复方首乌口服液及制备方法和质量控制方法.pdf

本发明涉及一种中药制剂，即具有滋补肝肾，健脑益智功能的复方首乌口服液及制备方法和质量控制方法。由制何首乌266.7g，枸杞子200g，远志166.7g，石菖蒲133.3g，桑椹133.3g，人参66.7g，大枣33.3g，单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g，制成1000ml。经对235例患者临床观察，本品能明显改善痴呆、智力衰弱、记忆力减退病人的肝肾阴虚，心气不足等症状，并能提高智力，改善痴呆，对血压可能有良性调节作用，还可能具有降血脂、调节非特异性体液免疫功能的作用，对肝肾及血液系统无不良影响

权利要求书
1.  一种复方首乌口服液，其特征在于包括以下重量原料药制成：制何首乌266.7g，枸杞子200g，远志166.7g，石菖蒲133.3g，桑椹133.3g，人参66.7g，大枣33.3g。

2.  按照权利要求1所述的复方首乌口服液，其特征在于包括单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g，制成1000ml。

3.  一种如权利要求2所述的复方首乌口服液的制备方法，其特征在于步骤如下：取石菖蒲、桑椹用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣及其余何首乌等五味加8、6、6倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至450ml，加乙醇至醇浓度为60％，搅拌，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.5，80℃的稠膏，加水稀释至450ml，相对密度为1.20-1.25，50℃；置-5℃冷冻24小时，室温溶化后，滤过，加单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g及上述挥发油，再加水至1000ml，搅拌，滤过，分装，灭菌，即得。

4.  如权利要求2所述的复方首乌口服液的鉴别方法，其特征在于该方法中包括如下任一种或几种组合：
(1)取本品50ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，浓缩至约30ml，用正丁醇饱和的2％氢氧化钠溶液提取2次，每次30ml，弃去碱液，再用正丁醇饱和的水30ml提取，弃去水层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，以105℃烘至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)取本品50ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，浓缩至约30ml，用正丁醇饱和的氨试液提取2次，每次30ml，弃去碱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材5g，加水煎煮2小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约15ml，用水饱和正丁醇提取2次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(13∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；
(3)取本品50ml，加盐酸1ml，回流提取1小时，立即冷却，用乙醚提取2次，每次50ml，合并提取液，蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试晶溶液；另取大黄素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚-醋酸乙酯-甲酸(13∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。

5.  如权利要求2所述的复方首乌口服液的含量测定方法，其特征在于方法如下：
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(25∶75)为流动相；检测波长为320nm；理论板数按2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000；
对照溶液的制备：精密称取2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；
供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置D101大孔吸附树脂柱上，以每分钟2.0ml的流速洗脱，弃去水洗脱液，用稀乙醇洗脱，弃去稀乙醇洗脱液7-9ml，收集洗脱液100ml，蒸干，残渣加稀乙醇溶解，置10ml量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得；
测定法  分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得；
本品每10ml含2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)计，不得少于6.0mg。

