技术领域
本发明涉及一种农用组合物及农用杀菌剂，特别涉及一种用于水稻的 纹枯病、稻曲病和稻瘟病防治的农用组合物及农用杀菌剂。
背景技术
水稻纹枯病是水稻产区的重要病害，是我国水稻三大病害之一，在全 国各水稻产区都有发生，长江流域和南方稻区发生较重，尤其以密植矮秆 杂交稻的高产田发生最为普遍且严重。主要由半知菌亚门立枯丝核菌病 (Rhizoctonia solani)引起，病害由下向上扩展，严重时可到剑叶，甚至 穗部发病，大片倒伏。发病较重的田块，一般减产5％～10％，严重可达 50％～70％。随着矮秆多穗型品种的推广，栽插密度和施肥水平的提高，已 成为水稻高产稳产的一个突出问题。
稻曲病又称伪黑穗病，病原菌无性阶段归半知菌亚门绿核菌属 (Ustilaginoidea virens)；有性世代归子囊菌亚门麦角菌属(Claviceps virens)。此病在世界大多数稻区都有发生，我国亦早有记载。在华南双季 稻区虽向有发生，但20世纪60年代前发生零星，为害轻微，不为人们所 注意。近年来，随着耕作制度变化、杂交稻推广、生产条件改善和生产水 平提高，稻曲病的发生越来越严重，在一些地区已经跃升为主要病害。此 病发生有逐年上升之势，不少地方造成较大损失。另外，由于其病粒有毒， 若用作饲料，含量达0.5％以上时，会引起禽畜慢性中毒，内脏发生病变 甚至死亡。
稻瘟病在长江流域和南方稻区发生较重，尤其以密植矮秆杂交稻的高 产田发生最为普遍且严重。主要由半知菌亚门立枯丝核菌病(Rhizoctonia solani)引起，病害由下向上扩展，严重时可到剑叶，甚至穗部发病，大 片倒伏。发病较重的田块，一般减产5％～10％，严重可达50％～70％。随 着矮秆多穗型品种的推广，栽插密度和施肥水平的提高，已成为水稻高产 稳产的一个突出问题。
稻瘟病是水稻重要病害之一，可引起水稻大幅度减产，严重时减产 40％～50％，甚至颗粒无收。世界各稻区均匀发生。本病在我国各水稻产 区均有发生，其中以叶部、节部发生为多，发生后可造成不同程度减产， 尤其穗颈瘟或节瘟发生早而重，可造成白穗以致绝产。
噻呋酰胺(商品名：满穗)，也称噻氟酰胺，英文通用名Trifluzamide， 属于噻唑酰胺类杀菌剂，是孟山都公司研制开发的新型高效内吸性杀菌 剂，是市面上能购买获得的产品。它对担子菌纲真菌引起的病害如纹枯病、 立枯病等有特效。噻呋酰胺是琥珀酸酯脱氢酶抑制剂，由于含氟，其在生 化过程中竞争力很强，一旦与底物或酶结合就不易恢复。对丝核菌属、柄 锈菌属、黑粉菌属、腥黑粉菌属、伏革菌属、核腔菌属等致病真菌也均有 很好的防效。其结构式为：
肟菌酯(Trifloxystrobin)是拜耳公司成功开发的属甲氧基丙烯酸酯类 新型含氟广谱杀菌剂，具有高效、广谱、保护、治疗、铲除、渗透、内吸 活性、耐雨水冲刷、持效期长等特性，在市场上可以购买获得。对1，4-脱 甲基化酶抑制剂、苯甲酰胺类、二羧胺类和苯并咪唑类产生抗性的菌株有 效，与目前已有杀菌剂无交互抗性。对几乎所有真菌纲(子囊菌纲、担子 菌纲、卵菌纲和半知菌类)病害如白粉病、锈病、颍枯病、网斑病、霜霉 病、稻瘟病等均有良好的活性。除对白粉病、叶斑病有特效外，对锈病、 霜霉病、立枯病、苹果黑腥病有良好的活性。对作物安全，因其在土壤， 水中可快速降解，故对环境安全。其结构式为：
以噻呋酰胺和肟菌酯为有效成分的杀菌组合物，用于水稻纹枯病、稻 瘟病和稻曲病的防治，可以延缓病菌抗药性的产生，提高实际防效，降低 用药成本，是病害综合防治的重要手段。
发明内容
本发明的目的在于克服单一杀菌剂对农业病害防治作用单一、持效期 短、毒力不足等问题，提供一种杀菌效果好、延缓抗药性且用药成本低的 杀菌组合物。
本发明的另一目的是提供将所述杀菌组合物用于水稻的纹枯病、稻瘟 病和稻曲病的用途。
本发明提供一种杀菌组合物，所述杀菌组合物含有噻呋酰胺和肟菌 酯，其中，噻呋酰胺与肟菌酯的重量比为100∶1～1∶100。
