一种养心安神的中药组合物及其制备方法和检测方法本发明为分案申请，原案申请号为200710179528.x，原案申请日为2007年
12月14日，原案名称为一种养心安神的中药组合物及其制备方法和质量控制方
法。
技术领域
本发明涉及一种养心安神的中药组和物及其制备方法和质量控制方法，属于中药技术领
域。
背景技术
失眠是指睡眠困难、早醒或醒后再难入睡，严重者彻夜难眠，使人心烦意乱、疲乏无力，
甚至导致头痛多梦、记忆力减退等症状。失眠做为顽固性疾病，一般需要长期服药，但长期
服用一些西药如巴比妥类、苯二氮卓类会产生严重的依赖性。同时一些养心安神中成药长期
服用，会对人体带来危害，例如长期服用天王补心丹、朱砂安神丸、安宫牛黄丸等，会因处
方中所含朱砂蓄积而出现慢性汞中毒，同时朱砂能造成胎儿畸形，孕妇不能服用。还要注意
配伍禁忌，朱砂与含甲基结构的药物(如茶碱、心得安等)易生成甲基汞，造成汞中毒；朱
砂与溴化物、碘化物合用，可生成具有毒性的溴化汞或碘化汞沉淀，导致药源性肠炎。而另
外一些相关中药则存在质量控制不科学，疗效不稳定的情况。
发明内容
本发明目的在于提供一种养心安神的中药组合物；
本发明目的还在于提供一种养心安神的中药组合物的制备方法；
本发明目的还在于提供一种养心安神的中药组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的：
本发明所述的养心安神的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：
珍珠层粉100-200重量份、灵芝500-800重量份、甘草100-200重量份；
本发明所述的养心安神的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：
珍珠层粉100重量份、灵芝800重量份、甘草100重量份；
本发明所述的养心安神的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：
珍珠层粉200重量份、灵芝500重量份、甘草200重量份；
本发明所述的养心安神的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：
珍珠层粉150重量份、灵芝600重量份、甘草150重量份；
本发明所述的养心安神的中药组合物是由如下重量比的原料药制成的：
珍珠层粉150重量份、赤芝600重量份、甘草150重量份、刺五加100重量份。
本发明所述的中药组合物的制备方法为：
以上药味，除珍珠层粉外加水提取二次，第1次加12倍量水，提取3小时，滤过，药渣加
10倍量水，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，静置，取上清液，浓缩至相对密度为1.28～
1.30(70～80℃)的清膏；取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，得细粉，细粉与
上述清膏混匀，加入辅料制成本领域各种常规制剂，如：颗粒剂、胶囊剂、片剂、合剂，即
得；
本发明所述的中药组合物的片制备方法为：
以上药味，除珍珠层粉外的药味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤
过，药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，静置，取上清液，浓缩至相对
密度为1.28～1.30(70～80℃)的清膏；取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，
得细粉，细粉与上述清膏混匀，加入25％淀粉制粒、干燥，加入0.5％硬脂酸镁压片，包薄膜
衣，包衣机进风温度为40℃，喷液速度为120g/min，包衣锅转速开始时选用8转/分的速度，
随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到转速为40转/分；喷液结束后，
用60℃热风干燥25min；即得。
本发明所述的中药组合物的质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或
几种：
【鉴别】：
取本发明制剂相当于生药材5.0-10.0g，置锥形瓶中，加水30-70ml，超声10-30分钟(功
率300W，频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以5-20％
乙醇溶液80-120ml洗脱，弃去洗脱液，然后加60-80％甲醇溶液30-70ml洗脱，收集洗脱液，
水浴蒸干，残渣加正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次10-30ml，第二、三