说明书复方首乌口服液及制备方法和质量控制方法
技术领域
本发明涉及一种中药制剂，即具有滋补肝肾，健脑益智功能的复方首乌口服液及制备方法和质量控制方法。
背景技术
在现有技术中，随着科学的进步，人们对增加智能的要求愈加迫切，多种疾病(脑动脉硬化脑栓塞、高血压病，老年痴呆等症)的病后记忆力减退、老年性记忆减退、儿童智力低下及中、小学生都在寻求增加智能、改善记忆、缓解脑力疲劳之品。然而，目前国内外能增加智商效果可靠之品尚缺乏。
发明内容
本发明的目的是针对上述情况而提供一种针对智力减退、痴呆有疗效的复方首乌口服液及制备方法和质量控制方法。
本发明的技术解决方案是：复方首乌口服液包括以下重量原料药制成：何首乌(制)266.7g，枸杞子200g，远志166.7g，石菖蒲133.3g，桑椹133.3g，人参66.7g，大枣33.3g，单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g，制成1000ml。
祖国医学对人的精神思维活动有其独特的分类描述。与智力关系密切的，主要有心、肝、肾等脏。本方主药选用何首乌苦甘而涩，温而不燥。化阴生血固涩精气，善补肝肾，健筋骨，乌须发，向为补血益精之良药。《何首乌录》有“长筋益精，能食，益气力，长肤延年”的记载。构杞子味甘，气平，质地滋润，能补肝血，益肾精，扶阳气，壮筋骨，为养血补精之佳品。《本草经疏》说：“枸杞子润而滋补，兼能退热，而专于补肾，润肺，生津，益气。为肝肾真阴不足，劳乏内热，补益之要药。二药并列为君药，功专补益肝肾，添充髓海以健脑元神之府。臣以桑椹子甘酸微寒，清凉润降，能滋肾水，补肝血，生津液，润心肺，乌须发。《本草经疏》说：“桑椹，甘寒益血而除热，为凉血，补血，益阴之药。……故魂安而神自清宁，神明则聪明内发”的记述。远志气温味苦，善交通心肾，使水火相济，能益心气，安心神，止惊悸开智慧。《本经》说“治咳逆伤中，补不足，除邪气，利九窍，益智慧，耳目聪明，不忘”。石菖蒲辛温，能开心窍，通心神，豁痰涎，利清阳。《别录》说：“聪耳目，益心智”，三臣药辅助君药心肝肾兼顾，可增强扶虚益损之功，佐以人参大补元气，特益脾肺，善振脾阳，资化源，益肺气，充百脉，生津止渴，宁神益智。《本经》载：“补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智。”得配君臣药不但三阴并理，而且有益脾肺，脾胃健运则谷化精微气血生，肺主诸脏之气，肺气旺则余脏受荫，是以人参协同君臣助益五脏生化之机则泉源有自，从而精气神充沛，记忆力增强，智力当可敏捷。使以大枣不但合同群药补脾益气，养血安神，并具“和百药”(《本经》)之能。诸药合用，共奏补益精髓，健脑益智之功效。
制法：以上七味，取石菖蒲、桑椹用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣及其余何首乌等五味加8、6、6倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至450ml，加乙醇至醇浓度为60％，搅拌，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.5(80℃)的稠膏，加水稀释至450ml，相对密度为1.20-1.25(50℃)；置-5℃冷冻24小时，室温溶化后，滤过，加单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g及上述挥发油，再加水至1000ml，搅拌，滤过，分装，灭菌，即得。
上述制剂不限于此，按上述各药用原料与制药上常用的药用载体、添加剂或辅料还可以混合制成片剂、胶囊剂(软胶囊剂)、颗粒剂、散剂、丸剂、液体制剂或其它常规制剂。
药理实验
1、经跳台法、食物迷宫法和电迷宫法观察复方首乌口服液对学习记忆的影响。实验证明本品具有抗樟柳碱所致的记忆获得障碍的作用，增加大、小鼠方向辨别能力。说明复方首乌口服液具有促进学习记忆作用。
2，经肾虚动物模型实验观察了复方首乌口服液在跳台中错误反应次数低抗乏氧和抗疲劳的能力。结果表明本品能对抗因肾虚所致小鼠学习记忆减退，增强抗氧、抗疲劳能力。
3、复方首乌口服液能增加大、小鼠脑DNA、RNA和蛋白质含量。复方首乌口服液增智作用与脑内核酸，蛋白质含量有关。
4，复方首乌口服液能增加大鼠脑内NA和DA含量。说明复方首乌口服液增智作用与脑内单胺类递质改变有关。
5、复方首乌口服液能降低血浆和肝脏中LPO含量，增加红细胞中SOD活性，降低脑组织中MAO-B含量，说明本品具有抗衰老作用。
毒理学研究：l、急性毒性实验：给20只小鼠灌胃3.33g/ml的复方首乌口服液，每次0.7ml/只，24小时内灌胃三次，累计剂量为349.66g/kg相当于临床用药量的874.23倍。给药后观察7日，小鼠饮食正常，毛色光亮，活动自如，体重增加，呼吸平稳，取其它不良反应和死亡。说明本品毒性甚小。2、长期毒性实验：复方首乌口服液40、20和10ml/kg给大鼠灌胃，每日1次，连续90日，结果末见动物体重、血象和肝肾功能的异常改变。病理检查与对照组比较也无显著差异。结合急性毒性实验说明本品毒性小。
功能与主治：滋补肝肾，健脑益智。用于心、肝、肾阴虚引起的头晕目眩、健忘失眠、腰膝酸软、神疲乏力等症。
用法与用量：口服，一次10ml，每日三次。
本发明的优点是：1、经临床对235例临床观察，本品不仅能明显改善痴呆、智力衰弱、记忆力减退病人的肝肾阴虚，心气不足等症状，并能提高智力，改善痴呆，对血压可能优良性调节作用，还可能具有降血脂、调节非特异性体液免疫功能的作用，对肝肾及血液系统无不良影响，床观察末见副作用，显效率62.55％，总有效率96.17％。2、久服可增加智力，延缓衰老，增强体质。
下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
具体实施方式
实施例1
复方首乌口服液由以下重量原料药制成：制何首乌266.7g，枸杞子200g，远志166.7g，石菖蒲133.3g，桑椹133.3g，人参66.7g，大枣33.3g，单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g，制成1000ml。
实施例2
复方首乌口服液制备方法：以上七味，取石菖蒲、桑椹用水蒸汽蒸馏法提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣及其余何首乌等五味加8、6、6倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液与上述水溶液合并，浓缩至450ml，加乙醇至醇浓度为60％，搅拌，静置24小时，滤过，减压浓缩至相对密度为1.5(80℃)的稠膏，加水稀释至450ml，相对密度为1.20-1.25(50℃)；置-5℃冷冻24小时，室温溶化后，滤过，加单糖浆360ml，苯甲酸钠2.7g及上述挥发油，再加水至1000ml，搅拌，滤过，分装，灭菌，即得。