优选地，噻呋酰胺与肟菌酯的重量比为20∶1～1∶20。
本发明的杀菌组合物还包含除草剂、杀虫剂、防护剂、生长调节剂、 植物营养素或土壤调节剂中的一种或几种的混合物。
本发明还提供一种杀菌剂，其中所述杀菌剂含有0.1～90重量％的上 述杀菌组合物，余量为农药上可接受的载体和助剂。
优选地，所述杀菌剂含有5～80重量％的上述杀菌组合物，余量为农 药上可接受的载体和助剂。
根据本发明所述杀菌剂的优选实施方式，其剂型为悬浮剂、水乳剂、 微乳剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
本发明还提供上述杀菌组合物在防治水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病的 应用。
本发明还提供一种防治作物病害的方法，在农作物和/或果实感染病害 之前或之后，向农作物和/或果实及其生长或储存的场所施用上述杀菌组合 物或上述杀菌剂。
以下将更详细的说明本发明的技术方案：
本发明提供一种杀菌组合物，所述杀菌组合物含有噻呋酰胺和肟菌 酯，其中，噻呋酰胺与肟菌酯的重量比为100∶1～1∶100，特别优选地 20∶1～1∶20。
本发明还提供含有上述杀菌组合物的杀菌剂，所述杀菌剂含有0.1～ 90重量％的上述杀菌组合物，余量为农药上可接受的载体和助剂。特别优 选地，上述杀菌组合物的含量是5～80重量％。
本发明的杀菌组合物还可以包含除草剂、杀虫剂、防护剂、生长调节 剂、植物营养素或土壤调节剂中的一种或几种的混合物。
所述除草剂例如乙草胺、甲草胺、丁草胺、莠去津、扑草净等；所述 杀虫剂例如氟啶虫酰胺、溴氰虫酰胺等。这些除草剂、杀虫剂、防护剂、 生长调节剂、植物营养素或土壤调节剂均为市面上能够购买获得的产品。
除非另有说明，本发明所涉及的“％”均为“重量百分比”。
按照本领域技术人员所公知的方法，本发明所述的杀菌组合物在实际 应用时可配制成农业上允许的剂型，较好的剂型是悬浮剂、水乳剂、微乳 剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
对悬浮剂，可使用的助剂有：分散剂选自聚羧酸盐、木质素磺酸盐、 烷基萘磺酸盐、TERSPERSE 2425(美国亨斯迈公司出品，烷基萘磺酸盐 类)；润湿剂选自烷基酚聚氧乙烯聚基醚甲醛缩合物硫酸盐、烷基酚聚氧 乙烯基醚磷酸酯、苯乙基酚聚氧乙烯基醚磷酸酯、烷基硫酸盐、烷基磺酸 盐、萘磺酸盐、TERSPERSE 2500(美国亨斯迈公司出品)；增稠剂选自黄 原胶、硅酸镁铝、膨润土；防腐剂选自苯甲酸、苯甲酸钠、BIT(1，2-苯并 异噻唑啉-3-酮)；消泡剂为有机硅类消泡剂；防冻剂选自乙二醇、丙二醇、 甘油、尿素、无机盐类如氯化钠。
对水乳剂，可使用的助剂有：乳化剂选自壬基酚聚氧乙烯(EO＝10) 醚磷酸酯、三苯乙基苯酚聚氧乙烯醚磷酸酯(农乳600#磷酸酯)、农乳700#、 农乳2201#、Span-60#、乳化剂T-60、TX-10、农乳1601#、农乳600#、 农乳400#；溶剂选自二甲苯、甲苯、环己酮、溶剂油(牌号：S-150、S-180、 S-200)；稳定剂选自亚磷酸三苯酯、环氧氯丙烷；防冻剂选自乙二醇、丙 二醇、甘油、尿素、无机盐类如氯化钠；增稠剂选自黄原胶、膨润土、硅 酸镁铝；防腐剂选自BIT(1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)、苯甲酸、苯甲酸钠。
对微乳剂，可使用的助剂有：乳化剂选自十二烷基苯磺酸钙(农乳 500#)、农乳700#、农乳2201#、斯盘-60#、吐温-80、TX-10、农乳1601、 农乳600#、农乳400#；助溶剂选自甲醇、异丙醇、正丁醇、乙醇；溶剂 选自环己酮、N-甲基吡咯烷酮、二甲苯、甲苯、溶剂油(牌号：S-150、 S-180、S-200)；稳定剂选自亚磷酸三苯酯、环氧氯丙烷。
