一种治疗放射性纤维化的中药制剂及其制备方法
技术领域：本发明是一种治疗放射性纤维化的中药制剂及其制备方法，属于中药的技术 领域。
技术背景：放射治疗是肿瘤治疗的主要手段之一。放射线是把双刃剑，它既能杀灭肿瘤 细胞，同时又可能造成正常组织的损伤，认识放射线损伤与认识和掌握放射线对肿瘤细胞的 杀伤作用同等重要。在胸部肿瘤(如肺癌、乳腺癌、纵隔淋巴瘤等)的放射治疗中，肺组织 往往会受到一定剂量的照射，造成不同程度的放射损伤。肺的放射损伤有两种表现形式，即 早期的急性放射性肺炎和后期的放射性纤维化。RTO(美国放射肿瘤治疗协作组)放射性损 伤评价标准中将发生放疗开始后90天内者称为急性放射性损伤，发生在90天以后者称为后 期放射性损伤。为了达到防治目的，许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些 治疗的产品；如：专利申请号为：98103087.4、名称为“抗放射性纤维化的药物”，但是这 份申请组方复杂，处方量大，服用量大，不仅为以后的制剂工艺带来很多困难，而且其中涉 及濒危和副作用较大的药材，使药物的有效性和安全性存在隐患。
发明内容：本发明的目的在于：提供一种治疗放射性纤维化的中药制剂及其制备方法； 本发明针对现有技术，根据放射性纤维化发病的原理，采用黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴 戟天、郁金、麦冬配伍做成制剂；处方量小，成本合理，对于治疗放射性纤维化有较好的疗 效。而且本发明为纯中药制剂，其不良反应小、服用量小，可供病人长期使用。
本发明是这样构成的：按重量组分计算：它由黄芪20～35份、丹参15～30份、鸡血藤 15～30份、玄参10～20份、巴戟天5～15份、郁金5～15份、麦冬5～15份制作而成，或者是 相应重量份药材经提取后得到的提取物制作而成。
准确的说，按重量组分计算：它由黄芪30份、丹参25份、鸡血藤25份、玄参15份、巴戟 天10份、郁金10份、麦冬10份制作而成，或者是相应重量份药材经提取后得到的提取物制作 而成。
本发明所述的制剂为：直接用于注射给药的注射液、直接供静脉滴注的静脉输液、需稀 释后用于静脉滴注的注射用浓溶液和用冷冻干燥法或喷雾干燥法制得的注射用无菌粉末和无 菌块状物以及片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、丸剂、软胶囊剂、口服液体制剂、口腔崩解 片和分散片剂等药剂学上所有能接受的剂型。
所述的治疗放射性纤维化的中药制剂的制备方法：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟 天、郁金、麦冬，加水煎煮，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇沉淀，静置，滤过，上 清液减压回收乙醇，再精制、浓缩，干燥后粉碎，然后分别制成不同的制剂。
优选方法为：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮1～3次， 每次0.5～5小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达60～80％，静置 12～48小时，回收乙醇，干燥，然后分别制成不同的制剂。
所述制剂中的胶囊剂这样制备：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬， 加水煎煮2次，每次2小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静 置24小时，回收乙醇，干燥，粉碎，每100g干浸膏，加入25g微晶纤维，以85％乙醇为湿润剂， 制软材，过40目筛制成湿颗粒，于60℃烘箱中干燥，40目整粒，过60目筛网去细粉，装入胶囊 ，即得。
所述制剂中的片剂这样制备：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加 水煎煮2次，每次2小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置 24小时，回收乙醇，干燥，粉碎，每100g干浸膏，加入微晶纤维素25g，用85％乙醇制粒，干 燥，整粒，加硬脂酸镁2g，混匀，压片，包薄膜衣，即得。
