蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂及其使用方法
发明领域
本发明涉及蛋白酪氨酸磷酸酶抑制的领域。
发明背景
本发明涉及一类新颖的膦酸衍生物，它们是PTP-1B的抑制剂。
可逆性蛋白酪氨酸磷酸化是调节很多细胞活动的关键机理，它受 到蛋白酪氨酸激酶(PTK)和蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)作用的协调，PTK 磷酸化多肽中的某些酪氨酸残基，PTP脱磷酸化某些磷酸酪氨酸残基。 越来越明显的是，PTP和PTK的多样性和复杂性是相当的，并且PTP 在递送正性与负性信号供细胞机构发挥正常功能中是同等重要的。受 调节的酪氨酸磷酸化与生物信号转导的特有途径有关，包括与细胞分 裂、细胞存活、细胞程序死亡、增殖和分化有关的那些。这些途径的 缺陷和/或障碍可能成为某些疾病病症的基础，对于它们的有效干预手 段仍然难以确定，例如包括恶性肿瘤、自体免疫疾患、糖尿病、肥胖 和感染。
蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)家族的酶在脊椎动物中由100种以上结 构上不同的蛋白质组成，包括具有公共的保守型250个氨基酸的PTP 催化性结构域的人PTP，但是在其非催化性节段中显示可观的变化 (Charbonneau et al.，1992 Annu.Rev.Cell Biol.8：463-493；Tonks， 1993 Semin.Cell Biol.4：373-453；Andersen et al.，(2001 Mol. Cell Biol.21：7117-36)。这种结构多样性假定反映了个别PTP家族 成员的生理角色的多样性，这在某些情况下已被证明在生长、发育和 分化中具有特定功能(Desai et al.，1996 Cell 84：599-609； Kishihara et al.，1993 Cell 74：143-156；Perkins et al.，1992 Cell 70：225-236；Pingel et al.，1989 Cell 58：1055-1065；Schultz et al.，1993 Cell 73：1445-1454)。PTP家族包括受体样和非跨膜酶， 它们表现敏锐的体内底物特异性，并且牵涉调节多种细胞信号传导途 径(Andersen et al.，2001 Mol.Cell.Biol.21：7117；Tonks et al.， 2001 Curr.Opin.Cell Biol.13：182)。PTP因而参与多种生理功能， 通过PTP活性的改变(也就是统计学上显著的增加或降低)或者调控 (也就是上调或下调)提供一些治疗性干预生理过程的机会。
尽管最近的研究已经形成可观的关于PTP结构、表达和调节的信 息，不过PTP发挥它们的效应所通过的很多酪氨酸磷酸化底物的属性 仍然有待确定。利用有限数量的合成磷酸肽底物所进行的研究已经证 明不同PTP的底物选择性上的一些差异(Cho et al.，1993 Protein Sci.2：977-984；Dechert et al.，1995 Eur.J.Biochem. 231：673-681)。PTP-介导的PTP底物脱磷酸化的分析提示，某些氨基 酸残基在底物多肽中相对于磷酸化酪氨酸残基的特定位置处的存在可 能有利于催化活性(Salmeen et al.，2000molecular Cell 6：1401； Myers et al.，2001 J.Biol.Chem.276：47771；Myers et al.，1997 Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：9052；Ruzzene et al.，1993 Eur. J.Biochem.211：289-295；Zhang et al.，1994 Biochemistry 33：2285-2290)。因而，尽管用在这些研究中的底物的生理相关性尚不 清楚，不过PTP显示一定水平的体外底物选择性。
PTP家族激酶含有大约250个氨基酸的公共进化性保守型节段， 被称为PTP催化性结构域。在这种保守型结构域内是独特的标志性序 列基序(motif)CX5R，它在所有PTP之中都是不变的。在大多数PTP 中，发现有含有该标志性序列基序的11个氨基酸保守型序列 ([I/V]HCXAGXXR[S/T)G(SEQ ID NO：1))。这种基序中的半胱氨酸残 基在该家族成员中是不变的，并且是催化磷酸酪氨酸脱磷酸化反应所 必需的。它充当亲核试剂的功能，攻击存在于进入底物磷酸酪氨酸残 基上的磷酸片段。众所周知，如果半胱氨酸残基被位点-定向性诱变作 用改变为丝氨酸(例如在从半胱氨酸到丝氨酸或“CS”突变体中)或 者丙氨酸(例如从半胱氨酸到丙氨酸或“CA”突变体)，所得PTP有 催化上的缺陷，但是至少在体外保留与其底物络合或结合的能力。
有一种非跨膜PTP、即PTP1B识别若干酪氨酸-磷酸化蛋白质作为 底物，其中很多牵涉在人类疾病中。例如，治疗性抑制胰岛素信号传 导途径中的PTP1B可能起到增进胰岛素作用的作用，从而改善II型糖 尿病患者中普遍存在的胰岛素抵抗状态。PTP1B充当由若干生长因子/ 激素受体PTK引发的信号传导的负性调节剂，包括p210 Bcr-Abl (LaMontagne et al.，1998 Mol.Cell.Biol.18：2965-75； LaMontagne et al.，1998 Proc.Natl.Acad.Sci.USA 95：14094-99)， 受体酪氨酸激酶，例如EGF受体、PDGF受体和胰岛素受体(IR)(Tonks et al.，2001 Curr.Opin.Cell Biol.13：182-95)，和JAK家族成 员，例如Jak2和其他(Myers et al.，2001 J.Biol.Chem. 276：47771-74)，以及由细胞因子诱导的信号传导事件(Tonks et al.， 2001)。PTP1B的活性受到若干氨基酸残基修饰作用的调节，例如Ser 残基的磷酸化(Brautigan et al.，1993；Dadke et al.，2001；Flint et al.，1993)，和活性Cys残基在其催化性基序中的氧化(Lee et al.， 1998；Meng et al.，2002)，它在蛋白酪氨酸磷酸酶之中是进化性保 守型的，并且是双重磷酸酶家族成员(Andersen et al.，2001)。另外， 已经在若干人类疾病中注意到PTP1B表达水平的变化，特别是与正常 酪氨酸磷酸化模式的破坏有关的那些。
糖尿病是一种常见的变性性疾病，影响发达国家人口的5-10％， 在很多国家中可能是五种主要死亡原因之一。世界人口的大约2％患有 糖尿病，压倒多数的病例(＞90％)是2型糖尿病，其余是1型。在经常 在儿童或青年人中确诊的1型糖尿病中，胰岛β细胞产生胰岛素被破 坏。2型糖尿病或者“晚期发生”或“成人发生”的糖尿病是一种复 杂的代谢疾患，其中细胞和组织不能有效地使用可利用的胰岛素；在 有些情况下胰岛素的产生也是不充分的。在细胞水平上，可能是晚期 发生糖尿病特征的变性表型例如包括胰岛素分泌减低和胰岛素敏感性 降低，也就是对胰岛素的响应减低。
研究已经显示，糖尿病可能先于或者与某些相关疾患有关。例如， 据估计在美国有四千万人患有晚期发生的葡萄糖耐量减低(IGT)。IGT 患者不能响应于葡萄糖，并伴有胰岛素分泌增加。每年有少量(5-10％) IGT个体进展为胰岛素缺陷型非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)。这些个 体中有些进一步进展为胰岛素依赖性糖尿病(IDDM)。NIDDM和IDDM与 胰腺β细胞释放胰岛素降低和/或正常表现胰岛素敏感性的细胞和组 织对胰岛素响应性降低有关。糖尿病和先于或者与糖尿病有关的病症 的其他症状包括肥胖、血管病变和各种神经病，包括失明和失聪。
1型糖尿病用终身胰岛素疗法治疗，它经常与不需要的副作用有 关，例如增重和低血糖的危险增加。目前2型糖尿病(NIDDM)的疗法包 括改变饮食、锻炼疗法和采用注射胰岛素或口服被设计成降低血液葡 萄糖水平的成分的药理干预。这类当前可利用的口服成分的实例包括 磺酰脲类、双胍类、噻唑烷二酮类、瑞格列奈和阿卡波糖，它们都改 变胰岛素和/或葡萄糖水平。不过，目前的药理疗法没有一个控制疾病 的完整过程，任何目前的疗法也都没有纠正2型NIDDM中的所有生理 异常，例如胰岛素分泌减低、胰岛素抵抗和过量肝葡萄糖输出。另外， 治疗失败是这些药物普遍的，以致经常需要多药疗法。
在某些代谢疾病或疾患中，一种或多种可能是同化或异化的生化 过程(分别例如物质的增益或瓦解)被改变(例如以统计学上显著的 方式增加或降低)或者调控(例如上调或下调至统计学上显著的程度)， 相对于它们在无疾病或正常个体中发生的水平而言，例如适当的对照 个体。改变可能来自任意牵涉在特定过程中的生化反应中底物、酶、 辅因子或任意其他组分的增加或降低。改变了的(也就是相对于正常 状态以统计学上显著的方式增加或降低了的)PTP活性能够成为某些 疾患的基础，并提示了PTP在某些代谢疾病中的角色。
例如，相对于具有至少一种功能性PTP1B基因的对照动物而言， 剔除小鼠模型中鼠PTP1B基因同系物的破坏导致PTP1B-/-小鼠表现胰 岛素敏感性增强、循环胰岛素与葡萄糖水平降低和即使在高脂饮食下 对增重的抵抗(Elchebly et al.，Science 283：1544(1999))。也 已经在PTP1B缺陷型小鼠的某些组织中检测到胰岛素受体过度磷酸 化，与PTP1B对胰岛素和葡萄糖代谢的生理调节的贡献相一致(Id.)。 PTP1B-缺陷型小鼠表现肥胖性降低(减少脂肪细胞质量而非脂肪细胞 数量)、基础代谢率与能量支出增加和胰岛素-刺激的葡萄糖利用增强 (Klaman et al.，2000 Mol.Cell.Biol.20：5479)。另外，改变了 的PTP活性已经与其他生物系统中的葡萄糖代谢减低有关联(例如 McGuire et al.，1991 Diabetes 40：939；Myerovitch et al.，1989 J.Clin.Invest.84：976；Sredy et al.，1995 Metabolism 44：1074)， 包括PTP经由胰岛素受体牵涉在生物信号转导中(例如参见WO 99/46268和其中引用的参考文献)。
综合结晶学、动力学与PTP1B-肽结合测定法阐述了PTP1B与胰岛 素受体(IR)的相互作用(Salmeen et al.，2000 Mol.Cell 6：1401-12)。胰岛素受体(IR)包含两种细胞外α亚单位和两种跨膜β 亚单位。受体的活化导致两个β亚单位中酪氨酸残基的自主磷酸化， 它们每种含有蛋白激酶结构域。在PTP1B与胰岛素受体激酶(IRK)之间 形成的广泛相互作用涵盖IRK的串联pTyr残基1162和1163，以致 pTyr-1162位于PTP1B的活性位点中(id.)。 Asp/Glu-pTyr-pTyr-Arg/Lys基序已经在PTP1B对IRK的最佳识别中 有牵连。这种基序也存在于其他受体PTK，包括Trk、FGFR和Axl。另 外，在PTK的JAK家族中发现了这种基序，该家族的成员传送来自细 胞因子受体的信号，包括经典的细胞因子受体，其被饱满感激素苗条 蛋白所识别(Touw et al.，2000 Mol.Cell.Endocrinol.160：1-9)。
已经在若干人类疾病中观察到PTP1B表达水平的变化，特别是在 与正常酪氨酸磷酸化模式的破坏有关的疾病中。例如，PTP1B的表达 受到p210 Bcr-Ab1致癌蛋白的特异性诱导，后者是直接负责慢性骨髓 性白血病(CML)的初始表现的PTK(LaMontagne et al.，1998 Mol. Cell.Biol.18：2965-75；LaMontagne et al.，1998 Proc.Natl.Acad. Sci.USA 95：14094-99)。PTP1B响应于这种致癌蛋白的表达在部分程 度上受到转录因子Sp1、Sp3和Egr-1的调节(Fukada et al.，2001 J. Biol.Chem.276：25512-19)。已经显示这些转录因子与人PTP1B启 动子中位于从转录起始位点计-49至-37碱基对的p210 Bcr-Ab1响应 序列(PRS)结合，但是似乎不介导某些附加的既未限定转录因子也未限 定转录因子识别元件的独立性PTP1B转录事件。
另一种蛋白酪氨酸磷酸酶、即T-细胞蛋白酪氨酸磷酸酶或TCPTP 脱磷酸化JAK1和JAK3。TCPTP似乎在免疫内环境稳定的调节中扮演角 色。也已知TCPTP脱磷酸化EGF受体和适配蛋白p52shc。TCPTP也可 能在某些T-细胞恶性肿瘤中扮演角色(例如参见Simoncic et al.， 2002 Curr.Biol.Mar 19；12(6)：446-45；Heinonen et al.，2004 Blood，103：3457-3464；You-Ten et al.，1997 J.Exp.Med.， 186：683-693)。TCPTP还可能在胰岛素-信号传导中扮演角色(参见 Tonks et al.，2004 JBC，279：37716；and 2003 Mol.Cell Biol. 23：2096)。
因此，目前所需要的生物信号转导的治疗性调节目标包括PTP1B- 介导的细胞事件的调控，尤其包括PTP1B-结合性分子、底物与结合性 配偶体之间相互作用或者其他调节PTP1B活性的成分的抑制或强化。 因此，本领域需要提高干预磷酸酪氨酸信号传导调节的能力，包括通 过改变PTP1B催化活性、PTP1B与PTP1B底物分子结合和/或PTP1B- 编码基因表达来调节PTP1B。增加调节PTP1B的能力可以有利于开发 调控在磷酸酪氨酸信号传导途径中牵涉的蛋白质活性的方法和治疗与 这类途径有关的病症的方法。本发明满足了这些需要，并且进一步提 供其他相关的优势。
发明概述
本发明提供式(I)或式(II)化合物：
其中：
X1是连接基团或者不存在；
X2是H、不存在或者连接基团，优选地选自任选被取代的直链或 支链脂族基，优选地包含1至8个碳，任选地含有1条或多条双键或 叁键，其中一个或多个碳任选地被R*代替，其中R*是任选被取代的环 烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR11-、 -C(O)NR11NR12-、-C(O)O-、-OC(O)-、-NR11CO2-、-O-、-NR11C(O)NR12-、 -OC(O)NR11-、-NR11NR12-、-NR11C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR11-、-SO2NR11- 或-NR11SO2-，其中R11和R12独立地选自H和任选被取代的脂族基、环 烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；或者X2是任选被取代的环烷基、杂 环烷基、芳基或杂芳基；-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR11-、 -C(O)NR11NR12-、-C(O)O-、-OC(O)-、-NR11CO2-、-O-、-NR11C(O)NR12-、 -OC(O)NR11-、-NR11NR12-、-NR11C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR11-、-SO2NR11- 或-NR11SO2-；其条件是当X1是-NH-时，X2不是-CH2C(O)-或取代的 -CH2C(O)-；
R1是H或者任选被取代的C1-8脂族基、环烷基、杂环烷基、芳基 或杂芳基；
R2是H或者任选被取代的C1-8脂族基、环烷基、杂环烷基、芳基 或杂芳基；或者R2不存在，此时X2是H；
R3和R4独立地是H、烷基或C5-6芳基；
R5和R6独立地是H或卤代基；
R7和R8独立地是H、-OR23或-NHR23；或者任选被取代的脂族基、环 烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；或者一起构成任选被取代的包含3 至7个碳或杂原子的环；
R9是H或C1-3烷基；
R10是H或C1-3烷基；或者R8和R10一起构成任选被取代的包含3 至7个碳或杂原子的环；
每个Rm独立地是H、卤代基、-OH、-NO2、-CN；任选被取代的C1-3烷基；-OR23、-C(O)R23、-C(O)OR23、-C(O)N(R23)(R24)、-OC(O)R23、 -OC(O)OR23、-OC(O)N(R23)(R24)、-N(R23)(R24)、-S(O)2R23、-S(O)R23、-SR23、 -S(O)2N(R23)(R24)；NR23C(O)R24、-NR23C(O)OR24、-NR23SOOR24、 -NR23C(O)N(R24)(R25)或-NR23SO2N(R24)(R25)；其中R23、R24和R25各自独立 地是H、C1-4烷基或者任选被取代的3至8元环烷基、杂环烷基、芳基 或杂芳基；或者两个相邻的Rm基团一起构成任选被取代的包含5至7 个碳或杂原子的芳族或非芳族环；其中n是0、1、2、3或4；或者Rm和R7一起构成任选被取代的芳族或非芳族环；
其中苯基环A碳原子2-6中的每一个任选地被N代替；或者相邻 的苯基环A碳原子2-6中的任意一对任选地被S、N或O代替；其条 件是不为苯基环A碳原子被所代替的膦酸酯基团取代的情形；和
其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
在本发明中也包括式II化合物(IIa-IIe)：
(IIa)
其中：
Ra和Rb独立地是H或卤素；
R26、R27、R29和R30各自独立地是H、卤代基、-OH、-NO2、-CN、-CF3、 -CHF2、-CH2CH3、-CH2CF3、-CF2CF3、-CH2Cl、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、 -CH2CH2NH2、-CH2SO2CH3、-OR23、-C(O)R23、-C(O)OR23、-C(O)N(R23)(R24)、 -OC(O)R23、-OC(O)OR23、-OC(O)N(R23)(R24)、-N(R23)(R24)、-S(O)2R23、 -S(O)R23、-SR23、-S(O)2N(R23)(R24)、-NR23C(O)R24、-NR23C(O)OR24、 -NR23SOOR24、-NR23C(O)N(R24)(R25)、-NR23SO2R24或-NR23SO2N(R24)(R25)；或 者任选被取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基或芳基；其中R23、R24和R25各自 独立地是H、C1-4烷基或C3-8环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；
R31和R32各自独立地是H、烷基或C5-6芳基；
R28是H、卤素、-CN、-[CH2]n-[C(H)3-p]x(R33)p、-C(O)OH、 -C(O)(CH2)nNH2、-C(O)NH(CH2)nR33、-C＝N-N-S(O)2R33、-(CH2)n-CH(R34)(R35) 或-CHNR34-；或者R28与R27或R29一起构成任选被取代的包含3至8个 碳或杂原子的环；
每个R33独立地是H、卤素、-C(O)OR39、-OH、-CN、-N＝N-N、 -N(R37)(R38)、-C(O)NH(CH2)nR39、-C(R39)(NH2)C(O)OR39，-CH2R35或 -CH(R35)NHS(O)2R39；或者任选被取代的环烷基、杂环烷基、芳基或杂 芳基；
R34是H或-N(R37)(R38)；
R35是H、-C(O)R34、-C(O)OR39或-N(NH2)C(O)NH(CH2)nPh；
R37和R38各自独立地是H、-C(O)OR39、-C(O)环烷基-Ph、-S(O)2R39、 -C(O)R39、-OC(O)R39、-C(O)(CH2)qR39、-S(O)2、-S(O)2NHR39、 -S(O)2N(R44)(R39)、-N(R39)(R44)、-C(O)N(R44)(R39)或-NHC(O)N(R44)(R39)； 或者任选被取代的C1-6烷基、C3-8环烷基、C5-8芳基、3至8元杂环烷基 或5至8元杂芳基；
R39和R44各自独立地是H或者任选被取代的C1-6烷基、C3-8环烷基、 C5-8芳基、3至8元杂环烷基或5至8元杂芳基；
其中每个苯基环A碳原子2-6、包括其各自的取代基在内任选地 被N代替；或者任意一对相邻的苯基环A碳原子2-6和它们各自的取 代基在内任选地被S、N或O代替；
其中n是整数0至4；m是0、1或2；p是整数1至3；q是整数 0至6；x是0或1，其条件是当x是0时，p是1；和
其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
本发明内的化合物还有式IIb化合物：
其中R26、R27、R28、R29、R31和R32是如上所定义的；每个苯基环A 碳原子3-6、包括其各自的取代基在内任选地被N代替；或者任意一 对相邻的苯基环A碳原子3-6和它们各自的取代基任选地被S、N或 O代替；和
其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
本发明内的其他化合物还有下式IIc化合物：
其中R26、R27、R29、R31和R32是如上式IIa所定义的；
R40是H、烷基、亚烷基、-C(O)OR39、-C(O)N(R37)(R38)或 -N(NH2)C(O)NH(CH2)nPh；
R41是-N(R37)(R38)；其中R37和R38是如上式IIa所述的；并且
每个苯基环A碳原子3、5或6、包括其各自的取代基在内任选地 被N代替；或者苯基环A碳原子5和6一起和它们各自的取代基在内 任选地被S、N或O代替；
及其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
本发明内的其他化合物还有下式IId化合物：
其中R26、R27和R29是如上式IIa所定义的；
R31和R32各自独立地是H、烷基或C5-6芳基；
R40是如上式IIc所定义的；R42是H、任选被取代的C1-3烷基、 -C(O)OR39、-OC(O)R39、-C(O)N(R44)(R39)、-C(O)环丙基-Ph、-S(O)2R39、 -S(O)2NHR39或-C(O)(CH2)qR39；每个苯基环A碳原子3、5或6、包括其 各自的取代基在内任选地被N代替；或者苯基环A碳原子5和6一起 和它们各自的取代基在内任选地被S、N或O代替；
其中R39是如上式IIa所定义的；和
其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
本发明内的其他化合物还有下式IIe化合物：
其中R26、R27、R29和R40是如上式IId所定义的；
R31和R32各自独立地是H、烷基或C5-6芳基；R43是H、-NHR39或者是 R39；其中R39是H或者任选被取代的C1-6烷基、C3-8环烷基、3-8元杂 环烷基、C3-8芳基或3至8元杂芳基；每个苯基环A碳原子3、5或6、 包括其各自的取代基在内任选地被N代替；或者苯基环A碳原子5和 6一起和它们各自的取代基在内任选地被S、N或O代替；和
其药学上可接受的盐、酯或前体药物。
本发明另外提供药物组合物，包含式(I)或(IIa-e)化合物或者其 药学上可接受的盐、酯或前体药物与药学上有效的稀释剂或载体的组 合。为简便起见，式IIa-IIe化合物在本文中被称为式II化合物。
本发明也提供治疗、预防或控制PTP-介导的疾病的方法，所述疾 病包括但不限于1型糖尿病、2型糖尿病、葡萄糖耐量不充分(减低)、 胰岛素抵抗、肥胖、高脂血、高甘油三酯血、高胆固醇血、低HDL水 平、动脉粥样硬化、血管再狭窄、炎性肠病、胰腺炎、脂肪细胞肿瘤、 脂肪细胞癌、脂肉瘤、血脂异常、癌症和神经变性疾病，其中该方法 包含有效量或PTP-调控量本文所述药物组合物的给药。另外，本发明 包含增加哺乳动物胰岛素敏感性的方法，包含对所述哺乳动物给予胰 岛素-致敏化量的式(I)或式(II)化合物或者其药学上可接受的盐、酯 或前体药物。