对可湿性粉剂，可使用的助剂有：分散剂选自聚羧酸盐、木质素磺酸 盐、烷基萘磺酸盐；润湿剂选自烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐；填 料选自硅藻土、高岭土、白炭黑、轻钙、滑石粉、凹凸棒土、陶土等。
对于水分散粒剂来说，本领域技术人员很熟悉使用相应的助剂完成本 发明。分散剂选用自聚羧酸盐、木质素磺酸盐、烷基萘磺酸盐；润湿剂选 自聚氧乙烯醇、烷基硫酸盐、烷基磺酸盐、萘磺酸盐；崩解剂选自硫酸铵、 尿素、蔗糖、葡萄糖、柠檬酸、丁二酸、碳酸氢钠；粘结剂选自硅藻土、 玉米淀粉、PVA、羧甲基(乙基)纤维素类及微晶纤维素类；填料选自硅 藻土、高岭土、白炭黑、轻钙、海泡石、滑石粉、凹凸棒土、陶土等。
本发明所述的杀菌组合物可以以成品制剂形式提供，即组合物中各物 质已经混合；也可以以单剂制剂的形式，使用前在桶(罐)中直接混合。 本发明的浓缩物通常与水混合得到所需要活性物质的浓度。
本发明还提供上述杀菌组合物在防治水稻纹枯病和稻曲病的应用。
本发明还提供一种防治作物病害的方法，在农作物和/或果实感染病害 之前或之后，向农作物和/或果实及其生长或储存的场所施用上述杀菌组合 物或上述杀菌剂。
与现有技术相比，本发明通过噻呋酰胺和肟菌酯的联合使用，其有益 效果为：
(1)与单剂相比，本发明所述杀菌组合物对病害有显著的增效作用， 提高了杀菌效果；
(2)减少用药次数，降低用药成本，减少环境污染和农药残留；
(3)组合物由不同作用机制的有效成分组成，作用位点增加，有利 于克服和延缓病菌抗药性的产生。
具体实施方式
下面结合具体实施例来对本发明进行进一步说明，但并不将本发明局 限于这些具体实施方式。本领域技术人员应该认识到，本发明涵盖了权利 要求书范围内所可能包括的所有备选方案、改进方案和等效方案。
一、制备实施例
下述所有制剂配比中所涉及的“％”均为重量百分比；术语“有效成分 比”均为噻呋酰胺与肟菌酯的重量比。
1、制备悬浮剂
按配方比例，以水为介质，将原药、分散剂、助悬剂和防冻剂等加入 到高剪切乳化机中剪切30min(例如转速3000r/min)，再用砂磨机砂磨后， 得到悬浮剂。
实施例1：24％噻呋酰胺·肟菌酯悬浮剂(有效成分比5∶1)
称取20％噻呋酰胺原药、4％肟菌酯原药、3％FS3000(磷酸酯型阴离 子表面活性剂)、1％TXC(磺酸型阴离子表面活性剂)、0.1％黄原胶、1％ 硅酸镁铝、5％乙二醇、0.03％BIT(1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)、0.3％有机改 性硅氧烷消泡剂，去离子水加至100％。制成浆料，进行砂磨，得到产品。
实施例2：30％噻呋酰胺·肟菌酯悬浮剂(有效成分比1∶1)
称取15％噻呋酰胺原药、15％肟菌酯原药、3％FS3000、1％JFC(脂 肪醇聚氧乙烯醚)、0.2％黄原胶、硅酸镁铝1％、5％乙二醇、0.3％苯甲酸、 0.5％有机改性硅氧烷消泡剂，去离子水加至100％。制成浆料，进行砂磨， 得到产品。
实施例3：40.4％噻呋酰胺·肟菌酯悬浮剂(有效成分比100∶1)
称取40％噻呋酰胺原药、0.4％肟菌酯原药、3％FS3000、2％JFC(脂 肪醇聚氧乙烯醚)、0.1％黄原胶、硅酸镁铝1％、5％乙二醇、0.3％苯甲酸、 0.5％有机改性硅氧烷消泡剂，去离子水加至100％。制成浆料，进行砂磨， 得到产品。
2、水分散粒剂
实施例4：30％噻呋酰胺·肟菌酯水分散粒剂(有效成分比5∶1)
称取25％噻呋酰胺原药、5％肟菌酯原药、3.5％NNO(烷基萘磺酸盐 甲醛缩合物)、2.5％拉开粉BX(二丁基萘磺酸钠)、3％K-12(十二烷基硫 酸钠)、5％羧甲基(乙基)纤维素、5％硅藻土、5％葡萄糖、高岭土加至 100％。混合均匀，经气流粉碎后制粒。
