《一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法.pdf（9页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410376828.7 (22)申请日 2014.08.01 A01H 4/00(2006.01) (71)申请人 江西省林业科学院 地址 330032 江西省南昌市昌北区枫林西大 道 1629 号江西省林业科学院科研楼 101 室 (72)发明人 江香梅 戴小英 章挺 肖复明 杨海宽 汪信东 伍艳芳 邱凤英 宋晓琛 王召滢 (74)专利代理机构 广州科粤专利商标代理有限 公司 44001 代理人 刘明星 (54) 发明名称 一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法 (57) 摘要 本发明公开一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁 育方法。本发明从。
2、龙脑樟天然变异中选育出龙脑 含量达 90以上的龙脑樟个体， 采集当年抽梢的 半木质化茎段作为外植体， 经消毒处理后， 建立无 菌系， 再通过芽的初生诱导、 增殖培养、 生根培养 等， 形成再生植株。本发明筛选出了高龙脑含量 的龙脑樟组培繁殖各个环节的适宜配方及培养条 件， 成功的获得了高龙脑含量的龙脑樟再生植株。 因此本发明有效的解决了龙脑含量 90以上的 龙脑樟组培繁育中出现褐化和死苗的技术难题， 将为优良龙脑樟原料林基地的建设提供种苗保 障。 (51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 (10)申请公布号 CN 。
3、104365476 A (43)申请公布日 2015.02.25 CN 104365476 A 1/1 页 2 1. 一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法， 其特征在于， 包括以下步骤 ： a、 无菌系的建立 ： 以叶精油中龙脑含量 90 97的高龙脑含量龙脑樟母树当年生 枝条作为外植体， 经灭菌后， 接种于诱导培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/ 天， 温度 20 30下培养， 直到长出初生芽， 所述的诱导培养基每升含有 ： 6-BA5.0 7.0mg、 IBA2.0 3.0mg、 白糖 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 。
4、b、 增殖培养 ： 将初生芽接种到第一增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温 度 23 28下增殖培养， 继代若干个周期后， 待芽基部分化出不定芽并有白色愈伤组织产 生时， 再接种到第二增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖 培养， 获得增殖苗， 所述的第一增殖培养基每升含有 ： 6-BA 5.0 7.0mg、 IBA2.0 3.0mg、 卡拉胶 3.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 所述的第二增殖培养基每升含有 ： 6-BA 0.53.5mg、 IBA2.03.0mg、 VB21030mg、 卡。
5、拉胶3.0g， 余量为改良MS培养基， pH6.8 7.0 ； c、 生根培养 ： 剪取增殖苗中具有 4 5 片叶且叶面完全展开、 光滑发亮的无根小苗， 接 入生根培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/d， 温度 20 30下进行生根培养， 得 到生根苗， 所述的生根培养基每升含有 ： NAA0.5 1.5 mg、 IBA0.1 1.0mg、 白糖 30g、 卡拉 胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； d、 组培苗移栽 ： 将生根苗洗去基部培养基后再移植到基质中， 移植后浇足定根水， 常规 育苗管理， 满足水肥供应， 长出高龙脑含量的龙脑樟幼。
