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1、(10)申请公布号 CN 103865913 A (43)申请公布日 2014.06.18 CN 103865913 A (21)申请号 201410130287.X (22)申请日 2014.04.02 C12N 9/88(2006.01) C12N 9/42(2006.01) C12N 9/26(2006.01) C12N 9/18(2006.01) C12P 19/14(2006.01) C12P 19/02(2006.01) C07H 17/07(2006.01) C07H 1/08(2006.01) C07C 69/732(2006.01) C07C 67/48(2006.01) C。
2、07D 207/16(2006.01) (71)申请人 济南诺能生物工程有限公司 地址 250022 山东省济南市市中区阳光新路 69 号泉景鸿园商务大厦 623 室 (72)发明人 吴秀玉 宋迪 郭殿梁 (74)专利代理机构 济南舜源专利事务所有限公 司 37205 代理人 宋玉霞 (54) 发明名称 一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方 法 (57) 摘要 本发明公开了一种复合酶及其提取中草 药中有效成分的方法, 该复合酶由纤维素酶、 酸性淀粉酶和果胶酶组成 ; 1g 复合酶中含纤 维素酶 500-700U、 酸性淀粉酶 60-75U、 果胶酶 6000-7000U。该复合酶能同时提取中。
3、草药中两种 有效成分, 效果显著, 可用于提取益母草、 炙淫羊 藿和金银花中有效成分。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 8 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书8页 (10)申请公布号 CN 103865913 A CN 103865913 A 1/1 页 2 1. 一种复合酶, 其特征在于, 由纤维素酶、 酸性淀粉酶和果胶酶组成 ; 1g 复合酶中含纤 维素酶 500-700U、 酸性淀粉酶 60-75U、 果胶酶 6000-7000U。 2.根据权利要求1所述的一种复合酶, 其特征在于, 1g复合酶中含纤维素酶667U、。
4、 酸性 淀粉酶 66.7U、 果胶酶 6667U。 3. 根据权利要求 1 所述的一种复合酶, 其特征在于, 该复合酶用于提取益母草中的还 原糖和盐酸水苏碱 ; 或者提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷 ; 或者提取金银花中的还原 糖和绿原酸。 4. 如权利要求 3 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 包括 以下步骤 : (1) 将中草药粉碎成粉状 ; (2) 将中草药粉加入去离子水混合均匀, PH 调至 4.5, 得料液 ; (3) 将复合酶用甘油水溶液稀释得复合酶稀释液 ; (4) 将步骤 (2) 的料液预热, 加入复合酶稀释液, 酶解后过滤, 取滤液即可。 5. 根据。
5、权利要求 4 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 步 骤 (1) 中, 中草药粉碎至 40-200 目。 6. 根据权利要求 4 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 步 骤 (3) 中, 甘油水溶液浓度为 20wt, 将复合酶用甘油水溶液稀释至 0.0020g-0.5g/ml, 得 复合酶稀释液。 7. 根据权利要求 6 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 当 中草药为益母草时, 复合酶稀释液浓度为 0.025-0.30g/ml ; 当中草药为炙淫羊藿时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.28g/ml ; 当中草药为。