所述制剂中的颗粒剂这样制备：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬， 加水煎煮2次，每次2小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静 置24小时，回收乙醇，干燥，粉碎，每100g干膏粉加入糊精50g、糖粉100g，以75％的乙醇为 润湿剂，制成颗粒，干燥，即得。
所述制剂中的注射剂这样制备：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬， 加水煎煮2次，每次2小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静 置24小时，回收乙醇，干燥，粉碎，加注射用水溶解，用10％氢氧化钠溶液调节pH值至8.0～ 8.5，加注射用水及0.1％针用活性炭，混合溶液加热煮沸，滤过，再加入注射用水至一定体 积，滤过、灌装、灭菌，即得。
所述制剂中的注射剂这样制备：取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬， 加水煎煮2次，每次2小时，合并水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静 置24小时，回收乙醇，干燥，粉碎，加入适量甘露醇，加注射用水溶解，用10％氢氧化钠溶 液调节pH值至8.0～8.5，加注射用水及0.1％针用活性炭，混合溶液加热煮沸，滤过，加无菌 注射用水至全量，真空冷冻干燥或喷雾干燥，分装，密封即得。
本方中，重用黄芪补气升阳，益卫固表；丹参活血通经，祛瘀止痛，清心除烦；鸡血藤 补血，活血，通络，三药活血之时同时补气，利于血行共为君药；玄参凉血滋阴，泻火解毒 ，为臣药；郁金行气化瘀、清心解郁，巴戟天补肾阳、强筋骨；麦冬养阴生津、润肺清心， 为佐药。
与现有技术相比，本发明制剂的处方简练，疗效稳定可靠，副作用小，减少了服用量， 方便了病人的服用，更有利于患者长期服用。
申请人进行了一系列组方实验，能够证明本发明提供的药物具有有效的效果；
实验例1：对放射性肺损伤保护作用的研究
1号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、牡蛎30g、生地10g、麦冬 10g、肉苁蓉10g、巴戟天10g、山茱萸10g
2号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、生地10g、麦冬10g、肉苁 蓉10g、巴戟天10g、山茱萸10g
3号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、生地10g、麦冬10g、巴戟 天10g、山茱萸10g
4号方：丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、生地10g、麦冬10g、巴戟天10g、山 茱萸10g
5号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、麦冬10g、巴戟天10g
取70只体重180～220的雌性大白鼠随机分为7个组进入实验：正常对照组、单纯照射组 、实验1组(照射加1号方水提液组)、实验2组(照射加2号方水提液组)、实验3组(照射 加3号方水提液组)、实验4组(照射加4号方水提液组)、实验5组(照射加本发明5号方水 提液组)，每组动物10只。加药组于照射前一周口服给药，一天一次(0.3g/kg)。大鼠在麻 醉后用4MV的X射线、3.5cm×3.5cm的照射野、右全肺单次照射28Gy。对照组给予同量的麻醉
(1)呼吸频率改变与生存情况
用呼吸频率记录机记录呼吸频率每2周1次，当出现呼吸困难(220～250次/min)和体重下 降13％左右时，终止实验观察；否则在3个月后终止观察。结果见表1。
表1 各组动物呼吸频率(次/min)变化情况
不同时间(周)的呼吸频率(次/min) 组别 0 4 8 10 12 正常对照组 119.5±3.3 118.5±2.5 116.5±2.3 113.6±2.9 113.9±3.4 单纯照射组 117.9±2.4 118.7±2.9 187.6±4.8 176.3±5.2 185.0±3.2 实验1组 118.5±2.8 118.3±3.2 160.3±5.6 145.0±4.1 169.5±4.9
