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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610604106.1 (22)申请日 2016.07.28 (71)申请人 莫明鑫 地址 530300 广西壮族自治区南宁市横县 横州镇槎江路121号 (72)发明人 莫明鑫 邓小健 (74)专利代理机构 南宁市来来专利代理事务所 (普通合伙) 45118 代理人 来光业 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) (54)发明名称 一种艾草组培苗的生产方法 (57)摘要 本发明公开了一种艾草组培苗生产方法, 包 括如下步骤: 外植体的建立; 外植体处理。
2、; 初代培 养; 继代培养; 生根培养; 炼苗和移栽步骤。 本发 明的艾草组培苗生产方法具有成苗量多, 繁殖系 数高的优点, 比传统的广西地区艾草种植方法能 够提高成活率15-20%, 能够在短期内快速繁殖大 量野艾草, 具有成活率高, 生长迅速, 能够快速实 现规模化种植和生产的特点。 权利要求书1页 说明书2页 CN 106172002 A 2016.12.07 CN 106172002 A 1.一种艾草组培苗生产方法, 其特征在于: 包括如下步骤: 外植体的建立: 选择在广西壮族自治区南宁市生长的野艾草, 在其叶片长至收获时, 取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体; 外植体处理: 步骤得到。
3、的外植体先用无菌水冲洗4-5次, 沥干水, 再用75的酒精 浸泡30S, 最后置于0.1的升汞溶液中消毒5-10min, 再用无菌水冲洗4-5 次, 处理完毕后, 晾干备用; 初代培养: 将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基, 初代培养基成 分为: MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L, 培养基pH6.3; 光照强度 2000Lux, 培养温度232, 培养时间222天; 继代培养: 将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后, 继续进行继代培养, 培养基成分为: N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L; 培养温度252, 。
4、光照时间22h/d, 培养基 pH5.8-6.0; 每25天扩繁一次试管苗; 生根培养: 待步骤扩繁的试管苗取出, 转入生根培养, 生根培养基成分为: 1/4MS+ IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜; 光照强度为3000Lux, 培养温度252, 培养至25 天, 根长至3-5cm, 苗长高3cm时出瓶; 炼苗: 选择健壮、 半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土: 椰糠配比为1:3 的营养基质 中, 保持空气湿度50-60%, 光照8000lux; 移栽: 炼苗15天后移到露天培养, 建立艾草组培苗生产基地。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 106172002。
5、 A 2 一种艾草组培苗的生产方法 技术领域 0001 本发明涉及植物种植技术领域, 具体为一种艾草组培苗的生产方法。 背景技术 0002 艾草(Artemisia argyi)属菊科蒿属多年生草本植物, 因其具有重要的药用价值 和生态效应, 长期以来, 一直受到人们青睐。 尽管艾蒿是一种分布较为广泛、 数量较多的植 物, 但由于每年端午节人们大量的拔取, 使很多地区的艾蒿已经濒危灭绝。 王艳等对艾蒿进 行了组织培养及试管苗培养的研究, 已建立起艾蒿的无性系, 获得的试管苗容易移栽、 移植 成活, 但却存在着试管苗繁殖速度较慢等问题; 同时发明人用上述方法对广西地区的野生 艾草组织培养繁殖多次。
6、, 并未获得成功, 这可能与野艾草当地的生活环境有关。 0003 广西壮族自治区南宁地区气候湿润多雨, 野生艾蒿生长迅速, 发明人对广西壮族 自治区南宁市的野生艾蒿尽心了详细研究, 发现其虽然与北方大多数地区的野生艾蒿外形 大致类似, 但其生长条件却与之不同, 这可能与南北方气候、 土质不同有关。 众所周知, 目前 保护野生艾蒿资源已经成为国家的重要课题, 不仅因为其作为药用植物有巨大的潜在价 值, 更因为其繁殖条件苛刻, 在不同地域均有不同的生长繁殖条件。 组织培养 (Tissue Culture) 是在无菌条件下, 分离并在培养基中培养离体植物组织的技术, 它具有以下重要 意义:(1) 促。