次每次5-15ml，合并氨试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取1-3次，每次10-30ml，合并
正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1.0g，同法
制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两
种溶液各10-30μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲
烷一甲醇-水(10-15∶5-10∶1-3)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸
乙醇溶液，105℃加热5-15分钟，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，
显相同颜色的斑点；
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材10.0-20.0g，精密称取1.0-3.0g，置
10ml具塞离心管中，加蒸馏水3-10ml，振摇溶解，离心5-15分钟，静置，弃去上层溶液，
然后再加入3-8ml蒸馏水，如法操作2-5次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶
液(1→2ml)5-15ml，待沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得；
测定法精密吸取供试品溶液15-40ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸
钾钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适
量，用0.05mol/L的乙二胺四醋酸二钠滴定液滴定，至溶液由红色变为蓝色；每1ml0.05mol/L
的乙二胺四醋酸二钠滴定液相当于2.004mg的Ca；
本发明制剂相当于生药材0.7g，含珍珠层粉以Ca计，不得少于40-80mg。
本发明所述的中药组合物的质量控制方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或
几种：
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液；照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得；
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色；每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca；
本发明制剂相当于生药材0.7g，含珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
本发明组方科学，精选了安全无毒的可药食两用的中药材作为原料药，服用更加安全；
处方中各药味的用量配比经过药理实验进行了优化筛选，并且结合处方对该中药组合物的制
备工艺进行了优化筛选，此外还对处方的质量进行了多层次的控制，对该控制方法进行了验
证，使本发明表现出稳定的较高疗效。
具体实施方式
下述实验例和实施例进一步说明但不下限于本发明
实验例1.本发明中药组合物制备工艺条件及技术参数的优选实验
(一)、工艺研究
1、提取工艺考察：
甘草药材常用的提取方法有水提法、醇提法等，经实验得知在水提法中影响提取效率的
主要因素是溶剂体积，其次是提取时间和溶液的pH值。灵芝的提取方法有醇提法和水提法，
其中，以水提法多糖含量最高，比70％乙醇提取的多糖含量高5倍左右。据此进行实验：分别
拟定18倍、22倍和26倍水进行提取，以确定适宜的溶剂体积。此外，药材的粉碎度对提取效
率也有一定的影响，但鉴于大生产提取常采用饮片进行直接提取，因此对药材粉碎度不另作
考察。
提取方法：按实施例4处方比例称取灵芝、甘草、刺五加原料药材，混合均匀，加入规定
量的去离子水，煎煮二次，每次3小时，合并煎液滤过，放置，取上清液，浓缩干燥，根据干
膏的量计算收率。结果见表1：
表1提取工艺考察
结果表明：第二组与第三组的出膏率几乎相当，第二组更省时、更节约，因此采用22倍
量溶剂，分两次提取，第1次加水12倍量，提取3小时，滤过，药渣加水10倍量，提取3小时，
滤过，合并滤液，备用。因此实际生产采用22倍量溶剂进行提取。
2、浓缩工艺考察：
该片剂的制粒工艺采用将浸膏浓缩到一定的相对密度后，直接加入珍珠层粉、淀粉进行
