山楂和植物甾醇类及其对代谢性疾病的作用.pdf

本发明一般性涉及健康和幸福领域。具体而言，本发明针对代谢性疾病和与其相关的疾病。例如，本发明描述了包含植物甾醇类和山楂的组合物，其用于治疗、减轻或预防代谢性疾病。

权利要求书
1.  包含植物甾醇类和山楂的组合物，其用于治疗、减轻或预防代谢性疾病。

2.  根据权利要求1的组合物，其中所述代谢性疾病与高甘油三酯血症相关。

3.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述代谢性疾病选自超重、肥胖、糖尿病、高血压、肝硬化、代谢综合征以及其组合。

4.  根据上述权利要求任一项的组合物，其用于减少或预防肾周脂肪与体重的比例的增加。

5.  根据上述权利要求任一项的组合物，其用于减少或预防腹部脂肪与体重的比例的增加。

6.  根据上述权利要求任一项的组合物，其用于帮助体重控制。

7.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述的组合物以相当于每天每公斤体重至少0.5g、1g或3g山楂和至少2.5mg、15mg或40mg植物甾醇类的日剂量施用。

8.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中山楂以新鲜果实、干果实、山楂叶或以其提取物的形式提供。

9.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中植物甾醇类选自植物甾醇和甾烷醇；例如β-谷甾醇、油菜甾醇和豆甾醇。

10.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中植物甾醇类是膳食植物甾醇，并且以植物油、坚果、谷类制品、蔬菜、水果和浆果或以其提取物的形式提供。

11.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述的组合物选自食品、饮料、功能食品、营养食品、食品添加剂、营养配方食品和宠物食品。

12.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述的组合物施用给成年人或老人。

13.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述的组合物施用给人 或动物，例如伴侣动物，例如猫或狗。