实验2组 119.7±2.5 119.0±3.5 158.3±5.9 144.2±5.4 165.6±3.5 实验3组 119.1±3.1 119.7±2.9 153.2±6.0 142.0±3.8 163.1±5.2 实验4组 120.1±2.1 119.4±3.5 163.1±4.7 141.5±4.6 162.3±3.5 实验5组 118.3±3.0 118.5±2.1 152.7±3.6 139.6±3.4 152.9±4.3
(2)血浆TGF-β1检查：
每2周从大鼠尾静脉获取100～150μl血浆标本用于TGF-β1水平的检测。用浓度为 3ng/ml的TGF-β1单抗MAB-240滴加96孔盘，用2.5mol/L醋酸与10mol/L尿素和2.7mol/LNaOH 与1mol/LHepes激活和游离血浆内的TGF-β1。然后，样本和对照分别加入每个孔，室温下孵 化2h，用含有体积分数为0.01吐温-20的体积分数为0.0005磷酸缓冲液冲洗，之后加入TGF β1单抗BAF-240，室温下孵化20min，冲洗3次后加入1∶150的显色液室温下20～25min，而 后加50μl的4mol/L硫酸终止反应，15～20min后，用450μm波长测取测量值。每半月观察血 浆TGF-β1水平的变化，其结果见表2。
表2 血浆TGF-β1水平变化情况
不同时间(个月)的血浆TGF-β1水平(ng/ml) 组别 0 0.5 1 1.5 2 正常对照组 1.25±0.17 1.21±0.15 1.18±0.21 1.21±0.16 1.18±0.23 单纯照射组 1.24±0.21 1.81±0.26 1.83±0.29 2.21±0.46 1.71±0.25 实验1组 1.25±0.19 1.37±0.24 1.47±0.31 1.39±0.28 1.21±0.22 实验2组 1.24±0.13 1.35±0.21 1.36±0.26 1.37±0.32 1.20±0.35 实验3组 1.27±0.14 1.41±0.28 1.36±0.35 1.35±0.24 1.20±0.31 实验4组 1.26±0.27 1.44±0.25 1.34±0.25 1.35±0.32 1.19±0.26 实验5组 1.25±0.22 1.32±0.31 1.28±0.21 1.30±0.22 1.18±0.42
实验结果表明，本发明各处方对放射性肺损伤均有明显的治疗作用，尤其是5号方，仅 使用7味药组方，作用好于其他1～4号的较多药味组方。
实验例2：不同配比组方的药效学实验：
在优选了7味药组方之后，拟对此7味药的不同配比进行研究。
1号方：黄芪20g、丹参15g、鸡血藤15g、玄参10g、巴戟天5g、郁金5g、麦冬5g
2号方：黄芪35g、丹参30g、鸡血藤30g、玄参20g、巴戟天15g、郁金15g、麦冬15g
3号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、玄参15g、巴戟天10g、郁金10g、麦冬10g
4号方：黄芪25g、丹参20g、鸡血藤20g、玄参20g、巴戟天8g、郁金8g、麦冬8g
5号方：黄芪18g、丹参18g、鸡血藤18g、玄参18g、巴戟天6g、郁金6g、麦冬6g
体重150～160g的雌性Fisher-344大白鼠随机分为7个组进行本实验研究：(1)正常对 照组、(2)荷瘤照射组、(3)实验1组(照射加1号方水提液组)、(4)实验2组(照射加 2号方水提液组)、(5)实验3组(照射加3号方水提液组)、(6)实验4组(照射加4号方 水提液组)、(7)实验5组(照射加本发明5号方水提液组)。有照射的组每组10只大鼠， 无照射的组每组7只大鼠。荷瘤的大白鼠为R3230AC人乳腺癌细胞株种植于右后胸壁皮下，当 肿瘤直径在1.0～1.5cm时入本实验。加药组于照射前一周口服给药，一天一次(0.3g/kg)。 大鼠用ketamine(67.5mg/kg)和xylazine(4.5mg/kg)腹腔内注射麻醉，用4MV的X射线、 3.5cm×3.5cm的照射野、剂量35Gy分5次5d照射右全肺，照射时照射野区填充1cm厚的凡士林 纱布调整剂量分布。对照组只给予同量的麻醉。采用Woessner’s方法在分光光度计下测定羟 脯氨酸含量，计算每克湿肺所含的羟脯氨酸含量，结果见表3。
表3 对大鼠肺组织羟脯氨酸(HP)含量的影响(mg/g)
组别 n 第14天 第28天 正常对照组 7 2.46±0.13 2.47±0.18 荷瘤照射组 10 4.10±0.79 4.48±0.15 实验1组 10 2.96±1.72 3.09±2.16 实验2组 10 3.01±2.21 2.97±2.18 实验3组 10 2.72±1.23 2.48±1.74 实验4组 10 2.99±1.76 3.02±1.49 实验5组 10 3.05±0.82 3.04±1.03