制粒，因此需要考察提取液浓缩的相对密度。按实施例4处方量配置甘草、灵芝、刺五加药材，
分三组按制法项进行试验，加水量均为22倍量，将提取液分别浓缩至以下相对密度，以湿法
制粒难易度为指标，确定浓缩后的相对密度。结果见表2：
表2相对密度的考察
根据以上试验结果最终选择相对密度为1.28～1.30(70℃-80℃)。
3、成型工艺研究：
因为珍珠层粉是直接入药的原料，所以珍珠层粉的粒度对于制剂的质量有很大的影响。
据此进行实验设计，选择100目、200目、300目的珍珠层粉进行成型工艺的研究。
取不同目数的珍珠层粉50g，分别加入淀粉21.5g，混合均匀，加入75g浸膏，制备成颗粒，
压片，测定崩解时限。结果见表3：
表3成型工艺的考察
结果表明：采用200目以上粉碎细度的珍珠层粉，所压片剂外观为土黄色，光滑，色泽均
匀无斑点，微甜，颗粒感少，崩解迅速。故选用200目以上珍珠层粉制备片剂。
4、硬脂酸镁用量的选择：
筛选珍珠层粉粒度的过程中知颗粒的流动性差，造成片重差异大，需加入润滑剂，根据
常规用量，分别加入0.3％、0.5％、1.0％的硬脂酸镁，以压片的难易、片重差异和崩解时
限为指标考察硬脂酸镁的用量。结果见表4：
表4硬脂酸镁用量的考察
结果表明：当硬脂酸镁用量为0.5％时，颗粒流动性能够达到压片的要求，制成的片面光
滑，崩解时限合格。故选硬脂酸镁用量0.5％用于生产。
5、包衣工艺研究：
为了保护本品不受潮湿、氧化等作用的影响，提高药品的稳定性，拟对本品包薄膜衣。
因为包薄膜衣生产周期短，操作简便，干燥速度快，药物受湿热影响小，有利于提高产品质
量。
5.1试验材料：胃溶型包衣粉，95％乙醇，纯化水。
5.2包衣基本处方：胃溶型包衣粉、95％乙醇、纯化水、本发明片剂素片。
5.3包衣液配制：
将胃溶型包衣粉准确称量后，加入95％乙醇适量，搅拌半小时，加纯化水配成乙醇浓度
为80％，包衣液浓度为8％的包衣溶液，继续搅拌摇匀，待包衣液完全溶解，即得。
5.4包衣过程操作参数的筛选
片面平整、细腻的关键在于整个过程中要掌握锅温、喷量、转速三者之间的关系，这是
薄膜包衣操作过程中的重中之重。若温度过高，则干燥太快，成膜容易粗糙，片色不均；若
温度过低，或喷速过快，则会使锅内湿度过度高，很快就会出现片的粘连等现象。为了解决
上述问题，下面对影响包衣的几个关键工艺参数：进风温度，喷枪的喷液速度和包衣锅转速
进行优化组合。以片子的外观、片重差异、崩解时限为指标。共设计了三种条件，对其包衣
后成品外观、片重差异和崩解时限进行考察组合见表5：
表5包衣条件组合表
根据上述表5的三种组合进行试验，包衣条件筛选结果见下表6：
表6包衣条件考察结果
实验表明：包衣机进风温度为40℃，喷液速度为120g/min，包衣锅转速开始时选用8转/
分的速度，随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到转速为40转/分。喷
液结束后，用热风干燥25分钟，各项指标均较合格。
实验例2.本发明药物制剂中对甘草的薄层鉴别
(1)供试品溶液制备时回流提取时间的考察
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声滤过，滤液过大孔吸附
树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％
甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提
取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取
2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘
草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)
试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层
板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5
％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视供试品和对照品的显色效果，结果见下表：
表7不同提取时间的显色效果
从上表可以看出，回流提取20min，提取的供试品溶液和对照品溶液均符合试验要求。
(2)上述鉴别方法中甘草的薄层鉴别展开剂配比的优选：
分别吸取供试品溶液、对照品溶液各20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水分别为23∶5∶1、18∶6∶1、13∶7∶2、8∶8∶2的
