特戊酰氨基甲氧苯基苯并D氮杂基喹唑啉类化合物在制备治疗肺癌药物中的应用.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810070302.4 (22)申请日 2018.01.24 (71)申请人 浙江工业大学 地址 310014 浙江省杭州市下城区潮王路 18号 (72)发明人 刘宇宁 饶国武 胡成海 (74)专利代理机构 杭州天正专利事务所有限公 司 33201 代理人 黄美娟 俞慧 (51)Int.Cl. A61K 31/55(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C07D 403/04(2006.01) (54)发明名称 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑 啉类化。

2、合物在制备治疗肺癌药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种特戊酰氨基甲氧苯基苯 并d氮杂基喹唑啉类化合物在制备预防或治 疗肿瘤药物中的应用， 特别是制备预防或治疗人 肺癌药物中的应用， 其对抑制人肺癌细胞株A- 549活性具有显著效果。 权利要求书1页 说明书12页 CN 108014115 A 2018.05.11 CN 108014115 A 1.如式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉类化合物在制备预防 或治疗人肺癌药物中的应用； 2.如权利要求1所述的应用， 其特征在于所述药物为具有抑制人肺癌细胞株A-549活性 的药物。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 10。

3、8014115 A 2 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉类化合物在制 备治疗肺癌药物中的应用 (一)技术领域 0001 本发明涉及一种喹唑啉类化合物的应用， 特别涉及一种特戊酰氨基甲氧苯基苯并 d氮杂基喹唑啉类化合物在制备预防或治疗人肺癌药物中的应用。 (二)背景技术 0002 喹唑啉类化合物具有许多较好的生物活性， 在医药领域有着广泛的应用， 尤其一 些特殊结构的喹唑啉类衍生物具有明显的抗病毒活性、 抗菌活性、 抗肿瘤活性等， 喹唑啉类 化合物作为抗肿瘤药物已经上市了一些品种。 例如上市的用于治疗肺癌的吉非替尼 (Gefitinib)和厄洛替尼(Erlotinib)， 以及用于治疗乳腺癌。

4、的拉帕替尼(Lapatinib)， 它们 都属于喹唑啉类化合物。 新型的喹唑啉类化合物及其生物活性也常见文献报道(参阅Y.- Y.Ke,H.-Y.Shiao,Y.C.Hsu,C.-Y.Chu,W.-C.Wang,Y.-C.Lee,W.-H.Lin,C.-H.Chen, J.T.A.Hsu,C.-W.Chang,C.-W.Lin,T.-K.Yeh,Y.-S.Chao,M.S.Coumar,H.-P.Hsieh, ChemMedChem 2013,8,136-148； A.Garofalo,A.Farce,S.Ravez,A.Lemoine,P.Six, P.Chavatte,L.Goossens。

5、,P.Depreux,J.Med.Chem.2012,55,1189-1204)。 当然多数喹唑啉 类化合物并不具有抗肿瘤活性。 (三)发明内容 0003 本发明的目的在于提供一种新型喹唑啉类化合物特戊酰氨基甲氧苯基苯并d 氮杂基喹唑啉类化合物的应用， 该类化合物在一定剂量下对人肺癌细胞株A-549具有很 好的抑制效果； 且该类化合物制备方法简便， 易于操作， 原料易得， 且生产成本较低， 适于工 业化应用。 0004 为实现上述发明目的， 本发明采用如下技术方案： 0005本发明提供了一种式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉类 化合物在制备预防或治疗肿瘤药物中的应用， 特别是在。

6、制备预防或治疗人肺癌药物中的应 用： 0006 0007 优选地， 所述药物为具有抑制人肺癌细胞株A-549活性的药物。 说 明 书 1/12 页 3 CN 108014115 A 3 0008此外， 本发明提供一种式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉 类化合物的制备方法， 所述的方法为： (1)将式()所示化合物与式()所示化合物混合， 在有机溶剂A中， 于碱性催化剂B的作用下， 25120进行反应(TLC跟踪监测， 展开剂为乙 酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 优选40100反应0.512h)， 反应完全后， 将反应液分离纯 化， 制得式()所示化合物； 所述有机溶剂A选自。

