技术领域
本发明属于植物种子萌发技术领域，特别是一种促进战骨种子萌发的方法。
背景技术
战骨，为马鞭草科植物黄毛豆腐柴，其茎或根入药称斑鸠占，味辛、微甘，性微温； 有活血散瘀、强筋健骨、祛风止痛的功效，用于风湿痹痛、肥大性脊接骨椎炎、肩周炎、 肾虚阳痿、月经延期等症。
战骨的生产主要靠野生资源，地域分布零散且蕴藏量稀少。随着以战骨为主要原料的 “健骨注射液”、“跌打生骨颗粒”、“复方黄毛豆腐柴搽剂”等系列产品的开发，其市场需 求量逐年攀升，野生资源遭到过度采挖，濒临枯竭。在自然条件下，战骨主要依靠种子进 行繁殖，但因其结实量大而叶片的光合产物供应有限，致使果实细小，种子发育不完整、 生活力低，生产上难以实现大面积栽培。经统计分析，国内外只有1篇关于战骨种子萌发 的报道(截止2015年10月8日)，史艳财等研究发现，战骨种子浸种12h后，30℃培养 时发芽率最高，为18％。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种促进战骨种子萌发的方法，其解决战骨种子在自然状态 下萌发慢、萌发率低、出苗不整齐的问题，为大规模人工栽培提供大量的优良种苗，以满 足生产上的需要。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种促进战骨种子萌发的方法， 在培养战骨种子之前将战骨种子用浸种剂浸泡，所述浸种剂中GA3、激动素和萘乙酸的浓 度分别为100-500mg/L、50-200mg/L和10-100mg/L。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，所述浸种剂中GA3、激动素和萘乙酸的 浓度分别为250mg/L、100mg/L和100mg/L。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，用浸种剂浸泡的时间为10-14小时。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，培养战骨种子的方法为：战骨种子放入 温度为28-32℃、湿度为60-80％的恒温培养箱中培养35-45天。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，在用浸种剂浸泡战骨种子之前，还包括：
步骤a、将战骨种子放入质量分数为3％的次氯酸钠溶液中浸泡15-25分钟，然后将战 骨种子放入质量分数为2％的高锰酸钾溶液中浸泡25-35分钟，取出战骨种子用蒸馏水冲 洗3-7次；
步骤b、将步骤a得到的战骨种子放入温度为40-60℃的水中浸泡5-7小时；
步骤c、将步骤b得到的战骨种子放入超声波清洗器中超声处理15-25分钟。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，所述恒温培养箱为12小时光照与12小 时黑暗交替的恒温培养箱。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，所述超声处理过程中的超声波频率为 40kHz。
优选的是，所述的促进战骨种子萌发的方法，在步骤c之后还包括：
步骤d、将步骤c得到的战骨种子放入一个布袋中，然后加入战骨种子重量3倍的河 沙，混合均匀，将布袋封口，揉搓布袋10-15分钟；
步骤e、取100重量份的米糠，加入其重量的15％的水润湿，等量分为四堆，然后向 第一堆米糠中添加0.2-0.3重量份的酵母菌，向第二堆米糠中添加0.3-0.5重量份的乳酸菌， 向第三堆米糠中添加0.2-0.3重量份的放线菌，向第四堆米糠中添加0.5-0.8重量份的芽孢 杆菌，分别发酵5天后，将步骤d得到的战骨种子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三 堆米糠和第四堆米糠中分别埋藏8小时。
本发明至少包括以下有益效果：
(1)采用的浸种剂能够有效解除障碍战骨种子萌发的各种因素，包括种皮障碍和萌 发抑制物等，提高战骨种子吸水能力，最终促进种子萌发，提高种子萌发率。
(2)用温水浸种处理、超声波处理和恒温培养的方法，结合浸种剂又进一步提高了 战骨种子的萌发率和出苗整齐度。
(3)操作简便、成本低、对环境友好，具有较强的实用性和推广价值。
(4)步骤d和步骤e首先用河沙对战骨种子摩擦对战骨种子进行机械刺激，并使战 骨种子表面产生微小的细纹，然后用米糠发酵产生的生物热和发酵产生的酵素来刺激战骨 种子，促进战骨种子的新陈代谢，从而促进战骨种子萌发。微小的细纹还有利于战骨种子 对酵素的吸收。本发明将米糠分为四堆，每堆所用的发酵菌剂各不相同，这样，发酵5天 后，每堆米糠的内部温度不一样，每堆米糠内部生成的有益物质即酵素也不一样，因此将 战骨种子在四堆米糠中各埋藏8小时，这样战骨种子可以接收米糠中各菌种产生的有益物 质，使这些有效物质共同对战骨种子形成良性刺激，充分促进战骨种子萌发。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明 的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字 能够据以实施。
