一种治疗抑郁症的中药组合物及其制法与检测方法及应用.pdf

本发明属于中药领域，名称为一种治疗抑郁症的中药组合物及其制法与检测方法及应用，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1～2重量份，马蹄根1～2重量份，东北卫矛1～2重量份，花荵1～2重量份。其制备工艺为：取干燥的大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，加水煎煮1～3次，加水4～15倍量，浸泡0.5～2h，煎煮0.5～2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入辅料，采用中药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂。本发明还提供该中药的含量测定方法及指纹图谱检测方法，该方法具有较高准确度、稳定性和重复性。该中药组合物可用于制备治疗失眠症、健忘症的药物。

权利要求书
1.  一种治疗抑郁症的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1～2重量份，马蹄根1～2重量份，东北卫矛1～2重量份，花荵1～2重量份。

2.  如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1重量份，马蹄根2重量份，东北卫矛1重量份，花荵2重量份。

3.  如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜2重量份，马蹄根1重量份，东北卫矛2重量份，花荵1重量份。

4.  如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1重量份，马蹄根1重量份，东北卫矛1重量份，花荵1重量份。

5.  如权利要求1～4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物采用如下方法制备：取干燥的大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，加水煎煮1～3次，加水4～15倍量，浸泡0.5～2h，煎煮0.5～2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入辅料，采用中药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口服液、散剂。

6.  如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物采用如下方法制备：取干燥的大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，加水煎煮2次，第一次加水11倍量，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4倍量，煎煮1h，合并两次煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，装入硬胶囊，即得。

7.  如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的含量测定方法为：采用高效液相色谱指纹图谱测定：
     （1）色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为15:85的甲醇:水，流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000；
    （2）供试品溶液：取装量差异符合规定的本品内容物，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液；
（3）对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

8.  如权利要求1～4任意一项所述的药物组合物，其特征在于，该药物组合物的高效液相色谱指纹图谱的检测方法为：
（1）色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱；流动相：乙腈-0.6%磷酸水溶液，梯度洗脱：0min～30min，乙腈从10%线性上升至25%，0.6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%，30min～60min，乙腈从25%线性上升至60%，0.6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%，60min～65min，乙腈从60%线性上升至67%，0.6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%，65min～75min，乙腈保持67%，0.6%磷酸水溶液保持33%，75min～95min，乙腈从67%线性上升至100%，0.6%磷酸水溶液从33%线性下降至0；体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；
（2）参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得；
（3）供试品溶液的制备：取10粒本发明中药组合物的内容物，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。

9.  如权利要求1～4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物在制备治疗失眠症药物中的应用。

