一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养基及培养方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 103960118 A (43)申请公布日 2014.08.06 CN 103960118 A (21)申请号 201410222840.2 (22)申请日 2014.05.26 A01G 33/00(2006.01) C05G 1/00(2006.01) (71)申请人 临沂大学 地址 276000 山东省临沂市双岭路中段临沂 大学 (72)发明人 王培磊 (54) 发明名称 一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养 基及培养方法 (57) 摘要 本发明公开了一种利用淀粉厂废水养殖青岛 大扁藻方法。该技术不仅可以低成本处理淀粉废 水， 变废为宝， 还可获得有重要饵料价。

2、值的青岛大 扁藻， 一举两得， 实在是巧妙之极。青岛大扁藻培 养传统上使用 f/2 培养基并使用开放水泥跑道 池， 生长慢、 产量低、 投资大、 易污染、 效益低。现 在我采用容积为 3 立方米的高密度聚乙烯水塔 培养， 成本低， 不易污染， 洗刷方便， 可重复利用， 易于操作， 而且本发明在基本培养基中增加了驴 粪浸出液、 磷酸二氢钠、 海藻酸丙二醇酯、 山梨糖 醇、 海泥抽取液、 土壤抽出液、 乙二胺四乙酸、 复合 维生素、 人尿等营养成分， 有机肥和无机肥混合 使用， 营养更加全面、 均衡， 青岛大扁藻产量提高 300。 (51)Int.Cl. 权利要求书 2 页 说明书 6 页 附图 。

3、1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书2页 说明书6页 附图1页 (10)申请公布号 CN 103960118 A CN 103960118 A 1/2 页 2 1. 一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养基， 其特征在于配方如下 ： 淀粉厂废水 75 毫升， 驴粪浸出液 2.0 毫升， 兔粪浸出液 1.5 毫升， 乙酸钠 12 毫克， 硫酸 铵 18 毫克， 硫酸镁 24 毫克， 琼脂 30 毫克， 蔗糖 25 毫克， 磷酸二氢钠 15 毫克， 海藻酸丙二醇 酯 10 毫克， 环己基氨基磺酸钠 8 毫克， 山梨糖醇 1.0 毫升， 三聚甘油单硬脂酸酯 。

4、5 毫克， 海 泥抽取液 1.5 毫升， 土壤抽出液 2.0 毫升， 乙二胺四乙酸 6 毫克， 维生素 B112 微克， 维生素 B121.5 微克， 人尿 2 毫升， 次氯酸钠消毒后的纯净海水 1000 毫升。 2. 一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养方法， 其特征在于具体步骤如下 ： 培养容器为圆柱体聚乙烯水塔， 容积 3.0 立方米， 高密度聚乙烯材料制成， 无色或白 色， 有较好的透光性， 以利藻类进行光合作用， 水塔为一体式构造， 壁厚 6 毫米， 具有很大的 强度和坚固性， 水塔顶部有一圆形盖子， 上有旋丝， 可旋转而密封， 水塔底部是一角铁焊接 成的底座， 高 50 厘米， 。

5、水塔顶部盖子直径 40 厘米， 盖子打上 2 个孔， 一个孔插入充气管， 另 一个孔插入排气管， 充气管和排气管都是玻璃管， 内径 10 毫米。将反应器洗刷干净， 后用 蒸馏水润洗 3 遍， 装入权利要求 1 所述的培养基 2000 升， 充气混合 5 分钟， 选择生命力旺 盛、 无污染的青岛大扁藻接种， 接种密度 2104cell/mL， 盖子上插入两根干净玻璃管， 一根 较长， 65 厘米， 顶端露出盖子 12 厘米， 下端通过料管与散气石连接， 用以充气， 所述散气石 的作用是形成很小的气泡， 避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞 ； 另一根较短， 30 厘米， 两 端露出盖子即可， 用以排。

