本发明涉及曲马多和NSAID(非甾体抗炎药)-如昔布类(coxibs) 的共晶体(co-crystals)、用于制备其的方法以及它们作为药物或在药物制 剂中的应用，更特别是用于治疗疼痛的应用。
疼痛是已经被功能上分类为感觉性、自发性、运动性、和感情性成分 的复杂应答。感觉性方面包括关于刺激位置和强度的信息，而适应性成分 可能被认为是内源性疼痛调节的激活和计划用于逃避应答的活动。感情性 成分似乎包括对疼痛不愉快和刺激威胁以及由疼痛刺激的记忆和环境触 发的负面情绪的评估。
总体上，疼痛病症可以被分成慢性和急性的。慢性疼痛包括神经性疼 痛和慢性炎症性疼痛，例如关节炎，或未知来源的疼痛，如纤维肌痛。急 性疼痛通常跟随非神经组织损害，例如来自外科手术或发炎的组织损伤， 或偏头痛。
已知有许多可用于治疗或处理疼痛的药物。阿片样物质频繁地用作疼 痛中的镇痛剂。吗啡的衍生物被指定用于对人的急性疼痛的缓和治疗。通 过它们对吗啡受体，优选μ-受体的作用获得镇痛效果。在吗啡的这些衍生 物之中，可以提到吗啡、可待因、哌替啶、右旋丙氧吩美沙酮 (dextropropoxyphenemethadone)、lenefopan以及其它。
曲马多(Tramadol)是在口服给予时已表现出很好的结果且广泛销售 的吗啡衍生物之一，还可用作生理学可接受盐，特别是用作盐酸盐 (chlorohydrate)。化学名称为2-(二甲基氨基甲基)-1-(3-甲氧基苯基)环己 醇的曲马多具有下列式：
曲马多
该结构显示两个不同的手性中心，而因此可能存在不同的非对映异构 体，其中曲马多是顺式-非对映异构体：(1R，2R)，或(1S，2S)，两者也 称为(+)-曲马多和(-)-曲马多且其两者都以不同的方式贡献其活性。
从本领域来看，似乎是该化合物既不是完全阿片样的(opioid-like)， 也不是非阿片样的。一些研究证明曲马多是阿片样物质激动剂，然而临床 经验表明，它缺乏阿片样物质激动剂的许多典型副作用，例如呼吸抑制、 便秘或耐受。
由于它们的缺点，作为治疗疼痛的镇痛剂的阿片样物质总是不能重复 或以更高的剂量给予。本领域中阿片样物质的副作用是已知的，包括例如 J.Jaffe的“Goodman and Gilman’s，The Pharmacological Basis of Therapeutics”，8th edition；Gilman et al.；Pergamon Press，New York，1990， Chapter 22，pages 522-573。
因此，建议将阿片样物质与不是阿片样镇痛剂的其它药物组合，以便 降低产生相等的止痛程度所需要的阿片样物质的量。在这些组合中，据报 道曲马多与非甾体消炎药(NSAID)的联合是尤其令人关注的(EP-0 546 676)。
因此本发明的目的在于提供改进曲马多性能的新方法，特别是关于通 过提供曲马多的新可用药物形式治疗疼痛。
新可用药物形式的尤其期望的改进/优势包括：
●改进理化性质，以便促进配制、制造、或增强吸收和/或生物利用 度；
因此
●与曲马多碱或盐酸盐相比时更加有活性；或
●提供曲马多与另外的自身具有有利的药理学作用的活性剂的形 式，从而提供了最终的有效成分的高效剂量/重量关系或甚至
●允许使用任一种曲马多和另外的活性剂，NSAID-昔布类或两者的 更低的治疗剂量；
●以相同新可用药物形式通过曲马多和另外的活性剂的组合， NSAID-昔布类而具有协同效应；或
进一步地
●使曲马多的苦味去除或改进；
●容易获得、容易制造或
●提供了在配制中更多的灵活性，或促进其配制，
●是高度可溶的，从而提供了更好的溶解速度，特别是如果溶入水 性生理环境中，或
●与以相同的比率的曲马多/活性剂(NSAID-昔布类)的物理混合物 相比，提高了共晶体的稳定性；
●提供了新的给药途径；
此外
●允许在必要时将曲马多与化学通常不相容的活性剂以相同制剂或 甚至以直接接触而组合，无需必须分离曲马多；
或最终
●最小化/减少副作用，特别是对于曲马多所指定的严重副作用。
新可用药物形式的其它期望的改进/优势，包括在为或与疼痛和其亚 型有关的疾病或症状中，特别是目前的治疗不充分的那些如与中枢致敏 (中枢性疼痛综合症)相关的坐骨神经痛或肩凝症中是有活性的。
最期望的新可用药物形式应当组合一种以上、大部分的优势。
该目的通过提供曲马多的新的共晶体而实现。人们发现，曲马多能够 与NSAID-如昔布类，特别是与塞来昔布形成共晶体。这些共晶体如果与 单独的曲马多相比显示提高的性质并且还显示良好的镇痛活性。因此所获 得的共晶体具有具体的化学计量。在适当的情况下，这也是可能实现药理 学作用的一部分调节的这些新的固体可用药物形式的另一种优势。尽管一 般若干年前已鉴定出形成结晶多晶型物、溶剂化物、水合物和无定形形式 的API(活性药物成分)如曲马多，但关于API会形成共晶体的知识几乎 没有。共晶体是特定类型的晶型，其提供一条新的途径来调节API形式而 因此来调节API性能。共晶体包含API和一起结晶的至少一种其他组分。 其它组分的选择帮助决定是否会形成共晶体，以及共晶体会具有哪些性 质。正如多晶型物、溶剂化物、水合物或无形性形式的API能调节稳定性、 溶解度和吸湿度，共晶体能调节这些相同的性质。
因此，本发明的主要的目的是包含作为游离碱或者作为生理学可接受 盐的曲马多和至少一种NSAID/昔布类的共晶体。
昔布类作为与曲马多的共晶形成体(co-crystal former)是高度关注的 NSAID。它们是选择性的COX-2抑制剂。这些中最重要的是上市药物塞 来昔布。其化学名称为4-[5-(4-甲苯基)-3-(三氟甲基)-吡唑-1-基]苯磺酰胺。 它具有C17H14F3N3O2S的经验式。
塞来昔布
NSAID如昔布类在众多疼痛症状中具有镇痛活性。它们活性的基础 是抑制环加氧酶(COX)，前列腺素内过氧化物合酶(PGHS)的两种活性 之一。它是前列腺素路径的关键酶。
如在本文中使用的“(曲马多的)可用药物形式”被定义为曲马多会 采用的任何形式(其盐、无定形晶体、溶液、分散体、混合物等)，其仍 然能够配制成可用作治疗疾病或症状，尤其是疼痛的药物的药物制剂。
如在本文中使用的“共晶体”被定义为结晶材料，在环境温度(20 至25℃，优选20℃)下包含两种以上的化合物，其中至少两种通过弱的 相互作用结合在一起，其中至少一种化合物是共晶形成体。弱相互作用被 定义为这样的相互作用，其既不是离子的也不是共价的且包括例如：氢键、 范德华力和π-π相互作用。不进一步包含共晶形成体的曲马多的溶剂化物 不是根据本发明的共晶体。然而共晶体可能在结晶晶格中包含一个或多个 溶剂化物分子。仅仅为了明确结晶盐和共晶体之间的区别不得不在这里强 调。通过离子相互作用的方式结合至另一种化合物而形成盐的API可以被 认为是根据本发明的一种“化合物”，但是它本身不能被认为是两种化合 物。
