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一种有机污染水体生物修复剂及其制备方法.pdf

  • 上传人：奻奴
  • 文档编号：5476625
  • 上传时间：2019-01-26
  • 格式：PDF
  • 页数：11
  • 大小：386.99KB
    • 摘要
    申请专利号：

    CN201310180390.0

    		 申请日：

    2013.05.15
    公开号：

    CN103351061A

    		 公开日：

    2013.10.16
    当前法律状态：

    授权

    		 有效性：

    有权
    法律详情：

    专利权的转移IPC(主分类):C12N 1/14变更事项:专利权人变更前权利人:钱臻变更后权利人:上海玉垒环境生物技术有限公司变更事项:地址变更前权利人:201102 上海市闵行区虹莘路1551弄11号101室变更后权利人:201100 上海市闵行区七莘路999号登记生效日:20150128|||授权|||实质审查的生效IPC(主分类):C02F 3/34申请日:20130515|||公开
    IPC分类号：

    C02F3/34; C12N1/14; C12N1/20; C12R1/69(2006.01)N; C12R1/085(2006.01)N; C12R1/66(2006.01)N; C02F101/30(2006.01)N

    		 主分类号：

    C02F3/34
    申请人：

    钱臻
    发明人：

    钱臻
    地址：

    201102 上海市闵行区虹莘路1551弄11号101室
    优先权：

    专利代理机构：

    上海科盛知识产权代理有限公司 31225

    		 代理人：

    林君如
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    内容摘要

    本发明涉及一种有机污染水体生物修复剂及其制备方法，原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液0.6～1.0％、蜡样芽孢杆菌菌液0.6～1.0％、土曲霉菌液0.6～1.0％、构巢曲霉菌液0.6～1.0％、谷壳50～60％，余量为天然河水，通过混合、发酵、驯化制备得到有机污染水体生物修复剂。与现有技术相比，本发明使水体中形成黑臭、富营养化得有机污染物得以分解带出水，从而提升了水质，结合其他技术，如水生动植物等，可以使污染水体恢复到地表IV～V类水。

    权利要求书

    权利要求书
    1.  一种有机污染水体生物修复剂，其特征在于，该生物修复剂的原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液0.6～1.0％、蜡样芽孢杆菌菌液0.6～1.0％、土曲霉菌液0.6～1.0％、构巢曲霉菌液0.6～1.0％、谷壳50～60％，余量为河水。

    2.  根据权利要求1所述的一种有机污染水体生物修复剂，其特征在于，所述的米曲霉菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。

    3.  根据权利要求1所述的一种有机污染水体生物修复剂，其特征在于，所述的蜡样芽孢杆菌菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。

    4.  根据权利要求1所述的一种有机污染水体生物修复剂，其特征在于，所述的土曲霉液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。

    5.  根据权利要求1所述的一种有机污染水体生物修复剂，其特征在于，所述的构巢曲霉菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。