10.  如权利要求1～4任意一项所述的中药组合物，其特征在于，该中药组合物在制备治疗健忘症药物中的应用。

说明书一种治疗抑郁症的中药组合物及其制法与检测方法及应用
技术领域
本发明属于中药领域，涉及一种治疗抑郁症的中药组合物，具体涉及一种由为大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵为原料制成的中药组合物。
背景技术
对于抑郁症的治疗，主要从患者的心境着手，从其兴趣爱好以及情绪的波动等对其进行治疗，对于抑郁症中医认识由来已久，在《内经》一书中对于抑郁症的治疗就已经存在，但是还未定义其病名，却对五气之郁有着较为明确的阐释，对于五郁的治疗奠定了相应的基础，为今天忧郁症的治疗提供了相应的借鉴意义。如果肝胆之间的气血通畅，那么会使得脏腑之间的循环运转畅通无阻，但是如果出现了病变，则会使得整个脏腑之间的气血流通不畅，造成患者出现抑郁现象。因此根据相应的抑郁症的表征，可以看出抑郁症主要是由于感情因素所造成，同时还会造成痰湿、郁血、郁火、血气虚耗以及虚实夹杂。对相应的抑郁症的表现和治疗方案进行研究和分析。
    1 肝郁痰结
    患者会出现情绪低落的状况，同时还会有较为容易激怒，记忆减退、懒言少动、终日沉闷、反应迟缓、惴惴不安、目光呆滞、食不安，患者大便干燥、舌苔红而白腻、脉象平和、呕吐、胃肮胀满，还会伴有心悸怔仲，头昏目眩等。由于患者的气机郁滞、肝失疏泄，会出现聚湿生痰以及上扰头目的状况，患者神情呆滞、情绪极低、阳气不足、郁郁寡欢、反应迟缓，痰浊扰心极易出现心悸怔仲，那么在进行治疗的时候则需要以温胆汤加减，如果患者烦躁且易怒，则需加入珍珠母、牡蝠，如果患者出现食欲不佳则需要以麦芽、神曲辅助治疗，对于舌苔红而黄腻患者则要加入佩兰、黄连，大便干燥患者需要加入大黄、莱旅子、蒲公英。
    2 气血淤积
    患者表现为心神不宁、精神烦躁而抑郁、夜间多梦、头晕、头疼，且身体还存在某些部位发麻、发热，情绪不稳、健忘嗜睡、大便干燥、舌色暗红、舌苔白腻。如果患者的血液运行不畅，则会影响五脏六腑生理功能，因为血液循环是人体的根本，所以要使得血脉和利才能保障人的精神劲。如果出现情志不合、气血不畅、肝失疏泄、精神低落、躁动不安、气血阻滞、脉络不畅、久郁化热，故此身体会出现发麻、发热之感。治疗当以顺气化癖为主，并且以血府逐癖汤加减。若坐立不安者，当辅以玄参、麦冬、桅子，夜间难眠则应加炒枣仁。
    3 心肝郁火
    此类患者情绪极易波动、烦躁冲动、彻夜难眠、面目红赤、惶恐不安、面色紧张、喜食冷饮、求医心切、小便浑浊、大便多日不畅，舌色偏红、舌苔黄腻、脉弦数，心脏为火、七情难遂、五志化火，容易造成患者心火旺盛、因热扰神，或者是心火引动肝火，此时患者情绪起伏、烦躁不安、恐惧。因此治疗之法当以清心平肝为宜，药物则以黄连解毒汤加味。舌色红且舌苔黄腻者加入佩兰、黄连口渴喜食冷饮者，当加入知母、石膏另大便干燥患者适量加入芒硝、大黄。
    4 气血虚亏
    4.1 心脾俱虚 患者久病、情绪不稳、忧愁郁闷、身心疲惫、夜间多梦且易失眠、身体消瘦、面色苍白、气虚懒言、疲倦乏力，妇女患者月经变少、淋漓不尽或色淡，小便正常、大便失调或便塘，患者舌色偏淡、舌苔变白、脉象沉细。由于患者存在整日思虑、心血暗耗、烦愁过度、脾气耗伤，造成心脾两伤，心绪不宁，此为惊悸怔仲、神智迷离、情绪低下，脾为后天之本，因此妇女患者经少、色淡。其治疗之法多为补益心脾，药物则以四君子汤加减。若小便频繁、大便稀则需加入益智仁、补骨脂等若时常想哭的患者，需要加入百合对于失眠较重患者需要加入定量合欢皮、酸枣仁。
    4.1 肝肾亏虚 肝肾亏虚患者情绪失落、兴趣乏味、遇事失望、忧心忡忡、闷闷不乐、缺乏生活信心、终日显疲态、心神不佳、注意力不集中且记忆力差，生活闭塞、较易出现盗汗、自汗、五心烦热、早泄、阳痪、大便失调不规律、舌色偏淡、舌苔呈白色、脉象细。此类患者由于忧郁成疾、肾虚、情绪低落、忧心忡忡、索然无味。
    4.2 肾阳亏虚 久病不治、情绪低下、默默寡言、阴囊湿润、腰膝酸冷、身体疲惫、浑身疼痛、男子阳痪、舌色偏淡或者伴有齿痕、舌苔白滑或者白腻、脉象沉细。由于病程日久较易成阳气受损，逐渐阳气虚弱、精神不振、情绪低沉、功能减退，患者疲惫且四肢发冷，舌色淡且舌苔白腻等均为阳虚寒凝之症状圈。
    5 讨论
    由于抑郁症是当前的一种发病较高的病症，这种疾病集合了社会、心理、生物等各个方面的病，抑郁症的产生与个体的差异存在密切的联系，因此根据患者所处的人群不同，其治疗的方案也不尽相同，因此要根据中医的辨证理论来对患者进行治疗，通过辨证的思路来对忧郁症的患者进行符合实际的治疗。
本发明提供了一种治疗抑郁症的中药组合物，经研究表明，该中药组合物对抑郁症具有较好的治疗效果。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗抑郁症的中药组合物。
本发明的另一目的是提供该中药组合物的制备方法。
本发明还提供该中药组合物的质量检测方法。
本发明还提供了该中药组合物的制药用途。
本发明的目的是通过以下方式实现的：
一种治疗抑郁症的中药组合物，该中药组合物是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1～2重量份，马蹄根1～2重量份，东北卫矛1～2重量份，花荵1～2重量份。
