一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法及其低温连续搅拌超滤装置.pdf

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1、(10)授权公告号 CN 102058527 B (45)授权公告日 2012.05.23 CN 102058527 B *CN102058527B* (21)申请号 201010205840.3 (22)申请日 2010.06.22 A61K 9/08(2006.01) A61K 31/255(2006.01) C12P 11/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 31/10(2006.01) (73)专利权人 新疆埃乐欣药业有限公司 地址 830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 高新区河南东路16号创业大厦130。

2、6室 (72)发明人 陈坚 李新霞 (74)专利代理机构 北京中恒高博知识产权代理 有限公司 11249 代理人 夏晏平 WO 97/39115 A1,1997.10.23, 权利要求 1-15， 说明书实施例 1-5. WO 03/004668 A1,2003.01.16, 实施例 1-5. CN 1465283 A,2004.01.07,说明书7-8页及 附图 1. 王伟萍等 .HPLC 法测定蒜酶催化蒜氨酸生成 大蒜辣素的配比及稳定性研究 .新疆医科大学 学报 .2003, 第 26 卷 ( 第 6 期 ),534-536. 王伟萍等 . 蒜酶催化蒜氨酸动力学研 究 .新疆医科大学学报 。

3、.2003, 第 26 卷 ( 第 6 期 ),537-538. 林守峰等 . 蒜氨酸 / 蒜酶二元催化体系配比 研究 .中国药科大学学报 .2010, 第 41 卷 ( 第 3 期 ),231-234. (54) 发明名称 一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制 备方法及其低温连续搅拌超滤装置 (57) 摘要 本发明公开了一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣 素注射液的制备方法及其低温连续搅拌超滤装 置。大蒜辣素注射液的制备方法， 分两步 ： 第一 步， 提取大蒜辣素 ； 第二步， 在洁净环境下， 将步 骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 0-4的溶剂稀 释得到大蒜辣素溶液 ； 将上述大蒜辣素溶液按照 需要。

4、充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣 素注射液， 可用于静脉滴注， 治疗败血症或肿瘤等 疾病。本发明同时公开了一种制备大蒜辣素注射 液的低温连续搅拌超滤装置。 本发明配方合理、 制 备工艺简单克服了现有技术的诸多缺点， 实现了 产物纯度高、 性能稳定的优点。 (51)Int.Cl. (56)对比文件 审查员 崔传明 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利 权利要求书 1 页 说明书 8 页 附图 1 页 1/1 页 2 1. 一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法， 其特征在于， 分两步 ： 第一步， 提取大蒜辣素， 步。

5、骤为 ： (1)、 在充满氩气或高纯氮的容器中加入脱氧纯水和蒜酶， 其中脱氧纯水 ： 蒜酶 =1000 2000ml ： 35. 4g， 充分搅拌使蒜酶充分溶解， 调节水浴温度至 25-35， 控制 pH 值 在 6.5-8.5 范围内 ； (2)、 配制蒜氨酸溶液， 其中蒜氨酸 ： 脱氧纯水 =35.4g ： 500 l000ml， 将蒜氨酸溶液缓 慢滴加入上述容器， 其中蒜氨酸 ： 蒜酶=1mg ： 12 IU， 充分搅拌， 并连续通入氩气或高纯氮 使容器内充满高纯氮或氩气 ； (3)、 滴加完毕后继续搅拌， 反应总时间 20 40 分钟， 得到含大蒜辣素的酶解反应 溶液， 立即用冰水置换。

6、水浴中的温水， 水浴温度降至 0且有过量冰块， 最后利用 1000 5000D 超滤膜除去蒜酶得到大蒜辣素水溶液 ； 第二步， 在洁净生物安全柜环境下， 将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 0-4的溶剂 稀释得到大蒜辣素溶液 ； 将上述大蒜辣素溶液按照需要充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣素注射液。 2. 根据权利要求 l 所述的大蒜辣素注射液的制备方法， 其特征在于， 所述溶剂为脱氧 纯水、 含有抗冻剂乙醇的脱氧纯水、 含有丙二醇的脱氧纯水中的一种。 3. 根据权利要求 l 所述的大蒜辣素注射液的制备方法， 其特征在于， 所述蒜氨酸纯度 大于 90%。 4. 根据权利要求 l 所述的大蒜辣。