6、苗， 所述的基质是由红壤心土和草木 灰按照质量比 3:1 的比例混合搅拌均匀而成， ； 所述的改良 MS 培养基， 每升含有 ： (1) 大量元素 ： 硝酸钾 1900mg， 硝酸铵 800mg， 硫酸 镁 7H2O 370 mg， 硝酸钙 4H2O 200mg， 氯化钙 2H2O 437mg， 磷酸二氢钾 170mg， (2) 铁 盐 ： 硫酸亚铁 7H2O 27.8mg， 乙二胺四乙酸二钠 37.3mg ； (3) 微量元素 ： 硼酸 10mg， 硫酸锰 H2O 25mg， 硫酸锌7H2O 10mg， 钼酸钠2H2O 0.25mg， 硫酸铜5H2O 0.025mg ； (4)有机 成分 ：。
7、 肌醇 100mg， 抗坏血酸 10mg， 盐酸硫胺素 0.5mg， 烟酸 5mg， 盐酸吡哆辛 0.5mg， 甘氨酸 2mg， 余量为水。 2. 根据权利要求 1 所述的高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法， 其特征在于， 所述的步 骤 b 的增殖培养中的继代若干个周期， 其为继代 1 2 个周期。 权 利 要 求 书 CN 104365476 A 2 1/5 页 3 一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法 技术领域 ： 0001 本发明属于植物组织培养领域， 具体涉及一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方 法。 背景技术 ： 0002 龙脑樟是从樟树(Cinnamonun Camphora(I)Presl。
8、)中发现的枝叶中富含天然右旋 龙脑 ( 天然冰片 ) 的一种化学类型， 可从龙脑樟新鲜叶片中提取精油后加工成天然右旋龙 脑。天然龙脑是一种名贵中药和高级香料， 具有抗菌、 消炎、 收敛、 生肌、 抗妊娠、 止痛等作 用， 在医药和香料产业具有广泛的应用前景。 0003 由龙脑樟自由授粉种子繁育的半同胞后代， 分化现象极其严重。其中可以发现叶 精油含量高、 精油中主成分龙脑含量达到 90 97以上的优良个体。在优良个体发现 后， 大力扩大繁殖以便在生产上应用， 则是必须首先需决的关键技术问题。 组培繁殖就是高 龙脑含量龙脑樟的高效快速繁殖途径之一。 0004 目前， 有关龙脑樟组培繁殖技术方面没。
9、有公开专利申请， 仅有 2 篇公开发表的论 文 ： 一是 2010 年由陈美兰， 叶正良， 欧阳少林等发表在 中国中药 杂志 35 卷第 5 期上的 “龙脑樟愈伤组织的诱导及龙脑的产生” ， 该论文采用龙脑樟嫩叶、 茎做外植体， 目的旨在比 较取材部位不同的外植体诱导的愈伤组织是否能生产出龙脑， 而未进行植株再生研究。二 是 2011 年刘秀芳、 林文革、 苏明华等发表在 植物研究 杂志 31 卷第 5 期上的 “龙脑樟组培 育苗及苗木工厂化生产技术研究” ， 该论文以树干基部萌芽条为外植体开展了龙脑樟组培 快繁技术研究， 其关键技术在于以降低 MS 培养中铵盐的含量 (NH4NO3 降为 8。
10、25mg/L) 作为 基本培养基， 在附加 6-BA2.0mg/L+NAA0.05mg/L( 增殖 ) 和 1/2 改良 MS+IBA 0.5mg/L+IAA 0.4mg/L ( 生根 ) 的外源激素调控下获得了增殖培养条件和再生植株。该论文没有明确外 植体材料的龙脑含量。 而事实上， 龙脑樟不同基因型或龙脑含量的高低不同， 在组培繁殖条 件筛选中起关键作用。 龙脑含量越高， 增殖培养过程中化感效应越明显， 极易导致增殖苗因 培养基中龙脑含量过高而褐化或死亡。 发明内容 ： 0005 本发明的目的是提供一种高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法， 利用该方法能够在 尽可能短的时间内快速大量获得高龙脑含。