6、气 ； 两根玻璃管同样粗细， 内径 10 毫米， 用干净的透明胶带将两 根玻璃管固定， 长的玻璃管上端用料管与充气泵相连， 充入混合气体， 混合气体成分和体积 比例是空气纯二氧化碳臭氧氨气 92 6 1 1 ； 连续充气， 充气量不 宜太大， 以藻细胞浮起不下沉即可， 室外培养， 太阳光照射， 最佳温度 252， 最佳光照强 度 3000-10000Lux， 培养的前 5 天， 水塔上方搭建一简易棚， 上放置帘子遮挡光线， 使光照 强度维持在 1500-2800Lux， 避免强烈阳光对细胞造成的光伤害， 第 6 天撤掉帘子， 较强的 光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成 ； 培养至第。

7、 7 天， 停止充气， 拿开盖 子， 补充新鲜培养基 100 升， 盖上盖子， 充气， 继续培养， 至第 9 天， 青岛大扁藻密度增加至 150104cell/mL， 停止培养， 从底部的水龙头放出藻液， 将反应器洗刷干净后， 加入中药消 毒液消毒 30 分钟， 后进入下一轮培养 ； 所述中药消毒液由以下重量比的物质组成 ： 每 100 份 85乙醇中加入以下重量份的 中药材 ： 板蓝根 30 50 份、 柴胡 15 25 份、 薄荷 15 25 份、 栀子 5 15 份、 艾叶 5 15 份， 中药消毒液制作方法 ： 将新鲜板蓝根、 柴胡、 薄荷叶、 艾叶、 山栀果切碎， 于 60-70下 。

8、烘干， 再用中药材粉碎机分别粉碎至 70 目备用， 用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根 120 克， 柴胡 60 克， 薄荷叶 60 克， 艾叶 30 克， 山栀果 30 克， 置于三角烧瓶中充分混合后， 加 入 1000 毫升 85乙醇， 浸泡 48 小时， 200 筛绢过滤， 将清液静置沉淀 36 小时， 撇去液面漂 浮物， 取中上层的清液， 即为复方中药消毒液， 密封于黑色试剂瓶中， 贴上标签， 置于 4冰 箱备用。 3. 根据权利要求 2 所述的一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养方法， 其特征在 于对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用紫外灯消毒， 消毒 10-20 。

9、分钟。 4. 根据权利要求 2 所述的一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养方法， 其特征在 于对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压氮气喷射消毒， 消毒 5-10 分钟。 5. 根据权利要求 2 所述的一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养方法， 其特征在 权 利 要 求 书 CN 103960118 A 2 2/2 页 3 于对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压二氧化碳喷射消毒， 消毒 5-6 分 钟。 6. 根据权利要求 2 所述的一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养方法， 其特征 在于对选用的所述的反应器， 洗刷干净后分两个阶段消毒， 先使用高压氮气。

10、喷射消毒， 消毒 2-3 分钟， 使用高压二氧化碳喷射消毒， 消毒 2-3 分钟， 消毒完毕后再进行藻类培养。 权 利 要 求 书 CN 103960118 A 3 1/6 页 4 一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养基及培养方法 技术领域 0001 本发明属于水产养殖领域， 尤其涉及一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的培养 基及培养方法。 背景技术 0002 淀粉是一种重要工业原料， 广泛应用于食品、 化工、 纺织、 医药行业。 淀粉生产过程 中， 废水排放量大， 每生产 1t 淀粉产生 10-20m3废水， 主要成份为淀粉、 蛋白质和糖类， 废水 COD 值在 8000-30000mg/L。

11、， BOD 值 5000-20000mg/L， SS 值 3000-5000mg/L， pH4-6， 属高浓度 酸性废水。 另外， 有些淀粉废水还含一定量SO32-、 SO42-。 目前中国共有大小淀粉厂300余家， 每年产废水1600万m3， 含溶解性淀粉、 少量蛋白质、 有机酸、 尘土、 矿物质及油脂， 易腐败， 发 黑发臭， 排入江河消耗水中溶氧， 促进藻类及水生植物繁殖， 导致江河缺氧， 厌氧腐败， 散发 恶臭， 严重者鱼、 虾、 贝窒息死亡， 对人体健康也构成巨大威胁， 故淀粉废水治理及利用受到 环境科学工作者重视。目前国内外较常用的淀粉废水处理工艺有以下几种 ： 0003 1. 厌。