该中药组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1重量份，马蹄根2重量份，东北卫矛1重量份，花荵2重量份。
该中药组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大叶藜2重量份，马蹄根1重量份，东北卫矛2重量份，花荵1重量份。
该中药组合物优选是由以下重量份的原料制成的：大叶藜1重量份，马蹄根1重量份，东北卫矛1重量份，花荵1重量份。
该中药组合物采用如下方法制备：取干燥的大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，加水煎煮1～3次，加水4～15倍量，浸泡0.5～2h，煎煮0.5～2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入辅料，采用中药学中常规的制药方法制备成片剂、丸剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、口服液、散剂。
优选采用如下方法制备：取干燥的大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，加水煎煮2次，第一次加水11倍量，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4倍量，煎煮1h，合并两次煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成干膏粉，加入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，装入硬胶囊，即得。
该药物组合物的含量测定方法为：采用高效液相色谱指纹图谱测定：
     （1）色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为15:85的甲醇:水，流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000；
    （2）供试品溶液：取装量差异符合规定的本品内容物，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液；
（3）对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。
该药物组合物的高效液相色谱指纹图谱的检测方法为：
（1）色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱；流动相：乙腈-0.6%磷酸水溶液，梯度洗脱：0min～30min，乙腈从10%线性上升至25%，0.6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%，30min～60min，乙腈从25%线性上升至60%，0.6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%，60min～65min，乙腈从60%线性上升至67%，0.6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%，65min～75min，乙腈保持67%，0.6%磷酸水溶液保持33%，75min～95min，乙腈从67%线性上升至100%，0.6%磷酸水溶液从33%线性下降至0；体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；
（2）参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得；
（3）供试品溶液的制备：取10粒本发明中药组合物的内容物，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测。
该中药组合物可以用于制备治疗失眠症的药物。
该中药组合物还可以用于制备治疗健忘症的药物。
本发明中药组合物中的大叶藜为藜科藜属植物杂配藜Chenopodium hybridum L.的全草；马蹄根为观音坐莲科观音坐莲属植物大观音坐莲Angiopteris magna Ching的根茎。东北卫矛为卫矛科卫矛属植物毛脉卫矛Euonymus alatus (Thunb.)Sieb. var. pubescens Maxim.的带翅茎枝或根。花荵为花荵科花荵属植物花荵Polemonium coeruleum L.[P. Racemosum (Regel) Kitamura]和小花荵P. liniflorum V. Vassil.的全草或根与根茎。
    通过如下实验研究验证本发明的技术效果：
    实验一：本发明中药组合物抗抑郁作用实验研究
    1材料与方法
    1.1药物
    （1）本发明中药组合物：取干燥的大叶藜250.0g，马蹄根250.0g，东北卫矛250.0g，花荵250.0g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