实验例1
复方首乌口服液的鉴别方法
该方法中包括如下任一种或几种组合：
(1)取本品50ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，浓缩至约30ml，用正丁醇饱和的2％氢氧化钠溶液提取2次，每次30ml，弃去碱液，再用正丁醇饱和的水30ml提取，弃去水层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，以105℃烘至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品50ml，加乙醚提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，用水饱和的正丁醇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，浓缩至约30ml，用正丁醇饱和的氨试液提取2次，每次30ml，弃去碱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材5g，加水煎煮2小时，放冷，滤过，滤液浓缩至约15ml，用水饱和正丁醇提取2次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(13∶4∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(3)取本品50ml，加盐酸1ml，回流提取1小时，立即冷却，用乙醚提取2次，每次50ml，合并提取液，蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试晶溶液；另取大黄素对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一以0.3％羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯-甲酸(13∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。
实验例2
复方首乌口服液的含量测定方法
照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(25∶75)为流动相；检测波长为320nm；理论板数按2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。
对照溶液的制备：精密称取2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：精密量取本品1ml，置D101大孔吸附树脂柱(内径约1.5cm，填充高度10cm)上，以每分钟2.0ml的流速洗脱，弃去水洗脱液，用稀乙醇洗脱，弃去稀乙醇洗脱液7-9ml，收集洗脱液100ml，蒸干，残渣加稀乙醇溶解，置10ml量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每10ml含2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C20H22O9)计，不得少于6.0mg。
实验例3
复方首乌口服液临床报告
复方首乌口服液增智保健作用临床观察总结--吉林省中医中药研究院
为观察验证复方首乌口服液的增智保健作用，对235例中医辨证为肝肾阴虚、心气不足或兼痰浊阻窍的具有不同程度低智、记忆力明显减退的病人进行临床观察，取得较好的疗效，现报告如下：
1、临床资料
本组235例，其中男性1 56例，女性79例：年龄：40岁15例，40-49岁19例，50-59岁45例，60岁以上156例；病程：1年40例，1-3年109例，4-5年37例，6年49例。
2观察方法
(1)诊断与疗效评定标准
诊断与疗效评定标准均按照全国中西医结合老年病和虚证专业委员会《中医虚证辨证参考标准》的肾虚、肝虚、心虚、阴虚证，参照《老年呆病的诊断、辨证分型及疗效评定标准》进行判定。症状按轻：+，中：++，重：+++填表。
疗效评定标准：
显效：主要症状基本恢复，神志清醒，定向健全，回答问题正确，反应灵敏，生活自理，能进行一般的社会活动。主症消失(重+++→轻+或重+++、中++、轻+→-)主要症状3项显效+2项好转，4项显效+1项无效，2项显效+3项好转。
有效：主要精神症状有所减弱，或部分消失、生活基本自理，回答问题基本正确，但反应迟钝，智力与人格仍有部分障碍。主症减轻(+++→++，++→+)主要症状1项显效十2项好转，3项以上好转。
无效：主要症状无改变，或病情有发展，生活不能自理，回答问题不正确，神志痴呆。
(2)病例选择：凡符合中医辨证为肝肾阳虚，心气不足或兼痰浊阻窍[包括西医诊断为老年性痴呆、脑血管，瞒呆(多发性梗塞性痴呆及脑出血、脑.血栓形成、脑栓塞后痴呆)]及混合性痴呆、脑叶萎缩症，正压性脑积水、脑淀粉祥血管病，植物神经功能失调引起的智力减逊的门诊和住院病人；无其他严重疾病影响疗效观察者；均可作为观察对象。
(3)观察药物：复方首乌口服液由通化白山药业股份有限公司提供，用法：每次口服10ml。每日3次，30天为1疗程。用本药前三周停用有关滋补强壮药物，用本药期间禁用其他有关药物。
(4)统计方法：采用配对t检验和秩和检验进行统计学分析。
3、观察结果
(1)复方首乌口服液对症状的改善
表1 复方首乌口服液对症状的改善
  失眠健忘  智力障碍  头晕目眩  +++ ++ +-  +++ ++ + -  +++ ++ + -  用药前  78 91  59   7  34  75  112  14  59 110 55  11  用药后  2  31  104  98  0   24  79   132  3  20  96  116  P值  ＜0.01(u＝13.86)  ＜0.01(u＝14.64)  ＜0.01(u＝14.02)  腰膝酸软  神疲乏力  手足心热  心悸气短  +++ ++ +-  +++ ++ +-  +++ ++ +-  +++ ++ +-  36 105 73 30  33 93  90  13  26  41  65  101  19 61  75  80  1  15  77 102  2  21  77  133  10  20  32  173  0  18  62  155  ＜0.01(u＝13.01)  ＜0.01(u＝13.50)  ＜0.01(u＝7.16)  ＜0.01(u＝3.34)
由上表可见，复方首乌口服液能明显改善肝肾阴虚、心气不足等症状。
(2)复方首乌口服液对智能的影响
表2复方首乌口服液对智能的影响X-±S分

