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一种用以预断肝硬化病患发生肝癌的风险的方法.pdf

  • 上传人:a3
  • 文档编号:6298727
  • 上传时间:2019-05-29
  • 格式:PDF
  • 页数:15
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  • 摘要
    申请专利号:

    CN201510003081.5

    申请日:

    2015.01.05

    公开号:

    CN105823870A

    公开日:

    2016.08.03

    当前法律状态:

    撤回

    有效性:

    无权

    法律详情:

    发明专利申请公布后的视为撤回IPC(主分类):G01N 33/48申请公布日:20160803|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 33/48申请日:20150105|||公开

    IPC分类号:

    G01N33/48

    主分类号:

    G01N33/48

    申请人:

    叶昭廷; 梁恭豪; 简荣南; 胡琮辉; 张启仁

    发明人:

    叶昭廷; 梁恭豪; 简荣南; 胡琮辉; 张启仁

    地址:

    中国台湾桃园县龟山乡复兴街5号

    优先权:

    专利代理机构:

    上海专利商标事务所有限公司 31100

    代理人:

    张睿

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    内容摘要

    本揭示内容是关于一种预断方法,借以评估一肝硬化病患罹患肝癌的风险。该方法包含:收集该名肝硬化病患的血液样品;分析一组临床数据,该临床数据包含空腹血糖、胰岛素、高密度脂蛋白、血小板、淋巴球及嗜中性白血球;由该组临床数据计算一风险指数;以及由该风险指数进行预断。依据该风险指数,可准确且有效率地预断该名肝硬化病患罹患肝癌的风险,进而使其能实时接受适当的治疗。

    权利要求书

    1.一种利用一肝硬化病患的血液样品来预断该名肝硬化
    病患是否具有罹患肝癌的风险的方法,包含:
    (1)由该血液样品分别测量空腹血糖、胰岛素及高密度
    脂蛋白的浓度、血小板的数量及淋巴球与嗜中性白血球的百
    分比;
    (2)利用一公式来计算一风险指数:

    其中,
    t=-0.005PLT–0.029HDL–0.376log10(SIR)+0.854
    log10(LNR)–(0.015PLT×LNR)–(0.062SIR×
    LNR)+4.253;以及
    PLT为血小板的数量,HDL为高密度脂蛋白的浓度,SIR
    为空腹血糖的浓度与胰岛素的浓度的比值,而LNR则为淋巴
    球的百分比与嗜中性白血球的百分比的比值;以及
    (3)由步骤(2)的风险指数来进行预断;若是该风险指数介
    于0到0.5之间,则该病患罹患肝癌的风险为低度;若该风
    险指数介于0.5到0.65之间,则该病患罹患肝癌的风险为中
    度;而若该风险指数介于0.65到1之间,则该病患罹患肝癌
    的风险为高度。
    2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,该肝硬化是由
    一慢性肝脏疾病所导致,而该慢性肝脏疾病是选自由酒精性
    肝脏疾病、非酒精性脂肪肝、B型肝炎及C型肝炎所组成的
    群组。
    3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,该肝硬化是由
    B型肝炎所导致。
    4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,空腹血糖的浓
    度是利用一酶、一芳香胺或一连续流动分析来进行测量。
    5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,该酶是选自由
    葡萄糖氧化酶、葡萄糖去氢酶及己糖激酶所组成的群组。
    6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,该芳香胺是苯
    胺、联苯胺、2-胺基联苯或邻甲苯胺。
    7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,胰岛素的浓度
    是利用一抗体来进行测量,该抗体对于胰岛素的A链或B链
    具有专一性。
    8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,高密度脂蛋白
    的浓度是利用一酶、一电泳分析、一连续流动分析或一核磁
    共振分析来进行测量。
    9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,该酶是胆固醇
    氧化酶。
    10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,血小板的数
    量、淋巴球的百分比及嗜中性白血球的百分比分别是以一血
    球计、一血液分析仪及一抗体来进行测量。

