技术领域
本发明涉及一种用于消除人体白斑和疤痕的生物敷料，属于医疗用品技术领域。
背景技术
众所周知，烧烫伤创面愈合的皮肤往往会留下疤痕，常有皮肤色素沉着或色素脱落现象，色素沉着通常会随着时间的推移而逐渐消退，而色素脱落形成的白斑则难以恢复，直至终生。此外，由于黑色素细胞内酪氨酸酶功能减退或消失，导致黑色素生成的进行性降低或消失而引起的一些原发性白癜风、外阴白斑，给患者带来了极大的精神创伤和生活压力，甚至会使患者对未来丧失信心。
经检索发现，中国专利文献CN201110091216.X公开了一种治疗白癜风的组合物，该中成药是将当归、女贞子、荆芥、防风、冬虫夏草、全蝎、红花、何首乌、生地、川穹、补骨脂按照常规制药方法制成各种口服剂型，该发明能够治疗白癜风，但其功能单一，不具有祛疤、止痒的功效。
中国专利文献CN200910232186.2公开了一种消除人体白斑和疤痕的生物敷料及其制备方法，其主要成分为:大葱提取物、细沙虫草植物精华、甲壳素、乳化剂、皮肤渗透剂、硬脂酸单甘油脂、保湿剂、水。该乳胶剂同时具有消白斑以及除疤、止痒功能。尽管如此，该制剂仍存在药物原材料价格昂贵、细沙虫草植物精华国内尚未批量生产，资源稀少，疗效不明显等问题。
发明内容
本发明解决的技术问题是：提出一种消除人体白斑和疤痕、兼具止痒功能，且无毒副作用的消除人体白斑和疤痕的生物敷料，同时给出其制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明提出的技术方案是：一种消除人体白斑和疤痕的生物敷料由以下组分组成：
上述技术方案的更进一步完善是：所述乳化剂是SHD、硬脂酸单甘油脂或十二烷基硫酸钠之一；所述SHD从法国赛比克公司购得，由聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯和聚山梨醇酯-20组成。
上述技术方案的更进一步完善是：所述皮肤渗透剂是是氮酮、麝香或噻酮之一。
上述技术方案的更进一步完善是：所述原花青素是从天然葡萄籽提取，所述大葱提取物是从大葱中提取。
上述技术方案的更进一步完善是：所述补骨脂素是从补骨脂中提取。
本发明的有益效果如下：
研究表明，原花青素对人体细胞有很强的抗氧化性，强化毛细血管，使血液循环畅通，从而及时供应皮肤细胞所需营养，优化细胞的生存环境，改善皮肤真皮层微循环，有效修复断裂的胶原蛋白和弹力纤维，可阻止皮肤伤口纤维组织的增生，对增生性及术后疤痕、瘢痕有促进软化、扁平、再生作用。原花青素是天然聚合物，具有生物相溶性，没有毒性和副作用，安全性高，清除自由基，抗过敏，具有良好的杀菌，扼制微生物、细菌、霉菌的作用，可作为天然抗生素来抗敏感及抗炎症的产生，快速修复皮肤基底热损伤，修复表皮屏障，促进细胞再生，全面修复各类疤痕组织。
白斑是由于表皮和色素细胞中酪氨酸酶的减少所致，白斑部位由于缺少Zn、Cu、Fe等金属微量元素，而使体内酪氨酸酶活性降低，影响了黑色素的合成代谢，从而产生病变，据最新火焰原子吸收光谱法测定实验表明，大葱中富含K、Ca、Na、Mg、Zn、Cu、Fe、Cr和Cd等各种无机元素，本发明的主要原料采用纯天然大葱提取物，可以增补患者局部的Zn、Cu、Fe等金属元素，使体内酪氨酸酶活性增强，继而使黑色素合成加快、增多、融合，最终安全覆盖白斑。大葱系一种天然食用植物，经过江苏省植物研究所与省内外医疗单位的长期科研实践表明，大葱提取物具有促进皮肤黑色素细胞增殖和局部免疫调节的作用。大葱提取物对皮肤具有抗菌、活化细胞、促进能量代谢、加快新陈代谢的作用，能舒张小血管，促进血液循环，结合能力强，渗透速效性高。大葱中的成分来自大自然，与环境相容性高，活化细胞，能有效抑制和杀灭多种病原微生物，从而起到止痒的作用。
何首乌提取物为水溶性物质，具有促进黑色素生成的功效。
补骨脂素是活性成分，属于芳香性中草药提取物，具有抗菌、抗氧化作用。补骨脂素有较强的光敏作用，使皮肤对紫外线照射敏感，易出现色素沉着；补骨脂素 对酪氨酸酶有明显的激活作用，可使黑色素生成的速度和数量增加，亦能促进皮肤黑色素的合成，并使之沉积于皮下；补骨脂素对黑素细胞的迁移和粘附具有明显的促进作用。有效去除白斑。