由表2可见用药后智能提高，痴呆改善。说明复方首乌口服液有较好的增智作用。
(3)复方首乌口服液对血红蛋白，白细胞的影响
表3 复方首乌口服液对血红蛋白，白细胞的影响X-±S
  n  血红蛋白(g/L)  白细胞数(×109/L)  用药前230  126.81±17.59  8.02±2.91  用药后230  129.24±16.08  7.63±1.85  P值  ＜0.05(t＝2.54)  ＜0.05(t＝2.49)
由表3可见用药后血红蛋白有所提高，白细胞有所下降.但均在正常范围波动，故可认为对血液系统无不良影响。
(4)复方首乌口服液对血压的影响
表4复方首乌口服液对血压的影响X±S Kpa
  n  收缩压  舒张压  用药前230  18.98±3.36  11.86±1.70  用药后230  18.17±3.07  11.52±1.37  P值  ＜0.01(t＝8.03)  ＜0.01(t＝15.33)
由表4可见用药后血压有所下降，但波动在正常范围，提示本品无血压升高的副作用，可能对血压有一定的良性调节作用或一定的降压作用。
(5)复方首乌口服液对血脂的影响
表5复方首乌口服液对血脂的影响X+S mmol/L
  n  胆固醇  三酸甘油酯  用药前58  4.69±1.14  1.05±0.81  用药后58  3.89±1.01  0.73±0.44  P值  ＜0.01(t＝5.93)  ＜0.01(t＝3.31)
由表5可见用启智灵后血胆固醇、三酸甘油脂有所下降，提示本品可能有一定的降脂作用。
(6)复方首乌口服液对免疫球蛋白的影响
表6复方首乌口服液对免疫球蛋白的影响X±S g/L
  n  IgG  IgA  IgM  用药前82  11.30±2.38  1.37±0.66  1.38±0.43  用药后82  11.69±2.27  1.76±0.50  1.46±0.40  P值  ＜0.05(t＝1.83)  ＞0.10(t＝30.70)  ＞0.10(t＝1.63)
由表6可见服用复方首乌口服液后兔疫球蛋白较用药前有所提高，其中IgG明显高于用药前，故本品可能有调节非特性体液免疫功能的作用。
(7)复方首乌口服液对尿常规肝功能的影响
经235例临床观察用本药后尿常规、肝功能较用药前无异常改变，可见本药对肝、肾功能无不良影响。另外也未见其他副作用。
(8)总疗效
235例中显效147例，显效率62.55％，有效79例，有效率33.62％，总有效率96.17％，无效9例，无效率3.83％。
4、小结
经我们对235例临床观察，本品不仅能明显改善痴呆、智力衰弱、记忆力减退病人的肝肾阴虚，心气不足等症状，并能提高智力，改善痴呆，对血压可能优良性调节作用，还可能具有降血脂、调节非特异性体液免疫功能的作用，对肝肾及血液系统无不良影响，床观察末见副作用，显效率62.55％，总有效率96.17％。本品服用携带方便，药源丰富易得，价格低廉，疗效高，可为增智保健佳品，值得推广应用。