一种防治糖尿病神经病变的药物组合物.pdf

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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810724003.8 (22)申请日 2018.07.04 (71)申请人 四川省中医药科学院 地址 610041 四川省成都市武侯区人民南 路4段51号 (72)发明人 谭正怀 张爱军 苟文伊 唐大轩 熊静悦 陈园园 张秀 刘琪 张莉 (74)专利代理机构 成都弘毅天承知识产权代理 有限公司 51230 代理人 蒋秀清 李春芳 (51)Int.Cl. A61K 36/81(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 25/00(2006.01) A。

2、61P 17/02(2006.01) (54)发明名称 一种防治糖尿病神经病变的药物组合物 (57)摘要 本发明公开了一种防治糖尿病神经病变的 药物组合物， 涉及糖尿病慢性并发症防治药物领 域， 以花椒或藤椒、 辣椒及川芎或者其提取物为 原料， 按照重量份计比例为花椒或藤椒0 .5 5.0： 辣椒0.010.1、 川芎5.050.0的比例配伍 组成。 本发明中， 花椒或藤椒、 辣椒、 川芎三者合 用时既有明显的协同增效作用， 同时也显著的协 同拮抗毒性作用， 最终使得该组合物对糖尿病神 经病变具有良好的防治作用。 权利要求书1页 说明书10页 CN 108567852 A 2018.09.25。

3、 CN 108567852 A 1.一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所述药物组合物包括如下重 量份的药物或药物提取物： 花椒或藤椒 0.55.0份 辣椒 0.010.1份 川芎 5.050.0份。 2.根据权利要求1所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所述花 椒或藤椒提取物为直接压榨的油液、 用植物油浸泡得到的油液以及0100乙醇提取得到 的液体中的一种。 3.根据权利要求1或2所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所 述花椒或藤椒提取物中， 花椒麻味物质的质量含量不低于0.01， 所述花椒麻味物质为山 椒素及其由烷基不饱和度差异或。

4、碳链氧化引起结构变化的酰胺类同系物。 4.根据权利要求1所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所述辣 椒提取物为直接压榨的油液、 用植物油浸泡得到的油液以及0100乙醇提取得到的液体 中的一种。 5.根据权利要求1或4所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所 述辣椒提取物中， 辣椒素的质量含量不低于0.001。 6.根据权利要求1所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所述川 芎提取物的提取方法是蒸馏、 超临界萃取以及0100乙醇提取中的一种。 7.根据权利要求1所述的一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 其特征在于， 所述药 物组合物。

5、为外用制剂， 其形态为乳剂、 油剂、 搽剂、 贴剂、 洗剂以及凝胶剂中的一种。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108567852 A 2 一种防治糖尿病神经病变的药物组合物 技术领域 0001 本发明涉及糖尿病慢性并发症防治药物领域， 具体涉及一种防治糖尿病神经病变 的药物组合物。 背景技术 0002 据调查， 我国目前城市人口中的糖尿病发病率已经达到10左右， 按此推算， 我国 现有糖尿病人口已经达到1.3亿左右。 由于降糖药物的广泛使用， 糖尿病本身对人体的损害 已经降至很低水平， 然而， 许多糖尿病慢性并发症特别是糖尿病神经病变给糖尿病患者的 生活质量、 寿命均产生了严重影响。

6、， 据报道糖尿病神经病变的发病率占70以上。 0003 糖尿病神经并发症是一种累及整个神经系统的疾病， 包括糖尿病中枢神经病变 (大脑、 小脑、 脑干、 脊髓及在其中上行、 下行感觉及运动有髓鞘神经纤维)和糖尿病周围神 经病变(diabeticperipheral neuropathy， DPN)， 以后者为常见。 其中糖尿病中枢神经系统 损伤又分为糖尿病性脑白质脱髓鞘、 糖尿病性脑萎缩、 糖尿病认知功能障碍与痴呆、 糖尿病 性脑软化、 糖尿病性癫痫、 糖尿病性锥体束损伤、 糖尿病性脊髓病； 而糖尿病周围神经病变 又分为近端运动神经病变、 局灶性单神经病变、 非对称性的多发局灶性神经病变、 多。