在科学文献中，目前对术语共晶体的适当使用存在一些讨论(参见例 如Desiraju，Cryst.Eng.Comm.，2003，5(82)，466-467and Dunitz，Cryst.Eng. Comm.，2003，5(91)，506).Zawarotko的最近的文章(Zwarotko，Crystal Growth & Design，Vol.7，No.1，2007，4-9)给出了共晶体的定义，其与上面 给出的定义是一致的且因此也是根据本发明的“共晶体”的定义。根据该 文章，“共晶体是多组分晶体，其中所有组分在以它们的纯净形式时在环 境条件下是固体。这些组分由目标分子或离子以及一种或多种分子共晶形 成体组成；当以共晶体时，它们在分子水平下在单晶中共存”。
如在本文中使用的“共晶形成体”被定义为作为选自NSAID/昔布类 的活性剂且曲马多能够与其形成共晶体的分子。
“活性剂”是表现出药物作用且因此能被确定为是药物活性的API。 在更狭窄的含义中，该定义包括上市的或处于用于治疗疾病的临床试验下 的所有API。“具有镇痛作用的活性剂”是API(活性药物成分)，其在熟 知的疼痛动物模型中表现出有效性而因此可以被确定为是镇痛剂。在更狭 窄的含义中，该定义包括上市的或处于临床试验下的所有API，所述临床 试验用于标记包括落入疼痛定义的指征，也包括偏头痛。这些指征可包括 急性疼痛、慢性疼痛、神经性疼痛、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛，包括 糖尿病神经病变或糖尿病性周围神经病变、骨关节炎、或纤维肌痛以及所 有它们的亚型。“具有镇痛作用的活性剂”的实例包括NSAID，如塞来昔 布或曲马多及其N-去甲基-代谢物。
“疼痛”被国际疼痛研究协会(International Association for the Study of Pain)(IASP)定义为“与实际或潜在的组织损伤有关或在这样的损伤 方面描述的使人不愉快的感觉和情绪体验(IASP，Classification of chronic pain，2nd Edition，IASP Press(2002)，210)。即使疼痛总是主观的，但其原因 或综合症是可以分类的。命名疼痛亚型的一种分类是把一般的疼痛综合症 分成急性和慢性疼痛的亚型或-根据疼痛强度分成轻度、中度和重度疼痛。 在其它定义中，一般的疼痛综合症也被分成“感受伤害的”(由伤害感受 器的激活所引起)、“神经性的”(由神经系统的损害或功能失常所引起) 和与中枢致敏(中枢性疼痛综合症)有关的疼痛。
根据IASP，“异常性疼痛”被定义为“由于不通常引起疼痛的刺激导 致的疼痛”(IASP，Classification of chronic pain，2nd Edition，IASP Press (2002)，210)。虽然异常性疼痛的症状很可能伴有如神经性疼痛的症状，但 这不必然是这种情况，因此存在与神经性疼痛不联系的异常性疼痛的症 状，虽然致使异常性疼痛在一些区域比神经性疼痛更广泛。
IASP进一步提取了“异常性疼痛”、“痛觉过敏”和“痛觉过度”之 间的以下差异(IASP，Classification of chronic pain，2nd Edition，IASP Press (2002)，212)：
根据IASP，“神经病”被定义为“神经系统的原发性损害或机能障碍” (IASP，Classification of chronic pain，2nd Edition，IASP Press(2002)，211)。 神经性疼痛可能源于中枢或外周。
“坐骨神经痛”或“坐骨神经炎”在本文中定义为包括源于坐骨神经 或其根的刺激的疼痛的一组症状。
“肩凝症”或“粘连性肩关节囊炎(adhesive capsulitis)”在本文中被 定义为围绕肩关节或肩关节囊(shoulder capsule)自身的结缔组织引起慢 性疼痛，变得发炎和僵硬的症状。
“强直性脊柱炎”或“白赫铁列夫症(Morbus Bechterew)”是慢性、 炎症性的关节炎和自身免疫性疾病。它主要影响脊骨的关节和骨盆的骶髂 (sacroilium)，引起最终脊骨融合。
“与中枢致敏有关的疼痛”/“中枢性疼痛综合症”在本申请中被定 义为由包括脑、脑干和脊髓的中枢神经系统(CNS)的损伤或机能障碍所 引起的神经病症。该综合症可尤其由打击、多发性硬化、肿瘤、癫痫、脑 或脊髓损伤或帕金森氏病所引起。
“伤害性疼痛”被定义为由伤害感受器的激活所引起的一种类型的疼 痛。这可以分成躯体痛和内脏痛。“内脏痛”是通常源于器官的痛，然而 “(深)躯体痛”源于韧带、腱、骨、血管、筋膜和肌肉。
在根据本发明的共晶体的一个实施方式中，一种或多种NSAID/一种 或多种昔布类以这样的方式选择，使得如果与单独的曲马多或者与曲马多 和一种或多种相应活性剂/昔布类的混合物相比：
●增加共晶体的溶解度；和/或
●增加共晶体的剂量反应；和/或
●增加共晶体的效力；和/或
●增加共晶体的溶出度(dissolution)；和/或
●增加共晶体的生物利用度；和/或
●增加共晶体的稳定性；和/或
●减少共晶体的吸湿度；和/或
●减少共晶体的形式多样性(form diversity)；和/或
●调整共晶体的形态(morphology)。
“曲马多和一种或多种相应活性剂的混合物”被定义为所讨论的一种 活性剂或多种活性剂(NSAID/昔布类)与曲马多的混合物，所述混合物 仅是物理混合物而在化合物之间没有任何结合力，因此既不包括盐也不包 括另外的共晶体。
在进一步的实施方式中，作为昔布类的NSAID选自塞来昔布 (celecoxib)、依托考昔(etoricoxib)、芦米考昔(lumiracoxib)、帕瑞考昔 (parecoxib)、罗非昔布(rofecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)、和西米考 昔(cimicoxib)。
在根据本发明的共晶体在另外的实施方式中，NSAID是选自下述中 昔布类：
-塞来昔布，
-依托考昔，
-芦米考昔，
-帕瑞考昔，
-罗非昔布，
-伐地考昔，或
-西米考昔。
本发明的另外非常优选的方面涉及根据本发明的共晶体，其中作为昔 布类的NSAID是塞来昔布或其盐。