由实验结果可知，实验1～5组动物的肺组织羟脯氨酸(HP)含量均有明显的改善，其中， 最佳配伍比例为3号方，即黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、玄参15g、巴戟天10g、郁金10g 、麦冬10g。
实验例3：制剂药效学实验
体重150～160g的雌性Fisher-344大白鼠随机分为8个组进本实验研究：(1)正常对照 组、(2)荷瘤照射组、(3)本发明胶囊剂组、(4)本发明片剂组、(5)本发明口服液组 、(6)本发明丸剂组、(7)阿米福汀组。有照射的组每组10只大鼠，无照射的组每组7只 大鼠。荷瘤的大白鼠为R3230AC人乳腺癌细胞株种植于右后胸壁皮下，当肿瘤直径在1.0～ 1.5cm时入本实验。加药组于照射前一周口服给药，一天一次(0.3g/kg)。大鼠用ketamine (67.5mg/kg)和xylazine(4.5mg/kg)腹腔内注射麻醉，用4MV的X射线、3.5cm×3.5cm的 照射野、剂量35Gy分5次5d照射右全肺，照射时照射野区填充1cm厚的凡士林纱布调整剂量分 布。对照组只给予同量的麻醉。采用分光光度法测定羟脯氨酸含量，计算每克湿肺所含的羟 脯氨酸含量，结果见表4。
表4 制剂对大鼠肺组织羟脯氨酸(HP)含量的影响(mg)
组别 n 第14天 第28天 正常对照组 7 2.51±0.13 2.46±0.18 荷瘤照射组 10 4.16±0.81 4.55±0.15 本发明胶囊剂组(0.3g/kg) 10 2.84±1.75 2.63±2.18 本发明片剂组(0.3g/kg) 10 2.91±2.25 2.58±2.20 本发明口服液组(0.3g/kg) 10 2.88±1.25 2.53±1.76 本发明丸剂组(0.3g/kg) 10 2.90±1.80 2.61±1.50 阿米福汀组(0.15g/kg) 10 2.74±1.65 2.50±0.93
由实验结果可知，本发明药物制剂能明显降低大鼠体内的HP含量，说明本发明制剂对放 射引起的大鼠肺纤维化模型具有治疗作用。
实验例4：成本比较之前的比较都是在日服药量相同0.3g/kg的情况下进行的，此处提出 缩减处方药味的同时缩减了服药量。
①药用牡蛎为牡蛎科动物长牡蛎、大连湾牡蛎或近江牡蛎的贝壳，其有效成分不易煎出 ，溶出度差，而且加入该药，服药量较大，且服用次数较多。
表5 制剂服用量的比较
组别 规格(g/片) 日服药次数 次服药量(片/次) 日服生药量(g) 1号方片剂组 0.45 3 3 8.325 2号方片剂组 0.40 2 3 4.862
注：1号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、牡蛎30g、生地10g、 麦冬10g、肉苁蓉10g、巴戟天10g、山茱萸10g
2号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、生地10g、麦冬10g、肉苁 蓉10g、巴戟天10g、山茱萸10g
②肉苁蓉为著名的补药之一，但是近年来在我国由于对肉苁蓉不合理的极度采挖和对其 寄主梭梭的大量砍伐，不但造成荒漠区生态环境和植被的严重破坏，而且促使肉苁蓉这一名 贵中药资源濒临枯竭，因此肉苁蓉已被列入我国重点保护植物名录中，并被列入《濒危野生 动植物种国际贸易公约》附录II。本发明2号方的基础上组成5号方，制剂成本(1000片)比 较见表6。
表6 制剂成本比较
组方 规格g/片 药材总量/g 药材总成本/元 日服药/次 次服药/片 日服生药量/g 1号方片剂组 0.45 925 23.62 3 3 8.325 5号方片剂组 0.30 496 14.82 3 2 3.550
注：1号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、牡蛎30g、生地10g、 麦冬10g、肉苁蓉10g、巴戟天10g、山茱萸10g
5号方：黄芪30g、丹参25g、鸡血藤25g、郁金10g、玄参15g、麦冬10g、巴戟天10g
实验结果表明，本发明组方制剂药效良好，而且降低了制剂的成本，方便病人的服用， 同时使制剂的质量更稳定，更易控制。
具体的实施方式：(实施例中的重量份是：克、公斤、吨等)
本发明的实施例1：
