蓝莓籽粉及其制备方法和应用.pdf

本发明公开了一种蓝莓籽粉及其制备方法和应用，所述制备方法为：筛选蓝莓籽；清洗烘干；于-15～-20℃冷冻40～80min；-25～-30℃低温超微粉碎即得蓝莓籽粉；所述蓝莓籽粉制剂以蓝莓籽粉为活性成分，辅以保健食品、药品或化妆品上可接受的功能性物质和/或辅料制成制剂，上述蓝莓籽粉及其制剂在制备改善视力、缓解视疲劳和调节血脂的保健食品、药品或化妆品中的应用。本发明制备方法生产效率高成本低，采用物理方法，将超微粉技术应用于蓝莓籽粉的制备中，避免了分离提取过程中的不安全因素，及热敏性功能物质的损失，使得营养成分得到最大限度的保留。

权利要求书
1.  一种蓝莓籽粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）筛选蓝莓籽；
（2）清洗；
（3）烘干；
（4）冷冻：所述冷冻温度为-15～-20℃，时间为40～80min；
（5）低温超微粉碎：所述低温粉碎的温度为-25～-30℃。

2.  根据权利要求1所述的蓝莓籽粉的制备方法，其特征在于，步骤（5） 中所述低温超微粉碎的时间为25-35min。

3.  根据权利要求1所述的蓝莓籽粉的制备方法，其特征在于，步骤（3） 中所述烘干为：将经步骤（2）清洗处理的蓝莓籽置于干燥箱中，干燥至水分含 量小于8%。

4.  根据上述权利要求1-3任一项所述的制备方法制得的蓝莓籽粉。

5.  一种蓝莓籽粉制剂，其特征在于，以权利要求4制得的蓝莓籽粉为活性 成分，辅以保健食品、药品或化妆品上可接受的功能性物质和/或辅料制成的制 剂。

6.  根据权利要求5所述的蓝莓籽粉制剂，其特征在于，所述制剂的剂型为 片剂、软胶囊、硬胶囊或口服液。

7.  一种如权利要求4所述的蓝莓籽粉和权利要求5所述的蓝莓籽粉制剂在 制备改善视力、缓解视疲劳和调血脂的保健食品、药品或化妆品中的应用。

说明书蓝莓籽粉及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及蓝莓副产品的加工生产领域，特别涉及一种蓝莓籽粉及其制备 方法和应用。
背景技术
蓝莓是一种人们喜爱的水果，近年来越来越多的人们认识到蓝莓的药用和 营养价值。目前，我国蓝莓行业也进入了新的发展时期，种植业、酒业和饮料 产业化的加工发展已有一定的规模。据我们的研究，在蓝莓鲜果中蓝莓籽的含 量约为3%，而每年约产生蓝莓籽几千吨，大部分均被废弃掉；这不仅会污染环 境，也造成了资源的巨大浪费。然而到目前为止，在世界范围内对蓝莓籽的研 究及对其的开发较少，因此，对蓝莓籽的研究及如何充分利用蓝莓籽即对蓝莓 籽的综合利用，是目前亟待解决的问题。
发明内容
基于此，本发明的目的在于提供一种蓝莓籽粉及其制备方法和应用。
解决上述技术问题的具体技术方案如下：
一种蓝莓籽粉的制备方法，包括如下步骤：
（1）筛选蓝莓籽：所述蓝莓籽的水分含量小于8%，黄曲霉毒素小于等于 20μg/kg；
（2）清洗；
（3）烘干；
（4）冷冻：所述冷冻温度为-15～-20℃，时间为40～80min。冷冻后便于粉 碎蓝莓籽；
（5）低温超微粉碎：所述低温粉碎的温度为-25～-30℃。
在其中一些实施例，所述低温超微粉碎的时间为25-35min。
在其中一些实施例，步骤（3）中所述烘干为：将经步骤（2）清洗处理的 蓝莓籽置于干燥箱中，干燥至水分含量小于8%。
根据上述制备方法制得的蓝莓籽粉。
在其中一些实施例，所述蓝莓籽粉含有7-9wt%的油脂，其中，所述油脂中 含195-205mg/kg的VE，10-11mg/kg的β-胡萝卜素，0.75-0.85wt%的植物甾醇。
在其中一些实施例，所述油脂中含有不饱和脂肪酸90-93wt%。
在其中一些实施例，所述不饱和脂肪酸中含亚油酸43-47wt%，亚麻酸 23-27wt%，油酸18-22wt%。
