技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种改善睡眠保护视力的中老年保健食品 及其制备方法。
技术背景
睡眠表现为机体运动活动停止、肌肉松弛、意识消失、与世隔绝；新陈代谢下 降，允许在能量消耗最小的条件下保证机体的基本生命活动；感知觉与环境分离并 丧失反应能力的一种可逆转状态，常可在“瞬间”完成睡眠和觉醒的转换。睡眠是 一种主动过程，是恢复精力所必须的休息，有专门的中枢管理睡眠与觉醒，睡时人 脑只是换了一种工作方式，使能量得到贮存，有利于精神和体力的恢复；而适当的 睡眠是最好的休息，既是维持健康和体力的基础，也是取得高度生产力的保证。一 个人的一生有三分之一的时间是在睡眠中度过的，睡眠是人寿命的保证，没有睡眠 就没有生命的延续，通过睡眠人的精神体力得到恢复，人体亦是在睡眠过程中进行 必要的生理调节。中老年人由于神经细胞减少，自然会引起睡眠障碍，失眠就是最 常见的症状。进入老年，全身性的疾病发病率增高，老年人多患有心脑血管疾病、 呼吸系统疾病，以及其他退行性脊椎病，颈椎病，类风湿性关节炎，四肢麻木等， 这些病，可因为疾病本身或伴有症状而影响睡眠，加重老年人的失眠。同时失眠也 会影响身体的正常代谢功能，诱发各种疾病，如心脏病、肾病、哮喘、溃疡病、关 节炎、骨关节病、肠胃病、高血压、睡眠呼吸暂停综合症、甲状腺功能亢进、夜间 肌阵痉挛综合症、脑疾病等，长期失眠还会加速衰老，诱发抑郁、焦虑等情绪功能 障碍。失眠的同时往往还会伴随着视力的下降，目前市面上的助眠产品，往往功能 单一，只能改善失眠而不能改善失眠带来的视疲劳、视力模糊等问题。
发明内容
本发明为了解决市面上助眠产品功能单一的问题，将能够促进睡眠及保护视力 的功能成分进行了科学合理的搭配，提供了一种改善睡眠保护视力的中老年保健食 品。
本发明所述改善睡眠保护视力的中老年保健食品配方由以下重量份数的原料组 成：叶黄素5％-10％份、黑灵芝提取物20％-50％份、褪黑素1％-5％份、石菖蒲提 取物20％-50％份。
本发明所用褪黑素由陕西森弗天然制品有限公司提供，食品级原料，含量 ≧99％。
本发明的制备方法主要包括以下步骤：
(1)叶黄素的制备
将万寿菊干花颗粒粉碎过40目筛，称取一定量万寿菊花粉末，按料液比1:20加入 萃取剂正己烷，超临界萃取工艺参数为萃取压力20-25MPa，温度50-60℃，CO2流 量10-12L/h，萃取时间3-4h，分离参数为分离Ⅰ温度40-50℃，压力10-15MPa， 分离Ⅱ温度30-40℃，压力10-15MPa，提取液真空加热使溶剂挥发，得到浸膏状叶 黄素酯，将叶黄素酯加入到乙醇溶液中溶解，加热，缓慢加入NaOH溶液，并趁热 搅拌，皂化6-10h，向混合溶液中加入蒸馏水搅拌均匀，离心除去上清液，沉淀物 经真空冷冻干燥得到叶黄素粗制品，粗制品用乙酸乙酯溶解，并用去离子水冲洗去 除多余的皂化物和水溶性杂质，将乙酸乙酯相减压蒸馏回收溶剂，向浓缩物中加入 4倍体积的正己烷-丙酮混合溶剂(体积比为4:1)，室温下静置30min后过滤，分 别用无水乙醇和蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥制得叶黄素结晶体；
(2)黑灵芝提取物的制备
黑灵芝购自金寨县顺保康生态农业开发有限公司。
将购买的黑灵芝60℃干燥，粉碎，过40目筛→称取一定量的粉碎后的黑灵芝 →按料液比1:15加入蒸馏水→微波萃取30分钟→提取液抽滤去残渣→真空浓缩至 浸膏状→冷冻干燥→粉碎过60目筛，备用；
(3)石菖蒲提取物制备
石菖蒲购自金寨县天然生态中药材种植专业合作社。
将购买的石菖蒲60℃烘干，粉碎，过40目筛→称取一定量粉碎后的石菖蒲→ 按料液比1:20加入蒸馏水→70℃提取2小时→过滤→重复提取3次，合并滤液→真 空浓缩至浸膏状→冷冻干燥→粉碎过60目筛，备用；
(4)混合