本发明的另一个实施方式涉及根据本发明的共晶体，其中曲马多是 (-)-曲马多或(+)-曲马多或其盐。
本发明的另一个实施方式涉及根据本发明的共晶体，其中曲马多是 (消旋)-曲马多((rac)-tramadol)或其盐。
尤其优选的是包含曲马多和塞来昔布的药物化合物，优选包含(消旋)- 曲马多·HCl和塞来昔布的药物化合物。
如下面更加详细说明的，曲马多-且尤其是消旋体与塞来昔布形成共 晶体。通常获得的共晶体具有具体的化学计量，这取决于形成NSAID的 每种共晶体的结构。在(消旋)-曲马多和作为共晶形成体的塞来昔布之间的 共晶体的这种具体情况中，曲马多和塞来昔布之间的分子比率是1比1。
术语“盐”应当理解为是指根据本发明的曲马多或NSAID/昔布类的 任何形式，其中这呈现离子形式或是带电荷的且与抗衡离子(阳离子或阴 离子)结合或在溶液中。这还应当被理解为曲马多或NSAID/昔布类与其 它分子和离子的复合体，尤其是经由离子相互作用复合的复合体。这还包 括生理学可接受盐。
根据本发明的术语“溶剂化物”应当被理解为是指曲马多或NSAID/ 昔布类的任何形式，其中化合物经由非共价结合另外的分子(很可能是极 性溶剂)而连接至其，尤其包括水合物和醇溶剂化物，例如甲醇溶剂化物。
在本发明另外优选的实施方式中，根据本发明的共晶体选自：
●包含作为游离碱或作为生理学可接受盐的(消旋)-曲马多和塞来昔 布的共晶体；
●包含作为游离碱或作为生理学可接受盐的(+)-曲马多和塞来昔布 的共晶体；
●包含作为游离碱或作为生理学可接受盐的(-)-曲马多和塞来昔布的 共晶体；或优选地
●包含(消旋)-曲马多·HCl(曲马多的盐酸盐)和塞来昔布的共晶体。
根据本发明的共晶体的高度优选的实施方式，共晶体由作为游离碱或 作为生理学可接受盐的(消旋)-曲马多和塞来昔布和塞来昔布，优选由(消 旋)-曲马多·HCl和塞来昔布形成。
在这些选择的共晶体的高度优选的实施方式中，在(消旋)-曲马多·HCl 与塞来昔布之间的分子比率是1∶1。
在根据本发明的(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布之间的分子比率为1∶1 的共晶体的优选实施方式中，共晶体显示[2θ]在7.1、9.3、10.2、10.7、13.6、 13.9、14.1、15.5、16.1、16.2、16.8、17.5、18.0、19.0、19.5、19.9、20.5、 21.2、21.3、21.4、21.8、22.1、22.6、22.7、23.6、24.1、24.4、25.2、26.1、 26.6、26.8、27.4、27.9、28.1、29.1、29.9、30.1、31.1、31.3、31.7、32.5、 32.8、34.4、35.0、35.8、36.2和37.2[°]下具有峰的粉末X射线衍射图样。 2θ值利用铜辐射(CuKα1)获得。
在根据本发明的(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布之间的分子比率为1∶1 的共晶体的优选实施方式中，共晶体显示在3481.6(m)、3133.5(m)、 2923.0(m)、2667.7(m)、1596.0(m)、1472.4(m)、1458.0(m)、1335.1 (m)、1288.7(m)、1271.8(m)、1168.7(s)、1237.3(m)、1168.7(s)、 1122.6(s)、1100.9(m)、1042.2(m)、976.8(m)、844.6(m)、820.1(m)、 786.5(m)、625.9(m)cm-1下具有吸收带的傅里叶变换红外线谱图(Fourier Transform Infra Red pattern)。
在根据本发明的(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布之间的分子比率为1∶1 的共晶体的优选的实施方式中，共晶体具有以下列尺度的正交晶胞(正交 单位晶胞，orthorhombic unit cell)：
在根据本发明的(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布之间的分子比率为1∶1 的共晶体的优选的实施方式中，与熔点相对应的共晶体的吸热顶峰 (endothermic sharp peak)在164℃下开始(onset)。
本发明的另一种实施方式涉及一种用于生产如以上所描述的根据本 发明的共晶体的方法，包括下述步骤：
(a)将NSAID-如昔布类溶解或混悬在溶剂中；可选地将溶液或分 散体加热到高于环境温度且低于溶液或分散体的沸点的温度；
(b)与步骤(a)一起、或在步骤(a)之后、或在步骤(a)之前将 作为游离碱或作为盐的曲马多溶解在溶剂中，
(c)可选地将(b)的溶液加入到(a)的溶液中并混合它们；
(d)将步骤(c)的混合溶液/分散体冷却至环境温度；
(e)可选地使部分或所有的溶剂蒸发；以及
(f)过滤出所得的共晶体。
本发明的另一种实施方式涉及一种用于生产如以上所描述的根据本 发明的共晶体的方法，包括下述步骤：
(a)将NSAID-如昔布类溶解或混悬在溶剂中；可选地将溶液或分 散体加热到高于环境温度且低于溶液或分散体的沸点的温度；
(b)与步骤(a)一起、或在步骤(a)之后、或在步骤(a)之前将 作为游离碱或作为盐的曲马多溶解在溶剂中，可选地通过溶解已经与步骤 (a)中的NSAID-如昔布类在一起的曲马多而与步骤(a)相组合(组合， combine)；
(c)可选地将(b)的溶液加入到(a)的溶液中并混合它们；
(d)可选地将溶剂加入到(a)、(b)或(c)的溶液中并混合它们；
(e)将步骤(a)、(b)、(c)或(d)的混合溶液/分散体冷却至 环境温度或以下；
(f)可选地使部分或所有的溶剂蒸发；以及
(g)过滤出所得的共晶体。
“环境温度”在本文中被定义为在20至25℃之间的温度，优选为 20℃。
在这些过程中可用的溶剂包括水或有机溶剂，优选选自丙酮、乙酸异 丁酯、乙腈、乙酸乙酯、2-丁醇、碳酸二甲酯、氯苯、丁基醚、二异丙醚、 二甲基甲酰胺、乙醇、水、己烷(以及环己烷)、异丙醇、甲乙酮(以及 甲基异丁基酮)、甲醇、甲基叔丁基醚、3-戊酮、甲苯和1，1，1-三氯乙烷中 的溶剂，最优选包含醇类，如乙醇。优选但不必要在步骤(a)和(c)中 的溶剂相同。
在曲马多和NSAID如昔布类之间的分子比率位于4∶1至1∶4之间， 优选3∶1至1∶3之间且最优选1∶1至1∶2之间。