一种蓝莓籽粉制剂，以上述制得的蓝莓籽粉为活性成分，辅以保健食品、 药品或化妆品上可接受的功能性物质和/或辅料制成的制剂。
在其中一些实施例，所述剂型为片剂、软胶囊、硬胶囊或口服液。
在其中一些实施例，所述功能性物质为维生素A、维生素E、维生素C、β- 胡萝卜素或牛磺酸。
一种根据上述制备方法制得的蓝莓籽粉在制备改善视力、缓解视疲劳和调 血脂的保健食品、药品或化妆品中的应用。
本发明所述的一种蓝莓籽粉及其制备方法和应用的优点或有益效果具体如 下：
（1）本发明所述制备方法生产效率高，成本低，技术可靠，经济易行，且 采用纯物理方法，将低温超微粉碎技术应用于蓝莓籽的深加工中，避免了分离 提取过程中的不安全因素和热敏性功能成分的损失，最大限度的保留蓝莓籽中 的各种营养成分；该方法适用范围广，大、中、小企业均可采用。
（2）本发明所述制备方法中采用了低温超微粉碎技术，使得蓝莓籽中的可 溶性成分迅速溶解，即使溶解度低的成分也因超微粉体具有较大的附着力而紧 紧粘附在黏膜上，因而有利于有效成分的吸收。
（3）本发明制得的蓝莓籽粉及以蓝莓籽粉为活性成分制成直接食用的蓝莓 籽粉制剂，具有显著的改善视力、缓解视疲劳和调节血脂的功效，其将蓝莓籽 变废为宝，避免了资源的浪费和环境污染。
（4）本发明所述蓝莓籽粉制剂可以根据保健食品、药品或化妆品的功能不 同，以蓝莓籽粉为主，辅以其他功能性成分，既可以保证蓝莓籽的功效，也可 以增强蓝莓籽的功能。
具体实施方式
为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，特举以下实施例详细说明。应 理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例 中未注明具体条件的实验方法，测定方法，通常按照常规条件，或按照制造厂 商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
本发明所制得的蓝莓籽粉中含有大量的活性成分，例如花青素、黄酮类化 合物、功能氨基酸、视黄醛、胡萝卜素等成分，尤其是视黄醛。其中油脂中含 有较高的不饱和脂肪酸(91.20％以上)，黄酮类、多糖类、花青素、芦丁、氨基酸、 胡萝卜素、维生素A、视黄醛等多种活性成分，具有缓解视疲劳、美肤养颜、 调节血脂、抗衰老、保护心脑血管、抗肿瘤、抗辐射、抗疲劳、健身提神、抗 氧化和提高记忆力等功效，尤其改善视力、缓解视疲劳和调节血脂等特别突出。 虽然蓝莓皮、蓝莓汁和蓝莓酒中也含有这些成分，但其含量要比蓝莓籽中的低 得多。
蓝莓籽中含有丰富的多酚类物质，其含量约为果梗中的2.4倍、果皮中的 4.3倍。从蓝莓籽中提取出来的多酚混合物，我们实验结果表明其抗氧化剂比 VC或VE更有效。且蓝莓籽中的多种功能性成分具有超强的抗氧化能力、对心脑 血管疾病等有明显的疗效，可预防过敏，抗衰老、减轻运动损伤及关节疼痛、 抗炎及与自由基有关的疾病。其次，蓝莓籽中的亚油酸、亚麻酸等不饱和脂肪 酸具有抗辐射、降胆固醇和抗动脉硬化等保健作用，而且蓝莓籽中还有大量的 蛋白质、纤维素等营养成分可被利用。
以下将结合具体实施例对本发明做进一步说明。
下述实施例中TPA是指12-氧-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯；
IC50又称半抑制浓度或称半抑制率，是指被抑制一半时抑制剂的浓度，这 里的反应可以是酶催化反应，抗原抗体反应等。
实施例1
一种蓝莓籽粉的制备方法，包括如下步骤：
（1）筛选蓝莓籽原料：按GB/TS009.3食品中水分的测定方法，测定蓝莓籽 的水分含量，大于10％不接收，按GB/T5009.25-2003标准测定蓝莓籽中的黄曲 霉毒素，超标不接受）；储存（注意消毒或通风）；
