等离子体处理绿萝茎产生芽变的方法技术领域
本发明属于等离子体应用领域，具体涉及用等离子体处理绿萝的老茎产生芽变的方法。
背景技术
等离子体是物质存在的一种状态。它是物质固体状态、液体状态、气体状态之后的第四种状态——等离子体状态。1929年科学家第一次引入“等离子体”这个名称，等离子体学科成为一门年轻的学科。由于等离子体科学发展较晚，因此应用范围不普遍。近年来，等离子体科学的研究得到了快速发展，目前主要用于航天实验、军事国防、金属切割、材料表面镀膜、电子工业、核聚变能源研究等领域。等离子体技术在农业上的应用属于刚刚开始，它开辟了等离子体应用的一个新领域，也为农业增产创造了新的途径。等离子体技术在农业上的应用的现有技术均是对有性繁殖植物种子处理技术，还未见对无性繁殖植物处理的报道。究其原因是等离子体处理已活植物体效果较差，如已发芽种子，处理后效果不稳定且死苗较多，因此未在活体植物上进行研究，也未在无性繁殖植物的品种选育和生产中应用，特别是没有在多年生草本植物花卉上应用。
绿萝（Epipremnumaureum）又名黄金葛，原产中美、南美的热带雨林地区，为天南星科常绿藤本植物，属于攀藤观叶花卉。性喜温暖、潮湿环境，藤长可达数米，节间有气根，叶片会越长越大，叶互生，绿色，少数叶片也会略带黄色斑驳，全缘，心形。绿萝具有很高观赏价值，既能净化空气，又能充分利用了空间。但是，目前市场上所见到的绿萝品种单一，一般品种都是黄、白斑绿色、小型叶片，难以满足广大花卉爱好者的需求。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种等离子体处理绿萝茎产生芽变的方法，采用本发明方法对绿萝老茎处理后，可使绿萝茎稳定产生芽变、进而从中选育出绿萝的绿叶型、叶片变大型、叶色黄斑变大型、黄茎色型等各种变异新类型，以满足人们观赏所需要。
为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的。
本发明的等离子体处理绿萝茎产生芽变的方法，包括如下步骤：
（1）在冬春季节将直径5-7mm粗的绿萝茎切成50－60mm长的枝条，将枝条的下端竖直浸在15-25℃、20-25mm深的自来水中，在日光照射下培养3周，备用；
（2）将（1）处理过的枝条用等离子体机处理，处理用剂量为0.1-0.3A，处理1次，使每个枝条逐一通过等离子体处理机；
（3）将（2）处理后的枝条下部竖直浸在15-25℃、25-30mm深的自来水中，在日光照射下培养，直到长出芽和根；
（4）当（3）水培枝条的根长出30－40mm、新芽长出2-4叶时，移栽到固体基质的育苗钵中培养，固体基质由草炭土、珍珠岩和粘土按体积比8︰2︰1的比例混匀制成，培养条件是：15－25℃，每天9-17时要在日光照射下培养；
（5）当（4）育苗钵中培养的枝条长出5－6叶时就要定植于花盆中，当新芽的枝条长生长到20－22cm时，就表现出等离子体处理后产生的多种特定类型；
（6）从（5）产生的多种特定类型中选择出需要的个体枝条进行无性繁殖，即可获得性状较一致的绿萝新类型。
等离子体处理绿萝茎产生芽变试验
1、试验方法
1.1等离子体处理剂量试验共设11个处理，处理剂量分别是：0.1A、0.2A、0.3A、0.4A、0.5A、0.6A、0.7A、0.8A、0.9A、1.0A、0A（对照），处理1次，对处理后死亡率低于100%的处理增加处理次数为两次；绿萝茎直径为5-7mm，均切成50－60mm长的枝条，每个枝条的顶端上保证有一个芽，重复三次，考察产生芽变率、受害率和死亡率。
1.2等离子体处理绿萝茎直径试验设4个处理，分别是：4mm以下、5mm、6mm、7mm、8mm以上，均切成50－60mm长的枝条，枝条顶端上保留一个芽，处理为剂量0.3A处理一次，重复三次，考察产生芽变率、受害率和死亡率。
1.3等离子体处理后培养方法试验设3个处理，分别是普通土壤扦插方法、无营养成分自来水水插培养方法、加常规营养成分的水插培养方法，将30段直径为5-7mm绿萝茎用等离子体处理剂量0.3A、处理一次后培养，重复三次，考察根、叶的生长速度。
1.4无性繁殖后代枝条和叶片的性状一致试验
用本发明方法处理直径5-7mm100段枝条，处理为剂量0.3A，处理一次后，再进行无营养水插培养后，栽植在育苗钵，生长到60-80cm时，从多种特定类型中选择出芽变个体枝条进行了5代的无性繁殖，观察后代枝条和叶片的性状一致。
2.试验结果
2.1等离子体处理绿萝茎产生芽变试验结果
等离子体处理绿萝茎产生芽变试验结果见表1。
由表1可见，当处理剂量较小时，即处理剂量在0.1A-0.3A时，随着处理剂量的增加，处理后绿萝茎的芽变率、受害和死亡率随着增高。当处理剂量在0.4A及以上时，死亡率为100%。对0.1A-0.3A处理就同一剂量处理二次数后，全部处理的绿萝茎死亡。由此可见，适宜绿萝茎产生芽变的处理为0.1A-0.3A、处理一次。