    6.  如权利要求1-4中任一项所述有机污染水体生物修复剂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
    (1)米曲霉菌液的制备：
    a、准备米曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.4～1.6％；5°麦芽汁98.4～98.6％；
    b、液体培养基的制备：按米曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的米曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面米曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌米曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有米曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的米曲霉培养基再发酵24～48h，得到米曲霉菌液；
    (2)蜡样芽孢杆菌菌液的制备：
    a、准备蜡样芽孢杆菌培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蛋白胨0.4～0.6％、牛肉浸取物0.25～0.35％、NaCl0.4～0.6％、琼脂1.4～1.5％，余量为蒸馏水；
    b、液体培养基的制备：按蜡样芽孢杆菌培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的蜡样芽孢杆菌培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面蜡样芽孢杆菌菌种在无菌环境中接入含有已灭菌蜡样芽孢杆菌培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有蜡样芽孢杆菌培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的蜡样芽孢杆菌培养基再发酵24～48h，得到蜡样芽孢杆菌菌液；
    (3)土曲霉菌液的制备：
    a、准备土曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蔗糖2.8～3.0％、NaNO30.28～0.3％、MgSO4·7H2O0.045～0.048％、KCl0.0045～0.0048％、FeSO4·4H2O0.001％、K2HPO40.095～0.096％、琼脂1.4％～1.44％，余量为蒸馏水，pH控制为6.0～6.5。
    b、液体培养基的制备：按土曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的土曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面土曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌土曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有土曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的土曲霉培养基再发酵24～48h，得到土曲霉菌液；
    (4)构巢曲霉菌液的制备：
    a、准备构巢曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.45～1.48％、余量为12Brix.麦芽汁；
    b、液体培养基的制备：按构巢曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的构巢曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面构巢曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌构巢曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有构巢曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的构巢曲霉培养基再发酵24～48h，得到构巢曲霉菌液；
    (5)将米曲霉菌液、蜡样芽孢杆菌菌液、土曲霉菌液、构巢曲霉菌液按配方混拌于谷壳中，加入河水，保持湿度为40～60％，堆料覆盖发酵，当堆温介于40～60℃时，将谷壳移至发酵槽继续发酵，并通风30～60min/3h，每12h翻堆一次，同时控制堆温在50～70℃，湿度在20～50％，发酵7～10d后摊平料堆降温，堆温降至20℃以下，湿度降至10～15％，即制备得到有机污染水体生物修复剂。