（2）清洗：清洗用水符合6B5749生活饮用水卫生标准；
（3）烘干：将清洗后的蓝莓籽马上进入通风干燥箱，干燥后水分含量小于 8%；
（4）冷冻：冷冻温度约在-15℃，时间40min；
（5）低温超微粉碎：所述低温的温度为-27℃，粉碎时间为30min；
（6）灭菌：将蓝莓籽粉灭菌后，测定产品的细菌总数、大肠杆菌数、致病 菌、霉菌；其均符合国家食品通用标准(GB16740-1997)。
经分析，上述蓝莓籽粉中含有8wt%油脂，0.3wt%视黄醛，200mg/kg VE， 10.55mg/kg的β-胡萝卜素，0.8wt%的植物甾醇，其中，不饱和脂肪酸在油脂中 的质量分数高达90％以上，经分析测定，不饱和脂肪酸中亚油酸含量在45％左 右，亚麻酸含量在25%左右，油酸含量在20%左右。另外，蓝莓籽粉中还含有 多种微量元素，如Mg、Ca、K、Na、Cu、Zn、Mn、Co，以及VA、VC、VD、 VE等。
实施例2蓝莓籽粉的功效评价
一、蓝莓籽粉的对视力的功效
（1）实验目的
通过实验，评价实施例1制得的蓝莓籽粉的对视力的功效。
（2）实验方法
给予50例因长期在显示屏前工作的眼疲劳患者每天服用蓝莓籽粉500mg， 2个月后，考量其相对敏感性和客观症状；给予50名近视性视网膜非炎性改变 的患者服用蓝莓籽粉，每日200mg，2个月后，通过试验前后比较，考量受视 者的视力。
（3）实验结果
结果表明：与服用前相比，眼疲劳患者服用蓝莓籽粉2个月后，其相对敏 感性和客观症状均有明显改善；近视性视网膜非炎性改变的患者服用蓝莓籽粉2 个月后，受视者视力有明显提高(P<0.05)。经分析测定：蓝莓籽粉中含有大量的 视黄醛、β-胡萝卜素等增强视网膜的营养成分，可以改善视网膜功能和提高其灵 敏度的作用(P<0.05)。
二、蓝莓籽粉的降血脂功效
（1）实验目的
通过实验评价实施例1制得的蓝莓籽降血脂的功效。
（2）实验方法
选择以高脂饲料(含猪油、胆固醇3％、猪胆盐0.5％和甲基硫氧嘧啶0.2％) 喂食动物造成大鼠高血脂模型，以出血时间、凝血时间、血脂水平和抗自由基 活性为药理指标，对蓝莓籽进行研究。在室温27℃，湿度60%的条件下，将动 物饲养一周后，随机分为空白对照组、高血脂模型组、溶媒对照组(水溶液)、地 奥心血康组（0.5mg甾体总皂苷/kg）、蓝莓籽提取物药组（50%醇提液）。除溶 媒对照组8只外，其余各组每组10只动物。除空白对照组喂普通饲料外，其余 各组均给予高脂饲料，连续饲养14天后，检查前一天禁食不禁饮8小时以上， 每只动物均经眼球采血检测血脂，确认造模成功(给药前血脂水平，经过检验剔 除血脂不升高的大鼠若干只)。随后继续给予高脂饮食。高脂饲料饲养约第15 天开始给药，各实验药物组分别经灌胃口服给药，灌胃量为相当于生药3g·kg-1， 每天一次，连续给药共四周28天，（末次给药后，禁食不禁饮8h）测大鼠出血 时间、凝血时间。全部动物经眼眶采血，取血清，检测血脂(给药后血脂)和脂质 过氧化物酶水平。
（3）实验结果
蓝莓籽受试药各组均在不同水平降低总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）。与 高脂模型组和溶媒对照组比较，各受试药组均可降低总胆固醇（TC）水平和甘 油三酯（TG）水平(P<0.05)。对脂蛋白尤其是HDL/LDL比值的影响，从本实 验结果来看，地奥心血康组对提升HDL水平，改善HDL/LDL比值效果一般,但 是蓝莓籽中50%醇提物对于升高HDL水平效果较好，可以明显提高HDL/LDL 比值，效果好于地奥心血康组(P<0.05)。
三、蓝莓籽粉的抗脂质过氧化和清除自由基功效
（1）实验目的
通过比较实施例1制得的蓝莓籽粉、VC、VE对TPA诱导的肝、脑组织中脂 质过氧化的保护，评价蓝莓籽粉的抗脂质过氧化和清除自由基功效。