本发明提供调控PTP、特别是PTP1B酶生物活性的方法，包含使 PTP1B与式(I)或式(II)化合物或者其药学上可接受的盐、酯或前体药 物接触。
另外，本发明提供调控哺乳动物PTP1B生物活性的方法，包含给 予PTP1B-调控量的式(I)或式(II)化合物或者其药学上可接受的盐、 酯或前体药物。进一步包括通过调控TC-PTP生物活性来治疗患有 TCPTP-介导疾病的哺乳动物的方法，例如皮肤T-细胞淋巴瘤(CTCL)， 也称为蕈样真菌病和赛塞利综合征。这类治疗包含给予TCPTP-调控有 效量的式(I)或式(II)化合物或者其药学上可接受的盐、酯或前体药 物。
本发明也提供调控TCPTP(T-细胞蛋白酪氨酸磷酸酶)生物活性 的方法，包含使TCPTP与式(I)或式(II)化合物或者其药学上可接受的 盐、酯或前体药物接触。
本发明也提供包含PTP1B或TCPTP和式(I)或式(II)化合物的复合 物。
详细说明
本文应当适用下列定义，另有指示除外。
措辞“任选被取代的”可与措辞“取代或未取代的”互换使用。 除非另有指示，任选被取代的基团可以在该基团的每个可取代位置具 有取代基，并且每个取代是独立于彼此的。而且，取代基或变量的组 合仅当这类组合导致稳定的化合物时才是可允许的。另外，除非另有 指示，官能团是独立地加以选择的。若“任选被取代的”修饰一系列 被逗号或顿号分开的基团(例如“任选被取代的A、B或C”；或者“A、 B或C任选地被......取代”)，每个基团(例如A、B和C)都是任选 被取代的。
术语“PTP1B”表示蛋白酪氨酸磷酸酶1B。本文所用的PTP1B表 示野生型或天然形式的酶，或者可以表示任意所分离或纯化的形式。 进而，术语PTP1B表示全长形式或截短形式的酶。当本发明化合物用 于体外研究时，PTP1B酶可以是截短的或全长的，只要催化性结构域 是完整的，并且其活性和蛋白质折叠特征没有从其天然状态改变。这 类形式是商业上可获得的或者容易利用本领域的标准方法得到，如文 献所述。
本文所用的术语“脂族”或“脂族基团”表示直链或支链C1-12烃 链，它是完全饱和的或者含有一个或多个不饱和单元，或者表示单环 C3-8烃或双环C8-12烃，它是完全饱和的或者含有一个或多个不饱和单 元，但是不是芳族的(本文也称之为“碳环”或“环烷基”)，它具 有单一的与分子其余部分连接的点，其中所述双环环系中任意个别环 都具有3-7个成员。例如，适合的脂族基团包括但不限于直链或支链 烷基、烯基、炔基及其杂合物，例如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环 烷基)烯基。
单独或者作为更大片段的一部分使用的术语“烷基”、“烷氧基”、 “羟基烷基”、“烷氧基烷基”和“烷氧基羰基”包括含有一至十二 个碳原子的直链与支链。单独或者作为更大片段的一部分使用的术语 “烯基”和“炔基”应当包括含有二至十二个碳原子的直链与支链。
术语“卤代烷基”、“卤代烯基”和“卤代烷氧基”表示被一个 或多个卤原子取代的烷基、烯基或烷氧基，视情况而定。术语“卤素” 或“卤代基”表示F、Cl、Br或I。
术语“杂原子”表示氮、氧或硫，包括氮和硫的任意氧化形式， 和任意碱性氮的季铵化形式。
单独或者与其他术语联合使用的术语“芳基”表示具有总计五至 十四个成员的单环、双环和三环碳环环系，其中该系统中至少一个环 是芳族的，并且其中该系统中每个环含有3至8个环成员。术语“芳 基”可以与术语“芳基环”互换使用。术语“芳烷基”表示被芳基取 代的烷基。术语“芳烷氧基”表示被芳基取代的烷氧基。
正如本文所用的，若环被定义为含有或包含x至y个成员，这被 理解为构成该环的成员原子(例如碳或杂原子)的总数是x、y或者x 与y之间的任意整数。举例而言，包含3至8个碳或杂原子的环可以 是包含3、4、5、6、7或8个环成员的环。
本文所用的术语“杂环烷基”、“杂环”、“杂环基”或“杂环 的”表示具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14个环成员的单环、 双环或三环环系，其中一个或多个环成员是杂原子，其中该系统中每 个环含有3、4、5、6、7或8个环成员，并且是非芳族的。
单独或者与其他术语联合使用的术语“杂芳基”表示具有总计5、 6、7、8、9、10、11、12、13或14个环成员的单环、双环和三环环 系，其中：1)该系统中至少一个环是芳族的；2)该系统中至少一个环 含有一个或多个杂原子；和3)该系统中每个环含有3、4、5、6或7 个环成员。术语“杂芳基”可以与术语“杂芳基环”或术语“杂芳族” 互换使用。杂芳基环的实例包括但不限于2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪 唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-异唑基、4-异唑基、 5-异唑基、2-二唑基、5-二唑基、2-唑基、4-唑基、5- 唑基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、1-吡唑基、3-吡唑基、4-吡 唑基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧 啶基、3-哒嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三 唑基、5-三唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、咔唑基、苯并咪唑基、苯并 噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、 苯并唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、吲唑基、异吲哚基、吖啶基和 苯并异唑基。术语“杂芳烷基”表示被杂芳基取代的烷基。术语“杂 芳基烷氧基”表示被杂芳基取代的烷氧基。
芳基(包括芳烷基、芳烷氧基、芳氧基烷基等)或杂芳基(包括 杂芳烷基、杂芳基烷氧基等)可以含有一个或多个取代基。芳基、杂 芳基、芳烷基或杂芳烷基的不饱和碳原子上适合的取代基选自卤素、 卤代烷基、CF3、-R、-OR、-SR、1，2-亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、 被保护的OH(例如酰氧基)、苯基(Ph)、被R取代的Ph、-O(Ph)、被 R取代的-O(Ph)、-CH2(Ph)、被R取代的-CH2(Ph)、-CH2CH2(Ph)、被R 取代的-CH2CH2Ph、-NO2、-CN、-N(R)2、-NRC(O)R、-NRC(O)N(R)2、-NRCO2R、 -NRNRC((O))R、-NRNRC(O)N(R)2、-NRNRCO2R、-C(O)C(O)R、 -C(O)CH2C(O)R、-CO2R、-C(O)R、-C(O)N(R)2、-OC(O)N(R)2、-SO2R、 -SO2N(R)2、-S(O)R、-NRSO2N(R)2、-NRSO2R、-C(＝S)N(R)2、-C(＝NH)-N(R)2、 -(CH2)yNHC(O)R、-(CH2)yR、-(CH2)yNHC(O)NHR、-(CH2)yNHC(O)OR、 -(CH2)yNHS(O)R、-(CH2)yNHSO2R或-(CH2)yNHC(O)CH((V)z-R)(R)，其中 每个R独立地选自氢、任选被取代的脂族基(优选C1-6)、未取代的杂 芳基或杂环(优选C5-6)、苯基(Ph)、-O(Ph)或-CH2(Ph)-CH2(Ph)，其 中y是0-6，z是0-1，V是连接基团。当R是脂族基时，它可以被 一个或多个取代基取代，所述取代基选自-NH2、-NH(C1-4脂族基团)、 -N(C1-4脂族基团)2、-S(O)(C1-4脂族基团)、-SO2(C1-4脂族基团)、卤素、 -(C1-4脂族基团)、-OH、-O-(C1-4脂族基团)、-NO2、-CN、-CO2H、-CO2(C1-4脂族基团)、-O-(卤代C1-4脂族基团)或-卤代(C1-4脂族基团)，其中每 个C1-4脂族基团是未取代的。
脂族基团或非芳族杂环可以含有一个或多个取代基。脂族基团或 非芳族杂环的饱和碳上适合的取代基选自如上关于芳基或杂芳基的不 饱和碳所列举的那些和如下：＝O、＝S、＝NNHR、＝NN(R)2、＝N-、＝NNHC(O)R、 ＝NNHCO2(烷基)、＝NNHSO2(烷基)或＝NR，其中每个R独立地选自氢或任 选被取代脂族基(优选C1-6)。当R是脂族基时，它可以被一个或多个 取代基取代，所述取代基选自-NH2、-NH(C1-4脂族基团)、-N(C1-4脂族 基团)2、卤素、-OH、-O-(C1-4脂族基团)、-NO2、-CN、-CO2H、-CO2(C1-4脂族基团)、-O-(卤代C1-4脂族基团)或-(卤代C1-4脂族基团)，其中每 个C1-4脂族基团是未取代的。
非芳族杂环氮上的取代基选自-R、-N(R)2、-C(O)R、-C(O)OR、 -C(O)C(O)R、-C(O)CH2C(O)R、-SO2R、-SO2N(R)2、-C(＝S)N(R)2、 -C(＝NH)-N(R)2或-NRSO2R；其中每个R独立地选自氢、任选被取代的 脂族基(优选C1-6)、任选被取代的苯基(Ph)、任选被取代的-O(Ph)、 任选被取代的-CH2(Ph)、任选被取代的-CH2CH2(Ph)或者未取代的杂芳 基或杂环(优选5-6元)。当R是C1-6脂族基团或苯基环时，它可以 被一个或多个取代基取代，所述取代基选自-NH2、-NH(C1-4脂族基团)、 -N(C1-4脂族基团)2、卤素、-(C1-4脂族基团)、-OH、-O-(C1-4脂族基团)、 -NO2、-CN、-CO2H、-CO2(C1-4脂族基团)、-O-卤代(C1-4脂族基团)或-(卤 代C1-4脂族基团)；其中每个C1-4脂族基团是未取代的。
术语“连接基团”或“连接基”表示连接化合物两个部分的有机 片段。连接基包括亚烷基链，它是饱和或不饱和的、直链或支链的C1-8碳链，它是任选被取代的，其中该链的一个或多个饱和碳任选地被R* 代替，其中R*是-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR-、-C(O)NRNR-、-C(O)O-、 -OC(O)-、-NRCO2-、-O-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-、-NRNR-、-NRC(O)-、 -S-、-SO-、-SO2-、-NR-、-SO2NR-或-NRSO2-；或者任选被取代的环烷 基、杂环烷基、芳基或杂芳基；其中R选自氢或C1-4脂族基；其中C1-4脂族基是未取代的。在一种实施方式中，该链的两个或多个不相邻的 饱和碳任选地被R*代替。亚烷基链上任选的取代基是如下关于脂族基 团所述的。作为替代选择，连接基是R*。其他连接基包括芳基和杂芳 基。
就式(I)或式(II)化合物而言，苯基环A可以任选地被修饰成杂芳 基环，应用一次、两次或三次下列改变之一或两者：1)任意一个或多 个苯基环A碳原子2-6、包括其各自的取代基在内被N代替；和/或 2)任意一对相邻的苯基环A碳原子2-6和它们各自的取代基被S或O 或N代替。这类杂芳基环优选地包括但不限于唑、异唑、咪唑、 噻唑、异噻唑、吡唑、噻吩、呋喃、吡咯、吡啶、嘧啶、吡嗪和哒嗪。 优选地，环A是苯基、吡啶、噻吩、呋喃、吡咯、唑、异唑、噻 唑或异噻唑。更优选地，环A是苯基、吡啶、噻吩、呋喃或吡咯。进 而更优选地，环A是苯基、吡啶或噻吩。最优选的是环A是苯基。
就其中R28与R27或R29一起的式II化合物而言，它们构成任选被 取代的3-8元或者优选5-8元环烷基、芳基、杂环烷基或杂芳基。
术语“治疗”表示对于哺乳动物、特别是人的病理状况的任意处 置，包括：(i)在可能有该状况倾向但是尚未被诊断有该状况的受治疗 者中防止该病理状况的发生，因此治疗构成疾病状况的预防性处置； (ii)抑制该病理状况，也就是阻止其发展；(iii)缓解该病理状况，也 就是导致该病理状况的消退；或者(iv)缓解由该病理状况介导的条件。
术语“治疗有效量”表示本发明化合物在对需要这类治疗的哺乳 动物给药时足以实现治疗的量。治疗有效量将因所治疗的受治疗者与 疾病条件、受治疗者的体重与年龄、疾病条件的严重性、给药的方式 等而异，这可以容易为本领域普通技术人员加以确定。
术语“药学上可接受的盐”包括但不限于本领域技术人员熟知的 盐，例如本发明化合物的单盐(例如碱金属和铵的盐)和多盐(例如 二-或三-盐)。式(I)和(II)化合物的药学上可接受的盐是例如其中可 置换的基团、例如-OH、-NH-或-P(＝O)(OH)-中的氢被药学上可接受的 阳离子(例如钠、钾或铵离子)代替，它可以适宜地从相应的式(I) 或式(II)化合物制备，例如与适合的碱反应。在其中化合物的碱性或 酸性足以生成稳定的无毒性酸或碱盐的情况下，化合物作为盐给药可 能是适当的。药学上可接受的盐的实例有与生成生理学可接受的阴离 子的酸生成的有机酸加成盐，例如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、 柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、 α-酮戊二酸盐和α-甘油磷酸盐。也可以生成适合的无机盐，包括盐 酸盐、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。药学上可接受的盐可以 利用本领域熟知的标准工艺得到，例如使充分碱性的化合物、例如胺 与适合提供生理学上可接受的阴离子的酸反应。也能够制备羧酸的碱 金属(例如钠、钾或锂)或者碱土金属(例如钙)盐。
术语“前体药物”使用其在本领域中的普通含义，表示其带电部 分被另一部分掩蔽或保护的本发明化合物，所述另一部分被设计成在 特定的生理条件下裂解，留下去保护的或解除掩蔽的本发明化合物。 掩蔽剂的使用是本领域普遍的和熟知的，特别是掩蔽磷酸或膦酸基团。 所有这类掩蔽剂都是适合的，并且可以用于本发明化合物。各种试剂、 例如酰氧基烷基酯如Srivasta et al.，(1984 Bioorganic Chemistry 12，118-12)和Freeman et al.(1997 Progress in Medicinal Chemistry 34：112-147)所述，它们都全文引用在此作为参考；3-苯并 吡喃酮基膦酸酯如Dang Q.，et al.，(1999 Bioorganic &Med.Chem Letters，9：1505-1510)所述，全文引用在此作为参考。例如而非限制， Srivasta等也描述过乙酰氧基甲基、异丁酰氧基甲基和新戊酰氧基甲 基作为掩蔽剂。其他适合的掩蔽基团包含新戊酰氧基烷基、例如新戊 酰氧基甲基或者如Farquhar D.et al.，(1995 J.Med.Chem.， 38：488-495)所述新戊酰氧基，全文引用在此作为参考。其他掩蔽或保 护剂参见美国专利No.4,816,570和4,968,788，二者都全文引用在 此作为参考。脂质前体药物也适合用于本发明化合物。非限制性地例 如，某些脂质前体药物如Hostetler et al.，(1997 Biochem.Pharm. 53：1815-1822)和Hostetler et al.，(1996 Antiviral Research 31：59-67)所述，二者都全文引用从此作为参考。适合的前体药物技术 的其他实例如下文献所述：WO90/00555；WO96/39831；WO 03/095665A2；美国专利No.5,411,947；5,463,092；6,312,662； 6,716,825；和美国已公布的专利申请No.2003/0229225和 2003/0225277，它们各自全文引用在此作为参考。这类前体药物也可 以具备靶向药物化合物至患者内特定组织的能力，例如肝脏，如Erion et al.，(2004 J.Am.Chem.Soc.126：5154-5163；Erion et al.， Am.Soc.Pharm.&Exper.Ther.DOI：10.1124/jept.104.75903 (2004)；WO01/18013A1；U.S.Patent No.6,752,981)所述，它们 各自全文引用在此作为参考。非限制性地例如，其他适合用于本发明 的前体药物如下文献所述：WO03/090690；美国专利No.6,903,081； 美国专利申请No.2005/0171060A1；美国专利申请No. 2002/0004594A1；和Harris et al.，(2002 AntiviralChem&Chemo. 12：293-300；Knaggs et al.，2000 Bioorganic&Med.Chem Letters 10：2075-2078)，它们各自全文引用在此作为参考。
有些本文所述化合物具备一个或多个手性(也称不对称)中心， 可以形成旋光异构体。所有这类异构体以及非对映体和对映体都包括 在本发明中。化合物的外消旋混合物也包括在本发明中。这类外消旋 混合物的拆分可以利用本领域已知的标准工艺进行。非限制性地例如， 本领域技术人员利用手性柱分离或者恰当的官能化继之以酶拆分，或 者用手性胺处理外消旋物生成非对映体盐，再结晶分离两种非对映体， 能够得到外消旋氨基酸的两种对映体。然后借助酸处理，母体化合物 可以从胺盐中释放出来。作为替代选择，利用手性柱分离或者用手性 胺处理生成非对映体盐，再结晶分离两种非对映体，人们能够得到外 消旋最终化合物的两种对映体。然后借助酸处理，母体化合物可以从 胺盐中释放出来。另一种可以用于拆分手性氨基酸的对映体的方法是 与手性部分(例如手性醇)生成缀合物(例如酯)，以形成非对映体 加合物的混合物。这些加合物可以借助普通(非手性)色谱或分步结 晶加以分离，然后借助缀合物的裂解释放氨基酸的各对映体。
按照一种实施方式，本发明提供式(I)化合物，其中：
X1是连接基团或者不存在；
X2是H或者任选被取代的直链或支链脂族基，优选地包含1至8 个碳，任选地含有1条或多条双键或叁键，其中一个或多个碳任选地 被R*代替，其中R*是任选被取代的环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基； -C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR11-、-C(O)NR11NR12-、-C(O)O-、-OC(O)-、 -NR11CO2-、-O-、-NR11C(O)NR12-、-OC(O)NR11-、-NR11NR12-、-NR11C(O)-、 -S-、-SO-、-SO2-、-NR11-、-SO2NR11-或-NR11SO2-，其中R11和R12独立 地选自H和任选被取代的脂族基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基； 或者X2是R*，也就是说X2是任选被取代的环烷基、杂环烷基、芳基或 杂芳基；-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR11-、-C(O)NR11NR12-、-C(O)O-、 -OC(O)-、-NR11CO2-、-O-、-NR11C(O)NR12-、-OC(O)NR11-、-NR11NR12-、 -NR11C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR11-、-SO2NR11-或-NR11SO2-；
R1是H或者任选被取代的脂族基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂 芳基；
R2是H或任选被取代的环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基；或者 R2不存在，此时X2是H；
R3和R4独立地是H、烷基或C5-6芳基；
至少一个R5和R6是卤代基；
R7和R8各自独立地是H或者任选被取代的脂族基、环烷基、杂环 烷基、芳基或杂芳基；或者一起构成任选被取代的包含3至7个碳或 杂原子的环；
R9是H或-CH3；
R10是H或-CH3；
每个Rm独立地是H、卤代基、-OH、-NO2、-CN、-CH3、-CF3、-CHF2、 -CH2CH3、-CH2CF3、-CF2CF3、-CH2Cl、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、 -CH2CH2NH2、-CH2SO2CH3、-OR23、-C(O)R23、-C(O)OR23、-C(O)N(R23)(R24)、 -OC(O)R23、-OC(O)OR23、-OC(O)N(R23)(R24)、-N(R23)(R24)、-S(O)2R23、 -SR23、-S(O)2N(R23)(R24)、-NR23C(O)R24、-NR23C(O)OR24、-NR23SOOR24、 -NR23C(O)N(R24)(R25)-NR23SO2R24或-NSO2(R23)(R24)；其中R23、R24和R25各自独立地是H、C1-4烷基或者5或6元环烷基、杂环烷基、芳基或杂 芳基；或者两个相邻的Rm基团一起构成任选被取代的包含5至7个碳 或杂原子的芳族或非芳族环；或者Rm和R7一起构成任选被取代的芳族 或非芳族环；其中n是0、1、2、3或4。
优选的是式(I)化合物不包含二肽、三肽或寡肽片段，例如其中式 (I)代表式R1-AAn-R2化合物，其中AA是氨基酸或其衍生物，n是大于 1的整数。因而，优选的是其中X1是-NH-，X2不是或者不包含-CHRC(O)-， 其中R是α-碳取代基。在其他术语中，优选的是其中X1是-NH-，X2不是或者不包含在亚甲基上被取代的-CH2C(O)-或-CH2C(O)-。还优选 的是R1X1不是R1-C(O)CRNH-的形式，其中R是α-碳取代基。进一步优 选的是R1X1不是R1-NHC(R)C(O)NH-的形式，其中R是α-碳取代基；特 别是其中X2是H或低级烷基，例如-CH3，R2不存在。
在一种实施方式中，X1是任选被取代的C1-8烷基，其中一个或多 个亚甲基任选地被R*代替，其中R*是-C(O)-、-C(O)C(O)-、-C(O)NR13-、 -C(O)NR13NR14-、-CO2-、-OC(O)-、-NR13CO2-、-O-、-NR13C(O)NR14-、 -OC(O)NR13-、-NR13NR14-、-NR13C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、-NR13-、-SO2NR13- 或-NR13SO2-；其中R13和R14独立地选自H和C1-4烷基；或者X1是-C(O)-、 -C(O)C(O)-、-C(O)NR13-、-C(O)NR13NR14-、-CO2-、-OC(O)-、-NR13CO2-、 -O-、-NR13C(O)NR14-、-OC(O)NR13-、-NR13NR14-、-NR13C(O)-、-S-、-SO-、 -SO2-、-NR13-、-SO2NR13-或-NR13SO2-。
在另一种实施方式中，X1是-(CH2)R*-、-C(O)-、-C(O)C(O)-、 -C(O)NR13-、-C(O)NR13NR14-、-C(O)O-、-OC(O)-、-NR13CO2-、-O-、 -NR13C(O)NR14-、-OC(O)NR13-、-NR13NR14-、-NR13C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、 -NR13-、-SO2NR13-或-NR13SO2-。
按照另一种实施方式，X1是-SO2NR13、-NR13SO2-、-(CH2)OC(O)NH-、 -C(O)NH-或-OC(O)NR13-。
在另一种实施方式中，X1不存在，R1是C1-8烷基或者是H。