2.2等离子体处理绿萝茎直径试验结果
等离子体处理绿萝茎直径试验结果见表2。
由表2可见，当绿萝茎直径较小时，绿萝茎产生芽变的机率较大，处理后绿萝茎的芽变率、受害率和死亡率也较高，随着绿萝茎直径的增粗，处理后绿萝茎的芽变率、受害和死亡率随之降低。当绿萝茎直径在4mm以下时，平均死亡率和平均受害率达到80%以上，且后期栽培成活率也较低，因此，该直径范围的茎不是适宜处理区间。当绿萝的老茎直径在8mm以上时，平均芽变率低于3%，因此，该直径范围的茎也不是适宜绿萝产生芽变的处理区间。当枝条直径在5-7mm时，产生芽变的机率较高，平均死亡率和平均受害率在60%以下，后期栽培成活率也较高，因此，枝条直径5-7mm为适宜绿萝产生芽变的处理区间。
2.3等离子体处理后培养方法试验结果
等离子体处理后培养方法试验结果见表3。
由表3可知，通过对培养50天和70天时绿萝生长发育的根数量、根长和叶片数三个指标的考察，经等离子体处理后的枝条采用普通土壤扦插方法的根数量、根长均极显著低于水插的培养方法（P＜0.01）；在两种水插的培养方法的根数量、根长均无显著差异（P＞0.05）；三种培养方法(普通土壤扦插方法、无营养成分自来水水插培养方法和加常规营养成分的水插培养方法)的叶片数无显著差异（P＞0.05）。因此，为提高根数量和根的生长速度、降低培养成本，优选无营养成分水插方法。
2.4无性繁殖后代枝条和叶片的性状一致试验结果
用本发明方法处理直径5-7mm100段枝条，处理为剂量0.3A、处理一次后，在进行水插的培养过程中发现发生芽变的有5枝，其中受害茎为36枝，死亡茎为25枝。当水培枝条的根长到15-30mm时，移栽到有固体基质的育苗钵中进行培养，当其新发枝长到4-6cm时，将芽变后生长正常的5株栽植在应用地，当茎生长到60-80cm时，分别从特定类型中选择出绿叶型和叶色变化型两个体枝条分别进行了5代的无性繁殖，分别繁殖出150株绿叶型和150株叶色变化型，其后代枝条和叶片的性状均稳定一致，没有发现有任何变异现象。
本发明的有益效果
(1)用本发明方法对绿萝茎进行等离子体机处理后，产生芽变的比例较高达5%左右，且受害率和死亡率较低、重现性、重复效果非常好。如此高的芽变比例对绿萝新类型的选育是极其有利的，可根据人为所需，选出快速选育出快速生长型、较慢生长型、抗病型、抗虫型、叶片紧缩型、叶片增大型、叶脉变色型等等多种新的观赏类型，美化人们的生活。
(2)用本发明方法对绿萝茎进行等离子体机处理后，结合无营养成分水插培养，绿萝茎培养的根数量、根长均优于现有技术的固体培养基扦插方法，与营养成分水插的培养根数量、根长和叶片数之间没有显著差异。因绿萝自身有杀菌成分，吸收养分较少，不须在水中添加任何营养成分，仅用自来水即可。本发明采用无营养成分水插培养技术较现有的扦插技术成活高，培养成本低。
(3)用本发明方法处理后发生芽变的绿萝茎进行5代无性繁殖，绿萝茎和叶片的性状稳定一致，没有再出现变异现象。
（4）用本发明方法选育绿萝新品种所用时间短，成本低，本发明是绿萝新品系选育的新途径。
附图说明
图1为采本发明方法选育的绿叶快速生长型绿萝新品系图。
图2为采本发明方法选育的黄金格比例大叶色蔓色变黄型绿萝新品系图。
实施例1
2011年4月10日，将直径5-7mm粗的绿萝茎切成50－60mm长共200段插条，每20-30段插条，放入广口瓶内，将枝条下部直接浸在15-25℃、20-25mm深的自来水中，在室内日光照射下培养3周后，即用大连博事等离子体有限公司生产的DL-2型等离子体处理机，处理用剂量为0.3A，处理1次，使每个枝条逐一通过等离子体处理机；然后将处理后的绿萝茎插条下部竖直浸在15-25℃、20-25mm深的自来水中，在日光照射下无营养水插培养。期间发现发生芽变的有11枝，受害枝条有77枝，死亡枝条为48枝。当水培枝条的根长出30－40mm、新芽长出2-4叶时，移栽到固体基质的育苗钵中培养(固体基质由草炭土、珍珠岩和粘土按体积比8︰2︰1的比例混匀制成)，它的好处是可以在前期多浇水也不会导致死苗，可大大提高成活率，促进根系生长发育。培养条件是：夜间温度不低于15℃，白天最高温为25℃，光照要求：要求光照较强，在上午9点-下午5点要在太阳光直射条件下培养，有较强的散射光也行。当新芽培养到5-6叶时就要定植于花盆内，当新芽的枝条长生长到20－22cm时，就表现出等离子体处理后产生的多种特定类型。选出绿叶型进行无性繁殖，即获得绿叶快速生长型绿萝新品系（茎长1米）(见图1)；选出了叶色蔓色变黄型进行无性繁殖，即获得黄金格比例大叶色蔓色变黄型绿萝新品系(见图2)；将绿萝新品系分别经过5代无性繁殖，其性状均表现稳定一致，无变异现象发生。