7、素注射液的制备方法， 其特征在于， 所述蒜酶活力大 于 l000IU/g。 5. 根据权利要求 l 所述的大蒜辣素注射液的制备方法， 其特征在于， 所述搅拌速度为 60-120rpm。 6. 根据权利要求 l 所述的大蒜辣素注射液的制备方法， 其特征在于， 所述脱氧纯水是 新煮沸放冷的纯水， 底部通入高纯氮或氩气 10L/ 小时， 脱除水中存在的溶解氧。 权 利 要 求 书 CN 102058527 B 2 1/8 页 3 一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法及其低 温连续搅拌超滤装置 技术领域 0001 本发明涉及制药领域， 具体地， 涉及一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制 备方。

8、法及其低温连续搅拌超滤装置。 背景技术 0002 大蒜 (Alliium sativun L.) 及其制剂已列入美国、 欧盟药典。确认蒜氨酸 (Alliin)及大蒜辣素(Allicin)为主要功效成分。 但是目前国内外上市的大蒜制剂蒜氨酸 或大蒜辣素的含量很低。 研发安全、 有效、 质量可控的大蒜高效新制剂成为各国药学家的研 究热点。 0003 1、 蒜氨酸(Alliin)化学名 ： S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜(S-Allyl-L-cysteine)。 熔点 ： 163-165 ( 分解、 炭化 )， D +60o， 白色结粉末， 几乎无臭。 0004 C6H11NO3S 177.22 00。

9、05 依据发明专利 ： 从鲜蒜中制备蒜氨酸的方法 (ZL 001012444) 及从鲜蒜中制备蒜 氨酸的生产工艺 (ZL 031004202) ： 符合药典规定的大蒜， 经脱皮、 纯水洗净， 微波照射 5-10 分钟或沸水煮沸 5-10 分钟使蒜酶灭活。打浆、 纯水或 5-70乙醇提取、 浓缩、 精滤、 离 子交换柱吸附、 氨水洗脱、 浓缩、 喷雾干燥、 重结晶等步骤， 制备蒜氨酸原料药。HPLC 测定含 量 90。 0006 2、 蒜酶 (Alliinase， EC 4.4.1.4) 又名蒜氨酸裂解酶、 烯丙基半胱氨酸亚砜酶 (Alliin lyase， S-allyl-L-cysteine。

10、 sulfoxide lyase)。 属二聚体糖蛋白， 两个亚基分子 量均为 51.5KDa。结晶呈黄色， 无臭， 等电点 pH ： 4.9。 0007 依据发明专利 ： 从鲜蒜中制备蒜酶的生产工艺 (ZL 031004199) ： 在低温车间 (0-3 )， 符合药典规定的大蒜， 经脱皮、 纯水洗净、 胶体磨破壁打浆、 缓冲保护液提取蒜酶， 经 (NH4)2SO4 或 PEG-4000 8000 沉淀蒜酶， 连续式低温管式离心机收集沉淀， 缓冲保护液 复溶。两组超滤装置除去大分子和小分子， 冷冻干燥， 得到蒜酶原料药。以蒜氨酸为底物， 经 HPLC 测定， 蒜酶活力 1000IU/g。 00。

11、08 3、大 蒜 辣 素 (Alliicin) 化 学 名 ：二 烯 丙 基 硫 代 亚 磺 酸 酯 (2-propene-1-sulfinothioic acid S-2-propenyl ester)。常温下为淡黄色易挥发粘稠 液体， 有浓烈气味。密度 ： 1.112g/cm3。熔点 ： 25 ( 分解 )， 微溶于水。在空气中数小时即 分解变质。 0009 说 明 书 CN 102058527 B 3 2/8 页 4 0010 2C6H11NO3S 2177.2 354.4 C6H10OS2 162.3 0011 两分子蒜氨酸被蒜酶催化裂解生成一分子大蒜辣素。即 354.4 克蒜氨酸 (。

12、2C6H11NO3S 2177.2 354) 可生成大蒜辣素 162.3 克 (C6H10OS2 162)。加入蒜 氨酸纯度 “C” 及反应系数 (0.9)。得到以下关系式 ： 0012 发明内容 0013 本发明的目的在于， 针对上述问题， 提出一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液 的制备方法， 以实现配方合理、 制备简单、 纯度高、 性能稳定的优点。 0014 为实现上述目的， 本发明采用的技术方案是 ： 0015 一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的制备方法， 分两步 ： 0016 第一步， 提取大蒜辣素， 步骤为 ： 0017 (1)、 在充满氩气或高纯氮的容器中加入脱氧纯水和蒜酶， 其。