7、发神经 根病变、 糖尿病神经肌接头病变、 自主神经病变、 糖尿病末梢感觉神经病变， 还有糖尿病性 自主神经病变。 0004 由此可见糖尿病神经病变可累及全身周围神经系统任何部分， 包括感觉神经、 运 动神经及自主神经。 临床表现为肢体麻木、 蚁行感、 烧灼感或触电样感觉异常， 疼痛多呈现 灼痛、 刺痛、 钝痛等多种表现， 严重者造成肌无力， 甚至肌肉萎缩， 导致足部溃疡、 坏疽以至 截肢， 给患者带来极大的肉体和精神痛苦， 对患者的生活质量和生存期造成了严重的影响。 0005 糖尿病神经病变的发病机理并没有得到系统阐明。 目前临床上用于治疗糖尿病神 经病变的药物包括神经生长因子， 神经营养药甲。

8、钴胺， 抗血小板凝集、 扩张血管药前列腺素 E1、 西络他唑， 氧化应激抑制剂 -硫辛酸， 胰激肽释放酶， 醛糖还原酶抑制剂依岶司他， 抗抑 郁药， 抗癫痫药， 抗精神病药， 其它各类止痛剂等。 但这些药物的远期效果并不理想， 且有产 生副作用之虑。 近年来， 随着人们对糖尿病周围神经病变的认识逐步加深， 中医药在其治疗 方面取得了很好的效果， 日益显示出良好的发展前景。 0006 而糖尿病周围神经病变是糖尿病足的主要诱发因素或病因， 与糖尿病足的发生、 发展关系最为密切， 是造成糖尿病患者足部溃疡、 坏疽及截肢(趾)的主要原因， 可使糖尿病 患者截肢的危险升高1.7倍， 如伴有足部畸形则糖尿。

9、病患者截肢的危险性升高12倍。 糖尿病 足患者由于合并神经病变及各种不同程度末梢血管病变而导致下肢感染、 溃疡形成和(或) 深部组织的破坏。 患者从皮肤到骨与关节的各层组织均可受累， 严重者可以发生局部或全 足的坏疽， 需要截肢。 故而， 糖尿病足处理不当会导致病情急转直下， 严重者会致残， 甚至死 亡。 尽管糖尿病足对糖尿病人的身体健康具有重大威胁， 但目前并无有效防治糖尿病足的 药物或方法。 临床上治疗糖尿病足的目标是促进溃疡愈合、 预防继发感染和复发、 减少截肢 的发生。 目前对糖尿病足的治疗并无特殊疗法， 主要就是一个综合治疗方案， 包括控制血 说 明 书 1/10 页 3 CN 10。

10、8567852 A 3 糖、 彻底清创缓解局部压力、 使用辅料尽快封面创面维持创面湿润环境， 及时清除创面渗出 物； 促进下肢血运重建； 部分创面感染患者需要给予广谱抗生素抗感染治疗等。 这些治疗的 疗效是非常有限的， 即使是采取非常及时、 积极的治疗措施， 也得花数星期、 数月的时间才 能治愈， 有部分患者甚至根本无法治愈， 这不仅导致患者的身体残疾， 也会严重影响其生活 质量。 有部分患者最终不得不采取截肢， 由此可见， 目前的治疗措施不足之处是非常明显 的： 没有针对糖尿病足的关键因素进行治疗(糖尿病神经病变和糖尿病血管病变)， 仅是对 症处理； 其抗菌治疗也使临床医生倍感头疼， 全身使。

11、用广谱抗菌可能引起严重的菌群失调 和二重感染， 而局部使用抗生素又很容易引起耐药菌出现和过敏反应。 发明内容 0007 本发明目的是提供一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 以解决现有糖尿病神 经病变防治效果不理想的技术问题。 0008 为解决上述技术问题， 本发明的技术方案为： 0009 一种防治糖尿病神经病变的药物组合物， 所述药物组合物包括如下重量份的药物 或药物提取物： 0010 花椒或藤椒 0.55.0份 0011 辣椒 0.010.1份 0012 川芎 5.050.0份。 0013 作为优选地， 所述花椒或藤椒提取物为直接压榨的油液、 用植物油浸泡得到的油 液以及0100乙醇提取得。