按配方比例，将原药和分散剂、湿润剂、粘结剂、填料等混合均匀， 经气流粉碎后得到粉剂，加入一定量的水混合，在造粒机中进行造粒，然 后干燥、筛分即得颗粒状产品。
实施例5：33％噻呋酰胺·肟菌酯水分散粒剂(有效成分比10∶1)
称取30％噻呋酰胺原药、3％肟菌酯原药、3.5％NNO(烷基萘磺酸盐 甲醛缩合物)、2％拉开粉BX(二丁基萘磺酸钠)、3％K-12(十二烷基硫 酸钠)、5％羧甲基(乙基)纤维素、10％硅藻土、5％葡萄糖、高岭土加至 100％。
制备过程同实施例4。
3、可湿性粉剂
按配方要求，将各种助剂、填料、原药混合后经粗粉碎机粉碎后，进 入气流粉碎机充分粉碎混合制得可湿性粉剂。
实施例6：60％噻呋酰胺·肟菌酯可湿性粉剂(有效成分比5∶1)
称取50％噻呋酰胺原药、10％肟菌酯原药、4％NNO、2％拉开粉BX、 5％白炭黑、轻钙加至100％。混合均匀，粉碎后得到产品。
实施例7：80％噻呋酰胺·肟菌酯可湿性粉剂(有效成分比3∶1)
称取60％噻呋酰胺原药、20％肟菌酯原药、5％木质素磺酸钙、3％拉 开粉BX、1％K-12、4％白炭黑、高岭土加至100％。混合均匀，粉碎后得 到产品。
实施例8：51％噻呋酰胺·肟菌酯可湿性粉剂(有效成分比50∶1)
称取50％噻呋酰胺原药、1％肟菌酯原药、5％木质素磺酸钙、2％拉开 粉BX、1％K-12、3％白炭黑、高岭土加至100％。混合均匀，粉碎后得到 产品。
4、微乳剂
实施例9：18％噻呋酰胺·肟菌酯微乳剂(有效成分比1∶5)
称取3％噻呋酰胺原药、15％肟菌酯原药、5％农乳700#、5％农乳500#、 6％农乳1601#、15％环已酮、5％N-甲基吡咯烷酮、5％正丁醇，经溶解完 全并混合均匀，去离子水加至100％。搅拌均匀后，得到产品。
实施例10：22％噻呋酰胺·肟菌酯微乳剂(有效成分比10∶1)
称取20％噻呋酰胺原药、2％肟菌酯原药、5％农乳2201#、5％农乳500#、 6％农乳1601#、15％环已酮、5％N-甲基吡咯烷酮、5％异丙醇，经溶解完 全并混合均匀，去离子水加至100％。搅拌均匀后，得到产品。
实施例11：36％噻呋酰胺·肟菌酯微乳剂(有效成分比1∶5)
称取6％噻呋酰胺原药、30％肟菌酯原药、5％农乳2201#、5％农乳500#、 6％农乳1601#、20％环已酮、5％N-甲基吡咯烷酮、5％异丙醇，经溶解完 全并混合均匀，去离子水加至100％。搅拌均匀后，得到产品。
实施例12：51％噻呋酰胺·肟菌酯微乳剂(有效成分比1∶50)
称取1％噻呋酰胺原药、50％肟菌酯原药、5％农乳2201#、5％农乳500#、 5％农乳1601#、25％环已酮、5％N-甲基吡咯烷酮、3％异丙醇，经溶解完 全并混合均匀，去离子水加至100％。搅拌均匀后，得到产品。
5、水乳剂
实施例13：5％噻呋酰胺·肟菌酯水乳剂(有效成分比4∶1)
称取4％噻呋酰胺原药、1％肟菌酯原药、3％农乳2201#、2％壬基酚 聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、2％农乳600#酸磷脂、15％环己酮、10％溶 剂油S150，混合溶解得到油相。将5％乙二醇，0.3％黄原胶、0.03％BIT (1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)，去离子水加至100％，配成水相。油相加入水 相中充分混合，经高剪切乳化后，得到产品。
实施例14：5％噻呋酰胺·肟菌酯水乳剂(有效成分比1∶1)
称取2.5％噻呋酰胺原药、2.5％肟菌酯原药、3.5％农乳2201#、2％壬 基酚聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、1.5％农乳600#酸磷脂、15％环己酮、 10％溶剂油S150，混合溶解得到油相。将5％乙二醇，0.3％黄原胶、0.03％BIT (1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)，去离子水加至100％，配成水相。油相加入水 相中充分混合，经高剪切乳化后，得到产品。