（2）实验方法：分别使用化学发光法和细胞色素C还原法测定蓝莓籽粉、 VC、VE对活性氧即超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力。
（3）实验结果
结果表明：在100mg/kg剂量下蓝莓籽粉、VC、VE均可降低TPA诱导产生 的活性氧，使用腹腔巨噬细胞发光法测定，活性氧的降低率分别为72%、19% 和45%，使用细胞色素还原法测定，活性氧的降低率分别为66%、16%和36%， 同时还发现蓝莓籽粉对于抑制TPA诱导的腹腔巨噬细胞活性氧的产生，具有剂 量反应关系。因此，蓝莓籽粉可对氧化损伤起到保护作用，且保护作用优于其 它抗氧化剂。
具体来讲，蓝莓籽粉对自由基的抑制具有浓度反应关系，在100mg/L的浓 度时，蓝莓籽粉对超氧化阴离子和羟基自由基的抑制能力为79%和82%：同等 条件下，VC抑制上述两种自由基的能力为14%和21%，VE为49%和71%，说 明蓝莓籽粉是一种比VC、VE更强的自由基清除剂，其可应用于各种抗氧化、抗 衰老产品中。
四、蓝莓籽粉的抗肿瘤功效
（1）实验目的
通过分析实施例1制得的蓝莓籽粉对人肺癌细胞A549、人肝癌细胞HePG2、 慢性骨髓性白血病细胞K562、正常人的胃粘膜细胞和正常鼠的巨噬细胞J774A.1 的作用，评价蓝莓籽粉的抗肿瘤功效。
（2）实验方法
采用MTT法，体外培养拮抗肿瘤研究法。
（3）实验结果
结果表明：蓝莓籽粉对人肺癌细胞A549，人肝癌细胞HePG2有明显的抑 制作用。而对慢性骨髓性白血病细胞K562无细胞毒作用，对正常人的胃粘膜细 胞和正常鼠的巨噬细胞J774A.1却有促进增长，增强生长活力的作用；说明蓝莓 籽粉有良好的抗肿瘤作用。
五、蓝莓籽粉的抗辐射功效
（1）实验目的
通过对比分析，评价实施例1制得的蓝莓籽粉的抗辐射功效。
（2）实验方法
将荷Slao肉瘤小鼠分为对照组和实验组，实验组中将荷Slao肉瘤小鼠分别 给予4Co局部照射、口服蓝莓籽粉和局部照射加口服蓝莓籽粉的3种不同方法 处理，持续12天后，检测动物的瘤重、白细胞计数、脾淋巴细胞转化率等指标。
（3）实验结果
结果表明：对照组瘤重高于其它各组，局部照射加口服高剂量蓝莓籽粉的 肿瘤抑制率高于单纯局部照射组和单纯口服蓝莓籽粉组，单纯照射组的白细胞 计数低于其它各组。说明蓝莓籽粉可抑制辐照引发的脂质过氧化，这可能是蓝 莓籽粉抗辐射损伤的主要原因。
六、蓝莓籽粉的抗过敏及抗炎功效
（1）实验目的
通过对比分析，评价实施例1制得的蓝莓籽粉的抗过敏及抗炎功效。
（2）实验方法
采用耳廓肿胀法、足趾肿胀法等经典抗炎试验进行研究。
（3）实验结果
经上述实验分析，结果表明：由于蓝莓籽粉的抗氧化活性，使其可抑制诸 如组织胺、5-羟色胺、前列腺素及白三烯等炎症因子的合成和释放，抑制嗜碱细 胞和肥大细胞释放过敏颗粒，从而有效地改善皮肤过敏症状及过敏性哮喘症状。
七、蓝莓籽粉的抗衰老功效
（1）实验目的
通过分析，评价实施例1制得的蓝莓籽粉的抗衰老功效。
（2）实验方法
通过体外抗酶实验，研究蓝莓籽粉对黄嘌呤氧化酶、弹性蛋白酶、胶原蛋 白酶、透明质酸酶、β-葡萄糖醛酸糖甙酶的IC50；并利用超临界萃取法，提取 蓝莓籽粉中视黄醛，以衡量蓝莓籽粉的抗衰老功效。
（3）实验结果
蓝莓籽粉的体外抗酶试验结果表明：蓝莓籽粉对黄嘌呤氧化酶、弹性蛋白 酶、胶原蛋白酶、透明质酸酶、β-葡萄糖醛酸糖甙酶的IC50(umol/1)分别为2.4、 4，24、38、80、1.1；从中可以看出，蓝莓籽粉对上述各酶具有显著的抑制作用。
而超临界萃取法提取蓝莓籽粉中视黄醛结果表明：蓝莓籽粉中含有0.3%的 视黄醛，且其可以明显的改善皮肤的老化，减轻皮肤粗糙、皱纹、降低色斑沉 积等功效。同时蓝莓籽粉具有清除自由基，阻断弹性蛋白酶的产生并抑制其活 性，从而改善皮肤健康状况。