7、下列之一： 氯仿、 甲苯、 甲醇、 乙醇、 丙醇、 异 丙醇、 乙腈或N,N-二甲基甲酰胺； 所述的碱性催化剂B选自下列之一： 吡啶、 二乙胺、 三乙胺、 喹啉、 N,N-二甲苯胺、 4-二甲氨基吡啶、 4-吡咯烷基吡啶或碳酸钠(优选吡啶、 二乙胺、 三乙 胺、 N,N-二甲苯胺或4-二甲氨基吡啶)； 0009 0010 (2)式()所示的化合物在有机溶剂D中,于还原剂E作用下， 在25100反应完 全(TLC跟踪监测， 展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 优选4080反应0.512h)， 反 应液过滤， 滤液减压浓缩后的浓缩物干燥(优选25真空干燥)， 制得式()所示的化合物； 所。

8、述有机溶剂D为下列之一： 氯仿、 甲苯、 甲醇、 乙醇、 丙醇、 异丙醇、 乙腈或N,N-二甲基甲酰 胺； 所述还原剂E为下列之一： 铁粉/浓盐酸， 铁粉/醋酸， 钯碳/甲酸铵或钯碳/水合肼； 所述 铁粉/浓盐酸是指铁粉与浓盐酸任意比例的混合、 铁粉/醋酸是指铁粉与醋酸任意比例的混 合， 所述钯碳/甲酸铵是指钯碳与甲酸铵任意比例的混合， 所述钯碳/水合肼是钯碳与水合 肼任意比例的混合物； 0011 (3)将式()所示化合物与特戊酰氯或特戊酸酐混合， 在碱性催化剂F作用下， 于 有机溶剂G中， -1050反应完全(TLC跟踪监测， 展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 优选-1050反应。

9、312h)， 反应液经后处理， 制得式( )所示的化合物； 所述的碱性催化 剂F为下列之一： 吡啶、 二乙胺、 三乙胺、 喹啉、 N,N-二甲苯胺、 4-二甲氨基吡啶、 4-吡咯烷基 吡啶或碳酸钠； 所述有机溶剂G为下列之一： 四氢呋喃、 二氯甲烷、 氯仿、 乙酸乙酯、 乙醚、 乙 腈、 甲苯或苯。 0012 进一步， 步骤(1)中， 所述式()所示化合物与式()所示化合物、 碱性催化剂B的 投料物质的量之比为1.0 0.81.2 1.08.0。 0013 进一步， 步骤(1)中， 所述有机溶剂A的用量以式()所示化合物的质量计为10 50mL/g。 0014 进一步， 本发明步骤(1)中所述。

10、反应液分离纯化的方法为： 反应完全后， 将反应液 蒸除溶剂， 取浓缩物用有机溶剂C将其溶解， 获得溶解液， 然后向溶解液中加入浓缩物1.0 2.0倍重量的柱层析硅胶， 混匀后， 蒸除溶剂， 干燥， 获得浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物 装柱， 然后以体积比为1： 0.110的石油醚与乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 收集含目标组分 说 明 书 2/12 页 4 CN 108014115 A 4 的流出液(优选以乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)为展开剂跟踪检测， 收集目标组分， 优选收 集Rf值为0.5的组分)， 减压浓缩， 干燥(优选50干燥)， 获得式()所示的化合物； 所述有 机溶剂C为下列之。

11、一： 乙醇、 氯仿、 四氢呋喃或乙酸乙酯。 所述有机溶剂C用量以能够溶解残 留物即可。 0015 进一步， 步骤(2)中， 当所述的还原剂E为铁粉/浓盐酸或者铁粉/醋酸时， 式()所 示的化合物与还原剂E中的铁粉、 浓盐酸或醋酸的投料质量比为1.0 1.03.0 0.21.0。 本发明中， 浓盐酸质量浓度为3638， 醋酸采用冰醋酸。 0016 进一步， 步骤(2)中， 当所述的还原剂E为钯碳/甲酸铵或钯碳/水合肼时， 式()所 示的化合物与还原剂E中的钯碳、 甲酸铵或水合肼的投料质量比为1.0 0.10.5 1.0 3.0。 本发明中适用的钯碳中钯的质量负载量为210， 优选5， 水合肼质量。