实施例15：11％噻呋酰胺·肟菌酯水乳剂(有效成分比1∶10)
称取1％噻呋酰胺原药、10％肟菌酯原药、3％农乳2201#、2％壬基酚 聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、2％农乳600#酸磷脂、15％环己酮、15％溶 剂油S150，混合溶解得到油相。将5％乙二醇，0.3％黄原胶、0.03％BIT (1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)，去离子水加至100％，配成水相。油相加入水 相中充分混合，经高剪切乳化后，得到产品。
实施例16：11％噻呋酰胺·肟菌酯水乳剂(有效成分比1∶50)
称取0.5％噻呋酰胺原药、25％肟菌酯原药、3％农乳2201#、2％壬基 酚聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、2％农乳600#酸磷脂、15％环己酮、15％ 溶剂油S150，混合溶解得到油相。将5％乙二醇，0.3％黄原胶、0.03％BIT (1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)，去离子水加至100％，配成水相。油相加入水 相中充分混合，经高剪切乳化后，得到产品。
实施例17：30.3％噻呋酰胺·肟菌酯水乳剂(有效成分比1∶100)
称取0.3％噻呋酰胺原药、30％肟菌酯原药、3％农乳2201#、2％壬基 酚聚氧乙烯(EO＝10)醚磷酸酯、2％农乳600#酸磷脂、15％环己酮、20％ 溶剂油S150，混合溶解得到油相。将5％乙二醇，0.3％黄原胶、0.03％BIT (1，2-苯并异噻唑啉-3-酮)，去离子水加至100％，配成水相。油相加入水 相中充分混合，经高剪切乳化后，得到产品。
二、生物活性实施例
生物活性实施例分为室内生物活性实施例和大田生物活性实施例。
活性实例1：噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻纹枯病的室内毒力测定
试验靶标为水稻纹枯病(Rhizoctonia solani)，试验采用共毒系数法评 价复配制剂的联合毒力作用，明确较合理的配比。
将噻呋酰胺和肟菌酯分别用DMF溶解，再用0.1％的吐温-80水溶液 稀释配制成系列浓度的药液，在超净工作台中分别吸取6mL到灭菌的三 角烧瓶，加入50℃左右的PDA+100mg/LSHAM培养基54mL，摇匀后倒 入4个直径9cm的平皿，制成4个相应浓度的含毒培养基；用同样的方法 将不同配比的噻呋酰胺和肟菌酯系列浓度复配药液制成含毒培养基。将培 养2天的水稻纹枯病病原菌，用直径5mm的打孔器在菌落边缘打成菌块， 用接种针将菌块移至预先配制成的含毒PDA培养基中央，然后置于25℃ 培养箱内培养，每处理重复4次。3天后，采用十字交叉法用卡尺量取各 处理菌落直径cm，求出校正抑制百分率。每个菌落十字交叉测两个直径， 以其平均数代表菌落大小。按下式求出菌落生长抑制率：菌落生长抑制率 ％＝(空白对照菌落增长直径-药剂处理菌落增长直径)×100/空白对照菌落 增长直径
在药剂抑菌率的基础上，用“DPS数据处理系统”3.11专业版进行数据 分析统计，求出回归直线、EC50、相关系数。依孙云沛(Y-P Sun)法将测 定的各处理的EC50换算成实际毒性指数(ATI)；根据混剂的配比，算出 理论毒性指数(TTI)，按下列公式计算混剂的共毒系数(CTC)。
理论混用毒力指数(TTI)＝A的毒力指数×A在混用中的含量(％)
+B的毒力指数×B在混用中的含量(％)
若共毒系数大于120，表明有增效作用；若明显低于100，表明为拮 抗作用；100～120之间，表明为相加作用。
