一种人参皂苷的提取方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102988440 A (43)申请公布日 2013.03.27 CN 102988440 A *CN102988440A* (21)申请号 201210522292.6 (22)申请日 2012.12.07 A61K 36/258(2006.01) A61P 37/04(2006.01) A61P 39/00(2006.01) A61P 7/02(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 17/16(2006.01) A61K 125/00(2006.01) (71)申请人 山东大学 地址 250100 山东省济南市历城区山大南路 27 号。

2、 (72)发明人 张成如 (74)专利代理机构 济南舜源专利事务所有限公 司 37205 代理人 徐槐 (54) 发明名称 一种人参皂苷的提取方法 (57) 摘要 本发明属于医药技术领域， 具体涉及一种从 人参中提取人参皂苷的方法。本发明人参皂苷 提取方法， 包含如下步骤 ： 将人参原料粉碎过筛， 加入 90-120U/mL 的酶粗提取液， 5070酶解 0.52h， 过滤， 残渣加入有机溶剂先微波提取再浸 提， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗 品。本发明采用酶法与有机溶剂提取相结合的方 法从人参中提取人参皂苷， 该方法中酶的添加可 以有效降解木质素， 增进植物中活性成分的释放，。

3、 大幅度提高活性成分的提取率 ； 该提取方法有机 溶剂提取过程中辅以微波作用， 进一步增加了有 效成分的提取， 且较好的保持其生物活性， 更适合 工业化生产。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 4 页 1/1 页 2 1. 一种人参皂苷提取方法， 包含如下步骤 ： 将人参原料粉碎过筛， 加入 90-120U/mL 的酶粗提取液， 5070酶解 0.52h， 过滤， 残 渣加入有机溶剂先微波提取再浸提， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 2. 根据权利要求 1 所述的。

4、人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的粉碎粒度为 40 目。 3. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的酶为漆酶、 木质素过 氧化物酶或锰过氧化物酶中的任意一种。 4. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 人参粉末与酶粗提取液的 重量体积比为 ： 1:10-50。 5.根据权利要求1所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的酶解温度为60， 酶 解时间为 1h。 6. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的有机溶剂为甲醇、 乙 醇或正丁醇中的任意一种， 残渣与有机溶剂的加入量的重量体积比为 ： 1:50-200。。

5、 7. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的微波提取时间为 3-5min， 微波功率为 300W。 8. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其特征在于， 所述的再浸提时间为 0.5-1.5h。 9. 根据权利要求 1 所述的人参皂苷提取方法， 其详细步骤为 ： a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶、 木质素过氧化物酶或锰过氧化物酶， 人参粉末与酶粗提取液 的重量体积比为 1kg:10-50L， 5070酶解 0.52h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入甲醇、 乙醇或正丁醇有机溶剂， 。

6、滤渣与有机溶剂之比为 1kg:50-200L, 浸泡0.5h后， 辅以微波作用3-5min， 微波功率为300W， 继续浸提1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干 燥后即得人参皂苷粗品。 权 利 要 求 书 CN 102988440 A 2 1/4 页 3 一种人参皂苷的提取方法 技术领域 0001 本发明属于医药技术领域， 涉及一种中药的提取方法， 具体涉及一种从中药人参 中提取人参皂苷的方法。 背景技术 0002 人参为五加科植物人参 Panax ginseng C. A. Mey. 的干燥根。人参的主要有效 成分为人参皂苷， 药理研究表明， 人参的主要药理作用为提高免疫力， 抗疲劳、 抗应激。

7、、 改善 微循环、 提高组织抗缺氧能力、 抑制血小板聚集、 Ca2+ 拮抗作用、 影响前列腺素 (PG5) 代谢、 抗肿瘤、 抗衰老、 抗辐射等。 0003 目前， 国内对人参皂苷的提取主要采用加热回流法、 水提醇沉法、 微波提取法、 超 声提取法。 但传统提取方法本身存在许多缺陷， 如 ： 提取收率低， 有效成分损失、 分解、 失活， 产物中杂质含量高， 提取时间长， 工艺繁琐等 ； 超声法虽提取时间短、 操作简便， 但其提取的 效果受人参含水量影响， 同时存在噪音大、 影响人体健康、 难以实现规模化生产等不足。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种用微生物所产生的酶处理人参来提高人参。

8、皂苷提取率 的方法， 以克服目前传统的人参皂苷提取方法存在的缺陷， 提高提取率。 0005 本发明是通过如下技术方案实现的 ： 一种人参皂苷提取方法， 包含如下步骤 ： 将人参原料粉碎过筛， 加入活性为 90-120U/ mL 的酶粗提取液， 5070酶解 0.52h， 过滤， 残渣加入有机溶剂先微波提取再浸提， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0006 所述的粉碎粒度为 40 目。 0007 所述的酶为漆酶、 木质素过氧化物酶或锰过氧化物酶中的任意一种。 0008 人参粉末与酶粗提取液的重量体积比 （kg/L） 为 1:10-50。 0009 所述的酶解温度为 60， 酶解。