采用原花青素、大葱提取物、何首乌提取物和补骨脂素进行组合，使各成分的功效产生协同作用，从而能够有效促进皮肤黑色素细胞增殖和局部免疫调节，达到逐步消除皮肤白斑和原发性白癜风、外阴白斑等的效果，对增生性瘢痕、疤痕疙瘩及手术后疤痕有明显的软化、扁平和止痒作用。
附图说明
图1为本发明的消除人体白斑和疤痕的生物敷料的制备流程图。
具体实施方式
实施例一
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料由以下组分制成：
SHD从法国赛比克公司购得，由聚丙烯酸酯-13、聚异丁烯和聚山梨醇酯-20组成。
其中，原花青素来源于天然葡萄籽，简称OPC,是一种有着特殊结构的生物类黄酮，是能清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂。具有水溶性、亲肤性和抑菌能力，无毒副作用，不会产生抗药性。
原花青素的提取方法：把风干的葡萄籽研碎，用20目筛筛去大颗粒。准确称取研碎的葡萄籽，加入石油醚，常温浸泡24h。抽滤，脱去油脂。将滤饼放入烧瓶中，加入乙醇水溶液，在20～25℃温度下提取2h（过程中可用超声波法或索氏提取法）。用离心分离机分离浑浊液。取上层清液用AB-8树脂湿法装柱进行吸附。将液体进行减压蒸馏，产物真空干燥24h，得红褐色粉末，即为原花青素。高纯度的原花青素更具活性，对皮肤伤口愈合和疤痕的软化、扁平、再生以及杀菌止痒起到针对性的作用。
大葱提取物属于纯天然的植物提取物，大葱中富含K、Ca、Na、Mg、Zn、Cu、Fe、Cr和Cd等各种无机元素。
大葱提取物的提取方法：取大葱洗净称量，剪碎，按1:1（w/v）加入无菌水，以研钵快速研磨至匀浆状，过滤并收集滤液，5000r/min离心5min，上清液即为大葱水提取物。-4℃密封保存备用。
何首乌提取物具有水溶性，具有促进黑色素生成的功效。
何首乌提取物由国内多家专业企业生产提取，可直接采购。
补骨脂素属于芳香性中草药，抗菌、抗氧化。
补骨脂素的提取方法：将补骨脂种子未泡制过碾碎，过100目筛得粉末，将该粉末用50%乙醇室温浸渍泡4次，过滤合并得到滤液。滤液在水浴加热中减压浓缩，回收乙醇至无醇味，得到混悬液。将其置于冰箱过夜，待其分层，得补骨脂水溶部位和黑色粘稠部位，用滤布吊滤，得呈棕色树脂状浸膏。将浸膏置于圆底烧瓶中，用浸膏甲醇热溶，再加浸膏重1%活性炭回流15min趁热抽滤，滤液在100℃油浴中蒸去甲醇后，放置过夜等待出沉淀，加入冰箱预冷甲醇稀释并迅速抽滤，沉淀用少量甲醇洗涤，得淡黄白色片状晶体粗品80℃干燥，得粗品。加甲醇加热回流使粗品溶解，然后加入活性炭脱色，回流10min，趁热抽滤，放置冷却析晶，再过滤，得白色针状晶体（补骨脂素）80℃干燥。母液在通风橱挥发至，冰箱放置析晶，又得结晶（补骨脂素）。
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料最终成品的制作步骤如下：
第一步、将本实施例生物敷料中的油相类原料（补骨脂素）按配方称重，加热至（80±2℃），过滤，成为第一组乳液；
第二步、将本实施例生物敷料中的水相类原料（原花青素、大葱提取物、何首乌提取物和皮肤渗透剂）分别称重，加热至（85±2℃），加入第一组乳液，搅拌15-20分钟，加入乳化剂，搅拌25-30分钟，速度分三级完成，静置11-12小时。
第三步、冷却后检测，灌装，再包装打码，最后入库。
使用时，将消除人体白斑和疤痕的生物敷料凃敷在患处，可以逐渐激活白斑周边的黑色素，从而使黑色素向空白区域蔓延至平衡，最终使白斑消失。其中食用植物大葱提取物的作用功用是消除白斑和止痒，因为大葱提取物可以促进皮肤黑色素细胞的增殖和局部免疫调节；在患者白斑处形成黑色颗粒状物质，并逐渐增多、融合、以致完全覆盖白斑，使白斑消失。除疤主要靠无毒且具有生物相溶性的原花青 素，原花青素能有效修复断裂的胶原蛋白和弹力纤维，可阻止皮肤伤口纤维组织的增生，因此对增生性及术后疤痕、瘢痕的软化、扁平，具有良好的促进作用。由于何首乌具有促进黑色素生成的功能，使白斑得到有效的的消除。补骨脂素的活性成分，有效的促进皮肤黑色素的合成。
