技术领域
本发明涉及林木繁殖技术领域，特别涉及一种柏木催芽组合物及其制剂和西藏柏木的播种育苗方法。
背景技术
西藏柏木(Cupressus torulosa D.Don)又名喜马拉雅柏木，国家级保护植物，濒危物种，高大乔木，高30-50m，胸径1-3m，冠幅达6m，为柏科柏木属常绿乔木，是喜马拉雅地区特有的针叶树种，分布于海拔2000-2500m的西藏东南部，具体为波密县的通麦、易贡和林芝县的排龙、通灯至门中一线。印尼、尼泊尔、不丹、锡金也有分布。
西藏柏木是珍贵的速生用材树种，树干饱满通直，木材淡黄色，纹理通直，结构细密，材质坚硬，有香气，易加工。可做建筑、桥梁、车厢、造纸、家具等用材。20世纪50年代初期昆明植物园引种驯化成功，1972年以来在云南推广种植，表现出速生、适应性广、抗性强、树干通直、树形优美等优良性状，与云南广为栽培的乡土树种冲天柏一样，已成为重要的造林绿化树种。其叶片和木材中含萜类化合物，可制精油，可治疗多种疾病，尤其是对呼吸道疾病的效果十分显著。西藏柏木是集木材、造林、精油提取于一体的珍稀植物。
西藏柏木由于其天然分布的生长环境比较特殊，分布地域有限；并且西藏柏木的树龄较长，原始林结实少，种子质量低劣，天然更新困难；加之自然灾害和人为砍伐，使得西藏柏木个体数量急剧减少，目前已处于濒危状态。研究表明引种后的西藏柏木生长迅速，在云南陆良县，栽植于宅旁的西藏柏木，经过3年的生长，树高最高可达5.57m，胸径最粗大6.0cm，已达到原生地25龄时的水平。
目前，西藏柏木的繁殖主要依靠播种育苗技术，但西藏柏木种子的发芽率较低，成苗率也较低，栽培环境难以控制，生产成本高。研发一种提高西藏柏木播种育苗成活率的技术，有利于增加西藏柏木种群数量，对于保护濒危植物具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种柏木催芽组合物及其制剂和西藏柏木的播种育苗方法。该柏木催芽组合物可显著提高西藏柏木种子的发芽率。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种柏木催芽组合物，包括IAA、6-BA和硝普钠。
吲哚乙酸(IAA)是一种植物体内普遍存在的内源生长素，属吲哚类化合物，又名茁长素、生长素、异生长素。吲哚乙酸广谱多用途，早期用它诱导番茄单性结实和坐果，在盛花期以3000毫克/升药液浸泡花，形成无籽番茄果，提高坐果率；促进插枝生根它是应用最早的一个方面。以100～1000毫克/升药液浸泡插枝的基部，可促进茶树、胶树、柞树、水杉、胡椒等作物不定根的形成，加快营养繁殖速度。1～10毫克/升吲哚乙酸和10毫克/升恶霉灵混用，促进水稻秧苗生根。25～400毫克/升药液喷洒一次菊花(在9小时光周期下)，可抑制花芽的出现，延迟开花。生长在长日照下秋海棠以10负5次方摩尔/升浓度喷洒一次，可增加雌花。处理甜菜种子可促进发芽，增加块根产量和含糖量。
6-BA是6-苄氨基腺嘌呤，别名：6-苄氨基嘌呤、细胞分裂素，英文通用名：6-Benzylaminopurine，分子式：C12H11N5。6-BA具有高效、稳定、廉价和易于使用等特点，因而被广泛采用，并且是组织培养者最喜爱的细胞分裂素。BA的主要作用是促进芽的形成,也可以诱导愈伤组织发生。可用于提高茶叶、烟草的质量及产量；蔬菜、水果的保鲜和无根豆芽的培育，明显提高果品及叶片的品质。
硝普钠首先在医学和动物学界崭露头角，近几年植物学方面的大量研究证实，硝普钠可以改善作物在低温、干旱、重金属、盐害等逆境中的出芽率和幼苗生长。
本发明将IAA、6-BA和硝普钠组合使用后可显著提高西藏柏木种子的发芽率，效果好于各单剂。
在本发明提供的实施例中，柏木为西藏柏木。
作为优选，IAA、6-BA与硝普钠的质量比为(30～60)：(50～100)：(3～8)。