12、浓度为40 80， 优选80。 。 0017 进一步， 步骤(2)中， 所述有机溶剂D的用量以式()所示的化合物的质量计为10 50mL/g。 0018 进一步， 步骤(3)中， 所述的式()所示化合物与特戊酰氯或特戊酸酐、 碱性催化 剂F的投料物质的量之比为1 1.08.0 1.03.0。 0019 进一步， 步骤(3)中， 所述有机溶剂G的用量以式()所示化合物的质量计为11 100mL/g。 0020 进一步， 本发明具体推荐步骤(3)按照如下方法进行： 于-1010条件下， 往式 ()所示化合物和碱性催化剂F的有机溶剂G溶液中或者往式()所示化合物和碱性催化 剂F中滴加特戊酰氯或特戊酸。

13、酐的有机溶剂G溶液， 滴毕， -1050反应312小时， 所得反 应液经后处理得到式( )所示化合物； 溶解特戊酰氯或特戊酸酐的有机溶剂体积用量对本 发明没影响， 所述有机溶剂G的总用量以式()所示化合物的质量计为11100mL/g。 有机 溶剂G的总用量是指溶解碱性催化剂F和式()所示化合物的有机溶剂G与溶解特戊酰氯或 特戊酸酐有机溶剂G的总体积。 0021 进一步， 本发明步骤(3)所述反应液后处理的方法为： 反应完全后， 将反应液过滤， 滤液蒸除溶剂， 取浓缩物用有机溶剂H将其溶解， 获得溶解液， 然后向溶解液中加入浓缩物 1.02.0倍重量的柱层析硅胶， 混匀后， 蒸除溶剂， 干燥， 。

14、获得浓缩物与硅胶的混合物， 将混 合物装柱， 然后以体积比为1： 0.110的石油醚与乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 收集含目标 组分的流出液(优选以乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)为展开剂跟踪检测， 收集目标组分)， 减 压浓缩， 干燥(优选50干燥)， 获得式( )所示的化合物； 所述有机溶剂H为下列之一： 乙醇、 氯仿、 四氢呋喃或乙酸乙酯。 所述有机溶剂H用量以能够溶解残留物即可。 0022 本发明所述有机溶剂A、 C、 D、 G和H均为有机溶剂， 为了便于区分不同步骤所用有机 溶剂不同而命名， 字母本身没有含义； 所述催化剂B、 还原剂E和催化剂F均为催化剂， 为了便 于区分不同步骤所。

15、用催化剂不同而命名， 字母本身没有含义。 0023 本发明的有益效果主要体现在： 提供了一种新型的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d 氮杂基喹唑啉类化合物( )在制备预防或治疗人肺癌的药物中的应用， 该化合物对人肺 癌细胞株A-549具有显著的抑制活性。 (四)具体实施方式 说 明 书 3/12 页 5 CN 108014115 A 5 0024 本发明结合具体实施例作进一步的说明， 以下的实施例是说明本发明的， 而不是 以任何方式限制本发明。 0025 化合物()的制备参照文献(Weinstock,J.et al.J.Med.Chem.,1986， 29(11), 2315-2325)的方法制备得到。。

16、 4-氯-6-硝基喹唑啉()的制备参照文献(Fernandes,C.et al.Bioorg.Med.Chem.,2007,15(12),3974-3980)的方法制备得到。 0026 本发明实施例使用的钯碳(Pd/C)型号D5H5A， 购于陕西瑞科新材料股份有限公司。 0027实施例1： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0028 依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和2.39克(6.87mmol)化合物 ()， 3.62克(45.76mmol)吡啶， 12毫升氯仿加入50毫升的反应瓶中， 加热至40， TLC跟踪 检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)，。

17、 搅拌反应10小时， 关闭反应， 反应液蒸除溶 剂， 得到的浓缩物中加入10毫升乙酸乙酯将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入3.0克柱 层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 10的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪 检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 根据TLC检测收集含式()所示的化合物的 洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄色固体产物， 收率 85.1， 熔点164166。 1H NMR(500MHz,CDCl3) :3.32。