9、时间为 1h。 0010 所述的有机溶剂为甲醇、 乙醇或正丁醇中的任意一种， 残渣与有机溶剂的加入量 的重量体积比 （kg/L） 为 1:50-200。 0011 所述的微波提取时间为 3-5min， 微波功率为 300W。 0012 所述的再浸提时间为 0.5-1.5h。 0013 本发明人参皂苷提取方法的详细步骤为 ： a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶、 木质素过氧化物酶或锰过氧化物酶， 人参粉末与酶粗提液的 重量体积比为 1kg:10-50L， 5070酶解 0.52h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入甲醇、 。

10、乙醇或正丁醇有机溶剂， 滤渣与有机溶剂之比为 1kg:50-200L， 浸泡0.5h后， 辅以微波作用3-5min， 微波功率为300W， 继续浸提1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干 燥后即得人参皂苷粗品。 说 明 书 CN 102988440 A 3 2/4 页 4 0014 本发明的有益效果在于 ： （1） 采用酶法与有机溶剂提取相结合的方法从人参中提取人参皂苷， 该方法中酶的添 加可以有效降解木质素， 增进植物中活性成分的释放， 大幅度提高活性成分的提取率。 0015 （2） 该提取方法有机溶剂提取过程中辅以微波作用， 进一步增加了有效成分的提 取， 且较好的保持其生物活性， 更适合工业。

11、化生产。 具体实施方式 0016 为了更好地理解本发明的技术方案， 以下通过具体的实施例进一步作详细描述。 0017 实施例 1 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:10L， 60酶解 2h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入甲醇， 滤渣与甲醇重量体积比为 1kg:100L, 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 3min， 微波功率为 300W， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0018 实施例 2 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目。

12、筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入木质素过氧化物酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:20L， 60酶解 1h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入乙醇， 滤渣与乙醇重量体积比为 1kg:150L, 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 3min， 微波功率为 300W， 继续浸提 1.5h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0019 实施例 3 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入锰过氧化物酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:50L， 0 酶解 2h， 利用 200 目的滤布。

13、过滤 ； c、 向滤渣内加入甲醇， 滤渣与甲醇重量体积比为 1kg:100L, 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 5min， 微波功率为 300W， 继续浸提 0.5h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0020 实施例 4 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入木质素过氧化物酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:50L， 50酶解 0.5h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入正丁醇， 滤渣与正丁醇重量体积比为 1kg:100L, 浸泡 0.5h 后， 辅以微 波作用 4min， 微波功率为 30。

14、0W， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗 品。 0021 实施例 5 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:30L， 60酶解 1.5h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入乙醇， 滤渣与乙醇重量体积比为 1kg:150L, 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 3min， 微波功率为 300W， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 说 明 书 CN 102988440 A 4 3/4 页 5 0022 实施例 6 a、。

15、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:20L， 65酶解 1.5h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入乙醇， 滤渣与乙醇重量体积比为 1kg:120L， 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 5min， 微波功率为 300W， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0023 实施例 7 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:35L， 70酶解 0.5h， 利。

16、用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入乙醇， 滤渣与乙醇重量体积比为 1kg:150L， 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 4min， 微波功率为 300W， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0024 实施例 8 a、 将人参原料进行粉碎， 过 40 目筛， 然后放入提取罐 ； b、 向提取罐内加入漆酶， 人参粉末与酶粗提液的重量体积比为 1kg:20L， 65酶解 1h， 利用 200 目的滤布过滤 ； c、 向滤渣内加入乙醇， 滤渣与乙醇重量体积比为 1kg:200L， 浸泡 0.5h 后， 辅以微波作 用 4min， 微波功率为 300W。

17、， 继续浸提 1h， 滤过， 滤液减压浓缩， 干燥后即得人参皂苷粗品。 0025 测试实施例 称取一定量人参粉碎分别按实施例 1-8 提供的方法提取人参皂苷， 同时做不加酶对 照， 即人参粉碎直接加入有机溶剂提取， 制得粗品利用高效液相色谱分析人参皂苷含量， 计 算提取率。 0026 高效液相色谱法测定人参皂苷的具体步骤为 ： a、 精密称取人参皂苷标准品， 用色谱级甲醇配制成质量浓度为 0.05， 0.1， 0.2， 0.5， 1.0， 2.0mg/mL 的样液， 利用高效液相色谱检测峰面积， 制作标准曲线。 0027 b、 取一定量提取的人参皂苷粗品， 用色谱级甲醇溶解， 过 0.45m 。

18、滤膜， 定容至 10mL， 利用高效液相色谱分析人参皂苷含量。 0028 c、 色谱条件为 ： 流动相 ： 乙腈 ( A )- 水 ( B )， 梯度洗脱 (0-30min， 19 A ； 30-35min， 19 A 24 A ； 35-70min， 24 A 40%A) ； 流速 ： 1.3mL/min ； 检测波长 ： 203nm ； 柱温 ： 30 ； 进样量 ： 20L。 0029 所测结果如表 1 所示， 结果显示 ： 添加了本发明的漆酶、 木质素过氧化物酶或锰过 氧化物酶后人参皂苷提取率显著增加。 0030 说 明 书 CN 102988440 A 5 4/4 页 6 说 明 书 CN 102988440 A 6 。