12、到的液体中的一种。 0014 作为优选地， 所述花椒或藤椒提取物中， 花椒麻味物质的质量含量不低于0.01， 所述花椒麻味物质为山椒素及其由烷基不饱和度差异或碳链氧化引起结构变化的酰胺类 同系物。 0015 作为优选地， 所述辣椒提取物为直接压榨的油液、 用植物油浸泡得到的油液以及0 100乙醇提取得到的液体中的一种。 0016 作为优选地， 所述辣椒提取物中， 辣椒素的质量含量不低于0.001。 0017 作为优选地， 所述川芎提取物的提取方法是蒸馏、 超临界萃取以及0100乙醇 提取中的一种。 0018 作为优选地， 所述药物组合物为外用制剂， 其形态为乳剂、 油剂、 搽剂、 贴剂、 洗剂。

13、 以及凝胶剂中的一种。 0019 辣椒是茄科辣椒属植物的统称， Capsicum frutescens L.是其中最常见的一种。 辣椒属为一年或多年生草本植物。 果实通常成圆锥形或长圆形， 未成熟时呈绿色， 成熟後变 成鲜红色、 黄色或紫色， 以红色最为常见。 辣椒的果实因果皮含有辣椒素而有辣味， 能增进 食欲。 辣椒中维生素C的含量在蔬菜中居第一位。 0020 花椒(Pericarpium Zanthoxyli)为芸香科植物青椒(Zanthoxylum schinifolium sieb.et Zucc)或花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxi m.)的干燥成熟果皮， 分。

14、为秦椒， 川 椒， 岩椒等几十个品种。 味辛， 性温， 小毒。 无论食用还是药用历史均已悠久。神农本草经 记载， 花椒 “味辛、 温， 主治风邪气， 温中， 除寒痹， 坚齿明目， 逐下气” 。本草纲目 里说道 “椒， 纯阳之物， 其味辛而麻， 其气温以热。 入肺散寒， 治咳嗽； 入脾除湿， 治风寒湿痹， 水肿泻 说 明 书 2/10 页 4 CN 108567852 A 4 痢； 入肾补火， 治阳衰溲数， 足弱久痢诸症” 。 0021 藤椒， 又名竹叶花椒(拉丁学名： Zanthoxylum armatum DC.)， 别称： 万花针、 白总 管、 竹叶总管(江西、 湖南)等， 为近年引入生产。

15、的新品种。 其临床功效还有待进一步验证。 0022 川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiongHort.的干燥根茎， 始载于 神农 本草经 。 其性温， 味辛、 微苦； 具有活血行气、 祛风止痛的功效。 主治血瘀气滞所致月经不 调， 痛经经闭， 肝郁气滞而致血行不畅的胸胁疼痛， 头痛， 风寒湿痹， 跌打肿痛等疾病。 临床 主要用于治疗心脑血管、 呼吸、 泌尿系统及妇科方面的疾病。 研究表明川芎含有大量的苯酞 类、 酚酸类、 生物碱类等化合物。 具有抑制血小板聚集、 阻止静脉旁路血栓形成、 抗动脉粥样 硬化、 清除自由基、 增强免疫功能、 抗惊厥、 抗血小板聚集和抗血栓形成、。

16、 降低血液粘度、 调 节心脏功能、 抑制学习记忆力损伤、 抑制平滑肌细胞增殖、 防护脑缺血症、 镇静和促进睡眠、 舒张平滑肌、 诱导血红素氧合酶-1(HO-1)表达等作用。 0023 本发明与现有技术相比具有如下优点： 0024 本发明提供的药物组合物， 其中花椒或藤椒、 辣椒、 川芎三者分用并不能对糖尿病 神经病变起到防治作用， 而三者合用时既有明显的协同增效作用， 同时也显著的协同拮抗 毒性作用， 最终使得该组合物对糖尿病神经病变具有良好的防治作用， 其中对糖尿病足疗 效最为显著。 具体实施方式 0025 为了使本发明的目的、 技术方案及优点更加清楚明白， 以下结合各实施例数据， 对 本发。