6、金银花时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.3g/ml。 8. 根据权利要求 7 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 复 合酶稀释液的浓度为 0.25g/ml。 9. 根据权利要求 4 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 步骤 (4) 中, 将料液于水浴锅中预热 2min, 边搅拌边加入酶液, 酶解温度为 40-55, 时间 4-7h。 10. 根据权利要求 4 所述的一种复合酶提取中草药中有效成分的方法, 其特征在于, 步 骤 (4) 中, 酶解温度为 50, 时间 5h。 权 利 要 求 书 CN 103865913 A 2 1/8 页。
7、 3 一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法 技术领域 0001 本发明涉及技术领域, 特别是涉及一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方 法。 背景技术 0002 从中草药中提取有效成分的方法有多种, 其中酶提取法是较新的方法。 其中, 常用 的酶有纤维素酶、 果胶酶、 蛋白酶和淀粉酶。通常来说, 由多种酶组成的复合酶的酶解效果 要优于单独使用一种酶的酶解效果。 但是, 由于中药材的品种不同, 其生物体细胞结构和有 效成分有很大的差异 ; 而酶又具有单一性, 复合酶的组成、 配比决定了其功效。 所以, 也就是 说, 复合酶的酶解效果并不一定优于单一酶的酶解效果, 因所要酶解的中药材而异。例如。
8、, 由纤维素酶和果胶酶组成的复合酶在提取金银花中绿原酸中的酶解效果与单一的纤维素 酶在提取金银花中绿原酸中的酶解效果相比, 并没有明显差异。 另一方面, 目前对酶法提取 中药成分的研究主要还停留在针对某些单个具体提取对象。也就是说, 目前只能针对一种 中药材进行研究, 获得仅适用于该中药材提取特定成分的复合酶。 发明内容 0003 本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种复合酶及其提取中草药中有 效成分的方法。该复合酶能同时提取中草药中两种有效成分, 效果显著, 可用于提取益母 草、 炙淫羊藿和金银花中有效成分。 0004 本发明的一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法技术方案为, 该复。
9、合酶 由纤维素酶、 酸性淀粉酶和果胶酶组成 ; 1g 复合酶中含纤维素酶 500-700U、 酸性淀粉酶 60-75U、 果胶酶 6000-7000U。 0005 1g 复合酶中含纤维素酶 667U、 酸性淀粉酶 66.7U、 果胶酶 6667U。 0006 该复合酶用于提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱 ; 或者提取炙淫羊藿中的还原 糖和淫羊藿苷 ; 或者提取金银花中的还原糖和绿原酸。 0007 该复合酶提取中草药中有效成分的方法, 包括以下步骤 : (1) 将中草药粉碎成粉状 ; (2) 将中草药粉加入去离子水混合均匀, PH 调至 4.5, 得料液 ; (3) 将复合酶用甘油水溶液稀释得复。
10、合酶稀释液 ; (4) 将步骤 (2) 的料液预热, 加入复合酶稀释液, 酶解后过滤, 取滤液即可。 0008 步骤 (1) 中, 中草药粉碎至 40-200 目。 0009 步骤 (3)中, 甘油水溶液浓度为 20wt, 将复合酶用甘油水溶液稀释至 0.0020g-0.5g/ml, 得复合酶稀释液。 0010 当中草药为益母草时, 复合酶稀释液浓度为 0.025-0.30g/ml ; 当中草药为炙淫羊藿时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.28g/ml ; 当中草药为金银花时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.3g/ml。 说 明 书 CN 103865913 A 3 2/8 页。
11、 4 0011 优选的, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.25g/ml。 0012 步骤 (4)中, 将料液于水浴锅中预热 2min, 边搅拌边加入酶液, 酶解温度为 40-55, 时间 4-7h。 0013 优选的, 步骤 (4) 中, 酶解温度为 50, 时间 5h。 0014 每克益母草提取 35.7-181mg 还原糖和 5.6-10.8mg 盐酸水苏碱 ; 每克炙淫羊藿提 取 38.85-97mg 还原糖和 8.4-10.8g 淫羊藿苷 ; 每克金银花提取 80.13-420.57mg 还原糖和 13.6-16.8mg 绿原酸。 0015 优选的, 具体步骤如下 : 称取中草药 5.0。