    说明书

    一种用以预断肝硬化病患发生肝癌的风险的方法

    技术领域

    本揭示内容是关于预断癌症的领域。更具体来说,本揭示
    内容是关于一种用以预断肝硬化病患是否会罹患肝癌的方
    法。

    背景技术

    肝癌高居全球好发性固态恶性肿瘤第五位,且为癌症相关
    死因第三位。约70%–90%的肝癌病患具有慢性肝脏疾病及肝
    硬化的病史,其中肝硬化肇因于伤疤组织修复受损的肝脏细
    胞而形成。导致肝硬化的主要危险因子包含B型肝炎病毒或
    C型肝炎病毒的慢性感染、酒精性肝脏疾病(alcoholicliver
    disease)及非酒精性脂肪肝(non-alcoholicfattyliverdisease,
    NAFLD)。其余会导致肝癌的致癌因子尚包含摄取遭受黄曲
    毒素污染的食物、糖尿病、肥胖、血色素沉着病
    (hemochromatosis)等遗传性疾病及代谢失调。

    有鉴于肝硬化及肝癌之间具有密切的关连性,肝硬化病患
    每年应接受一或多种诸如计算机断层摄影(computed
    tomography,CT)、核磁共振成像(magneticresonanceimaging,
    MRI)或超音波(ultrasound,US)等检测,以定期追踪防治。
    早期确诊的肝癌病患通常拥有较多的治疗选择。举例来说,
    罹患早期肝癌的病患可接受肝脏移植、手术切除及消融治疗
    等较具治愈性的疗法;而罹患晚期肝癌的病患则缺乏有效的
    治疗方法。治疗的功效往往反应在病患的存活率上。已知多
    数罹患早期肝癌的病患可存活超过5年,而罹患晚期肝癌的
    病患的平均存活率则少于1年。然而,传统的检测方法多受
    限于仅能检测大于2公分的肝脏结节(livernodules)。依据
    之前的报导,在检测小于2公分的肝脏结节时,超音波、计
    算机断层摄影及核磁共振成像的敏感度分别只有21%、40%
    及47%。此外,可得性与诊断仪器的高成本价位更进一步限
    定了核磁共振成像及计算机断层摄影的应用。

    有鉴于此,相关技术领域一直亟需一种可有效预断肝癌发
    生风险的方法;相较于传统的核磁共振成像及/或计算机断
    层摄影,本预断方法将更准确且不需搭配使用任何昂贵的仪
    器设备;借此,病患可实时接受适当的治疗。

    发明内容

    发明内容旨在提供本揭示内容的简化摘要,以使阅读者对
    本揭示内容具备基本的理解。此发明内容并非本揭示内容的
    完整概述,且其用意并非在指出本发明实施方式的重要/关键
    组件或界定本发明的范围。发明内容旨在提供本揭示内容的
    简化摘要,以使阅读者对本揭示内容具备基本的理解。

    本揭示内容是关于一种预断癌症的方法,其是利用肝硬化
    病患的血液样品来预断该名病患罹患肝癌的风险高低。该方
    法包含:

    (1)由该血液样品测量空腹血糖(mg/dL)、胰岛素(μ
    IU/mL)及高密度脂蛋白(mg/dL)的浓度、血小板的数量
    (number/μL)及淋巴球与嗜中性白血球的百分比;

    (2)利用以下一公式来计算一风险指数:


    其中,

    t=-0.005PLT-0.029HDL-0.376log10(SIR)+0.854
    log10(LNR)–(0.015PLT×LNR)–(0.062SIR×
    LNR)+4.253;e是自然对数函数的底数以及

    PLT为血小板的数量,HDL为高密度脂蛋白的浓度,SIR
    为空腹血糖浓度与胰岛素浓度的比值,而LNR则为淋巴球百
    分比与嗜中性白血球百分比的比值;以及

    (3)由步骤(2)的风险指数来进行预断;其中该风险指数若
    是介于0到0.5之间,则该病患罹患肝癌的风险为低度;若
    该风险指数介于0.5到0.65之间,则该病患罹患肝癌的风险
    为中度;而若该风险指数介于0.65到1之间,则该病患罹患
    肝癌的风险为高度。

