技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种扩繁烟蚜茧蜂的方法，特别涉及一种以烟蚜 为寄主扩繁烟蚜茧蜂的方法。
背景技术
蚜虫是地球上最具破坏性的害虫之一。目前已经发现的蚜虫总共有10个科约4400 种，其中大约有250种是对于农林业和园艺业危害严重的害虫。常群集于叶片、嫩茎、 花蕾、顶芽等部位，通过刺吸吮食植物汁液，使叶片皱缩、卷曲、畸形，造成植物营 养损失和器官的机械损伤，此外，蚜虫可以传播植物病毒病害，其分泌的蜜露可滋生 多种植物真菌和细菌等病原生物，造成植物病害的发生与流行。蚜虫还具有极强的繁 殖本能，一些种类的蚜虫具有独特而复杂的繁殖方式，即孤雌生殖，这样的生殖循环 一直持续到整个夏季，环境条件合适每5天就能繁殖1代，大约20-40天能够繁殖多 代。因此一只雌虫在春季孵化后可以产生数以亿计的蚜虫。例如，甘蓝蚜（Brevicoryne brassicae）能够繁殖41代雌性，如果全部成活的话，可以达到1.5×1027个后代。
由于蚜虫对于植物特别是经济作物的危害，人们花费大量的人力物力试图控制蚜 虫的为害。其中有效的措施很多，例如使用内吸式的化学杀虫剂，就能快速杀灭蚜虫。 此外，自然界中有大量的昆虫天敌捕食或寄生于蚜虫，也有一些细菌、真菌以及病毒 侵染蚜虫。蚜虫的天敌昆虫种类很多，有瓢虫、食蚜蝇、蚜茧蜂、食蚜瘿蚊、蚜狮、 草蛉和蜘蛛等。其中蚜茧蜂是一类专门寄生蚜虫的寄生性天敌昆虫，对蚜虫的自然控 制效果极为显著，其在农林业生产中发挥着不可替代的重要作用。利用蚜茧蜂防治蚜 虫有利于减少化学农药的使用，保护环境，维持生态平衡和保护生物多样性，对农业 可持续发展战略的实施具有重要意义。
烟蚜茧蜂Aphidius gifuensis以其生殖力强，自然寄生率高，世代周期短，适应性 强并易于人工繁殖等优良性状成为蚜茧蜂科中利用价值很高的天敌昆虫之一。该蜂主 要分布在中国大陆、台湾，韩国，日本等亚洲东部地区，对寄主蚜虫的自然控制力较 强，其寄主范围广泛，可寄生烟蚜、萝卜蚜、小麦长管蚜、大豆蚜、棉蚜、及茄无网 蚜等，对烟蚜的防治效果尤其显著。在烟田，烟蚜茧蜂对烟蚜的寄生率通常为 20%～60%，高者可达89.16%。近年来，烟蚜茧蜂受到了国内外的高度关注，其扩繁与 应用得到了广泛的开展，并在实际应用中取得了极好的防控效果。
鉴于烟蚜茧蜂的优良生防能力，总结筛选高效扩繁技术，大量生产天敌昆虫产品， 对于防控我国蔬菜、园艺、农业、林业上的蚜类害虫具有重大的意义。近年来，我们 结合烟蚜茧蜂发育学、营养学、生理学及其对害虫控害能力评价，开展了烟蚜茧蜂的 大规模扩繁技术发明研究，围绕繁蜂寄主筛选、最佳接蜂比例、接蜂关键时机、成蜂 收集贮存等技术环节，经过反复探索与改进，形成了高效、经济、简便的寄生蜂扩繁 技术，提高了寄生蜂产量，促进了蚜虫的生物防治能力提升。
近年来，见到云南省烟草农业科学研究院、云南省烟草公司玉溪市公司、云南省 烟草公司曲靖市公司、云南省烟草公司大理州公司、云南省烟草公司红河州公司、云 南省烟草科学研究所等单位关于烟蚜茧蜂扩繁相关的发明专利及实用新型专利。上述 单位主要采用在小型温棚内，先种植烟草、再接入烟蚜、再接入烟蚜茧蜂，并回收烟 蚜茧蜂成虫的扩繁技术路线。该类发明主要适用于在我国南方（特别是云南省）利用 烟草为载体植物在温棚内扩繁寄生蜂。
在扩繁烟蚜茧蜂的实践中，我们发现上述技术不适于我国北方地区，主要表现为： 第一、烟草生长周期长，从播种到接蚜虫往往需要90d以上时间，需要大量的人力物 力资源；第二，烟草生长需要较大空间，单株烟草可长至2米高，需要1*1米的间距 来安排烟草栽培，需要较大面积的扩繁场所；第三，烟草叶片具有粘性，不利于寄生 蜂收集；第四，收集成蜂，不利于产品储存及运输。