12、00g(粉状) 置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀 ; 然后加入 0.5mL 1mol/L 的硫酸溶液将 pH 值调至 4.5, 得料液。取复合酶 (每克复合酶中含有纤维素酶 667u、 酸性淀粉酶 66.7u 和果胶酶 6667u) 用 20wt甘油溶解 稀释稀释至 1ml, 得酶液。 0016 将料液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静置保温 5h ; 然后 过滤, 取滤液。 0017 其中, 1g 中草药需要复合酶稀释液 1ml。 0018 本发明的有益效果为 : 本发明的复合酶破坏中草药的细胞壁, 降低粘度, 提高中草 药浸提收得。
13、率, 能够同时用于提取益母草、 炙淫羊藿和金银花中有效成分 ; 从而克服了一种 特定组成的复合酶只能用于一种中草药的技术难题。 另外, 采用本发明的复合酶, 能够同时 提取上述每种中药材中两种有效成分。具体来说, 能够提取益母草中的还原糖和盐酸水苏 碱 ; 能够提取炙淫羊藿中的还原糖和淫羊藿苷 ; 能够提取金银花中的还原糖和绿原酸 ; 且 提取率高。 0019 本发明的方法, 简单易操作, 能同时提取两种有效成分, 提取率显著提高。 0020 经检测, 采用本发明方法, 每克益母草可以提取 35.7-181mg 还原糖和 5.6-10.8mg 盐酸水苏碱 ; 每克炙淫羊藿可以提取 35.04-。
14、97mg 还原糖和 8.4-10.8g 淫羊藿苷 ; 每克金银 花为可以提取 80.13-420.57mg 还原糖和 13.6-16.8mg 绿原酸。与未采用酶水解或采用纤 维素酶和果胶酶组成的复合酶水解相比, 每种原料中的两种有效成分的提取率均大幅度提 高, 提取率提高了 16.4-495。 0021 由于复合酶的浓度会对酶的活性产生影响, 从而影响整个提取过程 ; 而不同原料 其生物体细胞结构和有效成分有很大的差异 ; 所需要的最优复合酶浓度不同。 因此, 所以上 述方法中, 当原料为益母草时, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.025-0.30g/ml ; 此时, 还原糖 提取率为 57.3。
15、-181mg/g, 盐酸水苏碱的提取率为 8.4-10.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液 的优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 181mg/g, 盐酸水苏碱的提取率为 10.8mg/ g。 0022 当原料为炙淫羊藿时, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.025-0.28g/ml ; 此时, 还原 糖提取率为 38.85-97mg/g, 淫羊藿苷的提取率为 9.6-10.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液 的优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 97mg/g, 淫羊藿苷的提取率为 10.8mg/g。 0023 当原料为金银花时, 复合酶稀释液的优选浓。
16、度为 0.025-0.3g/ml ; 此时, 还原糖提 取率为 168.3-420.57mg/g, 绿原酸的提取率为 14.8-16.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液的 优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 420.57mg/g, 绿原酸的提取率为 16.8mg/g。 0024 具体实施方式 : 说 明 书 CN 103865913 A 4 3/8 页 5 为了更好地理解本发明, 下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案。 0025 本发明中的果胶酶、 纤维素酶、 酸性淀粉酶为 : 果胶酶 QB1502-92 : 1g 酶粉在 50、 pH3.5 的条件下, 1h 分解。