上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光
下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；
表8.甘草的鉴别方法中展开剂配比优选实验结果表
从上表可以看出展开剂配比为13∶7∶2时，在薄层板上展开效果好，主斑点清晰，无拖
尾，与对照品的斑点位置及颜色相同，适合试验要求。
(3)上述甘草鉴别方法中样品溶液点样量的优选：
吸取供试品溶液2μl、10μl、20μl、30μl点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲
醇-水(13∶7∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分
钟，日光下检视，观察薄层板上供试品主斑点显色的效果，结果见下表：
表9.甘草的鉴别方法中样品溶液点样量优选实验结果表
从上表可以看出供试品点样量在20μl时，在薄层板上显色效果好，适合试验要求。
(4)阴性对照试验
取缺甘草的阴性样品，照上述甘草的鉴别方法中供试品样品及溶液制备方法制备阴性对
照溶液，展开后在对照品溶液对应位置上没有出现相应斑点，说明所选取的鉴别实验专属性
强。
实验例3.含量测定方法的筛选
为提高制剂的质量标准，我们对处方中的君药珍珠层粉的含量进行测定，以提高其质量
的可控性。
1.试剂及试药
梅特勒电子分析天平 盐酸：AR 北京化工厂
氢氧化钠：AR 北京化工厂 碳酸钙：AR 北京化工厂
2.方法的建立
供试品溶液的制备：取本发明片剂20片，除去薄膜衣，研细，精密称取1.5g，置10ml
具塞离心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入
5ml蒸馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，
待沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
对照品溶液的制备：取碳酸钙约0.5g，精密称定，置100ml容量瓶中，加稀盐酸至碳
酸钙全部溶解，用新沸过的蒸馏水稀释至刻度，即得。
2.1阴性对照试验
取缺珍珠层粉药材之外的其它药材按照工艺制备成阴性样品，再按照供试品溶液的制备
方法制备成阴性样品溶液，同法测定。结果阴性不干扰含量测定。
2.2精密度试验
取供试品溶液，平行测定5次，结果见表10：
表10精密度试验结果
结果表明：取同一份供试品溶液，连续测定5份，其平均体积为13.9ml，计算RSD值为
0.65％，该方法精密度符合要求。
2.3稳定性试验
取上述供试品溶液6份，分别于0、1、2、4、6、8小时测定，考察方法稳定性，结果见
表11：
表11.稳定性试验结果
结果表明：取同一份供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8小时滴定，其平均体积为
13.8ml，计算RSD值为0.82％，该供试品溶液在8小时内基本稳定。
2.4重现性试验
取同一批号样品共5份，按正文方法制备供试品溶液并进行测定，计算含量，结果见表
12：
表12.重现性试验结果
经计算重现性试验RSD值为1.39％，符合要求。
2.5加样回收率试验
精密称取已知含量的样品适量，再精密加入已知纯度的碳酸钙细粉，混合均匀，按正文
方法进行测定，计算回收率。结果见表13：
表13.加样回收率测定结果
取已知含量样品分别进行0.5倍、1倍和1.5倍的加样回收率测定，回收率在95.34～
100.23％之间，其平均回收率为98.01％，符合要求。
表14.三批样品的含量测定结果见下表：
由以上方法学考查结果可以看出，本发明药物所采用的含量测定方法其线性关系、稳定
性、精密度、重现性等均良好，能够有效控制本发明药物质量。
暂定本品每片含珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实验例4.药效学实验
1材料
1.1药品：
本发明中药组合物I，根据实施例3方法制成；
本发明中药组合物II，根据实施例4方法制成；
珍合灵片上海雷允上药业有限公司国药准字Z31020265
1.2动物
昆明种小鼠、大鼠，以上动物雌雄兼用，体重见后述，由中国中医研究院实验动物中心
提供。
1.3仪器
WT/1001型电子天平，江苏万得天平仪器厂。
WFZ800--D3B型紫外可见分光光度计，北京瑞利分析仪器公司。
FJ一2021型放射免疫计数器，国营二六二厂。
LDZ4-O8离心机：北京医用离心机厂。
KENZ-ECG心电图机，日本可耐公司。
2.方法与结果
2.1对小鼠常压耐缺氧试验
取昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重(20±2)g，随机分为4组，分别灌胃给药，生理盐水