14.  根据上述权利要求任一项的组合物，其中所述的组合物在高脂饮食之前1小时到高脂饮食之后1小时的时间框架内施用。

说明书山楂和植物甾醇类及其对代谢性疾病的作用
本发明一般性涉及健康和幸福领域。具体而言，本发明针对代谢性疾病和与其相关的疾病。例如，本发明描述了包含植物甾醇类和山楂的组合物，其用于治疗、减轻或预防代谢性疾病。
在过去几十年中，肥胖症的流行在世界范围内增加了流行比例。世界上约有10亿人超重或肥胖，这些状况增加了死亡率、变动性和经济成本。当能量摄入超出能量消耗时发生肥胖，多余的能量主要以脂肪储存在脂肪组织中。减少体重和预防体重增加能够通过降低能量摄入或生物利用度、增加能量消耗和/或减少脂肪储存来实现。肥胖代表了对健康的严重威胁，因为其与一系列慢性疾病有关，包括糖尿病、动脉粥样硬化、变性疾病、气道疾病以及某些癌症。
众所周知，山楂和植物甾醇类具有健康益处，但是这两类成分都有其限制。
山楂是蔷薇科的开花植物。其健康益处可参考例如Rigelsky和Sweet,Am J Health Syst Pharm March 1,200259:417-422的综述.山楂具有用于心血管疾病的从公元1世纪至今的悠久历史。它已经显示了对血胆固醇降低具有良好效果，而且也建议其对血脂具有有益效果。
但是，为了达到生物学的显著效果，每日食用山楂汁经常由于其酸味而导致胃部不适。而且，在治疗剂量上，山楂可造成轻度的疹、头痛、出汗、头晕、心悸、睡意、激动和胃肠道症状(Rigelsky和Sweet,Am J Health Syst Pharm March 1,200259:417-422)。
植物甾醇类已知能够通过减少肠内的胆固醇吸收而降低总胆固醇和LDL胆固醇的血浓度。每日摄入约2.4g植物甾醇类(或其饱和形式甾烷醇)与血中总胆固醇浓度的8％的降低有关。还有一些指征表明植物甾醇类可能对糖尿病有作用(Five phytosterols from Aloe Vera Gel as Anti-diabetic  Compounds；Tanaka等人,Biological and Pharmaceutical Bulletin卷29(2006),No.71418)。但是，如果以显著的量施用，植物甾醇类可能有不希望的副作用。例如，已知它们抑制α-和β-胡萝卜素的吸收。β-胡萝卜素是维生素A的重要来源，而维生素A是例如生长和发育所必需的物质。
当以避免显著的不希望的副作用或肠道不适的低剂量施用时，山楂或植物甾醇对于代谢性疾病如肥胖症没有统计学显著的效果。
但是，本领域明显需要这类天然制品，其既能够安全使用而没有副作用，还能够降低发生代谢性疾病的风险。
本发明的发明人满足了这一需求。
因此，本发明的目的是改善现有技术的状态，并且特别是提供一种天然组合物，其克服了现有技术的问题并且满足了上述需求。
发明人惊讶地发现，独立权利要求的主题实现了本发明的目的。从属权利要求的主题进一步发展了本发明的中心思想。
具体而言，发明人在仓鼠模型中发现，当共同施用时，山楂和植物甾醇类协同地起作用，使血脂、体重和脂肪积累发生统计学显著的降低，同时保持植物甾醇类和山楂各自的低剂量，所述低剂量足以避免不希望的副作用和不适。
因此，本发明部分地涉及包含植物甾醇类和山楂的组合物，其用于治疗、减轻或预防代谢性疾病。
本发明还涉及植物甾醇类和山楂在制备用于治疗、减轻或预防代谢性疾病的组合物中的用途。
山楂和植物甾醇类的组合显示出对预防高血脂浓度的积累非常有效，尤其是在进食高脂饮食时。
对于本发明的目的，如果脂肪含量为高于每日推荐摄入量(RDI)至少10％、至少25％、至少50％、至少75％或至少100％，则膳食被考虑为“高脂的”。
因此，能够用本发明的组合物预防、减轻或治疗的代谢性疾病可以与高甘油三酯血症相关。
例如，所述代谢性疾病可选自超重、肥胖、糖尿病、高血压、肝硬化、代谢综合征及其组合。
“超重”定义为成年人具有25-30的BMI。
“体重指数”或“BMI”是指按kg计的体重除以按米计的身高的平方的比例。
“肥胖”是一种状况，其中储存在动物(特别是人和其他哺乳动物)的脂肪组织中的天然能量储备增加到某一水平，此时其与某些健康状况或增加的死亡率相关。“肥胖”定义为成年人具有30以上的BMI。
对于发生进一步的代谢性疾病，特别重要的是高体重，尤其是升高的脂肪量。
因此，预防或治疗超重和/或肥胖是本发明的重要应用。
发明人能够证明本发明的组合物能够用来预防或减少过量的肾周脂肪的蓄积。
因此，本发明组合物可以用于减少或预防肾周脂肪与体重的比例的增加。
在进食高脂饮食时，这是极其有用的。
肾周脂肪厚度也是2型糖尿病患者中慢性肾病、增加的肾抵抗力指数和高尿酸血症的独立指标(lamacchia等人,Nephrol.Dial.Transplant.(2011)26(3):892-898)。因此，本发明组合物也可用于治疗或预防这些疾病。
发明人也发现，本发明组合物能够很好地用来预防或减少腹部脂肪的积累。
因此，本发明组合物可以用于减少或预防腹部脂肪与体重的比例的增加。
腹部脂肪可以是围绕腹部器官的内脏脂肪或者位于皮肤和腹壁之间的皮下脂肪。
本发明组合物具有对于内脏脂肪和皮下脂肪的效果。
尽管众所周知内脏脂肪是主要的脂肪沉着体，其与风险因素如胰岛素抵抗相关，但最近的结果也显示皮下脂肪同样可能参与了这类风险因素， 尤其是在男人中(Goodpaster等人,Diabetes,October 1997,卷46no.101579-1585)。
肥胖与发生非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、高血压和心血管疾病之间的关系也已同时确立(Smith等人,Metabolism,卷50,No 4(April),2001:pp 425-435)；因此，本发明组合物也可用来治疗或预防这些疾病。
同样，对于未患代谢性疾病的个体来说，本发明组合物也可能是有用的。它们例如可用于帮助体重控制。
体重控制可有利于维持或改善个体对其外观和幸福感的满意度。
体重控制也可视为降低罹患代谢性疾病的风险的预防措施。
因此，本发明组合物可用于帮助体重控制。
在治疗应用中，组合物以足以至少部分地治愈或阻止疾病和/或其并发症的症状的量施用。足以实现这一点的量被定义为“治疗有效剂量”。能够有效实现该目的的量取决于本领域技术人员已知的多种因素，例如疾病的严重性以及患者的体重和一般状态。
在预防应用中，本发明的组合物施用给易患特定疾病的或有疾病风险的患者，其施用量足以至少部分地降低发生疾病的风险。所述的量被定义为“预防有效剂量”。同样，精确的量取决于多种患者特异性的因素，例如患者的健康状态和体重。
本发明组合物按照剂量-效应曲线是有效的。它们可以以治疗有效剂量或预防有效剂量施用。技术人员能够适宜地确定这些剂量。
但是，本发明组合物一般可以以相当于每天每公斤体重至少0.5g、1g或3g山楂和至少2.5mg、15mg或40mg植物甾醇类的量施用。
例如，本发明组合物可以包含每天每公斤体重至少0.5g山楂和至少2.5mg植物甾醇类。
或者，本发明组合物可以包含每天每公斤体重至少1g山楂和至少15mg植物甾醇类。
或者，本发明组合物可以包含每天每公斤体重至少3g山楂和至少40mg植物甾醇类。
为了避免不希望的副作用，例如异味或抑制维生素A吸收，所述剂量应当保持在合理的低水平。
例如，山楂的剂量可以不超过2.5g/公斤体重/天，植物甾醇类的剂量可以不超过40mg/公斤体重/天。
山楂可以以任何适合施用给人或动物的形式提供。例如，山楂可以以新鲜果实、干果实、山楂叶或以其提取物的形式提供。
可用于本发明目的的典型的植物甾醇类可以选自植物甾醇、甾烷醇或其组合。
例子包括β-谷甾醇、油菜甾醇和/或豆甾醇。
植物甾醇类可以以化学上纯的化合物提供。因此，它们可以从植物来源纯化或者通过化学合成。这提供了非常精确的给药。
也可以优选提供来自天然来源或其提取物的植物甾醇类。因此，植物甾醇类可以是膳食植物甾醇类。它们可以以植物油、坚果、谷类制品、蔬菜、水果、浆果或以其提取物的形式提供。
组合物可以是适合于人或动物食用的任何组合物。
因此，组合物可以选自食品、饮料、功能食品、营养食品、食品添加剂、营养配方食品和宠物食品。
由于代谢性疾病不仅发生于人，也在动物中发生，本发明的组合物可以施用给人或动物，例如伴侣动物如猫或狗。
有利的是，本发明的组合物可以在食用高脂饮食之前的短时间内、同时或稍后的短时间内食用。
所以，组合物可以在高脂饮食之前1小时到高脂饮食之后1小时的时间框架内施用。
本领域技术人员应当理解，在不背离所公开的本发明范围的情况下，他们能够自由地组合本文所述的本发明的所有特征。特别地，用于本发明用途的所述特征可以应用在本发明的组合物上，反之亦然。
本发明的其他优点和特征可从下文的实施例和附图中清楚看出。
图1显示了以相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗显著且协同地导 致HFD仓鼠的血甘油三酯的稳定降低。通过单因素方差分析来分析数据，随后进行Tukey多重比较检验和非配对学生t检验。平均值±SEM，n＝8-12，*P<0.05，相对于对照；P<0.05，相对于HFD-安慰剂。
图2显示了以相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗显著且协同地导致HFD仓鼠的体重增加的稳定降低。通过单因素方差分析来分析数据，随后进行Tukey多重比较检验和非配对学生t检验。平均值±SEM，n＝8-12，*P<0.05，相对于对照；P<0.05，相对于HFD-安慰剂。
图3显示了以相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗显著且协同地导致HFD仓鼠的肾周脂肪增加的稳定降低。通过单因素方差分析来分析数据，随后进行Tukey多重比较检验和非配对学生t检验。平均值±SEM，n＝8-12，*P<0.05，相对于对照；P<0.05，相对于HFD-安慰剂。
图4显示了以相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗显著且协同地导致HFD仓鼠的腹部脂肪增加的稳定降低。通过单因素方差分析来分析数据，随后进行Tukey多重比较检验和非配对学生t检验。平均值±SEM，n＝8-12，*P<0.05，相对于对照；P<0.05，相对于HFD-安慰剂。
实施例
叙利亚金色仓鼠称重约120-130g，购自Beijing Vital River Laboratory Animal有限公司。将动物圈养在可控环境中(22-24℃和12h光照-12h黑暗)，自由取食自来水和食物。
在一周的适应后，将仓鼠随机分配到不同的实验组。通过向动物饲喂高胆固醇饮食来诱导高脂血症，并测定升高的血浆TC、TG和HDL-C水平。所述饮食通过混合以下成分来制备(g/kg)：