综上所述，目前急需一种可克服以上缺点，适宜在我国北方地区扩繁烟蚜茧蜂的 技术，从而满足我们北方农业生产上烟蚜生物防治的需要。
发明内容
本发明的目的是提供一种扩繁烟蚜茧蜂的方法。
本发明所提供的扩繁烟蚜茧蜂的方法，具体可包括如下步骤：向带有烟蚜的油菜 幼苗接种待产卵的烟蚜茧蜂雌蜂，进行出蜂培养，收集烟蚜茧蜂，实现扩繁。
在所述方法中，所述待产卵的烟蚜茧蜂雌蜂的接种数量与所述烟蚜数量的比例为 1：130至1：190，如1：130至1：160，或1：160至1：190。
在本发明的一个实施例中，所述待产卵的烟蚜茧蜂雌蜂的接种数量与所述烟蚜数 量的比例具体为1：130，1：160或1：190。
在上述方法中，所述进行出蜂培养的培养条件为：白天（6：00到20：00）温度 25±1℃，夜间（20：00到次日6：00）温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%，光周 期L∶D=14h∶10h。
在上述方法中，时间为4-14天，如4-8天或10-14天。
具体的，在所述方法中，当所述收集烟蚜茧蜂为收集所述烟蚜茧蜂僵蚜时，所述 进行出蜂培养的培养时间可为4-8天（如5天）；当所述收集烟蚜茧蜂为收集所述烟蚜 茧蜂成蜂时，所述进行出蜂培养的培养时间可为10-14天（如11天）在一定的温度范 围内，烟蚜茧蜂随着温度的升高发育周期缩短，因此，繁殖周期也会相应地缩短。
在上述方法中，所述带有烟蚜的油菜幼苗满足如下条件：每株所述油菜幼苗上带 有3700-4200头（具体如3704头或4120头）所述烟蚜。
在本发明中，所述带有烟蚜的植物幼苗的制备方法包括如下步骤：向所述油菜幼 苗接种待产卵的雌性烟蚜成蚜，接种密度为每株所述油菜幼苗接种50-70头（如50头） 所述待产卵的雌性烟蚜成蚜，培养（如培养7d）至每株所述油菜幼苗上带有3700-4200 头烟蚜（在培养期间新生长出的叶片上的烟蚜数量不计），得到所述带有烟蚜的油菜幼 苗。
所述方法中，接种所述待产卵的雌性烟蚜成蚜时，所述油菜幼苗为7-8片真叶（如 7片真叶）的油菜幼苗。此时，所述油菜幼苗具体为生长27-30，如生长27天的油菜 幼苗；所述生长27-30天的油菜幼苗为油菜种子播种后培育27-30天得到的油菜幼苗， 种子播种之日记作第1天。
上述方法中，所述生长27天的油菜幼苗按照包括如下a和b步骤的方法制备：
a、将油菜的种子播种，培育至苗高为10cm；
所述培育的时间具体为14天，将播种日记作第1天；
b、将步骤a所得油菜幼苗移栽到含有培养基质的营养钵中，继续培育至得到带有 7-8片真叶的油菜幼苗；
上述将步骤a所得油菜幼苗移栽到含有培养基质的营养钵（12cm×12cm）中具体 为按照每钵2棵所述油菜幼苗移栽，
上述培养基质具体为草炭和蛭石以体积比2︰1混合的混合物；
所述继续培育的时间具体为13天
各种所述培育的条件均具体为白天温度28℃±1℃、夜间22±1℃、相对湿度 65%-70%、光周期L∶D=14h∶10h。
在所述方法中，所述收集烟蚜茧蜂具体可为收集所述烟蚜茧蜂僵蚜，也可为收集 所述烟蚜茧蜂成蜂。
当收集所述烟蚜茧蜂僵蚜时，按照如下A的操作进行；当收集所述烟蚜茧蜂成蜂 时，按照如下B的操作进行：
A将经所述出蜂培养后的带有僵蚜的油菜幼苗叶片在水中浸泡10-15分钟，且同 时震荡以脱落所述僵蚜，收集所述僵蚜；