    依据本揭示内容的实施方式,该血液样品是一全血样品。

    一般来说,肝硬化是由一慢性肝脏疾病所导致,该慢性肝
    脏疾病是选自由酒精性肝脏疾病、非酒精性脂肪肝、B型肝
    炎及C型肝炎所组成的群组。

    空腹血糖、胰岛素、高密度脂蛋白、血小板、淋巴球及嗜
    中性白血球的数值可由本领域技术人员所熟知的任何生化或
    血液检测方法来取得。依据本揭示内容的实施方式,空腹血
    糖的浓度是利用一酶、一芳香胺或一连续流动分析
    (continuousflowanalysis)来进行测量。适用于测量空腹血
    糖浓度的酶包含,但不限于,葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase)、
    葡萄糖去氢酶(glucosedehydrogenase)及己糖激酶
    (hexokinase)。适用于测量空腹血糖浓度的芳香胺可以是苯
    胺(aniline)、联苯胺(benzidine)、2-胺基联苯
    (2-aminobiphenyl)或邻甲苯胺(o-toluidine)。

    依据本揭示内容的实施方式,胰岛素的浓度是利用一抗体
    来进行测量,其中该抗体对于胰岛素的A链或B链具有专一
    性。

    在本揭示内容的某些实施方式中,高密度脂蛋白的浓度可
    利用一酶、一电泳分析(electrophoresisassay)、一连续流
    动分析或一核磁共振分析(nuclearmagneticresonanceassay)
    来进行测量。用以测量高密度脂蛋白的酶包含,但不限于,
    胆固醇氧化酶(cholesteroloxidase)。

    依据本揭示内容的实施方式,血小板的数量、淋巴球的百
    分比及嗜中性白血球的百分比是分别以一血球计、一血液分
    析仪及一抗体来进行测量。为测量血小板的数量,使用的抗
    体对血小板的表面标记具有专一性,其中该表面标记是选自
    由CD41、CD42、CD49、CD61、CD62及CD109所组成的群
    组。在测量淋巴球的百分比时,使用的抗体对淋巴球的表面
    标记具有专一性,其中该表面标记是选自由CD3、CD4、CD25、
    CD40、CD62L、CD80及CD152所组成的群组。而使用于测
    量嗜中性白血球的百分比的抗体,则是对嗜中性白血球的标
    记具有专一性,其中该标记是选自由CD66、CD177、Ly6G
    及嗜中性白血球弹性蛋白酶(neutrophilelastase)所组成的
    群组。非必要性地,使用于本揭示内容的抗体是与一荧光染
    料接合,便于检测与抗体结合的细胞。

    在参阅下文实施方式后,本发明所属技术领域中具有通常
    知识者当可轻易了解本发明的基本精神及其它发明目的,以
    及本发明所采用的技术手段与实施方式。

    附图说明

    为让本发明的上述与其它目的、特征、优点与实施例能更
    明显易懂,所附图式的说明如下:

    图1为一累积风险曲线(cumulativehazardcurve),用
    以阐述183名肝硬化病患于1.5年内罹患肝癌的风险,其中
    这些肝硬化病患是依本揭示内容的风险指数分为低度、中度
    或高度风险族群;以及

    图2为一累积风险曲线,用以阐述344名肝硬化病患于
    1.5年内罹患肝癌的风险,其中这些肝硬化病患是依本揭示内
    容的风险指数分为低度、中度或高度风险族群。

    依照惯用作法,不同叙述的特色/组件并非描绘范围,而
    是用以描绘与本发明相关的最佳说明具体特色/组件。另外,
    在不同图例的相似标记和命名用于表示相似的组件/部件。

    具体实施方式

    为了使本揭示内容的叙述更加详尽与完备,下文针对了本
    发明的实施方式与具体实施例提出了说明性的描述;但这并
    非实施或运用本发明具体实施例的唯一形式。实施方式中涵
    盖了多个具体实施例的特征以及用以建构与操作这些具体实
    施例的方法步骤与其顺序。然而,亦可利用其它具体实施例
    来达成相同或均等的功能与步骤顺序。