17、明进行进一步详细说明。 应当理解， 此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明， 并不 用于限定本发明， 即所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例， 而不是全部的实施例。 0026 实施例1 0027 花椒提取物制备： 取花椒， 粉碎成粗粉， 加4倍量95乙醇加热回流提取3次， 每次1 小时， 合并提取液， 过滤， 50减压回收溶剂至无醇味， 50减压干燥24小时， 即得花椒提取 物， 为棕色油状物， 得量26.4(g/g)。 0028 实施例2 0029 藤椒提取物制备： 藤椒， 用压榨机直接压榨得藤椒油， 经过滤， 分装备用， 为黄棕色 油状物， 收率8.3(g/g)。 0030 实施例3 0。

18、031 辣椒提取物制备： 辣椒， 粉碎成粗粉， 加4倍量植物油加热回流提取3次， 每次1小 时， 合并提取液， 过滤， 备用， 为红棕色油状物。 0032 实施例4 0033 川芎提取物制备： 取川芎， 粉碎成粗粉， 加4倍量70乙醇加热回流提取3次， 每次1 小时， 合并提取液， 过滤， 50减压回收溶剂至无醇味， 50减压干燥24小时， 即得川芎提取 物， 为棕色油状物， 得量23.7(g/g)。 0034 实施例5 0035 制备复方脂质体凝胶制剂的药物组合物， 包括如下步骤： 0036 (1)制备提取物， 按处方量准备花椒或藤椒、 辣椒、 川芎， 先用植物油提取挥发油， 得提取物a； 。

19、再用水剂提取药渣水， 得提取物b； 说 明 书 3/10 页 5 CN 108567852 A 5 0037 (2)取提取物a， 大豆卵磷脂， 胆固醇， 十六烷基三甲基溴化铵， 加乙醇， 完全溶解后 形成脂质溶液1； 将提取物b溶解在磷酸盐缓冲溶液中， 调节pH值为7， 得到溶液2； 脂质溶液1 缓慢注入搅拌下的上述溶液2中， 制成脂质分散溶液3； 将脂质分散溶液3超声法处理(300W， 10min)得到复方脂质体混悬液； 0038 (3)制取空白凝胶剂 0039 A.取甲基纤维素钠， 加丙三醇湿润分散， 调节pH值为6-8； 加入超纯水， 均匀溶胀过 夜后， 搅拌均匀形成空白凝胶剂A； 00。

20、40 B.取卡波姆， 加丙三醇湿润分散， 调节pH值为6-8； 加入超纯水， 均匀溶胀过夜后， 搅拌均匀形成空白凝胶剂B； 0041 C.取甲壳素， 加丙三醇湿润分散， 调节pH值为6-8； 加入超纯水， 均匀溶胀过夜后， 搅拌均匀形成空白凝胶剂C； 0042 (4)将制备好的复方脂质体混悬液分别加入到形成的空白凝胶剂A、 B、 C中， 继续搅 拌均匀， 即分别得复方脂质体凝胶制剂A、 复方脂质体凝胶制剂B、 复方脂质体凝胶制剂C。 0043 实施例6 0044 制备乳膏制剂的药物组合物： 0045 油脂性基质防治糖尿病神经病变的药物组合物软膏材料及基质辅料： 硬脂酸12g， 羊毛脂2g， 液。

21、体石蜡14ml， 甘油5ml， 十八醇1g， 三乙醇胺2ml， 水64ml， 制备步骤如下： 0046 (1)制备油相： 将硬脂酸、 羊毛脂、 液体石蜡、 甘油、 十八醇以及按处方量分别取得 的实施例1、 实施例3以及实施例4(或实施例2、 实施例3以及实施例4)所得样品， 加热至70- 80混匀得到油相备用； 0047 (2)制备水相： 将水、 三乙醇胺加热至70-80混匀， 得水相备用。 0048 (3)制备合相： 将油相加入水相， 边加入边搅拌， 加完油相后停止加热， 冷却即得。 0049 实施例7 0050 制备软膏制剂的药物组合物： 0051 (1)制备提取物 0052 A.按处方量。