在式(I)化合物的一种实施方式中，X2是任选被取代的C2-8烷基， 其中一个或多个碳任选地被R*代替，其中R*是-C(O)-、-C(O)C(O)-、 -C(O)NR11-、-C(O)NR11NR12-、-C(O)O-、-OC(O)-、-NR11C(O)O-、-O-、 -NR11C(O)NR12-、-OC(O)NR11-、-NR11NR12-、-NR11C(O)-、-S-、-SO-、-SO2-、 -NR11-、-SO2NR11-或-NR11SO2-。
在另一种实施方式中，X2是-(CH2)m-，其中m是2至8；或者 -(CH2)m-O-，其中m是2至7；或者-(CH2)m(C＝C)(CH2)n-、 -(CH2)m(C＝C)(CH2)nO-或-(CH2)m(C≡C)(CH2)n-，其中m和n独立地是0、 1、2或3；或者X2是-CH3，并且R2不存在。
在其他实施方式中，R1是C1-8烷基、烯基或炔基，任选地被卤代 基或羟基取代；或者任选被取代的5或6元环烷基、杂环烷基、芳基 或杂芳基，更具体地，R1是5或6元环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳 基，任选地被如下取代基取代：卤素、卤代烷基、-R15、-OR15、-SR15、 1，2-亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、-NO2、-CN、-NR15R16、-NR15C(O)R16、 -NR15C(O)NR16R17、-NR15C(O)OR16、-NR15NR16C(O)R17、-NR15NR16C(O)NR17R18、 -NR15NR16C(O)OR17、-C(O)C(O)R16、-C(O)CH2C(O)R16、-C(O)OR15、-C(O)R15、 -C(O)NR15R16、-OC(O)NR15R16、-S(O)2R15、-SO2NR15R16、-S(O)R15、-NR15SO2、 -NR16R17、-NR15SO2R16、-C(＝S)NR15R16、-C(＝NH)N15R16、-(CH2)yNHC(O)R15、 -(CH2)yR15、-(CH2)yNHC(O)NHR15、-(CH2)yNHC(O)OR15、-(CH2)yNHS(O)R15或-(CH2)yNHSO2R15，其中R15、R16、R17和R18独立地选自H和任选被取代 的C1-6烷基；其中y是0-6。
在另一种实施方式中，R1是甲基或苯基。
在其他实施方式中，R2是任选被取代的5或6元环烷基、杂环烷 基、芳基或杂芳基，更具体地，R2是5或6元环烷基、杂环烷基、芳 基或杂芳基，任选地被如下取代基取代：卤素、卤代烷基、-R19、-OR19、 -SR19、1，2-亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、-NO2、-CN、-NR19R20、 -NR19C(O)R20、-NR19C(O)NR20R21、-NR19C(O)OR20、-NR19NR20C(O)R21、 -NR19NR20C(O)NR21R22、-NR19NR20C(O)OR21、-C(O)C(O)R19、-C(O)CH2C(O)R19、 -C(O)OR19、-C(O)R19、-C(O)NR19R20、-OC(O)NR19R20、-S(O)2R19、-SO2NR19R20、 -S(O)R19、-NR19SO2NR20R21、-NR19SO2R20、-C(＝S)NR19R20、-C(＝NH)NR19R20、 -(CH2)yNHC(O)R19、-(CH2)yR19、-(CH2)yNHC(O)NHR19、-(CH2)yNHC(O)OR19、 -(CH2)yNHS(O)R19或-(CH2)yNHSO2R19，其中R19、R20、R21和R22独立地选自 H、C1-6脂族基或者5或6元芳基、杂芳基、环烷基或杂环烷基，其中 y是0-6。
R2也可以是任选被-OH或-C(O)OR19取代的苯基。在具体的实施方 式中，R2是被一个或多个选自-OH和-C(O)OCH3的基团取代的苯基。X2R2(也就是其中R2不存在)也可以是低级烷基，例如甲基、乙基或丙基。
在式(I)化合物的另一种实施方式中，X1是-SO2NR13-、 -(CH2)OC(O)NH-、-C(O)NH-或-OC(O)NR13-；X2是-(CH2)m-，其中m是2 至8，或者-(CH2)m-O-，其中m是2至7。在另一种实施方式中，X1是 -SO2NH-或-(CH2)OC(O)NH-；X2是-(CH2)4O-或-C(O)NH-；其中例如R1是 甲基或苯基；并且R2是任选被一个或多个选自-OH和-C(O)OCH3的基团 取代的苯基。在进一步的实施方式中，R3和R4独立地是H或者C1-4烷 基，例如甲基、乙基、丙基或丁基，或者苯基。在另一种实施方式中， R3和R4各自是H。在另一种实施方式中，R5和R6都是卤代基，优选F； Rm是卤代基，其中m是0、1或2。
式I的具体实施方式包括下列化合物以及实施例1-24所述那些：
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-羟基-丙基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(二甲基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二 氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(4-氯苯基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-吗啉-4-基-丙基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(2-吡啶基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(3-吡啶基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-二甲基氨基-丙基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-咪唑-1-基-丙基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(4-氯苯氧基)丙基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-(苯基氨基)苯基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(3-氯苯氧基)丙基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(3-二甲基氨基苯氧基)丙基 氨甲酰基)-乙基]苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-二甲基氨基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-甲基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-苯氧基丙基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(N-十二烷基磺酰氨基)-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(4-甲氧基苯基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰 基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(2-氨基乙磺酰氨基)-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-苯氧基-苯基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-苄基-苯基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(N-甲基、N-苯基氨基)-丙基氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(4-甲基苯基磺酰氨基)-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-(4-[2-异丙基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(6-苯氧基-吡啶-3-基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-(3-氯苯氧基)-苯基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-苯基氨基-苯基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(4-三氟甲氧基-苯氧基)丙基氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(3，4-二氯苯基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰 基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁 基-氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(2-苯并噻吩)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(2-噻吩基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(1-萘基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯基-丁-3E-烯基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(2-(4-氯苯基氨甲酰基)乙基-氨甲 酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(4-溴-苯氧基)丙基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(3，5-二甲氧基-4-乙酰基-苯氧 基)丙基-氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(3，4-二氯-苯氧基)丙基氨甲酰 基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(2-硝基苯基磺酰氨基)丙基-氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苄基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}-二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(2-苯基乙基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(3，5-二甲基异唑-4-基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基 -氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-(三氟甲基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙 基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-(2-溴-4-{2-(3-吡啶基)磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3- 羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸；
(2S)-[(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[3-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-丙基 氨甲酰基]-乙基}-苯基)]二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-(4-甲氧基苯基氨基)苯基-氨甲 酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；
(2S)-[4-(2-苯基磺酰氨基-3-[1，4′]联哌啶-1′-基-3-氧代-丙 基)-苯基]二氟甲基膦酸；
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(4-三氟甲基-苯氧基)丙基-氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸；和
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(3-(4-喹啉氧基)丙基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}二氟甲基膦酸。
按照一种实施方式，本发明提供式(IIa)化合物，其中至少一个、 优选两个Ra和Rb都是卤素；
R31和R32各自是氢；
环A是苯基、吡啶或噻吩；
R28优选地是-[CH2]n-[C(H)3-p]x(R33)p、-C(O)NH(CH2)nR33、 -(CH2)n-CHR34R35或CHNR34；或者R28与R27或R29构成任选被取代的包含3 至7个碳或杂原子、更优选5至8个碳或杂原子的环；
每个R33独立地是H、卤素、-C(O)OR39、-OH、-CN、-N＝N-N、 -N(R37)(R38)、-CH(R39)(NH2)C(O)OR39、-CH2R35或-CHR35-(NHS(O)2-R39)； 或者任选被取代的环烷基、芳基、杂环烷基或杂芳基；
R34是H或-N(R37)(R38)；
R35是H或-C(O)R34；
R37和R38各自独立地是H、C1-6烷基、-S(O)2R39、-C(O)(CH2)qR39、 -S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；并且
R39是H、任选被取代的C1-6烷基、C3-8芳基或3至8元杂芳基。
其中R28与R29(或者作为替代选择，与R27)一起构成任选被取代 的5元环的式IIa化合物可以如式IIa1所示：
其中X和Y独立地是C、N、S和O；
Rc、Rd和Re独立地是不存在的或者选自H、卤素、卤代烷基、-R45、 -OR45、-SR45、1，2-亚甲二氧基、1，2-亚乙二氧基、-NO2、-CN、-NR45R46、 -NR45C(O)R46、-NR45C(O)NR46R47、-NR45C(O)OR46、-NR45NR46C(O)R47、 -NR45NR46C(O)NR47R48、-NR45NR46C(O)OR47、-C(O)C(O)R46、-C(O)CH2C(O)R46、 -C(O)OR45、-C(O)R45、-C(O)NR45R46、-OC(O)NR45R16、-S(O)2R45、-SO2NR45R46、 -S(O)R45、-NR45SO2NR46R47、-NR45SO2R46、-C(＝S)NR45R46、-c(＝NH)NR45R46、 -(CH2)yNHC(O)R45、-(CH2)yR45、-(CH2)yNHC(O)NHR45、-(CH2)yNHC(O)OR45、 -(CH2)yNHC(O)(CH2)R45NHC(O)R46、-(CH2)yNHS(O)R45或-(CH2)yNHSO2R45， 其中R45和R46独立地选自H和任选被取代的C1-6烷基；其中y是0-6。
按照若干种实施方式，X和Y独立地是S或N，Rc、并且Rd和Re独立地是不存在的或者选自-NR45C(O)R46、-(CH2)yNHC(O)R45和 -(CH2)yNHC(O)(CH)(R45)NHC(O)R46。在进一步的实施方式中，X和Y独 立地是S或N；Rc、Rd和Re独立地是不存在的或者选自-NHC(O)CH3、 -(CH2)NHC(O)CH3和-(CH2)NHC(O)(CH2)NHC(O)CH3。其他实施方式包括如 下化合物，其中X和Y是O；X是N，Y是S；X是S，Y是N；X是N， Y是C；和X是C，Y是N。优选的实施方式包括如下化合物，其中R26和R30之一是卤代基，优选Br；一个或两个Ra和Rb是卤代基，优选F； 一个或两个R31和R32是H。
按照本发明的另一种实施方式，提供式(IIb)化合物，其中Ra和 Rb都是F；R31和R32各自是氢；环A是苯基、吡啶或噻吩；R30是Br；
R28是-(CH2)n-CHR34R35或-CHNR34；或者R28与R27或R39一起构成任选 被取代的包含3至8个碳或杂原子的环；
R34是H或-NR37R38；
R35是H或-C(O)R34；
R37和R38优选地各自独立地是H、C1-6烷基、-S(O)2R39、 -C(O)(CH2)qR39、-S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；
R39是H或任选被取代的C1-6烷基、3至8元芳基或杂芳基。
按照本发明的另一种实施方式，提供式(IIc)化合物，其中R31和 R32各自是氢；环A是苯基、吡啶或噻吩；R26、R27和R29各自是H；
R40是H、烷基或-C(O)NR37R38；
R41是-NR37R38；
R37和R38各自独立地是H、C1-6烷基、-S(O)2R39、-C(O)(CH2)qR39、 -S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；
R39是H或任选被取代的C1-6烷基、3至8元芳基或杂芳基。
按照本发明的另一种实施方式，提供式(IId)化合物，其中R31和 R32各自是氢；环A是苯基；R26、R27和R29各自是H；
R40是烷基或-C(O)NR37R38；
R42是-S(O)2R39、-C(O)(CH2)qR39、-S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；
R37和R38各自独立地是H、C1-3烷基、-S(O)2R39，C(O)(CH2)qR39、 -S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；
R39是H或任选被取代的C1-3烷基、3至8元芳基或杂芳基。
按照本发明更进一步的实施方式，提供式(IIe)化合物，其中R31和R32各自是氢；环A是苯基；R26、R27和R29各自是H；
R40是烷基或-C(O)NR37R38；
R43是H或R39；
R37和R38各自独立地是H、C1-3烷基、-S(O)2R39，C(O)(CH2)qR39、 -S(O)2NHR39或-NHC(O)NHR39；
R39是H或任选被取代的C1-3烷基、3-8元芳基或3-8元杂芳基。
式(II)的具体实施方式包括下列化合物以及实施例25-105所述 那些：
{[4-(2-乙酰基氨基-2-氨甲酰基-乙基)-苯基]-二氟-甲基}-膦 酸；
[4-(膦酰基-二氟-甲基)-苯基]-乙酸苄基酯；
[4-(膦酰基-二氟-甲基)-苯基]-乙酸；
4-{2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯 基二氟甲基膦酸；
4-甲基-2-硝基-苯基二氟甲基膦酸；
2-氨基-3-[3-溴-4-(二氟-膦酰基-甲基)-苯基]-丙酸；
[(2-溴-4-乙基氨基甲基-苯基)-二氟-甲基]-膦酸；
{[2-溴-4-(4-苯基-丁基氨甲酰基)-苯基]-二氟-甲基}-膦酸；
[(2-溴-3-甲基-苯基)-二氟-甲基]-膦酸；
{[4-(2-乙酰基氨基-乙基)-苯基]-二氟-甲基}-膦酸；
[(4-叠氮基甲基-2-溴-苯基)-二氟-甲基]-膦酸；
{[2-溴-4-(2-苯甲酰氧基-氨基-乙基)-苯基]-二氟-甲基}-膦酸；
[(2-溴-4-氟-苯基)-二氟-甲基]-膦酸。
其中R28与R27或R29一起构成任选被取代的C3-8环烷基、芳基、杂 环烷基或杂芳基的式IIa化合物的非限制性实例如下表1所示。
表1
本发明化合物通过抑制PTP1B而提高胰岛素敏感性，从而应用于 在所有需要这类治疗或者可能受益于这类治疗的哺乳动物中预防或治 疗1型与2型糖尿病、当存在胰岛素抵抗时提高葡萄糖耐量与胰岛素 敏感性和治疗或预防肥胖。
本发明化合物也可用于治疗、预防或控制一些伴随2型糖尿病的 病症，包括高脂血、高甘油三酯血、高胆固醇血(包括有益地升高低 HDL水平)、动脉粥样硬化、血管再狭窄、胰腺炎、脂肪细胞肿瘤、 脂肪细胞癌(例如脂肉瘤)、血脂异常、炎性肠病、一般的炎症和其 他存在胰岛素抵抗因素的疾患。最后，这些化合物可以用于治疗或预 防癌症，例如前列腺癌，神经变性疾病等。
可用于治疗上述病症的剂量水平在约0.01mg至约100mg/kg体重 每天的级别，或者作为替代选择约0.5mg至约7g每名患者每天。例如， 给予约0.01至50mg化合物每千克体重每天，或者作为替代选择约 0.5mg至约3.5g每名患者每天，可以有效地治疗本文所述疾病和病症。
本发明化合物通常与载体组合形成适合于所治疗的特定患者和特 定给药方式的剂型。例如，旨在对人口服给药的制剂可以含有约0.5mg 至约5g本发明化合物，复合有适当与适宜量的载体材料，后者可以占 全体组合物的约5至约95％不等。代表性剂型一般将含有约1mg至约 500mg之间的本发明化合物，通常25mg、50mg、100mg、200mg、300mg、 400mg、500mg、600mg、800mg或1000mg。
可以理解，就任意特定患者而言的具体剂量水平将依赖于多种因 素，包括年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、给药 途径、排泄速率、药物组合和接受疗法的特定疾病的严重性。
本发明化合物可以与一种或多种其他药学活性化合物联合使用， 例如抗糖尿病化合物(非限制性地例如，胰岛素、磺酰脲、PPAR-α和 /或-γ配体，包括都具有PPAR-α和-γ活性的配体)或抗肥胖化合物， 和改善患者脂质行为的化合物。这些化合物可以与胆固醇生物合成抑 制剂组合，特别是HMG-CoA还原酶抑制剂，例如洛伐他汀、辛伐他汀、 普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀和利伐他汀，其用量有效地改善脂 质行为。与PTP-1B抑制剂组合可以有益于治疗或预防动脉粥样硬化和 其他经常与2型糖尿病有关的病症。
可以与式(I)或式(II)化合物组合并且同时或先后联合给药的药 学活性化合物的实例非限制性地包括其他抗糖尿病剂，例如DPP IV 抑制剂，GLP 1类似物，胰岛素致敏化剂，例如PPARγ激动剂，例如 格列酮类(例如曲格列酮、吡格列酮、恩格列酮、MCC-555、罗格列酮 等)，和公开在WO97/27857、97/28115、97/28137和97/27847中 的那些；双胍类，例如甲福明和苯乙福明；胰岛素或胰岛素模拟物； 磺酰脲类，例如甲苯磺丁脲和格列吡嗪，或相关的物质；α-糖苷酶抑 制剂(例如阿卡波糖)；胆固醇降低剂，例如HMG-CoA还原酶抑制剂 (洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、利伐他 汀和其他他汀类)，螯合剂(考来烯胺、考来替泊和交联葡聚糖的二 烷基氨基烷基衍生物)，烟醇，烟酸或其盐，PPARα激动剂，例如非 诺贝特酸衍生物(吉非贝齐、氯贝特、非诺贝特和苯扎贝特)，胆固 醇吸收抑制剂，例如β-谷甾醇，和酰基CoA：胆固醇酰基转移酶抑制 剂，例如melinamide和普罗布考；PPARγ激动剂；抗肥胖化合物，例 如食欲抑制剂、芬氟拉明、右芬氟拉明、芬替拉明、西布曲明、奥利 司他、神经肽Y5抑制剂(NPY5受体拮抗剂)、苗条蛋白、β3肾上 腺素能受体激动剂；回肠胆汁酸转运抑制剂；和胰岛素受体活化剂， 例如公开在未决的普通转让的美国申请No.09/095,244和 09/280,602中的那些。