18、-3.38(m,1H),3.63(dt,J3.4, 15.5Hz,1H),3.75(s,3H),3.82(s,6H),3.91(dd,J8.1,14.3Hz,1H),4.03(td,J4.1, 11.7Hz,1H),4.15(d,J11.5Hz,1H),4.72(dd,J8.3,14.2Hz,1H),5.14(t,J8.9Hz, 1H),6.60(s,1H),6.90(d,J8.7Hz,2H),7.08(d,J8.6Hz,2H),7.93(d,J9.1Hz,1H), 8.48(dd,J2.4,9.2Hz,1H),8.71(s,1H),8.96(d,J2.4Hz,1H)。 IR(KBr,cm-1。

19、) :2917, 2848,1616,1580,1510,1463,1355,1327,1249,1038,847。 0029实施例2： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0030 依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和1.59克(4.57mmol)化合物 ()， 1.67克(22.83mmol)二乙胺， 60毫升甲苯加入100毫升的三口烧瓶中， 加热至100， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 搅拌反应2小时， 关闭反应， 反应液 蒸除溶剂， 得到的浓缩物中加入20毫升乙醇将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入2.5克 柱层析硅胶(30。

20、0400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合 物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 5的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟 踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 根据TLC检测收集含式()所示的化合物 的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄色固体产物， 收率 72.6， 熔点164166。 1H NMR和IR同实施例1。 0031实施例3： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0032 依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和1.99克(5.72mmol)化合物 ()， 。

21、0.58克(5.73mmol)三乙胺， 60毫升乙醇加入100毫升的三口烧瓶中， 加热至60， TLC 跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 搅拌反应8小时， 关闭反应， 反应液蒸除 溶剂， 得到的浓缩物中加入20毫升氯仿将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入2.5克柱层 析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将 混合物装柱， 然后以体积比为10： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪检 说 明 书 4/12 页 6 CN 108014115 A 6 测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)，。

22、 根据TLC检测收集含式()所示的化合物的洗 脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄色固体产物， 收率77.2， 熔点164166。 1H NMR和IR同实施例1。 0033实施例4： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0034 依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和2.20克(6.32mmol)化合物 ()， 1.40克(11.46mmol)4-二甲氨基吡啶， 60毫升异丙醇加入100毫升的三口烧瓶中， 室温 25搅拌， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 反应12小时， 关闭反应， 反应液蒸除溶剂， 得到的浓。

23、缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中 加入4.0克柱层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅 胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为5： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗 脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 根据TLC检测收集含式()所示 的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄色固体产 物， 收率80.2， 熔点164166。 1H NMR和IR同实施例1。 0035实施例5： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0036 依次将1.20克(。

24、5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和1.79克(5.15mmol)化合物 ()， 1.04克(8.58mmol)N,N-二甲苯胺， 12毫升N,N-二甲基甲酰胺加入50毫升的反应瓶中， 加热至120， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 搅拌反应0.5小时， 关 闭反应， 反应液蒸除溶剂， 得到的浓缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解， 获得溶解液， 向 溶解液中加入5.0克柱层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓 缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为 洗脱剂， 洗脱， TL。

25、C跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 根据TLC检测收集含 式()所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄 色固体产物， 收率89.6， 熔点164166。 1H NMR和IR同实施例1。 0037实施例6： 硝基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0038 依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉()和2.39克(6.87mmol)化合物 ()， 3.62克(45.76mmol)吡啶， 20毫升丙醇加入50毫升的反应瓶中， 加热至40， TLC跟踪 检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 搅拌反应10小时。

26、， 关闭反应， 反应液蒸除溶 剂， 得到的浓缩物中加入20毫升乙酸乙酯将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入3.5克柱 层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪 检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 3(v/v)， 根据TLC检测收集含式()所示的化合物的 洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式()所示的淡黄色固体产物， 收率 78.3， 熔点164166。 1H NMR和IR同实施例1。 0039实施例7： 氨基苯并d氮杂基喹唑。