12、氧生物法 0004 厌氧生物处理法是在无氧条件下， 靠厌气细菌分解有机物。 在此过程中， 参加生物 降解有机质 50-90转化为沼气， 发酵后的剩余物可作为优质肥料和饲料。厌氧法主要有 上流式厌氧污泥床、 折流厌氧污泥床、 厌氧序批式活性污泥法、 颗粒污泥膨胀床等。实验表 明， 厌氧法不仅污染物去除效果明显， 工艺稳定， 能耗低， 污泥产量少， 还可产生甲烷等能源 气体， 故应用广泛。但厌氧处理法易受废水水温、 pH、 有毒物质等因素影响且出水有机质浓 度高、 污泥培养周期长。 0005 2. 好氧生物法 0006 是在氧气充足的条件下， 利用好氧微生物的生命活动氧化污水中有机物， 产物是 二。

13、氧化碳、 水及能量。 活性污泥法、 生物膜法、 深井曝气法是有代表性的好氧生物处理方法。 近二十年国内外对好氧生物处理法进行了大量实验， 在高浓度有机废水处理方面， 取得了 一定成果， COD 去除率 95， 且回收蛋白质 2.07-2.39g/L 废水， 蛋白质无毒性， 作动物饲料 效益好且工艺简单， 易操作， 基建和运行费低， 便于管理， 缺点是需充氧， 动力消耗大， 无能 量回收， 微生物所需营养多。 0007 3. 生物塘法 0008 是一种利用水体天然净化能力处理废水方法， 该技术在 20 世纪 50 年代后发展迅 速， 生活污水和工业废水处理中应用最多。针对淀粉废水浓度高、 富含营。

14、养物特性， 采用厌 氧塘、 兼性塘、 好氧塘结合的生物塘技术。 杨凤江研究表明， 采用氧化塘-水葫芦池-细绿萍 池处理， 废水经隔栅沉淀后， 导入氧化塘， 经过 1-2 天自然发酵， 再导入水葫芦池， 经水葫芦 7 天净化， 降低了污染物浓度且实现了废水资源利用， 但氧化塘法占地多， 易受气候影响。 0009 4. 絮凝沉淀法 0010 通过加入絮凝剂， 降低胶体溶液稳定性， 使之凝聚沉淀， 分离净化， 主要处理水中 微小悬浮物和胶体杂质。 所用絮凝剂主要是微生物和多糖类絮凝剂， 也有聚铁类絮凝剂。 废 说 明 书 CN 103960118 A 4 2/6 页 5 水 CODcr 去除率 96。

15、.2， 浊度去除率达 96.4。该法基建投资少、 工艺简单、 易操作、 能耗 低、 对气温变化适应性强， 但混凝剂价格贵， 小分子有机物去除率低且易二次污染。 0011 5. 光合细菌法 0012 上世纪 70 年代， 日本的小林正泰等率先利用光合细菌处理有机废水， 效果较好。 光合细菌主要是红假单胞菌属， 能在厌氧条件下进行不耗氧光合作用， 利用有机物作为光 合作用碳源和供氢体， 能承受高浓度有机物， 不需稀释直接处理。适宜条件下， CODcr 去除 率达95.7。 该法有机物去除率高、 投资省、 占地少且菌种污泥对人畜无毒无害， 前途广阔。 但光合细菌法同样对温度变化敏感， 需加热和保温装。

16、置， 晚上需较强白炽灯光照， 运行费用 高且管理不便。 0013 为了克服淀粉废水传统处理方法缺点， 本人发明了一种利用淀粉厂废水养殖青岛 大扁藻技术， 不仅可以低成本处理淀粉废水， 废物利用， 变废为宝， 而且可获得有重要饵料 价值的单胞藻 - 青岛大扁藻， 一举两得， 实在是巧妙之极， 妙不可言。 0014 青岛大扁藻Platymonas sp.属绿藻门、 绿藻纲、 团藻目、 衣藻科、 扁藻属。 行无性生 殖， 细胞纵分裂成 2， 少数情况下为 4， 环境不良时形成休眠孢子。细胞广卵形， 前端较宽阔， 顶端凹陷 ； 鞭毛 4 条由洼处生出 ； 细胞内有一大型杯状绿色色素体， 近后端有一内上。

