从甘蔗梢中提取氨基酸的方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102260181 A (43)申请公布日 2011.11.30 CN 102260181 A *CN102260181A* (21)申请号 201110124263.X (22)申请日 2011.05.13 C07C 227/40(2006.01) C07C 229/36(2006.01) C07D 233/64(2006.01) C07C 229/26(2006.01) C07C 277/08(2006.01) C07C 279/14(2006.01) (71)申请人 广西大学 地址 530004 广西壮族自治区南宁市大学路 100 号 (72)发明人 孙卫东 张。

2、业辉 朱蓉艳 牛丽 李军委 谢伟 张娟 (74)专利代理机构 广西南宁公平专利事务所有 限责任公司 45104 代理人 翁建华 (54) 发明名称 从甘蔗梢中提取氨基酸的方法 (57) 摘要 本发明公开了一种从甘蔗梢中提取氨基酸的 方法， 将压榨砍割后的蔗梢压出汁， 用真空抽滤除 去汁中的泥土、 蔗渣， 用活性炭对蔗梢汁吸附脱色 后， 再用活性炭动态吸附酪氨酸和苯丙氨酸， 用氨 水和乙醇动态洗脱， 收集洗脱液， 经浓缩结晶， 得 粗品酪氨酸和苯丙氨酸 ； 再用离子交换吸附法分 离出组氨酸、 赖氨酸和精氨酸。 本发明先用活性炭 吸附、 后用离子交换树脂分离的方法， 不仅提高了 原料的利用率、 降。

3、低了对设备的要求， 提高了工作 效率， 而且较好的解决了单纯离子交换时苯丙氨 酸、 酪氨酸和组氨酸之间的交叉重叠现象。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 5 页 CN 102260185 A1/1 页 2 1. 一种从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是工艺步骤为 ： 步骤 1 对甘蔗梢压榨出的甘蔗梢汁， 首先用真空抽滤除去汁中的泥土、 蔗渣， 再用活性 炭静态吸附脱色， 脱色时将原汁稀释 50 倍， pH 为 2 5、 活性炭用量 2 6g/100mL、 吸附时 间为 50 150min、 加热温度为 50 90 。

4、； 步骤2使用活性炭动态吸附蔗梢汁中的酪氨酸和苯丙氨酸， pH为56 ； 再用氨水和乙 醇从活性炭中动态洗脱酪氨酸和苯丙氨酸， 氨水的浓度为 0.5 2.0mol/L， 乙醇的浓度为 30 90 ； 步骤 3 用离子交换吸附法分离碱性氨基酸组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸， 洗脱剂为以下五 种中的一种或两种 ： NH4Cl、 比例为 1 1 的 NH4Cl-NH3H2O、 NH3H2O、 比例为 1 1 的 NH4COOH-NH3H2O 和 NH4COOH， 流速为 1 3mL/min。 2. 如权利要求 1 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是步骤 1 所述的活性炭 静态吸附脱色的 pH 。

5、为 4， 加热温度为 80， 吸附时间为 75min， 活性炭用量为 4g/100mL。 3. 如权利要求 1 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是步骤 2 所述的活性炭 动态吸附酪氨酸和苯丙氨酸时， 流速控制在 1 1.5mL/min。 4. 如权利要求 1 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是步骤 2 所述的从活性 炭中动态洗脱氨基酸时， 先用蒸馏水洗柱， 控制流速在 2 3mL/min， 至无茚三酮反应为止 ； 然后用氨水洗脱， 控制流速在 2 3mL/min， 分步收集， 配合 Pauly 显色反应检查， 合并酪氨 酸显浅红色部分， 得到酪氨酸洗脱液 ； 再改用 60乙。

6、醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 得到苯 丙氨酸洗脱液。 5. 如权利要求 1 或 2 或 3 或 4 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是本发明 的活性炭要经过预处理， 用 0.5mol/L 的 NaOH 溶液、 0.5mol/L HCL 溶液、 自来水与蒸馏水按 顺序处理， 洗净浸泡， 待其 pH 值变为中性时将其烘干。 6. 如权利要求 1 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是步骤 3 所述的分离 组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸时， 利用离子交换法从蔗梢汁溶液中提取的最佳上柱及洗脱流速 为 1mL/min ； 若需制备上述三种碱性氨基酸时， 可分别用 0.05mol/L、 0.。

