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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201810473560.7 (22)申请日 2018.05.17 (71)申请人 南京同凯兆业生物技术有限责任公 司 地址 210000 江苏省南京市浦口区双峰路8 号 (72)发明人 陈晓春 张磊 汤亦文 周昌祝 蔡家栋 (74)专利代理机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 代理人 肖明芳 (51)Int.Cl. A23K 20/147(2016.01) A23K 20/153(2016.01) A23K 20/163(2016.01) A23K 50/80。
2、(2016.01) (54)发明名称 一种饲料添加剂及其制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种饲料添加剂， 它包括核苷 酸1075、 寡核苷酸1075、 酵母葡聚糖0.5 5、 粗蛋白0.12和水分510。 与现有 技术相比， 本发明产品与用98纯度的核苷酸等 比例混合相比， 工艺简单， 成本低廉， 适合于实际 大规模应用； 同时， 本发明产品能有效促进水产 品， 特别是对虾的摄食量， 提高水产品免疫力和 抗病性， 从而提高产量。 此外， 本发明制备的饲料 添加剂是用生物法制备的， 绿色无污染， 不会对 水体造成破坏。 权利要求书1页 说明书6页 CN 108740358 A 2018。
3、.11.06 CN 108740358 A 1.一种饲料添加剂， 其特征在于， 它包括如下质量百分比的组分： 2.权利要求1所述的饲料添加剂的制备方法， 其特征在于， 它包括如下步骤： 将核糖核酸酶解后， 所得酶解产物经喷雾干燥即得。 3.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 酶解所用酶为核酸酶P1， 酶活为 2000u/ml。 4.根据权利要求3所述的制备方法， 其特征在于， 核酸酶P1和核糖核酸的质量比为0.1 5： 1。 5.根据权利要求2所述的制备方法， 其特征在于， 酶解反应条件为在3090， pH39 下反应时间110h。 6.权利要求1所述的饲料添加剂在水产品饲料中应用。。
4、 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 应用方法为， 将所述的饲料添加剂添加到 水产品基础饲料中。 8.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 应用方法为， 饲料添加剂的添加量为0.01 5wt。 权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 108740358 A 2 一种饲料添加剂及其制备方法与应用 技术领域 0001 本发明属于饲料添加剂领域， 具体涉及一种饲料添加剂及其制备方法与应用。 背景技术 0002 对虾养殖生产当前面临的最大问题是虾病， 随着对虾养殖的快速发展和集约化养 殖程度的提高， 以及采用人工饲料喂养， 在养殖过程中经常出现大规模暴发性流行病和大 批死亡的现象。 有。
5、关对虾病毒性疾病的防治， 目前尚缺乏适当的疫苗和药物， 人们试图通过 加强管理来防止这些灾难的发生。 有些养虾场用大蒜、 柠檬和生姜等民间偏方来进行治疗， 但效果并不令人满意。 针对这一种情况， 研究工作已转向通过加强营养以增强动物机体的 自身免疫力。 0003 在免疫方面已进行了大量的研究， 在实验室使用葡聚糖和其它化合物取得了令人 鼓舞的效果； 可是在生产上应用却很少取得成功。 从而推测， 对已受病原感染的虾进行免疫 系统再刺激并非是个好办法。 而应用能增强和促进免疫系统功能的营养物质却取得始终一 致的结果。 0004 酵母和鱼类水解物一直被用作饲料原料， 并因其良好的功效而被称为 “不明。
6、生长 因子(UGF)” 。 现已表明,很多饲料(如动物蛋白水解物、 酵母抽提物和单细胞生物等)之所以 对动物有生长促进作用， 是因为含有大量的核苷酸和天然的多聚核苷酸。 由于大多数生物 能自己合成核苷酸， 故一直被认为它是一种非必需的营养物。 近来的研究认为， 核苷酸对哺 乳动物(包括人类)、 家禽、 鱼类等是必需的营养物质， 尤其当动物处于应激状态下(如疾病、 损伤)或者在幼年和生长旺盛期， 若缺乏核苷酸对生长和健康不利。 0005 广东省农业科学院畜牧研究所的曹俊明等使用5种纯度98以上的核苷酸(腺苷 酸， 鸟苷酸二钠， 尿苷酸二钠， 胞苷酸和肌苷酸二钠)等比例混合， 结果表明， 饲料中添。