优选地，IAA、6-BA与硝普钠的质量比为(50～60)：(80～100)：(6～8)。
更优选地，IAA、6-BA与硝普钠的质量比为60：100：8。
本发明还提供了一种柏木催芽剂，包括IAA、6-BA、硝普钠和溶剂。
作为优选，柏木催芽剂中IAA的浓度为30～60ppm，6-BA的浓度为50～100ppm，硝普钠的浓度为3～8ppm。
本发明还提供了一种西藏柏木的播种育苗方法，包括如下步骤：
将西藏柏木种子进行消毒处理、热处理，然后进行催芽处理，催芽处理所用催芽剂为本发明提供的柏木催芽剂，催芽处理的时间为7～9h；
将经过催芽处理的种子播种于播种基质中置于温室内，浇透水，覆膜，出苗后揭膜；
待芽苗长至5～6cm时，进行移栽。
本发明首次采用了热处理+催芽方法，打破种子休眠，减少了层积处理繁琐的步骤，种子萌发率与层积处理的萌发率相比提高了45％-50％。本技术对于西藏柏木在黄河以北地区的引种栽培以及推广具有十分重要的意义。
在本发明提供的实施例中，催芽处理的时间为8h。
作为优选，消毒处理采用的消毒液为多菌灵和次氯酸钠的混合液。
作为优选，以g/mL计，多菌灵的质量体积百分含量为1％～2％，次氯酸钠的质量体积百分含量为2％～3％。
作为优选，消毒处理的时间为20～30min。
作为优选，热处理为：将消毒后的种子浸泡于80～90℃水中3～5s，然后放入50～60℃水中，自然冷却后浸泡7～9h。
优选地，热处理为：将消毒后的种子浸泡于80～90℃水中3～5s，然后放入50～60℃水中，自然冷却后浸泡8h。
作为优选，以重量份计，播种基质由3～5份泥炭、2～4份砂粒和1～3份蛭石组成。
在本发明提供的一实施例中，以重量份计，播种基质由3份泥炭、2份砂粒和3份蛭石组成。
在本发明提供的另一实施例中，以重量份计，播种基质由4份泥炭、3份砂粒和1份蛭石组成。
在本发明提供的另一实施例中，以重量份计，播种基质由5份泥炭、4份砂粒和2份蛭石组成。
作为优选，西藏柏木种子的采集期为每年10～11月当球果由绿色转变为褐色，种鳞间裂缝明显时。
作为优选，温室的温度为24～26℃，湿度为50％～70％。
优选地，温室的温度为25℃，湿度为60％。
本发明提供了一种柏木催芽组合物及其制剂和西藏柏木的播种育苗方法。该柏木催芽组合物包括IAA、6-BA和硝普钠。本发明至少具有如下优势之一：
本发明柏木催芽组合物可显著提高西藏柏木种子的发芽率，发芽率可达85％以上；
本发明采用温室人工精细化播种育苗能克服传统育苗方法的一系列难题，使得发芽率分别高达85％以上，整齐度高，且幼苗生长健壮，并具有成苗快、生长周期短、操作简单的特点。解决了西藏柏木播种育苗过程中种子发芽率低、出苗率低、苗木不健壮、只能单一的春季播种育苗的问题；
本发明生产工艺简单，适应于工厂化育苗生产。规范了西藏柏木播种的一系列步骤，既能保护国家珍稀濒危植物西藏柏木野生资源，又解决了珍稀树种——西藏柏木的快繁效率问题，通过本发明最大程度的提高了西藏柏木的发芽率，加强了其幼苗质量，有利于工程生产，满足人们对于西藏柏木的资源需求。
具体实施方式
本发明公开了一种柏木催芽组合物及其制剂和西藏柏木的播种育苗方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种西藏柏木播种育苗方法，包括以下步骤：
(1)种子采集
采集地点为西藏易贡，10～11月当球果由绿色转变为褐色，种鳞间裂缝明显时，为最佳采种期。采种前，要选择成年健壮、干形好、无检疫性病害的植株为采种母树。切记采摘生长于主枝和大枝上多年不脱落，较长期宿存，也不开裂的球果，其种子多空瘪没有发芽力。
收集后的球果，摊开于通风干燥的地方，稍加晾晒，种鳞即可裂开，翻动球果，种子脱出。筛净种子，去除杂质和干瘪的种子，装入布袋于通风干燥处保存。