27、啉()的制备 0040依次将实施例1方法制备的0.40克(0.77mmol)硝基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.40克(6.34mmol)甲酸铵， 0.04克5Pd/C， 4.0毫升氯仿加入到反应瓶中， 室温25搅拌， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 反应12小时， 过滤， 滤液浓缩， 25 真空干燥得到淡黄色固体产物氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 收率98.2， 熔点122 说 明 书 5/12 页 7 CN 108014115 A 7 126。 1H NMR(500MHz,CDCl3) :3.40-3.48(m,2H),3.71(s,3H),3.82(s,3H),。

28、3.83(s,3H), 3.87-3.98(m,5H),4.45(dd,J6.3,13.8Hz,1H),4.95(dd,J6.5,9.2Hz,1H),6.47(s, 1H),6.90(d,J8.7Hz,2H),6.95(d,J2.5Hz,1H),7.11(d,J8.6Hz,2H),7.15(dd,J 8.9,2.5Hz,1H),7.69(d,J8.9Hz,1H),8.50(s,1H)。 IR(KBr,cm-1) :3368,3215,2932, 2825,1628,1566,1512,1487,1353,1248,1036,834。 0041实施例8： 氨基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 004。

29、2依次将实施例2方法制备的0.40克(0.77mmol)硝基苯并d氮杂基喹唑啉()， 1.20克(19.18mmol)80wt水合肼， 0.20克5Pd/C， 20.0毫升甲苯加入到50毫升的反应瓶 中， 加热至100， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 搅拌反应0.5小 时， 冷却过滤， 滤液浓缩， 25真空干燥得到淡黄色固体产物氨基苯并d氮杂基喹唑啉 ()， 收率100.0， 熔点122126。 1H NMR和IR同实施例7。 0043实施例9： 氨基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0044依次将实施例3方法制备的0.40克(0.77mmol)硝基苯并d氮杂基喹唑。

30、啉()， 0.08克浓盐酸(质量浓度3638)， 0.40克铁粉， 20.0毫升甲醇加入到50毫升的反应瓶中， 加热至40， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 搅拌反应8小时， 冷却 过滤， 滤液浓缩， 25真空干燥得到淡黄色固体产物氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 收 率94.1， 熔点122126。 1H NMR和IR同实施例7。 0045实施例10： 氨基苯并d氮杂基喹唑啉()的制备 0046依次将实施例4方法制备的0.40克(0.77mmol)硝基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.40克醋酸， 1.20克铁粉， 20.0毫升异丙醇加入到50毫升的反应瓶中， 加热至8。

31、0， TLC跟踪 检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 搅拌反应3小时， 冷却过滤， 滤液浓缩， 25 真空干燥得到淡黄色固体产物氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 收率97.5， 熔点122 126。 1H NMR和IR同实施例7。 0047实施例11： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0048依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.13克(1.64mmol)吡啶， 3毫升四氢呋喃加入到反应瓶中， -10搅拌条件下滴加0.531克 (4.40mmol)特戊酰氯， 滴毕， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1。

32、)， -10条件下 反应12小时， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加入10毫升乙酸乙酯将其溶解， 获得溶解液， 向溶 解液中加入0.60克柱层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩 物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 10的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗 脱剂， 洗脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 根据TLC检测收集含式 ( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50干燥得到式( )所示的特戊酰氨 基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固体， 收率64.2， 熔点131133。 1H NMR 。

33、(500MHz,D6DMSO) :1.29(s,9H),3.22-3.28(m,1H),3.38-3.42(m,1H),3.68(s,3H),3.69 (s,3H),3.73(s,3H),3.78-3.84(m,1H),3.87-3.96(m,2H),4.49(dd,J8.2,14.7,1H), 5.26(t,J8.6Hz,1H),6.85(s,1H),6.89(d,J8.8Hz,2H),7.08(d,J8.7Hz,2H),7.69 (d,J9.0,1H),7.88(dd,J2.2,9.2Hz,1H),8.44(s,1H),8.66(s,1H),9.55(s,1H)。 HRMS- 说 明 书 。

34、6/12 页 8 CN 108014115 A 8 ESI m/z:575.2417M+H+。 IR(KBr,cm-1) :2966,2921,2868,1665,1557,1522,1510,1490, 1163,1349,1248,1036,847。 0049实施例12： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0050依次将实施例8方法制备的0.27克(0.55mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.04克(0.55mmol)二乙胺， 10.0毫升氯仿加入到50毫升的反应瓶中， 10搅拌条件下滴加 0.066克(0.55mmol)特戊酰氯和5.0毫升氯仿混合溶液， 滴毕， 。