组、小本发明中药组合物组、珍合灵片组，给药容积皆为0.2mL/10g，剂量分别相当于人用
量的10倍，给药30Min后，将小鼠分别放入相同容积(250mL)密闭广口瓶内，瓶内分别装钠石
灰20g，钠石灰上垫有滤纸，瓶口涂凡士林，放入小鼠后将瓶密闭开始计时，仔细观察到小鼠
死亡，记录死亡时间。试验结果见表15。
表15.对小鼠常压耐缺氧的影响(X±S)
注：与珍合灵片组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与生理盐水组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
试验表明，于临床等效量下，本发明中药组合物较珍合灵片显著延长小鼠缺氧死亡时间，
本发明中药组合物II优于本发明中药组合物I。
2.2抗心肌缺血性试验
取大鼠40只，雌雄各半，体重(250±20)g，随机分组：生理盐水组、本发明中药组合物、
珍合灵片，在清醒状态下固定，记录II导联心电图，药前测定正常的II导联电图，连续给药7
天，第8天给药后30min，每只大鼠用乌拉坦麻醉，并测定大鼠心电图，对照此时大鼠的心电
图，与药前变化不大者为大鼠正常的心电图，称后舌下静脉注射垂体后叶素0.2u/kg，于10s
注射完毕，记录注射后1min、5min的心电图，判断大鼠心脏缺血情况。心电图判定标准：阳
性判定标准(心肌明显缺血)：ST段水平偏移，向上或向下偏移＞0.mV；T波高耸，超过同导联R
波的1/2；T波高耸伴有ST段移位。阴性判定标准(心肌缺血不明显)：ST段斜形偏移，或水平
偏移＜0.1mV；T波低乎或双向、倒置＜0.1mV。以ST段偏移基线的高度为指标。经每组ST段偏
移基线高度的总和(∑ST)的mV数均值作为心肌缺血损伤程度的指标。结果见表16。
表16抗心肌缺血性试验
注：经X2检验，与珍合灵片组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与生理盐水组比较，*P＜0.05，
**P＜0.01抗心肌缺血试验表明本发明中药组合物能明显减少大鼠心肌缺血动物数，显著改
善大鼠心肌缺血的程度，本发明中药组合物II优于本发明中药组合物I。
2.3镇静安神作用
取昆明种小鼠60只，体重18-22g，雌雄兼用，随机分为4组，每组15只。生理盐水对
照组(对照组)：予生理盐水0.2ml/10g灌胃，每日1次，共3天。本发明中药组合物制剂I
组、本发明中药组合物制剂II组：取制备好的本发明颗粒样品液0.2ml/10g灌胃(相当于人
用量的9倍)，每日1次，共3天。各组最末次灌胃后1h，将小鼠放入自发活动仪中适应3分
钟后，开始测定自发活动次数及睡眠超过2小时的睡眠时间。结果见下表：
表17.对小鼠自发活动次数及睡眠时间的影响
组别
剂量(g/kg)
自发活动次数
睡眠时间(min)
空白对照组
-
168.6±64.2
41.0±15.6
珍合灵片
0.5
127.47±27.76*
54.4±32.4*
本发明中药组合物I
0.5
103.5±56.3*
64.4±24.6*※
本发明中药组合物II
0.5
81.8±35.3**
86.4±23.7**※※
注：与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，与珍合灵片比较※P＜0.05，※※P＜0.01
本发明药物组合物与玉珍合灵片相比镇静安神作用显著，且本发明中药组合物II优于本
发明中药组合物I。
2.4对小鼠学习记忆的影响
对小鼠学习记忆影响取小鼠50只，随机分为5组，本发明中药组合物I、II、珍合灵片
组按下表剂量ig相应药物溶液，对照组给予等体积水，每日1次，连续7d末次给药后50min，
除对照组外，给小鼠ip樟柳碱10mg/kg，给药1次，10min后全部动物做跳台和被动回避反
应实验。实验时将动物放置在跳台上，动物跳至电网上时即受到电击，动物的正常反应是跳回
跳台上.如此训练一次后，将小鼠轻放于平台上，记录小鼠在台上停留的潜伏期(SDL)，待小
鼠从台上跳下，四肢均接触电网时，立即给予电刺激，直至小鼠跳回平台上，记录小鼠从台
上跳下受电刺激后逃避至台上的潜伏期(EL)，以SDL和EL作为判断小鼠学习能力的指标，
SDL越小，EL越大，就说明小鼠的学习获得越差，结果见表18。
表18各组的实验测量值
与樟柳碱组比较※P＜0.05，※※P＜0.01；与珍合灵片组比较*P＜0.05，**P＜0.01
本发明药物组合物与珍合灵片相比有增强学习记忆作用，且本发明中药组合物II优于本
发明中药组合物I。
下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果
实施例1.