11、量的龙脑樟的优质种苗。 0006 本发明的高龙脑含量的龙脑樟组培繁育方法， 其特征在于， 包括以下步骤 ： 0007 a、 无菌系的建立 ： 以叶精油中龙脑含量 90 97的高龙脑含量龙脑樟母树当 年生枝条作为外植体， 经灭菌后， 接种于诱导培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/ 天， 温度 20 30下培养， 直到长出初生芽， 所述的诱导培养基每升含有 ： 6-BA 5.0 7.0mg、 IBA2.0 3.0mg、 白糖 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 在初 代增殖培养过程中， 以芽生芽的方式及丛生芽的方式进行增殖， 削。
12、弱从愈伤组织中分化芽 的能力。此方法能最大限度地保持亲本遗传特性。 说 明 书 CN 104365476 A 3 2/5 页 4 0008 b、 增殖培养 ： 将初生芽接种到第一增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 继代若干个周期后， 待芽基部分化出不定芽并有白 色愈伤组织产生时， 再接种到第二增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 获得增殖苗， 所述的第一增殖培养基每升含有 ： 6-BA 5.0 7.0mg、 IBA2.03.0mg、 卡拉胶3.0g， 其余为改良MS培养基， pH6.8。
13、7.0 ； 所述的第二增殖培养基 每升含有 ： 6-BA 0.5 3.5mg、 IBA2.0 3.0mg、 VB210 30mg、 卡拉胶 3.0g， 余量为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 增殖培养 基可使增殖培养过程中产生的不定芽数和有效苗数 ( 高 3 4cm， 叶宽 1 2cm) 得到均衡发展， 既减少愈伤组织产生， 又减缓愈伤组织褐化变黑。 0009 c、 生根培养 ： 剪取增殖苗中具有 4 5 片叶且叶面完全展开、 光滑发亮的无根小 苗， 接入生根培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/d， 温度 20 30下进行生根培 养， 得到生根苗， 所述的生。
14、根培养基每升含有 ： NAA0.5 1.5mg、 IBA0.1 1.0mg、 白糖 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 一般培养 12 15 天后， 能产生 4 5 条根系， 小苗长成完整植株。 0010 d、 组培苗移栽 ： 将生根苗洗去基部培养基后再移植到基质中， 移植后浇足定根水， 常规育苗管理， 满足水肥供应， 长出高龙脑含量的龙脑樟幼苗， 所述的基质是由红壤心土和 草木灰按照质量比 3:1 的比例混合搅拌均匀而成， 该基质配方取材方便， 价格低廉， 保水性 强， 病虫害少， 利于应用 ； 0011 上述培养基都是将除改良 MS 培养基之外。
15、的组份加入到改良 MS 培养基中， 混合均 匀后再灭菌备用。 0012 所述的改良MS培养基， 每升含有 ： (1)大量元素 ： 硝酸钾1900mg， 硝酸铵800mg， 硫 酸镁 7H2O 370mg， 硝酸钙 4H2O 200mg， 氯化钙 2H2O 437mg， 磷酸二氢钾 170mg， (2) 铁 盐 ： 硫酸亚铁 7H2O 27.8mg， 乙二胺四乙酸二钠 37.3mg ； (3) 微量元素 ： 硼酸 10mg， 硫酸锰 H2O 25mg， 硫酸锌7H2O 10mg， 钼酸钠2H2O 0.25mg， 硫酸铜5H2O 0.025mg ； (4)有机 成分 ： 肌醇 100mg， 抗坏血。
16、酸 10mg， 盐酸硫胺素 0.5mg， 烟酸 5mg， 盐酸吡哆辛 0.5mg， 甘氨酸 2mg， 余量为水， 其是将除水之外的成分加入到水中， 搅拌均匀， 溶解完全后即为改良 MS 培 养基。该配方在高龙脑含量的龙脑樟增殖培养过程中， 能满足其基本生长需要， 提 高大量 元素中钙的含量可加强芽体木质化程度， 且对减少不定芽玻璃化现象效果明显 ； 增加有机 成分的含量， 可有效缓解愈伤组织褐化。 此配方是减少龙脑樟组培苗生长过程玻化、 褐化现 象发生的关键因素之一。 0013 所述的步骤 b 的增殖培养中的继代若干个周期， 优选为继代 1 2 个周期。 0014 龙脑樟是樟树中叶精油富含天然。
