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一种尿液肌酐检测试剂条及其制备方法.pdf

  • 上传人：v****
  • 文档编号：6220515
  • 上传时间：2019-05-22
  • 格式：PDF
  • 页数：9
  • 大小：338.50KB
    • 摘要
    申请专利号：

    CN201310548676.X

    		 申请日：

    2013.11.06
    公开号：

    CN103630532A

    		 公开日：

    2014.03.12
    当前法律状态：

    授权

    		 有效性：

    有权
    法律详情：

    授权|||实质审查的生效IPC(主分类):G01N 21/78申请日:20131106|||公开
    IPC分类号：

    G01N21/78

    		 主分类号：

    G01N21/78
    申请人：

    中国科学院苏州生物医学工程技术研究所
    发明人：

    陈名利; 白鹏利; 胡军
    地址：

    215163 江苏省苏州市科技城科灵路88号
    优先权：

    专利代理机构：

    北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369

    		 代理人：

    史霞
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    内容摘要

    本发明公开了一种尿液肌酐检测试剂条及其制备方法，该检测试剂条包括基板和滤纸片，滤纸片是滤纸分别在A液和B液中充分浸泡后取出，干燥后制得，A液是包含3.2wt％～4.8wt％缓冲液和1wt％～1.5wt％表面活性剂的80～95v／v％乙醇溶液；B液是包含0.8wt％～1.2wt％3，5-二硝基苯甲酸和0.008wt％～0.012wt％溴甲酚绿的甲醇溶液。本案制备的尿液肌酐检测试剂条，在碱性条件下与尿液中的肌酐迅速发生反应，肌酐浓度在0～26.4mmol／24h范围内，试纸呈现从浅蓝到褐色的明显色阶，易于目视分辨和机读，试纸制备方法简单，易操作，性能稳定，测定结果准确。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种尿液肌酐检测试剂条，包括基板和滤纸片，所述滤纸片附着在所述基板上，其特征在于，所述滤纸片中依次浸入有A液和B液，其中：
    所述A液是包含：3.2wt％～4.8wt％缓冲液和1wt％～1.5wt％表面活性剂的80～95v／v％乙醇溶液；
    所述B液是包含：0.8wt％～1.2wt％3，5-二硝基苯甲酸和0.008wt％～0.012wt％溴甲酚绿的甲醇溶液。

    2.  根据权利要求1所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述缓冲液选自氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠或其组合；所述表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇或其组合。

    3.  根据权利要求1或2所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述A液的pH=13～14。

    4.  根据权利要求1所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述基板材质是聚氯乙烯树脂，或是聚丙烯，或是聚甲基丙烯酸甲酯。

    5.  根据权利要求1所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述滤纸片是普通定量滤纸或普通定性滤纸。

    6.  一种尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征包括如下步骤：
    (1)配置A液：将32～48g缓冲液和10～15g表面活性剂放入容器内，加入800mL～950mL无水乙醇，随后加水至1000mL定容；
    其中，所述缓冲液选自氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠或其组合；所述表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇或其组合；
    (2)配置B液：将8～12g3，5-二硝基苯甲酸和0.08～0.12g溴甲酚绿放入容器内，加入无水甲醇至1000mL定容；
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20～30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10～20分钟；
    (4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为20～40℃的真 空干燥箱中干燥，干燥时间为10～20分钟；
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条。

    7.  根据权利要求6所述的尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征在于，所述A液的pH=13～14。

    8.  根据权利要求6所述的尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征在于，所述矩形纸条的尺寸为0.55×0.80cm。