(2)种子消毒
用多菌灵+次氯酸钠(包括1-2％多菌灵和2-3％次氯酸钠。)浸泡种子20-30min，然后用清水冲洗后晾干。
(3)热处理
消毒后的种子放入80～90℃热水中烫种子3～5s，捞出来后放入50～60℃温水中浸泡，自然冷却浸泡8h。
(4)催芽处理
热处理后的种子浸入IAA+6-BA(细胞分裂素)+NO(硝普钠)的试剂中8h，做催芽处理。
30～60ppmIAA(吲哚乙酸)；
50～100ppm6-BA(细胞分裂素)；
3～8ppm NO(硝普钠)。
(5)播种
播种基质采用泥炭、砂粒、蛭石按比例(泥炭3～5份，砂粒2～4份，蛭石1～3份)混匀的营养土，基质经暴晒过后才可使用。基质混匀后摊铺在地上，用800倍的多菌灵+高锰酸钾喷洒基质和育苗盘(30cm*40cm*15cm)。育苗盘底部铺一层报纸，将育苗基质均匀的摊铺在育苗盘内，摊铺厚度为10cm，并稍微压实基质。
将种子条播在育苗盘内，播种后浇透水，以水从育苗盘滴下为宜。浇水后覆盖一层透明薄膜，35％种子出苗后揭开。播种完后放入温室内，每天检查播种盘内基质干湿情况，始终保持基质表面湿润，表面干时，可将播种盘浸水，从底部吸水，或从表面喷洒水，温室内每天保持温度在25℃，湿度在60％。
(6)移栽及后期管理
种子出苗后，芽苗长至5cm时，于上午10点前或下午3点后将其移栽，移栽于直径10cm的营养钵中。小苗移栽时，要使根系舒展，浇灌定根水，放于温室内，并适当遮荫。温室移栽后前一周，每天喷水，保持基质湿润，以后浇水原则为“不干不浇，浇则浇透”，注意阴天要减少浇水量。
本发明提供的柏木催芽组合物及其制剂和西藏柏木的播种育苗方法中所用试剂和基质均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
本实施例提供了一种西藏柏木播种育苗方法，包括以下步骤：
(1)种子采集
采集地点为西藏易贡，10～11月当球果由绿色转变为褐色，种鳞间裂缝明显时，为最佳采种期。采种前，要选择成年健壮、干形好、无检疫性病害的植株为采种母树。切记采摘生长于主枝和大枝上多年不脱落，较长期宿存，也不开裂的球果，其种子多空瘪没有发芽力。
收集后的球果，摊开于通风干燥的地方，稍加晾晒，种鳞即可裂开，翻动球果，种子脱出。筛净种子，去除杂质和干瘪的种子，装入布袋于通风干燥处保存。
(2)种子消毒
用1％多菌灵+3％次氯酸钠浸泡种子20min，然后用清水冲洗后晾干。
(3)热处理
消毒后的种子放入80℃热水中烫种子5s，捞出来后放入50℃温水中浸泡，自然冷却浸泡8h。
(4)催芽处理
试验组：热处理后的种子浸入30ppm IAA+50ppm 6-BA(细胞分裂素)+3ppmNO(硝普钠)的试剂中8h，做催芽处理。
对照组1：热处理后的种子浸入90ppmIAA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组2：热处理后的种子浸入150ppm6-BA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组3：热处理后的种子浸入9ppm NO的试剂中8h，做催芽处理。
催芽处理结束后统计西藏柏木种子的发芽率，试验结果见表1：
表1西藏柏木种子的发芽率
组别 发芽率％ 发芽时间d 试验组 86.7％ 8d 对照组1 65.3％ 12d 对照组2 58.8％ 17d 对照组3 60.7％ 15d
试验结果显示，将IAA、6-BA和NO在减少用量的情况下组合使用后，仍可显著提高西藏柏木种子的发芽率，发芽时间缩短了4-9d。
(5)播种