优选地，步骤(b)中的曲马多溶液具有在3M至0.01M之间的浓度。
根据本发明的共晶体的部分是熟知的具有镇痛性能的药物，有时在全 世界长时间使用。由于此，本发明另外的目的是包含根据本发明的共晶体 的药物。
因此，本发明还涉及包含如以上描述的根据本发明的至少一种共晶体 以及可选地一种或多种生理学可接受的赋形剂的药物。
本发明还涉及在生理学可接受介质中包含治疗有效量的根据本发明 的共晶体的药物组合物。
两种有效成分在同一晶体中的联合表现出多种优势。作为连接，它们 常常表现如单独的化学个体，从而促进处理、配制、剂量测定等。除此之 外，在作为活性镇痛剂的曲马多和NSAID-如昔布类两者的情况下，这些 共晶体在治疗疼痛中是高度有用的，特别是通过加入药理学无用的抗衡离 子如以不具有API的盐也不失去任何活性/重量。此外，两种有效成分在 尤其是疼痛，但是还可能是各种其它疾病或症状的治疗中是相互补充的。 因此，根据本发明的共晶体确实组合了优于现有技术状况的高度大量的优 势。
另外的优势是，两种有效成分联合成一种独特的物质似乎提供了更好 的药代动力学/药效学(PKPD)，还包括更好地透过血脑障碍，其有帮助 于治疗疼痛。
通常，在使用曲马多的共晶体的大多数实施方式中(例如用于治疗疼 痛等)，可以将这些共晶体配制成方便的药物制剂或药物。因此，曲马多 的共晶体的期望的优势会显示出提高的药物性质和特征，特别是与游离碱 或盐酸曲马多相比时。因此，根据本发明的曲马多的共晶体应当期望地显 示出下列特征中的至少一种，优选更多种：
●具有非常小的粒径，例如从300μm或更低；或
●为和/或保持基本上没有聚集物；或
●为更少或不是非常吸湿的；或
●帮助配制控释或即释制剂；或
●具有高的化学稳定性；或
如果给予患者
●减少血液水平中主体之间和主体自身变异性(inter-and intra-subject variability)；或
●显示良好的吸收速率(例如增加血浆水平或AUC)；或
●显示高的最大血浆浓度(例如C最大)；或
●显示药物浓度在血浆中达到峰值的时间(t最大)减少；或
●显示化合物半衰期(t1/2)的改变，无论在哪种方向上优选指向该 改变。
根据本发明的药物或药物组合物，可以以适于施加至人和/或动物， 优选人包括婴儿、儿童和成人的任何形式，且可以通过本领域技术人员已 知的标准程序生产。本发明的药物可以例如是胃肠外给予，包括肌肉内给 予、腹膜内给予、或静脉注射给予、经粘膜(transmucosal)给予或舌下给 予；或口服给予，包括作为片剂、丸剂、粒剂、胶囊剂、锭剂、水溶液或 油溶液、混悬剂、乳剂、喷雾剂给予或作为带有液体介质的重配干燥粉末 形式。
典型地，根据本发明的药物可以包含按重量计1-60％的如本文中所限 定的一种或多种共晶体，以及按重量计40-99％的一种或多种辅助物质(添 加剂/赋形剂)。
本发明的组合物也可以局部给予或经由栓剂给予。
用于人和动物的每日剂量可取决于下述因素而变化，所述因素基于它 们各自的物质或其它因素，如年龄、性别、重量或病程度等等。用于人的 每日剂量在每天摄入一次或几次时待给予的曲马多优选在5至500毫克的 范围内。
本发明另外的方面涉及如上所描述的根据本发明的共晶体用于治疗 疼痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼痛、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛， 包括糖尿病神经病变或骨关节炎或纤维肌痛的应用。本发明因此还涉及如 上所描述的根据本发明的共晶体在生产用于治疗疼痛，优选急性痛、慢性 痛、神经性疼痛、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变或 骨关节炎或纤维肌痛的药物中的应用。本发明另外的方面涉及如上所描述 的根据本发明的共晶体用于治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼痛、 重度痛觉减退(severe to moderate pain)、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛， 包括糖尿病神经病变、骨关节炎、纤维肌痛；风湿性关节炎、强直性脊柱 炎、肩凝症或坐骨神经痛的应用。本发明因此还涉及如上所描述的根据本 发明的共晶体在生产用于治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼痛、 重度痛觉减退、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变、骨 关节炎、纤维肌痛；风湿性关节炎、强直性脊柱炎、肩凝症或坐骨神经痛 的药物中的应用。本发明另外的方面涉及如上所描述的根据本发明的共晶 体用于(用在)治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼痛、痛觉过敏、 异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变或骨关节炎或纤维肌痛中。本发 明另外的方面涉及如上所描述的根据本发明的共晶体用于(用在)治疗疼 痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼痛、重度痛觉减退、痛觉过敏、异常 性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变、骨关节炎、纤维肌痛；风湿性关节 炎、强直性脊柱炎、肩凝症或坐骨神经痛中。优选地，这些应用以如上所 描述的根据本发明的药物或药物组合物的形式提供。
