一种含有胸腺肽的药物组合物及其制剂.pdf

本发明属于医药技术领域,本发明提供了一种含有胸腺肽的药物组合物及其制剂，本发明药物组合物包含胸腺肽、甘露醇、pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液和乳糖。本发明所述组合物制得的注射剂溶解性好、稳定性好；由该组合物制得的注射液使用方便，利于贮运，其制备方法简单，易于工业化生产，且生产成本低。

权利要求书
1.  一种含有胸腺肽的药物组合物，其特征在于药物组合物包括：胸腺肽、甘露醇、pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液和乳糖。

2.  根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述的药物组合物，包含以下重量份的成分：胸腺肽15~20重量份，甘露醇40~60重量份，乳糖0.2~0.5重量份，pH7.7的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液。

3.  根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于所述的组合物的pH值为6.6～7.5。

4.  根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于所述的组合物的pH值为6.8～7.4。

5.  根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于所述的组合物的pH值为6.9~7.2。

6.  一种含有胸腺肽的药物组合物制备注射液的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
1）称取甘露醇、乳糖溶解于4/5处方量的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.6～7.5，搅拌均匀；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。

说明书一种含有胸腺肽的药物组合物及其制剂
技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及含有胸腺肽的药物组合物及其制剂。
背景技术
1965年Goldestein等人从动物胸腺中分离到有生物活性的多肽类分子，命名为胸腺肽(Thymosin)。1972年Goldestein 等进一步纯化所得到的主要分子量在1-15KD的组分，称之为胸腺肽组分5(Thymosin，TF5)，用于动物研究和临床观察，发现该组分有补偿胸腺功能低下作用。
胸腺肽溶液主要成分是小分子多肽类物质，肽类物质在保存中可自行聚合形成大分子，随着保存时间的延长，聚合物也增多，临床应用中过敏反应发生率也随即增加，中国专利申请200410013642公开了一种含有胸腺肽输液及其制备工艺，其组成包括：多肽类物质及渗透压调节剂，所述的多肽类物质是从哺乳动物的胸腺组织中提取取得，其重量份数为多肽类物质5～100，渗透压调节剂50～100，多肽类物质的分子量为3000～10000道尔顿，pH值为5.0～8.0，与茚三酮试液反应溶液显浅蓝紫色。该方法通过降低胸腺肽溶液浓度降低聚合物生成率，但由该方法生产的胸腺肽注射液浓度低，使用量大，在使用时会造成患者顺从性差，且使用成本增加。
发明内容
为解决上述现有技术中所存在的问题，我们进行了大量的试验探索，发现添加乳糖和pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液可以明显提高胸腺肽注射液的稳定性。本发明提供了一种药物组合物。
具体而言，本发明提供了：
一种含有胸腺肽的药物组合物包括：胸腺肽、甘露醇、pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液和乳糖。
所述的药物组合物，包含以下重量份的成分：胸腺肽15~20重量份，甘露醇40~60重量份，乳糖0.2~0.5重量份，pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液。  
所述的组合物的pH值为6.6～7.5。
所述的组合物的pH值为6.8～7.4。
所述的组合物的pH值为6.9~7.2。
一种含有胸腺肽的药物组合物制备注射液的方法，包括以下步骤：
1）称取甘露醇、乳糖溶解于4/5处方量的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入处方量胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.6～7.5，搅拌均匀；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：
1、由该组合物制得的注射液溶解性好；
2、由该组合物制得的注射液稳定性好，放置24个月高分子量物质未见显著增高；
3、由该组合物制得的注射液使用方便，利于贮运，其制备方法简单，易于工业化生产，且生产成本低。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。
胸腺肽购自深圳市翰宇生物工程有限公司；甘露醇购自湖北心仪精细化工有限公司；缓冲液购自生兴生物技术(南京)有限公司；乳糖购自湖北大仝生物化工科技有限公司。
处方筛选试验1
表1缓冲液处方筛选方案
  胸腺肽 甘露醇 缓冲液 处方1 16g 50g pH7.6磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液 处方2 16g 50g pH8.1三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液 处方3 16g 50g pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液
按本发明方法制备胸腺肽注射液：称取甘露醇溶解于4/5处方量的注射用水中，搅拌使溶解；在上述所得溶液中加入胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；测定上述所得溶液pH 值，以缓冲液调节溶液pH 值至7.0，搅拌均匀；在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；以安瓿瓶灌装上述所得溶液；注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；灯检，即得。
在上市药品包装条件下，在温度(25±2)℃、相对湿度60%±10%条件下存放3个月，测定酸度、高分子量物质、胸腺肽α1和含量各项指标，测定结果见表2。
表2缓冲液处方筛选试验考察结果
处方 酸度 高分子量物质(%) 胸腺肽α1含量(%) 含量(%) 1 5.31 5.3 0.53 78.3 2 7.03 13.8 1.36 97.5 3 6.95 1.43 2.21 99.6
从表2可知，当选用pH7.6磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液制备的胸腺肽注射液放置3个月后酸度下降到5.31，不符合要求，且胸腺肽α1含量也不符合要求；当选用pH8.1三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液制备的胸腺肽注射液放置3个月后高分子量物质明显增加，因此，选用pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液显著优于其它两项缓冲液。 
处方筛选试验2
表3乳糖筛选方案