    为求方便,此处将本说明书、实施例与附随申请专利范围
    中所用的某些词汇整理余下。除非本说明书另有定义,此处
    所用的科学与技术词汇的含义与本发明所属技术领域中具有
    通常知识者惯用者相同。此外,除非本说明书另有定义,此
    处所用的单数名词涵盖该名词的复数型;而所用的复数名词
    时亦涵盖该名词的单数型。具体来说,除非另外指明,否则
    在本文及附随的权利要求范围中所述及的单数型式词,“一
    (“a“及“an”)”均涵盖其复数形式。此外,本文及附随
    的权利要求范围中所述及的“至少一(“atleastone“)”及
    “一或多(“oneormore“)”等词具有相同意义,且包含一、
    二、三或更多。

    虽然用以界定本发明较广范围的数值范围与参数界是约
    略的数值,此处已尽可能精确地呈现具体实施方式的相关数
    值。然而,任何数值本质上不可避免地含有因个别测试方法
    所致的标准偏差。在此处,“约”通常是指实际数值在一特
    定数值或范围的正负10%、5%、1%或0.5%之内。或者是,
    “约”一词代表实际数值落在平均值的可接受标准差之内,
    视本发明所属技术领域中具有通常知识者的考虑而定。除了
    实验例之外,或除非另有明确的说明,当可理解此处所用的
    所有范围、数量、数值与百分比(例如用以描述材料用量、时
    间长短、温度、操作条件、数量比例及其它相似者)均经过“约”
    的修饰。因此,除非另有相反的说明,本说明书与附随申请
    专利范围所揭示的数值参数皆为约略的数值,且可视需求而
    更动。至少应将这些数值参数理解为所指出的有效位数与套
    用一般进位法所得到的数值。

    “接受者操作特征曲线”
    (receiveroperatingcharacteristiccurve,ROCcurve)一词于
    本文中是指一利用真阳性率(truepositiverate)与伪阳性率
    (falsepositiverate)绘出的曲线,用以决定一预断试验的切
    点(cut-offpoint)。ROC曲线通常将(1–专一性)定义为x
    轴,将敏感度定义为y轴。一高敏感度的数值表示低伪阳性
    率。同理,一高专一性的数值亦表示低伪阳性率。“切点”
    (cut-offpoint)一词于此处是指一由ROC曲线所得的数值,
    用以表示该预断试验的敏度感及专一性达到平衡。一切点范
    围可以包含数个切点实施方式,其中各切点分别代表不同的
    敏感度及其专一性间的平衡。

    在本文中,“曲线下面积”(areaunderthecurve,AUC)
    为本领域技术人员所惯用的名词,且定义为ROC曲线下的面
    积。一AUC数值通常介于0.5-1.0之间,用以代表一预断试
    验的准确度;其中,AUC的数值愈高,表示该预断试验的预
    断效果愈佳。AUC数值通常会伴随95%信赖区间(confidence
    interval,CI),其是指一具有特定概率的统计范围,以使一
    设定参数可落于该范围内。

    “风险”(risk)一词于此是指一项可能会产生不良结果
    的可能性,例如,肝癌的发生、进展或复发。依据一个体、
    其样品或其相关事件的分析结果,该名个体可被归类至“高
    度风险”(highrisk)、“中度风险”(intermediaterisk)
    或“低度风险”(lowrisk)群族。至于本揭示内容所述的风
    险指数是指,当一病患的风险指数>75th百分比(即,一介于
    0.65至1的数值)时,该名病患是为“高度风险”族群;亦即,
    他/她五年内罹患肝癌的可能性高于分析族群中,其余四分
    之三的病患。当一病患的风险指数<50th百分比(即,一介于
    0至0.5的数值)时,该名病患是为“低度风险”族群;亦即,
    他/她五年内罹患肝癌的可能性低于分析族群中,其余二分
    之一的病患。据此,若一病患的风险指数的百分比介于50th
    及75th之间(即,一介于0.5至0.65的数值)时,则该名病患
    是为“中度风险”族群。