    说明书

    说明书一种有机污染水体生物修复剂及其制备方法
    技术领域
    本发明涉及一种生物修复剂及其制备方法，尤其是涉及一种有机污染水体生物修复剂及其制备方法。
    背景技术
    已知国际上兴起的生物加强(投放)工艺，其原理是利用生物培养的方法，选择单一菌种，制备成含菌量较高的液体制剂，投放到工程界面中，用以强化生物降解的力量。但其制备成本高、产能低、液体菌剂在工程界面中有效期短、稳定性差、另储存条件苛刻、工程应用运耗过大。缺乏产业化前景，最致命的缺陷是液体菌剂的菌种自然属性丝毫不变，无法从根本上解决耐污性弱、环境耐受性差和分解速率低的问题。
    在有机污染水体治理方面，国内技术单一、菌种单一，国外菌剂又无法适应中国环境特点，又存在本土化、安检等问题。且国内现有的生物技术均依靠实验室级别的液体菌液的布洒，只能短期维持效果，长期维持需要不间断的投撒，且水体抗污染能力、自净能力低，水质易反复。
    发明内容
    本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种制造成本低，产能高，有效期长，稳定性强的有机污染水体生物修复剂及其制备方法。投入后，矿化底泥中的有机污染物质，建立腐食食物链，可长期维持水体自净能力，是水体生态系统的建立核心组成部分。
    本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
    一种有机污染水体生物修复剂，原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液0.6～1.0％、蜡样芽孢杆菌菌液0.6～1.0％、土曲霉菌液0.6～1.0％、构巢曲霉菌液0.6～1.0％、谷壳50～60％，余量为天然河水。
    所述的米曲霉菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    所述的蜡样芽孢杆菌菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    所述的土曲霉液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    所述的构巢曲霉菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    有机污染水体生物修复剂的制备方法包括以下步骤：
    (1)米曲霉菌液的制备：
    a、准备米曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.4～1.6％；5°麦芽汁98.4～98.6％；
    b、液体培养基的制备：按米曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的米曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面米曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌米曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有米曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的米曲霉培养基再发酵24～48h，得到米曲霉菌液；
    (2)蜡样芽孢杆菌菌液的制备：
    a、准备蜡样芽孢杆菌培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蛋白胨0.4～0.6％、牛肉浸取物0.25～0.35％、NaCl0.4～0.6％、琼脂1.4～1.5％，余量为蒸馏水；
    b、液体培养基的制备：按蜡样芽孢杆菌培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的蜡样芽孢杆菌培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面蜡样芽孢杆菌菌种在无菌环境中接入含有已灭菌蜡样芽孢杆菌培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有蜡样芽孢杆菌培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3 的蜡样芽孢杆菌培养基再发酵24～48h，得到蜡样芽孢杆菌菌液；
    (3)土曲霉菌液的制备：
    a、准备土曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蔗糖2.8～3.0％、NaNO30.28～0.3％、MgSO4·7H2O0.045～0.048％、KCl0.0045～0.0048％、FeSO4·4H2O0.001％、K2HPO40.095～0.096％、琼脂1.4％～1.44％，余量为蒸馏水，pH控制为6.0～6.5。
    b、液体培养基的制备：按土曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的土曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面土曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌土曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有土曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的土曲霉培养基再发酵24～48h，得到土曲霉菌液；
    (4)构巢曲霉菌液的制备：
    a、准备构巢曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.45～1.48％、余量为12Brix.麦芽汁；
    b、液体培养基的制备：按构巢曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的构巢曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面构巢曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌构巢曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有构巢曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的构巢曲霉培养基再发酵24～48h，得到构巢曲霉菌液；
    (5)将米曲霉菌液、蜡样芽孢杆菌菌液、土曲霉菌液、构巢曲霉菌液按配方混拌于谷壳中，加入水，保持湿度为40～60％，堆料覆盖发酵，当堆温介 于40～60℃时，将谷壳移至发酵槽继续发酵，并通风30～60min/3h，每12h翻堆一次，同时控制堆温在50～70℃，湿度在20～50％，发酵7～10d后摊平料堆降温，堆温降至20℃以下，湿度降至10～15％，即制备得到有机污染水体生物修复剂。
    与现有技术相比，本发明利用天然河水给混合后的菌液营造模拟天然的水体环境，驯化四种菌种对河水的适应性和相互间与土著菌种的适生性，使之能在投入天然水体后，迅速适应环境，并工作。米曲霉、蜡样芽孢杆菌、土曲霉的组合能有效分解水体、底泥中有机污染物，构巢曲霉能分解水体、底泥中的油脂类有机污染物，并都最终分解成为气体、水和灰质。活性复合生物能经用目标水体活化后，投撒后，可以降解底泥、水体中的有机污染物，使底泥矿化，密实度提高；使水体中形成黑臭、富营养化得有机污染物得以分解带出水，从而提升了水质，结合其他技术，如水生动植物等，可以使污染水体恢复到地表IV～V类水。
    具体实施方式
    下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
    实施例1