13、中脱氧纯水蒜酶 1000 2000ml 35.4g， 此比例可按照产量和浓度的不同要求， 加以扩大或缩小。充分搅 拌使蒜酶充分溶解， 调节水浴温度至 25-35， 控制 pH 值在 6.5-8.5 范围内 ； 0018 (2)、 配制蒜氨酸溶液， 其中蒜氨酸脱氧纯水 35.4 500 1000ml， 将蒜氨酸 溶液缓慢滴加入上述容器， 其中蒜氨酸蒜酶1mg12IU， 充分搅拌， 并连续通入氩气 或高纯氮使容器内充满高纯氮或氩气 ； 0019 (3)、 滴加完毕后继续搅拌， 反应总时间 20 40 分钟。得到含大蒜辣素等成分的 酶解反应溶液， 立即用冰水置换水浴中的温水， 水浴温度降至0(有过量。

14、冰块)， 最后利用 1000 5000D 超滤膜除去蒜酶得到大蒜辣素水溶液。 0020 第二步， 在洁净生物安全柜(无菌)环境下， 将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 0-4的溶剂稀释得到大蒜辣素溶液 ； 0021 将上述大蒜辣素溶液按照需要充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣素注 射液， 用于静脉滴注， 治疗败血症或肿瘤等疾病。 0022 所述大蒜辣素浓度为 ： 1.0mg/ml、 2.0mg/ml、 2.5mg/ml、 5.0mg/ml ； 规格 ： 1ml/Amp、 2ml/Amp、 5ml/Amp 及 10ml/Amp。棕色盒装， 0 -20保存， 保存期 6-12 个月。 0023 。

15、进一步地， 所述溶剂为脱氧纯水、 含有抗冻剂乙醇的脱氧纯水、 含有丙二醇的脱氧 纯水中的一种。 0024 进一步地， 所述蒜氨酸纯度大于 90。 说 明 书 CN 102058527 B 4 3/8 页 5 0025 进一步地， 所述蒜酶活力大于 1000IU/g。 0026 进一步地， 所述搅拌速度为 60 120rpm。 0027 进一步地， 所述脱氧纯水是新煮沸放冷的纯水， 底部通入高纯氮或氩气 1 小时 /10L， 脱除水中存在的溶解氧。 0028 本发明的另一目的， 是提供一种抗肿瘤及抗感染的大蒜辣素注射液的低温连续搅 拌超滤装置， 包括设置有保温罩的广口容器和制冷平台， 所述广口容。

16、器放置在制冷平台上， 所述广口容器的横截面通过超滤膜将容器分为上下两部分， 所述广口容器上部设置有搅拌 装置， 并设置有一进气口， 所述高纯氮或氩气由此口进入 ； 所述广口容器下部配套设置有取 液装置， 可将除蒜酶后的大蒜辣素水溶液抽出。 0029 药效学试验数据 0030 将利用本发明方法制备的大蒜辣素注射液应用在临床上进行药效学试验 ： 将 5.0mg/ml 大蒜辣素注射液送上海美迪西生物医药公司及南京医科大学第一临床医学院进 行抗肿瘤及抗病原微生物实验， 实验效果明显， 大蒜辣素注射液对多种致病微生物及肿瘤 有效。为新药注册及临床试验准备了试验样本和条件。具体实验数据如下 ： 0031 。

17、一、 上海美迪西生物医药公司抗肿瘤实验 0032 表一 IC50计算结果 0033 结果显示， Taxol 对多种细胞的半数抑制浓度在 10nM 左右或 10nM 以下， 根据 抗肿瘤药效学指导原则的标准 ( 植物提取纯品的 IC50 10g/ml 或植物粗提物的 IC50 20g/ml)， 反映其在体外对这几种细胞有显著的杀伤作用。大蒜辣素对 13 株肿瘤细胞 的半数抑制浓度基本在 10g/ml 以下， 说明大蒜辣素在体外对这 13 株肿瘤细胞有杀伤作 用。 0034 二、 南京医科大学第一临床医学院抗病原微生物实验 0035 通过一些列实验， 结果显示 ： 大蒜辣素对耐甲氧西林的金黄色葡萄。

18、球菌 (MRSA)、 不动杆菌、 大肠埃希菌、 幽门螺杆菌和白色假丝酵母菌 ( 白念 ) 等具有明显的杀菌活性， 其 中以 MRSA 和幽门螺杆菌最为敏感。其 MIC 值约在 10 30mg/L ； 其次白念对大蒜辣素的敏 感性亦较高。大蒜辣素有望替代万古霉素成为治疗 MRSA 感染的重要药物 ； 大蒜辣素或可 用于治疗幽门螺杆菌引起的胃炎和胃溃疡 ； 大蒜辣素亦可作为酵母样真菌感染的治疗药物 ( 内服或外用 )。 说 明 书 CN 102058527 B 5 4/8 页 6 0036 0037 有益效果 0038 本发明通过使用在国内外未见报道的惰性气体保护及封闭式隔绝空气条件下发 说 明 。