    有鉴于相关领域亟需一种可准确且有效预断肝硬化病患
    罹患肝癌的几率的方法,并借此投予病患适当的治疗,本揭
    示内容的主要目的是提供一组与肝癌发生率相关的临床参
    数。一旦确认,该组临床参数可用以计算出一风险指数,再
    依据该风险指数来预断一肝硬化病患是否具有罹患肝癌的风
    险,使医疗人员可依据该预断结果给予病患适当的治疗。

    参与本发明的肝硬化病患会先接受健康检查,以评估其肝
    脏的状况(例如,肝硬化或肝癌),且接受个人健康咨询,
    例如身高、体重、年龄、种族、病史及过去的手术经历(若
    有)。

    适用于诊断肝硬化的方法包含,但不限于,肝脏组织切片、
    内视镜、血液检验、影像检验及其组合。一般来说,肝硬化
    病患由于肝功能不足,白蛋白(albumin)、碱性磷酸酶(alkaline
    phosphatase)、胆红素(bilirubin)及肌酸酐(creatinine)
    等肝脏酶会异常表现于体内,而该异常可利用血液检验准确
    地定量及评估,其中该血液检验可以是本领域技术人员所熟
    知的传统方法。若病患具有较严重的肝硬化,则可利用影像
    检验来检测其肝脏的不规则表面、胃底静脉曲张(gastric
    varices)及脾脏肿大(splenomegaly)等病征,其中该影像检
    验包含超音波、计算机断层摄影、核磁共振成像及弹性影像
    (elastography)。依据一实施方式,参与本揭示内容的病患
    是利用肝脏组织切片、内视镜及影像检验来诊断其肝硬化;
    其中,该影像检验是超音波或弹性影像。

    至于肝癌,适用于诊断肝癌的方法包含,但不限于,肝脏
    组织切片、血液检验及影像检验。一般来说,肝癌病患会高
    量表现诸如甲型胎儿蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)等生长相
    关的致癌蛋白,而利用血液检验可准确测量并呈现这些致癌
    蛋白的表现量。在侦检肿瘤结节时,可利用超音波、计算机
    断层摄影、核磁共振成像或血管造影术(angiography)来进
    行。本揭示内容的一实施方式是利用肝脏组织切片、血液检
    验及影像检验来评估肝硬化病患是否罹患肝癌,其中该影像
    检验是计算机断层摄影或血管造影术。

    依据健康检查的结果,肝硬化病患可分为二群:(1)从未
    罹患肝癌的肝硬化病患;及(2)曾罹患早期肝癌,但接受治疗
    后已完全缓解的肝硬化病患。第二群病患是用以模拟相较于
    第一群病患,较易罹患肝癌的族群。由于伴随肝癌出现的癌
    细胞因子应被视为肝癌的诊断因子,而非预断因子,故第二
    群病患的肝癌的完全缓解可以防止这些癌细胞因子干扰本发
    明的测量及评估结果。

    先抽取每名病患的血液样品,以筛选出这些于第一及第二
    群肝硬化病患中具有不同表现量的临床参数。一般来说,血
    液样品是指病患周边血液的全血样品。本揭示内容分析的临
    床参数包含:(1)天门冬胺酸转胺酶(aspartatetransaminase,
    AST)、丙胺酸转胺酶(alaninetransaminase,ALT)、胆红
    素、甲型胎儿蛋白、血红素结合素(haptoglobin)、空腹血
    糖、糖化血红素(glycohemoglobin)、甲状腺促素
    (thyrotropin)、游离甲状腺素(freethyroxin,T4)、总蛋
    白、白蛋白、α1-球蛋白(alpha1-globulin)、α2-球蛋白、
    β-球蛋白、γ-球蛋白、脂蛋白元-A1(apolipoprotein-A1,
    Apo-A1)、尿酸(uricacid,UA)、高密度脂蛋白、低密度
    脂蛋白(lowdensitylipoprotein,LDL)、极低密度脂蛋白(very
    lowdensitylipoprotein,VLDL)、胆固醇(cholesterol)、三
    酸甘油脂(triglyceride)、胰岛素、铁蛋白(ferritin)、血
    浆铜蓝蛋白(ceruloplasmin)、铁、总铁结合能力(totaliron
    bindingcapacity,TIBC)、不饱合铁结合能力(unsaturatediron
    bindingcapacity,UIBC)、补体成分3(complementcomponent
    3,C3)、补体成分4(complementcomponent4,C4)、血脲
    氮(bloodureanitrogen,BUN)、肌酸酐及衡定模式评估的
    胰岛素抗性(homeostasismodelassessment-estimatedinsulin
    resistance,HOMA-IR)的浓度;(2)白蛋白/球蛋白、胰岛素
    /空腹血糖、胆固醇/高密度脂蛋白及低密度脂蛋白/高密
    度脂蛋白的比值;(3)白血球、血红素及血小板的数量;(4)
    嗜中性白血球、淋巴球及单核球于白血球中的百分比;以及
    (5)凝血酶原时间(prothrombintime,PT)。