将成分粉末与明胶溶液(20g/L)以每升溶液200g饮食的比例混合。一旦明胶凝固，将饮食切成约10g的小丁，冷冻储存在-80℃直到使用。
实验组如下：
1)对照：正常饮食组(n＝12)
2)HFD：高脂饮食组(n＝12)
3)HFD-H：在高脂饮食中的山楂浆体(新鲜果实5g/kg/天，n＝12)
4)HFD-PS：在高脂饮食中的植物甾醇酯类(植物甾醇酯类0.15g/kg/天，n＝12)
5)HFD-PS/H：在高脂饮食中的山楂浆体和植物甾醇酯类(n＝12)
1.植物甾醇(PS)和山楂(H)对血甘油三酯(TG)降低的协同作用
背景：在医学上，高甘油三酯血症表示血中甘油三酯的高水平，甘油三酯是多数生物体中最丰富的脂肪类分子。其与动脉粥样硬化相关，即使不存在高胆固醇血症(高胆固醇水平)也是如此。其也能在过高浓度时导致胰腺炎(即，当甘油三酯浓度高于、经常远高于1000mg/dl或12mmol/l时)。
血甘油三酯：在6周的处理后，高脂饮食显著增加126mg/dL的血甘油三酯(表1，HFD-安慰剂相对于对照)。单独的植物甾醇显示了在HFD仓鼠中血甘油三酯的稳定降低(图1，HFD-PS相对于对照，P>0.05；HFD-PS相对于HFD-安慰剂，P<0.05)。尽管山楂并未显示单独的降低作用，但其增加了植物甾醇降低血甘油三酯的作用达8.8mg/dL。
表1.山楂(H)和植物甾醇(PS)在高脂饮食(HFD)仓鼠中的血甘油三酯降低效果。