    一种有机污染水体生物修复剂，原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液0.6％、蜡样芽孢杆菌菌液0.6％、土曲霉菌液0.6％、构巢曲霉菌液0.6％、谷壳50％，余量为天然河水，上述菌液中的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    有机污染水体生物修复剂的制备方法包括以下步骤：
    (1)米曲霉菌液的制备：
    a、准备米曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.4～1.6％；5°麦芽汁98.4～98.6％；
    b、液体培养基的制备：按米曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的米曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面米曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌米曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有米曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的米曲霉培养基再发酵24～48h，得到米曲霉菌液；
    (2)蜡样芽孢杆菌菌液的制备：
    a、准备蜡样芽孢杆菌培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蛋白胨0.4～0.6％、牛肉浸取物0.25～0.35％、NaCl0.4～0.6％、琼脂1.4～1.5％，余量为蒸馏水；
    b、液体培养基的制备：按蜡样芽孢杆菌培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的蜡样芽孢杆菌培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面蜡样芽孢杆菌菌种在无菌环境中接入含有已灭菌蜡样芽孢杆菌培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有蜡样芽孢杆菌培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的蜡样芽孢杆菌培养基再发酵24～48h，得到蜡样芽孢杆菌菌液；
    (3)土曲霉菌液的制备：
    a、准备土曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蔗糖2.8～3.0％、NaNO30.28～0.3％、MgSO4·7H2O0.045～0.048％、KCl0.0045～0.0048％、FeSO4·4H2O0.001％、K2HPO40.095～0.096％、琼脂1.4％～1.44％，余量为蒸馏水，pH控制为6.0～6.5。
    b、液体培养基的制备：按土曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的土曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面土曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌土曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有土曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵 罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的土曲霉培养基再发酵24～48h，得到土曲霉菌液；
    (4)构巢曲霉菌液的制备：
    a、准备构巢曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.45～1.48％、余量为12Brix.麦芽汁；
    b、液体培养基的制备：按构巢曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的构巢曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面构巢曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌构巢曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有构巢曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的构巢曲霉培养基再发酵24～48h，得到构巢曲霉菌液；
    (5)将米曲霉菌液、蜡样芽孢杆菌菌液、土曲霉菌液、构巢曲霉菌液按配方混拌于谷壳中，加入水，保持湿度为40～60％，堆料覆盖发酵，当堆温介于40～60℃时，将谷壳移至发酵槽继续发酵，并通风30～60min/3h，每12h翻堆一次，同时控制堆温在50～70℃，湿度在20～50％，发酵7～10d后摊平料堆降温，堆温降至20℃以下，湿度降至10～15％，即制备得到有机污染水体生物修复剂。
    实施例2
    一种有机污染水体生物修复剂，原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液0.8％、蜡样芽孢杆菌菌液0.8％、土曲霉菌液0.8％、构巢曲霉菌液0.8％、谷壳50％，余量为天然河水，上述菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    有机污染水体生物修复剂的制备方法包括以下步骤：
    (1)米曲霉菌液的制备：
    a、准备米曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.4～1.6％；5°麦芽汁98.4～98.6％；
    b、液体培养基的制备：按米曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的米曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面米曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌米曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有米曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的米曲霉培养基再发酵24～48h，得到米曲霉菌液；
    (2)蜡样芽孢杆菌菌液的制备：
    a、准备蜡样芽孢杆菌培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蛋白胨0.4～0.6％、牛肉浸取物0.25～0.35％、NaCl0.4～0.6％、琼脂1.4～1.5％，余量为蒸馏水；
    b、液体培养基的制备：按蜡样芽孢杆菌培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的蜡样芽孢杆菌培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面蜡样芽孢杆菌菌种在无菌环境中接入含有已灭菌蜡样芽孢杆菌培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有蜡样芽孢杆菌培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的蜡样芽孢杆菌培养基再发酵24～48h，得到蜡样芽孢杆菌菌液；
    (3)土曲霉菌液的制备：
    a、准备土曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蔗糖2.8～3.0％、NaNO30.28～0.3％、MgSO4·7H2O0.045～0.048％、KCl0.0045～0.0048％、FeSO4·4H2O0.001％、K2HPO40.095～0.096％、琼脂1.4％～1.44％，余量为蒸馏水，pH控制为6.0～6.5。