表1噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻纹枯病的室内毒力测定结果
活性实例2：噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻稻曲病的室内毒力测定
试验靶标为水稻稻曲病(Ustilaginoidea virens)，试验采用共毒系数法 评价复配制剂的联合毒力作用，明确较合理的配比。
将噻呋酰胺和肟菌酯分别用DMF溶解，再用0.1％的吐温-80水溶液稀 释配制成系列浓度的药液，再将噻呋酰胺和肟菌酯按不同配比分别制成预 设的系列浓度复配药液。在100mL PSB培养基中接种已在PDA培养基上培 养了14d的菌丝块(直径5mm)3块，26℃恒温摇培14d的孢子菌丝悬浮液， 以单层灭菌医用沙布过滤去菌丝，孢子悬浮液供测试用。将各单剂及复配 药剂分别按预备试验设计的系列浓度药液，加入到PSB液体培养基中制成 含药液体培养基。每50mL的三角瓶中装稀释液20mL，每浓度4瓶。同时设 空白对照。该过程严格按照无菌操作。每三角瓶加已培养备用的孢子悬浮 液菌种2mL，26℃恒温摇培12d(转速120r/min)，静止培养2d。倒出菌丝， 60℃烘干称菌丝干重。计算各药剂处理的抑菌效果，抑菌率(％)＝(空 白对照菌丝干重-药剂处理菌丝干重)×100/空白对照菌丝干重。
在药剂抑菌率的基础上，用“DPS数据处理系统”3.11专业版进行数据 分析统计，求出回归直线、EC50、相关系数。依孙云沛(Y-P Sun)法将测 定的各处理的EC50换算成实际毒性指数(ATI)；根据混剂的配比，算出 理论毒性指数(TTI)，按下列公式计算混剂的共毒系数(CTC)。
理论混用毒力指数(TTI)＝A的毒力指数×A在混用中的含量(％)
+B的毒力指数×B在混用中的含量(％)
若共毒系数大于120，表明有增效作用；若明显低于100，表明为拮 抗作用；100～120之间，表明为相加作用。
表2噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻稻曲病的室内毒力测定结果
活性实例3：噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻稻瘟病的室内毒力测定
试验靶标为水稻稻瘟病(Pyricularia oryzae)，试验采用共毒系数法评 价复配制剂的联合毒力作用，明确较合理的配比。
将噻呋酰胺和肟菌酯分别用DMF溶解，再用0.1％的吐温-80水溶液 稀释配制成系列浓度的药液，再将噻呋酰胺和肟菌酯按不同配比分别制成 预设的系列浓度复配药液。将培养8天的水稻稻瘟病病原菌，用直径5mm 的打孔器在菌落边缘打成菌块，用接种针将菌块移至预先配制成的含毒 PDA培养基中央，然后置于25℃培养箱内培养，每处理重复4次。8天后， 采用十字交叉法用卡尺量取各处理菌落直径cm，求出校正抑菌率。每个 菌落十字交叉测两个直径，以其平均数代表菌落大小。按下式求出抑菌率： 菌落生长抑制率％＝(空白对照菌落增长直径-药剂处理菌落增长直径) ×100/空白对照菌落增长直径。
在药剂抑菌率的基础上，用“DPS数据处理系统”进行数据分析统计， 求出回归直线、EC50、相关系数。依孙云沛(Y-P Sun)法将测定的各处 理的EC50换算成实际毒性指数(ATI)；根据混剂的配比，算出理论毒性 指数(TTI)，按下列公式计算混剂的共毒系数(CTC)。
理论混用毒力指数(TTI)＝A的毒力指数×A在混用中的含量(％)
+B的毒力指数×B在混用中的含量(％)
若共毒系数大于120，表明有增效作用；若明显低于100，表明为拮 抗作用；100～120之间，表明为相加作用。
表3噻呋酰胺与肟菌酯复配对水稻稻瘟病的室内毒力测定结果