17、果胶产生 1mg 半乳糖醛酸 为一个酶活力单位。 0026 纤维素酶 NY/T912-2004 : 在 37、 pH 为 5.50 的条件下, 每分钟从浓度为 4mg/mL 的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放 1mol 还原糖所需要的酶量为一个酶活力单位 (U) 。 0027 酸性淀粉酶 : 1g 酶, 于 40、 pH3.0 条件, 1min 液化 1mg 可溶性淀粉, 即为 1 个酶活 力单位, 以 u/ g 表示。 0028 本发明的一种复合酶及其提取中草药中有效成分的方法, 该复合酶由纤维素酶、 酸性淀粉酶和果胶酶组成 ; 1g 复合酶中含纤维素酶 500-700U、 酸性淀粉酶 60-7。
18、5U、 果胶酶 6000-7000U。 0029 该复合酶用于提取益母草中的还原糖和盐酸水苏碱 ; 或者提取炙淫羊藿中的还原 糖和淫羊藿苷 ; 或者提取金银花中的还原糖和绿原酸。 0030 该复合酶提取中草药中有效成分的方法, 包括以下步骤 : (1) 将中草药粉碎成粉状 ; (2) 将中草药粉加入去离子水混合均匀, PH 调至 4.5, 得料液 ; (3) 将复合酶用甘油水溶液稀释得复合酶稀释液 ; (4) 将步骤 (2) 的料液预热, 加入复合酶稀释液, 酶解后过滤, 取滤液即可。 0031 步骤 (1) 中, 中草药粉碎至 40-200 目。 0032 步骤 (3)中, 甘油水溶液浓度为。
19、 20wt, 将复合酶用甘油水溶液稀释至 0.0020g-0.5g/ml, 得复合酶稀释液。 0033 当中草药为益母草时, 复合酶稀释液浓度为 0.025-0.30g/ml ; 当中草药为炙淫羊藿时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.28g/ml ; 当中草药为金银花时, 复合酶稀释液的浓度为 0.025-0.3g/ml。 0034 步骤 (4)中, 将料液于水浴锅中预热 2min, 边搅拌边加入酶液, 酶解温度为 40-55, 时间 4-7h。 0035 实施例中提及还原糖的测定, 具体方法为 : 葡萄糖溶液 : 称取无水葡萄糖 1.000g, 加蒸馏水溶解, 定容至 100ml D。
20、NS 试剂 : 称取 3,5- 二硝基水杨酸 3.15g (化学纯) , 加水 500ml, 搅拌 5s, 水浴至 45。 然后逐步加入 100ml 氢氧化钠溶液, 同时不断搅拌, 直到溶液清澈透明 (注意 : 在加入氢氧 化钠过程中, 溶液温度不要超过 48。 ) 。再逐步加入四水酒石酸钾钠 91.0g、 苯酚 2.50g 和 无水亚硫酸钠2.50g。 继续45水浴加热, 同时补加水300ml, 不断搅拌, 直到加入的物质完 全溶解。停止加热, 冷却至室温后, 用水定容至 1000ml。储存在棕色瓶中, 避光保存。室温 下存放 7 天后可以使用, 有效期为 6 个月。 0036 吸取蒸馏水4。
21、.0ml, 加入DNS试剂5.0ml, 沸水浴加热5min。 用自来水冷却至室温, 用水定容至 25.0ml, 制成标准空白样。 0037 取 2ml 上清液加入 2ml 蒸馏水、 5mlDNS 试剂混匀后沸水浴 5min, 用自来水冷却至 室温, 加水定容至 25ml 后混匀。以标准空白样为空白对照, 在 540nm 处测定吸光度。 0038 标准曲线的绘制 说 明 书 CN 103865913 A 5 4/8 页 6 分别吸取葡萄糖溶液 1.00、 2.00、 3.00、 4.00、 5.00、 6.00 和 7.00ml, 分别用蒸馏水定容 至 100ml, 配制成浓度为 0.100.7。
22、0mg/ml 葡萄糖标准溶液。 0039 分别吸取上述浓度系列的葡萄糖标准溶液各 2.00ml (做二个平行) , 分别加入到刻 度试管中, 再分别加入 2ml 水和 5mlDNS 试剂。电磁振荡 3s, 沸水浴加热 5min。然后用自来 水冷却到室温, 再用水定容至 25ml。以标准空白样为对照调零, 在 540nm 处测定吸光度 OD 值 A。 0040 以葡萄糖浓度为 Y 轴、 吸光度 OD 值为 X 轴, 绘制标准曲线。每次新配制 DNS 试剂 均需要重新绘制标准曲线。 0041 还原糖的计算 : XD = AK + CO XD 试样稀释液中的还原糖浓度, mg/ml ; A 反应液的。