17、右旋龙脑 ( 天然冰片 ) 的一种特异化学类型， 在 医药和香料产业中具有广泛应用前景。但龙脑樟资源稀少， 而个体间差异却极大， 因此， 筛 选出叶精油含量高、 精油中主成分龙脑含量高的优良品系， 并建立其高效无性繁育技术体 系， 是最大限度保持母本特性并能快速、 大量获得优质种苗的有效途径， 而组培繁殖技术当 首先。 前人对龙脑樟的组培繁殖技术有过尝试， 一是直接诱导愈伤组织生产龙脑， 二是在组 织培养过程中未解决基部褐化问题， 最终导致在增殖培养过程中死苗的现象发生。 事实上， 母本材料的龙脑含量越高， 越容易出现褐化和死苗现象。本发明从龙脑樟天然变异中选育 出龙脑含量达 90以上的龙脑樟。
18、个体， 采集当年抽梢的半木质化茎段作为外植体， 经消毒 处理后， 建立无菌系， 再通过芽的初生诱导、 增殖培养、 生根培养等， 形成再生植株。本发明 说 明 书 CN 104365476 A 4 3/5 页 5 筛选出了高龙脑含量的龙脑樟组培繁殖各个环节的适宜配方及培养条件， 成功的获得了高 龙脑含量的龙脑樟再生植株。 因此本发明有效的解决了龙脑含量90以上的龙脑樟组培繁 育中出现褐化和死苗的技术难题， 将为优良龙脑樟原料林基地的建设提供种苗保障。 附图说明 ： 0015 图 1 是龙脑樟初生芽 ； 0016 图 2 是龙脑樟增殖瓶苗 ； 0017 图 3 是龙脑樟组培生根苗 ； 0018 图。
19、 4 是龙脑樟组培移栽苗。 具体实施方式 ： 0019 以下实施例是对本发明的进一步说明， 而不是对本发明的限制。 0020 实施例 1 ： 0021 a、 无菌系的建立 ： 以叶精油中龙脑含量 90 97的高含量龙脑樟母树当年生 枝条作为外植体， 剪去叶片及顶芽， 取顶芽下部含有 4 5 个腋芽的茎段， 用洗涤剂清洗表 面， 在超净工作台上用酒精浸过 30s 后， 先用 5次氯酸钠溶液灭菌 6min 后， 再用 0.1的 升汞消毒 5 6min， 之后用无菌水冲洗 5 6 遍， 剪去茎段两端约 0.5cm， 视节间长短， 将 茎段剪成带 1 2 个腋芽的小段， 接种于诱导培养基中， 在光照强。
20、度 2000 3000Lux， 12h/ 天， 温度2030下培养， 培养约1周后， 茎段上的腋芽开始膨大， 继而慢慢长出叶片， 未被 污染的外植体即可作为进一步培养， 直到长出初生芽 ( 图 1)， 所述的诱导培养基每升含有 ： 6-BA 5.0mg、 IBA2.0mg、 白糖 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 初芽 诱导率可达 85 90。 0022 b、 增殖培养 ： 将初生芽接种到第一增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 培养周期 40d， 继代 2 周期后， 待芽基部分化出多个不 定。
21、芽并有少量白色愈伤组织产生时， 再接种到第二增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 获得增殖苗 ( 图 2)， 所述的第一增殖培养基每升含 有 ： 6-BA 5.0mg、 IBA2.0mg、 卡拉胶 3.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 所述的第二 增殖培养基每升含有 ： 6-BA0.5mg、 IBA2.0mg、 VB210mg、 卡拉胶 3.0g， 余量为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 增殖培养基可使增殖培养过程中产生的不定芽数和有效苗数 ( 高 3 4cm， 叶宽 1 2cm) 得到均衡发展， 既减。