若除了本文所述本发明化合物以外还使用第二药物，这两种药物 可以在单一组合物一起给药、在大约同一时间分开给药或者根据独立 的服药安排给药。重要的特性是它们的服药安排包含如下一种治疗计 划，其中服药安排在时间上重叠，因而是同时的。
可以采用任意适合的给药途径为患者提供有效的剂量(例如口服、 舌下、直肠、静脉内、硬膜外、鞘内、皮下、经皮、肌内、腹膜内、 皮内、吸入、透皮、鼻喷雾剂或滴剂等)。尽管就在疗法中的用途而 言有可能本发明化合物可以作为纯化学品给药而没有载体、赋形剂等， 正如经由吹入器吸入细粉，不过优选地以药物制剂形式呈递活性成分。 本发明因而进一步提供药物制剂，包含本发明化合物以及一种或多种 药学上可接受的载体和任选的其他治疗和/或预防成分。载体在与制剂 其他成分相容并且对其接受者无害的意义上必须是“可接受的”，所 述接受者例如人类患者或家养动物。
药物制剂包括适合于口服或肠胃外(包括肌内、皮下和静脉内) 给药的那些。适合于肠胃外给药的形式也包括适合于吸入或吹入给药 或者鼻用或局部(包括口腔、直肠、阴道和舌下)给药的形式。制剂 可以酌情适宜地在离散的单元剂型中呈递，并且可以借助药学领域熟 知的任意方法制备。这类方法包括使本发明化合物与液体载体、固体 基质、半固体载体、微细粉碎的固体载体或其组合混合，然后如果必 要的话使产物成形为所需的递送系统。
适合于口服给药的药物制剂可以在离散的单元剂型中呈递，例如 硬或软明胶胶囊剂、扁囊剂或片剂，各自含有预定量的活性成分；粉 剂或颗粒剂；溶液、悬液或乳液；或者在可咀嚼的基质中，例如合成 树脂或糖胶树胶，用于从口香糖中摄入成分。式(I)或式(II)化合物也 可以呈现药团、药糖或糊剂。口服给药片剂和胶囊剂可以含有常规的 赋形剂，例如粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂或湿润剂。片剂可以 按照本领域熟知的方法包衣，也就是肠溶衣。
口服液体制备物可以是例如水性或油性悬浮液、溶液、乳液、糖 浆或酏剂的形式，或者可以呈现干燥产物，在使用前用水或其他适合 的介质再生。这类液体制备物可以含有常规的添加剂，例如悬浮剂、 乳化剂、非水性介质(可以包括食用油)或防腐剂。
根据本发明的化合物也可以被配制供肠胃外给药(例如注射，例 如药团注射或连续输注)，并且可以在单元剂型中呈递，在安瓿、预 灌注注射器、小容量输注容器或多剂量容器中加入有防腐剂。组合物 可以采取在油性或水性介质中的悬浮液、溶液或乳液等形式，并且可 以含有配制试剂，例如悬浮液、稳定和/或分散剂。作为替代选择，如 式(I)或式(II)所示本发明化合物可以是粉末形式，通过无菌分离无菌 固体或者从溶液冻干而得，在使用前用适合的介质再生，例如无菌无 热原的水。
就对表皮局部给药而言，化合物可以被配制成软膏剂、霜剂或洗 剂，或者作为透皮贴剂的活性成分。适合的透皮递送系统例如公开在 A.Fisher et al.(美国专利No.4,788,603)或R.Bawa et al.(美 国专利No.4,931,279、4,668,506和4,713,224)中。软膏剂和霜剂 例如可以用水性或油性基质配制，其中加入有适合的增稠和/或胶凝 剂。洗剂可以用水性或油性基质配制，一般也将含有一种或多种乳化 剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。
适合于口中局部给药的制剂包括单元剂型，例如锭剂，在经过矫 味的基质中包含活性成分，所述基质通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶； 软锭剂，在惰性基质中包含活性成分，所述基质例如明胶和甘油或蔗 糖和阿拉伯胶；粘膜粘附性凝胶；和漱口剂，在适合的液体载体中包 含本发明化合物。
在需要时调整上述制剂，可以得到所用活性成分的持续释放，例 如与某些亲水性聚合物基质组合，例如包含天然树胶、合成聚合物凝 胶或其混合物。聚合物基质可以被涂在或者用于形成医用假体，例如 脉管支架、瓣膜、分流器、移植物等。
其中载体是固体的适合于直肠给药的药物制剂最优选地呈现单元 剂量栓剂。适合的载体包括可可脂和本领域常用的其他材料，栓剂可 以适宜地如下形成，混合本发明化合物和软化或熔化的载体，继之以 冷却和在模具中成形。
适合于阴道给药的制剂可以呈现阴道栓、棉塞、霜剂、凝胶、糊 剂、泡沫或喷雾剂，除了本发明化合物以外还含有本领域已知适当的 载体。
就吸入给药而言，根据本发明的化合物适宜从吹入器、雾化器或 加压包装或者其他递送气雾喷雾剂的适宜装置中递送。加压包装可以 包含适合的推进剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、 二氧化碳或其他适合的气体。在加压气雾剂的情况下，通过提供计量 递送的阀门可以确定剂量单元。
作为替代选择，就吸入或吹入给药而言，根据本发明的化合物可 以采取干粉组合物的形式，例如化合物与适合的粉末基质的粉末混合 物，所述基质例如乳糖或淀粉。粉末组合物可以在单元剂型中呈递， 例如胶囊剂或药筒，或者例如明胶或泡眼包装，从中借助吸入器或吹 入器可以给予粉末。
就鼻内给药而言，本发明化合物可以经由液体喷雾剂给药，例如 经由塑料瓶雾化器。典型的代表是Mistometer(Wintrop)和 Medihaler(Riker)。
就对眼部局部给药而言，化合物可以作为滴剂、凝胶(美国专利 No.4,255,415)、树胶(参见美国专利No.4,136,177)或者经由延长 释放的眼用插件给药。
现在将参照下列非限制性实施例更加详细地描述发明。
实施例
下列实施例所述所有原料都是商业上可获得的或者容易为本领域 技术人员所合成。
实施例1化合物1的合成
(2S)-{4-[2-(5-二甲基氨基-1-萘基)磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨 甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸
向Cd金属(15.2g，0.135mole)的DMF(125mL，经4分子筛干燥 24小时)悬浮液加入二乙基溴二氟甲基膦酸酯(21.7mL，0.122mole)和 冰乙酸(1.6mL)。在4分钟内开始放热，持续20分钟。将悬浮液搅拌 3小时，在室温下放置30-40分钟。然后将100mL这种溶液加入到甲 基N-Boc 4-碘苯基丙氨酸(11.0g，.027mole)中，继之以加入氯化铜 (I)(10.7g，0.108mole)，将反应物剧烈搅拌18小时。然后向反应混 合物加入剩余镉试剂溶液，将反应物搅拌另外48小时。加入乙醚(Et2O， 1000mL)，反应混合物通过Celite过滤。将Celite用另外的乙醚 (300mL)洗涤，合并乙醚层，用饱和氯化铵水溶液(NH4Cl，300mL)、饱 和碳酸氢钠水溶液(NaHCO3，300mL)、水(500mL)洗涤，然后经硫酸镁 (MgSO4)干燥。过滤，蒸发溶剂，得到19g粗产物。经过硅胶快速色谱 处理，使用30-45％乙酸乙酯/己烷洗脱，继之以在高真空下干燥产物， 偶尔用加热枪加热，得到5.8g＞95％纯的(2S)-{4-[2-叔丁氧羰基氨基 -2-(甲氧羰基)-乙基]-苯基}二氟甲基-膦酸二乙基酯。在0℃下，向 这种产物(1.0g，0.0021mole)的THF(25mL)溶液加入0.2N LiOH (21.0mL，0.0042mole)，将反应物在0℃下搅拌45分钟。将反应混 合物倒入含有0.2N HCl/EtOAc(各300mL)的分液漏斗。分离EtOAc 层，水层用EtOAc(100mL)洗涤。合并EtOAc层，经MgSO4干燥，过滤， 蒸发溶剂，在高真空下干燥后留下0.94g产物。在室温下，向这种产 物(0.94g，0.0021mole)的DMF(15mL)溶液加入羟基苯并三唑(HOBt， 0.35g，0.0023mole)、苯丁胺(0.36mL，0.0023mole)、EDC(0.44g， 0.0023mole)和DIEA(1.0mL，0.0059mole)，将溶液在室温下搅拌20 小时。加入EtOAc(150mL)和1N HCl(70mL)，将EtOAc层用饱和NaHCO3(70mL)、H2O(70mL)、盐水(70mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤，蒸发。 经过硅胶快速色谱处理，使用25％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到基本上纯 化的(2S)-{4-[2-叔丁氧羰基氨基-2-(4-苯基丁基-氨甲酰基)-乙基]- 苯基}二氟甲基膦酸二乙基酯(1.16g)。
在室温下，向所得二乙酯(0.55g，O.00094mole)的CH2Cl2(9.5mL) 溶液加入TFA(0.5mL)。将反应物搅拌1小时，继之以加入更多的TFA (0.5mL)，将反应物搅拌另外2小时。在旋转蒸发器上除去溶剂，残余 物在高真空下干燥15小时，得到产物(0.54g)。在室温下将这种产物 (0.05g，0.000084mole)溶于THF/饱和NaHCO3(各0.5mL)，加入丹磺 酰氯(0.024g，0.000088mole)，将反应物剧烈搅拌2小时，在此期间 形成悬液。加入H2O(4mL)，水层用EtOAc(10mL)萃取。将EtOAc层 用盐水(4mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤，蒸发。经过硅胶色谱处理， 使用10％MeOH/CHCl3洗脱，得到被一些丹磺酰氯污染的产物。将这种 产物溶于10％MeOH/CHCl3(5mL)，用胺树脂(PS-NH2200，1.86mmol/g， 100mg)处理10分钟，在旋转蒸发器上除去溶剂。这种过程重复三次。 将树脂溶于10％MeOH/CHCl3(5mL)，通过Celite过滤，继之以蒸发 溶剂，在高真空下干燥，得到(2S)-{4-[2-(5-二甲基氨基-1-萘基)磺 酰氨基-2-(4-苯基-丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸二乙基 酯(26mg)。
对(2S)-{4-[2-(5-二甲基氨基-1-萘基)磺酰氨基-2-(4-苯基-丁 基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基-膦酸二乙基酯进行下列实施例 2D的工艺，制备化合物1的2S异构体。MS(离子喷射)：m/z660.3 (M+H).
实施例2化合物2的合成
(2RS)-{4-[2-苯磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-2-溴 -苯基}二氟甲基膦酸
A.如同实施例1，使用Cd金属(8.5g，0.075mole)、二乙基溴 二氟甲基膦酸酯(18g，0.068mole)和AcOH(1.0mL)在DMF(80mL)中 生成镉试剂。将40mL这种溶液加入到CuCl(6.72g，0.068mole)中， 2分钟后加入3-溴-4-碘甲苯(5.0g，0.017mole)。将反应物悬浮液搅 拌28小时，然后加入更多的镉试剂溶液(30mL)，将反应物搅拌另外4 天。加入乙醚(700mL)，溶液通过Celite过滤。将Celite滤饼用另 外的乙醚(300mL)洗涤，合并乙醚层，用饱和氯化铵(500mL)和水(500mL) 洗涤，然后经硫酸镁干燥。过滤，蒸发溶剂，留下8.5g粗产物。经过 硅胶快速色谱处理，使用30％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到4.4g(2-溴-4- 甲基-苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯。向所得二乙基酯产物(1.8g， 0.005mole)的四氯化碳(CCl4，30mL)溶液加入AIBN(0.033g， 0.0002mole)和N-溴琥珀酰亚胺(NBS，0.89g，0.005mole)。将反应物 在回流下加热2小时(形成稀薄的白色悬浮液)。使反应达到室温， 在真空下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(EtOAc，120mL)，用饱和 NaHCO3(60mL)和盐水(60mL)洗涤，然后经MgSO4干燥。过滤，蒸发溶 剂，得到2.1g粗产物。经过硅胶快速色谱处理，使用20-30％乙酸乙 酯/己烷洗脱，得到1.11g(2-溴-4-溴甲基-苯基)-二氟-甲基膦酸二 乙基酯。
B.在室温下，向叔丁基二苯基亚氨基甘氨酸(0.14g， 0.00048mole)、如上所得(2-溴-4-溴甲基苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯 (0.21g，0.00048mole)四丁基硫酸氢铵(0.16g，0.00048mole)的二氯 甲烷(CH2Cl2，1.8mL)溶液加入10％NaOH溶液(1.2mL)，将反应物剧烈 搅拌7小时。将反应物用CH2Cl2(6mL)稀释，浓缩CH2Cl2层。将残余 物溶于Et2O(15mL)，用H2O(5mL)、盐水(5mL)洗涤，经MgSO4干燥5 分钟。过滤，蒸发溶剂，得到0.25g产物。经过硅胶快速色谱处理， 使用20％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到(2RS)-{4-[2-二苯甲叉氨基-2-(叔 丁氧羰基)-乙基]-2-溴苯基}-二氟甲基膦酸二乙基酯(0.17g)。在室温 下向这种产物(0.23g，0.00035mole)的THF(3mL)溶液加入1N HCl (10mL)，将反应物在室温下搅拌2小时。将水层用Et2O洗涤(3×10mL)， 在真空下浓缩，继之以在高真空下干燥20小时，得到0.122g中间体。 这种中间体化合物无需进一步纯化即可用于下一步。在-5 ℃下向中 间体产物(0.12g，0.00026mole)的Et2O(0.8mL)溶液加入1N NaOH (0.8mL)、水(0.8mL)和苯磺酰氯(PhSO2Cl，0.037mL，0.00029mole)， 将反应物搅拌1小时。加入更多的PhSO2Cl(0.037mL，0.00029mole)， 将反应物搅拌另外3小时，然后历经2小时达到室温。将水层用Et2O 萃取(3×4mL)，用1N HCl(1mL)酸化，用Et2O萃取(3×3mL)。合 并Et2O层(来自两次洗涤)，蒸发，将残余物用MeOH(5mL)和聚苯乙 烯胺树脂(PS-NH2 200，120mg)处理，在旋转蒸发器上摇动5分钟。蒸 发溶剂，加入MeOH(5mL)，溶液通过棉塞过滤。蒸发溶剂，在高真空 下干燥过夜，得到约0.142g磺酰胺酸产物。
C.在室温下，向如上所得磺酰胺酸(0.11g，0.00019mole)的DMF (2.3mL)溶液加入HOBt(0.032g，0.00021mole)、苯丁胺(0.033mL， 0.00021mole)、EDC(0.04g，0.00021mole)和DIEA(0.1mL， 0.00057mole)，将反应物搅拌过夜。加入EtOAc(15mL)和1N HCl (6mL)，将EtOAc层用饱和NaHCO3(6mL)、H2O(6mL)和盐水(6mL)洗涤， 然后经MgSO4干燥。过滤，蒸发溶剂，继之以经过硅胶快速色谱处理， 使用60％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到纯的(2RS)-{4-[2-苯磺酰氨基 -2-(4-苯基丁基-氨甲酰基)-乙基]-2-溴-苯基}二氟甲基膦酸二乙基 酯(0.028g)。
D.在室温下，向这种苯丁酰胺化合物(0.028g)的CH2Cl2(0.5mL) 溶液加入三甲基甲硅烷基溴(0.1mL)，将反应物在室温下搅拌过夜。除 去CH2Cl2，将残余物溶于CH2Cl2(1mL)，再次除去溶剂。将残余物在 高真空下干燥40分钟，然后溶于CH2Cl2(0.5mL)，用H2O(0.5mL)处 理，所得反应搅拌1小时。在旋转蒸发器上除去CH2Cl2，将水溶液借 助H2O转移至小瓶，冷冻，冻干，得到纯的化合物2(0.025g)。MS(离 子喷射)：m/z643.3/645.2(M-H)；645.2/647.1(M+H).1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ8.12(d，1H，J＝9.2Hz)7.89(t，1H，J ＝5.2Hz)，7.53(m，2H)，7.48(m，3H)，7.37(m，2H)，7.26(m， 2H)，7.17(m，4H)，3.91(m，1H)，2.81(m，3H)，2.65(m，1H)， 2.49(m，2H)，1.43(m，2H)，1.22(m，2H).
实施例3 化合物的合成3
(2RS)-(4-{2-苯磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)- 丁基氨甲酰基]乙基}-2-溴苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯和
(2RS)-(4-(2-苯磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)- 丁基氨甲酰基]乙基}-2-溴苯基)二氟甲基膦酸
(2RS)-(4-{2-苯磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧(2RS)-(4-{2-苯磺酰氨基-2-[4-(2-甲 羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰基]乙 氧羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰 基}-2-溴苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯 基]乙基}-2-溴苯基)二氟甲基膦酸
C32H38BrF2N2O10PS C28H30BrF2N2O10PS
确切质量：790.11 确切质量：734.05
3A 3
按照与实施例2C相似的工艺，从实施例2B所得磺酰胺酸制备 (2RS)-(4-{2-苯磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁基氨 甲酰基]乙基}-2-溴苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯(化合物3A)，例外的 是使用2-(4-氨基-丁氧基)-6-羟基苯甲酸甲基酯代替苯丁胺。2-(4- 氨基-丁氧基)-6-羟基-苯甲酸甲基酯是如下制备的，取2，6-二羟甲基 苯甲酸酯(1.0g，5.95mmol)、1.5当量N-Boc氨基丁醇与1.5当量三 苯基膦(2.34g，8.93mmol)的40mL CH2Cl2溶液，加入1.5当量DIAD (1.80g，8.93mmol)。继续在室温下搅拌1.5小时。蒸发至干，继之以 柱色谱处理(30％EtOAc/己烷)，得到2-(4-叔丁氧羰基氨基-丁氧 基)-6-羟基-苯甲酸甲基酯。将这种化合物在冰/盐水浴中冷却至0℃ 。向溶液中通入HCl气体达2分钟，继续搅拌1小时。蒸发至干，继 之以用乙醚沉淀，过滤，得到2-(4-氨基丁氧基)-6-羟基苯甲酸甲基 酯，为HCl盐。按照实施例2D的工艺从化合物3A制备化合物3。MS(离 子喷射)：m/z733.4/735.4(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ 9.91(br s，1H)，8.15(d，1H，J＝9.2Hz)，7.94(br s，1H)，7.55 (d，2H，J＝8.0Hz)，7.46(m，5H)，7.21(d，1H，J＝8.0Hz)， 7.15(t，1H，J＝8.0Hz)，6.47(m，2H)，3.95(m，1H)，3.85(m， 2H)，3.72(8，3H)，2.85(m，3H)，2.65(m，1H)，1.49(m，2H)， 1.35(m，2H).
实施例4化合物4的合成
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(羧基)-乙基]-苯基}二氟甲基-膦 酸二乙基酯
将L-4-碘-Phe(5.0g，17.2mmol)的100mL MeOH浆液在冰/盐水 浴中冷却至0℃。向混合物通入HCl气体达5分钟，此时原料溶解。 使混合物升温至室温，继续搅拌16小时。蒸发至干，继之以用乙醚沉 淀，过滤，得到4.62g(79％)L-4’-碘-Phe-Ome，即(2S)-2-氨基-3-(4- 碘苯基)-丙酸甲基酯，为HCl盐。向4.0g(11.7mmol)所得丙酸甲基 酯HCl盐的250mL THF/H2O(1∶1)溶液加入2.0当量Na2CO3，继之以 1.01当量Z-OSu(2.94g，11.8mmol)。将混合物在室温下搅拌4小时， 继之以用2×200mL EtOAc萃取。合并有机层，经Na2SO4干燥，蒸发。 经过柱色谱处理(20％EtOAc/己烷)，得到3.89g(76％)Cbz-L-4’- 碘-Phe-Ome，即(2S)-2-氨基-3-(4-碘苯基)-丙酸甲基酯。按照实施例 2中用于制备(2-溴-4-甲基-苯基)二氟-甲基膦酸二乙基酯的工艺，从 前面得到的Cbz-L-4’-碘-Phe-Ome、即(2S)-2-氨基-3-(4-碘苯基)- 丙酸甲基酯得到(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(甲氧羰基)乙基]苯基} 二氟甲基-膦酸二乙基酯。
在0℃下，向3.92g(7.85mmol)如上所得(2S)-{4-[2-苄氧羰基 氨基-2-(甲氧基-羰基)-乙基]-苯基}-二氟甲基膦酸二乙基酯的50mL THF溶液加入2当量LiOH(0.66g，15.7mmol)的50mL H2O溶液。继续 搅拌15分钟，此时TLC显示没有原料存在。将混合物倒入250mL EtOAc 和150mL 1N HCl中。水层然后用另外100mL EtOAc萃取。合并有机层， 经Na2SO4干燥，蒸发。经过柱色谱处理(1-5％MeOH/CH2Cl2)，得到3.5g (92％)化合物4。1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ12.77(s，1H)，7.70 (d，1H)，7.45(d，2H)，7.40(d，2H)，7.34-7.20(m，5H)，4.94 (m，2H)，4.20(m，1H)，4.08(m，4H)，3.12(dd，1H)，2.89(dd， 1H).1.18(t，6H).
实施例5 化合物5的合成
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-苯基丙基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟甲基膦酸
按照实施例2中的工艺C，从化合物4和苯丙胺制备(2S)-{4-[2- 苄氧羰基氨基-2-(3-苯基丙基氨甲酰基)-乙基]-苯基}-二氟甲基膦酸 二乙基酯。按照实施例2D所述工艺从所得产物制备化合物5。MS(离 子喷射)：m/z 547.3(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.04(t， 1H)，7.51(d，1H)，7.42(d，2H)，7.33-7.13(m，12H)，4.93(m， 2H)，3.05(m，2H)，2.95(dd，1H)，2.79(dd，1H)，2.53(t，2H)， 1.66(m，2H).