（2）对比中药组合物A：取干燥的大叶藜333.3g，马蹄根333.3g，东北卫矛333.3g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
（3）对比中药组合物B：取干燥的马蹄根333.3g，东北卫矛333.3g，花荵333.3g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
（4）对比中药组合物C：东北卫矛333.3g，花荵333.3g，大叶藜333.3g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
（5）对比中药组合物D：花荵333.3g，大叶藜333.3g，马蹄根333.3g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，置冰箱保存，实验时以常水配成所需浓度。
    1.2动物
    健康SD大鼠，雄性，体重180～200g，健康ICR小鼠，雌雄不限，体重18～22g，南京中医药大学实验动物中心提供。
    1.3药品及试剂
    盐酸文拉法辛片（常州四药制药有限公司，国药准字H20110150），给药剂量6.25mg/Kg，为人临床用量1.25mg/Kg的5倍；利血平片（上海信谊药厂有限公司，国药准字H31021148）。
    1.4仪器
    有机玻璃游泳槽，高40cm，长60cm，宽30cm，南京中医药大学实验动物中心提供；XZ-4小鼠自主活动计数器，南京中医药大学实验动物中心提供。
    1.5方法
    1.5.1大鼠强迫游泳实验：健康SD大鼠70只，雄性，按体重随机分成7组，每组10只，即模型对照组，阳性对照盐酸文拉法辛片6.25mg/Kg剂量组及本发明中药组合物20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物A20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物B20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物C20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物D20.00生药/Kg剂量组，模型对照组给予同体积去离子水。大鼠灌胃给药，给药1次/天，连续10天。第9天，于给药后30min将大鼠单个放入有机玻璃游泳槽中，水深为15cm，水温25℃，强迫其游泳，15min后取出动物，晒干，然后放回笼中。于末次给药30min后，将大鼠放入游泳槽中，记录5min内大鼠保持不动状态的时间，即大鼠微蜷躯体，但保持垂直姿势，鼻孔露出水面的时间。
    1.5.2小鼠尾悬挂实验：健康ICR小鼠70只，雌、雄各半，按体重随机分成7组，每组10只，即模型对照组、阳性对照盐酸文拉法辛片6.25mg/Kg剂量组及本发明中药组合物20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物A20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物B20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物C20.00生药/Kg剂量组，对比中药组合物D20.00生药/Kg剂量组，模型对照组给予同体积去离子水。小鼠灌胃给药，每日1次，连续10天。于末次给药30min后，将小鼠尾（距尾尖1cm处）用胶布粘在高出桌面3cm的木条上，记录5min内动物的不动时间。
    1.5.3利血平拮抗实验：健康小鼠140只，雌、雄各半，按体重随机分成7组，每组20只，分组及剂量同上，于末次给药30min后，小鼠尾静脉注射利血平2mg/Kg，于注射1h后观察小鼠眼睑下垂的动物数、身体僵直保持肌挛状态不动的动物数，并计算其发生率，观察并记录注射利血平前后体温变化。
    1.5.4自主活动实验：健康小鼠70只，雌雄各半，按体重随机分成7组，每组10只，即模型对照组、盐酸文拉法辛片组及本发明中药组合物组，对比中药组合物A组，对比中药组合物B组，对比中药组合物C组，对比中药组合物D组，给药剂量同前。小鼠灌胃给药，每日1次，连续10天。于末次给药后30min，以XZ-4小鼠自主活动计数器记录各组小鼠的自主活动情况，记录5min，测定2次，取其平均值。
    1.6统计学方法
    应用SPSS10.0统计软件进行数据处理，所有计量资料以均数±标准（                                                ±s）差表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。
    2结果
    2.1大鼠强迫游泳实验
    强迫游泳模型中出现的不动状态也反映了动物的绝望行为，可以模拟人类的抑郁状态。与模型对照组比较，本发明中药组合物组可明显对抗“失望”，缩短游泳不动时间（P<0.05），而对比中药组合物A组至对比中药组合物D组的作用效果则不明显。见表1。
表1本发明中药组合物对大鼠强迫游泳实验的影响（±s）