B将所述经出蜂培养后的带有僵蚜的油菜幼苗叶片置于开口端封闭的容器中，并 将所述容器置于集蜂箱中，在所述集蜂箱的上方提供亮光，待所述烟蚜茧蜂僵蚜羽化 后，打开所述容器的开口，利用所述烟蚜茧蜂成蜂的趋光性，所述烟蚜茧蜂成蜂自动 进入集蜂箱完成收集。
在上述方法中，所述油菜具体为油菜品种绿锦一号。
本发明所提供的扩繁烟蚜茧蜂的方法，便捷、经济、易于标准化操作，可快速大 量扩繁烟蚜茧蜂，达到对害虫生物防止的目的。本发明的优势在于：（1）成本低廉： 技术采用的种苗扩繁环节，油菜为常用品种，扩繁的基质（蛭石）可多次使用，只需 经日光曝晒即可。各环节采用的营养钵、纱网等均是低值品，易购得并能自行加工。 （2）空间利用率高：本技术不限扩繁空间，大至扩繁天敌的生产线、小至简易的温室 和塑料棚，均可用来扩繁烟蚜茧蜂天敌产品。（3）便于工厂化操作：本技术涉及扩繁 烟蚜茧蜂的各个环节，均可集约化操作，便于工厂化生产。（4）僵蚜及成蜂可自动收 集，并能分别针对防控对象的不同而收集僵蚜、成蜂，快速释放，节省大量的人工物 力。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中，光周期Lx：Dy表示每天光照时长x小时，黑暗时长y小时，x+y=24。
烟蚜（Myzus persicae）：记载于“曾钰.我国烟蚜防治研究概述.安徽农业科学，2011, 39(2):826-827.”一文中，公众可从中国农业科学院植物保护研究所获得。环境事宜3d 即可繁殖1代。
烟蚜茧蜂（Aphidius gifuensis）：记载于“毕章宝，季正瑞.烟蚜茧蜂Aphidius gifuensis Ashmead生物学研究.河北农业大学学报,1993,16(2):1-8.”一文中，公众可从中国农业 科学院植物保护研究所获得。
为满足扩繁的需求，需建立烟蚜和烟蚜茧蜂的保种种群，此二种群适宜的保种环 境条件为：白天温度25±1℃，夜间温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%，光周期L∶ D=14h∶10h。定期从野外采集土著种群进行复壮。
油菜品种绿锦一号：可从北京中农百禾科技发展有限公司购买。
实施例1、利用烟蚜扩繁烟蚜茧蜂的方法
一、种苗的培育
1、种苗品种选择
经筛选，确定以油菜扩繁最宜。品种为绿锦一号。选择颜色正、颗粒大、饱满、 形状规则、质地均匀的种子。
2、种苗的快繁
快繁培育条件：白天（6：00到20：00）温度28±1℃、夜间（20：00到次日6： 00）温度22±1℃、相对湿度65%～70%、光周期L∶D=14h∶10h。
1）催芽播种：在封闭隔离的种苗培育室内，于72孔育苗穴盘内放入混合土（草 炭和蛭石以体积比2︰1混匀），约为每孔容积的3/4，然后向育苗穴盘内撒入油菜种子 （每孔约4～5粒种子）并在种子上覆盖一层营养土（以刚没过油菜种子为宜），将育苗 穴盘放入托盘内并浇入适量水将营养土润湿均匀（切忌水不可过多，防止种子腐烂）。
2）及时分钵：种子萌发且苗高为10cm左右（约14d，将播种日记作第1天）后， 将油菜苗移到直径为9cm的营养钵中，以混合土（草炭和蛭石以体积比2︰1混匀） 栽培，每钵2棵。
3）快繁保障：油菜苗可在分钵后13d内长至7～8片真叶。
4）多叶载体接虫：当油菜苗长到7～8片真叶时，即可用于下一环节。
二、寄主的扩繁
1、寄主遴选：
选择烟蚜茧蜂优势寄生的寄主——烟蚜。
2、保种维持：即保种种群的建立与维持。