按叶黄素5％-10％份、黑灵芝提取物20％-50％份、褪黑素1％-5％份、石菖蒲 提取物20％-50％份的重量份数比称取叶黄素、黑灵芝提取物、褪黑素、石菖蒲提取 物，混合均匀；
(5)分装
将各组分混合均匀，分装入软胶囊，即成。
本发明配方成分的主要作用是：
叶黄素：叶黄素与玉米黄素是人眼视网膜黄斑区域的主要色素，人眼含有高量 的叶黄素，且这种色素人体不能合成，只能从外界摄入补充。它可以保护眼睛不受 光线损害，延缓眼睛的老化及防止病变，例如太阳光中的紫外线及蓝光进入眼睛会 产生大量的自由基，导致白内障、黄斑退化，甚至诱发癌症，黄斑中的叶黄素就能 过滤掉蓝光，避免蓝光对眼睛的损害。另外，叶黄素作为抗氧化剂和光保护作用剂， 可促进视网膜细胞中视紫质的再生成，可以预防重度近视及视网膜剥离，并可增进 视力、保护视力。叶黄素还能抑制多种眼科疾病的发生，如老年性视网膜黄斑变性、 白内障、结膜炎、畏光等。叶黄素还可以提高血管抵抗力，降低血管渗透性，抑制 血管中物质渗漏，保证眼睛血管的完整性，让眼睛得到充足的血液供应。
黑灵芝：灵芝是担子菌纲、多孔菌科、灵芝属真菌，主要成分为三萜类、总皂 苷、总多糖和肽类，其主要药理活性表现为抗肿瘤、增强和调节免疫功能、抗衰老、 抗动脉粥样硬化等方面。黑灵芝是灵芝中的极品，对人体保健具有药用疗效，远高 于其他种类的灵芝，能增强机体免疫功能，长期食用能调节体内多种机能。灵芝对 中枢神经系统呈抑制作用，故目前灵芝还被用于治疗神经衰弱症和虚劳失眠。
褪黑素：褪黑素又名褪黑激素、松果体素，主要是哺乳动物松果体分泌的一种 神经激素。褪黑素的药理和生理作用十分广泛，主要作用是调节昼夜节律、清除自 由基、抗炎症、抗凋亡、降体温、抑制肿瘤生长、抑制生殖系统功能、提高记忆力、 治疗痴呆、延缓衰老、抗焦虑、改善骨质疏松、抗癫痫等。在眼部，褪黑素参与调 节视网膜功能昼夜节律性变化、视网膜信息传递等。人体的褪黑素在婴儿时期夜晚 水平最高，从儿童到青少年时期褪黑素的水平平均降低80％，以后维持在低水平， 到50岁以后进一步降低。实验证明，很小剂量的褪黑素就可以使体内褪黑素水平达 到正常而引导入睡，而且褪黑素是人体内每天都会不断产生的一种激素，所以现在 只是在缺少它的时候将它补充正常水平，就可以恢复正常的生理睡眠。
石菖蒲：石菖蒲为天南星科多年生草本植物石菖蒲的干燥根茎，始载于《神农 百草经》，被列为上品，味辛性温，具芳香之气，行散之力强，为宣气通窍之佳品， 既能芳香化湿、醒脾健胃，又可化浊祛痰、开窍宁神，为涤痰开窍之要药。现代药 理研究表明，石菖蒲主要含有挥发油、氨基酸、糖类、脂肪酸、无机元素等化学成 分，具有免疫、抑菌、抗癌、抗突变等药理作用，对中枢神经系统、心脑血管系统、 呼吸系统、消化系统等均有一定的药理活性，临床上广泛应用于癫痫、惊厥、热病 神昏、健忘、老年痴呆等疾病，是为数不多的脑病良药。
本发明的有益效果是可以静心安神、缓解焦虑情绪、促进睡眠、改善睡眠质量， 且醒后无常用安眠药所产生的头晕、嗜睡、成瘾等现象。在良好改善睡眠的基础上， 保护视力，延缓眼睛老化，改善视力模糊，缓解视疲劳。
附图说明
图1急性经口毒性试验小鼠体重增长
a1、a2、a3分别为对照组小鼠的初始体重、1周末体重、2周末体重，b1、b2、 b3为实验组小鼠的初始体重、1周末体重、2周末体重。
图230天喂养试验血液检查结果
项目A为红细胞总数(1012/L)、项目B为血红蛋白总数(g·10-1/L)、项目C为 白细胞总数(109/L)、项目D为血小板总数(1011/L)；a为对照组，b为低剂量受试 组，c为中剂量受试组，d为高剂量受试组。
图330天喂养试验末期生化检查结果
项目A为谷丙转氨酶(U/L)、项目B为甘油三酯(mmol/L)、项目C为肌酐 (μmol/L)、项目D为血糖(mmol/L)；a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂量受 试组，d为高剂量受试组。
图430天喂养试验末期生化检查结果