实施例6 化合物的合成6
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟-甲基膦酸
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟-甲基膦 酸
6
将200mg(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)- 乙基]-苯基}-二氟甲基膦酸二乙基酯(按照实施例2中的工艺C从化 合物4和苯丁胺制备)的溶液用氮气流脱气2分钟，同时搅拌。加入 5％Pd/C(40mg)，施加真空1分钟，直至发生冒泡。应用氢气囊，继 续搅拌30分钟，此时TLC显示没有原料存在。将混合物经过Celite 过滤，蒸发至干。将胺产物溶于5mL THF。加入5mL饱和NaHCO3，继 之以1当量苯磺酰氯，同时搅拌。将反应物倒入25mL EtOAc和25mL H2O 中。水层然后用另外25mL EtOAc萃取。合并有机层，经Na2SO4干燥， 蒸发。经过柱色谱处理(3％MeOH/CH2Cl2)，得到121mg(60％) (2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯基-丁基氨甲酰基)乙基]-苯基}二 氟甲基膦酸二乙基酯。按照实施例2所述工艺从这种产物制备化合物 6。MS(离子喷射)：m/z 567.4(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz) δ8.08(d，1H)，7.86(t，1H)，7.57(d，2H)，7.49(t，1H)， 7.41-7.35(m，4H)，7.29-7.25(m，4H)，7.17-7.14(m，3H)，3.93 (m，1H)，2.84-2.74(m，3H)，2.66(dd，1H)，2.49(m，2H)，1.40 (m，2H)，1.17(m，2H).
实施例7 化合物7的合成
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯 基}二氟甲基膦酸
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦酸
7
按照实施例2D中的工艺C，从化合物4和苯丁胺制备(2S)-{4-[2- 苄氧羰基氨基-2-(4-苯基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}-二氟甲基膦酸 二乙基酯。然后按照实施例2D所述工艺从这种产物制备化合物7。MS (离子喷射)：m/z561.4(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.98 (t，1H)，7.48(d，1H)，7.39(m，4H)，7.32-7.12(m，10H)，4.92 (s，2H)，4.17(m，1H)，3.05(m，2H)，2.93(dd，1H)，2.77(dd， 1H)，2.52(t，2H)，1.52(m，2H)，1.37(m，2H).
实施例8 化合物8的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)- 丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰基]- 乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
8
按照实施例2C中的工艺从化合物4和2-(4-氨基-丁氧基)-6-羟 基-苯甲酸甲基酯制备(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基 -3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸二乙基 酯。按照实施例2D所述工艺从(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2- 甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基-氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦 酸二乙基酯制备化合物8。MS(离子喷射)：m/z 651.3(M+H).1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ8.02(t，1H)，7.51(d，1H)，7.41(d，2H)， 7.35-7.24(m，7H)，7.14(t，1H)，6.46(m，2H)，4.94，(s，2H)， 4.20(m，1H)，3.92(t，2H)，3.71(s，3H)，3.09(m，3H)，2.80 (dd，1H)，1.57(m，2H)，1.48(m，2H).
实施例9 化合物9的合成
(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基) 丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]- 乙基)-苯基)二氟甲基膦酸
9
按照实施例6中的工艺制备(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[4-(2- 甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基-氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦 酸二乙基酯，使用(2S)-(4-{2-苄氧羰基-氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3- 羟基苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)-二氟-甲基膦酸二乙基酯作 为原料。按照实施例2D所述工艺，使用这种产物制备化合物9。MS(离 子喷射)：m/z 657.3(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ9.92 (s，1H)，8.11(d，1H)，7.90(t，1H)，7.57(d，2H)，7.49(t，1H)， 7.43-7.36(m，4H)，7.20(d，2H)，7.15(t，1H)，6.46(d，2H)， 4.05(m，4H)，3.9 3(m，1H)，3.84(t，2H)，3.71(s，3H)，2.86-2.76 (m，3H)，2.69(dd，1H)，1.43(m，2H)，1.28(m，2H).
实施例10 化合物10的合成
(2S)-(4-{2-甲基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基苯氧基)丁 基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-甲基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙 基}-苯基)二氟甲基膦酸
10
按照实施例6中的工艺制备(2S)-(4-{2-甲基磺酰氨基-2-[4-(2- 甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)-丁基-氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦 酸二乙基酯，使用(2S)-(4-{2-苄氧羰基-氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3- 羟基苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)-二氟甲基-膦酸二乙基酯和 甲磺酰氯作为原料，然后如同实施例2D处理，得到化合物10。1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ8.13(t，1H)，7.57(d，1H)，7.45(d，2H)， 7.36(d，2H)，7.14(t，1H)，6.46(m，2H)，4.02(m，1H)，3.92 (t，2H)，3.71(s，3H)，3.08(m，2H)，2.95(dd，1H)，2.79(dd， 1H)，2.55(s，3H)，1.57(m，2H)，1.46(m，2H).
实施例11 化合物11的合成
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-苯氧基-丙基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}二氟甲基膦酸
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-苯氧基-丙基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基 膦酸
11
A.将化合物4(470mg，0.97mmol)与NHS(138mg，1.2mmol)的 5mL CH2Cl2溶液用225mg(1.2mmol)EDC处理。20分钟后，向反应混 合物加入96μL 3-氨基-1-丙醇(1.2mmol)和372μL DIEA(2.1mmol)。 搅拌3天后，将溶液用CH2Cl2稀释，用1M HCl水溶液淬灭。分离各相， 有机层进一步用水洗涤。然后将有机溶液干燥(Na2SO4)，滗析，浓缩。 经过硅胶色谱处理，使用5％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到285mg (2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-羟基丙基氨甲酰基)-乙基]-苯基}- 二氟甲基膦酸二乙基酯(54％)。
B.将这种产物(282mg，0.52mmol)与苯酚(51mg，0.54mmol)的 20mL THF溶液冷却至0℃，用110μL DIAD(0.57mmol)处理。搅拌 20小时后，在真空下浓缩反应混合物，溶于25mL EtOAc，先后用5％ NaHCO3水溶液(2×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤。经Na2SO4干燥后， 滗析溶液，浓缩至583mg。经过硅胶色谱处理，使用50-100％EtOAc 的己烷溶液洗脱，得到50mg(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(3-苯氧基 -丙基氨甲酰基)乙基]苯基}二氟甲基膦酸二乙基酯(15％)。
C.将这种产物(49mg，79μmol)的CH2Cl2溶液用500μL溴三甲 基硅烷处理。将溶液搅拌过夜，然后在真空下浓缩至干，溶于CH2Cl2， 在真空下再浓缩，得到固体。将固体在真空下贮存4小时，然后用3mL 苯、2mL蒸馏水和38mg(0.47mmol)NaHCO3处理。将所得白色浆液搅 拌15分钟，然后沉降和分离。将水层用3mL苯洗涤，冷冻，然后冻干， 用15mL蒸馏水再生，再次冷冻和冻干。进一步经过HPLC纯化得到 15.7mg化合物11(35％)。MS(离子喷射)：m/z563.3(M+H)，561.3 (M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.06(dd，1H)，7.49(d，1H)， 7.36(d，2H)7.18-7.30(m，9H)，6.83-6.86(m，3H)，4.88(s，2H)， 4.11-4.17(m，1H)，3.85-3.88(m，2H)，3.13-3.20(m，2H)， 2.91-2.94(m，2H)2.70-2.78(m，1H)，1.77-1.78(m，2H).
实施例12 化合物12的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-甲基-苯氧基) 丁基-氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-甲基-苯氧基)丁基-氨甲酰基]- 乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
12
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备(2S)-(4-{2-苄氧羰 基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-甲基-苯氧基)-丁基氨甲酰基]-乙基}- 苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯，例外的是采用2-(4-氨基-丁氧基)-6- 甲基-苯甲酸甲基酯作为偶联配偶体。经过硅胶色谱处理，使用2％甲 醇性CH2Cl2洗脱，得到产物(23％)。从前述工艺产物开始，然后按照实 施例11C的去保护工艺制备化合物12，得到57mg。这种产物进一步经 过HPLC纯化，得到7.4mg化合物12(8％)。MS(离子喷射)：m/z 649.3(M+H)，647.3(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.03(dd， 1H)，7.52(d，1H)，7.23-7.42(m，10H)，6.88(s，1H)，6.80(s， 1H)，4.93(s，2H)，4.17-4.23(m，1H)，3.94(dd，2H)，3.76(s， 3H)，3.03-3.10(m，2H)，2.90-2.98(m，1H)，2.15(s，3H)， 1.57-1.60(m，2H)，1.43-1.49(m，2H)，1.22(s，3H).
实施例13 化合物13的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-甲氧基-苯氧基)丙基氨甲酰 基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-甲氧基-苯氧基)丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基) 二氟甲基膦酸
13
一般按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物13，例 外的是采用3-(4-甲氧基-苯氧基)-丙基胺作为偶联配偶体，二环己基 碳二亚胺作为偶联剂。经过硅胶色谱处理，使用30％EtOAc的己烷、 继之以1至3％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到103mg(2S)-(4-{2-苄氧羰基 氨基-2-[3-(4-甲氧基-苯氧基)丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基 膦酸二-乙基酯(78％)。然后按照实施例11C的去保护工艺，将这种产 物转化为化合物13，继之以经过HPLC纯化，得到29mg产物(31％)。 MS(离子喷射)：m/z 593.3(M+H)，591.4(M-H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ8.10(dd，1H)，7.52(d，1H)，7.23-7.42(m，9H)，6.82 (s，4H)，4.93(s，2H)，4.18-4.20(m，1H)，3.85(dd，2H)，3.66 (s，3H)，3.18-3.35(m，2H)，2.94-2.98(m，1H)，2.78-2.82(m， 1H)，1.75-1.79(m，2H).
实施例14化合物14的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-氯-苯氧基)丙基氨甲酰基]- 乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-氯-苯氧基)丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二 氟甲基膦酸
14
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物14，例外的 是采用3-(4-氯苯氧基)-丙基胺作为偶联配偶体，和0.5M HOAt的DMF 溶液代替NHS。经过多次硅胶色谱处理，使用2％甲醇性CH2Cl2和50- 100％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基 -2-[3-(4-氯-苯氧基)丙基-氨甲酰基]乙基}苯基)二氟甲基膦酸二乙 基酯(10％)。然后按照实施例11C的去保护工艺将这种产物转化为化合 物14，继之以经过HPLC纯化，得到6.9mg化合物14(45％)。MS(离 子喷射)：m/z597.2(M+H)，595.4(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ8.10(dd，1H)，7.52(d，1H)，7.23-7.42(m，9H)，6.90 (d，2H)，4.93(s，2H)，4.18-4.20(m，1H)，3.85(dd，2H)， 3.18-3.35(m，2H)，2.94-2.98(m，1H)，2.78-2.82(m，1H)， 1.75-1.79(m，2H).
实施例15化合物15的合成
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯氧基-丁基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}-二氟甲基膦酸二乙基酯
(2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯氧基-丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}-二氟甲基 膦酸
15
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物15，例外的 是采用4-苯氧基-丁基胺作为偶联配偶体，和HOBt的DMF溶液代替 NHS。经过硅胶色谱处理，使用1-2％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到 (2S)-{4-[2-苄氧羰基氨基-2-(4-苯氧基-丁基-氨甲酰基)-乙基]-苯 基}-二氟甲基膦酸二乙基酯(38％)。然后按照实施例11C的去保护工艺 将这种产物转化为化合物15，继之以经过HPLC纯化，得到7.3mg化 合物15(15％)。MS(离子喷射)：m/z577.2(M+H)，575.2(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.03(dd，1H)，7.52(d，1H)， 7.23-7.42(m，10H)，6.87-6.90(m，3H)，4.93(s，2H)，4.17-4.20 (m，1H)，3.92(dd，2H)，3.10(ddd，2H)，2.97(ddd，1H)，2.78 (ddd，1H)，1.63-1.67(m，2H)，1.49-1.54(m，2H)，1.22(s，1H)
实施例16化合物16的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰 基]-乙基}-苯基)-二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲酰基]-乙基}-苯 基)-二氟甲基膦酸
16
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物16，例外的 是采用3-(4-氨基-丁氧基)-苯酚作为偶联配偶体，和HOBT的DMF溶 液代替NHS。经过硅胶色谱处理，使用1-4％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到 中间体(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(3-羟基-苯氧基)-丁基氨甲 酰基]-乙基}-苯基)-二氟-甲基膦酸二乙基酯(52％)。然后按照实施例 11C的去保护工艺将这种产物转化为化合物16，得到47mg产物(57％)。 MS(离子喷射)：m/z593.2(M+H)，591.2(M-H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ8.03(dd，1H)，7.50(d，1H)，7.24-7.42(m，10H)， 7.01(dd，1H)，6.30-6.34(m，3H)，4.94(s，2H)，4.16-4.24(m， 2H)，3.86(dd，2H)，3.06-3.15(m，2H)，2.94-3.00(m，1H)，2.80 (dd，1H)，1.60-1.68(m，2H)，1.46-1.54(m，2H).
实施例17化合物17的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基苯氧基)丁基-氨甲 酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基苯氧基)丁基-氨甲酰基]-乙基}-苯 基)二氟甲基膦酸
17
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物17，例外的 是采用2-(4-氨基-丁氧基)-苯甲酸甲基酯作为偶联配偶体，和二异丙 基碳二亚胺作为偶联剂。经过多次硅胶色谱处理，使用2.5-5％甲醇 性CH2Cl2、再用50-100％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到中间体化合物 (2S)-(4-{2-苄氧羰基-氨基-2-[4-(2-甲氧羰基苯氧基)丁基氨甲酰 基]-乙基}-苯基)-二氟-甲基膦酸二乙基酯(63％)。然后按照实施例 11C的去保护工艺将这种产物转化为化合物17，继之以经过HPLC纯化， 得到23.1mg化合物17(16％)。MS(离子喷射)：m/z635.2(M+H)， 633.3(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.04(dd，1H)，7.60 (dd，1H)，7.46-7.54(m，2H)，7.21-7.43(m，9H)，7.10(d，1H)， 6.98(dd，1H)，4.93(s，2H)，4.18-4.24(m，1H)，4.00(dd，2H)， 3.75(s，3H)，3.08-3.16(m，2H)，2.94-3.00(m 2H)，2.76-2.84 (m，1H)，1.60-1.70(m，2H)，1.50-1.60(m，2H).
实施例18化合物18的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-乙酰基-2-硝基-苯氧基)-丙 基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-乙酰基-2-硝基-苯氧基)-丙基氨甲酰基]-乙 基}-苯基)二氟甲基膦酸
18
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物18，例外的 是采用1-[4-(3-氨基-丙氧基)-3-硝基-苯基]-乙酮作为偶联配偶体。 经过硅胶色谱处理，使用1至4％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到47mg中间 体化合物(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-乙酰基-2-硝基苯氧 基)-丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟-甲基膦酸二乙基酯(32％)。然后 按照实施例11C的去保护工艺将这种产物转化为化合物18，继之以经 过HPLC纯化，得到23.1mg化合物18(69％).
实施例19化合物19的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-甲基-苯氧基)-丙基氨甲酰 基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(4-甲基-苯氧基)-丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基) 二氟甲基膦酸
19
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物19，例外的 是采用3-对-甲苯氧基-丙基胺作为偶联配偶体，和0.5M HOAt的DMF 溶液代替NHS。经过多次硅胶色谱处理，使用1至4％甲醇性CH2Cl2和 50％EtOAc的己烷溶液洗脱，得到37mg中间体化合物(2S)-(4-{2-苄 氧羰基氨基-2-[3-(4-甲基-苯氧基)-丙基氨甲酰基]-乙基}-苯基)-二 氟-甲基膦酸二乙基酯(29％)。然后按照实施例11C的去保护工艺将这 种产物转化为化合物19，继之以经过HPLC纯化，得到17mg化合物19 (46％)。MS(离子喷射)：m/z577.3(M+H)，575.4(M-H).1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ8.10(s，1H)，7.52(d，1H)，7.23-7.44(m， 8H)，7.04(d，2H)，6.78(d，2H)，4.93(s，2H)，4.20(brm，1H)， 3.88(brm，2H)，3.15 3.24(m，2H)，2.92-3.00(m，2H)， 2.75-2.84(m，1H)，2.20(s，3H).
实施例20化合物20的合成
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(3，4-二氯-苯氧基)-丙基氨甲 酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[3-(3，4-二氯-苯氧基)-丙基氨甲酰基]-乙基}-苯 基)二氟甲基膦酸
按照实施例11A的偶联工艺，从化合物4制备化合物20，例外的 是采用3-(3，4-二氯-苯氧基)-丙基胺作为偶联配偶体，和0.5M HOAt 的DMF溶液代替NHS。经过硅胶色谱处理，使用20至50％EtOAc的CH2Cl2溶液洗脱，得到14mg中间体化合物(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基 -2-[3-(3，4-二氯-苯氧基)-丙基-氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦 酸二乙基酯(13％)。然后按照实施例11C的去保护工艺将这种产物转化 为化合物20，得到3mg产物(24％)。MS(离子喷射)：m/z631.1(M+H)， 629.4(M-H)，631.4(M+2-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.10 (dd，1H)，7.1-7.58(m，12H)，6.90(dd，1H)，4.92(s，2H)， 4.18-4.20(m，1H)，3.85(dd，2H)，3.18-3.35(m，2H)，2.94-2.98 (m，1H)，2.78-2.82(m，1H)，1.75-1.79(m，2H).
实施例21化合物21的合成
(4-{2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}- 苯基)二氟甲基膦酸
(4-{2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦 酸C22H26F2NO8P
确切质量：501.14
21
按照实施例1的工艺从3-(4-碘苯基)-丙酸甲基酯制备(4-甲氧 羰基乙基苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯，得到53％产物。将这种化合物 (675mg，1.93mmol)在10mL 1∶1水∶THF(v∶v)中的溶液冷却至0℃。 加入LiOH·H2O(178mg，4.24mmol)，将反应物搅拌30分钟。将反应物 用NH4Cl水溶液淬灭，用1M HCl调节pH＝4。将粗产物萃取到EtOAc 中，干燥，浓缩至385mg。经由二氧化硅色谱纯化(2.5％甲醇性CH2Cl2)， 得到160mg(4-羧基乙基-苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯(25％)。按照实 施例11A的工艺使这种二乙基酯与2-(4-氨基-丁氧基)-6-羟基-苯甲 酸甲基酯偶联，例外的是采用二环己基碳二亚胺作为偶联剂。经过多 次硅胶色谱处理，使用甲醇性CH2Cl2洗脱，得到157mg中间体化合物 (4-{2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基苯氧基)丁基氨甲酰基]乙基}苯基)二 氟甲基-膦酸二乙基酯(61％)。然后按照实施例11C的工艺将中间体化 合物转化为化合物21，得到31mg化合物21(34％)。1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ9.90(s，1H)，7.84(dd，1H)，7.42(d，2H)，7.29(d， 2H)，7.30(dd，1H)，6.45-6.48(m，2H)，3.90(dd，2H)，3.71(s， 3H)，3.05，(dd，2H)，2.84(dd，2H)，2.37(dd，2H)，1.50-1.62 (m，2H)，1.40-1.50(m，2H).
实施例22化合物22的合成
(2S)-(4-{2-(4-十二烷基苯基磺酰氨基)-2-[4-(2-甲氧羰基-3- 羟基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-(4-十二烷基苯基磺酰氨基)-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基-苯氧基)丁 基氨甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
22
A.将(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-3-羟基苯 氧基)丁基氨甲酰基]乙基}苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯(在实施例8 中生成)(250mg，0.35mmol)的25mL甲醇溶液脱气，用氮覆盖，冷却， 加入50mg 5％披钯碳。用H2置换气氛，将反应物在20℃下搅拌1小 时。用氮置换气氛，通过Celite塞过滤溶液。将Celite塞先后用 甲醇冲洗，在真空中浓缩所得溶液至干，得到207mg游离胺。
B.将游离胺溶于10mL THF，用135mg 4-十二烷基-苯磺酰氯和 0.35mL 1M K2CO3处理。将反应物搅拌过夜，然后用氯化铵水溶液淬灭。 用1M HCl调节pH＝4后，将产物萃取到EtOAc中，干燥，浓缩至294mg 产物。通过多次二氧化硅色谱纯化，使用甲醇性CH2Cl2和EtOAc的 CH2Cl2溶液洗脱，得到57mg二乙基膦酸酯。
C.按照实施例11C的工艺完成膦酸酯的去保护，生成19mg产 物。这种产物的HPLC纯化得到4mg化合物22(1.4％)。MS(离子喷射)： m/z825.4(M+H)，823.5(M-H).
实施例23化合物23的合成
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯氧基丁基氨甲酰基)-乙基]- 苯基}-二氟甲基膦酸
(2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯氧基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}-二氟甲基 膦酸
23
利用实施例22的工艺A去保护在实施例15中生成的(2S)-{4-[2- 苄氧羰基氨基-2-(4-苯氧基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基}二氟甲基膦 酸二乙基酯。将所得胺(87mg，175μmol)无需进一步纯化，溶于4mL CH2Cl2，用60μL吡啶(369μmol)和54μL苯磺酰氯(420μmol)处理。 搅拌18小时后，将反应物用20mL CH2Cl2稀释，先后用20mL 1M HCl 和20mL水洗涤。将有机溶液干燥(Na2SO4)，浓缩至137mg。经过硅胶 色谱处理，使用2％甲醇性CH2Cl2洗脱，得到78mg中间体化合物 (2S)-{4-[2-苯基磺酰氨基-2-(4-苯氧基丁基氨甲酰基)-乙基]-苯基} 二氟甲基膦酸二乙基酯(70％)。按照实施例11C的工艺将这种中间体化 合物转化为化合物23，得到70mg。进一步经过HPLC纯化，得到2mg 基本上纯化的化合物23。MS(离子喷射)：m/z583.1(M+H)，581.2 (M-H)
1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.10(d，1H)，7.91(dd，1H)， 7.58(dd，2H)，7.20-7.50(m，9H)，6.88-6.92(m，3H)，3.96(ddd， 1H)，3.86(dd，2H)，2.80-2.86(m，3H)，2.68(dd，1H)，1.46-1.54 (m，2H)，1.27-1.35(m，2H).