按本发明方法制备胸腺肽注射液，在上市药品包装条件下，在温度(25±2)℃、相对湿度60%±10%条件下存放3个月，测定酸度、高分子量物质、胸腺肽α1和含量各项指标，测定结果见表4。
表4处方筛选试验考察结果
处方 酸度 高分子量物质(%) 胸腺肽α1含量(%) 含量(%) 1 7.08 7.28 0.78 88.3 2 7.03 3.28 2.63 99.5 3 7.05 1.28 2.61 101.0 4 7.03 1.45 2.69 99.6 5 7.06 2.28 1.98 93.6
从表4可知，不加入乳糖后胸腺肽注射液中的高分子量物质明显增加，而胸腺肽α1显著降低；但当乳糖超过本发明范围内，高分子量物质及胸腺肽α1均较本发明的结果差，因此，本发明方法制备的胸腺肽注射液的具有较低的高分子量物质及较高的胸腺肽α1。
胸腺肽注射液试验例
1、仪器与药品
高效液相色谱仪(HP1100型，美国惠普公司)，DAD检测器，AgilentChemstation色谱工作站：YB-2型澄明度检查仪(天津大学精密仪器厂)；DU 640型紫外分光光度仪(美国贝克曼公司)；pHS-3C型数字酸度计(上海雷磁仪器厂)；WS/08-0l型调温调湿箱(杭州蓝天仪器生产有限公司)；METYLER.AE 200型分析天平(瑞士)；胸腺肽注射液(根据实施例5所述制备的三批样品，批号100305，100307，100309)。
2、方法
2.1色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-磷酸（140:860:1）为流动相A；以乙腈-水-磷酸（250:750:1）为流动相B，检测波长为210nm。按下表进行梯度洗脱；理论板数按胸腺肽α1峰计算不低于2000。胸腺肽α1峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
2.2考察项目及方法
2.2.1性状：连续3批胸腺肽注射液样品均为本品为无色或微黄色澄明液体。
2.2.2酸度：取胸腺肽注射液样品，采用酸度计直接测定。结果pH值为6.6～7.5。
2.2.3溶液的澄清度与颜色：取胸腺肽注射液5支，照溶液颜色检查法，3批样品溶液均澄清、无色。
2.2.4澄明度：取胸腺肽注射液5支，依中国药典检查，均符合规定。
2.2.5高分子量物质：照高效液相色谱法测定（中国药典2010版二部附录VD）。
色谱条件与系统适应性试验 用凝胶色谱柱（TSK GEL2000SWxl7.8mm×300mm，5μm）；以三氟醋酸-乙腈-水（0.05:10:90）为流动相；流速为每分钟0.7ml；检测波长为214nm。理论塔板数按核糖核酸酶A计算应不低于5000，分离度按相邻峰高与峰谷之比计算均不得小于3.0。
标准曲线的制备 分别取核糖核酸酶A（分子量13700）、胰岛素（分子量5808）、胸腺肽α1（分子量3108）、生长激素释放抑制因子（分子量1521）适量，用流动相制成每1ml中含1mg的溶液作为分子量标准溶液。分别取分子量标准溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，重复进样，进行线性回归，相关系数不得小于0.99。
测定方法 供试品适量，加流动相制成每1ml中含多肽1mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，以面积归一化法计算供试品中分子量大于10000道尔顿的组分的含量。
胸腺肽α1 在高分子量物质项下记录的色谱图中，按面积归一化法计算，供试品中对应于胸腺肽α1的保留时间的峰的含量。
2.2.6含量测定：取样品适量，加水制成每1ml中含多肽0.15mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取1.0ml，照福林酚测定法测定，求多肽含量。
2.3影响因素实验
在上市药品包装条件下，将三批实施例5样品(批号为100305，100307，100309)在高温(60℃)、强光(4500lx) 、高湿条件下考察5、10天，对其酸度、含量及高分子量物质等指标进行考察，测定结果见表5。
表5 影响因素试验结果