本发明另外的方面涉及如上所描述的根据本发明的共晶体用于(用 在)治疗疼痛，或优选急性痛、慢性痛(急性和慢性疼痛)、神经性疼痛、 伤害性疼痛(内脏痛和/或躯体痛)、中度和重度痛觉减退(mild and severe to moderate pain)、痛觉过敏、与中枢致敏相关的疼痛、异常性疼痛或癌痛， 包括糖尿病神经病变或糖尿病性周围神经病变和骨关节炎、纤维肌痛；风 湿性关节炎、强直性脊柱炎、肩凝症或坐骨神经痛中。本发明另外的方面 涉及如上所描述的根据本发明的共晶体在用于治疗疼痛，优选急性痛，或 优选急性痛、慢性痛(急性和慢性疼痛)、神经性疼痛、伤害性疼痛(内 脏痛和/或躯体痛)、中度和重度痛觉减退、痛觉过敏、与中枢致敏相关的 疼痛、异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变或糖尿病性周围神经病变 和骨关节炎、纤维肌痛；风湿性关节炎、强直性脊柱炎、肩凝症或坐骨神 经痛中的应用。本发明因此还涉及如上所描述的根据本发明的共晶体在生 产用于治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛(急性和慢性疼痛)、神经性疼痛、 伤害性疼痛(内脏痛和/或躯体痛)、中度和重度痛觉减退、痛觉过敏、与 中枢致敏相关的疼痛、异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变或糖尿病 性周围神经病变和骨关节炎、纤维肌痛；风湿性关节炎、强直性脊柱炎、 肩凝症或坐骨神经痛中的药物中的应用。优选地，这些应用以如上所描述 的根据本发明的药物或药物组合物的形式提供。
根据本发明的共晶体的应用(前面所描述)或各自的治疗方法(以下 所描述)优选涉及疼痛，包括伤害性疼痛(其包括躯体痛和内脏痛)。本 发明这些优选的实施方式还可以涉及神经性疼痛和/或与中枢致敏相关的 痛(所谓的“中枢性疼痛综合症”)。
根据本发明的共晶体的应用(前面所描述)或各自的治疗方法(以下 所描述)，还可以优选涉及急性和慢性疼痛。
根据本发明的共晶体的应用(前面所描述)或各自的治疗方法(以下 所描述)，还可以优选涉及轻度、中度和重度疼痛。
本发明的另一个目的是通过向需要其的患者提供足够量的如以上所 描述的根据本发明的共晶体而治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛、神经性疼 痛、痛觉过敏、异常性疼痛或癌痛，包括糖尿病神经病变或骨关节炎或纤 维肌痛的方法。本发明的另一个目的是通过向需要其的患者提供足够量的 如以上所描述的根据本发明的共晶体而治疗疼痛，优选急性痛、慢性痛(急 性和慢性疼痛)、神经性疼痛、伤害性疼痛(内脏痛和/或躯体痛)、中度和 重度痛觉减退、痛觉过敏、与中枢致敏相关的疼痛、异常性疼痛或癌痛， 包括糖尿病神经病变或糖尿病性周围神经病变和骨关节炎、纤维肌痛；风 湿性关节炎、强直性脊柱炎、肩凝症或坐骨神经痛的方法。优选地，根据 本发明的共晶体以生理学合适的形式例如以如以上所描述的根据本发明 的药物或药物组合物的形式提供。
借助于以下的附图和实施例在下面对本发明进行说明。这些说明仅通 过实例的方式给出，而不是限制本发明。
附图说明
图1：
(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的粉末X射线衍射图样。
图2：
(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的DSC分析。
图3：
(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的TG分析。
图4：
通过SCXRD分析所获得的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶 体的晶胞结构，示出了塞来昔布的两个分子和曲马多的两个分子。
图5：
示出了(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体与单独的塞来昔 布和与两种API的组合(曲马多和塞来昔布的混合物)相比在狗中的生物 利用度。
图6：
比较了(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲马多和塞来 昔布在给予单剂量后对反转在切割的大鼠后爪中切割诱导的机械异常性 疼痛的作用(每组8-10只)。所有数据被提供为平均值±SEM。
图7：
等效应图(等效线图解法，isobologram)示出了塞来昔布(ED50＝3.01 mg/kg)和曲马多(ED50＝5.28mg/kg)在大鼠的爪切割手术后疼痛模型中 对机械异常性疼痛的抗异常性疼痛相互作用。在x轴与y轴之间的斜线是 理论相加线(theoretical additive line)。在该线中间的点是由单独的ED50所计算的理论相加点。红色：实验点((消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 的共晶体ED50，分子量比率1∶1.27)位于远低于理论ED50(蓝色)的位置， 表明显著的(P＜0.05)协同作用。
图8：
比较了(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲马多和塞来 昔布在给予单剂量后对反转在切割的大鼠后爪中切割诱导的热痛觉过敏 的作用(每组8-10只)。所有数据被提供为平均值±SEM。
图9：
在通过角叉菜胶诱导之后4.5h腹膜内给予(每剂量组n＝8-10)的(消 旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体[每三个柱的右侧柱]、曲马多[每 三个柱的中央/中间柱]和塞来昔布[每三个柱的左侧柱]对单关节炎大鼠的 活动行为的作用，其在给药后30分钟穿过CBMS而测量。
实施例
实施例1：(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体
获得(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的方法：
实施例1a：(经由溶剂辅助研磨的制备)
将5mL不锈钢球磨反应器装载有两个7mm钢球、(消旋)-曲马多盐 酸盐(48mg，0.16mmol)、塞来昔布(61mg，0.16mmol，1当量)以及 一滴甲基异丁基酮。将反应器在30Hz下搅拌45分钟。在真空中去除衡 量的溶剂，从而提供作为白色固体的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 共晶体(109mg，定量产率)。
实施例1b：(经由结晶的大规模)
向容纳曲马多·HCl(26.54g，88.5mmol)和塞来昔布(33.74g，88.5 mmol，1当量)的装备有机械搅拌器、滴液漏斗(addition funnel)以及冷 却器的三1L颈烧瓶中，加入122mL乙醇。将获得的混悬加热至回流(完 全溶解)。将环己烷(203mL)缓慢地加入到保持回流(另外20分钟的时 间)的溶液中，然后，在搅拌的情况下将溶液缓慢冷却到室温。将溶液以 实施例1a中获得的形式在55℃下引晶，并开始结晶)。混合物在0℃下 冷却2h.