实施例24化合物24的合成
(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-苯氧基)丁基氨 甲酰基]-乙基}-苯基)二氟甲基膦酸
(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基-2-[4-(2-甲氧羰基-苯氧基)丁基氨甲酰基]-乙基}- 苯基)二氟甲基膦酸
24
按照实施例23的工艺，从(2S)-(4-{2-苄氧羰基氨基-2-[4-(2- 甲氧羰基-苯氧基)丁基氨甲酰基]乙基}苯基)-二氟甲基膦酸二乙基酯 (在实施例17中生成)得到中间体化合物(2S)-(4-{2-苯基磺酰氨基 -2-[4-(2-甲氧基-羰基苯氧基)丁基氨甲酰基]乙基}苯基)二氟甲基膦 酸二乙基酯，得到78mg(66％)。按照实施例11C的工艺从这种中间体 化合物制备化合物24，得到76mg产物(99％)。1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ7.92(dd，1H)，7.56-7.63(m，3H)，7.40-7.52(m，4H)， 7.37(d，2H)，7.11(d，1H)，7.06(d，2H)，6.98(ddd，1H)， 3.88-3.94(3H)，3.76(s，3H)，2.78-2.88(m，3H)，2.62-2.66(m， 1H)，1.45-1.52(m，2H)，1.34-1.40(m，2H).
实施例25化合物25的合成
(2-溴-4-甲基苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯
向8.5g Cd金属(0.075mole)的80mL DMF(经过4分子筛干燥 24小时)悬浮液加入18g二乙基溴二氟-甲基膦酸酯(0.068mole)和1mL 冰乙酸。在4分钟内开始放热，持续20分钟。将悬浮液搅拌3小时， 在室温下放置30-40分钟。将40mL这种溶液加入到6.72g CuCl (0.068mole)中，2分钟后加入5g 3-溴-4-碘甲苯(0.017mole)。将反 应物悬液搅拌28小时，然后加入更多的镉试剂溶液(30mL)，将反应物 搅拌另外4天。加入乙醚(700mL)，通过Celite过滤溶液。将Celite 滤饼用300mL乙醚洗涤，合并乙醚层，用500mL饱和氯化铵和500mL 水洗涤，然后经硫酸镁干燥。过滤，蒸发溶剂，留下8.5g粗产物。经 过硅胶快速色谱处理，使用30％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到4.4g化合 物25。
实施例26化合物26的合成
(2-溴-4-溴甲基苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯
向1.8g(0.005mole)如上实施例25所得化合物25的30mL四氯 化碳溶液加入AIBN(0.033g，0.0002)和N-溴琥珀酰亚胺(NBS，0.89g， 0.005mole)。然后将反应物在回流下加热2小时。使反应达到室温， 在真空下除去溶剂。将残余物溶于120mL乙酸乙酯，用60mL饱和NaHCO3和60mL盐水洗涤，然后经MgSO4干燥。过滤，蒸发溶剂，得到2.1g 粗产物。经过硅胶快速色谱处理，使用20-30％乙酸乙酯/己烷洗脱， 得到1.11g化合物26。可以按照与实施例40工艺相似的方式处理化 合物26，得到(2-溴-4-溴甲基苯基)二氟甲基膦酸。
实施例27化合物27的合成
[(2-溴-4-氰基甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯
向化合物26(3.3g，0.0076mole)的DCM(16mL)溶液加入H2O (16mL)、四丁基氯化铵(0.16g)和氰化钾(0.98g，0.015mole)，将反 应物在室温下搅拌4小时。将反应混合物用DCM(100mL)稀释，用H2O (2×100mL)、1N HCl(1×100mL)洗涤，经Na2SO4干燥。经过硅胶快 速色谱处理，使用60％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到1.50g化合物27。可 以按照与实施例40工艺相似的方式处理化合物27，得到[(2-溴-4-氰 基甲基苯基)二氟甲基]-膦酸。
实施例28化合物28的合成
{[2-溴-4-(2-叔丁氧羰基氨基乙基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基 酯
28
在0℃下，向1.14g(0.003mole)化合物27的MeOH(90mL)溶液 加入1.32g Boc2O(0.006mole)和CoCl2.6H2O(0.72g，0.003mole)。 当全部CoCl2.6H2O都溶解时，历经15分钟分三份加入0.78g NaBH4(0.021mole)；在0℃下40分钟后蒸发溶剂。将所得固体溶于EtOAc/ 饱和NaHCO3(各120mL)，通过Celite过滤，分离EtOAc层，经Na2SO4干燥。经过硅胶快速色谱处理，使用2％MeOH/CHCl3洗脱，得到0.95g 化合物28。
实施例29化合物29的合成
{[4-(2-氨基-乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯盐酸盐
在室温下，向0.95g(0.002mole)化合物28加入16mL 4N HCl的 二烷溶液，将反应物搅拌2小时。在旋转蒸发器上除去溶剂，所得 油在高真空下干燥若干小时，得到0.85g化合物29。
实施例30化合物30的合成
{[2-溴-4-(2-苯甲酰氧基氨基乙基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基 酯
向0.61g(0.0014mole)化合物29的pH10.5缓冲溶液(8mL)一次 性加入过氧化苯甲酰(0.35g，0.0014mole)的8mL DCM溶液，将溶液在 室温下搅拌过夜。21hr后，将反应物用35mL DCM稀释，用饱和NaHCO3(10mL)洗涤。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，得到粗产物(0.66g)。 经过硅胶快速色谱处理，使用4O％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到0.39g化 合物30。
实施例31化合物31的合成
{[2-溴-4-(2-乙基氨基乙基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯
在0℃下，向0.4N Na2CO3(1mL)加入Et3B(0.92mL，0.00092mole) 的1M THF溶液。历经2分钟滴加0.39g化合物30(0.00077mole)的 THF(1.5mL)溶液，搅拌反应直至达到室温(历经1小时)，然后搅拌 4小时。在旋转蒸发器上除去THF，加入H2O(5mL)，水层用DCM萃取 (2×15mL)。将DCM层经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，得到化合物31 (0.23g)。
实施例32化合物32的合成
[(4-叠氮基甲基-2-溴苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯
在室温下，向2.0g(0.0046mole)化合物26的DMSO(10mL)溶 液加入0.6g NaN3(0.009mole)，将反应物搅拌60小时。将反应物用 250mL乙醚稀释，用150mL水和150mL 1N HCl洗涤，经Na2SO4干燥， 过滤，蒸发，留下0.55g粗产物。经过硅胶快速色谱处理，使用40％ 乙酸乙酯/己烷洗脱，得到0.31g化合物32。
实施例33化合物的合成33
甲基-[4-(膦酰基二氟甲基)苯基]乙酸二乙基酯
向0.4g化合物27(0.0011mole)的0.22mL MeOH溶液加入TMSCl (0.32mL，0.0025mole)，将反应物烧瓶置于预加热至47℃的油浴中， 搅拌4小时。加入水(0.05mL)和Na2CO3(0.12g)，5分钟后将反应物 用15mL DCM稀释，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，留下0.39g粗产物。 经过硅胶快速色谱处理，使用40％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到0.2g化 合物33。
实施例34化合物34的合成
3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲基)乙酸
在0℃下，向0.08g化合物33(0.00019mole)的THF/H2O(备 1.0mL)溶液加入LiOH.H2O(0.0085g，0.0002mole)，将反应物搅拌100 分钟。将反应混合物加入到两相0.2N HCl/EtOAc(各20mL)中，分离 EtOAc层，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，得到化合物34。
实施例35化合物35的合成
3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲基)苯甲酸
向1.0g(0.0023mole)化合物26的10mL DMSO溶液加入NaNO2(0.49g，0.0071mole)，继之以1.3mL乙酸。将反应物在室温下搅拌1 小时，然后在30℃下搅拌1小时。将反应物用Et2O(120mL)稀释， 用75mL 1N HCl洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，留下1.0g粗产物。 经过硅胶快速色谱处理，使用4％MeOH/CHCl3洗脱，得到0.15g化合 物35和0.04g[(2-溴-4-羟甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯。
实施例36化合物36的合成
{[4-(2-苯甲酰氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯
向化合物29(0.1g，0.00024mole)的1.5mL DCM溶液加入DIEA (0.045mL，0.00026mole)、吡啶(0.021mL，0.00026mole)和苯甲酰氯 (0.031mL，0.00026mole)，将反应物在室温下搅拌5小时。加入DCM (8mL)，用8mL 1N HCl、饱和NaHCO3(8mL)、8mL盐水洗涤，然后经 Na2SO4干燥，过滤，然后蒸发。经过硅胶快速色谱处理，使用2％ MeOH/CHCl3洗脱，得到0.083g化合物36。
作为替代选择，将化合物29溶于DMF(0.2M)，用HOBt.H2O (1equiv)、羧酸(1equiv)、EDC(1equiv)和DIEA(3equiv)处理，在 室温下搅拌过夜。操作与下列实施例39相同。
实施例37化合物37的合成
{[4-(苯甲酰氨基甲基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯
向化合物32(0.033g，0.000083mole)的1mL THF溶液加入三苯 基膦(0.023g，0.000084mole)，将反应物在室温下搅拌4小时。加入 苯甲酰氯(0.01mL，0.000083mole)，将反应物搅拌过夜。向所得悬浮 液加入0.02mL H2O，将反应物搅拌另外3.5小时。在旋转蒸发器上除 去THF，将残余物溶于8mL EA，用1N HCl(5mL)、饱和NaHCO3(5mL) 洗涤，经Na2SO4干燥，然后过滤，蒸发。经过制备型TLC纯化，使用 40％EtOAc/DCM洗脱，得到0.014g化合物37。
实施例38化合物38的合成
[(2-溴-4-哌啶-1-基甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯
在室温下，向0.1g(0.00023mole)化合物26的DMF(1.0mL)溶 液加入0.04mL DIEA(0.00023mole)和0.024mL哌啶(0.00024mole)， 将反应物搅拌40分钟。加入DCM(10mL)，将溶液用饱和NaHCO3(10mL)、 盐水(10mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥，然后过滤，蒸发。经过硅胶快 速色谱处理，使用2％MeOH/CHCl3洗脱，得到0.078g化合物38。
实施例39化合物39的合成
{[2-溴-4-(苯乙基氨甲酰基-甲基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯
在室温下，向0.11g化合物34(0.00027mole)的2mL DMF溶液 加入HOBt.H2O(0.042g，0.00027mole)、苯乙胺(0.035mL， 0.00027mole)、EDC(0.053g，0.00027mole)和DIEA(0.14mL， 0.00081mole)，将反应物搅拌17小时。然后将反应物用30mL EtOAc 稀释，用1N HCl(30mL)、饱和NaHCO3(30mL)、盐水(30mL)洗涤，然 后经Na2SO4干燥，然后过滤和蒸发。经过硅胶快速色谱处理，使用6％ MeOH/CHCl3洗脱，得到0.077g化合物39。
实施例40化合物40的合成
[(2-溴-4-甲基苯基)二氟甲基]膦酸
在室温下，向0.036g(0.0001mole)化合物25的0.5mL CH2Cl2溶液加入三甲基甲硅烷基溴(0.13mL)，将反应物在室温下搅拌过夜。 除去CH2Cl2，将残余物溶于1mL CH2Cl2，再次除去溶剂。将残余物在 高真空下干燥40分钟，然后溶于CH2Cl2(1.0mL)，用H2O(1.0mL)处 理，所得反应搅拌1小时。在旋转蒸发器上除去CH2Cl2，将水溶液接 种H2O/CH3CN转移至小瓶，冷冻，冻干，得到0.030g化合物40。
实施例41化合物41的合成
[(2-溴-4-((2-叔丁氧基氨甲酰基肼基)甲基)苯基)二氟甲基]膦 酸二乙基酯
在室温下，向化合物26(0.2g，0.00046mole)的THF(5mL)溶 液加入肼基甲酸叔丁酯(0.5g，0.0038mole)，将反应物搅拌65小时。 除去溶剂，得到粗产物。经过硅胶快速色谱处理，使用35％EtOAc/DCM 洗脱，得到0.2g纯的化合物41。
实施例42化合物42的合成
[(2-溴-4-肼基甲基苯基)二氟甲基]膦酸
按照与上述实施例40相似的方式处理化合物41(0.05g)，得到 0.04g产物化合物42。MS(离子喷射)：m/z330.95/332.92(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(s，1H)7.59(d，1H，J＝8.0Hz)， 7.45(d，1H，J＝8.0Hz)，4.02(s，2H).
实施例43化合物43的合成
({2-溴-4-[3-(4-苯基丁基)-1-氨基脲基甲基]苯基}二氟甲基)膦 酸
将化合物41(0.21g，0.00043mole)的THF(2mL)溶液用CDI (0.07g，0.00043mole)和催化性DMAP(几粒晶体)处理，将反应物在 室温下搅拌24小时。加入苯丁胺(0.068mL，0.00043mole)，将反应物 搅拌20小时。除去THF，将残余物溶于20mL EtOAc，用1N HCl(20mL)、 盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发。经过硅胶快速色谱处 理，使用30％EtOAc/DCM洗脱，得到0.145g Boc-保护的产物。按照 与实施例40相似的方式处理这种产物，得到0.015g化合物43。MS(离 子喷射)：m/z504.03/506.01(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ 7.65(d，1H，J＝8.0Hz)7.52(s，1H)，7.26(m，3H)，7.17(m， 3H)，6.94(brs，1H)4.57(s，2H)，3.08(m，2H)，2.57(m，2H)， 1.55(m，2H)，1.44(m，2H).
实施例44化合物44的合成
[(2-溴-4-(苯磺酰亚肼基甲基)苯基)二氟甲基]膦酸
在室温下，向0.33g(0.00075mole)化合物26的3mL乙腈溶液 加入0.16g(0.0009mole)苯磺酰肼，将反应物在回流下加热7小时。 在旋转蒸发器上除去溶剂，在高真空下干燥残余物。经过硅胶快速色 谱处理，使用50％EtOAc/己烷洗脱，得到0.1g[(2-溴-4-(苯磺酰亚 肼基甲基)-苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的方 式处理这种产物，得到0.045g化合物44。MS(离子喷射)：m/z 467.15/469.19(M-H)
实施例45化合物45的合成
[(2-溴-4-氰基甲基苯基)二氟甲基]膦酸
按照与上述实施例40相似的方式处理化合物27(0.026g， 0.000068mole)，得到0.02g化合物45。MS(离子喷射)：m/z 325.85/326.95(M+H)，347.89/349.93(M+Na)
实施例46化合物46的合成
{[4-(2-苯磺酰氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
在室温下，将游离碱化合物29(0.08g，0.00021mole)的1mL DCM 溶液用4-甲基吗啉(0.046mL，0.00042mole)和苯磺酰氯(0.026mL， 0.00021mole)处理，将反应物搅拌6小时。除去溶剂，将残余物溶于 10mL EtOAc，用10mL 1N HCl洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，蒸发。经 过硅胶快速色谱处理，使用60％EtOAc/己烷洗脱，得到0.02g{[4-(2- 苯磺酰氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯。按照与上述实 施例40相似的方式处理这种中间体，得到所需产物化合物46。MS(离 子喷射)：m/z468.01/469.99(M-H)
实施例47化合物47的合成
{[4-(2-乙酰基氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
如同实施例36处理化合物29，例外的是用乙酸酐代替苯甲酰 氯，得到所需中间体{[4-(2-乙酰基氨基-乙基)-2-溴苯基]二氟甲基} 膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的方式处理这种中间体，得到化 合物47。MS(离子喷射)：m/z370.2/372.17(M-H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ7.91(t，1H，J＝5.6Hz)7.55(s，1H)，7.52(d，1H， J＝8.4Hz)，7.30(d，1H，J＝8.4Hz)，3.25(m，2H)，2.7(t， 2H，J＝7.2Hz)，1.76(s，3H)
实施例48化合物48的合成
{[4-(2-苯甲酰氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物36，得到化合物48。 MS(离子喷射)：m/z432.14/434.12(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ8.57(t，1H，J＝5.6Hz)，7.79(m，2H)7.60(s，1H)， 7.46(m，4H)，7.35(d，1H，J＝8.4Hz)，3.5(m，2H)，2.87(t， 2H，J＝7.6Hz)
实施例49化合物49的合成
{[2-溴-4-(2-苯基乙酰基氨基乙基)苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例36相似的方式处理化合物29，例外的是用苯乙酰 氯代替苯甲酰氯，得到中间体{[2-溴-4-(2-苯基乙酰基氨基乙基)苯基] 二氟甲基}膦酸二乙基酯，按照与上述实施例40相似的方式处理，得 到化合物49。MS(离子喷射)：m/z446.02/448.00(M-H).1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ8.11(t，1H，J＝5.6Hz)，7.55(s，1H)7.50 (d，1H，J＝8.4Hz)，7.27(m，3H)，7.21(m，3H)，3.36(s，2H)， 3.29(m，2H)，2.73(t，2H，J＝7.2Hz)
实施例50化合物50的合成
({2-溴-4-[2-(3-苯基丙酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基)膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物29，例外的是用氢化肉 桂酰氯代替苯甲酰氯，得到({2-溴-4-[2-(3-苯基丙酰氨基)乙基]苯基} 二氟甲基)膦酸二乙基酯，然后按照与上述实施例40相似的方式处理， 得到化合物50。MS(离子喷射)：m/z459.98/461.95(M-H)
实施例51化合物51的合成
({2-溴-4-[2-(4-苯基丁酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基)膦酸
按照上述实施例36的替代工艺偶联化合物29与4-苯基丁酸， 得到({2-溴-4-[2-(4-苯基丁酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基)膦酸二乙 基酯，按照与实施例40相似的方式对其进行处理，得到化合物51。 MS(离子喷射)：m/z473.94/476.04(M-H)
实施例52化合物52的合成
({2-溴-4-[2-(5-苯基戊酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基)膦酸
按照上述实施例36的替代工艺偶联化合物29与5-苯基戊酸， 得到({2-溴-4-[2-(5-苯基戊酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基)膦酸二乙 基酯，按照与上述实施例40相似的方式处理，得到化合物52。MS(离 子喷射)：m/z488.09/490.07(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ 7.87(t，1H，J＝5.6Hz)，7.53(s，1H)7.51(d，1H，J＝8.0Hz)， 7.27(m，3H)，7.16(m，3H)，3.27(m，2H)，2.71(t，2H，J＝7.2 Hz)，2.54(t，2H，J＝7.2Hz)，2.04(t，2H，J＝7.2Hz)，1.48 (m，4H)
实施例53化合物53的合成
({2-溴-4-[2-(4-1H-吲哚-3-基-丁酰氨基)乙基]苯基}二氟甲基) 膦酸
按照上述实施例36的替代工艺偶联游离碱化合物29与吲哚-3- 丁酸，得到({2-溴-4-[2-(4-1H-吲哚-3-基-丁酰氨基)乙基]苯基}二氟 甲基)膦酸二乙基酯，然后按照与实施例40相似的方式处理，得到化 合物53。MS(离子喷射)：m/z514.93/516.91(M+H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ10.73(s，1H)，7.89(t，1H，J＝5.6Hz)，7.53(m， 3H)7.31(d，2H，J＝8.0Hz)，7.05(m，2H)，6.94(m，1H)，3.27 (m，2H)，2.73(t，2H，J＝7.2Hz)，2.64(t，2H，J＝7.2Hz)， 2.1(t，2H，J＝7.2Hz)，1.84(m，2H)
实施例54化合物54的合成
[(2-溴-4-{2-[(2-苯基环丙烷羰基)氨基]乙基}苯基)二氟甲基] 膦酸
按照实施例36的替代工艺偶联游离碱化合物29与反式-2-苯基 环丙烷-1-羧酸，得到[(2-溴-4-{2-[(2-苯基环丙烷羰基)氨基]乙基} 苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，按照与实施例40相似的方式处理，得 到化合物54。MS(离子喷射)：m/z472.03/474.00(M-H)
实施例55化合物55的合成
({4-[2-(乙酰基乙基氨基)乙基]-2-溴苯基}二氟甲基)膦酸
如同实施例36处理化合物31，例外的是用乙酸酐代替苯甲酰 氯，得到({4-[2-(乙酰基乙基氨基)乙基]-2-溴苯基}二氟甲基)膦酸二 乙基酯，按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物55。MS(离 子喷射)：m/z397.97/399.94(M-H)
实施例56化合物56的合成
({2-溴-4-[2-(乙基-(2-苯基乙酰基)氨基)乙基]苯基}二氟甲基) 膦酸
如同实施例36处理化合物31，例外的是用苯乙酰氯代替苯甲酰 氯，得到({2-溴-4-[2-(乙基-(2-苯基乙酰基)氨基)乙基]苯基}二氟甲 基)膦酸二乙基酯，按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物56。 MS(离子喷射)：m/z474.21/476.18(M-H).1H NMR：(CD3OD，400MHz) 1∶1顺式与反式酰胺键异构体的混合物δ8.04(t，1H，J＝8.4Hz)， 7.45-7.09(m，7H)，3.75(s，1H)，3.65(s，1H)，3.55-3.41(m， 4H)，2.82(t，1H，J＝7.6Hz)，2.68(t，1H，J＝8.0Hz)，1.14 (t，1.5H，J＝7.2Hz)，1.04(t，1.5H，J＝7.2Hz)