为满足扩繁的需求，需建立烟蚜的保种种群，保种环境条件为：白天（6：00到 20：00）温度25±1℃，夜间（20：00到次日6：00）温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%， 光周期L∶D=14h∶10h。定期从野外采集土著种群进行复壮。
3、接种
1）接种时间的选择
试验材料：油菜（绿锦一号品种）、烟蚜；
试验方法：在人工气候箱（宁波江南，RXZ-500C型）内白天（6：00到20：00） 温度25±1℃，夜间（20：00到次日6：00）温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%， 光周期L∶D=14h∶10h条件下，培养油菜及后期接入的烟蚜。在油菜真叶充分展开后， 选择真叶片数为2-10的不同阶段的油菜幼苗进行试验，每株油菜接入蚜虫50头，再 经7天连续培养，用计数器随机测量1片真叶上的蚜虫量，估算蚜虫总量，并计算单 叶载蚜量。在此期间新生长出的叶片上蚜虫数量不计。重复20次。
试验结果：如表1所示，随着油菜幼苗真叶片数增多，全株油菜载蚜总量呈上升 趋势，先期蚜量升高趋势显著，后期则保持稳定。在平均单叶载蚜量方面，波动幅度 较小，在410-530头/叶之间波动。考虑到生产成本、提高效率，生产上可以采纳在第 7-8片真叶充分展开时，接入蚜虫，经7d连续培养，蚜虫总量可达3700-4200头，即 维持在4000头/株油菜水平、单叶载蚜量维持在500头左右，比较理想。
表1接蚜虫时间测试结果
2）接寄主量的选择
试验材料：油菜（绿锦一号品种）、烟蚜；
试验方法：在人工气候箱（宁波江南，RXZ-500C型）内白天（6：00到20：00） 温度25±1℃，夜间（20：00到次日6：00）温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%， 光周期L∶D=14h∶10h条件下，培养油菜及后期接入的烟蚜。在油菜第7片真叶充分 展开后，每株油菜接入蚜虫，接虫数量分别为每株10头、30头、50头、70头、90 头、110头、150头，再经7天连续培养，计算总载蚜量。用计数器随机测量1片真叶 上的蚜虫量，估算蚜虫总量，计算单叶载蚜量，并对蚜虫体型进行观察。在此期间新 生长出的叶片上蚜虫数量不计。重复20次。
试验结果：接蚜数量选择性试验结果如表2所示，从中可见，接蚜量为50头/株 时，经7d连续培养后，蚜虫总数达到3980头，单叶载蚜量568.9头；当接蚜量为70 头/株时，蚜虫总数达到4000头，单叶载蚜量达到为571.7头，但蚜虫个体变小，蚜茧 蜂已不喜寄生产卵；接蚜量进一步升高到90头/株时，蚜虫总数达到4200头，单叶载 蚜量增至600头。接蚜量再升高时，蚜虫总数基本维持在4200头/株的规模，而单叶 载虫量则维持在较高水平，除了蚜虫体型显著变小外，还出现了大量的有翅蚜，呈现 出蚜虫群体数量过大，油菜寄主的营养供应不足，有翅蚜虫数量增加，迁飞外逃现象 出现。综合考虑生产成本、扩繁效率等因素，生产上确定以50头/株的接虫数量为佳， 也可适当增加接种数量，以50-70头/株为宜。
表2接蚜数量选择试验结果
4、批次式扩繁
每间隔2周按上述方法培育种苗、饱和接虫，以其实现接力性的批次式生产，满 足防控要求，保证产品供给。
三、繁蜂
1、最适接蜂比的确定
试验材料：油菜（绿锦一号品种）、烟蚜和烟蚜茧蜂；