与模型对照组比较，*P<0.05
    2.2小鼠尾悬挂实验
    小鼠在悬尾模型中出现的不动状态反映了动物的绝望行为。与模型对照组比较，本发明中药组合物组可缩短小鼠悬尾的不动时间（P<0.05），而对比中药组合物A组至对比中药组合物D组的作用效果则不明显。提示本发明中药组合物具有减轻小鼠绝望行为、抗抑郁作用。见表2。
表2本发明中药组合物对小鼠悬尾实验的作用（±s）

与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01
    2.3利血平拮抗实验
    与模型对照组比较，本发明中药组合物组可明显降低利血平引起小鼠眼睑下垂及小鼠运动不能发生率（P<0.05），可减轻注射利血平后体温降低的程度（P<0.05）；而对比中药组合物A组至对比中药组合物D组的作用效果则不明显。见表3～表5。
表3本发明中药组合物对利血平引起小鼠眼睑下垂作用的影响（±s）

与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01
  表4本发明中药组合物对利血平引起小鼠运动不能的影响（±s）

与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01
表5本发明中药组合物对利血平引起小鼠体温降低的影响（±s）

与模型对照组比较，*P<0.05
    2.4自主活动实验
未见本发明中药组合物各剂量组对小鼠自主活动有显著影响。见表6。
表6 本发明中药组合物对小鼠自主活动的影响（±s）

与模型对照组比较，**P<0.01
3.结论
常用的抑郁症动物模型主要有应激模型、药物诱发的抑郁模型等。小鼠悬尾实验和绝望游泳实验是根据环境因素致病学说，利用绝望行为建立的经典抑郁模型，用于抗抑郁药物药效的初步评价。药物诱发的抑郁模型主要筛选具有专一神经化学作用抑郁药，而利血平拮抗模型主要对增强单胺神经递质功能的药物比较敏感。利血平是一种囊泡再摄取抑制剂，它使递质留在囊泡外，易被单胺氧化酶降解，从而使儿茶酚胺（去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺和5-HT）耗竭，引起行为和生理上的变化。经利血平处理的动物出现上眼睑下垂、体温下降及强直
症状，预先用三环抗抑郁药及单胺氧化酶抑制剂处理，能拮抗上眼睑下垂及体温下降的症状。事实上此实验包含3个方面独立的生物学检测，因为利血平引起的上眼睑下垂、体温下降及强直可分别被α-肾上腺素能或5-HT能激动剂、β-肾上腺素能激动剂及多巴胺能激动剂所拮抗。
    从动物实验结果看，本发明中药组合物可明显对抗“失望”，缩短游泳不动时间；可缩短小鼠悬尾的不动时间；可降低利血平引起小鼠眼睑下垂及小鼠僵直状态发生率，减轻注射利血平后体温降低的程度；对正常小鼠自主活动无影响。由此可见，本发明中药组合物对行为应激模型和药物诱发的抑郁模型有一定的抗抑郁作用，同时对正常小鼠的自主活动没有显著影响，此点与阳性药物比较具有一定的区别。
    综上，本发明中药组合物具有明显的抗抑郁作用，并且优于对比中药组合物A、对比中药组合物B、对比中药组合物C和对比中药组合物D，说明本发明药物组合物中各药味之间的配伍精良，缺一不可，各药味之间的组合产生了明显的协同增效作用，具有开发成一个抗心肌缺血抗抑郁的中药新药的前景。
    实验二：本发明中药组合物胶囊治疗抑郁症的临床研究