A、B、C代表实施例5的三批样品，批号为100305、100307、100309的样品。
2.6加速实验
在上市药品包装条件下，将三批实施例5样品(批号为100305，100307，100309)在温度(40±2)℃、相对湿度75%土5%条件下存放，分别于0、1、2、3、6个月末取样，测定各项指标，测定结果见表6。
表6 加速试验考察结果

A、B、C代表实施例5的三批样品，批号为100305、100307、100309的样品。
2.7长期实验
在上市药品包装条件下，将三批实施例5样品(批号为100305，100307，100309)及按CN200410013642方法制备的样品在温度(25±2)℃、相对湿度60%±10%条件下存放，分别于0、3、6、12、18、24个月末取样，测定各项指标。各批样品性状均为无色透明溶液，符合规定，溶液澄清度与颜色、澄明度符合规定，酸度、高分子量物质和含量测定结果见表7。
表7长期试验考察结果

A、B、C代表实施例5的三批样品，批号为100305、100307、100309的样品；D代表CN200410013642方法制备的样品。
结论：影响因素试验、加速试验结果显示，胸腺肽注射液各项测定指标无明显变化，稳定性良好；长期室温条件下放置胸腺肽注射液24个月各项质量指标无明显变化，产品稳定性良好。
制备例
实施例1
1）称取40g甘露醇、0.2g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入15g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.65，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
实施例2
1）称取45g甘露醇、0.3g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入16g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.7，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
实施例3
1）称取50g甘露醇、0.4g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入17g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至7.0，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
实施例4
1）称取55g甘露醇、0.35g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入18g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至7.2，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7）灯检，即得。
实施例5
1）称取50g甘露醇、0.37g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入16g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至7.1，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7）灯检，即得。
实施例6
1）称取58g甘露醇、0.34g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入19g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.9，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
实施例7
1）称取60g甘露醇、0.45g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入20g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.9，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min;
7) 灯检，即得。
实施例8
1）称取53g甘露醇、0.45g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入19g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至6.9，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7）灯检，即得。
实施例9
1）称取52g甘露醇、0.5g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入16g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至7.2，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。
实施例10
1）称取56g甘露醇、0.4g乳糖溶解于700ml的注射用水中，搅拌使溶解； 
2) 在上述所得溶液中加入16g胸腺肽，搅拌，使溶解并以注射用水定容至总量；
3) 测定上述所得溶液pH 值，以pH7.7三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液调节溶液pH 值至7.3，搅拌；
4）在上述所得溶液中加入0.1%的针用活性炭，搅拌吸附，过滤除炭；
5）以安瓿瓶灌装上述所得溶液；
6）注射剂热压灭菌，温度121℃，时间30min；
7) 灯检，即得。