23、吸光度 ; K 标准曲线的斜率 ; CO 标准曲线的截距。 0042 实施例 称取益母草5.000g粉碎至100目置于200ml烧杯中, 加入200mL的去离子水摇匀 ; 然后 加入 0.5mL 1mol/L 的硫酸溶液将 pH 值调至 4.5, 得益母草液。取复合酶 (每克复合酶中含 有纤维素酶 667u、 酸性淀粉酶 66.7u 和果胶酶 6667u) 用 20wt甘油溶解稀释稀释至 1ml, 得酶液。 0043 将益母草液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静置保温 5h ; 然后过滤, 取滤液。 0044 上述操作共重复进行 5 次, 每次复合酶的用量均不同。
24、, 依次为 0g、 0.0025g、 0.025g、 0.25g 和 0.3g。 0045 分别检测将 5 次操作所获取的滤液中的原糖含量和盐酸水苏碱含量。 0046 检测结果如表 1。 0047 表 1 。 0048 实施例 2 称取益母草 5.000g 粉碎至 180 目置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀 ; 然 后加入 0.5mL 1mol/L 的硫酸溶液将 pH 值调至 4.5, 得益母草液。取复合酶用 20wt甘油 说 明 书 CN 103865913 A 6 5/8 页 7 溶解稀释稀释至 1ml, 得酶液。 0049 将益母草液于 50 C 水浴锅中预热。
25、 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静置保温 5h ; 然后过滤, 取滤液。 0050 上述操作共重复进行 3 次, 每次复合酶用量 0.25g, 复合酶中的各种酶含量均不 同 : 每克复合酶中含有纤维素酶 300u、 酸性淀粉酶 100u 和果胶酶 200u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 500u、 酸性淀粉酶 70u 和果胶酶 6500u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 700u、 酸性淀粉酶 60u 和果胶酶 6000u。 0051 分别检测原糖含量和盐酸水苏碱含量。 0052 检测结果如表 2。 0053 表 2 。 0054 实施例 3 称取炙淫羊藿 5.000g 粉碎至 200 目。
26、置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀, 然后加入 0.25mL 1mol/L 的硫酸溶液将 pH 值调至 4.5, 得炙淫羊藿液 ; 取复合酶 (每克复合 酶中含有纤维素酶 667u、 酸性淀粉酶 66.7u 和果胶酶 6667u) 用 20wt甘油溶解稀释稀释 至 1ml, 得酶液 ; 将炙淫羊藿液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静置 保温 5h ; 然后过滤, 滤液。 0055 上述操作共重复进行 5 次, 每次复合酶的用量均不同, 依次为 0g、 0.0025g、 0.025g、 0.25g 和 0.3g。 0056 分别检测原糖含。
27、量和淫羊藿苷含量。 0057 检测结果如表 3。 0058 表 3 说 明 书 CN 103865913 A 7 6/8 页 8 。 0059 实施例 4 称取炙淫羊藿 5.000g 粉碎至 200 目置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀, 然后加入 0.25mL 1mol/L 的硫酸溶液将 pH 值调至 4.5, 得炙淫羊藿液 ; 取复合酶用 20wt 甘油溶解稀释稀释至 1ml, 得酶液 ; 将炙淫羊藿液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅 速加入酶液, 静置保温 5h ; 然后过滤, 滤液。 0060 上述操作共重复进行 3 次, 每次复合酶用量 0。
28、.25g, 复合酶中的各种酶含量均不 同 : 每克复合酶中含有纤维素酶 300u、 酸性淀粉酶 100u 和果胶酶 200u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 500u、 酸性淀粉酶 70u 和果胶酶 6500u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 700u、 酸性淀粉酶 60u 和果胶酶 6000u。 0061 分别检测原糖含量和淫羊藿苷含量。 0062 检测结果如表 4 所示 : 表 4 。 0063 实施例 5 称取金银花 5.000g 粉碎至 40 目置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀, 然后 加入 0.2mL 1mol/L 的硫酸溶液将金银花液的 pH 值调至 4.5。