项目A为胆固醇(mmmol/L)、项目B为甘油三酯(mmmol/L)、项目C为肌酐 (μmol/L)、血糖(mmol/L)；a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂量受试组，d 为高剂量受试组。
图530天喂养试验对大鼠脏体比值的影响
a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂量受试组，d高剂量受试组。
具体实施方式
实施案例1改善睡眠保护视力的中老年功能食品配方及制备方法
本发明所述改善睡眠保护视力的中老年功能食品配方由以下重量份数的配方构 成：叶黄素5％-10％、黑灵芝提取物20％-50％、褪黑素1％-5％、石菖蒲提取物 20％-50％。
本发明所用褪黑素由陕西森弗天然制品有限公司提供，食品级原料，含量 ≧99％。
本发明的制备方法包括以下步骤：
(1)叶黄素的制备
将万寿菊干花颗粒粉碎过40目筛，称取一定量万寿菊花粉末，按料液比1:20 加入萃取剂正己烷，超临界萃取工艺参数为萃取压力20-25MPa，温度50-60℃，CO2流量10-12L/h，萃取时间3-4h，分离参数为分离Ⅰ温度40-50℃，压力10-15MPa， 分离Ⅱ温度30-40℃，压力10-15MPa，提取液真空加热使溶剂挥发，得到浸膏状叶 黄素酯，将叶黄素酯加入到乙醇溶液中溶解，加热，缓慢加入NaOH溶液，并趁热 搅拌，皂化6-10h，向混合溶液中加入蒸馏水搅拌均匀，离心除去上清液，沉淀物 经真空冷冻干燥得到叶黄素粗制品。粗制品用乙酸乙酯溶解，并用去离子水冲洗去 除多余的皂化物和水溶性杂质，将乙酸乙酯相减压蒸馏回收溶剂，向浓缩物中加入 4倍体积的正己烷-丙酮混合溶剂(体积比为4:1)，室温下静置30min后过滤，分 别用无水乙醇和蒸馏水洗涤，真空冷冻干燥制得叶黄素结晶体；
(2)黑灵芝提取物的制备
将购买的黑灵芝60℃干燥，粉碎，过40目筛→称取一定量的粉碎后的黑灵芝 →按料液比1:15加入蒸馏水→微波萃取30分钟→提取液抽滤去残渣→真空浓缩至 浸膏状→冷冻干燥→粉碎过60目筛；
(3)石菖蒲提取物制备
将购买的石菖蒲60℃烘干，粉碎，过40目筛→称取一定量粉碎后的石菖蒲→ 按料液比1:20加入蒸馏水→70℃提取2小时，过滤→重复提取3次，合并滤液→真 空浓缩至浸膏状→冷冻干燥→粉碎过60目筛，备用；
(4)混合
按叶黄素5％-10％份、黑灵芝提取物20％-50％份、褪黑素1％-5％份、石菖蒲 提取物20％-50％份的重量份数比称取叶黄素、褪黑素、黑灵芝提取物、石菖蒲提取 物，混合均匀。
(5)分装
将混合均匀的配方，分装入胶囊，即成。
实施案例2毒理学试验
根据《食品安全性毒理学评价程序和方法》GB15193-2003，对本发明的功能食 品进行安全性毒理学评价。
一、试验方法
1、急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量试验，选用体重为18-22g的昆明种 小鼠40只，雌雄各半，按性别随机分为雌性对照组、雌性实验组、雄性对照组、雄 性实验组。用本发明制备的功能食品25g加蒸馏水至60mL(达小鼠最大灌胃浓度)， 给实验组小鼠灌胃，每日灌胃两次累积剂量25g/kg·bw，对照组灌胃同等体积的蒸馏 水，灌胃后连续观察两周，记录中毒表现及死亡情况。
2、30天喂养试验：选用SD大鼠40只，雌雄各半，雌鼠体重73.8±5.6，雄鼠 体重70.9±8.4，随机分为四组，即对照组及三个受试组，每组10只，雌雄各半，以 本发明制备的功能食品低、中、高剂量1.0g/kg·bw、2.0g/kg·bw、3.0g/kg·bw分别 相当于人体食用量的50、75、100倍，给大鼠按1.5mL/100g·bw体积灌胃，对照组 用等体积的蒸馏水，每日一次，连续喂养30天。
二、试验结果
1、急性经口毒性实验结果
图1中a1、a2、a3分别为对照组小鼠的初始体重、1周末体重、2周末体重， b1、b2、b3为实验组小鼠的初始体重、1周末体重、2周末体重。