22、， 辣椒用90-95乙醇浸提， 回收乙醇得到辣椒提取物； 花椒采用80 酸乙醇(pH3)提取后， 提取液过大孔吸附树脂柱(大孔吸附树脂优选XDA-5、 HPD100， 但不 仅限于这两者)， 用水、 10乙醇分别洗涤柱体， 继用80乙醇洗脱， 回收乙醇， 得到花椒提 取物； 川芎用70乙醇浸提， 回收乙醇得到川芎提取物， 浓缩至一定体积， 将花椒提取物、 辣 椒提取物、 川芎提取物混合， 得到提取物1； 0053 B.按处方量， 分别用超临界萃取方法萃取得到花椒提取物、 辣椒提取物、 川芎提取 物， 混合， 得提取物2； 0054 C.按处方量， 分别采用压榨方法得到花椒提取物、 辣椒提取物，。

23、 采用超临界萃取方 法得到川芎提取物， 将花椒提取物、 辣椒提取物、 川芎提取物混合， 得到提取物3； 0055 (2)制备软膏制剂 0056 基质辅料包括(以100份量软膏量计)： 羊毛脂15份、 凡士林47.25份、 聚乙二醇4000 (PEG4000)0.5份、 硬脂酸甘油酯5.25份、 水5份、 对羟基苯甲酸乙酯0.03份， 包括如下步骤： 0057 (1)加入水、 聚乙二醇4000， 加入羊毛脂吸收水液， 搅拌均匀； 0058 (2)将凡士林水浴加热全部烊化后加入对羟基苯甲酸乙酯， 搅拌使对羟基苯甲酸 说 明 书 4/10 页 6 CN 108567852 A 6 乙酯全部溶解； 将。

24、凡士林与硬脂酸甘油酯混合， 加热至熔融， 混匀， 加入提取物1或提取物2 或提取物3， 快速搅拌使分散均匀； 0059 (3)将上述两步骤所得产物混合， 搅拌均匀， 冷却即得软膏成品。 0060 本方中应用凡士林有利于创面的保湿和润滑作用， 且有适宜的黏稠性和涂展性， 性质稳定无刺激； 羊毛脂有较强的吸水性， 可吸收约2倍重量的水， 可改善凡士林的吸水性， 能牢固粘附与皮肤上， 不易洗去； 硬脂酸甘油酯作为基质的稳定剂或增稠剂， 可使基质对温 度变化的敏感度降低； PEG4000起稳定和增粘作用。 为防止软膏被微生物污染发生质变， 软 膏中需加入适当的防腐剂， 对羟基苯甲酸乙酯作为防腐剂， 具。

25、有低毒、 无臭无味、 不挥发、 性 质稳定无刺激性的优点。 0061 实施例8 0062 制备外用搽剂的药物组合物： 0063 (1)制备提取物 0064 A.按处方量， 辣椒用90-95乙醇浸提， 回收乙醇得到辣椒提取物； 花椒采用80 酸乙醇(pH3)提取后， 提取液过大孔吸附树脂柱(大孔吸附树脂优选XDA-5、 HPD100， 但不 仅限于这两者)， 用水、 10乙醇分别洗涤柱体， 继用80乙醇洗脱， 回收乙醇， 得到花椒提 取物； 川芎用70乙醇浸提， 回收乙醇得到川芎提取物， 浓缩至一定体积， 将花椒提取物、 辣 椒提取物、 川芎提取物混合， 得到提取物4； 0065 B.按处方量，。

26、 分别用超临界萃取方法萃取得到花椒提取物、 辣椒提取物、 川芎提取 物， 混合， 得提取物5； 0066 C.按处方量， 分别采用压榨方法得到花椒提取物、 辣椒提取物， 采用超临界萃取方 法得到川芎提取物， 将花椒提取物、 辣椒提取物、 川芎提取物混合， 得到提取物6； 0067 (2)制备外用搽剂 0068 其原料配方按重量百分比为透明质酸钠0.1-0.5、 聚乙烯醇2-15， 95乙 醇1-7、 尼泊金乙酯0.1-0.5、 香精0.05-0.1、 中药提取物占60-95， 包括如 下步骤： 0069 (1)用乙醇将尼泊金乙酯溶解， 备用， 为A相； 0070 (2)将透明质酸钠、 聚乙烯醇。