    依据所得的临床参数来评估肝硬化病患罹患肝癌的风险。
    具体来说,先筛选出在二群病患间具有不同表现量的临床参
    数,再利用运算操作来结合这些临床参数,该运算操作可以
    是指数运算、代数运算、对数运算或其组合。不同临床参数
    的结合可产生不同的算法,并以风险指数表示,风险指数可
    进一步作为肝癌发生率指标;再依据各算法的AUC数值来评
    估该算法的准确度。利用不同的运算操作及调整使用的临床
    参数,直到取得一具有最高AUC数值的算法。再依据最终所
    得的算法来计算风险指数,将肝硬化病患分为具有低度、中
    度或高度罹患肝癌风险的族群。

    据此,本揭示内容提供一种准确的预断方法,其是利用肝
    硬化病患的血液样品来预断该名病患是否会罹患肝癌。大致
    而言,本方法包含:

    (1)由该血液样品测量空腹血糖、胰岛素及高密度脂蛋白
    的浓度、血小板的数量及淋巴球与嗜中性白血球的百分比;

    (2)利用一公式来计算一风险指数:


    其中,t=-0.005PLT-0.029HDL-0.376log10(SIR)+
    0.854log10(LNR)–(0.015PLT×LNR)–(0.062SIR
    ×LNR)+4.253;

    其中,PLT为血小板的数量,HDL为高密度脂蛋白的浓度,
    SIR为空腹血糖浓度与胰岛素浓度的比值,而LNR则为淋巴
    球百分比与嗜中性白血球百分比的比值;以及

    (3)由步骤(2)的风险指数来进行预断;其中若是该风险指
    数介于0到0.5之间,则该病患罹患肝癌的风险为低度;若
    该风险指数介于0.5到0.65之间,则该病患罹患肝癌的风险
    为中度;而若该风险指数介于0.65到1之间,则该病患罹患
    肝癌的风险为高度。

    依据本揭示内容的实施方式,血液样品是一全血样品。肝
    硬化病患是患有一慢性肝脏疾病,而该慢性肝脏疾病可以是
    酒精性肝脏疾病、非酒精性脂肪肝、B型肝炎或C型肝炎。
    在一较佳实施方式中,肝硬化病患是患有B型肝炎。

    在步骤(1)中,空腹血糖的浓度是以mg/dL(每分升之毫克)
    表示;胰岛素的浓度是以μIU/mL(每毫升之微-国际单位)表
    示;高密度脂蛋白的浓度是以mg/dL(每分升之毫克)表示;
    血小板的数量是以数量/μL(每微升之血小板数量);而淋巴
    球及嗜中性白血球的百分比则是分别以白血球总数作为基准
    值所分析出的数值。

    依据本揭示内容的实施方式,适用于分析空腹血糖浓度的
    方法包含,但不限于,酶、芳香胺或连续流动分析。依据本
    领域实验室或临床所熟知的技术,该酶是选自由葡萄糖氧化
    酶、葡萄糖去氢酶及己糖激酶所组成的群组;而芳香胺则可
    以是苯胺、联苯胺、2-胺基联苯或邻甲苯胺。

