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1、(10)申请公布号 CN 103070007 A (43)申请公布日 2013.05.01 CN 103070007 A *CN103070007A* (21)申请号 201110326145.7 (22)申请日 2011.10.25 A01G 1/04(2006.01) A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 何寒 地址 531500 广西壮族自治区百色市田东县 平马镇东宁西路合恒巷 253 号 (72)发明人 何寒 (54) 发明名称 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、 提纯方法 (57) 摘要 本发明涉及生物技术领域， 具体的说是一种 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育。
2、种、 提纯 方法。其步骤是 ： 将经分离的食用菌子实体肉块 组织放置于空白试管离斜面培养基有 2 5 毫米 侧上方的无基与有基临界点， 菌丝先是在无培养 基环境下萌发， 当菌丝生长至接触培养基后， 菌丝 生长迅速、 旺盛， 将这种状态的菌丝通过提纯， 能 有效脱毒， 保持菌株稳定的优良品性。 本发明的菌 种制作过程工艺简单， 适用性强， 适用于大多食用 菌菌株的组织分离育种， 成功率能达到 99。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书2页 (10)申请公布号 CN 103070007 A 。
3、CN 103070007 A *CN103070007A* 1/1 页 2 1. 一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、 提纯方法， 其特征是工艺步骤如 下 ： (1) 组织分离 ： 选择优良健壮的食用菌子实体， 在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄交 界处切 0.5 1 厘米长的肉块组织。 (2) 试管培菌 ： 将肉块组织放置于空白 PDA 斜面试管的离斜面培养基有 2 5 毫米侧 上方的无基与有基临界点。 (3) 菌丝培养 ： 将接好种的试管放置在温度 20 25、 相对湿度 75 80环境下培 养菌丝。 (4) 转管提纯 ： 菌丝生长至接触斜面培养基后， 在无菌环境下挑取生长迅猛、 旺盛的。
4、菌 丝转接至空白 PDA 斜面试管， 进行菌种提纯。 权 利 要 求 书 CN 103070007 A 2 1/2 页 3 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、 提纯方法 技术领域 0001 本发明属于生物技术领域， 具体涉及到一种食用菌菌种的试管无基与有基临界点 育种、 提纯方法。 背景技术 0002 我国食用菌生产仍存在 “重产量、 轻质量” 的倾向， 致使一些食用菌产品在市场上 缺乏竞争力。 同时， 在菌种繁育方面的科研力量较为薄弱， 使菌种继代繁殖太多导致菌种活 力退化， 菌种的优劣， 直接影响到食用菌产品的产量和质量。注重优质、 高产、 抗病、 抗虫等 优良菌株的繁育， 是保证食用。
5、菌提高产品产量、 质量的必由之路， 也是提高食用菌生产水平 的重要环节。 0003 任何一个好的食用菌品种， 如果连续栽培或长期的保藏及转代过程中都会存在生 产性能变劣、 种性衰退的现象。所以对食用菌菌种进行分离与筛选、 脱毒提纯复壮， 可有效 防止品种的退化和变异， 也是食用菌栽培过程中的重中之重。 因此要定期引种或提纯复壮， 才能保证菌种质量及种性稳定， 从而为最终产量稳定打下基础。 当前， 各食用菌生产者为了 保证种性稳定， 大多采用定期组织分离、 严格筛选， 获得菌种， 通过这样的工艺来进行组织 分离、 提纯， 必须经过三次以上转管才能实现保证菌种质量及种性稳定。 0004 专利申请号。
6、为 98126599.5 的 “一种食用菌试管菌种生产转接方法” ， 本发明操作 方便， 快速， 省时， 省力， 随时可转接， 平均每人1小时转接不少于100支试管， 成活率99以 上， 污染率 0.5以下， 但该工艺不能有效的进行脱毒， 菌种质量不稳定。 0005 专利申请号为 200910259431.9 的 “利用原生质体再生技术进行食用菌菌种复壮 和脱毒的方法” ， 本发明而达到使食用菌复壮和脱毒的目的， 恢复食用菌的优良特性。但该 工艺十分复杂， 一般人掌握不了。 发明内容 0006 本发明的目的在于提供一种食用菌菌种的试管生产新工艺， 它克服了传统技术工 艺生产的菌种质量不稳定、 。
7、工艺十分复杂等缺点。所提供一种食用菌菌种的试管无基与有 基临界点育种、 提纯方法工艺。 0007 本发明是通过以下技术方案来实现的 ： 0008 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、 提纯方法， 其工艺步骤如下 ： 0009 1、 组织分离 ： 选择优良健壮的食用菌子实体， 在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄 交界处切 0.5 1 厘米长的肉块组织。 0010 2、 试管培菌 ： 将肉块组织放置于空白 PDA 斜面试管的离斜面培养基有 2 5 毫米 侧上方的无基与有基临界点。 0011 3、 菌丝培养 ： 将接好种的试管放置在温度 20 25、 相对湿度 75 80环境下 培养菌丝。 0012 。
8、4、 转管提纯 ： 菌丝生长至接触斜面培养基后， 在无菌环境下挑取生长迅猛、 旺盛的 说 明 书 CN 103070007 A 3 2/2 页 4 菌丝转接至空白 PDA 斜面试管， 进行菌种提纯。 0013 与现有的技术相比， 本发明具有以下优点 ： 0014 (1) 本发明工艺简单、 效果明显。 0015 (2) 本发明的创新点主要体现于菌丝先是在无培养基环境下萌发， 当菌丝生长至 接触培养基后， 菌丝生长迅速、 旺盛， 将这种状态的菌丝通过提纯， 能有效脱毒， 保持菌株稳 定的优良品性。 0016 (3) 本发明培育的菌种成功率能达到 99。 0017 (4) 本方明适用于大多食用菌菌株。
9、的组织分离， 并能有效的提纯、 脱毒。 具体实施方式 0018 下面结合实施例对本发明的方法进一步说明。 0019 食用菌菌种的试管无基与有基临界点育种、 提纯方法， 其工艺步骤如下 ： 0020 1、 组织分离 ： 选择优良健壮的食用菌子实体， 在无菌环境下将子实体菌盖与菌柄 交界处切 0.5 1 厘米长的肉块组织。 0021 2、 试管培菌 ： 将肉块组织放置于空白 PDA 斜面试管的离斜面培养基有 2 5 毫米 侧上方的无基与有基临界点。 0022 3、 菌丝培养 ： 将接好种的试管放置在温度 20 25、 相对湿度 75 80环境下 培养菌丝。 0023 4、 转管提纯 ： 菌丝生长至接触斜面培养基后， 在无菌环境下挑取生长迅猛、 旺盛的 菌丝转接至空白 PDA 斜面试管， 进行菌种提纯。 说 明 书 CN 103070007 A 4 。