急性经口试验结果表明：
(1)、以25g/kg·bw剂量的本发明制备的功能食品给两种性别的昆明小鼠灌胃未 见明显的中毒症状；
(2)、由图1可知，观察期间小鼠体重增长正常，与对照组相比无明显差异 (p>0.05)，并且无死亡情况；
(3)、观察期结束后对小鼠肝脏、肾脏、肺脏、脾脏等做大体解剖观察，未见异 常改变，两种性别小鼠的经口毒性最大耐受剂量(MTD)大于25.0g/kg·bw，根据《保 健食品检验与评价技术规范》(2003版)中的急性毒性分级标准，属于无毒级。
2、30天喂养试验结果
(1)、30天喂养后小鼠血液检查结果
图中项目A为红细胞总数(1012/L)、项目B为血红蛋白总数(g·10-1/L)、项目 C为白细胞总数(109/L)、项目D为血小板总数(1011/L)；a为对照组，b为低剂量 受试组，c为中剂量受试组，d为高剂量受试组，观察项目以平均值计算，由图2 可知，30天喂养结束，低、中、高三个剂量组小鼠的血液检查结果与对照组相比无 明显差异(p>0.05)。
(2)、30天喂养结束小鼠生化检查结果
图3中，项目A为谷丙转氨酶(U/L)、项目B为甘油三酯(mmol/L)、项目C为 肌酐(μmol/L)、项目D为血糖(mmol/L)；a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂 量受试组，d为高剂量受试组，各检查项目以平均值计算，由图3可知，30天喂养 结束后各剂量受试组的生化检查结果与对照组相比无明显差异(p>0.05)。
图4中，项目A为胆固醇(mmmol/L)、项目B为甘油三酯(mmmol/L)、项目C 为肌酐(μmol/L)、血糖(mmol/L)；a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂量受试 组，d为高剂量受试组，由图4可知，30天喂养结束后，3个受试组小鼠的生化检 查结果与对照组相比无明显差异(p>0.05)。
(3)、30天喂养结束脏体比值结果
30天喂养过程中，各组大鼠生长发育良好，无异常行为和中毒症状，无死亡， 肝、脾、肾、十二指肠、睾丸(卵巢)组织病理检查无明显损害，各组大鼠的血常 规、血生化检查以及脏体比值结果如图5。
图中a为对照组，b为低剂量受试组，c为中剂量受试组，d高剂量受试组，各 检查项目以平均值计算，由图5可知，各剂量组小鼠的脏体比值与对照组相比无明 显差异(p>0.05)。
实施案例3功能性评价试验
为证明本发明的效果，根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)进行 了功能性评价试验。
2人群观察实验
2.1实验对象：
实验分50-60岁、60-70岁、70-80岁三组，每组选取有睡眠障碍并伴随视疲劳 视力模糊患者120人，按照症状的轻重随机分为实验组和对照组。
2.2试验方法：
采用自身及组间2种对照方式，按上述一种改善睡眠保护视力的中老年保健食 品配方制备的食品，给实验组服用，每天1次，每次2粒，对照组服用安慰剂，连 续服用60天。实验开始及结束时运用睡眠状况自评表以及视力状况调查表了解受试 者睡眠及视力状况的前后变化，统计症状总积分，根据《保健食品检验与评价技术 规范》(2003版)的评价标准进行功效判定。
2.3效果评价：
++：表示视力及睡眠状况有显著改善；
+：表示视力及睡眠状况有较好改善；
－：表示视力及睡眠状况基本无改善，甚至有更坏的趋势。
2.4观察结果
表1 50-60岁组改善结果
表2 60-70岁组改善结果
表3 70-80岁组改善结果
由表1、2、3可知，实验组与对照组差异具有高度显著性(p<0.01)，说明本 发明可以很好的改善睡眠，并缓解视疲劳以及视力模糊。
3结论
通过以上功能评价试验，证明本发明可以很好的改善失眠，同时缓解视疲劳以 及视力模糊。本发明还可以在制备静心安神、促进睡眠、保护视力的保健食品中应 用。