7、加一 定量的5种核苷酸混合物能显著提高凡纳滨对虾幼虾的增重率、 特定生长率、 摄食量、 蛋白 质沉积率、 全虾粗脂肪和灰分含量， 一定程度提高对虾的非特异性免疫功能。 0006 但由于高纯度的核苷酸制造成本非常昂贵， 而且缺乏其他有机成分做复配， 实际 应用受到限制。 本技术拟发明一种简单的核苷酸制造技术， 得到的产品富含核苷酸、 寡核苷 酸、 酵母细胞多糖、 蛋白等多种营养物质， 并在对虾上进行应用， 提高其免疫能力， 降低病害 的发生。 发明内容 0007 本发明要解决的技术问题是提供一种饲料添加剂及其制备方法与应用， 以解决现 有技术存在的效果不佳等问题。 0008 为解决上述技术问题，。
8、 本发明采用的技术方案如下： 0009 一种饲料添加剂， 它包括如下质量百分比的组分： 说 明 书 1/6 页 3 CN 108740358 A 3 0010 0011 其中， 优选如下质量百分比的组分： 0012 0013 进一步的， 优选如下质量百分比的组分： 0014 0015 上述饲料添加剂的制备方法， 其特征在于， 它包括如下步骤： 0016 将核糖核酸酶解后， 所得酶解产物经喷雾干燥即得。 0017 其中， 酶解所用酶为核酸酶P1， 购自安琪酵母股份有限公司， 酶活为5005000u/ ml， 优选酶活为2000u/ml。 0018 其中， 酶活的定义为将1.9ml的底物溶液(含有。
9、浓度为1左右的RNA； 0.2M pH5.2 的醋酸缓冲液以0.0005M的ZnSO4)于70恒温水浴10min后， 加入0.1ml经适当稀释的酶液， 70保温15min后加入2.0ml核酸沉淀剂(0.25钼酸铵-2.5过氯酸)， 冰水浴20min后离心、 取上清夜用蒸馏水稀释一定倍数， 测定其260nm处的吸光值为A260。 以先加沉淀剂者作为对 照， 其它操作同前； 在前述条件下， 每分钟所生成的核苷酸量在260nm处的吸光值的差值为 1.0时定义为1个酶活力单位。 0019 其中， 核酸酶P1和核糖核酸的质量比为0.15： 1， 优选0.52： 1， 进一步优选为1： 1。 0020 其。
10、中， 酶解反应的温度为3090， 优选为5080， 进一步优选为65。 0021 其中， 酶解反应的pH为39， 优选为47， 进一步优选为5.2。 0022 其中， 酶解反应的时间为110h， 优选为37h， 进一步优选为3.5h。 0023 上述饲料添加剂在水产品饲料中应用也在本发明的保护范围之内。 0024 其中， 所述的水产品为对虾、 龙虾、 鳗鱼和海参。 0025 其中， 应用方法为， 将所述的饲料添加剂添加到水产品基础饲料中。 说 明 书 2/6 页 4 CN 108740358 A 4 0026 其中， 应用方法为， 饲料添加剂的添加量为0.015wt， 优选为0.11wt； 添。
11、加 量为饲料添加剂与基础饲料的质量之比。 0027 特别的， 上述饲料添加剂在对虾饲料中应用也在本发明的保护范围之内， 应用方 法为将所述的饲料添加剂添加到对虾的基础饲料中， 可以促进对虾生长和增强对虾免疫功 能； 添加量为0.015wt， 优选为0.11wt。 0028 有益效果： 0029 与现有技术相比， 本发明具有如下优势： 0030 (1)本发明制备的饲料添加剂， 与用98纯度的核苷酸等比例混合相比， 工艺简 单， 成本低廉， 适合于实际大规模应用。 0031 (2)本发明制备的饲料添加剂， 能有效促进水产品， 特别是对虾的摄食量， 提高水 产品免疫力和抗病性， 从而提高产量。 00。
12、32 (3)本发明制备的饲料添加剂是用生物法制备的， 绿色无污染， 不会对水体造成破 坏。 具体实施方式 0033 根据下述实施例， 可以更好地理解本发明。 然而， 本领域的技术人员容易理解， 实 施例所描述的内容仅用于说明本发明， 而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本 发明。 0034 实施例1： 0035 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为0.3:1， 反应温度40， 反应pH4， 反应时间 2h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸26、 寡核苷酸65， 酵母葡聚糖1， 粗蛋白1、 水分7。 0036 实施例2： 0037 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w。