试验方法：在人工气候箱（宁波江南，RXZ-500C型）内白天（6：00到20：00） 温度25±1℃，夜间（20：00到次日6：00）温度20±1℃，相对湿度RH65%～70%， 光周期L∶D=14h∶10h条件下，培养油菜及后期接入的烟蚜和烟蚜茧蜂。在油菜第7 片真叶充分展开后，每株油菜接入蚜虫50头，再经7天连续培养，此时蚜虫种群数量 达到4000头/株，将初羽化的烟蚜茧蜂雌蜂置于混合种群1d，完成交尾后，再按1:100、 1:130、1:160、1:190、1:220、1:250的蜂蚜比例接入烟蚜茧蜂雌蜂（已完成交配、健 壮且待产卵），即分别每株油菜苗接入40头、31头、25头、21头、18头、16头烟蚜 茧蜂雌蜂（已完成交配、健壮且待产卵）。培养5d后计算烟蚜茧蜂僵蚜数量。用计数 器随机测量1片真叶上的僵蚜量，估算总量，并计算单蜂贡献率（单蜂贡献率=僵蚜总 数/接蜂数）。在此期间新生长出的叶片上僵蚜数不计。重复20次。
试验结果：接蜂数量试验结果如表3，从中可见随接蜂数量的增加，烟蚜茧蜂僵 蚜数量呈上升趋势并逐渐趋于平稳，单蜂贡献率则是先上升再下降的趋势。这主要是 由于烟蚜茧蜂在寄生蚜虫的行为中，存在螫刺试探过程，一般要经反复多次的对蚜虫 螫刺挑选，判定该蚜虫符合子代营养需求后，才在蚜虫体内产卵，如果烟蚜茧蜂密度 过高，对蚜虫反复螫刺频繁，形成的机械损伤将致使更多的烟蚜死亡，已在该蚜虫体 内产卵的烟蚜茧蜂也不能完成发育过程，影响了僵蚜的形成。从僵蚜数量指标来看， 蜂蚜比例为1:100-160之间，僵蚜数量维持在900头/株的水平，达到较高水平；从单 蜂贡献率的角度看，蜂蚜比例为1:160-250的区间，单蜂贡献率维持在35头僵蚜/蜂的 较高水平。综合生产实际，蜂蚜比例为1:160时，既发挥了寄生蜂最佳的寄生效能， 形成的僵蚜数量也最多，是理想化的接蜂比例。
表3最佳接蜂比例筛选试验结果
综合以上各试验的结果，扩繁烟蚜茧蜂最佳组合为：生长期为27d的油菜幼苗 （7-8片真叶）＋每株油菜接种50头待产卵的雌性烟蚜成蚜培养7d＋接蜂比为1:160 的待产卵的雌性烟蚜茧蜂成蜂。该组合可以大大节约繁蜂成本，能促进烟蚜茧蜂的大 规模繁殖乃至商品化生产。
2、繁殖周期的确定
在室内繁殖烟蚜茧蜂时，从种植寄主植物油菜、接种寄主烟蚜、接种烟蚜茧蜂到 成蜂羽化，共需要44d左右。从接种烟蚜茧蜂到收获成蜂，整个繁蜂周期大约为11d， 详见表4。在一定的温度范围内，烟蚜茧蜂随着温度的升高发育周期缩短，因此，繁 殖周期也会相应地缩短。
表4烟蚜茧蜂生产周期
生产流程 时间(天) 培育油菜苗 1～27 接种烟蚜 28 管理已接种烟蚜的油菜苗 29-33 接种烟蚜茧蜂 34 烟蚜茧蜂的发育 35-43 收集烟蚜茧蜂成蜂 44
四、自动化收集
产品收集技术按收集虫态的不同可分为两类：一类为收集僵蚜，一类是收集成蜂， 分别采取不同的收集方法。由于收集成蜂存活寿命短，不利于天敌昆虫产品贮存、包 装、远距离运输，也不便于田间释放，故此本发明同时提供了针对僵蚜进行收集的方 法。
收集僵蚜（在接蜂后第4-8天进行）的方法较简单，也便于制作蛹卡。方法是收 集半干燥的油菜叶片，置入覆盖纱网的水槽内，侵水10～15分钟，期间轻轻震荡，烟 蚜茧蜂僵蚜即可从叶片上脱落，并浮于上层，使用笊篱捞出即可。收集所得僵蚜可视 市场对烟蚜茧蜂产品的需求时间，酌情调整温度，以加快或延缓发育进度，控制其羽 化为烟蚜茧蜂的时间。
如需对成虫进行收集，可利用烟蚜茧蜂成虫有向上方聚集、趋光的习性，将快羽 化的僵蚜连同油菜叶片置入小型罩笼内，罩笼呈倒置的漏斗状，围以不透光的黑布， 上方留有开口。收集前将开口扎紧，置入集蜂箱内，并于上方悬挂白炽灯一盏。待大 量成虫羽化后，可打开白炽灯，利用烟蚜茧蜂成蜂的趋光性，使之聚集于开口处，适 时解开扎紧的开口，烟蚜茧蜂成蜂自动进入集蜂箱。