35、TLC跟踪检测(展开剂为乙酸 乙酯/石油醚1： 1(v/v)， 10条件下反应8小时， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加入20毫升 乙醇将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入0.26克柱层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 5的 石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1 (v/v)， 根据TLC检测收集含式( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50 干燥得到式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固体， 收率 。

36、74.7， 熔点131133。 1H NMR和IR同实施例11。 0051实施例13： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0052依次将实施例9方法制备的0.27克(0.55mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.111克(1.10mmol)三乙胺， 10.0毫升乙酸乙酯加入到50毫升的反应瓶中， 0搅拌条件下 滴加0.133克(1.10mmol)特戊酰氯和5.0毫升乙酸乙酯溶液， 滴毕， TLC跟踪检测(展开剂为 乙酸乙酯/石油醚1： 1)， 25条件下反应6小时， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加入20毫升 氯仿将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入0.30克柱层析硅。

37、胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为10： 1 的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚 1： 1(v/v)， 根据TLC检测收集含式( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集液浓缩， 50 干燥得到式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固体， 收率 50.5， 熔点131133。 1H NMR和IR同实施例11。 0053实施例14： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0054依次将实施例10方法制备的0.27克(0.55。

38、mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉 ()， 0.067克(0.55mmol)4-二甲氨基吡啶， 20.0毫升甲苯加入到50毫升的反应瓶中， 5搅 拌条件下滴加0.410克(2.20mmol)特戊酸酐和7.0毫升甲苯的溶液， 滴毕， 加热至50， TLC 跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1)， 反应3小时， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加入 20毫升四氢呋喃将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入0.40克柱层析硅胶(300400目柱 层析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体 积比为5： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， 。

39、TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/ 石油醚1： 1(v/v)， 根据TLC检测收集含式( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集 液浓缩， 50干燥得到式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固 体， 收率57.4熔点131133。 1H NMR和IR同实施例11。 0055实施例15： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0056依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 说 明 书 7/12 页 9 CN 108014115 A 9 0.213克(1.65mmol)喹啉， 15.0毫升苯加入到50毫升的反应瓶中。

40、， -10搅拌条件下滴加 0.265克(2.20mmol)特戊酰氯和5.0毫升苯的溶液， 滴毕， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/ 石油醚1： 1)， -10条件下反应12小时， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加入20毫升四氢呋喃 将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入0.40克柱层析硅胶(300400目柱层析硅胶)， 混匀 后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积比为1： 1的石油 醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1(v/ v)， 根据TLC检测收集含式( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)，。

41、 收集液浓缩， 50干燥 得到式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固体， 收率70.9， 熔点131133。 1H NMR和IR同实施例11。 0057实施例16： 特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉( )的制备 0058依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)氨基苯并d氮杂基喹唑啉()， 0.164克(1.10mmol)4-吡咯烷基吡啶， 15.0毫升二氯甲烷加入到50毫升的反应瓶中， 10搅 拌条件下滴加0.133克(1.10mmol)特戊酰氯和5.0毫升二氯甲烷溶液， 滴毕， TLC跟踪检测 (展开剂为乙酸乙酯/石油醚1： 1)， 10条件下反应8小时。

42、， 过滤， 滤液蒸除溶剂， 浓缩物加 入20毫升乙醇将其溶解， 获得溶解液， 向溶解液中加入0.50克柱层析硅胶(300400目柱层 析硅胶)， 混匀后， 蒸除溶剂， 得干燥的浓缩物与硅胶的混合物， 将混合物装柱， 然后以体积 比为10： 1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂， 洗脱， TLC跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/ 石油醚1： 1(v/v)， 根据TLC检测收集含式( )所示的化合物的洗脱液(Rf值为0.5)， 收集 液浓缩， 50干燥得到式( )所示的特戊酰氨基甲氧苯基苯并d氮杂基喹唑啉灰白色固 体， 收率68.6， 熔点131133。 1H NMR和IR同实施例11。 0059 实施。