19、书 CN 102058527 B 6 5/8 页 7 生蒜酶催化裂解蒜氨酸产生大蒜辣素的反应 ； 首创冰水浴超滤除蒜酶技术。该技术和方法 减少了大蒜辣素的分解， 产率90。 仪器和设备设置在生物无菌柜中无菌操作(洁净度 ： 100 级 )。 0039 HPLC 测定大蒜辣素含量后配制成大蒜辣素注射液。采用安瓿充氩气或高纯氮灌 封。 规格 ： 1.010.0mg/ml1.0ml ； 1.010.0mg/ml2.0ml ； 1.010.0mg/ml5.0ml ； 1.0 10.0mg/ml10.0ml。0 4避光处保存 6 个月， 含量无明显改变。加入 20乙醇 及 / 或丙二醇抗冻剂， -10避。

20、光处保存 24 个月， 含量无明显改变。 0040 本发明涉及酶催化动力学、 超滤等新技术研发新药。以鲜蒜中提取的蒜氨酸及蒜 酶为原料， 在生物安全柜中的特殊装置中， 以氩气(惰性气体)保护， 蒜酶催化裂解蒜氨酸， 生成大蒜辣素。 反应液经低温搅拌， 超滤膜除去蒜酶。 HPLC测定大蒜辣素含量， 用脱氧注射 用水或乙醇、 丙二醇等特殊溶媒定量稀释。安瓿充氮灌封制成注射液。大蒜辣素注射液经 药效学试验， 证明对多种致病性微生物及肿瘤有效。为新药注册及临床试验准备了试验样 本和条件。 附图说明 0041 附图用来提供对本发明的进一步理解， 并且构成说明书的一部分， 与本发明的实 施例一起用于解释本。

21、发明， 并不构成对本发明的限制。在附图中 ： 0042 图 1 为本发明的蒜酶催化裂解蒜氨酸产生大蒜辣素装置示意图 ； 0043 图 2 为本发明的低温连续搅拌超滤装置示意图 ； 0044 图 3 为本发明 5.0mg/ml 大蒜辣素注射液 HPLC 色谱图。 0045 结合附图， 本发明实施例中附图标记如下 ： 0046 A- 三口瓶 ； P- 取液泵 ； M- 封闭式搅拌器 ； I- 水浴 ； G- 进气口 ； R- 生物安全柜 (100 级洁净、 无菌 ) ； C- 保温罩 ； H- 超滤膜 ； S- 搅拌器 ； T- 制冷平台。 具体实施方式 0047 以下结合附图对本发明的优选实施例。

22、进行说明， 应当理解， 此处所描述的优选实 施例仅用于说明和解释本发明， 并不用于限定本发明。 0048 实施例一 0049 图 1-3 为本发明的实施例示意图， 大蒜辣素注射液的制备方法如下 ： 0050 (1)、 5000ml硬质三口瓶A中， 加脱氧纯水约10002000ml， 投入蒜酶35.4g， 搅拌 (M， 60rpm) 使溶解。调节水浴 I 温度至 25-35， 检查确认 pH 值为 6.5-8.5。 0051 (2)、 在封闭式刻度分液漏斗中置脱氧纯水约 500 1000ml ml， 加入规定量蒜氨 酸 35.4g， 轻摇溶解。高纯氮或氩气充满三口瓶 G 空间。 0052 (3)。

23、、 不断搅拌 (M， 60rpm) 下， 蒜氨酸溶液由封闭式刻度分液漏斗经 B 口进入三口 瓶 A， 速度约 50ml/min。滴加完毕后继续搅拌 10min， 反应总时间约 30 分钟。得到含大蒜辣 素等成分的酶解反应溶液。立即用冰水置换水浴 I 中的温水， 水浴温度降至 0。装置见图 1。 0053 酶解反应的条件为 ： 反应器温度 25-35， 水相 pH 6.5-8.5。反应时间约 30 分 钟。保持大蒜辣素的化学形治稳定， 是成功的关键。本专利采用惰性气体保护， 隔绝空气的 说 明 书 CN 102058527 B 7 6/8 页 8 方法、 反应结束 ( 从滴加蒜氨酸开始 30 分。