17、开口杯 状蛋白核， 蛋白核附近有一到多个红色眼点， 细胞中间略前有一细胞核， 细胞外包一层较薄 纤维质细胞壁 ； 靠鞭毛在水中游动， 迅速活泼 ； 体长 16-30 微米， 宽 12-15 微米， 厚 7-10 微 米， 左右对称， 有背腹之分， 背部隆起， 腹部略凹入 ； 尾部略窄或略尖， 眼点 2-3 个， 少数有 4 个 ； 盐度8-80水中均能生长繁殖， 最适盐度30-40 ； 温度适应范围也较广， 7-30均可， 最适 20-28。最适光照强度 5000-10000Lux ； 最适 pH7.5-8.5。该藻适应性强， 生长繁殖迅速， 极易培养， 是中国对虾、 毛虾、 栉孔扇贝、 海湾。

18、扇贝、 贻贝、 鲍鱼、 舌鳎、 梭子蟹、 毛蚶、 泥蚶、 牡 蛎、 海参等海珍动物幼体优质饵料， 富含动物幼体所必需的多种维生素和脂肪酸， 对幼体生 长发育有极重要作用。对海珍生长发育所必需的动物性饵料轮虫、 裸腹蛋、 丰年虫等也有 极好营养强化作用。青岛大扁藻培养传统上使用 f/2 培养基并使用开放水泥跑道池， 生长 慢、 产量低、 投资大、 易污染、 效益低。现在我采用容积为 3 立方米的高密度聚乙烯制成的具 有极好透光性的水塔培养， 成本低， 不易污染， 洗刷方便， 可重复利用， 易于操作， 而且我在 淀粉废水中添加了驴粪浸出液、 兔粪浸出液、 乙酸钠、 硫酸铵、 硫酸镁、 磷酸二氢钠、。

19、 海藻酸 丙二醇酯、 环己基氨基磺酸钠、 山梨糖醇、 三聚甘油单硬脂酸酯、 海泥抽取液、 土壤抽出液、 乙二胺四乙酸、 复合维生素、 人尿等营养成分， 有机肥和无机肥混合使用， 营养更加全面、 均 衡， 青岛大扁藻生长速度大增， 培养周期缩短， 产量提高 300。 0015 有益结果 ： 为了克服淀粉厂废水传统处理方法缺点， 本人发明了一种利用淀粉厂 废水培养青岛大扁藻的方法， 不仅废物利用， 变废为宝， 而且可获得有重要饵料价值的扁 藻， 一举两得， 实在是巧妙之极， 妙不可言。青岛大扁藻培养传统上使用 f/2 培养基并使用 开放水泥池培养， 生产速率低、 产量不高、 投资大、 易污染、 效。

20、益低， 现在我采用容积为 3 立 方米的高密度聚乙烯制成的具有极好透光性的水塔培养， 成本低， 不易污染， 洗刷方便， 可 重复利用， 易于操作， 而且我在淀粉厂废水中增加了驴粪浸出液、 兔粪浸出液、 乙酸钠、 硫酸 铵、 硫酸镁、 磷酸二氢钠、 海藻酸丙二醇酯、 环己基氨基磺酸钠、 山梨糖醇、 三聚甘油单硬脂 酸酯、 海泥抽取液、 土壤抽出液、 乙二胺四乙酸、 复合维生素、 人尿等营养成分， 有机肥和无 机肥混合使用， 营养更加全面、 均衡， 青岛大扁藻生长速度和产量大幅提高， 培养周期缩短， 说 明 书 CN 103960118 A 5 3/6 页 6 产量提高 300。 发明内容 001。

21、6 为了克服目前技术的不足， 本发明提供了一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁藻的 培养基， 配方如下 ： 0017 淀粉厂废水 75 毫升， 驴粪浸出液 2.0 毫升， 兔粪浸出液 1.5 毫升， 乙酸钠 12 毫克， 硫酸铵 18 毫克， 硫酸镁 24 毫克， 琼脂 30 毫克， 蔗糖 25 毫克， 磷酸二氢钠 15 毫克， 海藻酸丙 二醇酯 10 毫克， 环己基氨基磺酸钠 8 毫克， 山梨糖醇 1.0 毫升， 三聚甘油单硬脂酸酯 5 毫 克， 海泥抽取液 1.5 毫升， 土壤抽出液 2.0 毫升， 乙二胺四乙酸 6 毫克， 维生素 B112 微克， 维 生素 B121.5 微克， 人尿 2 毫。