从上述结果可以看出，噻呋酰胺与肟菌酯混配，在重量比为100∶1～ 1∶100的范围内，对水稻纹枯病、稻曲病和稻瘟病均表现为增效作用。其 中重量比为20∶1～1∶20的范围内增效作用最为明显。结果表明，噻呋酰胺 与肟菌酯混配具有合理性和可行性。
田间应用试验1：防治水稻纹枯病田间药效试验
根据农业部药检所“GB/T 17980.20-2000农药田间药效试验准则(一) ——杀菌剂防治水稻纹枯病”的规定，试验药剂、对照药剂和空白对照的 小区处理采用随机区组排列，小区面积15m2，4次重复，本试验共计施药 两次。第一次施药时处于发病初期，两周后施第二次药。本试验共计调查 2次，每试验小区采用对角线五点取样，每点调查相连5丛，共25丛，记 录病害等级。
病害分级标准如下：
0级：全株无病；
1级：第四叶片及其以下各叶鞘、叶片发病(以剑叶为第一片叶)；
3级：第三片叶及其以下各叶鞘、叶片发病；
5级：第二片叶及其以下各叶鞘、叶片发病；
7级：剑叶叶片及其以下各叶鞘、叶片发病；
9级：全株发病，提早枯死。
药效计算方法：
根据调查结果，按照下面(1)、(2)公式计算病情指数和防效。
式中：CK0、CK1分别为空白对照区施药前、后的病情指数；PT0、PT1分别为药剂处理区药前、后的病情指数。
表4防治水稻纹枯病田间药效试验结果
田间应用试验2：防治水稻稻曲病田间药效试验
试验药剂、对照药剂和空白对照的小区处理采用随机区组排列，小区 面积20m2，4次重复，本试验共计施药两次。第一次施药时处于发病初期， 1周后施第二次药。每试验小区采用对角线五点取样，每点调查相连5丛， 共25丛，调查各小区的病粒数，记录病害等级。
病害分级标准如下：
0级：无病；
1级：1粒病粒；
2级：2～5粒病粒；
3级：6～10粒病粒；
4级：11～15粒病粒；
5级：16粒以上病粒。
药效计算方法：
根据调查结果，按照下面(1)、(2)公式计算病情指数和防效。
式中：CK0、CK1分别为空白对照区施药前、后的病情指数；PT0、PT1 分别为药剂处理区药前、后的病情指数。
表5防治水稻稻曲病田间药效试验结果
田间应用试验3：防治水稻稻瘟病田间药效试验
试验药剂、对照药剂和空白对照的小区处理采用随机区组排列，小区 面积20m2，4次重复，本试验共计施药两次。第一次施药时处于水稻出穗 期前，齐穗期施第二次药。每试验小区采用对角线五点取样，每点调查50 株，穗瘟每点调查50穗以上，以穗为单位记录分级，记录病害等级。
病害分级标准如下：
0级：无病；
1级：每穗损失5％一下(个别枝梗发病)；
3级：每穗损失6％～20％(1/3左右枝梗发病)；
5级：每穗损失21％～50％(穗颈或主轴发病，谷粒半瘪)；
7级：每穗损失51％～70％(穗颈发病，大部瘪谷)；
9级：每穗损失71％～100％(穗颈发病，造成白穗)。
药效计算方法：
根据调查结果，按照下面(1)、(2)公式计算病情指数和防效。
式中：CK0、CK1分别为空白对照区施药前、后的病情指数；PT0、PT1分别为药剂处理区药前、后的病情指数。
表6防治水稻稻瘟病田间药效试验结果
上述室内生测和田间药效试验结果表明本发明所述杀菌组合物产生 的有益效果为：
(1)与单剂相比，该杀菌组合物对水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病有 显著的协同增效作用，提高了杀菌效果，特别是在有效成分比为20∶1～1∶20 范围内，其效果明显高于单独使用单一杀菌剂；
(2)减低用药成本，减少环境污染和农药残留；
(3)组合物由不同作用机制的有效成分组成，作用位点增加，有利 于克服和延缓病菌抗药性的产生。本发明组合物对试验作物均无明显不良 影响，叶色、长势等都正常，安全性好，符合农药制剂的安全性要求。
本发明所述杀菌组合物对水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病有良好的防 效。