24、钟 ) 立即降至低温 (0 )。 0054 低温搅拌超滤装置 ( 图 2) 安装在生物安全柜中。取液泵 P 吸出反应溶液 W， 转移 至超滤装置。的耐压瓶中。调节制冷机平台 T 温度至 -2。套上保温罩 C。启动搅拌器 S， 高纯高压氮气钢瓶与进气口 G 连接。在规定压力下， 溶液通过分子量为 5000 的超滤膜 H 除 去蒜酶等大分子， 得到除酶大蒜辣素溶液 A 约 1500 3000ml。 0055 在洁净生物安全柜中， 吸取除蒜酶后的大蒜辣素水溶液 A 适量， HPLC 测定大蒜辣 素含量。加预冷 (0 ) 的脱氧纯水 ( 或加适量抗冻剂乙醇或丙二醇的脱氧纯水 ) 稀释并 得到 10.0。

25、mg/ml 大蒜辣素溶液约 1500ml。或得到 5.0mg/ml 大蒜辣素溶液约 3000mg。HPLC 再次测定含量， 应为表示量的 98 -102。 0056 实施例二 0057 大蒜辣素注射液的制备方法如下 ： 0058 (1)、 在容器中加入脱氧纯水和蒜酶， 其中脱氧纯水蒜酶 1000ml 35.4g， 充 分搅拌使蒜酶充分溶解， 所述搅拌速度为 60rpm， 调节水浴温度至 25， 控制 pH 值在 6.5 范 围内， 蒜酶活力大于 1000IU/g ； 所述脱氧纯水是新煮沸放冷的纯水， 底部通入高纯氮或氩 气 1 小时 /10L， 脱除水中存在的溶解氧。 0059 (2)、 配制。

26、蒜氨酸溶液， 其中蒜氨酸脱氧纯水 35.4 500ml 的， 将蒜氨酸溶液 缓慢滴加入上述容器， 其中蒜氨酸蒜酶 1mg 1IU， 充分搅拌， 所述搅拌速度为 60rpm， 并连续通入氩气或高纯氮使容器内充满高纯氮或氩气 ； ， 述蒜氨酸纯度大于 90 ； 0060 (3)、 滴加完毕后继续搅拌， 反应总时间 20 分钟。得到含大蒜辣素等成分的酶解反 应溶液， 立即用冰水置换水浴中的温水， 水浴温度降至 0， 最后利用 1000D 超滤膜除去蒜 酶得到大蒜辣素水溶液。 0061 第二步， 在洁净环境下， 将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 0的溶剂稀释得到 大蒜辣素溶液 ； 溶剂为脱氧纯水、 含。

27、有抗冻剂乙醇的脱氧纯水和含有丙二醇的脱氧纯水中 的一种。 0062 将上述大蒜辣素溶液按照需要充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣素注 射液， 用于静脉滴注， 治疗败血症或肿瘤等疾病。 0063 所述大蒜辣素浓度为 ： 1.0mg/ml ； 规格 ： 1ml/Amp。棕色盒装， 0 -20保存， 保存 期 6-12 个月。 0064 大蒜辣素注射液的低温连续搅拌超滤装置， 包括设置有保温罩的广口容器和制冷 平台， 广口容器放置在制冷平台上， 广口容器的横截面通过超滤膜将容器分为上下两部分， 广口容器上部设置有搅拌装置， 并设置有一进气口， 所述高纯氮或氩气由此口进入 ； 广口容 器下部配套设。

28、置有取液装置， 可将除蒜酶后的大蒜辣素水溶液抽出。 0065 实施例三 0066 (1)、 在容器中加入脱氧纯水和蒜酶， 其中脱氧纯水蒜酶 2000ml 35.4g， 充 分搅拌使蒜酶充分溶解， 所述搅拌速度为 120rpm， 调节水浴温度至 35， 控制 pH 值在 8.5 范围内， 蒜酶活力大于 1000IU/g ； 所述脱氧纯水是新煮沸放冷的纯水， 底部通入高纯氮或 氩气 1 小时 /10L， 脱除水中存在的溶解氧。 0067 (2)、 配制蒜氨酸溶液， 其中蒜氨酸脱氧纯水35.41000ml的， 将蒜氨酸溶液 缓慢滴加入上述容器， 其中蒜氨酸蒜酶 1mg 2IU， 充分搅拌， 所述搅拌。