7、1mol/L、 2mol/L 的 NH3H2O 洗脱 ： 先用 0.05mol/L 氨水以流速为 0.8-1.2mL/min 洗脱， 待流出约 20mL 实体积 后， 开始分步收集， 每管 10mL， 共收集洗脱液 86 管。再用 0.1mol/L 氨水洗脱， 洗脱至无茚 三酮反应， 最后用 2mol/L 氨水洗脱， 洗至茚三酮反应检测基本上无显色为止， 对收集洗脱 液进行层析， 层析 2h 后， 利用 pauly 显色试剂检测和坂口试剂检测确定收集液组成， 再进 行结晶及重结晶得到精制的组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸 ； 若制备单一的精氨酸， 采用NH4COOH和 NH4COOH-NH3H2O 。

8、结合使用， 首先用 0.2mol/L 的 NH4COOH-NH3H2O 洗脱组氨酸、 赖氨酸， 洗 至无茚三酮反应时， 用去离子水洗至无 COOH-， 再用 0.1mol/LNH3H2O 和 1mol/LNH3H2O 相 继洗脱， 得单一的精氨酸。 7. 如权利要求 1 所述的从甘蔗梢中提取氨基酸的方法， 其特征是本发明离子交换树脂 要经过预处理， 将 732 阳离子树脂放入烧杯中， 加入过量的蒸馏水浸泡 24h， 搅动树脂， 除去 悬浮的破碎树脂 ； 然后， 用 2mol/L 的 HCl 浸泡约 3h， 用蒸馏水洗至 pH5 6， 再用 2mol/L 的 NaOH 浸泡 3h， 用蒸馏水洗至。

9、 pH5 6， 最后用 2mol/L 的 HCl 作转型处理， 用蒸馏水洗至中 性。 权 利 要 求 书 CN 102260181 A CN 102260185 A1/5 页 3 从甘蔗梢中提取氨基酸的方法 技术领域 0001 本发明属一种从甘蔗梢中提取氨基酸的方法。 背景技术 0002 蔗梢是蔗茎生长点(蔗黄)所在部位， 在甘蔗生长发育过程中， 蔗茎的养料尽量提 供给生长点， 故它含有丰富的营养物质， 如蛋白质、 淀粉、 氨基酸、 维生素、 酶类及矿物质等。 蔗梢中氨基酸的含量是蔗茎中的约 5 倍左右。氨基酸是构成生物体蛋白质分子的基本单 位， 与生物的生命活动有着密切的关系。 它在机体内具。

10、有特殊的生理功能， 是生物体内不可 缺少的营养成分之一。 0003 氨基酸除具有众所周知的营养作用以外， 近年医药研究部门已确认某些氨基酸的 医疗价值， 如精氨酸、 谷氨酸作为肝昏迷抢救药物之一 ； 组氨酸用于治疗胃及十二指肠溃疡 和肝炎 ； 蛋氨酸用于治疗肝硬化和脂肪肝 ； 赖氨酸、 蛋氨酸大量用作强化食品， 促进儿童发 育 ； 天冬氨酰胺是治疗心脏病和高血压的良药等。 0004 广西甘蔗年产量超过 4400 万吨， 甘蔗蔗梢的量非常大， 但蔗梢对制糖工业几乎没 有用处， 每年被砍割下来的数百万吨蔗梢或被还田， 或做牲畜饲料， 对其加工利用的程度不 大， 没有发挥资源优势。如果能根据甘蔗蔗梢。

11、的成分， 对其做一些深加工方面的研究， 充分 开发利用其潜在价值， 对带动地方经济是大有益处的。 发明内容 0005 本发明要求解决的技术问题是提供一种能变废为宝、 充分利资源、 用甘蔗梢做原 料提取氨基酸的方法。 0006 本发明以如下技术方案解决上述技术问题 ： 0007 (1) 对甘蔗梢压榨出的甘蔗梢汁， 首先用真空抽滤除去汁中的泥土、 蔗渣， 再用活 性炭静态吸附脱色， 脱色时将原汁稀释 50 倍， pH 为 2 5， 活性炭用量 2 6g/100mL， 吸附 时间为 50 150min， 加热温度为 50 90 ； 0008 (2) 使用活性炭动态吸附蔗梢汁中的酪氨酸和苯丙氨酸， 活。