将白色固体用烧结漏斗(sintered funnel)n°3进行过滤，并且在0-5℃ 下用溶剂混合物洗涤(1vol.，60mL，(0.6∶1)EtOH/环己烷)。在真空下 在室温下干燥2天后，获得作为白色固体的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布 (1∶1)共晶体(54.6g，91％产率)。
共晶体的表征：
将根据实施例1获得的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体通 过1H-NMR、FTIR、粉末X射线衍射、DSC和TG全面地表征(参见图1 至3)。
(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的粉末X射线衍射(PXRD) 图样(参见图1)：
以布拉格-布伦塔诺几何学(Bragg-Brentano geometry)使用具有Cu Kα辐射的Philips X′Pert衍射仪进行PXRD分析。系统装备有单尺寸、实时多 道探测器(monodimensional，real time multiple strip detector)。测量参数如 下：2θ的范围在8.8°/分钟的扫描速度下为3°到40°(参见图1)。以角度2θ 和d值表示的峰在表1中详细描述：
表1：通过(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)共晶体的粉末X射线 衍射获得的所选择峰列表。
(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布(1∶1)的共晶体的1H-NMR光谱：
质子核磁共振分析在装备有5mm宽带探针ATB 1H/19F/X的Varian Mercury 400光谱仪中以甲醇-d4记录。在0.6mL的氘化溶剂中溶解5-10mg 样品而获得光谱。
1H NMR光谱(在d4-甲醇中在400MHz下)δ示出了在7.97-7.90(m， 2H)；7.53-7.46(m，2H)；7.30(t，J＝8.0Hz，1H)；7.22-7.14(m，4H)； 7.12-7.09(m，1H)；7.07(d，J＝7.8Hz，1H)；6.90(s，1H)；6.83(dd， J＝2.7Hz，J＝8.2Hz，1H)；3.80(s，3H)；2.98(dd，J＝9.0Hz，J＝13.3 Hz，1H)；2.75-2.60(m，8H)；2.35(s，3H)；2.28-2.18(m，1H)；2.00-1.46 (m，8H)ppm下的峰。
(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布(1∶1)的共晶体的FT-IR光谱：
FTIR光谱利用装备有分光器KBr系统、作为激发源的35mW He-Ne 激光器和DTGS KBr探测器的Thermo Nicolet Nexus 870FT-IR进行记录。 光谱在4cm-1的分辨率下以32次扫描而获得。
样品(KBr小球)表现出在3481.6(m)、3133.5(m)、2923.0(m)、 2667.7(m)、1596.0(m)、1472.4(m)、1458.0(m)、1335.1(m)、1288.7 (m)、1271.8(m)、1168.7(s)、1237.3(m)、1168.7(s)、1122.6(s)、 1100.9(m)、1042.2(m)、976.8(m)、844.6(m)、820.1(m)、786.5(m) 625.9(m)cm-1下具有吸收带的傅里叶变换红外线光谱。
(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布(1∶1)的共晶体的DSC分析(参见 图2)：
DSC分析利用Mettler DSC822e记录。称重1.6230mg的样品装入40 μL的带小孔盖(pinhole lid)的铝坩埚中，并在氮气下(50mL/分钟)以 10℃/分钟从30℃加热到200℃。
本发明的新型晶体的特征在于与熔点相应的吸热顶峰(endothermic sharp peak)在164.44℃(融合焓-93.56J/g)开始，由DSC分析(10℃/ 分钟)测得(参见图9)。
(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布(1∶1)的共晶体的TG分析(参见图 3)：
热重分析(thermogravimetric analyse)在热重分析仪Mettler TGA/SDTA851e中记录。称重3.0560mg的样品装入70μL的带小孔盖的 铝坩埚中，并在氮气下(50mL/分钟)以10℃/分钟从30℃加热至200℃。
根据本发明的晶型的TG分析显示在30至200℃之间不显著的重量 损失。
(消旋)-曲马多·HCl和塞来昔布(1∶1)的共晶体的单晶的单晶XRD 分析(参见图4)：
晶体结构由单晶X射线衍射数据确定。使用的无色棱柱(0.33×0.16 ×0.11mm)由等摩尔量的(消旋)-曲马多盐酸盐和塞来昔布在庚烷和IPA 中的引种溶液的结晶而获得。
利用Bruker Smart Apex衍射仪与装备有CCD探测器的石墨单色Mo Kα辐射(graphite monochromated Mo K小αradiation)在常温下进行分析。利 用和ω扫描(使用的程序：SMART 5.6)收集数据。没有观察到标准强 度的显著衰减。应用数据简化(洛伦兹(Lorentz)和极化校正)和吸收校 正(使用的程序：SAINT 5.0)。
结构用直接法解析，且进行针对所有测得强度的Fo2的最小二乘方精 化(使用的程序：SHELXTL-NT 6.1)。利用各向异性位移参数细化所有的 非氢原子。(消旋)-曲马多-塞来昔布(1∶1)共晶体的结晶数据和结构细化 在下表2中给出。
表2：(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体的SCXRD分析 最有关的结构数据。
在图4中示出了晶体结构(仅示出了晶胞内含物的一半，为了清晰已 将氢原子省略；使用的程序：Mercury 2.2，C.F.Macrae，I.J.Bruno，J.A. Chisholm，P.R.Edgington，P.McCabe，E.Pidcock，L.Rodríguez-Monge，R. Taylor，J.van de Streek and P.A.Wood，J.Appl.Cryst.，41，2008，466-470。
由单晶数据模拟XRPD衍射图给出了与上面提供的实验图几乎相同 的图。
实施例1c：(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体的生物利 用度的测定(狗)
目标是通过AUC测定本发明的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 的共晶体来测定(消旋)-曲马多·HCl以及塞来昔布在狗中的血浆暴露，并将 其与共晶体的每种有效成分和两种有效成分的固定组合相比较。