播种基质采用泥炭：砂粒：蛭石＝3:2:3的营养土，基质经暴晒过后才可使用。基质混匀后摊铺在地上，用800倍的多菌灵+高锰酸钾喷洒基质和育苗盘(30cm*40cm*15cm)。育苗盘底部铺一层报纸，将育苗基质均匀的摊铺在育苗盘内，摊铺厚度为10cm，并稍微压实基质。
将种子条播在育苗盘内，播种后浇透水，以水从育苗盘滴下为宜。浇水后覆盖一层透明薄膜，35％种子出苗后揭开。播种完后放入温室内，每天检查播种盘内基质干湿情况，始终保持基质表面湿润，表面干时，可将播种盘浸水，从底部吸水，或从表面喷洒水，温室内每天保持温度在25℃，湿度在60％。
(6)移栽及后期管理
种子出苗后，芽苗长至5cm时，于上午10点前或下午3点后将其移栽，移栽于直径10cm的营养钵中。小苗移栽时，要使根系舒展，浇灌定根水，放于温室内，并适当遮荫。温室移栽后前一周，每天喷水，保持基质湿润，以后浇水原则为“不干不浇，浇则浇透”，注意阴天要减少浇水量。按本实施例方法播种的西藏柏木的成苗率为85.3％。
实施例2：
本实施例提供了一种西藏柏木播种育苗方法，包括以下步骤：
(1)种子采集
采集地点为西藏易贡，10-11月当球果由绿色转变为褐色，种鳞间裂缝明显时，为最佳采种期。采种前，要选择成年健壮、干形好、无检疫性病害的植株为采种母树。切记采摘生长于主枝和大枝上多年不脱落，较长期宿存，也不开裂的球果，其种子多空瘪没有发芽力。
收集后的球果，摊开于通风干燥的地方，稍加晾晒，种鳞即可裂开，翻动球果，种子脱出。筛净种子，去除杂质和干瘪的种子，装入布袋于通风干燥处保存。
(2)种子消毒
用1.5％多菌灵+2.5％次氯酸钠浸泡种子25min，然后用清水冲洗后晾干。
(3)热处理
消毒后的种子放入85℃热水中烫种子4s，捞出来后放入55℃温水中浸泡，自然冷却浸泡8h。
(4)催芽处理
试验组：热处理后的种子浸入50ppm IAA+80ppm 6-BA(细胞分裂素)+6ppm NO(硝普钠)的试剂中8h，做催芽处理。
对照组1：热处理后的种子浸入150ppm IAA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组2：热处理后的种子浸入240ppm 6-BA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组3：热处理后的种子浸入18ppm NO的试剂中8h，做催芽处理。
催芽处理结束后统计西藏柏木种子的发芽率，试验结果见表2：
表2西藏柏木种子的发芽率
组别 发芽率％ 发芽时间d 试验组 85.3％ 10d 对照组1 68.7％ 13d 对照组2 56.8％ 16d 对照组3 62.6％ 17d
试验结果显示，将IAA、6-BA和NO在减少用量的情况下组合使用后，仍可显著提高西藏柏木种子的发芽率，发芽时间缩短了3-7d。
(5)播种
播种基质采用泥炭：砂粒：蛭石＝4:3:1的营养土，基质经暴晒过后才可使用。基质混匀后摊铺在地上，用800倍的多菌灵+高锰酸钾喷洒基质和育苗盘(30cm*40cm*15cm)。育苗盘底部铺一层报纸，将育苗基质均匀的摊铺在育苗盘内，摊铺厚度为10cm，并稍微压实基质。
将种子条播在育苗盘内，播种后浇透水，以水从育苗盘滴下为宜。浇水后覆盖一层透明薄膜，35％种子出苗后揭开。播种完后放入温室内，每天检查播种盘内基质干湿情况，始终保持基质表面湿润，表面干时，可将播种盘浸水，从底部吸水，或从表面喷洒水，温室内每天保持温度在25℃，湿度在60％。
(6)移栽及后期管理
种子出苗后，芽苗长至5cm时，于上午10点前或下午3点后将其移栽，移栽于直径10cm的营养钵中。小苗移栽时，要使根系舒展，浇灌定根水，放于温室内，并适当遮荫。温室移栽后前一周，每天喷水，保持基质湿润，以后浇水原则为“不干不浇，浇则浇透”，注意阴天要减少浇水量。按本实施例方法播种的西藏柏木的成苗率为87.6％。