12、性炭的用量为 1 5g/100mL， pH 为 5 6 ； 再用氨水和乙醇从活性炭中动态洗脱酪氨酸和苯丙氨酸， 氨水的浓 度为 0.5 2.0mol/L， 乙醇的浓度为 30 90 ； 0009 (3)用离子交换吸附法分离碱性氨基酸(组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸)， 洗脱剂为以下 五种中的一种或两种 ： NH4Cl、 NH4Cl-NH3H2O(1 1)、 NH3H2O、 NH4COOH-NH3H2O(1 1)、 NH4COOH， 流速为 1 3mL/min。 0010 步骤 1 所述的活性炭静态吸附脱色的 pH 为 4， 加热温度为 80， 吸附时间为 75min， 活性炭用量为 4g/100m。

13、L。 0011 步骤 2 所述的活性炭动态吸附酪氨酸和苯丙氨酸时， 流速控制在 1 1.5mL/min。 0012 步骤 2 所述的从活性炭中动态洗脱氨基酸时， 先用蒸馏水洗柱， 控制流速在 2 3mL/min， 至无茚三酮反应为止 ； 然后用氨水洗脱， 控制流速约在 2 3mL/min， 分步收集， 配 说 明 书 CN 102260181 A CN 102260185 A2/5 页 4 合 Pauly 反应检查， 合并酪氨酸显浅红色部分， 得到酪氨酸洗脱液 ； 再改用 60乙醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 得到苯丙氨酸洗脱液。 0013 本发明的活性炭要经过预处理， 用 0.5mol/L 。

14、的 NaOH 溶液、 0.5mol/L HCL 溶液、 自 来水与蒸馏水按顺序处理， 洗净浸泡， 待其 pH 值变为中性时将其烘干。 0014 步骤 3 所述的分离碱性氨基酸时， 利用离子交换法从蔗梢汁溶液中提取三种碱性 氨基酸的最佳上柱及洗脱流速为 1mL/min ； 若需制备三种碱性氨基酸， 可分别用三种不同 浓度的 NH3H2O(0.05mol/L， 0.1mol/L， 2mol/L) 洗脱 ： 先用 0.05mol/L 氨水洗脱 ( 洗脱液 流速为约 1mL/min)， 待流出约 20mL 实体积后 ； 开始分步收集， 每管 10mL， 用 0.1mol/L 氨水 洗脱， 洗脱至无茚三。

15、酮反应， 再用 2mol/L 氨水洗脱， 洗至茚三酮反应检测基本上无显色为 止， 对收集洗脱液进行层析， 层析2h后， 利用pauly试剂检测和坂口试剂检测确定收集液组 成， 再进行结晶及重结晶得到精制的组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸。若制备单一的精氨酸， 采用 NH4COOH 和 NH4COOH-NH3H2O 结合使用， 首先用 0.2mol/L 的 NH4COOH-NH3H2O 洗脱组氨酸、 赖氨酸， 洗至无茚三酮反应时， 用去离子水洗至无 COOH-， 再用 0.1mol/LNH3H2O 和 1mol/L NH3H2O 相继洗脱， 得单一的精氨酸， 这样不仅可使组氨酸、 赖氨酸与精氨酸获得较。

16、好分离， 同时又节省洗脱剂且产品不含 NH4COOH， 较易纯化。 0015 本发明的离子交换树脂要经过预处理， 将 732 阳离子树脂放入烧杯中， 加入过量 的蒸馏水浸泡24h， 搅动树脂， 除去悬浮的破碎树脂。 然后， 用2mol/L的HCl浸泡约3h， 用蒸 馏水洗至 pH5 6， 然后用 2mol/L 的 NaOH 浸泡 3h， 再用蒸馏水洗至 pH5 6， 最后用 2mol/ L 的 HCl 作转型处理， 用蒸馏水洗至中性。 0016 本发明的方法显著优点有 ： 应用活性炭来脱色和吸附苯丙氨酸与酪氨酸， 大大提 高了原料的利用率， 降低了对设备的要求， 提高了工作效率， 而且活性炭吸。

17、附滤除了上柱液 中的杂质， 还解决了单纯分离交换柱中树脂易毒化的问题 ； 同时先用活性炭吸附后用离子 交换树脂分离比较好的解决了单纯离子交换苯丙氨酸、 酪氨酸和组氨酸之间的交叉重叠现 象。 具体实施方式 0017 本发明提供了一种物理和化学方法相结合的手段从甘蔗梢中提取氨基酸的方法。 在本发明的方法中， 用活性炭吸附分离酪氨酸和苯丙氨酸， 用离子交换吸附法分离碱性氨 基酸， 洗脱剂和分离条件的选择是实现本发明的关键。本方法在对甘蔗梢汁进行了真空抽 滤后， 活性炭在 pH 为 2 5、 活性炭用量 2 6g/100mL、 吸附时间为 50 150min、 加热温度 为 50 90的条件下对甘蔗梢。