将(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布共晶体的生物利用度与将(消旋)-曲马 多·HCl加塞来昔布组合和单独经口服途径给予比格犬(3个雄性和3个雌 性)之后获得的那些生物利用度进行比较。具有等效粒径的产品通过胶囊 剂以10mg/kg共晶体(作为碱)的剂量水平和以对照物(comparator)的 等效剂量水平(4.1mg曲马多/kg，5.9mg塞来昔布/kg)口服给予。在以 下时间点抽取狗的血：剂量给药前(predose)、15和30分钟；1、1.5、2、 2.5、3、3.5、4、4.5、5、6、8和24h。血浆通过离心而分离，通过SPE 纯化，并且血浆水平通过LC-MS-MS测定。利用非间隔的药代动力学分 析计算药代动力学参数。
结果显示塞来昔布在给予共晶体(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布时与单 独的塞来昔布和与两种API的组合(曲马多和塞来昔布的混合物)相比暴 露增加(参见图5)。
实施例1d：在大鼠的手术后疼痛模型中对机械异常性疼痛和热痛觉 过敏的影响
该研究的目的是评价(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、 曲马多和塞来昔布在爪切割后的手术后疼痛大鼠模型中的镇痛效能和潜 能。在跖切割后，大鼠显示出对温度(热超敏性)和分级的触觉测量套件 (von Frey filaments)(机械超敏性)的应答阈值下降(Brennan et al.，Pain 1996，64，493)。
为了评估测试化合物的效能和潜能的可靠性，使用了两种不同的行为 测试：通过触觉测量套件利用上下变化的触觉异常性疼痛和利用跖测试分 析的热痛觉过敏(Hargreaves et al.，Pain 1988，32，77)。
实验设计：
动物
雄性，韦斯大鼠(Wistar rat)(120-160g，Harlan，意大利)在测试 之前待在气候控制室中至少5天。食物和水一直到测试时间是不限制使用 的。
动物剂量给药
将大鼠全部经腹膜内分别剂量给予(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 的共晶体或每种试剂，其溶解在0.5％羟丙基甲基纤维素在蒸馏水中的混 悬液中。剂量给药体积是10mL/kg。随后在给药后60分钟评价动物的抗 痛觉过敏或异常性疼痛的应答。
手术
采用Ohmeda汽化器和麻醉室，使用兽医用的3％异氟烷(异氟醚， 异荧烷，isofluorane)将大鼠麻醉。在手术操作期间通过将引导异氟烷蒸 汽至动物的鼻口部的导管而保持麻醉。一旦大鼠被麻醉，使它们在俯卧位 躺下，并且将它们的右足用乙醇清洁。然后，通过爪的跖面的皮肤和筋膜， 使用23号手术刀造成1cm的纵切口，从距足跟近端边缘0.5cm处开始并 且朝向足趾延伸。因此，浅表(皮肤)和深的(肌肉)组织和神经两者都 是受伤的。最终，脚爪的皮肤用有编织丝(breaded silk)(3.0)的缝线缝 合，并且创伤用聚维酮清洁。
在大鼠的手术后疼痛中的镇痛作用的评价
药物在手术(跖切割)后4小时测试；在产品给药后60分钟，评价 两种行为的终点：热超敏性或痛觉过敏、和机械超敏性或异常性疼痛。
在大鼠的手术后疼痛中热超敏性(痛觉过敏)的评价
超敏性或痛觉过敏通过利用选择性地升高单个爪的温度的 Hargreaves装置(Ugo Basile跖测试)测定对热刺激的反应而评估(Dirig， et al.，J Neurosci Methods，1997，76，183)。将动物置入所述的装置的甲基丙 烯酸酯笼中，该装置具有结晶底(crystal floor)。在笼中的适应期是大约 10分钟。热刺激来自在结晶底下面移动并施加至两只爪的灯，两个刺激之 间有1分钟的最小间隔，以便避免学习行为。大鼠在感觉由来自灯的热所 产生的不舒服(疼痛)时，能自由地收回爪；然后将其关闭，并且以秒记 录收回反应的等待时间。为了避免伤害动物的爪，灯在32秒之后自动关 闭。痛觉过敏定义为与载体处理动物的潜伏期相比减少的反应潜伏期，且 测试化合物的镇痛作用被看作趋向正常的潜伏期的(部分)恢复(Dirig，et al.，J.Pharmacol Expt Therap.1998，285，1031)。
在大鼠手术后疼痛中机械超敏性(异常性疼痛)的评价
利用触觉测量套件对机械异常性疼痛进行测试。将动物放入在隆起表 面上的甲基丙烯酸酯圆筒中，带有穿孔的金属网底，以便施加细线。在圆 筒中约30分钟的适应期之后，两个足都被刺激(受伤和未受伤的爪，未 受伤的爪用作对照)，以最低力量的细线(0.4g)开始并且达到15g的细 线。动物对疼痛的反应由爪的收回证明，作为由细线所引起的疼痛刺激的 结果。记录引出爪收回的压力(以克的力)阈值。测试化合物的镇痛作用 被看作是趋向正常的阈值的(部分)恢复。
协同效应的分析
在曲马多和塞来昔布之间的协同作用通过如R.J.Tallarida，et al.，Life Sci.，1989，45，947所公开的等效应图分析确定。该程序涉及确定在50％剂 量水平(即，ED50或Z混合)下产生指定协同抗痛觉过敏作用所需要的混合 物的总量和期望在简单加和(ED50相加或Z相加)下的相应总量。在确定对 于具体的固定比率的Z混合＜Z相加时，则组合物具有协同抗痛觉过敏作用。 ED50混合值和ED50相加值两者都是随机变量。ED50混合由对于具体的固 定比率的组分的剂量反应曲线确定；ED50相加由对于单个药物的ED50值 计算。然后经Student t检验将Z混合与Z相加比较。
结果：
在该研究中，获得(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲 马多和塞来昔布(腹膜内途径)的剂量反应。机械异常性疼痛和热超敏性 用作行为终点。在评价机械异常性疼痛时，所有的药物诱发全部效能。
基于(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲马多和塞来昔 布在机械异常性疼痛中的作用所获得的表示为ED50的结果在表3和图6 中给出，而图7示出了塞来昔布(ED50＝3.01mg/kg)和曲马多(ED50＝5.28 mg/kg)在该手术后疼痛模型中对机械异常性疼痛的抗异常性疼痛相互作 用的等效应图。图8示出了基于(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共 晶体、曲马多和塞来昔布在大鼠后爪中的切割诱导的热痛觉过敏中的作用 所获得的表示为ED50的结果。(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶 体与曲马多和塞来昔布相比更有效。
表3.对于在大鼠爪切割后的手术后疼痛模型中的机械异常性疼痛和 热痛觉过敏反曲调整之后所获得的每种测试药物的ED50(mg/kg)。
*E最大＝47.53％
图7的等效应图示出了塞来昔布(ED50＝3.01mg/kg)和曲马多(ED50＝5.28mg/kg)在大鼠爪切割手术后的疼痛模型中，对机械异常性疼痛的 抗异常性疼痛的相互作用。x轴和Y轴之间的斜线是理论相加线。在该线 中间的点是由单独的ED50所计算的理论相加点。灰色：实验点((消旋)- 曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体ED50，分子量比率1∶1.27)处于远 低于理论的ED50(黑色)的位置，表明显著的(P＜0.05)协同相互作用。