将原花青素、大葱提取物、何首乌提取物和补骨脂素进行组合，使各成分的功效产生协同作用，从而能够有效促进皮肤黑色素细胞增殖和局部免疫调节，达到逐步消除皮肤白斑和原发性白癜风、外阴白斑等的效果，对增生性瘢痕、疤痕疙瘩及手术后疤痕有明显的软化、消退和止痒作用。
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料（消白斑）分别进行去白斑试验、祛疤试验和止痒试验。
实验数据
1.本发明对氢醌所致豚鼠长白斑的治疗作用
取豚鼠60只，雌雄各半，背部有黑毛，剪去背部黑色皮肤区毛约4×4cm2，按体重随机分为6组，每组10只，其中3组为使用本实施例消白斑的不同剂量的治疗组，1组为使用维阿露卡力孜然酊的治疗比较组，1组为使用等体积水的对照组，1组为正常组。
用8%的硫化钠对豚鼠脱毛，每四天一次，除正常组涂自来水外，其余各组在脱毛区每天涂5%的氢醌0.5ml两次。
第11d开始每天在涂抹氢醌过后1小时按剂量分别涂药，其中正常对照组和模型对照组涂赋形剂1g，治疗比较组涂维阿露卡力孜然酊1ml，治疗组分别涂浓度分别为10%、20%、40%的消白斑1g，每天一次，连续40天，共50天。末次药后2h，取血，测酪氨酸酶（TYR）的含酶量，实验结果如表1所示。
表1消白斑对氢醌所致豚鼠长白斑的治疗作用
组别 剂量（g/只） 鼠只 吸收度（E） 酶含量（mg/ml） 正常组 1 10 0.6046±0.1414 0.2091±0.0506 对照组 1 10 0.4038±0.0629 0.1372±0.0225 维阿露卡力孜然酊 1 10 0.5341±0.0665 0.1639±0.0238 消白斑 0.1 10 0.5158±0.0467 0.1791±0.0199 消白斑 0.2 10 0.5436±0.0778 0.1868±0.0294 消白斑 0.4 10 0.5683±0.0457 0.1967±0.0167
表1的结果显示，本实施例消白斑给药组与对照组和治疗比较组比较，对酪氨酸酶的增殖促进作用强于市售的药物维阿露卡力孜然酊，其促进效果接近正常组，从而证明其去白斑效果也强于维阿露卡力孜然酊。
2.本发明对过氧化氢所致豚鼠长白斑的治疗作用
取豚鼠40只，雌雄各半，背部有黑毛，剪去背部黑色皮肤区毛约4×4cm2，按体重随机分为4组，每组10只，其中1组为使用本实施例白斑消的治疗组，1组为使用甲氧沙林的治疗比较组，1组为使用等体积水的模型对照组，1组为正常对照组。
用8%的硫化钠对豚鼠脱毛，每三天一次，除正常组涂纯化水外，其余各组在脱毛区每天涂5%过氧化氢1ml一次，使豚鼠皮肤脱色，连续30天,制备试验性白斑豚鼠模型。
正常组和对照组不作任何处理，从造模第10天开始，治疗比较组外涂甲氧沙林溶液1ml，治疗组外涂消白斑生物敷料2g，涂药后1h，日光灯照射15min（功率40w×10，照射距离30cm），连续20天，实验结果如表2所示。
表2消白斑对过氧化氢所致豚鼠长白斑的治疗作用
注：优为受试区色素基本恢复正常，良为受试区出现色素面积>50%，中为受试 区色素面积<50%，差为受试区皮肤呈苍白或白斑状，总有效率以（优+良）计算。
表2的结果显示，本实施例的消白斑生物敷料对实验性白斑的治疗效果要强于甲氧沙林。
3.本发明对氢醌所致豚鼠长白斑的治疗作用
取豚鼠120只，雌雄各半，背部有黑毛，用电动剃毛刀剃去背部黑色皮肤区毛约4×4cm2，按体重随机分为6组，每组10只，其中3组为使用本实施例消白斑的不同剂量的治疗组，1组为使用愈白丸的治疗比较组，1组为使用等体积水的模型对照组，1组为正常对照组。
用8%的硫化钠对豚鼠脱毛，每3天1次，除正常组涂纯化水外，其余各组在脱毛区每天涂0.5%的氢醌0.05ml一次，连续60天，制备试验性白斑豚鼠模型。
从造模第11d开始每天在涂抹氢醌过后1小时按剂量分别涂药，其中正常对照组和模型对照组涂纯化水，治疗比较组涂愈白丸1g，治疗组分别涂消白斑1g、2g、3g，每天一次，连续40天，共50天,实验结果如表3所示。