八、蓝莓籽粉的抗疲劳功效
（1）实验目的
通过分析，评价实施例1制得的蓝莓籽粉的抗疲劳功效。
（2）实验方法
每天经口给予雄性昆明种小鼠高、中、低三种不同剂量的蓝莓籽粉，剂量 分别为：以体重计，低剂量1.7m/kg、中剂量16.7m/kg、高剂量50.0m/kg，30 天后测定负重游泳时间、血红蛋白及运动后血乳酸和肝糖元含量。
（3）实验结果
结果表明：各剂量组小鼠负重游时间均比对照组延长，中、高剂量组具有 极显著差异(P<0.01)，血红蛋白含量均高于对照组；各剂量组小鼠运动后血乳酸 含量均低于对照组，高剂量组与对照组相比具有极显著差异(P<0.01,肝糖元含 量均高于对照组，中、高剂量组与对照组相比分别具有显著和极显著差异 (P<0.05，P<0.01)。因此，蓝莓籽粉具有抗疲劳的功效。
九、蓝莓籽粉对记忆力的影响
（1）实验目的
通过实验，分析评价实施例1制得的蓝莓籽粉对记忆力的影响。
（2）实验方法
通过对小鼠D-半乳糖6周，制备小鼠衰老模型，同时给药蓝莓籽粉，分别 采用跳台法、Y形迷宫法测试小鼠的学习记忆力，并测定小鼠血液和脑组织的 过氧化脂质：正常小鼠给予给药蓝莓籽粉，连续19天，采用Morris水迷宫法测 试小鼠的学习记忆能力。
（3）实验结果
实验结果表明，蓝莓籽粉在D-半乳糖所致衰老小鼠在跳台法的测试中，可 延长潜伏期，减少5分钟内错误次数对小鼠Y型迷路的测试中，能减少错误反 应次数，提示蓝莓籽粉对由D-半乳糖所致小鼠学习记忆障碍有明显的改善作用。 在Morris水迷宫测试中，蓝莓籽粉对正常小鼠的学习记忆难以进一步提高，但 能明显改善正常小鼠信息的保持和再现能力，作用机制可能与其能降低血液和 脑组织的过氧化脂质有关。
实施例3蓝莓籽粉制剂-软胶囊
配方：蓝莓籽粉（实施例1制得）300g，维生素A50g，β-胡萝卜素50g， 辅料600g，每粒0.5g，制得2000粒软胶囊。
工艺步骤为：原料→混合→压丸→洗丸、干燥+选丸→内包装+外包装→成 品。
本实施例所制得的软胶囊，以蓝莓籽粉为主要成分，辅以功能性物质维生 素A、β-胡萝卜素，其可用于缓解视疲劳。
实施例4蓝莓籽粉制剂-硬胶囊
配方：蓝莓籽粉（实施例1制得）50g，维生素E10g，维生素C20g， 环状糊精等其他辅料220g，制成1000粒，每粒0.3g。
工艺步骤为：原料→混合(过80目筛)→制软材→制粒→装硬胶囊→压 PVC→成品。
本实施例所制得的硬胶囊，以蓝莓籽粉为主要成分，辅以功能性物质维生 素E、维生素C，其可用于抗氧化。
实施例5蓝莓籽粉制剂-片剂
配方：蓝莓籽粉（实施例1制得）50g，维生素E10g，牛磺酸5g，环 状糊精等辅料235g，制成1000粒，每粒0.3g。
工艺步骤为：混料→制软材→制粒→压片→包衣→压PVC板→成品。
本实施例所制得的片剂，以蓝莓籽粉为主要成分，辅以功能性物质维生素E、 牛磺酸，其可用于抗疲劳。
实施例6蓝莓籽粉制剂-口服液
配方：蓝莓籽粉（实施例1制得）2000克，去离子水7920克，苯甲酸钠 30克，硬脂酸单甘酯50克，香精适量，制成1000瓶，每瓶l0ml。
工艺：混料→乳化→高压均质→罐封→灯检→包装→成品。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细， 但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域 的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和 改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附 权利要求为准。