黄芪30重量份、丹参25重量份、鸡血藤25重量份、玄参15重量份、巴戟天10重量份、郁 金10重量份、麦冬10重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，每100g干浸膏，加入25g微晶纤维，以85％乙醇为湿润剂，制软材，过40目筛制成湿颗粒，于 60℃烘箱中干燥，40目整粒，过60目筛网去细粉，装入胶囊，即得胶囊剂，本产品口服、一日 三次、每次2粒。
本发明的实施例2：
黄芪30重量份、丹参25重量份、鸡血藤25重量份、玄参15重量份、巴戟天10重量份、郁 金10重量份、麦冬10重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，每100g干浸膏，加入微晶纤维素25g，用85％乙醇制粒，干燥，整粒，加硬脂酸镁2g，混 匀，压片，包薄膜衣，即得片剂。
本发明的实施例3：
黄芪35重量份、丹参30重量份、鸡血藤30重量份、玄参20重量份、巴戟天15重量份、郁 金15重量份、麦冬15重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮3次，每次5小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达80％，静置48小时，回收乙醇，加入蒸馏 水和糖浆，即得口服液。
本发明的实施例4：
黄芪20重量份、丹参15重量份、鸡血藤15重量份、玄参10重量份、巴戟天5重量份、郁 金5重量份、麦冬5重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮0.5小时，合并水煎液 ，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达60％，静置12小时，回收乙醇，干燥，制丸，即 得丸剂。
本发明的实施例5：
黄芪35重量份、丹参30重量份、鸡血藤30重量份、玄参20重量份、巴戟天15重量份、郁 金15重量份、麦冬15重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，每100g干膏粉加入糊精50g、糖粉100g，以75％的乙醇为润湿剂，制成颗粒，干燥，即得 颗粒剂。
本发明的实施例6：
黄芪35重量份、丹参30重量份、鸡血藤30重量份、玄参20重量份、巴戟天15重量份、郁 金15重量份、麦冬15重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，加注射用水溶解，用10％氢氧化钠溶液调节pH值至8.0～8.5，加注射用水及0.1％针用活 性炭，混合溶液加热煮沸，滤过，再加入注射用水至一定体积，滤过、灌装、灭菌，即得注 射液。
本发明的实施例7：
黄芪35重量份、丹参30重量份、鸡血藤30重量份、玄参20重量份、巴戟天15重量份、郁 金15重量份、麦冬15重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，加入适量甘露醇，加注射用水溶解，用10％氢氧化钠溶液调节pH值至8.0～8.5，加注射 用水及0.1％针用活性炭。混合溶液加热煮沸，滤过，加无菌注射用水至全量，真空冷冻干燥 ：第一阶段的平衡冻结温度为0℃时的平衡时间为1小时，即搁板温度与产品温度基本一致的 时间；第二阶段冻结温度从0℃到最低共熔温度-15℃时，搁板温度与产品温度平衡时间为2 小时；第三阶段继续降温至-40℃，约需2小时，保持此温度2小时，直至产品完全冻牢，即 开始抽真空，进入干燥程序，在-40℃恒温下抽真空，缓慢升温，2～4℃/h，至最低共熔点 温度，时间约为13小时，升华干燥完成后，继续在低压条件下，升温干燥以除去残余水分， 时间约为10～12小时，保持35℃以上干燥2小时，压盖，即得注射用无菌块状物。
本发明的实施例8：黄芪35重量份、丹参30重量份、鸡血藤30重量份、玄参20重量份、 巴戟天15重量份、郁金15重量份、麦冬15重量份
取黄芪、丹参、鸡血藤、玄参、巴戟天、郁金、麦冬，加水煎煮2次，每次2小时，合并 水煎液，滤过，减压浓缩，加乙醇，使乙醇浓度达70％，静置24小时，回收乙醇，干燥，粉 碎，加入适量注射用水溶解，按体积加入1.0％的活性炭，煮沸，保持微沸30min，稍冷滤过 ，滤液加注射用水至规定量，用饱和氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.5，煮沸，4℃冷藏过夜 ，粗滤、精滤，在进风温度为150℃，出风温度为65℃，气流速度为20m·s-1的条件下喷雾 干燥得粉末，分装，即得粉针剂。