多孔过滤板及其制备方法 本发明涉及一种新型的多孔过滤板，优选为96-孔或384-孔的规格，其由二个单个部分构成，这二部分牢固地和紧密地互相连接。第一部分为具有过滤小板的试样接收部分，第二部分在进行了过滤后起到作为流出口部分的作用。根据本发明的板特别适合于核酸技术中的高渗透应用以及适合于蛋白质的净化和分析。
最近几年，核酸的分离和净化过程中的自动化程度呈现出不断增长的趋势。原因基本在于，在所有的现代生物技术的研究领域中越来越多地运用分子生物学的方法。特别地还有，通过在全球基因组计划(例如人类基因组计划)内的DNA-排序，原浆-DNA的分离和净化的自动化已经是一个强制性的先决条件。在此，研发自动化方案的必要性不仅仅局限于原浆-DNA分离领域。而且从不同的起始材料和量的基因地DNA的自动分离以及RNA的分离具有越来越重要的意义。这包括分子基础研究的所有领域，并且还包括越来越多的诊断学领域。核酸的自动化分离方法例如通过具有设置有过滤材料的微测试板得以实现。在此，例如应用可得到的所谓的96-孔或384-孔规格的微测试板。
然而，现在可得到的具有过滤材料的96-孔微测试板对于高渗透应用是太昂贵了。这是由于用来将过滤材料置入微测试板的较复杂的制备方法导致的(US-A4,948,442)。此外，迄今为止还没有已知的具有过滤材料的微测试板在应用于核酸的分离和净化时实现足够高交叉污染的保护。原因在于流向多孔过滤板的底部的短得太多的流出口接管。另一个问题是反应的空穴体积较小，此在如EP-A1 0,098,534中有述。现有技术已知的384-孔板也只允许各自的分析方法中较小体积的渗透，这一体积约为50-80μl。然而对于进行分析，特别是用来自动化分析，和对于联合使用实验室机器人，在许多情况下允许大体积的渗透的测试板是必需的。
因此，本发明的任务在于，制备一种多孔过滤板，其提供样品的交叉污染的保护，制备成本低，并可在多方面使用，如在核酸技术中和在蛋白质技术中的高渗透应用。
新型的多孔过滤板由二个紧密连接的单个部分构成。板的上面部分定义为试样接收部分1，板的下面部分为具有过滤器3的流出口部分2。该流出口部分2包括对于每种孔的根据本发明所形成的流出口接管4，通过该接管滤出物流入接收容器，例如深-孔-板(Deep-Well-Platten)以进行进一步的测定。流出口部分基本上就是通过相应构成的流出口接管4为特征的，根据优选的96或384规格板不同而定。
这个流出口接管具有15-25°的内倾角，优选为20°，并且在与上部连接的位置各具有约1,0-1,5mm，优选为1,0mm的用来稳定滤器器具3的垫板间隔(紧密间隔)5。它的长度为约5-15mm。96-孔板具有根据本发明的具有10-15mm长的流出口接管，它们优选为12mm的长度。384-孔板具有根据本发明的具有5-8mm长的流出口接管，优选为5-6mm的长度。过滤板也可以连接到流出口容器。
所以，流出口接管通常是圆的，在另一个实施方案中它们可在流出口末端具有至少8个孔的完全星状的构成。
内倾角为15-25°，优选为20°，特别的流出口设计使得过滤了的试样毫无问题地和完全地流向接收容器，例如深-孔板(死体积最小化，几乎为0)成为可能。通过对于96-孔板具有的优选为12mm的流出口接管的长度和对于384-孔板具有的优选为5-6mm的长度(已知的微过滤板具有9mm(96孔)和＜5mm(384孔)的最大长度的流出口)可避免问题严重的交叉污染。所以根据本发明的多孔过滤板也可应用于基于PCR的传染病诊断。
所以，不同于迄今为止已知的过滤板，流出口接管的加长导致了根据本发明的过滤板对于96孔板具有超过1ml的室体积的最大接收体积容量，对于384孔板约300μl，这就是说，可处理比迄今为止常用的更大的总的试样体积。所以这也导致了可重复性的结果。这特别地被视为本领域的专业人员所非常期望的应用384-孔板，它的渗透性可提高4-6倍。
本发明的主题还包括制备新型多孔过滤板的方法。多孔过滤板的二部分在一个特别的生产过程中通过液压挤压法互相牢固地连接在一起。挤压各自根据流出口接管的切口进行(96或384)。内挤压角用工具这样制成，即在挤压过程中过滤器具3，如过滤垫子置入上-1和下部2之间，相应过滤器的切口整齐地被冲压。该冲压好了的过滤器具与上部一起挤压入下部，放入下部的垫板间隔5上。通过液压压力，板的上部、过滤小板和板的下部牢固地和紧密地互相挤压在一起。
一种这样的根据本发明的挤压是可能的，因为新型的多孔过滤板的上部和下部用二个最大公差为1/1000mm的绝对精密的工具(热槽技术)制得，这二个精密工具是完全互相匹配的。二个板部分的挤压部分处的尖锐的切角使得在用本身的挤压工作过程中由过滤板构成的单个过滤器的冲压成型成为可能。挤压是直接进行的，这就是说，根据本发明不需要键槽(如由通常的现有技术已知的那样)，这意味着一个很大的技术优点。优选地以仔细精心调节了的压铸参数用压铸法制备多孔过滤板。根据本发明的过滤板由已知的材料构成，如聚苯乙烯或聚丙烯。所使用的压铸材料优选是高价的聚苯乙烯。因为只有应用完全合适的压铸件，挤压才能无密封滑动松动而进行。
以这样的最完美的方式解决了所有存在的问题。通过一个新的技术方法而制备板，该方法使得高效地和成本低廉地将过滤材料置入多孔过滤板中成为可能。此外，新型的多孔过滤板在它的结构计算尺寸上是这样构造的，即通过流出口接管的形状可消除迄今为止已知的交叉污染。板的外部尺寸(宽和长)和切口的设置(优选为8×12矩阵)相当于一个标准的微滴定板，在此，另一个优点在于反应空穴的体积提高到约1ml(96孔)或约300μl(384孔)。所以原则上用一块板可没有问题地实现核酸的自动化分离和净化的所有标准应用。此外，这种板也可毫无问题地用在蛋白质净化和分析中。
接着在下列的实施例中更清楚地解释本发明。
图1 96-孔装置的总图
图2a 单个装置部分的纵断图
图2b 过滤器薄膜的纵断图
图3 流出口接管的横断面
图例说明表
1 试样接收部分(上部)
2 流出口部分(下部)
3 过滤器具
4 流出口接管
5 垫板间隔
6 流出口末端(圆的或星状的)