实施例57化合物57的合成
[(2-溴-4-{2-[乙基-(3-苯基丙酰基)氨基]乙基}苯基)二氟甲基] 膦酸
按照与实施例36的替代工艺所述相似的方式处理化合物31，例 外的是用氢化肉桂酸代替苯甲酰氯，得到[(2-溴-4-{2-[乙基-(3-苯基 丙酰基)氨基]乙基}苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，按照与实施例40 相似的方式处理，得到化合物57。MS(离子喷射)：m/z488.03/490.00 (M-H)
实施例58化合物58的合成
[(2-溴-4-{2-[乙基-(2-苯基环丙烷羰基)氨基]乙基}苯基)二氟 甲基]膦酸
按照与实施例36的替代工艺所述相似的方式处理化合物31，例 外的是用反式-2-苯基环丙烷-1-羧酸代替苯甲酰氯，得到[(2-溴 -4-{2-[乙基-(2-苯基环丙烷羰基)氨基]乙基}苯基)二氟甲基]膦酸二 乙基酯，按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物58。MS(离 子喷射)：m/z500.08/502.05(M-H)
实施例59化合物59的合成
[(2-溴-4-羟甲基苯基)二氟甲基]膦酸
按照与实施例40相似的方式处理按照实施例35所得二乙基酯 化合物[(2-溴-4-羟甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，得到化合物 59。MS(离子喷射)：m/z315.1/317.11(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ7.71(s，1H)，7.63(d，1H，J＝8.8Hz)，7.46(d，1H， J＝8.4Hz)，4.6(s，2H)
实施例60化合物60的合成
3-溴-4-(膦酰基二氟甲基)苯甲酸
按照与实施例40相似的方式处理按照实施例35所得羧酸化合 物3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲基)苯甲酸，得到化合物60。MS (离子喷射)：m/z328.91/330.95(M-H)
实施例61化合物61的合成
[(2-溴-4-氨甲酰基苯基)二氟甲基]膦酸
在室温下，向0.15g按照实施例35所得3-溴-4-[(二乙氧基磷 酰基)二氟甲基)苯甲酸的1.5mL DCM溶液加入草酰氯(0.5mL)和1滴 DMF，将反应物搅拌90分钟。在旋转蒸发器上除去溶剂，将残余物溶 于2mL DCM，除去溶剂。然后将残余物在高真空下干燥1小时，溶于 THF(2mL)，冷却至0℃，向溶液通入氨气达1分钟，在此期间生成 沉淀。20分钟后，过滤反应物，蒸发滤液，留下0.11g[(2-溴-4-氨 甲酰基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的方式处 理这种化合物，得到化合物61。MS(离子喷射)：m/z328.00/330.04 (M-H)
实施例62化合物62的合成
{[2-溴-4-(4-苯基丁基氨甲酰基)苯基]二氟甲基}膦酸
按照实施例39的工艺偶联3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲 基)苯甲酸(化合物35)与苯丁胺，得到{[2-溴-4-(4-苯基丁基氨甲酰 基)苯基]二氟甲基}-膦酸二乙基酯，按照与实施例40相似的方式处 理，得到化合物62。MS(离子喷射)：m/z459.98/461.95(M-H)
实施例63化合物63的合成
[3-溴-4-(膦酰基二氟甲基)苯基]乙酸甲基酯
按照与实施例40相似的方式处理化合物33，得到化合物63。 MS(离子喷射)：m/z357.07/359.04(M-H)
实施例64化合物64的合成
[3-溴-4-(膦酰基二氟甲基)苯基]乙酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物34，得到化合物64。 MS(离子喷射)：m/z343.01/345.02(M-H)
实施例65化合物65的合成
{[2-溴-4-(苯乙基氨甲酰基甲基)苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物39，得到化合物65。 MS(离子喷射)：m/z446.16/448.14(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ8.19(t，1H，J＝5.6Hz)，7.58(s，1H)，7.51(d，1H， J＝8.0Hz)，7.27(m，3H)，7.17(m，3H)，3.42(s，2H)，3.27(m， 2H)，2.70(t，2H，J＝7.2Hz)
实施例66化合物66的合成
{[4-(苯甲酰氨基甲基)2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物37，得到化合物66。 MS(离子喷射)：m/z418.12/420.10(M-H)
实施例67化合物67的合成
{[4-(乙酰基氨基-甲基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例37相似的方式处理化合物32，例外的是用乙酸酐 代替苯甲酰氯，得到{[4-(乙酰基氨基甲基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸 二乙基酯，然后按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物67。 MS(离子喷射)：m/z356.12/358.09(M-H)
实施例68化合物68的合成
{[4-(2-氨基乙基)-2-溴苯基]二氟甲基}膦酸
68
按照与实施例40相似的方式处理化合物29，得到化合物68。 MS(离子喷射)：m/z328.02/329.99(M-H)
实施例69化合物69的合成
{[2-溴-4-(2-乙基氨基乙基)苯基]二氟甲基}膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物31，得到化合物69。 MS(离子喷射)：m/z355.98/357.96(M-H)
实施例70化合物70的合成
[(4-叠氮基甲基-2-溴苯基)二氟甲基]膦酸
按照与实施例40相似的方式处理化合物32，得到化合物70。 MS(离子喷射)：m/z340.05/342.09(M-H)
实施例71化合物的合成71
[(2-溴-4-乙基氨基甲基苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与乙胺反应，例外的 是没有使用碱，并且使用THF代替DMF，得到[(2-溴-4-乙基氨基甲基 苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，然后按照与实施例40相似的方式处 理，得到化合物71。MS(离子喷射)：m/z341.93/343.94(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.82(brs，2H)，7.85(s，1H)，7.64 (d，1H，J＝8.4Hz)，7.56(d，1H，J＝8.4Hz)，4.15(m，2H)， 2.97(m，2H)，1.19(t，3H，J＝7.6Hz)
实施例72化合物72的合成
[(2-溴-4-二甲基氨基甲基苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与二甲胺反应，得到 [(2-溴-4-二甲基氨基甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，然后按照与 实施例40相似的方式处理，得到化合物72。MS(离子喷射)：m/z 342.30/344.28(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ10.2(brs， 1H)，7.86(s，1H)，7.68(d，1H，J＝8.0Hz)，7.56(d，1H，J＝ 8.0Hz)，4.27(s，2H)，2.68(s，6H)
实施例73化合物73的合成
[(2-溴-4-二乙氨基甲基苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与二乙胺反应，例外 的是没有使用碱，并且使用THF代替DMF，得到[(2-溴-4-二乙氨基甲 基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，然后按照与实施例40相似的方式处 理，得到化合物73。MS(离子喷射)：m/z370.00/371.97(M-H).1H NMR：(CD3OD，400MHz)δ7.87(s，1H)，7.78(d，1H，J＝8.4Hz)， 7.55(d，1H，J＝8.4Hz)，4.34(s，2H)，3.22(m，4H)，1.35(t， 6H，J＝7.6Hz)
实施例74化合物74的合成
[(4-氮杂环丁烷-1-基甲基-2-溴苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与氮杂环丁烷盐酸盐 反应，得到[(4-氮杂环丁烷-1-基甲基-2-溴苯基)二氟甲基]膦酸二乙 基酯，然后按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物74。MS(离 子喷射)：m/z354.11/356.09(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ 10.08(brs，1H)，7.85(s，1H)，7.65(d，1H，J＝8.0Hz)，7.57 (d，1H，J＝8.0Hz)，4.40(d，2H，J＝6.4Hz)，4.04(m，4H)， 2.37(m，2H)
实施例75化合物75的合成
[(2-溴-4-吡咯烷-1-基甲基苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与吡咯烷反应，得到 [(2-溴-4-吡咯烷-1-基甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，然后按照 与上述实施例40相似的方式处理，得到化合物75。MS(离子喷射)：m/z 368.23/370.21(M-H)1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ9.97(brs， 1H)，7.92(s，1H)，7.67(d，1H，J＝8.0Hz)，7.62(d，1H，J＝ 8.0Hz)，4.38(d，2H，J＝5.2Hz)，3.37(m，2H)，3.08(m，2H)， 2.02(m，2H)，1.84(m，2H)
实施例76化合物76的合成
{[2-溴-4-(2，5-二氢-吡咯-1-基甲基)苯基]二氟甲基)膦酸氢溴 酸盐
按照与实施例38相似的方式使化合物26与吡咯啉反应，得到 {[2-溴-4-(2，5-二氢-吡咯-1-基甲基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯， 按照与实施例40相似的方式处理，得到化合物76。MS(离子喷射)：m/z 366.23/368.21(M-H)1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ11.5(brs， 1H)，7.90(s，1H)，7.66(m，2H)，5.89(s，2H)，4.43(s，2H)， 3.98(m，4H)
实施例77化合物77的合成
[(2-溴-4-哌啶-1-基甲基苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照与实施例40相似的方式处理化合物38，得到化合物77。 MS(离子喷射)：m/z382.21/384.21(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ9.70(brs，1H)，7.88(s，1H)，7.68(d，1H，J＝8.0Hz)， 7.59(d，1H，J＝8.0Hz)，4.28(s，2H)，3.28(m，2H)，2.85(m， 2H)，1.77(m，2H)，1.64(m，3H)，1.36(m，1H)
实施例78化合物78的合成
[(2-溴-4-吗啉-4-基甲基-苯基)二氟甲基]膦酸氢溴酸盐
按照基本上与实施例38相似的工艺使化合物26与吗啉反应， 得到[(2-溴-4-吗啉-4-基甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯，然后按 照与实施例40相似的方式处理，得到化合物78。MS(离子喷射)：m/z 384.21/386.30(M-H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ10.30(brs， 1H)，7.88(s，1H)，7.68(d，1H，J＝8.0Hz)，7.59(d，1H，J＝ 8.0Hz)，4.33(s，2H)，4.00-3.60(brm，4H)，3.14(brm，4H)
实施例79化合物79的合成
{[2-溴-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)苯基]二氟甲基}膦酸双氢溴 酸盐
按照实施例38的工艺使化合物26与4-甲基哌嗪反应，得到{[2- 溴-4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)苯基]二氟甲基}膦酸二乙基酯，然后按 照与实施例40相似的方式处理，得到化合物79。MS(离子喷射)：m/z 397.28/399.28(M-H).1H NMR：(D20，400MHz)δ7.70(s，1H)， 7.58(d，1H，J＝8.0Hz)，7.42(d，1H，J＝8.0Hz)，4.22(s， 2H)，3.41(br m，8H)，2.85(s，3H)
实施例80-化合物80的合成
[(1-溴-萘-2-基)二氟甲基]膦酸
80
A.向1-溴-2-萘甲醛(0.740g，0.001mole)的四氢呋喃(10mL) 溶液加入三乙胺(0.150mL，0.001mole)，继之以亚磷酸二乙酯 (0.330mL，0.002mole)。然后将反应混合物在室温氮气下搅拌18小时。 然后在真空中蒸发挥发物，进一步在真空下干燥。将所得固体用乙醚 研制，收集所分离出来的固体，在真空下干燥，得到0.935g[(1-溴 萘-2-基)-羟甲基]膦酸二乙基酯。
B.将这种产物加入到40mL丙酮中。加入20eq.二氧化锰(4.31g， 0.05moles)，将混合物在室温下搅拌1小时。向其中加入另外20eq. 二氧化锰，搅拌另外1小时。在Celite垫上滤出固体二氧化锰，用 热丙酮洗涤。合并滤液，蒸发，得到0.6g粗的(1-溴-萘-2-羰基)膦酸 二乙基酯。经过硅胶快速色谱处理，使用0-5％乙酸乙酯/二氯甲烷洗 脱，继之以在高真空下干燥产物，得到0.260g中间体。
C.在0℃下，向二乙基(1-溴萘-2-羰基)膦酸酯的二氯甲烷 (2mL)溶液加入(二乙氨基)三氟化硫(1.3mL，0.01mole)，使其达到室 温，然后搅拌另外4小时。然后将反应混合物用二氯甲烷(50mL)稀释， 用冷的饱和碳酸氢钠水溶液(NaHCO3，25mL)洗涤，然后经硫酸镁(MgSO4) 干燥。过滤，蒸发溶剂，得到0.260g产物。经过硅胶快速色谱处理， 使用0-5％EtOAc/二氯甲烷洗脱，继之以在高真空下干燥产物，得到 0.120g二乙基[(1-溴-萘-2-基)二氟甲基膦酸酯。利用与实施例40相 似的工艺从这种相应的二乙基酯制备化合物80。1H NMR：(DMSO-d6，400 MHz)δ8.52(d，1H，J＝8.4Hz)8.11(m，2H)，7.79(m，3H)。 MS(离子喷射)：m/z337.00(M+H)
实施例81-化合物81的合成
(6-溴-苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基)二氟甲基膦酸
81
按照与实施例80A相似的工艺，从6-溴-苯并[1，3]二氧杂环戊烷 -5-甲醛制备中间体[(6-溴-苯并[1，3]二氧杂环戊烷-5-基)羟甲基]膦 酸二乙基酯。按照与实施例80B相似的工艺使用中间体[(6-溴-苯并 [1，3]二氧杂环戊烷-5-基)羟甲基]膦酸二乙基酯制备[(6-溴-苯并 [1，3]二氧杂环戊烷-5-羰基)膦酸二乙基酯，例外的是使用氯铬酸吡啶 作为氧化剂。按照与实施例80C相似的工艺使用这种所得产物制备 (6-溴-苯并[1，3]二氧杂环戊烷-5-基)二氟甲基膦酸二乙基酯。按照与 实施例40相似的工艺从(6-溴-苯并[1，3]二氧杂环戊烷-5-基)二氟甲 基膦酸二乙基酯制备化合物81。1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.13 (s，1H)，7.7(s，1H)，6.05(d，1H，J＝2.0Hz)。MS(离子喷射)： m/z330.17(M-H)
实施例82化合物82的合成
(2-溴-5-甲基苯基)二氟甲基膦酸
A.在0℃下，向2-溴-5-甲基苯甲酸(1.0g，0.00465mole)的 无水二氯甲烷(10mL)悬浮液滴加草酰氯(1.22mL，0.013mole)，继之以 1-2滴N，N-二甲基甲酰胺。然后将反应混合物在室温下搅拌2小时， 蒸发溶剂，在真空下干燥产物，得到2-溴-5-甲基苯甲酰氯，用于下 一步。向预冷却的2-溴-5-甲基苯甲酰氯的甲苯溶液(5mL)缓慢加入预 冷却的亚磷酸三乙酯(1.05mL，0.00604mole)的甲苯溶液。然后将反应 物置于室温下过夜。然后在旋转蒸发器上蒸发溶剂。将所得产物用二 氯甲烷(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠(NaHCO3，25mL)洗涤，然后经硫 酸镁(MgSO4)干燥。过滤，蒸发溶剂，得到1.1g产物。经过硅胶快速 色谱处理，使用0％-5％乙酸乙酯/二氯甲烷，继之以在高真空下干燥 产物，得到0.900g(2-溴-5-甲基苯甲酰基)膦酸二乙基酯.
B.按照与实施例80C相似的工艺，使用上述A产物制备[2-溴-5- 甲基苯甲酰基)二氟甲基]膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的工艺 使用这种产物制备化合物82。1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.56(d， 1H，J＝8.4Hz)，7.40(s，1H)，7.19(d，1H，J＝8.0Hz)，2.28(s， 3H)。MS(离子喷射)：m/z300.15/301.05(M-H)
实施例83化合物83的合成
(2-溴-5-羟基苯基)二氟甲基膦酸
按照与实施例82A相似的工艺制备(2-溴-5-甲氧基苯甲酰基)膦 酸二乙基酯，例外的是使用2-溴-5-甲氧基苯甲酰氯代替2-溴-5-甲基 苯甲酰氯。这种产物受到与实施例82C相似的条件处理，得到(2-溴-5- 甲氧基苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯。在0℃下，向(2-溴-5-甲氧基 苯基)二氟甲基膦酸二乙基酯(0.170g，0.0005moles)的二氯甲烷(1mL) 溶液加入三溴化硼(0.175mL，0.0009moles)，使其达到室温，然后在 室温下搅拌3小时。然后用二氯甲烷(50mL)稀释，用冷水洗涤，然后 经硫酸镁(MgSO4)干燥。过滤，蒸发溶剂，得到0.130g(2-溴-5-羟基 苯基)二氟甲基-膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的工艺使用这种 产物制备化合物83。1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ10.03(s，1H， OH)，7.42(d，1H，J＝8.8Hz)，7.07(bs，1H)，6.76(m，1H)。 MS(离子喷射)：m/z
实施例84.化合物84的合成
[(4-溴-联苯-3-基)二氟甲基]膦酸
在0℃ 下，向化合物83的二乙基酯(0.130g，0.000362moles) 的二氯甲烷(3mL)溶液加入吡啶(0.0148mL，0.00180mole)，继之以三 氟甲磺酸酐(0.070mL，0.000416mole)。然后将反应在0℃下搅拌1 小时。然后用二氯甲烷(50mL)稀释，用水、0.5N氢氧化钠水溶液、10％ 柠檬酸水溶液洗涤，然后经硫酸镁(MgSO4)干燥。过滤，蒸发溶剂，得 到0.150g粗产物。经过硅胶快速色谱处理，使用二氯甲烷，继之以在 高真空下干燥产物，得到0.120g三氟甲磺酸-4-溴-3-[二乙氧基磷酰 基]二氟甲基苯基酯。向这种产物的甲苯溶液(1mL)加入苯基代硼酸 (0.055g，0.000448mole)、四(三苯膦)钯(0)(3mole％)和无水碳酸钾 (0.046g，0.000336mole)。然后升高反应温度至90℃，维持3小时。 然后用乙酸乙酯(50mL)稀释，用饱和碳酸氢钠(NaHCO3)、饱和氯化钠 溶液洗涤，经硫酸镁(MgSO4)干燥。过滤，蒸发溶剂，得到0.100g粗 产物。经过硅胶快速色谱处理，使用0％-1％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱， 继之以在高真空下干燥产物，得到0.015g[(4-溴-联苯-3-基)二氟甲 基]膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的工艺从[(4-溴-联苯-3-基) 二氟甲基]膦酸二乙基酯制备化合物84。1H NMR：(CD3OD，400MHz)δ 7.79(m，1H)，7.68(d，1H，J＝8.4Hz)，7.52(m，3H)，7.36(m， 3H).MS(离子喷射)：m/z363.12(M-H).
实施例85-化合物85的合成
[(2-溴-5-溴甲基苯基)二氟甲基]膦酸
向(2-溴-5-甲基苯甲酰基)膦酸二乙基酯(实施例82A，0.500g， 0.0014mole)在水/二氯甲烷(1∶8，10mL)中的两相混合物加入溴 (0.080mL，0.00147mole)，继之以35％过氧化氢水溶液(1.5mL， 0.00158mole)。然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后用二氯甲 烷稀释，用饱和碳酸氢钠(NaHCO3)、水洗涤，然后经硫酸镁(MgSO4)干 燥。过滤，蒸发溶剂，得到产物。经过硅胶快速色谱处理，使用0％- 1％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，继之以在高真空下干燥，得到0.180g[(2- 溴-5-溴甲基苯基)二氟甲基]膦酸二乙基酯。按照与实施例40相似的 工艺从这种相应的二乙基酯制备化合物85。1H NMR：(CD3OD，400MHz) δ7.44(m，2H)，7.18(d，1H，J＝8.4Hz)，4.32(s，2H)。MS(离 子喷射)：m/z381.09(M+H).
实施例86-化合物86的合成
[(2-溴-4-三氟甲基-苯基)二氟甲基]膦酸
将商业上可获得的2-溴-4-(三氟甲基)苯胺(2.06g，8.6mmol)悬 浮在浓HCl(4.0mL)中。用药匙打碎原料块，然后向混合物加入冰(～ 2.6g)，用冰浴冷却。滴加NaNO2(0.64g，9.3mmol)的H2O(2.6mL)溶 液，同时维持反应混合物的温度在0-5℃。将混合物在冰浴上搅拌 20分钟，然后缓慢倒入KI(12.5g，75.3mmol)的H2O(16mL)溶液。 将KI混合物搅拌若干分钟，然后沉降过夜。反应混合物用己烷萃取三 次。合并有机层，用1M NaOH洗涤两次，用亚硫酸氢钠水溶液洗涤一 次，然后用盐水洗涤。将溶液经MgSO4干燥，通过Celite真空过滤， 在真空中浓缩，得到2.33g 2-溴-4-(三氟甲基)-碘苯。借助TLC(100％ 己烷)和1H NMR分析，确定产物的纯度足以用在随后的步骤中。按照 实施例25从2-溴-4-(三氟甲基)-碘苯合成所得二乙基[2-溴-4-(三氟 甲基)-苯基]二氟甲基膦酸酯，例外的是使用氯三甲基硅烷(若干滴) 代替乙酸。按照与实施例40相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合 成化合物86。MS(ES-)：m/z352.9，354.9(M H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ8.07(s，1H)，7.89(d，J＝8.0，1H)，7.78(d，J＝ 8.0，1H).
实施例87-化合物87的合成
[2-溴-5-(三氟甲基)苯基]二氟甲基-膦酸
按照实施例86所述工艺，从2-溴-5-(三氟甲基)苯胺合成2-溴 -5-(三氟甲基)-碘苯。按照实施例25从2-溴-5-(三氟甲基)-碘苯合 成二乙基[2-溴-5-(三氟甲基)苯基]二氟甲基膦酸酯，例外的是使用氯 三甲基硅烷(若干滴)代替乙酸。按照与实施例40相似的工艺从这种 相应的二乙基膦酸酯合成化合物87。MS(ES-)：m/z353.0，355.0(M H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.94(d，J＝8.2，1H)，7.90 (s，1H)，7.68(d，J＝8.2，1H).