29、速度为 60rpm， 说 明 书 CN 102058527 B 8 7/8 页 9 并连续通入氩气或高纯氮使容器内充满高纯氮或氩气 ； ， 述蒜氨酸纯度大于 90 ； 0068 (3)、 滴加完毕后继续搅拌， 反应总时间 40 分钟。得到含大蒜辣素等成分的酶解反 应溶液， 立即用冰水置换水浴中的温水， 水浴温度降至 4， 最后利用 5000D 超滤膜除去蒜 酶得到大蒜辣素水溶液。 0069 第二步， 在洁净环境下， 将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 4的溶剂稀释得到 大蒜辣素溶液 ； 溶剂为脱氧纯水、 含有抗冻剂乙醇的脱氧纯水和含有丙二醇的脱氧纯水中 的一种。 0070 将上述大蒜辣素溶液按照。

30、需要充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣素注 射液， 用于静脉滴注， 治疗败血症或肿瘤等疾病。 0071 所述大蒜辣素浓度为 ： 2.0mg/ml ； 规格 ： 2ml/Amp。棕色盒装， 0 -20保存， 保存 期 6-12 个月。 0072 大蒜辣素注射液的低温连续搅拌超滤装置， 包括设置有保温罩的广口容器和制冷 平台， 广口容器放置在制冷平台上， 广口容器的横截面通过超滤膜将容器分为上下两部分， 广口容器上部设置有搅拌装置， 并设置有一进气口， 所述高纯氮或氩气由此口进入 ； 广口容 器下部配套设置有取液装置， 可将除蒜酶后的大蒜辣素水溶液抽出。 0073 实施例四 0074 (1)、。

31、 在容器中加入脱氧纯水和蒜酶， 其中脱氧纯水蒜酶 1500ml 35.4g， 充 分搅拌使蒜酶充分溶解， 所述搅拌速度为 60rpm， 调节水浴温度至 35， 控制 pH 值在 8.5 范 围内， 蒜酶活力大于 1000IU/g ； 所述脱氧纯水是新煮沸放冷的纯水， 底部通入高纯氮或氩 气 1 小时 /10L， 脱除水中存在的溶解氧。 0075 (2)、 配制蒜氨酸溶液， 其中蒜氨酸脱氧纯水 35.4 800ml 的， 将蒜氨酸溶 液缓慢滴加入上述容器， 其中蒜氨酸蒜酶 1mg 1.5IU， 充分搅拌， 所述搅拌速度为 60rpm， 并连续通入氩气或高纯氮使容器内充满高纯氮或氩气 ； ， 述蒜。

32、氨酸纯度大于 90 ； 0076 (3)、 滴加完毕后继续搅拌， 反应总时间 30 分钟。得到含大蒜辣素等成分的酶解反 应溶液， 立即用冰水置换水浴中的温水， 水浴温度降至 2， 最后利用 5000D 超滤膜除去蒜 酶得到大蒜辣素水溶液。 0077 第二步， 在洁净环境下， 将步骤一中提取的大蒜辣素用预冷至 2的溶剂稀释得到 大蒜辣素溶液 ； 溶剂为脱氧纯水、 含有抗冻剂乙醇的脱氧纯水和含有丙二醇的脱氧纯水中 的一种。 0078 将上述大蒜辣素溶液按照需要充氮或充氩气安瓿灌封成不同规格的大蒜辣素注 射液， 用于静脉滴注， 治疗败血症或肿瘤等疾病。 0079 所述大蒜辣素浓度为 ： 2.5mg/。

33、ml ； 规格 ： 5ml/Amp。棕色盒装， 0 -20保存， 保存 期 6-12 个月。 0080 大蒜辣素注射液的低温连续搅拌超滤装置， 包括设置有保温罩的广口容器和制冷 平台， 广口容器放置在制冷平台上， 广口容器的横截面通过超滤膜将容器分为上下两部分， 广口容器上部设置有搅拌装置， 并设置有一进气口， 所述高纯氮或氩气由此口进入 ； 广口容 器下部配套设置有取液装置， 可将除蒜酶后的大蒜辣素水溶液抽出。 0081 最后应说明的是 ： 以上所述仅为本发明的优选实施例而已， 并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明， 对于本领域的技术人员来说， 其依然可 说 明 书 CN 102058527 B 9 8/8 页 10 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改， 或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内， 所作的任何修改、 等同替换、 改进等， 均应包含在本发明的 保护范围之内。 说 明 书 CN 102058527 B 10 1/1 页 11 图 1 图 2 图 3 说 明 书 附 图 CN 102058527 B 11 。