22、少 愈伤组织产生， 又减缓愈伤组织褐化变黑 ； 每生长周 期增殖系数可达 6 以上 ； 0023 c、 生根培养 ： 剪取增殖苗中具有 4 5 片叶且叶面完全展开、 光滑发亮的无根小 苗， 接入生根培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/d， 温度 20 30下进行生根培 养， 得到生根苗(图3)， 所述的生根培养基每升含有 ： NAA0.5mg、 IBA0.1mg、 白糖30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 一般培养 12 15 天后， 生根率达 95以上， 根 系数量 4 5 条， 小苗长成完整植株。 0024 d、 组培苗移。
23、栽 ： 用粉碎机把红壤心土粉碎成细小颗粒， 按 3 质量份红壤心土和 1 质量份草木灰的比例混合搅拌均匀后， 作为龙脑樟组培苗移栽的基质， 用直径和高度为 6cm8cm 左右的杯状营养袋装填基质。将生根苗洗去基部培养基后放到筛盘中滤干水， 即 说 明 书 CN 104365476 A 5 4/5 页 6 可移栽到营养袋的基质中， 栽完后浇足定根水， 使基质与苗木根系紧密融合。 一周内用雾状 喷水器每天给叶面补充水分 3 5 次， 之后每天补水 1 2 次。1 个月后待叶片光滑平整 时， 可适时适量喷施叶面肥， 进入常规育苗管理， 得到高龙脑含量的龙脑樟的可用于移栽的 幼苗 ( 图 4)。 00。
24、25 所述的改良MS培养基， 每升含有 ： (1)大量元素 ： 硝酸钾1900mg， 硝酸铵800mg， 硫 酸镁 7H2O 370mg， 硝酸钙 4H2O 200mg， 氯化钙 2H2O 437mg， 磷酸二氢钾 170mg， (2) 铁 盐 ： 硫酸亚铁 7H2O 27.8mg， 乙二胺四乙酸二钠 37.3mg ； (3) 微量元素 ： 硼酸 10mg， 硫酸锰 H2O 25mg， 硫酸锌7H2O 10mg， 钼酸钠2H2O 0.25mg， 硫酸铜5H2O 0.025mg ； (4)有机 成分 ： 肌醇 100mg， 抗坏血酸 10mg， 盐酸硫胺素 0.5mg， 烟酸 5mg， 盐酸吡哆。
25、辛 0.5mg， 甘氨酸 2mg， 余量为水。 该配方在高龙脑含量的龙脑樟增殖培养过程中， 能满足其基本生长需要， 提 高大量元素中钙的含量可加强芽体木质化程度， 且对减少不定芽玻璃化现象效果明显 ； 增 加有机成分的含量， 可有效缓解愈伤组织褐化。此配方是减少龙脑樟组培苗生长过程 玻 化、 褐化现象发生的关键因素之一。 0026 实施例 2 ： 0027 a、 无菌系的建立 ： 以叶精油中龙脑含量 90 97的高含量龙脑樟母树当年生 枝条作为外植体， 剪去叶片及顶芽， 取顶芽下部含有 4 5 个腋芽的茎段， 用洗涤剂清洗表 面， 在超净工作台上用酒精浸过 30s 后， 先用 5次氯酸钠溶液灭。
26、菌 6min 后， 再用 0.1的 升汞消毒 5 6min， 之后用无菌水冲洗 5 6 遍， 剪去茎段两端约 0.5cm， 视节间长短， 将 茎段剪成带 1 2 个腋芽的小段， 接种于诱导培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/ 天， 温度2030下培养， 培养约1周后， 茎段上的腋芽开始膨大， 继而慢慢长出叶片， 未被 污染的外植体即可作为进一步培养， 直到长出初生芽 ( 图 1)， 所述的诱导培养基每升含有 ： 6-BA 7.0mg、 IBA3.0mg、 白糖 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 初芽 诱导率可达 85 90。
27、。 0028 b、 增殖培养 ： 将初生芽接种到第一增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 培养周期 40d， 继代 1 周期后， 待芽基部分化出多个不 定芽并有少量白色愈伤组织产生时， 再接种到第二增殖培养基上， 在光照强度 2500Lux 3000Lux， 温度 23 28下增殖培养， 获得增殖苗 ( 图 2)， 所述的第一增殖培养基每升含 有 ： 6-BA 7.0mg、 IBA3.0mg、 卡拉胶 3.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 所述的第二 增殖培养基每升含有 ： 6-BA3.5mg、 IBA3.0mg、。