一种促进战骨种子萌发的方法，包括如下步骤
1、浸泡战骨种子之前需要预先处理战骨种子，将成熟的战骨果实，搓去果皮，洗净， 从中挑选饱满、无破损、质地均匀、不携带虫卵的种子备用；将挑选好的种子置于质量百 分数为3％的次氯酸钠溶液中浸泡20min，再置于质量百分数为2％的高锰酸钾溶液浸泡消 毒30min，蒸馏水冲洗5次；将消毒处理过的种子放入40-60℃的温水中浸泡6h；将温水 处理过的种子放入频率为40kHz的超声波清洗器中处理20min。
2、将预处理过的战骨种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另 一份完全浸泡于浸种剂中，浸泡时间为12h，所述浸种剂的有效成分及其配比为：赤霉素 GA3为100-500mg/L，激动素KT为50-200mg/L，萘乙酸NAA为10-100mg/L，其余为水。
3、将空白对照的战骨种子和浸泡后的战骨种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上， 然后将萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子；再将透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中 进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱为12h光照/12h黑暗交替的恒温培养箱，所述 恒温培养箱温度为30℃，所述恒温培养箱湿度为60-80％，培养时间为40d，40d后统计 萌发率。
改变浸种剂中赤霉素、激动素和萘乙酸的含量(实施例1-9)，重复上述步骤1-3，统 计的萌发率结果如表1所示。数据分析发现，浸种剂对战骨种子的萌发具有显著的影响， 其中最佳的浸种剂溶液配比为A2B2C3，即实施例5中的方案：赤霉素GA3250mg/L，激动 素KT100mg/L，萘乙酸NAA100mg/L，该条件下的萌发率高达83％，远高于空白对照的 的萌发率27％。
本发明首次对促进战骨种子萌发进行研究，得到的战骨种子萌发快、萌发率高、出苗 整齐、种苗健壮，同时本发明方法操作简便、成本低、对环境友好，具有较强的实用性和 推广价值，为战骨的规模化种植提供有力的保障。
表1浸种剂有效成分及其配比和对应的萌发率
注：
在第一列中1、2、3分别代表100mg/L、250mg/L、500mg/L；
在第二列中1、2、3分别代表50mg/L、100mg/L、200mg/L；
在第三列中1、2、3分别代表10mg/L、50mg/L、100mg/L；
K1/3为水平1的3次指标值的平均；
K2/3为水平2的3次指标值的平均；
K3/3为水平3的3次指标值的平均；
R表示赤霉素GA3、激动素KT以及萘乙酸NAA在各自取值范围内的极差。
实施例10
一种促进战骨种子萌发的方法，在培养战骨种子之前将战骨种子用浸种剂浸泡，所述 浸种剂中GA3、激动素和萘乙酸的浓度分别为100mg/L、50mg/L和10mg/L。
用浸种剂浸泡的时间为10小时。
培养战骨种子的方法为：战骨种子放入温度为28℃、湿度为60％的恒温培养箱中培 养35天。
在用浸种剂浸泡战骨种子之前，还包括：
步骤a、将战骨种子放入质量分数为3％的次氯酸钠溶液中浸泡15分钟，然后将战骨 种子放入质量分数为2％的高锰酸钾溶液中浸泡25分钟，取出战骨种子用蒸馏水冲洗3次；
步骤b、将步骤a得到的战骨种子放入温度为40℃的水中浸泡5小时；
步骤c、将步骤b得到的战骨种子放入超声波清洗器中超声处理15分钟。
所述恒温培养箱为12小时光照与12小时黑暗交替的恒温培养箱。
所述超声处理过程中的超声波频率为40kHz。
在步骤c之后还包括：
步骤d、将步骤c得到的战骨种子放入一个布袋中，然后加入战骨种子重量3倍的河 沙，混合均匀，将布袋封口，揉搓布袋10分钟；
步骤e、取100重量份的米糠，加入其重量的15％的水润湿，等量分为四堆，然后向 第一堆米糠中添加0.2重量份的酵母菌，向第二堆米糠中添加0.3重量份的乳酸菌，向第 三堆米糠中添加0.2重量份的放线菌，向第四堆米糠中添加0.5重量份的芽孢杆菌，分别 发酵5天后，将步骤d得到的战骨种子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三堆米糠和第 四堆米糠中分别埋藏8小时。
实施例11