    依据本揭示内容某些实施方式,用以分析胰岛素浓度的非
    限定实施方式包含利用抗体进行的试验,其中该抗体对于胰
    岛素的A链或B链具有专一性。

    在本揭示内容的实施方式中,高密度脂蛋白的浓度可利用
    酶、电泳分析、连续流动分析或核磁共振分析来进行测量。
    依据本领域技术人员所熟知的试验,用以测量高密度脂蛋白
    浓度的酶是胆固醇氧化酶。

    依据本揭示内容的实施方式,适用于分析血小板数量、淋
    巴球百分比及嗜中性白血球百分比的试验包含,但不限于,
    血球计、血液分析仪及抗体。在本揭示内容中,用于分析血
    小板数量的抗体对于血小板的表面标记具有专一性,其中该
    表面标记是选自由CD41、CD42、CD49、CD61、CD62及CD109
    所组成的群组。用于测量淋巴球百分比的抗体对于淋巴球的
    表面标记具有专一性,其中该表面标记包含,但不限于,CD3、
    CD4、CD25、CD40、CD62L、CD80及CD152。相似地,用
    以测量嗜中性白血球百分比的抗体对于嗜中性白血球的标记
    具有专一性,其中该标记是选自由CD66、CD177、Ly6G及
    嗜中性白血球弹性蛋白酶所组成的群组。此外,本揭示内容
    所使用的抗体是与一荧光染料接合,便于检测与抗体结合的
    细胞。

    在步骤(2)中,利用本揭示内容的公式,并佐以步骤(1)所
    得的血小板数量、高密度脂蛋白浓度、空腹血糖浓度与胰岛
    素浓度的比值,以及淋巴球百分比与嗜中性白血球百分比的
    比值来计算风险指数。

    在步骤(3)中,依据步骤(2)计算的风险指数将病患分为具
    有低度、中度或高度罹患肝癌风险的族群。依据本揭示内容
    的一实施方式,相较于低度或中度风险族群的病患,高度风
    险族群的病患较易罹患肝癌。

    下文举出多种实施例来阐明本发明的部分方式,以使本发
    明所属技术领域中具有通常知识者能借以实践本发明。因此
    不应将这些实施例视为对本发明范围的限制。本发明所属技
    术领域中具有通常知识者基于此处提的说明,当可在不需过
    度推衍的情形下运用本发明。此处提及的所有文献,皆视为
    已完全引用而成为本说明书的一部分。

    实施例

    实施例1建立风险指数

    医疗人员依据健康检查结果将193名参与本发明试验的
    肝硬化病患分为二个群组。第一群组包含161名病患,这些
    病患患有B型肝炎,且从未罹患过肝癌(标记为“非肝癌群
    组”)。第二群组包含32名病患,这些病患患有B型肝炎,
    且曾经罹患早期肝癌,而后接受临床治疗后已治愈(标记为
    “肝癌群组”)。然而,在分群后一年内,5名原属非肝癌群
    组的病患陆续罹患肝癌。将该5名病患重新分群后,肝癌群
    组包含37名病患,而非肝癌群组则包含156名病患。依据表
    1所示的基线人口统计资料,肝癌群组与非肝癌群组间并没有
    显著的差异存在。

    表1基线人口统计资料


    HBsAg:B型肝炎病毒的表面抗原

    将由肝癌群组及非肝癌群组的病患所抽取的血液样品(在
    抽血前空腹12个小时)利用连续流动分析或血液分析仪来进
    行相关的生化或血液分析。表2总结44个所得的临床参数值。

    表2由生化或血液分析所得的临床参数





    注释:

    (1)粗体标示的临床参数在肝癌群组及非肝癌群组间具有显著的差异。

    (2)CI:信赖区间。

    (3)p-值是由c-统计法来计算。

    如表2所示,在44个临床参数中,有4个参数在肝癌群
    组及非肝癌群组间具有显著不同的表现量:(1)高密度脂蛋
    白的浓度(AUC=0.405,p-值=0.074);(2)空腹血糖浓度与胰
    岛素浓度的比值(AUC=0.354,p-值=0.006);(3)血小板的数
    量(AUC=0.317,p-值=0.001);以及(4)淋巴球百分比与嗜中
    性白血球百分比的比值(AUC=0.373,p-值=0.017)。