28、 VB230mg、 卡拉胶 3.0g， 余量为改良 MS 培养基， pH6.8 7.0 ； 增殖培养基可使增殖培养过程中产生的不定芽数和有效苗数 ( 高 3 4cm， 叶宽12cm)得到均衡发展， 既减少愈伤组织产生， 又减缓愈伤组织褐化变黑 ； 每生长周期 增殖系数可达 6 以上 ； 0029 c、 生根培养 ： 剪取增殖苗中具有 4 5 片叶且叶面完全展开、 光滑发亮的无根小 苗， 接入生根培养基中， 在光照强度 2000 3000Lux， 12h/d， 温度 20 30下进行生根培 养， 得到生根苗 ( 图 3)， 所述的生根培养基每升含有 ： NAA1.5mg、 IBA 1mg、 白糖。
29、 30g、 卡拉胶 5.0g， 其余为改良 MS 培养基， pH5.6 5.8 ； 一般培养 12 15 天后， 生根率达 95以上， 根 系数量 4 5 条， 小苗长成完整植株。 0030 d、 组培苗移栽 ： 用粉碎机把红壤心土粉碎成细小颗粒， 按 3 质量份红壤心土和 1 质量份草木灰的比例混合搅拌均匀后， 作为龙脑樟组培苗移栽的基质， 用直径和高度为 说 明 书 CN 104365476 A 6 5/5 页 7 6cm8cm 左右的杯状营养袋装填基质。将生根苗洗去基部培养基后放到筛盘中滤干水， 即 可移栽到营养袋的基质中， 栽完后浇足定根水， 使基质与苗木根系紧密融合。 一周内用雾状 。
30、喷水器每天给叶面补充水分 3 5 次， 之后每天补水 1 2 次。1 个月后待叶片光滑平整 时， 可适时适量喷施叶面肥， 进入常规育苗管理， 得到高龙脑含量的龙脑樟的可用于移栽的 幼苗 ( 图 4)。 0031 所述的改良MS培养基， 每升含有 ： (1)大量元素 ： 硝酸钾1900mg， 硝酸铵800mg， 硫 酸镁 7H2O 370mg， 硝酸钙 4H2O 200mg， 氯化钙 2H2O 437mg， 磷酸二氢钾 170mg， (2) 铁 盐 ： 硫酸亚铁 7H2O 27.8mg， 乙二胺四乙酸二钠 37.3mg ； (3) 微量元素 ： 硼酸 10mg， 硫酸锰 H2O 25mg， 硫酸。
31、锌7H2O 10mg， 钼酸钠2H2O 0.25mg， 硫酸铜5H2O 0.025mg ； (4)有机 成分 ： 肌醇 100mg， 抗坏血酸 10mg， 盐酸硫胺素 0.5mg， 烟酸 5mg， 盐酸吡哆辛 0.5mg， 甘氨酸 2mg， 余量为水。 该配方在高龙脑含量的龙脑樟增殖培养过程中， 能满足其基本生长需要， 提 高大量元素中钙的含量可加强芽体木质化程度， 且对减少不定芽玻璃化现象效果明显 ； 增 加有机成分的含量， 可有效缓解愈伤组织褐化。 此配方是减少龙脑樟组培苗生长过程玻化、 褐化现象发生的关键因素之一。 0032 本发明的改良 MS 培养基配方与常规的 MS 配方的用量对比如。
32、表 1 所示 ： 0033 表 1 ： 常规 MS 培养基各成分用量与本发明经过改良的 MS 各成分用量对比表 0034 成分MS 用量 改良 MS 用量 (mg/L) 硝酸钾19001900 硝酸铵1650800 硫酸镁 7H2O370370 氯化钙 2H2O440437 硝酸钙 4H2O_200 磷酸二氢钾170170 硫酸亚铁 7H2O27.827.8 乙二胺四乙酸二钠37.337.3 碘化钾0.83_ 氯化钴 6H2O0.025_ 硼酸6.210 硫酸锰 H2O16.525 硫酸锌 7H2O8.610 硫酸铜 5H2O0.0250.025 钼酸钠 2H2O0.250.25 肌醇100100 抗坏血酸10 甘氨酸22 烟酸0.55 盐酸吡哆辛0.50.5 盐酸硫胺素0.10.5 说 明 书 CN 104365476 A 7 1/2 页 8 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 104365476 A 8 2/2 页 9 图 3 图 4 说 明 书 附 图 CN 104365476 A 9 。