    b、液体培养基的制备：按土曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的土曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面土曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌土曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到 三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有土曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(WV)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的土曲霉培养基再发酵24～48h，得到土曲霉菌液；
    (4)构巢曲霉菌液的制备：
    a、准备构巢曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.45～1.48％、余量为12Brix.麦芽汁；
    b、液体培养基的制备：按构巢曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的构巢曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面构巢曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌构巢曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有构巢曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的构巢曲霉培养基再发酵24～48h，得到构巢曲霉菌液；
    (5)将米曲霉菌液、蜡样芽孢杆菌菌液、土曲霉菌液、构巢曲霉菌液按配方混拌于谷壳中，加入水，保持湿度为40～60％，堆料覆盖发酵，当堆温介于40～60℃时，将谷壳移至发酵槽继续发酵，并通风30～60min/3h，每12h翻堆一次，同时控制堆温在50～70℃，湿度在20～50％，发酵7～10d后摊平料堆降温，堆温降至20℃以下，湿度降至10～15％，即制备得到有机污染水体生物修复剂。
    实施例3
    一种有机污染水体生物修复剂，原料包括以下组分及重量百分比含量：米曲霉菌液1.0％、蜡样芽孢杆菌菌液1.0％、土曲霉菌液1.0％、构巢曲霉菌液1.0％、谷壳60％，余量为天然河水，上述菌液的含菌量为1×108～9×1012个/ml。
    有机污染水体生物修复剂的制备方法包括以下步骤：
    (1)米曲霉菌液的制备：
    a、准备米曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂 1.4～1.6％；5°麦芽汁98.4～98.6％；
    b、液体培养基的制备：按米曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的米曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面米曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌米曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有米曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的米曲霉培养基再发酵24～48h，得到米曲霉菌液；
    (2)蜡样芽孢杆菌菌液的制备：
    a、准备蜡样芽孢杆菌培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蛋白胨0.4～0.6％、牛肉浸取物0.25～0.35％、NaCl0.4～0.6％、琼脂1.4～1.5％，余量为蒸馏水；
    b、液体培养基的制备：按蜡样芽孢杆菌培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的蜡样芽孢杆菌培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面蜡样芽孢杆菌菌种在无菌环境中接入含有已灭菌蜡样芽孢杆菌培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有蜡样芽孢杆菌培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的蜡样芽孢杆菌培养基再发酵24～48h，得到蜡样芽孢杆菌菌液；
    (3)土曲霉菌液的制备：
    a、准备土曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：蔗糖2.8～3.0％、NaNO30.28～0.3％、MgSO4·7H2O0.045～0.048％、KCl0.0045～0.0048％、FeSO4·4H2O0.001％、K2HPO40.095～0.096％、琼脂1.4％～1.44％，余量为蒸馏水，pH控制为6.0～6.5。
    b、液体培养基的制备：按土曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃， 灭菌15min，得到已灭菌的土曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面土曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌土曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有土曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的土曲霉培养基再发酵24～48h，得到土曲霉菌液；
    (4)构巢曲霉菌液的制备：
    a、准备构巢曲霉培养基原料，包括以下组分及重量百分比含量：琼脂1.45～1.48％、余量为12Brix.麦芽汁；
    b、液体培养基的制备：按构巢曲霉培养基配方配制原料，在0.15MPa，121℃，灭菌15min，得到已灭菌的构巢曲霉培养基；
    c、三角瓶菌种的制备：取斜面构巢曲霉菌种在无菌环境中接入含有已灭菌构巢曲霉培养基的三角瓶中，在30～45℃，振率100～200rpm，培养24～48h，得到三角瓶菌种液；
    d、生产菌种的制备：按3wt％～5wt％的接种量将三角瓶菌种液接入含有构巢曲霉培养基的发酵罐中，在30～45℃，通风比为1∶1(V/V)，装液量为发酵罐体积的1/3，发酵24～48h，然后再按上述条件补加发酵罐体积的1/3的构巢曲霉培养基再发酵24～48h，得到构巢曲霉菌液；
    (5)将米曲霉菌液、蜡样芽孢杆菌菌液、土曲霉菌液、构巢曲霉菌液按配方混拌于谷壳中，加入水，保持湿度为40～60％，堆料覆盖发酵，当堆温介于40～60℃时，将谷壳移至发酵槽继续发酵，并通风30～60min/3h，每12h翻堆一次，同时控制堆温在50～70℃，湿度在20～50％，发酵7～10d后摊平料堆降温，堆温降至20℃以下，湿度降至10～15％，即制备得到有机污染水体生物修复剂。
    制备得到的生物修复剂用于水体的处理中，具体实施的结果如下所示。
    技术使用实例一：上海市长宁区汤家浜


    技术使用实例二：上海市长宁区野奴泾

    技术使用实例三：无锡横浜

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    一种 有机 污染 水体 生物 修复 及其 制备 方法
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