    为使评估的准确度最佳化,利用运算操作将上述4个具有
    高可信度及高辨别度的临床参数合并运算。经过数次筛选及
    修正,可得到一最终公式,其是具有最佳的分群准确度(AUC
    =0.78),且可表示为:


    其中,

    t=-0.005PLT-0.029HDL-0.376log10(SIR)+0.854
    log10(LNR)–(0.015PLT×LNR)–(0.062SIR×
    LNR)+4.253;

    其中,

    PLT为血小板的数量(每微升的血小板数量);

    HDL为高密度脂蛋白的浓度(每分升之毫克);

    SIR为空腹血糖浓度与胰岛素浓度的比值;以及

    LNR则为淋巴球百分比与嗜中性白血球百分比的比值。

    依据该风险指数,可将肝硬化病患分为三族群:(1)低度
    风险:指数介于0至0.5的病患;(2)中度风险:指数介于0.5
    至0.65的病患;以及(3)高度风险:指数介于0.65至1的病
    患。

    据此,若一病患的血小板数量为每微升140个,高密度脂
    蛋白为每分升45毫克,空腹血糖为每分升100毫克,胰岛素
    为每毫升8微-国际单位,淋巴球占总白血球数量的30%,而
    嗜中性白血球占总白血球数量的60%,则该名病患的风险指
    数为0.535,将分群至中等风险族群。

    实施例2验证实施例1的风险指数

    利用实施例1所建立的公式计算183名肝硬化病患的风险
    指数,并依其风险指数进行分群;其中85名病患是为低度风
    险族群,38名病患是为中度风险族群,而60名病患是为高度
    风险族群。持续追踪观察这些病患1.5年。在这段观察期间,
    低度风险族群中,没有人罹患肝癌;而中度及高度风险族群
    则分别有3名及7名病患被诊断罹患肝癌。依据图1所示的
    累积风险曲线,相较于低度或中度风险族群的病患,高度风
    险族群的病患较易罹患肝癌,且具有显著的差异(p=0.0213)。

    为进一步确认本揭示内容方法的准确度,利用实施例1的
    公式分别评估共344名病患(包含161名建立实施例1公式
    的病患及183名图1所分析的病患)的风险指数,并进行分
    群;其中167名病患是为低度风险族群,76名病患是为中度
    风险族群,而101名病患是为高度风险族群。在1.5年的观
    察期中,低度风险族群中,没有人罹患肝癌;而中度及高度
    风险族群则分别有3名及12名病患被诊断罹患肝癌。因此,
    若以预断之日起算,高度风险族群的病患较低度或中度风险
    族群的病患更快罹患肝癌,且具有显著的差异(p=0.0001,图
    2)。

    总结上述,本揭示内容提供一种预断方法,其是用以预断
    一肝硬化病患未来罹患肝癌的风险。本方法包含一利用空腹
    血糖、胰岛素、高密度脂蛋白、血小板、淋巴球及嗜中性白
    血球的数值进行计算的公式。依据公式计算出的风险指数,
    可将该名肝硬化病患分群至具有低度、中度或高度罹患肝癌
    风险的族群。相较于传统的影像检验,本揭示内容提供一种
    更为准确及有效的肝癌预断方法;借此,医疗人员可提供病
    患适当且及时的治疗。

    当可理解上述实施方式与实施例仅为例示,且熟习此技艺
    者可对齐进行各种修饰。上文提出的说明书、实施例与数据
    的目的在于使本说明书的结构完备,并作为实作本发明的例
    示。虽然本揭示内容已以实施方式揭示如上,然其并非用以
    限定本揭示内容,任何熟习此技艺者,在不脱离本揭示内容
    的精神和范围内,当可作各种的更动与润饰,因此本揭示内
    容的保护范围当视后附的权利要求书所界定者为准。

    关 键  词:
    一种 用以 预断 肝硬化 病患 发生 肝癌 风险 方法
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