27、于二倍的50-70的清水中， 搅拌均匀， 为B相； 0071 (3)将提取物4或提取物5或提取物6， 置于搅拌器内， 把上述A相、 B相混合加到搅拌 器内， 搅拌均匀加入香精， 调节pH为6-7， 即为混悬型液体制剂， 经装瓶包装后， 为本发明糖 尿病足外用搽剂。 0072 实施例9 0073 制备外用搽剂的药物组合物： 其原料配方按重量百分比为透明质酸钠0.1- 0.5、 聚乙烯醇2-15， 95乙醇1-7、 尼泊金乙酯0.1-0.5、 香精0.05- 0.1、 中药提取物占60-95。 用乙醇将尼泊金乙酯溶解， 备用， 为A相； 将透明质酸钠、 聚 乙烯醇于二倍的50-70的清水中， 搅拌。

28、均匀， 为B相； 按处方量， 分别加入市场购买的辣 椒油、 花椒油以及川芎提取物， 置于搅拌器内， 把上述A相、 B相混合加到搅拌器内， 搅拌均匀 加入香精， 调节pH为6-7， 即为混悬型液体制剂， 经装瓶包装后， 为本发明糖尿病足外用搽 剂。 0074 实施例10 说 明 书 5/10 页 7 CN 108567852 A 7 0075 对本发明的药物组合物进行药效学研究与安全性研究， 研究过程如下： 0076 一、 试验材料 0077 试验样品： 实施例1-9制备的样品。 0078 链脲佐菌素： 规格1g， ALEXIS公司生产， 批号01291613、 06191707。 用前用0.l。

29、mo1/L 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(pH4.2-pH4.4)配制， 现配现用。 0079 四氧嘧啶(Alloxan monohydrate)： A7413-10g， lot BCBR9198V， Sigma aldrich出 品。 0080 盐酸吗啡缓释片： 规格为30mg/片*10片/板/盒， 批号16120047。 太极集团西南药业 股份有限公司出品。 临用前用0.5CMC-Na配成所需浓度的混悬液备用。 0081 二、 试验动物 0082 SD大鼠， SPF级， 生产合格证号是SCXK(川)-2013-19， 由四川省中医药科学院实验 动物中心提供。 0083 昆明种小鼠： SPF级， 。

30、由四川省达硕实验动物中心提供。 生产许可证号为SCXK(川 2015-030号)。 0084 日本大耳兔： 普通级， 体重1.82.2kg， 雌雄各半， 由四川省实验动物专委会养殖 场提供， 合格证号： SCXK(川)2013-14号。 0085 三、 试验方法与结果 0086 1、 不同提取物对糖尿病小鼠的镇痛作用研究 0087 取体重为2226g的雌性昆明小鼠， 适应性喂养两天后， 随机分为2组： 正常对照组 和糖尿病模型组。 复制糖尿病模型组动物在禁食不禁水24小时后， 一次性腹腔注射四氧嘧 啶200mg/kg， 正常对照组腹腔注射等容积生理盐水。 于造模后72小时测定小鼠随机血糖， 将。

31、 随机血糖值16.65mmo1/L的动物作为进一步实验的合格动物。 7天之后， 将糖尿病小鼠按表 1随机分组给药， 实验前30min在各小鼠每只足底部均匀涂抹0.1g药物制剂或基质辅料， 试 验时用干棉花轻轻将其药物或基质擦拭干净。 吗啡组则在试验前30min灌胃给药。 然后用热 板法测定各动物的痛阈值， 结果详见表1。 0088 从表1可见， 糖尿病小鼠对热的痛敏感性明显增加， 与对照组比较比较差异具有统 计学意义； 花椒、 藤椒单独使用、 与川芎或辣椒合用均有较好的镇痛作用， 与模型组比较差 异具有统计学意义； 当花椒(或藤椒)与辣椒、 川芎三者合用时， 其镇痛作用明显优于花椒、 藤椒单用。

32、或与辣椒或川芎合用。 提示三者合用时在改善糖尿病神经变敏感性方面具有显著 的协同增效作用。 0089 表1各提取物对糖尿病小鼠神经敏感性的影响 说 明 书 6/10 页 8 CN 108567852 A 8 0090 0091 与模型组比较： *P0.05；*P0.01(*P、*P分别指统计学中的概率)。 0092 2、 不同提取物对破损皮肤家兔刺激性作用研究 0093 取体重为2kg2.5kg的健康家兔， 雌雄各半。 按性别体重随机均分为两组。 给药前 24h将家兔背部脊柱两侧毛剪去， 随后用8硫化钡脱毛， 每侧脱毛范围约33cm2。 试验时 将动物脱毛区皮肤以消毒针头划成小 “#” 形， 。