18、汁进行脱色的预处理 ； 预处理后的甘蔗梢汁经活性炭在 流速为 1 1.5mL/min、 pH 为 5.8 的条件下吸附， 然后用 1.5mol/L 氨水洗脱， 控制流速约在 23mL/min， 分步收集， 配合Pauly显色反应检查， 至酪氨酸转阴显色， 合并含酪氨酸部分， 再改用 60乙醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 洗脱液经脱色低温结晶过滤得苯丙氨酸与酪 氨酸的粗品 ； 滤液再用离子交换树脂吸附交换， 洗脱流速为 1mL/min ； 洗脱剂为以下五种中 的一种或两种 ： NH4Cl、 NH4Cl-NH3H2O(1 1)、 NH3H2O、 NH4COOH-NH3H2O(1 1)、 NH4CO。

19、OH， 洗脱液减压浓缩结晶得组氨酸、 赖氨酸、 精氨酸粗品， 再经脱色过滤结晶烘干得精制氨酸。 0018 实施例 1 0019 取甘蔗梢压榨成汁， 过滤， 滤去泥土等大分子杂质， 将滤清汁稀释 50 倍， 用活性炭 说 明 书 CN 102260181 A CN 102260185 A3/5 页 5 脱色， 脱色 pH 值为 4.0， 加热温度为 80， 活性炭用量为 4g/100mL， 脱色时间为 75min， 活性 炭对蔗梢汁溶液的脱色率达到 75.37， 氨基酸损失率为 13.75 ； 过滤后取滤汁调 pH 为 5.8， 以流速为 1 1.5mL/min 流入含 100g 活性炭的吸附柱。

20、内吸附酪氨酸和苯丙氨酸， 配合 茚三酮反应检查， 至有紫红色反应， 即停止上柱 ； 先用蒸馏水洗柱， 控制流速约在 2 3mL/ min， 至无茚三酮反应为止 ； 然后用 1.5mol/L 氨水洗脱， 控制流速约在 2 3mL/min， 分步收 集， 配合 Pauly 反应检查， 直到 Panly 反应不显浅红色为止， 合并含酪氨酸转阴显色部分， 得到酪氨酸洗脱液 ； 再改用 60乙醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 得到酪氨酸洗脱液。将酪 氨酸洗脱液用旋转蒸发器减压浓缩赶氨， 调 pH 值为 2， 加 2活性炭颗粒脱色， 过滤， 滤液 冷却至室温， 冰箱内 4下放置两天， 小心分离滤液， 有白色。

21、针状晶体析出， 过滤得酪氨酸及 滤液， 再重结晶一次， 用 95乙醇洗涤， 放置烘箱 60烘干得酪氨酸成品， 纸层析检测为单 一斑点。将酪氨酸过滤液和苯丙氨酸洗脱液混合， 同酪氨酸浓缩提纯步骤， 得苯丙氨酸晶 体， 纸层析检测为单一斑点。将 50mL 处理完毕的 732 阳离子树脂置于 140cm 的离子交换 柱内， 取 200mL 活性炭吸附苯丙氨酸、 酪氨酸后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱， 流速控制在 1mL/ min， 至流出液中有组氨酸显色反应 ( 即 Pauly 显色反应检测 ) 时， 用去离子水洗至无氨基 酸出来为止(不同温度条件下的吸附茚三酮检验)， 先用0.05mol/L氨水以约1m。

22、L/min流速 洗脱， 待流过约 20mL 实体积后， 开始分步收集， 每管 10mL， 继而用 0.1mol/L 氨水洗脱， 洗脱 至无茚三酮反应， 再用 2mol/L 氨水洗脱， 洗至茚三酮反应检测基本上无显色为止， 共收集 洗脱液86管。 将第15-32管含有组氨酸的洗脱液进行减压浓缩， 待有结晶出来， 趁热用盐酸 调至 pH2.5， 并加入二倍于溶液量的 95无水乙醇， 静置沉淀， 过滤， 得组氨酸粗品 ； 将粗品 溶于去离子水中， 加热溶解， 用盐酸调至 pH2.5， 加 1.5溶液量的活性炭进行脱色、 过滤， 滤液加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析。