13、/w)为0.6:1， 反应温度45， 反应pH5， 反应时间 3h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸13、 寡核苷酸75， 酵母葡聚糖 1.2， 粗蛋白0.8、 水分10。 0038 实施例3： 0039 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为0.8:1， 反应温度50， 反应pH5.0， 反应时 间4h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸52、 寡核苷酸36， 酵母葡聚糖 4， 粗蛋白2、 水分6。 0040 实施例4： 0041 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为1:1， 反应温度65， 反应pH5.2， 反应时间 3.5h。 喷雾干燥后得到的核苷。
14、酸混合物组分为： 核苷酸45、 寡核苷酸45， 酵母葡聚糖 2， 粗蛋白1、 水分7。 0042 实施例5： 0043 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为1.2:1， 反应温度60， 反应pH6， 反应时间 5h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸60、 寡核苷酸28， 酵母葡聚糖 2.4， 粗蛋白0.6、 水分9。 0044 实施例6： 说 明 书 3/6 页 5 CN 108740358 A 5 0045 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为1.5:1， 反应温度80， 反应pH7， 反应时间 7h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸74、 寡核苷。
15、酸14， 酵母葡聚糖4， 粗蛋白1.5、 水分6.5。 0046 实施例7： 0047 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为2:1， 反应温度90， 反应pH8， 反应时间8h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸22、 寡核苷酸68， 酵母葡聚糖1， 粗蛋 白2、 水分7。 0048 实施例8： 0049 酶解反应中， 核酸酶： 核糖核酸(w/w)为1.8:1， 反应温度50， 反应pH3， 反应时间 2h。 喷雾干燥后得到的核苷酸混合物组分为： 核苷酸50、 寡核苷酸41， 酵母葡聚糖 1.5， 粗蛋白0.5、 水分7。 0050 在江苏六合地区， 对9家农户的养殖塘进行。
16、试验， 每户分为4个区域， 使用的添加剂 如下： 0051 组1： 使用实施例1制备的添加剂； 0052 组2： 使用实施例2制备的添加剂； 0053 组3： 使用实施例3制备的添加剂； 0054 组4： 使用实施例4制备的添加剂； 0055 组5： 使用实施例5制备的添加剂； 0056 组6： 使用实施例6制备的添加剂； 0057 组7： 使用实施例7制备的添加剂； 0058 组8： 使用实施例8制备的添加剂； 0059 组9： 不使用任何饲料添加剂。 0060 以上用户使用的对虾饲料均为市售同种产品， 营养成分见表1。 0061 组分质量百分比() 鱼粉34.2 豆粕12.6 花生麸高精面。
17、粉12.4 大豆卵磷脂26.3 鱼油3.6 氯化胆碱2.2 维生素C2.0 多维2.0 多矿2.6 海藻酸钠2.1 0062 每天分别在8:00、 15:00和20:00分3次投喂， 投料量为对虾质量的57， 并根据 摄食情况适当进行调整。 0063 从虾种投放到收获， 记录收获后的白对虾养殖效果， 具体见表2。 0064 表2 说 明 书 4/6 页 6 CN 108740358 A 6 0065 说 明 书 5/6 页 7 CN 108740358 A 7 0066 0067 通过以上试验可知， 本发明制备的对虾饲料添加剂具有很好的效益。 其中组4添加 量为0.2时效果最好， 发病率低至3.2， 存活率高达97.3， 养殖周期缩短至78天， 单虾 重达40.2g。 0068 实施例10： 利用实施例4所述成分比例制备的添加剂， 用于龙虾的喂养， 可增产 12。 0069 实施例11： 利用实施例4所述成分比例制备的添加剂， 用于鳗鱼的喂养， 可增产 18。 0070 实施例12： 利用实施例4所述成分比例制备的添加剂， 用于海参的喂养， 可增产 15。 说 明 书 6/6 页 8 CN 108740358 A 8 。