实施例88-化合物88的合成
(2-氟-4-甲基苯基)二氟甲基膦酸
按照实施例86所述工艺，从2-氟-4-甲基苯胺化合物合成2-氟-1- 碘-4-甲基苯。借助色谱法进行碘苯化合物的纯化(0-2％EtOAc-己 烷)。按照实施例25从2-氟-1-碘-4-甲基苯合成二乙基(2-氟-4-甲基 苯基)二氟甲基膦酸酯，例外的是使用氯三甲基硅烷(若干滴)代替乙 酸。按照与实施例40相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合成化合 物化合物88。MS(ES-)：m/z239.1(M H).1H NMR：(DMSO-d6， 400MHz)δ7.33-7.37(m，1H)，7.08-7.11(m，2H)，2.33(s，3H).
实施例89-化合物89的制备
(2-溴-4-氯苯基)二氟甲基膦酸钠
按照实施例25，从商业上可获得的2-溴-4-氯碘苯合成二乙基(2- 溴-4-氯苯基)二氟甲基膦酸酯，例外的是使用氯三甲基硅烷(若干滴) 代替乙酸。按照与实施例40相似的工艺从相应的二乙基膦酸酯合成化 合物89。从膦酸和NaHCO3制备二钠盐。MS(ES-)：m/z319.0，321.1 (M H).1H NMR：(CD3OD，400MHz)δ8.09(d，J＝8.6，1H)，7.60 (d，J＝2.3，1H)，7.30-7.32(m，1H).
实施例90-化合物90的合成
(3-溴萘-2-基)二氟甲基膦酸
按照实施例25，从商业上可获得的2-溴-3-碘萘合成二乙基(3- 溴萘-2-基)二氟甲基膦酸酯，例外的是使用氯三甲基硅烷(若干滴) 代替乙酸。按照与实施例40相似的工艺从相应的二乙基膦酸酯合成化 合物90。MS(ES-)：m/z335.0，337.0(M H).1H NMR：(CD3OD，400 MHz)δ8.25(s，2H)，7.95(dd，J＝1.6，7.8，1H)，7.85(dd， J＝2.0，8.0，1H)，7.56-7.63(m，2H).
实施例91-化合物91的合成
[2-溴-(4-二溴甲基)苯基]二氟甲基膦酸
按照实施例26溴化二乙基(2-溴-4-甲基苯基)二氟甲基膦酸酯。 反复色谱处理，用EtOAc-己烷洗脱，得到基本上纯的二乙基[2-溴-(4- 二溴甲基)苯基]二氟甲基-膦酸酯以及单溴化产物。按照与实施例40 相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合成化合物91。MS(ES-)：m/z 456.7，458.6(M H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.89(d， J＝1.6，1H)，7.76(dd，J＝1.6，8.2，1H)，7.65(d，J＝8.2， 1H)，7.38(s，1H).
实施例92-化合物92的合成
(2-溴-5-甲氧基苯基)二氟甲基膦酸
按照实施例82，从商业上可获得的2-溴-5-甲氧基苯甲酰氯合成 二乙基(2-溴-5-甲氧基苯基)氧代甲基膦酸酯。产物无需纯化即可用于 随后的步骤。利用实施例80C从相应的氧代-膦酸酯合成二乙基(2-溴 -5-甲氧基苯基)二氟甲基膦酸酯。按照与实施例40相似的工艺从这种 相应的二乙基膦酸酯合成化合物92。化合物92经过C-18柱色谱纯化， 用0-40％MeCN-H2O(含有0.05％甲酸)洗脱。MS(ES-)：m/z315.0， 316.9(M H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.59(d，J＝8.6， 1H)，7.11(d，J＝2.4，1H)，6.98-7.01(m，1H)，3.75(s，3H).
实施例93-化合物93的合成
(2-溴-5-乙氧基苯基)二氟甲基膦酸
将2-溴-5-羟基苯甲醛(0.96g，4.8mmol)溶于无水DMSO(10mL)。 加入碘代乙烷(0.50mL，6.2mmol)和Cs2CO3(1.9g，6.3mmol)，将混合 物在室温下搅拌1.5小时。向反应混合物加入另外的Cs2CO3(1.45g， 4.8mmol)，然后搅拌30分钟。将反应混合物用H2O和EtOAc稀释，分 离各层。向水层加入盐水，用EtOAc萃取两次。合并有机层，用1M NaOH 洗涤两次，用盐水洗涤三次，然后经MgSO4干燥。将溶液通过Celite 真空过滤，在真空中浓缩，得到1.08g 2-溴-5-乙氧基苯甲醛。在N2下将2-溴-5-乙氧基-苯甲醛(1.02g，4.45mmol)溶于无水甲苯(10mL)。 加入亚磷酸二乙酯(0.57mL，4.4mmol)，然后加入MgO(0.45g， 11.2mmol)，除去N2入口。将混合物在室温下搅拌1.75小时，然后加 入更多的亚磷酸二乙酯(0.1mL，0.77mmol)。将混合物搅拌另外2.75 小时，然后用EtOAc、H2O和饱和NaHCO3水溶液稀释。分离各层，将有 机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，通过Celite真空过滤，在真空中 浓缩，得到1.70g粗产物。产物无需纯化即可使用。将二乙基(2-溴-5- 乙氧基苯基)-(羟基)-甲基-膦酸酯(1.13g，3.08mmol)溶于无水二氯 甲烷(13mL)。加入氯铬酸吡啶(1.22g，4.6mmol)，将混合物在室温 下搅拌17小时，此时加入另外的氯铬酸吡啶(1.1g，5.1mmol)。将 混合物在室温下搅拌3小时，然后在干燥试管中回流45分钟。将反应 用二氯甲烷稀释，用H2O和饱和aq.NaHCO3洗涤，经MgSO4干燥，通 过Celite真空过滤，在真空中浓缩。产物经过色谱处理(EtOAc-己 烷)，得到二乙基(2-溴-5-乙氧基苯基)-氧代甲基膦酸酯。按照实施例 80C使二乙基(2-溴-5-乙氧基苯基)氧代-甲基-膦酸酯与DAST反应， 得到二乙基(2-溴-5-乙氧基苯基)二氟甲基膦酸酯。按照与实施例40 相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合成化合物93。MS(ES-)：m/z 329.0，331.0(M H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.56(d， J＝8.8，1H)，7.11(d，J＝2.7，1H)，6.97(dd，J＝2.7，8.8， 1H)，4.01(q，J＝7.2，2H)，1.30(t，J＝7.2，3H).
实施例94-化合物94的合成
(2-溴-5-碘苯基)二氟甲基膦酸
按照与实施例82A相似的工艺，将2-溴-5-碘苯甲酸转化为2-溴 -5-碘苯甲酰氯。按照与实施例82相似的工艺使2-溴-5-碘苯甲酰氯 与亚磷酸三乙酯反应，得到二乙基(2-溴-5-碘苯基)氧代甲基膦酸酯。 按照与实施例80C相似的工艺将二乙基(2-溴-5-碘苯基)氧代甲基膦 酸酯转化为二乙基(2-溴-5-碘苯基)二氟甲基膦酸酯。按照与实施例 40相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合成化合物94。MS(ES-)： m/z411.0，413.0(M H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.93 (s，1H)，7.67-7.69(m，1H)，7.45(d，J＝8.2，1H).
实施例95-化合物95的合成
(2-碘-4-甲基苯基)二氟甲基膦酸
利用实施例25，使商业上可获得的4-碘-3-硝基甲苯与二乙基溴 二氟甲基膦酸酯在Cd偶联条件下反应，得到二乙基(4-甲基-2-硝基苯 基)二氟甲基膦酸酯。将二乙基(4-甲基-2-硝基苯基)二氟甲基膦酸酯 (500mg，1.55mmol)溶于EtOAc(10mL)和EtOH(10mL)。加入5％Pd-C (大约20mg)，将混合物置于H2(1atm)下，在室温下搅拌过夜。然后 过滤混合物，在真空中浓缩，得到二乙基(4-甲基-2-氨基苯基)二氟甲 基膦酸酯。利用实施例86将二乙基(4-甲基-2-氨基-苯基)二氟甲基膦 酸酯转化为二乙基(2-碘-4-甲基苯基)-二氟甲基膦酸酯。利用与实施 例40相似的工艺从这种相应的二乙基膦酸酯合成化合物95。MS(ES-)： m/z347.1(M H).1H NMR：(CD3OD，400MHz)δ7.90(s，1H)， 7.49(dd，J＝0.8，8.2，1H)，7.27(d，J＝8.2，1H)，2.31(s， 3H).
实施例96-化合物96的合成
[4-(二氟-膦酰基甲基)苯基]乙酸苄基酯
[4-(二氟-膦酰基甲基)苯基]乙酸苄基酯
96
利用与实施例25和40相似的工艺，从4-碘苯基乙酸苄基酯制 备化合物96。MS(离子喷射)：m/z355.2(M-H)；357.3(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.48-7.31(m，9H)，5.12(s，2H)，3.81 (s，2H).
实施例97-化合物97的合成
[4-(二氟-膦酰基甲基)苯基]乙酸
[4-(二氟-膦酰基甲基)苯基]乙酸
97
向化合物96(358mg，1.0mmole)的5mL MeOH溶液加入100mg 5％ 钯/碳。将这种溶液在H2气氛下搅拌2小时。经过Celite床过滤， 继之以蒸发至干，得到269mg化合物97。MS(离子喷射)：m/z265.2 (M-H)；267.3(M+H)；1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.45(d，2H)， 7.31(d，2H)，3.61(s，2H).
实施例98-化合物98的合成
3-{3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲基]苯基}-2-甲磺酰基-氨 基丙酸
98
在-78℃下，向叔丁基二苯基亚氨基甘氨酸(0.68g， 0.0023mole)、(-)-O-9-烯丙基-N-9-蒽基甲基溴化辛可尼 (cinchonidium bromide)(0.14g，0.00023mol)和CsOH.H2O(3.86g， 0.023mole)加入DCM(8mL)。然后向这种悬浮液一次性加入(2-溴-4- 溴甲基-苯基)-二氟-甲基膦酸二乙基酯(化合物26)(1.5g， 0.0034mole)的DCM(6mL)溶液，将反应物在-78℃下剧烈搅拌24小 时。将反应物用Et2O(400mL)稀释，Et2O层用H2O(2×150mL)、盐 水(150mL)洗涤，经MgSO4干燥15-20min。过滤，蒸发溶剂，留下2.1g 粗产物。使用硅胶(100mL)和20％乙酸乙酯/己烷进行快速色谱，得到 (2S)-{4-[2-二苯亚甲基氨基-2-(叔丁氧羰基)-乙基]-2-溴-苯基}-二 氟甲基膦酸二乙基酯(1.35g)。在更大规模上制备中间体(2S)-{4-[2- 二苯亚甲基氨基-2-(叔丁氧羰基)乙基]-2-溴-苯基}-二氟-甲基膦酸 二乙基酯(12.3g，18.9mmole)，溶于30mL THF/H2O/CH3COOH(1∶1∶1)， 在室温下搅拌3小时。加入水(100mL)，继之以用饱和NaHCO3中和至 pH＝8。这种混合物然后用2×200mL EtOAc萃取。合并有机层，经 Na2SO4干燥，蒸发至干。将这种混合物溶于100mL无水CH2Cl2，同时在 氮下搅拌。加入甲基吗啉3.82g(37.8mmole)，继之以3.25g (28.4mmole)甲磺酰氯，将这种混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合 物用100mL 1N HCl萃取，经Na2SO4干燥，蒸发。经过柱色谱处理(20％ EtOAc/CH2Cl2)，得到3-{3-溴-4-[(二乙氧基磷酰基)二氟甲基]苯 基}-2-甲磺酰氨基-丙酸叔丁基酯(8.0g)。将这种产物在50mL 30％ TFA/CH2Cl2中搅拌3小时，继之以蒸发至干，得到大约7g化合物98。 1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.72-7.69(m，2H)，7.51(dd，1H)， 7.43(d，1H)，4.10(m，5H)，3.08(dd，1H)，2.82(dd，1H)，2.66 (s，3H).1.21(t，6H)。利用与实施例40相似的工艺可以将化合物 98转化为相应的游离膦酸。
实施例99-化合物99的合成
{[2-溴-4-(2-氨甲酰基-2-甲磺酰氨基乙基)苯基]二氟甲基}-膦 酸
将化合物98(254mg，0.5mmole)在含有1滴DMF的5mL 25％草酰 氯中搅拌3小时。将这种混合物蒸发至干，加入5mL无水THF，继之 以蒸发至干，以除去残留的草酰氯。将残余物溶于2mL无水THF，然 后加入3mL 2M NH3的MeOH溶液。在室温下搅拌2小时后，蒸发混合 物至干。经过柱色谱处理(4％MeOH，CH2Cl2)，得到153mg{[2-溴-4-(2- 氨甲酰基-2-甲磺酰氨基乙基)-苯基]-二氟甲基}-膦酸二乙基酯。利用 与实施例40相似的工艺将这种产物转化为化合物99。MS(离子喷射)： m/z 450.2/452.2(M-H)；452.2/454.1(M+H).1H NMR：(MeOD-d3，400 MHz)δ7.70(s，1H)，7.59(dd，1H)，7.40(d，1H)，4.16(m，1H)， 3.13(dd，1H)，2.87(dd，1H)，2.54(s，3H).
实施例100-化合物100的合成
{[2-溴-4-(2-甲磺酰氨基-2-甲基氨甲酰基乙基)苯基]二氟甲基} 膦酸
利用与化合物99相似的工艺制备化合物100，例外的是使用2M 甲胺的THF溶液。MS(离子喷射)：m/z 464.2/466.2(M-H)； 466.2/468.1(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ8.03(q，1H)， 7.60(s，1H)，7.55(d，1H)，7.48(d，1H)，7.31(d，1H)，3.95 (m，1H)，2.89(dd，1H)，2.71(dd，1H)，2.55(d，3H)，2.54(s， 3H).
实施例101-化合物101的合成
{[2-溴-4-(2-二甲基氨甲酰基-2-甲磺酰氨基-乙基)-苯基]-二氟 甲基}-膦酸
利用与化合物99相似的工艺制备化合物101，例外的是使用2M 二甲胺的THF溶液。MS(离子喷射)：m/z 478.2/480.2(M-H)； 480.2/482.1(M+H).1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.64(s，1H)， 7.55(d，1H)，7.50(d，1H)，7.38(d，1H)，4.49(m，1H)，2.94 (s，3H)，2.92(dd，1H)，2.80(s，3H)，2.75(dd，1H)，2.65(s， 3H).
实施例102-化合物102的合成
[(2-溴-3，4-二甲基苯基)二氟甲基]膦酸
[(2-溴-3，4-二甲基苯基)二氟甲基]膦酸
C9H10BrF2O3P
Mol.Wt.：315.05
102
向2-溴-3，4-二甲基硝基苯(1.0g，4.35mmole)的10mL DMF溶液 加入SnCl2·2H2O(4.92g，21.8mmole)。将这种溶液在室温下搅拌过 夜。加入50mL H2O，用饱和NaHCO3调节pH至8，用150mL EtOAc萃取。 将有机层经Na2SO4干燥，过滤，蒸发，得到2-溴-3，4-二甲基苯胺， 按照与实施例86相似的方式转化为2-溴-3，4-二甲基碘苯。利用与实 施例25和40相似的工艺从2-溴-3，4-二甲基碘苯制备化合物102。MS (离子喷射)：m/z 314.0/316.1(M-H)；316.1/318.0(M+H).1H NMR： (DMSO-d6，400MHz)δ7.37(d，1H)，7.15(d，1H)，2.43(s，3H)， 2.37(s，3H).
实施例103-化合物103的合成
[(2-溴-3-甲基苯基)二氟甲基]膦酸
[(2-溴-3-甲基苯基)二氟甲基]膦酸
C8H8BrF2O3P
Mol.Wt.：301.02
103
利用与实施例25和40相似的工艺，从2-溴-3-甲基碘苯制备化 合物103。MS(离子喷射)：m/z 300.0/302.1(M-H)；302.1/304.0 (M+H)．1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.54(dd，1H)，7.45-7.40 (m，2H)，2.41(s，3H).
实施例104-化合物104的合成
[(2-溴-4-异丙基苯基)二氟甲基]膦酸
[(2-溴-4-异丙基苯基)二氟甲基]膦酸
C10H12BrF2O3P
Mol.Wt.：329.08
104
利用与实施例86相似的工艺，从2-溴-4-异丙基苯胺制备2-溴-4- 异丙基碘苯。利用与实施例25和40相似的工艺从2-溴-4-异丙基碘 苯制备化合物104。MS(离子喷射)：m/z 328.1/330.1(M-H)： 330.1/332.1(M+H)．1H NMR：(DMSO-d6，400MHz)δ7.55(d，1H)， 7.51(dd，1H)，7.35(d，1H)，2.91(m，1H)，1.18(d，6H).
实施例105-化合物105的合成
{[2-溴-4-(2-甲磺酰氨基-2-甲基氨甲酰基乙基)苯基]二氟-甲基}膦 酸
为了制备D-异构体化合物100，采用实施例98中的工艺，例外的 是在烷基化步骤中使用(+)-O-9-烯丙基-N-9-蒽基甲基溴化辛可尼 作为相转移催化剂，得到(2R)-{4-[2-二苯亚甲基氨基-2-(叔丁氧羰 基)-乙基]-2-溴-苯基}二氟甲基-膦酸二乙基酯。然后利用与实施例 100相似的工艺合成最终化合物。
实施例106 PTP酶活性测定法
本质上如文献所述进行PTP活性的测定(Flint et al.，1993 EMBO J.12：1937-1946；Zhang et al.，1994 Biochem.33：2285-2290，比 活度11uCi/nM)，使用酪氨酸磷酸化32P-标记的EGF(表皮生长因子) 受体自主磷酸化位点肽作为底物。
将从100％DMSO储备溶液稀释到含有6％DMSO的25mM Tris-pH7.5 中所得化合物等分试样(20μL)分配至96-孔聚丙烯微量滴定平板的 V-底小孔；对照小孔接受不含化合物的Tris-DMSO。向被设计作为酶 阴性对照的小孔加入20μL等分试样的测定缓冲液(25mM Tris-pH7.5， 1mM EDTA，3mM二硫苏糖醇(DTT)，0.3mg/mL卵清蛋白)。向全部小孔 加入20μL等分试样的32P-标记底物肽(在没有DTT的测定缓冲液中 稀释至0.6μM)。将平板在轨道摇动器上搅拌20秒，在室温下温育 13分钟。向全部小孔加入PTP1B(从50％甘油储备液稀释到冰冷的测 定缓冲液中，以便这种数量的酶将在测定中利用小于20％的底物)， 每孔20μL，除了酶阴性对照孔以外。将平板搅拌，在室温下温育另 外13分钟。向每孔加入140μL活性炭悬浮液(含有25mg/mL的0.1M NaH2PO4，pH≤5)，旋转使内容物混合，将平板在台式离心机(Beckman Instruments，Inc.)中、在室温下以2400rpm离心3分钟。将每孔中 100μL等分试样的所得上清液转移至β-闪烁计数平板(Perkin Elmer， Inc.)，按照厂商的推荐量化32P β发射。减去背景计数，根据酶阴性 对照值校正，正常化为不接受化合物的对照小孔，计算抑制50％最大 酶活性的化合物浓度(IC50)。
实施例107测定细胞中的化合物功效：胰岛素受体酪氨酸磷酸化
使用过度表达人胰岛素受体的293-HEK细胞(293/IR细胞)，借助 ELISA评价胰岛素受体酪氨酸磷酸化(IR PY)。使293/IR细胞生长在 96-孔平板中、37℃下、5％CO2下，血清-饥饿16小时，用各种浓度 化合物预处理2小时，然后暴露于3nM胰岛素达另外10分钟。然后从 温育器中取出细胞，溶解在萃取缓冲液(50mM Tris-HCl，pH7.5(室 温)；2mM EDTA，pH7-8；1mM磷酸盐(多磷酸盐)；1mM NaVO4(pH10， 单聚的)；0.1％Triton X-100；蛋白酶抑制剂鸡尾酒套系III， (Calbichem，San Diego，CA))中，在4℃下搅拌20分钟。如下进 行IR PY ELISA：向Dynex Immulon HB4X平板涂以含有抗-胰岛素受 体抗体Ab-1(NeoMarker s，Inc.，Fremont，CA)的磷酸盐缓冲盐水 (PBS)+5μg/mL牛血清白蛋白。平板随后用含有3％牛血清白蛋白的 PBS封闭。将细胞溶解产物转移至ELISA平板小孔，在23℃下温育 1hr，同时搅拌。将小孔用TBST(20mM Tris-HCl，pH7.5；150mM NaCl； 0.05％Tween 20)洗涤三次。将稀释在TBST中的与辣根过氧化物酶 (4G10-HRP， www.upstate.com)缀合的抗-磷酸酪氨酸抗体与小孔在23 ℃下温育1小时，同时搅拌。将平板用TBST再洗涤三次，然后用 3，3’，5，5’-四甲基联苯胺液体底物系统(Sigma-Aldrich，Inc，St. Louis，MO)比色检测辣根过氧化物酶。