23、检测为 L- 组氨酸 成品。将第 37-55 管含有赖氨酸的洗脱液进行减压浓缩至糖浆状， 用盐酸调至 pH4 左右， 加 入三倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却放置， 过滤， 得赖氨酸粗品 ； 将粗品溶解于去离子水， 加热溶解， 加 1.5活性炭脱色， 过滤， 再减压浓缩至结晶出现， 加二倍溶液量的 95无水 乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为 L- 赖氨酸成品。将第 57-86 管含有精氨酸 的洗脱液进行减压浓缩， 待有结晶出来， 趁热用盐酸调至 pH4.0 左右， 并加入二倍于溶液量 的 95无水乙醇， 静置沉淀， 过滤， 得精氨酸粗品 ； 将精氨酸粗品溶于去离子水， 加热溶。

24、解， 用盐酸调至 pH4.0， 加 1溶液量的活性炭脱色， 过滤， 滤液加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为 L- 精氨酸成品。 0020 实施例 2 0021 取甘蔗梢压榨成汁， 过滤， 滤去泥土等大分子杂质， 将滤清汁稀释 50 倍， 用活性炭 脱色， 脱色 pH 值为 3.22， 加热温度为 77.8， 活性炭用量为 5g/100mL， 脱色时间为 70min， 过滤 ； 取滤汁 100mL， 调 pH 为 6， 以流速为 1 1.5mL/min 流入重量为 500g 活性炭的吸 附柱内吸附 ： 先用蒸馏水洗柱， 控制流速约在 2 3mL/min， 。

25、至无茚三酮反应为止 ； 然后 用 2.0mol/L 氨水洗脱， 控制流速约在 2 3mL/min， 分步收集， 配合 Pauly 反应检查， 直到 Panly 反应不显浅红色为止， 合并含 Tyr 转阴显色部分， 得到酪氨酸洗脱液 ； 再改用 50乙 醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 得到苯丙氨酸洗脱液。 将酪氨酸洗脱液用旋转蒸发器减压浓 缩赶氨， 调 pH 值为 2， 加 2活性炭颗粒脱色， 过滤， 滤液冷却至室温， 冰箱内 4下放置两 天， 小心分离滤液， 有白色针状晶体析出， 过滤得酪氨酸及滤液， 再重结晶一次， 用 95乙醇 说 明 书 CN 102260181 A CN 1022601。

26、85 A4/5 页 6 洗涤， 放置烘箱60烘干得酪氨酸成品， 纸层析检测为单一斑点。 将酪氨酸过滤液和苯丙氨 酸洗脱液混合， 同酪氨酸浓缩提纯步骤， 得苯丙氨酸晶体， 纸层析检测为单一斑点。将 50mL 处理完毕的 732 阳离子树脂置于 140cm 的离子交换柱内， 取 200mL 经活性炭吸附苯丙氨 酸、 酪氨酸后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱， 流速控制在 1mL/min， 至流出液中有组氨酸显色反 应 (Pauly 反应检测 ) 时， 用去离子水洗至无氨基酸出来为止 ( 不同温度条件下的吸附茚三 酮检验 )， 然后用 0.1mol/L 的 NH4COOH-NH3H2O 洗脱， 至无茚三酮反应。

27、， 再用 0.5mol/L 的 NH4COOH-NH3H2O 继续洗脱。当洗脱剂用量为 150 300mL 时， 洗脱出来的为组氨酸， 将 组氨酸的洗脱液进行减压浓缩， 待有结晶出来， 趁热用盐酸调至 pH 2.5， 并加入二倍于溶液 量的 95无水乙醇， 静置沉淀， 过滤， 得组氨酸粗品 ； 将组氨酸粗品溶解于去离子水中， 加 热溶解， 用盐酸调至 pH2.5， 加 1.5溶液量的活性炭进行脱色、 过滤， 滤液加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为 L- 组氨酸成品。当洗脱剂用量为 340 690mL 时， 洗脱出来的为赖氨酸， 将赖氨酸的洗脱液进行减压浓。

28、缩至糖浆状， 用盐酸 调至 pH4 左右， 加入三倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却放置， 过滤， 得赖氨酸粗品 ； 将赖氨酸 粗品溶于去离子水， 加热溶解， 加 1.5活性炭脱色， 过滤， 再减压浓缩至结晶出现， 加二倍 溶液量的95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为L-赖氨酸成品。 当洗脱 剂用量为 690 920mL 时， 洗脱出来的为精氨酸， 将精氨酸的洗脱液进行减压浓缩， 待有结 晶出来， 趁热用盐酸调至 pH4.0 左右， 并加入二倍于溶液量的 95无水乙醇， 静置沉淀， 过 滤， 得精氨酸粗品 ； 将粗品溶于去离子水， 加热溶解， 用盐酸调至 pH4.0， 加 。