22、升， 次氯酸钠消毒后的纯净海水 1000 毫升。 0018 一种青岛大扁藻培养方法， 具体步骤如下 ： 0019 培养容器为圆柱体聚乙烯水塔， 容积3.0立方米， 高密度聚乙烯材料制成(市场有 售 )， 无色或白色， 有较好的透光性， 以利藻类进行光合作用， 水塔为一体式构造， 壁厚 6 毫 米， 具有很大的强度和坚固性。水塔顶部有一圆形盖子， 上有旋丝， 可旋转而密封。水塔底 部是一角铁焊接成的底座， 高 50 厘米。水塔顶部盖子直径 40 厘米， 盖子打上 2 个孔， 一个 孔插入充气管， 另一个孔插入排气管， 充气管和排气管都是玻璃管， 内径 10 毫米。将反应 器洗刷干净， 后用蒸馏水。

23、润洗 3 遍， 装入权利要求 1 所述的培养基 2000 升， 充气混合 5 分 钟， 选择生命力旺盛、 无污染的青岛大扁藻接种， 接种密度 2104cell/mL ； 盖子上插入两根 干净玻璃管， 一根较长， 65 厘米， 顶端露出盖子 12 厘米， 下端通过料管与散气石连接， 用以 充气 ( 散气石的作用是形成很小的气泡， 避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞 ) ； 另一根较 短， 30厘米， 两端露出盖子即可， 用以排气 ； 两根玻璃管同样粗细， 内径10毫米 ； 用干净的透 明胶带将两根玻璃管固定 ； 长的玻璃管上端用料管与充气泵相连， 充入混合气体， 混合气体 成分和体积比例是空气纯二。

24、氧化碳臭氧氨气 92 6 1 1 ； 连续充气， 充气量不宜太大， 以藻细胞浮起不下沉即可 ； 室外培养， 太阳光照射， 最佳温度 252， 最 佳光照强度 3000-10000Lux ； 培养的前 5 天， 水塔上方搭建一简易棚， 上放置帘子遮挡光线， 使光照强度维持在 1500-2800Lux， 避免强烈阳光对细胞造成的光伤害 ； 第 6 天撤掉帘子， 较强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成 ； 培养至第 7 天， 停止充气， 拿 开盖子， 补充新鲜培养基 100 升， 盖上盖子， 充气， 继续培养， 至第 9 天， 青岛大扁藻密度增 加至 150104cell/mL， 停止。

25、培养， 从底部的水龙头放出藻液， 将培养容器洗刷干净后， 加入 0.2过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒 2 小时， 再用蒸馏水润洗一遍， 后进入下一轮培养 ； 0020 优选的， 将培养容器洗刷干净后， 不采用 “加入 0.2过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒 2 小时” 的消毒方式， 而采用 “加入中药消毒液消毒 30 分钟， 后进入下一轮培养。所述中药 消毒液由以下重量比的物质组成 ： 每 100 份 85乙醇中加入以下重量份的中药材 ： 板蓝根 30 50 份、 柴胡 15 25 份、 薄荷 15 25 份、 栀子 5 15 份、 艾叶 5 15 份， 中药消毒 液制作方法 ： 将新鲜板蓝根、 柴胡、 薄。

26、荷叶、 艾叶、 山栀果切碎， 于 60-70下烘干， 再用中药 材粉碎机分别粉碎至 70 目备用， 用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根 120 克， 柴胡 60 克， 薄荷叶60克， 艾叶30克， 山栀果30克， 置于三角烧瓶中充分混合后， 加入1000毫升85 乙醇， 浸泡48小时， 200筛绢过滤， 将清液静置沉淀36小时， 撇去液面漂浮物， 取中上层的清 液， 即为复方中药消毒液， 密封于黑色试剂瓶中， 贴上标签， 置于 4冰箱备用。 ” 说 明 书 CN 103960118 A 6 4/6 页 7 0021 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用紫外灯消毒， 消。