如图8所示，曲马多和(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体 在使用热痛觉过敏的时候，类似地显示完全的效能，但是塞来昔布仅仅诱 发部分反应(E最大：45％)。显然，以这种参数，(消旋)-曲马多·HCl-塞来 昔布(1∶1)的共晶体比曲马多(ED50Tram：8.3mg/kg相对于(消旋)-曲 马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体：2.26mg/kg的ED50)更有效，从而 表明明显的协同作用。因为塞来昔布的升限效应(ceiling effect)(45％)， 所以用于该行为终点的等效应图分析不是合适的。
结论
腹膜内给予的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体在爪切割 手术后疼痛模型中协同地起到抑制机械异常性疼痛和热痛觉过敏的作用
实施例1e：对大鼠的急性单关节炎模型中的机械异常性疼痛和运动 引起疼痛的作用
在该研究中，在大鼠的急性单关节炎模型中评价(消旋)-曲马多·HCl- 塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲马多和塞来昔布对机械异常性疼痛和运动引 起的疼痛的作用。通过计算机化的行为监控系统(CBMS)评价运动引起 疼痛。使用评价疼痛诱导的步态适应的这种方法与评价引起疼痛的触觉测 量方法(von Frey methodology)一起产生更好和更可靠的动物疼痛经历图 片。
大鼠角叉菜胶模型利用在膝关节(单关节炎模型)注射之后与炎症相 关的疼痛。该研究的目的是评价曲马多、塞来昔布、以及(消旋)-曲马多·HCl- 塞来昔布(1∶1)的共晶体在减少由将300μg的角叉菜胶注入到右膝关节 中诱导的单关节炎大鼠的疼痛行为中的镇痛效能和潜能。CBMS用于评估 在角叉菜胶注射之后5小时和给药以后30分钟的步态相关改变。在以下 面分组的不同CBMS参数中观察步态缺陷：静电学(印记面积、印记长度、 印记宽度)、动力学(站立、摇摆)和协调(状态分散)。机械异常性疼痛 在CBMS步态分析之后15分钟用触觉测量套件测定。在该研究中，由于 它们的普通处方用于在临床中缓和与伤害或炎症有关的重度疼痛，所以评 价了(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体、曲马多和塞来昔布的 作用。
实验设计：
动物
雄性，韦斯大鼠(225-250g，Charles River Laboratories)待在气候控 制室中。食物和水直到测试时间是不限制使用的。
动物剂量给药
将大鼠全部经腹膜内分别剂量给予(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 的共晶体或每种试剂曲马多盐酸盐和塞来昔布，其溶解在0.5％羟丙基甲 基纤维素在蒸馏水中的混悬液中。剂量给药体积是2mL/kg。随后在给药 后30和45分钟评价动物的药物反应(分别对于CBMS和触觉测量)。
由角叉菜胶的关节内注射诱导的膝关节单关节炎。
通过动物在短暂的异氟烷(Abbott-Esteve，巴塞罗那，西 班牙)麻醉(3％)下，使用30规格的针穿过髌下韧带进入右膝关节腔中 (300μg，40μl)而经皮注射的角叉菜胶(Sigma Chemical，St.Louis， MO)来诱导关节的炎症。
利用CBMS方法评价疼痛诱导的步态适应。
利用CBMS方法在行走的大鼠上进行步态的详细分析。简要地，来 自荧光管的光通过玻璃板发送。光线在内部完全反射。一旦出现任何情况， 例如大鼠的爪与玻璃表面接触，则光向下反射。它产生明亮爪印的清晰图 像。整个过程经由置于玻璃板下的照相机记录。
在本研究中，分析与单爪有关的参数：
●印记面积(以mm2表示)：该参数描述在站立阶段期间由爪接触的 总底面积。
●最大接触面积(以mm2表示)：最大接触面积描述在站立期间在最 大爪-底接触时刻接触的爪面积。
●印记宽度(以mm表示)：它是印记区域(印记面积)的宽度尺度。
●印记长度(以mm表示)：它是印记区域的长度尺度。
●站立(以s表示)：它是爪与玻璃板接触的以秒表示的持续时间。
●摇摆(以s表示)：它是爪与玻璃板没有接触的以秒表示的持续时 间。
●摆动速度(以m/s表示)：它是在摇摆期间爪的速度(距离单位/ 秒)。该参数由步长度(stride length)和摇摆持续时间计算。
●忙闲度(％)：表示站立作为步骤周期的百分比。
●站立指数：它是爪与玻璃板失去接触的速度尺度。
●最大接触在(以秒表示)：是自从爪与玻璃板进行最大接触的过程 开始的以秒表示的时间。它可以被认为是在站立期间制动阶段转变成推进 阶段的点。
在单关节炎大鼠中机械超敏性(异常性疼痛)的评价。
利用触觉测量套件对机械异常性疼痛进行测试：将动物放入在隆起表 面上的甲基丙烯酸酯圆筒中，带有穿孔的金属网底，以便施加细线。在圆 筒中约15分钟的适应期之后，两个足都被刺激(受伤和未受伤的爪，未 受伤的爪用作对照)，以最低力量的细线(0.4g)开始并且达到15g的细 线。动物对疼痛的反应由爪的收回证明，作为由细线所引起的疼痛刺激的 结果。记录引出爪收回的压力(以克的力)阈值。测试化合物的镇痛作用 被看作是趋向正常的阈值的(部分)恢复。
结果：
由将角叉菜胶(CAR)注射到踝关节所引起的关节炎会引起几个描 述大鼠步行方式的参数的改变，表明不情愿使用被注射的爪。CAR诱导 的步态改变被塞来昔布、曲马多、以及(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1) 共晶体所抑制(图9)。
结果显示，(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体给予会在各 种CBMS相关的参数中产生更大的有利作用(相对于单独给予曲马多和塞 来昔布)，这些参数包括：印记面积、印记长度、最大接触面积、站立指 数、以及状态分散。
图9示出了在通过角叉菜胶诱导之后4.5h腹膜内给予(每剂量组n＝ 8-10)(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体[每三个柱中的右侧柱]、 曲马多[每三个柱中的中央/中间柱]和塞来昔布[每三个柱中的左侧柱]对单 关节炎大鼠的活动行为的作用，在给药以后30分钟穿过CBMS而测量。 如上面所概述的，共晶体以20mg/kg的剂量给予而(消旋)-曲马多·HCl或 塞来昔布单独以与其存在于共晶体中相应的剂量给予。印记面积(以mm2表示)描述在站立阶段期间由爪接触的总底面积。最大接触面积描述在站 立期间在最大爪-底接触时刻接触的爪面积。印记长度是印记区域的长度 尺度。站立是爪与玻璃板接触的以秒表示的持续时间。站立指数是爪与玻 璃板失去接触的速度尺度。摆动速度是在摇摆期间爪的速度(距离单位/ 秒)。该参数由步长度和摇摆持续时间计算。最大接触在是自从爪与玻璃 板进行最大接触的过程开始的以秒表示的时间。它可以被认为是在站立期 间制动阶段转变成推进阶段的点。状态分散带是关于利用两个不同爪的脚 步之间的时间关系的肢体间协调参数。所有数据都以平均值±SEM提供。 *p＜0.05相对于曲马多的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体；# p＜0.05相对于塞来昔布的(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体。
结论
在大鼠急性单关节炎疼痛的模型中以各种疼痛诱发的步态的改变测 试，(消旋)-曲马多·HCl-塞来昔布(1∶1)的共晶体相对于单独药物产生优 良的益处。