    本研究对南京中医药大学附属连云港医院收治的40例抑郁症患者采用本发明中药组合物胶囊治疗，取得满意效果，报道如下。
    1.资料与方法
    1.1临床资料选取2013年2月至2014年11月医院住院或门诊收治的40例抑郁症患者，均符合全国精神疾病分类方案与诊断标准（第3版）（CCMD-3）抑郁症诊断标准。采用随机单盲法将其分为对照组和观察组，每组20例。其中：
对照组男性10例，女性10例，年龄43～55岁，平均年龄（48.36±4.57）岁，病程1～7年，平均病程（2.35±0.63）年，本次发作病期（0.75±0.47）年，发作次数（1.86±0.81）次，HAMD-17评分（25.67±4.67）分；
观察组男性11例，女性9例，年龄45～56岁，平均年龄（48.43±4.47）岁，病程1～7年，平均病程（2.42±0.59）年，本次发作病期（0.76±0.43）年，发作次数（1.83±0.91）次，HAMD-17评分（25.51±4.60）分。
两组患者的性别、年龄、病程以及病情差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。入选患者均在入组前2周内未使用其他抗抑郁药，并签署知情同意书。
1.2纳入标准
纳入标准：
（1）汉密尔顿抑郁量表（HAMD-17）总分≥18分；
（2）中医辨证：主症精神抑郁，症见善悲易哭或急躁易怒、胸胁胀痛或满闷、头痛眩晕、迟滞、入睡困难、少寐多梦、心悸纳呆、腰膝酸软、疲乏无力、舌质淡或红、舌苔黄腻或白腻、脉弦或兼细、数、滑等。
排除标准：
（1）心肺肝肾等严重躯体疾病者；
（2）继发性抑郁症及双相情感障碍抑郁症患者；
（3）神志不清、失语、痴呆等器质性疾病者；
（4）不遵守试验方案服药者以及无人监护者；
（5）严重药物过敏史、哺乳期、妊娠者；
（6）心电图检查或化验室检查结果异常者。
1.3治疗方法
对照组给予盐酸帕罗西汀片（浙江尖峰药业有限公司，国药准字H20040533）初始剂量10mg，1次/d，3d后加至20mg/d，以后根据病情变化及药物耐受性情况加至个体化治疗剂量（最高剂量为40mg/d），平均日剂量（19.5±6.4）mg/d，疗程为6周。
    观察组给予说明书实施例1的本发明中药组合物胶囊，1次3粒，2次/d，疗程为6周。
1.4观察项目
所有患者均于治疗前和治疗后1周、2周、4周、6周进行临床疗效、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分判定疗效、临床疗效总评量表（CGI-SI）、抑郁自评量表（SDS）评分及副反应量表（TESS）评分。
1.5疗效评价标准
根据HADM评分和临床症状改善程度制定疗效评定标准。
（1）痊愈：HAMD减分率≥75%，临床症状消失；
（2）显效：HAMD减分率≥50%，临床症状明显改善；
（3）有效：HAMD减分率≥25%，临床症状部分改善；
（4）无效：HAMD减分率＜25%，临床症状大部分无缓解。
1.6统计学方法
采用SPSS17.0统计学软件分析所得数据，计量资料用（±s）表示，进行t检验；计数资料用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。
2.结果
2.1临床疗效比较
由表7可看出，观察组的治愈率和总有效率明显高于对照组（P＜0.05），无效率明显低于对照组（P＜0.05）。
表7 两组抑郁症患者的临床疗效比较（n，%）