29、, 得金银花液 ; 取复合酶 (每克 复合酶中含有纤维素酶 667u、 酸性淀粉酶 66.7u 和果胶酶 6667u) 用 20wt甘油溶解稀释 稀释至 1ml, 得酶液 ; 将金银花液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静 置保温 5h ; 然后过滤, 滤液。 0064 上述操作共重复进行 5 次, 每次复合酶的用量均不同, 依次为 0g、 0.0025g、 0.025g、 0.25g 和 0.3g。 说 明 书 CN 103865913 A 8 7/8 页 9 0065 分别检测将 5 次操作所获取的滤液中的还原糖、 绿原酸, 结果如表 5。 0066 表 5 。
30、。 0067 实施例 6 称取金银花 5.000g 粉碎至 40 目置于 200ml 烧杯中, 加入 200mL 的去离子水摇匀, 然后 加入 0.2mL 1mol/L 的硫酸溶液将金银花液的 pH 值调至 4.5, 得金银花液 ; 取复合酶 (每克 复合酶中含有纤维素酶 667u、 酸性淀粉酶 66.7u 和果胶酶 6667u) 用 20wt甘油溶解稀释 稀释至 1ml, 得酶液 ; 将金银花液于 50 C 水浴锅中预热 2min, 边搅拌边迅速加入酶液, 静 置保温 5h ; 然后过滤, 滤液。 0068 上述操作共重复进行 3 次, 每次复合酶用量 0.25g, 复合酶中的各种酶含量均不。
31、 同 : 每克复合酶中含有纤维素酶 300u、 酸性淀粉酶 100u 和果胶酶 200u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 500u、 酸性淀粉酶 70u 和果胶酶 6500u ; 每克复合酶中含有纤维素酶 700u、 酸性淀粉酶 60u 和果胶酶 6000u。 0069 分别检测原糖含量和绿原酸含量。 0070 检测结果如表 6 所示 : 表 6 。 0071 由此可见, 采用本发明方法, 每克益母草可以提取 35.7-181mg 还原糖和 5.6-10.8mg 盐酸水苏碱 ; 每克炙淫羊藿可以提取 35.04-97mg 还原糖和 8.4-10.8g 淫羊藿 苷 ; 每克金银花为可以提取 80.。
32、13-420.57mg 还原糖和 13.6-16.8mg 绿原酸。与未采用酶水 解或采用纤维素酶和果胶酶组成的复合酶水解相比, 每种原料中的两种有效成分的提取率 说 明 书 CN 103865913 A 9 8/8 页 10 均大幅度提高, 提取率提高了 16.4-495。 0072 由于复合酶的浓度会对酶的活性产生影响, 从而影响整个提取过程 ; 而不同原料 其生物体细胞结构和有效成分有很大的差异 ; 所需要的最优复合酶浓度不同。 因此, 所以上 述方法中, 当原料为益母草时, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.025-0.30g/ml ; 此时, 还原糖 提取率为 57.3-181mg/g, 。
33、盐酸水苏碱的提取率为 8.4-10.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液 的优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 181mg/g, 盐酸水苏碱的提取率为 10.8mg/ g。 0073 当原料为炙淫羊藿时, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.025-0.28g/ml ; 此时, 还原 糖提取率为 38.85-97mg/g, 淫羊藿苷的提取率为 9.6-10.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液 的优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 97mg/g, 淫羊藿苷的提取率为 10.8mg/g。 0074 当原料为金银花时, 复合酶稀释液的优选浓度为 0.025-0.3g/ml ; 此时, 还原糖提 取率为 168.3-420.57mg/g, 绿原酸的提取率为 14.8-16.8mg/g。最优选的, 复合酶稀释液的 优选浓度为 0.25g/ml ; 此时, 还原糖提取率为 420.57mg/g, 绿原酸的提取率为 16.8mg/g。 说 明 书 CN 103865913 A 10 。