29、1溶液量的活 性炭脱色， 过滤， 滤液加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检 测为 L- 精氨酸成品。 0022 实施例 3 0023 取甘蔗梢压榨成汁， 过滤， 滤去泥土等大分子杂质， 将滤清汁稀释 50 倍， 用活性炭 脱色， 脱色 pH 值为 3， 加热温度为 75， 活性炭用量为 4g/100mL， 脱色时间为 80min， 过滤， 取滤汁 100mL， 调 pH 为 5.5， 以流速为 1 1.5mL/min 流入重量为 500g 活性炭的吸附柱内 吸附， 先用蒸馏水洗柱， 控制流速约在 2 3mL/min， 至无茚三酮反应为止 ； 然后用 1.0mo。

30、l/ L 氨水洗脱， 控制流速约在 2 3mL/min， 分步收集， 配合 Pauly 反应检查， 直到 Panly 反应 不显浅红色为止， 合并含酪氨酸转阴显色部分， 得到酪氨酸洗脱液 ； 再改用 70乙醇洗脱， 至无茚三酮反应为止， 得到苯丙氨酸洗脱液。 将酪氨酸洗脱液用旋转蒸发器减压浓缩赶氨， 调pH值为2， 加2活性炭颗粒脱色， 过滤， 滤液冷却至室温， 冰箱内4下放置两天， 小心分 离滤液， 有白色针状晶体析出， 过滤得酪氨酸及滤液， 再重结晶一次， 用 95乙醇洗涤， 放置 烘箱 60烘干得酪氨酸成品， 纸层析检测为单一斑点。将酪氨酸过滤液和苯丙氨酸洗脱液 混合， 同酪氨酸浓缩提纯。

31、步骤， 得苯丙氨酸晶体， 纸层析检测为单一斑点。将 50mL 处理完毕 的 732 阳离子树脂置于 140cm 的离子交换柱内， 取 200mL 经活性炭吸附苯丙氨酸、 酪氨酸 后的蔗梢汁氨基酸溶液上柱， 流速控制在 1mL/min， 至流出液中有组氨酸显色反应 (Pauly 显色反应检测 ) 时， 用去离子水洗至无氨基酸出来为止 ( 不同温度条件下的吸附茚三酮检 验 )， 然后用 0.1mol/L 的 NH4COOH 洗脱至无茚三酮反应， 再用 0.5mol/L 的 NH4COOH 继续洗 脱。当洗脱剂用量为 180 320mL 时， 洗脱出来的为组氨酸， 将组氨酸的洗脱液进行减压浓 缩， 。

32、待有结晶出来， 趁热用盐酸调至 pH2.5， 并加入二倍于溶液量的 95无水乙醇， 静置沉 淀， 过滤， 得组氨酸粗品 ； 将组氨酸粗品溶解于去离子水中， 加热溶解， 用盐酸调至 pH2.5， 说 明 书 CN 102260181 A CN 102260185 A5/5 页 7 加 1.5溶液量的活性炭进行脱色、 过滤， 滤液加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为L-组氨酸成品。 当洗脱剂用量为340750mL时， 洗脱出来 的为赖氨酸， 将赖氨酸的洗脱液进行减压浓缩至糖浆状， 用盐酸调至 pH4 左右， 加入三倍溶 液量的 95无水乙醇， 冷却放置， 过滤。

33、， 得赖氨酸粗品 ； 将粗品溶于去离子水， 加热溶解， 加 1.5活性炭脱色， 过滤， 再减压浓缩至结晶出现， 加二倍溶液量的 95无水乙醇， 冷却结 晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为 L- 赖氨酸成品。当洗脱剂用量为 750 980mL 时， 洗脱 出来的为精氨酸， 将精氨酸的洗脱液进行减压浓缩， 待有结晶出来， 趁热用盐酸调至 pH4.0 左右， 并加入二倍于溶液量的 95无水乙醇， 静置沉淀， 过滤， 得精氨酸粗品 ； 将粗品溶于 去离子水， 加热溶解， 用盐酸调至 pH4.0， 加 1溶液量的活性炭脱色， 过滤， 滤液加二倍溶 液量的 95无水乙醇， 冷却结晶， 过滤后低温烘干， 纸层析检测为 L- 精氨酸成品。 说 明 书 CN 102260181 A 。