表3消白斑对氢醌所致豚鼠长白斑的治疗作用
表3的结果表明，各用药组的黑色素基本恢复至正常水平，本实施例消白斑生物敷料去白斑效果强于愈白丸。
4.本发明对治疗疤痕的临床观察
选择符合纳入标准的病例，患者138例，女性76例，男性62例，共167处疤痕，年龄18-53岁，平均33岁。在相同疤痕处，一半使用本实施例白斑消，另一半不做处理当作对照组，以观察治疗效果，时间3个月。167处疤痕经过治疗，痊愈23处（13.8%），明显好转74处（44.3%),好转60处（35.9%），无效10处（6.0%），总有效率为（94.0%）。说明本实施例的消白斑的使用与否具有显著性差异。
5.本发明对裸鼠的疤痕组织的治疗作用
取两周龄裸鼠，雌雄各10只。将手术中新鲜切取的疤痕组织去除表皮，修剪成1.0cm×1.0cm×0.6cm大小的组织块，分别植入裸鼠背部头、尾侧皮下。每只裸鼠植入两块。
在疤痕植入第21天和第28天，所有20只裸鼠头侧的疤痕块外涂本实施例白斑消生物敷料，每次2g，所有尾侧的疤痕块外涂祛疤药膏疤贴宁2g。
分别在用药前、第一次用药1周后及第二次用药1周后，用尺在裸鼠体外精确测量记录疤痕块的体积，实验结果如表4所示。
表4消白斑对裸鼠的疤痕组织的治疗作用
表4的结果表明，本实施例的消白斑生物敷料对疤痕组织块具有强大的降解作用。
6.本发明对裸鼠的疤痕组织的治疗作用
新西兰白兔12只，用2%的利多卡因做耳根神经阻滞麻醉（≤0.5ml/kg），常规消毒兔耳腹侧面，用EP管口在兔耳表面做一皮肤压痕（直径1cm），用小圆刀切除皮肤及皮下组织，直至软骨，连同软骨膜一块去除，每只白兔右耳制作6处直径1cm的圆形创面，共72处，造模后的家兔随机分为2组，每组6只，其中1组为外用本实施例白斑消生物敷料的治疗组，1组为外用生理盐水的对照组。
治疗组每天给药一次，对照组给等体积的水，连用1月。
观察疤痕的大体变化，12只新西兰白兔，72个创面，平均18天愈合形成疤痕；疤痕形成时为明显可触及的圆形突出疤块，质硬，色红。治疗组疤痕在术后10天内呈增生趋势，在此后疤痕逐渐变薄，变软，四周时，疤痕体积缩小、变平、变软、色泽轻度变浅。对照组疤痕在术后20天内一直呈增生趋势；20天至四周未见疤痕质地变软及色素消退。
7.本发明对家兔烧伤创面致痒的影响
通过Cabal吡啶银染法,免疫组织化学技术,计算机辅助图像分析技术检测使用本实施例消白斑生物敷料后家兔烧伤创面及创面愈合后不同时间组织神经末梢数量,(substance P,SP)P物质,肥大细胞数目,组胺及5-羟色胺的多少。
结果家兔使用消白斑生物敷料在烧伤创面及烧伤愈合后的创面不同时间点上部分毁损皮肤的神经末梢整体结构及数量实验组与对照组比较差异性不大。用药后家兔深Ⅱ°烧伤创面及烧伤愈合后创面组织不同时间点中组织SP含量与对照组比较差异性不大(P﹥0.01)。用药后实验组脱颗粒的肥大细胞数目明显少于对照组。实验组的组织胺及5-色胺量与对照组比较有明显差异。结论白斑消生物敷料对家兔烧伤创面致痒介质有一定的影响。
这些均验证了本实施例的消白斑生物敷料同时具有消白斑以及除疤、止痒功能，且无毒副作用。
实施例二
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料的其余部分与实施例一相同，不同之处在于：
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料由以下组分比例制成：
本实施例的生物敷料制备方法和使用效果与实施例一基本相同。
实施例三
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料的其余部分与实施例一相同，不同之处在于：
本实施例的消除人体白斑和疤痕的生物敷料由以下组分比例制成：
本实施例的生物敷料制备方法和使用效果与实施例一基本相同。
本发明的不局限于上述实施例所述的具体技术方案，凡采用等同替换形成的技术方案均为本发明要求的保护范围。