实施例3：
本实施例提供了一种西藏柏木播种育苗方法，包括以下步骤：
(1)种子采集
采集地点为西藏易贡，10～11月当球果由绿色转变为褐色，种鳞间裂缝明显时，为最佳采种期。采种前，要选择成年健壮、干形好、无检疫性病害的植株为采种母树。切记采摘生长于主枝和大枝上多年不脱落，较长期宿存，也不开裂的球果，其种子多空瘪没有发芽力。
收集后的球果，摊开于通风干燥的地方，稍加晾晒，种鳞即可裂开，翻动球果，种子脱出。筛净种子，去除杂质和干瘪的种子，装入布袋于通风干燥处保存。
(2)种子消毒
用2％多菌灵+2％次氯酸钠浸泡种子30min，然后用清水冲洗后晾干。
(3)热处理
消毒后的种子放入90℃热水中烫种子3s，捞出来后放入60℃温水中浸泡，自然冷却浸泡7h。
(4)催芽处理
试验组：热处理后的种子浸入60ppm IAA+100ppm 6-BA(细胞分裂素)+8ppm NO(硝普钠)的试剂中8h，做催芽处理。
对照组1：热处理后的种子浸入180ppmIAA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组2：热处理后的种子浸入300ppm 6-BA的试剂中8h，做催芽处理。
对照组3：热处理后的种子浸入24ppm NO的试剂中8h，做催芽处理。
催芽处理结束后统计西藏柏木种子的发芽率，试验结果见表3：
表3西藏柏木种子的发芽率
组别 发芽率％ 发芽时间d 试验组 88.3％ 9d 对照组1 66.7％ 14d 对照组2 57.6％ 18d 对照组3 59.1％ 13d
试验结果显示，将IAA、6-BA和NO在减少用量的情况下组合使用后，仍可显著提高西藏柏木种子的发芽率，发芽时间缩短了4-9d。
(5)播种
播种基质采用泥炭：砂粒：蛭石＝5:4:2的营养土，基质经暴晒过后才可使用。基质混匀后摊铺在地上，用800倍的多菌灵+高锰酸钾喷洒基质和育苗盘(30cm*40cm*15cm)。育苗盘底部铺一层报纸，将育苗基质均匀的摊铺在育苗盘内，摊铺厚度为10cm，并稍微压实基质。
将种子条播在育苗盘内，播种后浇透水，以水从育苗盘滴下为宜。浇水后覆盖一层透明薄膜，35％种子出苗后揭开。播种完后放入温室内，每天检查播种盘内基质干湿情况，始终保持基质表面湿润，表面干时，可将播种盘浸水，从底部吸水，或从表面喷洒水，温室内每天保持温度在25℃，湿度在60％。
(6)移栽及后期管理
种子出苗后，芽苗长至5cm时，于上午10点前或下午3点后将其移栽，移栽于直径10cm的营养钵中。小苗移栽时，要使根系舒展，浇灌定根水，放于温室内，并适当遮荫。温室移栽后前一周，每天喷水，保持基质湿润，以后浇水原则为“不干不浇，浇则浇透”，注意阴天要减少浇水量。按本实施例方法播种的西藏柏木的成苗率为90.5％。
本发明实施例1-3所述的方法使得西藏柏木播种育苗的成苗率均高达85％以上，实施例3的效果最好。
对比例1
层积处理：将采集后的种子用清水浸泡一天后取出，将种子与湿沙按照1:3的比例混匀。准备一个底部带孔的泡沫箱，底部铺5cm的沙子，将混匀后的种沙倒入泡沫箱，顶部留5cm铺沙子，铺平后放入温室，保证温度在0-5℃，每天检查沙子湿度，以60％含水量为宜，即：手握成团，放在地上就散。
在第二年2-3月检查种子的萌动情况，当种子萌动率在20％时，即可播种。试验结果对比见表4：
表4实验组和对比例发芽率对比
组别 发芽率％ 发芽时间d 试验组1 86.7％ 8d 试验组2 85.3％ 10d 试验组3 88.3％ 9d 对比例 58.6％ 63d
试验结果表明，采用催芽剂与传统的层积处理相比，发芽率提高了45.6％-50.7％，发芽时间仅需8-10d。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。