注：与对照组比较，*P＜0.05。
    2.2两组患者治疗前后的HAMD、SDS及CGI评分比较由表8可看出，两组患者治疗后的HAMD、CGI及SDS评分明显低于治疗前（P＜0.05或0.01）。观察组治疗2周后的HAMD、CGI及SDS评分明显低于对照组（P＜0.05）。
表8 两组抑郁症患者治疗前后的HAMD、SDS及CGI-SI评分比较
（n=20，±s）

注：与治疗前比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与对照组比较，#P＜0.05。
2.3不良反应
对照组3例出现口干，恶心1例，腹泻4例、便秘5例、眩晕或头晕2例，头痛2例，视力模糊2例、失眠4例，嗜睡2例，TESS（0.82±0.47）分；
观察组2例出现口干，恶心1例，腹泻1例、便秘1例、眩晕或头晕2例，头痛1例，视力模糊1例、失眠0例，嗜睡1例，TESS（0.47±0.52）分。
观察组的不良反应数及TESS评分均低于对照组（P＜0.05或0.01），其中观察组患者的便秘及失眠数明显低于对照组（P＜0.01）。
3.结论
帕罗西汀是一种选择性血清素再吸收抑制剂（SS-RI）型的抗抑郁药，具有起效快、疗效好的特点。本发明中药组合物不仅可通过调节不同脑区的5-HT、NE等神经递质，并且可通过降低慢性应激导致的过高浓度的CORT、ACTH、TNF-α、IL-1β，逆转神经-内分泌-免疫功能紊乱，产生抗抑郁作用。本研究显示，观察组的治愈率和总有效率明显高于对照组（P＜0.05或0.01）；两组患者治疗后的HAMD、CGI及SDS评分明显低于治疗前（P＜0.05或0.01）；观察组治疗2周后的HAMD、CGI及SDS评分明显优于对照组（P＜0.05）；观察组的不良反应数及TESS评分均明显低于对照组（P＜0.05或0.01），且能明显改善患者的睡眠质量（P＜0.05）。揭示本发明中药组合物胶囊能有效改善抑郁症的临床症状、HAMD评分以及SDS评分。因此，本发明中药组合物胶囊治疗抑郁症的临床效果显著，不良反应少，且能改善患者睡眠质量。
实验三：本发明中药组合物胶囊治疗失眠症的临床研究
    1 资料与方法
    1.1 一般资料
    选取2014年4月至2014年11月南京中医药大学附属连云港医院收治的50例肝郁血虚证失眠患者作为研究对象，按照随机数字表法将患者分为观察组和对照组各25例。其中：
观察组：男13例，女12例；患者年龄为31～48岁，平均年龄为（42.36±4.64）岁；病程10个月至2年，平均病程（1.53±0.48）年。
对照组：男12例，女13例；患者年龄为32～47岁，平均年龄为（42.45±4.51）岁；病程10个月至2年，平均病程（1.59±0.41）年。
两组患者性别、年龄、病程等一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。
    1.2 诊断标准
所有患者经检查均符合相关诊断标准，且排除药物不耐受者。
西医诊断标准：患者睡眠潜伏期延长，入睡时间超过30min；患者睡眠夜间觉醒次数达2次以上；患者睡眠多梦，睡眠质量下降；总睡眠时间低于6h。上述症状持续1个月以上。
中医诊断标准：患者有典型的失眠症状，入睡较难，多梦，全天睡眠低于5h；反复发作。中医辨证标准：患者胸胁胀满、头痛目眩、面色无华，或表现为肢体麻木、舌淡、脉细等。
    1.3 方法
    1.3.1 对照组 采用艾司唑仑片（上海信谊药厂有限公司，国药准字H31021533）治疗，每天睡前30min口服，每次1mg。治疗2周为1个疗程，共2个疗程。
    1.3.2 观察组 采用中药本发明中药组合物胶囊治疗，按照说明书实施例1的方法制备，口服，1次3粒，每日2次，治疗2周为1个疗程，共2个疗程。观察两组患者临床疗效。
    1.4 疗效评价标准
    （1）治愈：经治疗后，患者睡眠时间恢复正常，醒后精力充沛；
    （2）显效：经治疗后，患者睡眠时间有显著改善，睡眠深度增加；
    （3）有效：经治疗后，患者失眠症状减轻，睡眠时间比之前增加3h以内；
    （4）无效：经治疗后，患者失眠症状未见好转，甚至病情加重。
    总有效率＝（治愈＋显效＋有效）例数／总例数×100%
    1.5 统计学方法
    实验数据采用SPSS11.0统计软件进行统计学分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验；计数资料以百分比表示，采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。
    2 结果
    结果表明，观察组患者治疗总有效率（88.00%）显著高于对照组（64.00%），差异具有统计学意义（*P＜0.05）。见表9。
表9 两组患者临床疗效比较［n（%）］

3 结论
观察组患者治疗总有效率（88.00%）显著高于对照组（64.00%），差异具有统计学意义（P＜0.05）。采用本发明中药组合物胶囊治疗肝郁血虚证失眠疗效显著。
实验四：本发明中药组合物胶囊制备工艺及质量检测方法研究
    1仪器与试药
    JA5003N型电子天平（上海精密科学仪器有限公司生产），RE-52A旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂生产），ZK-1真空干燥箱（天津市中环试验电炉有限公司生产），LC-10AT高效液相色谱仪（日本岛津公司生产）；SPD-10A紫外检测器（日本岛津公司生产）；江申通用汉字色谱工作站。
 硅胶G（青岛海洋化工集团公司，批号：20140405）；大叶藜、马蹄根、东北卫矛、花荵，均为市售产品，均由连云港康济大药房连锁有限公司提供；水为新制蒸馏水；辅料均为药用辅料；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。
    2试验方法与结果
    2.1提取工艺条件优化
    2.1.1正交实验设计：选择加水量、浸泡时间、煎煮时间作为考察因素，以干膏收率为评价指标，采用L9（34）正交表安排试验，所选因素水平见表10。
表10  提取工艺正交试验因素水平表