27、毒 10-20 分钟。 0022 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压氮气喷射消毒， 消毒 5-10 分钟 ； 0023 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压二氧化碳喷射消 毒， 消毒 5-6 分钟 ； 0024 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后分两个阶段消毒， 先使用高压氮气喷 射消毒， 消毒 2-3 分钟 ； 使用高压二氧化碳喷射消毒， 消毒 2-3 分钟 ； 消毒完毕后再进行藻 类培养。 0025 附图说明图 1 为一种利用淀粉厂废水培养青岛大扁藻方法图。 0026 其中附图标记为 ： 1 充气管 2 藻液 3 底座 4。

28、 培养容器 5 出气管。 具体实施方式 0027 1) 淀粉废水预处理方法 ： 淀粉废水用于养藻前需要进行预处理， 方法是 ： 先用 60 目的筛绢过滤废水， 除去漂浮物、 玻璃渣子、 毛发、 泥沙、 树叶、 塑料袋等体积较大固形物， 后 将污水引入长 30 米、 宽 20 米、 深 0.7 米的水泥曝气池中， 池子呈东西走向， 以接受更多的阳 光照射 ； 水深保持在55厘米 ； 按每立方米污水加入50克生石灰的量均匀泼洒生石灰(生石 灰最好预先按 1 公斤加入 5 升纯水的量在塑料桶中溶解、 稀释、 搅拌均匀， 再全池泼洒 )， 隔 60分钟， 再按每立方米污水加入80克的量全池泼洒明矾(明。

29、矾最好预先按100克加4升纯 水的量在塑料桶中溶解、 稀释并搅拌均匀， 再全池泼洒 )， 然后用耙子搅动或充气搅拌 60 分 钟， 使石灰和明矾充分溶解、 混合并与污水中有机物充分发生化学反应， 然后自然沉淀、 发 酵、 曝光72小时， 撇去水面泡沫等漂浮物， 勿搅动池底， 取中上层的污水， 煮沸6分钟， 冷却， 装入不透光的黑色塑料桶中， 密封， 4冰箱或冷库， 保存， 备用 ； 0028 2) 驴粪浸出液制备方法 ： 取新鲜驴粪 50 公斤， 加入麸皮 1 公斤， 玉米面 2 公斤， 自 来水 3 升， 充分搅拌， 堆成圆锥状， 自然发酵 20 天， 后摊成薄层， 阳光下暴晒 4 天， 后。

30、取 3 公 斤放入水桶中， 加入 15 升蒸馏水， 充分搅匀， 静置， 48 小时后 400 目筛绢过滤， 取滤液加热， 煮沸 15 分钟， 杀死其中的细菌、 霉菌、 病毒等， 冷却， 沉淀 24 小时， 取上清液， 即得驴粪浸出 液， 装入磨口塞试剂瓶， 密封， 贴上标签， 置于 4冰箱备用 ； 0029 3) 次氯酸钠消毒海水方法 ： 取海水， 脱脂棉过滤， 按 1 立方米海水中加入漂白粉 50-100 克的量加入漂白粉， 使海水中有效氯含量达到 10-20mg/L， 充气 10-12 小时后， 用硫 代硫酸钠中和余氯。硫代硫酸钠量由余氯的多少来确定， 直到滴入淀粉碘化钾液不变色为 止 ；。

31、 0030 4)过氧乙酸消毒液制备方法和使用注意事项 ： 市售过氧乙酸原液含量35(以重 量计 )， 无色液体， 有强烈刺激性气味。使用时应用洁净自来水稀释成 0.2溶液， 浸泡蓄水 罐 2 小时。该品对眼睛、 皮肤、 粘膜和上呼吸道有强烈刺激作用， 头痛、 恶心且易燃， 具爆炸 性、 强腐蚀性、 强刺激性， 可致人体灼伤， 加热至 100即猛烈分解， 遇火或受热、 受震都可起 爆。与还原剂、 促进剂、 有机物、 可燃物等接触会发生剧烈反应 ； 腐蚀性强， 不可直接用手接 触， 操作时应带胶皮手套、 口罩和眼镜， 对金属有腐蚀性， 不可用于金属器械的消毒 ； 原液长 期放置可分解， 注意保质期。