33、至渗血为度， 作为破损皮肤组。 在动物的右侧 脱毛区涂药物1g/只， 左侧涂基质辅料约1g/只作对照。 给药后局部覆盖纱布和保鲜薄膜， 并 以胶布固定， 保持药物与皮肤接触6h后去除纱布和保鲜薄膜， 然后以温水洗去残留药物。 完 整皮肤组以同样方法给药。 在去除药物后3060分钟， 24、 48和72小时肉眼观察并记录涂敷 部位有无红斑和水肿等情况， 并按表2所示标准对其刺激性进行评分， 按以下公式计算其皮 肤刺激试验反应平均值： 皮肤刺激试验反应平均值(红斑形成总分+水肿形成总分)/合计 动物数。 然后根据反应分值按表3评价标准对其刺激强度进行判断。 如有明显病变则在末次 给药后72h取受试。

34、皮肤标本做病理检查。 0094 表2皮肤刺激反应评分标准 说 明 书 7/10 页 9 CN 108567852 A 9 0095 0096 表3皮肤刺激强度评价标准 0097 0098 表4不同提取物对家兔皮肤刺激评分的影响 0099 说 明 书 8/10 页 10 CN 108567852 A 10 0100 0101 从表4可见， 花椒、 藤椒、 辣椒单独使用对皮损皮肤具有轻、 中度的刺激性， 当花椒 或藤椒与辣椒提取物合用时， 其对皮损皮肤的刺激作用与辣椒单独使用时相似， 不存在相 加作用； 当花椒、 藤椒或辣椒与川芎合用时， 其对破损皮肤的刺激作用明显减弱， 当三者合 用时， 这种对。

35、皮肤刺激的作用进一步减弱， 由此可证明， 花椒(或藤椒)、 辣椒、 川芎三者合用 时具有明显的减毒作用。 0102 3、 不同实施例对糖尿病大鼠皮肤融合作用研究 0103 取体重为200250g雄性大鼠， 随机取10只作为对照组， 其余大鼠在禁食不禁水24 小时后， 静脉注射链脲佐菌素(STZ)40mg/kg， 于并在注射STZ72小时测定大鼠血糖， 取其血 糖水平在16.5mmol/L以上的大鼠作为正式试验大鼠。 大鼠在腹腔注射戊巴比妥钠35mg/kg 麻醉后， 背部去毛后在无菌情况下， 用手术刀切除直径为1.5cm的皮肤圈， 深度达皮肤全层， 对照组也照此操作。 术后第二天， 将糖尿病皮损。

36、大鼠按表4随机分组， 给药， 每天给药一次， 连续7天， 每只动物0.2原生药g/kg， 模型组和对照组则给予等量基质。 末次给药后24小时， 用生理盐水清洗皮损处， 用游标卡尺测量皮损区新生皮肤的厚度， 结果进行统计学分析。 结 果详见表5。 0104 表5不同实施例对糖尿病大鼠皮肤伤口生长速度的影响 0105 说 明 书 9/10 页 11 CN 108567852 A 11 0106 0107 与模型组比较： *P0.05；*P0.01。 0108 从表5可见， 糖尿病大鼠皮肤伤口的愈合作用明显减慢， 与对照组比较差异具有统 计学意义； 各实施例均有刺激糖尿病大鼠皮肤伤口愈合的作用， 与模型组比较具有统计学 差异。 0109 从上面的药效及安全性评价结果可以看出， 花椒(或藤椒)、 辣椒、 川芎三者合用时 既有明显的协同增效作用， 同时也显著的协同拮抗毒性作用， 具有良好的应用前景。 0110 以上所述实施例仅表达了本申请的具体实施方式， 其描述较为具体和详细， 但并 不能因此而理解为对本申请保护范围的限制。 应当指出的是， 对于本领域的普通技术人员 来说， 在不脱离本申请技术方案构思的前提下， 还可以做出若干变形和改进， 这些都属于本 申请的保护范围。 说 明 书 10/10 页 12 CN 108567852 A 12 。