7、进优良遗传材料的快速繁殖;(2) 脱毒良种苗的培养和无病毒苗的大量繁殖; (3) 特殊育种材料的快速繁殖;(4) 基因工程植株的快速繁殖;(5) 离体保存种质的快速繁 殖。 研究南宁地区的野生艾蒿组培生长条件, 对于保护广西地区野生艾蒿资源, 利用植物组 织培养方法建立起起无性再生系, 满足社会需求, 具有重要的实践意义。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种艾草组培苗的生产方法, 旨在解决目前广西地区艾草只 能自然种植, 不能无性繁殖的问题; 从而达到保护野艾草资源, 使其优良性状得以保持并最 终得到有效利用, 满足社会需求的目的。 0005 本发明的技术方案是这样实现的: 本发明的艾。
8、草组培苗生产方法, 包括如下步骤: 外植体的建立: 选择在广西壮族自治区南宁市武鸣县里建镇生长的野艾草, 在其叶 片长至收获时, 取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体; 外植体处理: 步骤得到的外植体先用无菌水冲洗4-5次, 沥干水, 再用75的酒精 浸泡30S, 最后置于0.1的升汞溶液中消毒5-10min, 再用无菌水冲洗4-5 次, 处理完毕后, 晾干备用; 初代培养: 将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基, 初代培养基成 分为: MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L, 培养基pH6.3; 光照强度 2000Lux, 培养温度。
9、232, 培养时间222天; 继代培养: 将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后, 继续进行继代培养, 说 明 书 1/2 页 3 CN 106172002 A 3 培养基成分为: N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L; 培养温度252, 光照时间22h/d, 培养基 pH5.8-6.0; 每25天扩繁一次试管苗; 生根培养: 待步骤扩繁的试管苗取出, 转入生根培养, 生根培养基成分为: 1/4MS+ IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜; 光照强度为3000Lux, 培养温度252, 培养至25 天, 根长至3-5cm, 苗长高3cm时出瓶; 炼苗: 选择。
10、健壮、 半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土: 椰糠配比为1:3 的营养基质 中, 保持空气湿度50-60%, 光照8000lux; 移栽: 炼苗15天后移到露天培养, 建立艾草组培苗生产基地。 0006 本发明的有益效果是: 一、 本发明具有成苗量多, 繁殖系数高的优点, 比传统的广西地区艾草种植方法能够提 高成活率15-20%, 能够在短期内快速繁殖大量野艾草。 0007 二、 采用合理化炼苗措施, 使艾草在出瓶后能够迅速适应露地环境, 成活率高, 生 长迅速, 能够快速实现规模化种植和生产。 具体实施方式 0008 以广西地区野生艾草为组培繁殖对象, 所开发的组培苗生产技术, 包括如下步骤:。
11、 外植体的建立: 选择在广西壮族自治区南宁市武鸣县里建镇生长的野艾草, 在其叶 片长至收获时, 取无病虫害侵染的艾草嫩茎作为外植体; 外植体处理: 步骤得到的外植体先用无菌水冲洗4-5次, 沥干水, 再用75的酒精 浸泡30S, 最后置于0.1的升汞溶液中消毒5-10min, 再用无菌水冲洗4-5 次, 处理完毕后, 晾干备用; 初代培养: 将步骤处理过的茎段在无菌条件下接种到初代培养基, 初代培养基成 分为: MS+NAA1.2mg/L+GA3 0.5mg/L+6-BA3.0mg/L+糖蜜15g/L, 培养基pH6.3; 光照强度 2000Lux, 培养温度232, 培养时间222天; 继代。
12、培养: 将初代培养成的试管苗剪成具2个生长点的茎段后, 继续进行继代培养, 培养基成分为: N6+IAA0.1mg/L+蔗糖20g/L; 培养温度252, 光照时间22h/d, 培养基 pH5.8-6.0; 每25天扩繁一次试管苗; 生根培养: 待步骤扩繁的试管苗取出, 转入生根培养, 生根培养基成分为: 1/4MS+ IBA0.2mg/L+6-BA 0.02mg/L+15%糖蜜; 光照强度为3000Lux, 培养温度252, 培养至25 天, 根长至3-5cm, 苗长高3cm时出瓶; 炼苗: 选择健壮、 半木质化的试管苗出瓶移栽在泥炭土: 椰糠配比为1:3 的营养基质 中, 保持空气湿度50-60%, 光照8000lux; 移栽: 炼苗15天后移到露天培养, 建立艾草组培苗生产基地。 0009 上述本发明实施例的艾草组培苗生产的方法具有成苗量多, 繁殖系数高的优点, 比传 统的广西地区艾草种植方法能够提高成活率15-20%, 能够在短期内快速繁殖大量野艾草, 具有成活率高, 生长迅速, 叶子宽大, 能够快速实现规模化种植和生产的特点。 说 明 书 2/2 页 4 CN 106172002 A 4 。