43、例17： 抗癌活性体外测试 0060 (1)将制得的化合物( )和()进行了人肺癌细胞株A-549生物活性测试。 0061 测试方法： 四氮唑盐还原法(MTT法)。 0062 细胞株： 人肺癌细胞株A-549。 上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细 胞库。 0063 实验步骤如下： 0064 (a)样品的准备： 对于可溶样品， 每1mg用40 L DMSO溶解， 取2 L用1000 L培养基稀 释， 使浓度为100 g/mL， 再用培养液连续稀释至使用浓度。 0065 (b)细胞的培养 0066 培养基的配制:每1000mL DMEM培养基(Gibco)中含80万单位青霉素， 1.0g。

44、链霉 素， 10灭活胎牛血清。 0067 细胞的培养： 将肿瘤细胞接种于培养基中， 置37， 5CO2培养箱中培养， 35d 传代。 0068 测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用 0069 将第2代细胞用EDTA-胰酶消化液消化， 并用培养基稀释成1106/mL， 加到96孔细 胞培养板中， 每孔100 L， 置37， 5CO2培养箱中培养。 接种24h后， 分别加入用培养基稀释 的100 g/mL、 10 g/mL和1 g/mL样品， 每孔100 L， 每个浓度加3孔， 置37， 5CO2培养箱中 培养， 72h后在细胞培养孔中加入5mg/mL的MTT， 每孔10 L， 置37孵育3h， 加入。

45、DMSO， 每孔 说 明 书 8/12 页 10 CN 108014115 A 10 150 L， 用振荡器振荡， 使甲臢完全溶解， 用酶标仪在570nm波长下比色。 以同样条件下不含 样品， 含同样浓度DMSO的培养基培养的细胞作为对照， 计算样品对肿瘤细胞生长的IC50。 0070 测试的结果如表1所示： 0071 表1.化合物( )和()对癌细胞株A-549生长的抑制作用 0072 0073 (2)根据实施例11， 将特戊酰氯分别用4-碘苯甲酰氯、 3-甲氧基苯甲酰氯或肉桂酰 氯代替， 其他操作同实施例11， 分别合成了喹唑啉类化合物(a)， (b)和(c)， 结构如下所示： 0074 。

46、0075 根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(a)， (b)和(c)进行了人肺癌细胞株A-549 生物活性测试， 测试结果表明喹唑啉类化合物(a)， (b)和(c)对人肺癌细胞株A-549抑制效 果均不明显， 化合物(a)， (b)和(c)对人肺癌细胞株A-549的抗癌活性远不如化合物( )。 具 体结果如表2所示： 0076 表2.化合物(a)、 (b)和(c)对癌细胞株A-549生长的抑制作用 说 明 书 9/12 页 11 CN 108014115 A 11 0077 0078 上述抗癌活性体外测试实验表明： 其它3个结构类似的化合物(a)， (b)和(c)对人 肺癌细胞株A-549生长。

47、的抑制作用均不明显。 化合物( )对人肺癌细胞株A-549生长的抑制 作用显著， 明显优于化合物(a)， (b)和(c)。 0079 (3)参照文献(Rao,G.-W.et al.ChemMedChem,2013,8(6),928-933)的方法制备得 到4-氯喹唑啉， 再根据实施例1， 将4-氯-6-硝基喹唑啉用4-氯喹唑啉代替， 其他操作同实施 例1， 合成了喹唑啉类化合物(d)， 结构如下所示： 0080 0081 根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(d)进行了人肺癌细胞株A-549生物活性 测试， 测试结果表明喹唑啉类化合物(d)对人肺癌细胞株A-549的抗癌活性远不如化合物 ( )。 具体结果如表3所示： 0082 表3.化合物(d)对癌细胞株A-549生长的抑制作用 说 明 书 10/12 页 12 CN 108014115 A 12 0083 0084 (4)根据实施例11， 将特戊酰氯分别用苯甲酰氯、 氯乙酰氯或异丁酰氯代替， 其他 操作同实施例11， 分别合成了喹唑啉类化合物(e)、 (h)和(j)， 结构如下所示： 0085 0086 根据上述方法。