32、， 应贮于塑料桶内凉暗处保存， 远离可燃性物质。 说 明 书 CN 103960118 A 7 5/6 页 8 0031 5) 接种用的青岛大扁藻预先进行提纯 ( 本领域常规方法， 只要可实现提纯即可， 例如凯氏提取法 )， 以确保接种时藻种处于指数生长期 ； 0032 6) 各种营养盐要按配方中提供的顺序加入， 以免发生化学反应 ； 0033 7) 各种营养盐均需预先配成母液且置于 4冰箱冷藏保存备用， 放置时间不要超 过 45 天 ； 0034 8) 全部营养盐加完后要充气混合 10 分钟， 使营养盐混合均匀后再接种 ； 0035 9) 兔粪浸出液制备方法 ： 把干兔粪、 青草、 豆饼、 。

33、米糠、 颖壳 ( 五谷杂粮的外壳 ) 和 腐殖土按 60 10 12 15 2 1 的重量比例混合， 搅拌均匀， 装入缸内密闭进行发 酵， 30 天后， 倒出， 在干净水泥地上， 摊成薄层， 晾干 48 小时， 后取 2 公斤， 置于塑料水桶， 加 自来水 10 公斤， 搅拌均匀， 用 200 目筛绢过滤， 将清液煮沸 5 分钟， 冷却， 静置 24 小时， 取上 清液， 装入试剂瓶， 贴上标签， 置于 4冰箱， 备用 ； 0036 10) 土壤抽出液制备方法 ： 到树林中取松散、 富含有机质的上层土壤 1 公斤， 加自 来水 5 升， 煮沸 20 分钟， 将泥浆倒入烧杯中， 静置 24 小时。

34、， 后吸取上清液， 倒入三角烧瓶中， 加棉花塞， 煮沸 15 分钟， 冷却， 静置沉淀 12 小时， 取上清液即得土壤抽出液， 装入磨口塞试 剂瓶， 密封， 贴上标签， 置于 4冰箱备用 ； 0037 11) 人尿制备方法 ： 取人尿 1000 毫升， 烧瓶煮沸 5 分钟后， 冷却备用 ； 0038 12) 水塔底部安放在一角铁、 钢管焊接成的底座上， 底座高 50 厘米， 要求底座坚 固、 强壮、 安稳、 牢靠、 耐用、 防锈 ； 0039 13) 所用化学药品纯度均需化学纯级别 ； 0040 14) 为了克服目前技术的不足， 本发明提供了一种利用淀粉厂废水养殖青岛大扁 藻的培养基， 配方如。

35、下 ： 0041 淀粉厂废水 75 毫升， 驴粪浸出液 2.0 毫升， 兔粪浸出液 1.5 毫升， 乙酸钠 12 毫克， 硫酸铵 18 毫克， 硫酸镁 24 毫克， 琼脂 30 毫克， 蔗糖 25 毫克， 磷酸二氢钠 15 毫克， 海藻酸丙 二醇酯 10 毫克， 环己基氨基磺酸钠 8 毫克， 山梨糖醇 1.0 毫升， 三聚甘油单硬脂酸酯 5 毫 克， 海泥抽取液 1.5 毫升， 土壤抽出液 2.0 毫升， 乙二胺四乙酸 6 毫克， 维生素 B112 微克， 维 生素 B121.5 微克， 人尿 2 毫升， 次氯酸钠消毒后的纯净海水 1000 毫升。 0042 15) 一种青岛大扁藻培养方法， 。

36、具体步骤如下 ： 0043 培养容器为圆柱体聚乙烯水塔， 容积3.0立方米， 高密度聚乙烯材料制成(市场有 售 )， 无色或白色， 有较好的透光性， 以利藻类进行光合作用， 水塔为一体式构造， 壁厚 6 毫 米， 具有很大的强度和坚固性。水塔顶部有一圆形盖子， 上有旋丝， 可旋转而密封。水塔底 部是一角铁焊接成的底座， 高 50 厘米。水塔顶部盖子直径 40 厘米， 盖子打上 2 个孔， 一个 孔插入充气管， 另一个孔插入排气管， 充气管和排气管都是玻璃管， 内径 10 毫米。将反应 器洗刷干净， 后用蒸馏水润洗 3 遍， 装入权利要求 1 所述的培养基 2000 升， 充气混合 5 分 钟，。