珍珠层粉100g、灵芝800g、甘草100g
以上三味，除珍珠层粉外的两味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤过，
药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对密度为
1.28～1.30(70～80℃)的清膏。取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，得细粉，
细粉与上述清膏混匀，加入辅料制成本领域各种常规制剂，如：颗粒剂、胶囊剂、片剂、软
胶囊、合剂，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液；照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品制剂相当于生药材0.7g，珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实施例2.胶囊剂
珍珠层粉200g、灵芝500g、甘草200g
以上三味，除珍珠层粉外的两味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤过，
药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对密度为
1.28～1.30(70～80℃)的清膏。取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，得细粉，
细粉与上述清膏混匀，加入淀粉100g制粒、装胶囊，得胶囊1000粒，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液；另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视；
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品制剂相当于生药材0.7g，含珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实施例3.颗粒剂
珍珠层粉150g、灵芝600g、甘草150g
以上三味，除珍珠层粉外的两味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤过，
药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对密度为
1.28～1.30(70～80℃)的清膏。取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，得细粉，
细粉与上述清膏混匀，加入糖粉300g制粒，得颗粒700g，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品制剂相当于生药材0.7g，珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实施例4.颗粒剂
珍珠层粉150g、赤芝600g、甘草150g、刺五加100g
以上四味，除珍珠层粉外的三味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤过，
药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对密度为
1.28～1.30(70～80℃)的清膏。取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，得细粉，
细粉与上述清膏混匀，加入糖粉360g制粒，得颗粒800g，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品制剂相当于生药材0.7g，珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实施例5.片剂
珍珠层粉150g、灵芝600g、甘草150g
以上三味，除珍珠层粉外的两味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤
过，药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对
密度为1.28～1.30(70～80℃)的清膏。取珍珠层粉粉碎，过筛，筛孔内径为75μm±4.1μm，
得细粉，细粉与上述清膏混匀，加入25％淀粉制粒、干燥，加入0.5％硬脂酸镁压片，包薄膜
衣，包衣机进风温度为40℃，喷液速度为120g/min，包衣锅转速开始时选用8转/分的速度，
随着薄膜衣层在素片表面的不断形成，再逐步增加转速，直到转速为40转/分。喷液结束后，
用60℃热风干燥25min，得片剂1000片，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品每片含珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。
实施例7.合剂
珍珠层粉150g、灵芝600g、甘草150g
以上三味，除珍珠层粉外的两味加水提取二次，第1次加水12倍量水，提取3小时，滤
过，药渣加水10倍量，提取3小时，滤过，合并滤液，滤过，放置，取上清液，浓缩至相对
密度为1.10～1.20(70～80℃)浓缩液，珍珠层粉水飞成细粉，加入浓缩液中，加苯甲酸钠、
羧甲基纤维素纳各5.0g，混匀，制成约1000ml，即得。
【鉴别】
取本发明制剂相当于生药材8.0g，置锥形瓶中，加水50ml，超声20分钟(功率300W，
频率50kHz)，滤过，滤液过大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm，D101)，以10％乙醇溶液
100ml洗脱，弃去洗脱液，然后加70％甲醇溶液50ml洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，残渣加
正丁醇20ml使溶解，用氨试液振摇提取三次，第一次20ml，第二、三次每次10ml，合并氨
试液，加盐酸酸化后以正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇
2ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1.0g，同法制成对照药材溶液。照薄层色
谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μl，分别点于同一
以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)的下层溶
液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，105℃加热10分钟，日光下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】
供试品溶液的制备取本发明制剂相当于生药材16.0g，精密称取1.5g，置10ml具塞离
心管中，加蒸馏水5ml，振摇溶解，离心10分钟，静置，弃去上层溶液，然后再加入5ml蒸
馏水，如法操作3次；将沉淀移入250ml容量瓶中，分次加入盐酸溶液(1→2ml)10ml，待
沉淀全部溶解后，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
测定法精密吸取供试品溶液25ml，置于250ml锥形瓶中，加水20ml，加5％酒石酸钾
钠和三乙醇胺溶液(1→2ml)各5ml，摇匀，再加入20％氢氧化钠溶液10ml与钙指示液适量，
用乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)滴定，至溶液由红色变为蓝色。每1ml的乙二胺四
醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于2.004mg的Ca。
本品制剂相当于生药材0.7g，珍珠层粉以Ca计，不得少于60mg。