孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法技术领域
本发明涉及一种模型建立方法，具体地说是孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型
的建立方法，属于生物医学领域。
背景技术
原发性高血压由基因和环境因素相互作用导致的疾病，其是心血管疾病发生的主
要风险因素，并对人类的健康构成了重大威胁。目前，大量的研究表明，孕期影响胎儿的环
境因素，在成年后高血压，糖尿病及肥胖等疾病的发生发展中起着至关重要的作用。
长期暴露于低剂量脂多糖的人群易感染，酒精滥用及肠道紊乱，且已发现高剂量
的脂多糖暴露可引起妇女细菌性阴道炎。脂多糖是革兰氏阴性菌的细胞壁的一种毒性成
分，常寄居在动物和人的消化道内，且其常用于构建细菌感染的实验模型。大量研究表明，
孕期脂多糖暴露可随后引起高血压，心肌纤维化，肥胖，异常睾丸发育，及阿尔茨海默氏病。
基于医学研究的伦理要求，目前尚无法通过临床试验来研究孕期脂多糖导致子代
大鼠高血压疾病中的具体作用及其机制。因此，建立子代大鼠高血压疾病模型，可用于研究
原发性高血压疾病的发生、发展机制及开发对抗药物为目的的医学基础和临床研究。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的不足，提供一种操作简单方便、培育高
效的孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法。
按照本发明提供的技术方案：孕期脂多糖导致子代大鼠高血压模型的建立方法，
其特征在于，包括如下步骤：
(1)、配制脂多糖溶液；
(2)、选取符合标准的孕鼠，分别在孕鼠孕期的第8、10、12天，采用腹腔注射方式注
射1次步骤(1)配制好的脂多糖溶液，脂多糖的单次剂量不超过0.80mg/kg，不低于0.77mg/
kg；
(3)、饲养注射了脂多糖的孕鼠及其繁殖的子代大鼠；
(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期进行
收缩压测定，收缩压达到131.5～136.7mm Hg的16周子代大鼠即为孕期脂多糖导致高血压
的子代大鼠。
作为本发明的进一步改进，所述脂多糖溶液要求现配现用，按每1mg脂多糖中加入
0.9～1.1ml生理盐水的比例进行配制，并充分混合摇匀。
作为本发明的进一步改进，所述脂多糖溶液的混合摇匀时间控制在20分钟左右。
作为本发明的进一步改进，所述脂多糖与生理盐水的配制比例为每1mg脂多糖中
加入1ml生理盐水。
作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中符合标准的孕鼠是指7～8周龄的体重
为250～270g的SD成年大鼠。
作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中，选取孕鼠的腹部脐与髂前上棘连接线
外1/3点为注射部位。
作为本发明的进一步改进，所述步骤(2)中，注射脂多糖的单次剂量为0.79mg/kg。
作为本发明的进一步改进，所述步骤(3)中，饲养注射了脂多糖的孕鼠及其繁殖的
子代大鼠的方法为：所有的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑夜循环，幼鼠
经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠。
作为本发明的进一步改进，所述步骤(4)中测定收缩压的方法为尾套法。
作为本发明的进一步改进，所述尾套法具体操作是：测前将子代大鼠置于33～35
℃的温热室内13～17分钟，以引起尾血管扩张；然后将子代大鼠放置在限制件中，并将具有
气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其
平均值。
本发明与现有技术相比，具有如下优点：本发明操作简单方便，能够准确高效地培
育出孕期脂多糖导致高血压的子代大鼠，从而为高血压疾病的致病机制、诊断、治疗以及预
防的研究提供一种新的途径和可能。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
药品试剂：脂多糖(LPS)，生理盐水。
试验动物：7～8周龄的体重为250～270g的孕1天的SD成年大鼠【购自北京维通利
华公司】。
主要仪器：一次性5、10ml无菌注射器；一次性3ml无菌吸管；大鼠无创血压仪【BP
2010A，日本软龙公司】；大鼠操作台。
实施例1：【实验组1】
(1)、配制脂多糖溶液：现配现用，按每1mg脂多糖中加入1ml生理盐水的比例进行
配制，并充分混合摇匀，混合摇匀的时间控制在20分钟左右，配好之后备用；如果脂多糖溶
液本次未使用完，不建议下次继续使用。
(2)、选择10只符合标准的SD孕鼠，在孕鼠孕期的第8、10、12天，分别采用腹腔注射
方式给SD孕鼠注射步骤(1)配制好的脂多糖溶液，注射部位选取SD孕鼠的腹部脐与髂前上
棘连接线外1/3点，脂多糖的剂量为0.77mg/kg；SD孕鼠在腹腔注射脂多糖后1天内死亡3只
【死亡率为3/10＝30％】，流产2只【流产率为2/7＝28.57％】；