2.山楂(H)和植物甾醇(PS)对体重和脂肪组织的降低的协同效果
背景：过量的体重与多种疾病相关，特别是心血管疾病、2型糖尿病、阻塞性睡眠呼吸暂停、某些类型的癌症以及骨关节炎。因此，发现肥胖降低预期寿命。
2.1体重：在8周处理之后，高脂饮食显著增加体重45.6g(表2,HFD-安慰剂相对于对照)。与HFD-安慰剂相比(图2,HFD-H、HFD-PS相对于对照，*P<0.05；HFD-H、HFD-PS相对于HFD-安慰剂，P>0.05)，用植物甾醇或山楂处理对体重没有显著改变。尽管这两类成分各自本身未显示显著的保护作用，但山楂和植物甾醇在同样剂量下的组合治疗与HFD-安慰剂相比却显著降低了体重(图3.1，HFD-PS/H相对于HFD-安慰剂，P<0.05)。此外，组合治疗显示了相对于单独治疗而言对体重的协同的降低效果(表2)。
表2.山楂(H)和植物甾醇(PS)在高脂饮食(HFD)仓鼠中的体重降低效果

2.2肾周脂肪：在8周处理之后，高脂饮食显著增加肾周脂肪与体重的比例(表3，HFD-安慰剂相对于对照)。与HFD-安慰剂相比(图3，HFD-H、HFD-PS相对于对照，*P<0.05；HFD-H、HFD-PS相对于HFD-安慰剂，P>0.05)，用植物甾醇或山楂处理对体重没有显著改变。尽管这两类成分各自本身未显示显著的保护作用，但山楂和植物甾醇在同样剂量下的组合治疗与HFD-安慰剂相比却显著降低了肾周脂肪与体重的比例(图3,HFD-PS/H相对于HFD-安慰剂，P<0.05)。
表3.山楂(H)和植物甾醇(PS)在高脂饮食(HFD)仓鼠中的肾周脂肪降低效果

2.3腹部脂肪：在8周处理之后，高脂饮食显著增加腹部脂肪和腹部脂肪与体重的比例(表4，HFD-安慰剂相对于对照)。与HFD-安慰剂相比(图4，HFD-H、HFD-PS相对于对照，*P<0.05；HFD-H、HFD-PS相对于HFD-安慰剂，P>0.05)，用植物甾醇或山楂处理对体重没有显著改变。尽管这两类成分各自本身未显示显著的保护作用，但山楂和植物甾醇在同样剂量下的组合治疗与HFD-安慰剂相比却显著降低了腹部脂肪与体重的比例(图4,HFD-PS/H相对于HFD-安慰剂，P<0.05)。
表4.山楂(H)和植物甾醇(PS)在高脂饮食(HFD)仓鼠中的腹部脂肪降低效果