37、 选择生命力旺盛、 无污染的青岛大扁藻接种， 接种密度 2104cell/mL ； 盖子上插入两根 干净玻璃管， 一根较长， 65 厘米， 顶端露出盖子 12 厘米， 下端通过料管与散气石连接， 用以 充气 ( 散气石的作用是形成很小的气泡， 避免大气泡或翻滚的波浪打碎藻细胞 ) ； 另一根较 短， 30厘米， 两端露出盖子即可， 用以排气 ； 两根玻璃管同样粗细， 内径10毫米 ； 用干净的透 明胶带将两根玻璃管固定 ； 长的玻璃管上端用料管与充气泵相连， 充入混合气体， 混合气体 成分和体积比例是空气纯二氧化碳臭氧氨气 92 6 1 1 ； 连续充气， 说 明 书 CN 103960118。

38、 A 8 6/6 页 9 充气量不宜太大， 以藻细胞浮起不下沉即可 ； 室外培养， 太阳光照射， 最佳温度 252， 最 佳光照强度 3000-10000Lux ； 培养的前 5 天， 水塔上方搭建一简易棚， 上放置帘子遮挡光线， 使光照强度维持在 1500-2800Lux， 避免强烈阳光对细胞造成的光伤害， 第 6 天撤掉帘子， 较 强的光照有利于细胞的生长繁殖和高不饱和脂肪酸的合成 ； 培养至第 7 天， 停止充气， 拿开 盖子， 补充新鲜培养基100升， 盖上盖子， 充气， 继续培养， 至第9天， 青岛大扁藻密度增加至 150104cell/mL， 停止培养， 从底部的水龙头放出藻液， 。

39、将反应器洗刷干净后， 加入 0.2 过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒 2 小时， 再用蒸馏水润洗一遍， 后进入下一轮培养 ； 0044 优选的， 将培养容器洗刷干净后， 不采用 “加入 0.2过氧乙酸消毒溶液浸泡消毒 2 小时” 的消毒方式， 而采用 “， 加入中药消毒液消毒 30 分钟， 后进入下一轮培养 ； 所述中 药消毒液由以下重量比的物质组成 ： 每 100 份 85乙醇中加入以下重量份的中药材 ： 板蓝 根 30 50 份、 柴胡 15 25 份、 薄荷 15 25 份、 栀子 5 15 份、 艾叶 5 15 份， 中药消 毒液制作方法 ： 将新鲜板蓝根、 柴胡、 薄荷叶、 艾叶、 山栀果切。

40、碎， 于 60-70下烘干， 再用中 药材粉碎机分别粉碎至 70 目备用， 用托盘天平分别称取烘干并粉碎的板蓝根 120 克， 柴胡 60 克， 薄荷叶 60 克， 艾叶 30 克， 山栀果 30 克， 置于三角烧瓶中充分混合后， 加入 1000 毫升 85乙醇， 浸泡48小时， 200筛绢过滤， 将清液静置沉淀36小时， 撇去液面漂浮物， 取中上层 的清液， 即为复方中药消毒液， 密封于黑色试剂瓶中， 贴上标签， 置于 4冰箱备用。 ” ， 采用 重要消毒没有化学物质残留， 对藻类的生长更加有益。 0045 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用紫外灯消毒， 消毒 10。

41、-20 分钟 ； 0046 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压氮气喷射消毒， 消毒 5-10 分钟 ； 0047 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后进行消毒， 使用高压二氧化碳喷射消 毒， 消毒 5-6 分钟 ； 0048 优选地， 对选用的所述的反应器， 洗刷干净后分两个阶段消毒， 先使用高压氮气喷 射消毒， 消毒 2-3 分钟 ； 使用高压二氧化碳喷射消毒， 消毒 2-3 分钟 ； 消毒完毕后再进行藻 类培养。 0049 最后应说明的是 ： 以上实施例仅用以说明本发明的技术方案， 而非对其限制 ； 尽 管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明， 本领域的普通技术人员应当理解 ： 其依然 可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改， 或者对其中部分技术特征进行等同替换 ； 而这些修改或者替换， 并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范 围。 说 明 书 CN 103960118 A 9 1/1 页 10 图 1 说 明 书 附 图 CN 103960118 A 10 。