(3)、所有的注射了脂多糖的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑夜
循环，幼鼠经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠，待子代大鼠长至6周时，准备测量血压；
(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期采用
尾套法进行收缩压测定，测前将子代大鼠置于34℃的温热室内15分钟，以引起尾血管扩张；
然后将子代大鼠放置在塑料限制件中，并将具有气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，
每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其平均值，测量结果参见表1。注意：因为动
物血压测量时需要动物处于安静、温度适宜的环境，且老鼠进入鼠网后，网内是封闭的无阳
光环境，其需要适应环境后方测量准确，否侧误差很大。
实施例2：【实验组2】
(1)、配制脂多糖溶液：现配现用，按每1mg脂多糖中加入1ml生理盐水的比例进行
配制，并充分混合摇匀，混合摇匀的时间控制在20分钟左右，配好之后备用；
(2)、选择10只符合标准的SD孕鼠，在孕鼠孕期的第8、10、12天，分别采用腹腔注射
方式给SD孕鼠注射步骤(1)配制好的脂多糖溶液，注射部位选取SD孕鼠的腹部脐与髂前上
棘连接线外1/3点，脂多糖的剂量为0.79mg/kg；SD孕鼠在腹腔注射脂多糖后1天内死亡3只
【死亡率为3/10＝30％】，流产2只【流产率为2/7＝28.57％】；
(3)、所有的注射了脂多糖的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑夜
循环，幼鼠经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠，待子代大鼠长至6周时，准备测量血压；
(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期采用
尾套法进行收缩压测定，测前将子代大鼠置于34℃的温热室内15分钟，以引起尾血管扩张；
然后将子代大鼠放置在塑料限制件中，并将具有气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，
每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其平均值，测量结果参见表1。
实施例3：【实验组3】
(1)、配制脂多糖溶液：现配现用，按每1mg脂多糖中加入1ml生理盐水的比例进行
配制，并充分混合摇匀，混合摇匀的时间控制在20分钟左右，配好之后备用；
(2)、选择10只符合标准的SD孕鼠，在孕鼠孕期的第8、10、12天，分别采用腹腔注射
方式给SD孕鼠注射步骤(1)配制好的脂多糖溶液，注射部位选取SD孕鼠的腹部脐与髂前上
棘连接线外1/3点，脂多糖的剂量为0.80mg/kg；SD孕鼠在腹腔注射脂多糖后1天内死亡3只
【死亡率为3/10＝30％】，流产2只【流产率为2/7＝28.57％】；
(3)、所有的注射了脂多糖的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑夜
循环，幼鼠经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠，待子代大鼠长至6周时，准备测量血压；
(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期采用
尾套法进行收缩压测定，测前将子代大鼠置于34℃的温热室内15分钟，以引起尾血管扩张；
然后将子代大鼠放置在塑料限制件中，并将具有气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，
每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其平均值，测量结果参见表1。
实施例4：【对照组】
选择10只符合标准的SD孕鼠，在孕鼠孕期的第8、10、12天，分别采用腹腔注射方式
给SD孕鼠注射注射生理盐水，注射部位选取腹部脐与髂前上棘连接线外1/3点，SD孕鼠在腹
腔注射脂生理盐水后没有出现死亡或者流产；
(3)、所有的注射了生理盐水的孕鼠饲养于标准动物房，室内恒温24℃，12小时黑
夜循环，幼鼠经母乳喂养4周后分笼，每笼4只4周子鼠，待子代大鼠长至6周时，准备测量血
压；
(4)、对步骤(3)获得的子代大鼠，在其生长的6～16周期间，按2周1次的周期采用
尾套法进行收缩压测定，测前将子代大鼠置于34℃的温热室内15分钟，以引起尾血管扩张；
然后将子代大鼠放置在塑料限制件中，并将具有气动脉冲传感器的袖带附接到大鼠尾部，
每只子代大鼠至少测量3次收缩压，最终结果取其平均值，测量结果参见表1。
表1：
结果分析：
从表1中可以看出，注射了脂多糖的各实验组的子代大鼠从8～16周开始，其收缩
压均高于对照组；在12周时，注射了脂多糖的各实验组子代大鼠的收缩压均高于130mm Hg，
明显高于对照组各子代大鼠的收缩压。