    说明书

    说明书一种尿液肌酐检测试剂条及其制备方法
    技术领域
    本发明涉及尿液检测领域，特别涉及一种尿液肌酐检测试剂条及其制备方法。 
    背景技术
    肌酐是肌肉在人体内代谢的产物，随尿液排出时即为尿肌酐。尿肌酐主要来自血液，经肾小球滤过后排出体外。尿肌酐值正常范围为8.4～13.25mm ol／24h或40～130mg／dl。正常人尿肌酐的日排出量很稳定，基本不受食物蛋白质含量和尿量的影响，当尿肌酐值出现显著异常(升高或降低)则反映出肾功能受到相当程度的损伤。所以临床上能够通过检测尿肌酐含量的变化，能够及时掌控疾病的变化以及对治疗起到重要的参考作用。 
    测定肌酐的方法有氧化酶发、苦味酸法等，这些方法都需要相关的仪器设备和接受过专门训练的检测人员，操作复杂，检测速度慢，且这些专业仪器设备不便于携带，检测成本昂贵，临床使用不便。目前已有的一种测定尿肌酐的试纸，是在强碱条件下用3，5-二硝基苯甲酸与肌酐络合生成紫红色络合物。该方法自苦味酸法改进而来，有效降低了假肌酐的干扰，但由于试纸在制作过程中，高温条件下的强碱溶液不但降解了试纸纤维，而且能使3，5-二硝基苯甲酸氧化变色，从而造成背景干扰。 
    发明内容
    针对现有技术中存在的不足之处，本发明提供一种尿液肌酐检测试剂条及其制备方法，该制备方法简便快捷，在常温下即能对检测试剂条迅速干燥，避免高温下碱溶液降解试纸，同时也能避免3，5-二硝基苯甲酸的氧化。本方法制作成本低廉，试剂条使用方便，便于保存， 检测结果快速准确。 
    本发明的技术方案概述如下： 
    一种尿液肌酐检测试剂条，包括基板和滤纸片，所述滤纸片附着在所述基板上，所述滤纸片中依次浸入有A液和B液，其中： 
    所述A液是包含：3.2wt％～4.8wt％缓冲液和1wt％～1.5wt％表面活性剂的80～95v／v％乙醇溶液； 
    所述B液是包含：0.8wt％～1.2wt％3，5-二硝基苯甲酸和0.008wt％～0.012wt％溴甲酚绿的甲醇溶液。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述缓冲液选自氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠或其组合；所述表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇或其组合。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述A液的pH=13～14。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述基板材质可以是聚氯乙烯树脂、聚丙烯或聚甲基丙烯酸甲酯。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条，其特征在于，所述滤纸片是普通定量滤纸或普通定性滤纸。 
    一种尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征包括如下步骤： 
    (1)配置A液：将32～48g缓冲液和10～15g表面活性剂放入容器内，加入800mL～950mL无水乙醇，随后加水至1000mL定容； 
    其中，所述缓冲液选自氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、苯甲酸钠或其组合；所述表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮、聚环氧乙烯月桂酸醚、聚乙二醇或其组合； 
    (2)配置B液：将8～12g3，5-二硝基苯甲酸和0.08～0.12g溴甲酚绿放入容器内，加入无水甲醇至1000mL定容； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20～30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10～20分钟； 
    (4)将滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为20～40℃的真 空干燥箱中干燥，干燥时间为10～20分钟； 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征在于，所述A液的pH=13～14。 
    优选地，所述的尿液肌酐检测试剂条的制备方法，其特征在于，所述矩形纸条的尺寸为0.55×0.80cm。 
    本发明的有益效果是：本发明方法制备的尿液肌酐检测试剂条，在碱性条件下，3，5-二硝基苯甲酸能够与尿液中的肌酐迅速发生反应，肌酐浓度在0～26.4mmol／24h范围内，试剂条呈现从浅蓝到褐色的明显色阶，易于目视分辨和机读，且不受尿液中其他物质的干扰，试剂条制备方法简单，易操作，性能稳定，测定结果准确。 
    具体实施方式
    下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。 
    实施例1 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将32g氢氧化钠、10g聚乙二醇、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例2 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将48g氢氧化钠、15g聚乙二醇、950mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5-二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为40℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例3 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将32g氢氧化钾、10g聚乙二醇、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为40℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例4 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将48g氢氧化钾、15g聚乙二醇、950mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5- 二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例5 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将40g氢氧化钠、12.5g聚乙二醇、875mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将10g3，5-二硝基苯甲酸、0.10g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例6 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将16g氢氧化钠、16g硅酸钠、10g聚乙烯吡咯烷酮、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例7 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将24g氢氧化钠、24g硅酸钠、15g聚乙烯吡咯烷酮、950mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5-二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例8 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将16g氢氧化钾、16g苯甲酸钠、10g聚乙烯吡咯烷酮、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例9 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将24g氢氧化钾、24g苯甲酸钠、15g聚乙烯吡咯烷酮、9 50mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5-二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例10 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将32g硅酸钠、10g聚环氧乙烯月桂酸醚、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例11 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将48g硅酸钠、15g聚环氧乙烯月桂酸醚、950mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5-二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例12 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将32g苯甲酸钠、10g聚环氧乙烯月桂酸醚、800mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=13； 
    (2)配置B液：将8g3，5-二硝基苯甲酸、0.08g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为20℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为20分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例13 
    本实施例提供一种尿液肌酐检测试剂条，其通过如下步骤制备得到： 
    (1)配置A液：将48g苯甲酸钠、15g聚环氧乙烯月桂酸醚、950mL无水乙醇放入容量瓶内，加水至1000mL；经pH试纸测试，A液的pH=14； 
    (2)配置B液：将12g3，5-二硝基苯甲酸、0.12g溴甲酚绿放入容量瓶内，加无水甲醇至1000mL； 
    (3)将滤纸片浸入A液中，充分浸泡后取出，置于温度为30℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟； 
    (4)将干燥后的滤纸片浸入B液中，充分浸泡后取出，置于温度为40℃的真空干燥箱中干燥，干燥时间为10分钟；。 
    (5)将干燥后的滤纸片与基板固定，裁成矩形纸条，制成一种尿液肌酐检测试剂条，矩形纸条的尺寸优选为0.55×0.80cm。 
    实施例14 
    标准比色卡的制备方法： 
    (1)配置0mmol／L、4.4mmol／L、8.8mmol／L、17.6mmol／L、26.4mmol／L的肌酐标准溶液； 
    (2)将上述实施例1～13制备好的检测试剂条分别浸于上述的五种肌酐标准溶液中，2秒钟后取出，晾干，1分钟后显色完全； 
    (3)根据各试纸的显色情况制备比色卡，比色卡的色阶为淡蓝到深褐的5个色阶。 
    实施例15 
    尿液肌酐检测试剂条使用方法： 
    将实施例1～13制备好的检测试剂条浸入待测液中，2秒钟后取出，晾干，1分钟后显色完全，随后与标准比色卡进行比较，与检测试剂条上颜色最接近的标准比色卡上的颜色所对应的浓度即为待测液的浓度，如果在两个色阶之间，则可估读肌酐浓度。 
    实施例16 
    尿液肌酐检测试剂条在仪器上的使用方法： 
    (1)配置0mmol／L、4.4mmol／L、8.8mmol／L、17.6mmol／L、26.4mmol／L的肌酐标准溶液； 
    (2)将实施例1～13制备好的检测试剂条分别浸于上述的五种肌酐标准溶液中； 
    (3)使用尿液分析仪测定1分钟的反射率，根据5个点绘制标准曲线； 
    (4)使用时，将按照实施例制备好的尿肌酐试剂条浸入待测液中取出，1分钟后使用尿液分析仪测定反射率，测得的反射率与标准曲线上对应的浓度即为待测液肌酐浓度。 
    尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。 

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    一种 尿液 检测 试剂 及其 制备 方法
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