一种促进战骨种子萌发的方法，在培养战骨种子之前将战骨种子用浸种剂浸泡，所述 浸种剂中GA3、激动素和萘乙酸的浓度分别为500mg/L、200mg/L和100mg/L。
用浸种剂浸泡的时间为14小时。
培养战骨种子的方法为：战骨种子放入温度为32℃、湿度为80％的恒温培养箱中培 养45天。
在用浸种剂浸泡战骨种子之前，还包括：
步骤a、将战骨种子放入质量分数为3％的次氯酸钠溶液中浸泡25分钟，然后将战骨 种子放入质量分数为2％的高锰酸钾溶液中浸泡35分钟，取出战骨种子用蒸馏水冲洗7次；
步骤b、将步骤a得到的战骨种子放入温度为60℃的水中浸泡7小时；
步骤c、将步骤b得到的战骨种子放入超声波清洗器中超声处理25分钟。
所述恒温培养箱为12小时光照与12小时黑暗交替的恒温培养箱。
所述超声处理过程中的超声波频率为40kHz。
在步骤c之后还包括：
步骤d、将步骤c得到的战骨种子放入一个布袋中，然后加入战骨种子重量3倍的河 沙，混合均匀，将布袋封口，揉搓布袋15分钟；
步骤e、取100重量份的米糠，加入其重量的15％的水润湿，等量分为四堆，然后向 第一堆米糠中添加0.3重量份的酵母菌，向第二堆米糠中添加0.5重量份的乳酸菌，向第 三堆米糠中添加0.3重量份的放线菌，向第四堆米糠中添加0.8重量份的芽孢杆菌，分别 发酵5天后，将步骤d得到的战骨种子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三堆米糠和第 四堆米糠中分别埋藏8小时。
实施例12
一种促进战骨种子萌发的方法，在培养战骨种子之前将战骨种子用浸种剂浸泡，所述 浸种剂中GA3、激动素和萘乙酸的浓度分别为250mg/L、100mg/L和100mg/L。
用浸种剂浸泡的时间为12小时。
培养战骨种子的方法为：战骨种子放入温度为30℃、湿度为70％的恒温培养箱中培 养40天。
在用浸种剂浸泡战骨种子之前，还包括：
步骤a、将战骨种子放入质量分数为3％的次氯酸钠溶液中浸泡20分钟，然后将战骨 种子放入质量分数为2％的高锰酸钾溶液中浸泡30分钟，取出战骨种子用蒸馏水冲洗5次；
步骤b、将步骤a得到的战骨种子放入温度为50℃的水中浸泡6小时；
步骤c、将步骤b得到的战骨种子放入超声波清洗器中超声处理20分钟。
所述恒温培养箱为12小时光照与12小时黑暗交替的恒温培养箱。
所述超声处理过程中的超声波频率为40kHz。
在步骤c之后还包括：
步骤d、将步骤c得到的战骨种子放入一个布袋中，然后加入战骨种子重量3倍的河 沙，混合均匀，将布袋封口，揉搓布袋12分钟；
步骤e、取100重量份的米糠，加入其重量的15％的水润湿，等量分为四堆，然后向 第一堆米糠中添加0.25重量份的酵母菌，向第二堆米糠中添加0.4重量份的乳酸菌，向第 三堆米糠中添加0.25重量份的放线菌，向第四堆米糠中添加0.6重量份的芽孢杆菌，分别 发酵5天后，将步骤d得到的战骨种子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三堆米糠和第 四堆米糠中分别埋藏8小时。
为了说明本发明的效果，发明人还提供比较实验如下：
<比较例1>
在进行步骤c之后，不进行步骤d和步骤e，其余参数与实施例12中的完全相同，工 艺过程也完全相同。
<比较例2>
在进行步骤e时，将战骨种子依次在第一堆米糠、第二堆米糠、第三堆米糠和第四堆 米糠中分别埋藏5小时，其余参数与实施例12中的完全相同，工艺过程也完全相同。
实验方法：将成熟的战骨果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损、质地均匀、 不携带虫卵的种子备用，并将种子分为5份，每份种子的数量相等，将5份种子依次用实 施例10、实施例11、实施例12、比较例1和比较例2中的方案处理，得到萌发率如表2 所示。
[表2实施例10-12和比较例1-2处理战骨种子得到的萌发率]
萌发率(％) 实施例10 95％ 实施例11 96％ 实施例12 97％ 比较例1 84％ 比较例2 89％
从表2可以看出，实施例10-12和比较例1-2中战骨种子的萌发率远高于空白组的27％。 而且，比较例1由于没有进行步骤d和步骤e，战骨种子的萌发率显著低于实施例12中的 情况，比较例2中由于埋藏时间只有5小时，战骨种子的萌发率也显著低于实施例12中 的情况。因此在对战骨种子进行处理的过程中，对战骨种子进行河沙摩擦和米糠埋藏对促 进战骨种子具有极大的作用，而且埋藏时间不应低于8小时。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用， 它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现 另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特 定的细节和这里示出与描述的实施例。