    2.1.2干膏收率的测定：精密量取提取液50mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴上蒸干残渣，于105℃烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷却30min，迅速精密称量，计算干膏收率。
    2.1.3正交试验结果：按处方比例精密称取9份药材（每份50g），置入1000mL烧瓶中，加入规定量水，浸泡至规定时间后，进行煎煮，达到规定时间后过滤药渣，并加入水进行2次煎煮，过滤，合并滤液，浓缩至稠膏状，分别计算干膏收率。见表11。
表11 正交试验结果

    方差分析结果见表12。
表12 方差分析结果

F0.05（2，2）=19.00
    由表11极差分析的结果可知，各因素对评价指标干膏收率影响主次顺序为B＞C＞A，即煎煮时间＞浸泡时间＞总加水量。且A2＞A3＞A1，B2＞B1＞B3，C2＞C3＞C1，并且各因素对评价指标均无显著影响，故应选A2，B2，C2，因此即总加水量：第一次11倍、第二次4倍，煎煮时间：分别为1h，浸泡时间：1h。    
    2.2成型工艺条件优化
    2.2.1辅料种类的筛选：干膏粉碎后过40目筛得到干膏粉，取干膏粉适量，按一定比例与辅料分别混合均匀，添加适量95%乙醇，进行制粒，分别测定吸湿率和休止角。制得的颗粒置于温度40℃、相对湿度70%环境下，考察颗粒吸湿情况。采用不同辅料制粒后试验结果见表13。
表13 不同辅料对制粒效果的影响

    由表13可知，添加4种不同的辅料按1:1比例制粒后，颗粒的休止角分别有不同程度的下降，采用糊精和可溶性淀粉作为辅料制粒效果比较理想，休止角最小，说明颗粒流动性最优。
    2.2.2辅料用量的筛选：以干膏粉和辅料不同比例混合制粒后流动性和颗粒状态见表14。
表14 不同辅料添加比对制粒效果的影响

    由表13可知，当干膏粉与辅料比例为4:1时，所制得的颗粒流动性最优，并且制成的颗粒状态较好，因此，确定本发明中药组合物胶囊干膏粉与辅料的添加比例为4:1。
    2.3槲皮素含量测定
    2.3.1色谱条件：色谱柱为C18（150×46.5nm），流动相为甲醇:水（15:85），流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，进样量10μL，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000。
    2.3.2溶液制备：对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液。精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液，冰箱中低温保存备用。
    供试品溶液制备：取装量差异符合规定的本品内容物，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液，冰箱中低温保存备用。
    2.3.3线性关系考察：分别精密吸取对照品贮备液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL置10mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀；按“2.3.1”色谱条件分别进样10μL，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，以对照品溶液浓度为横坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=2.436×10-5A－0.1956，r=0.9998（n=5）。槲皮素在2.110～11.450μg/mL范围内有良好的线性关系。
    2.3.4干扰实验：除大叶藜外，按处方比例称取其它各药材，按本发明中药组合物胶囊工艺标准制成阴性样品；按“2.3.2”项下方法制成阴性供试品溶液。依照“2.3.1”项下色谱条件分别进样，记录色谱图，可见在槲皮素位置处无吸收峰，即其它成份对测定无干扰。
    2.3.5精密度实验：精密吸取各对照品溶液10μL，按“2.3.1”色谱条件连续进样，记录色谱图，计算槲皮素峰面积RSD为1.48%，表明仪器精密度良好。
    2.3.6稳定性实验：精密吸取供试品溶液10μL，分别在0、4、8、12、18、24h进样，记录色谱图，计算槲皮素峰面积RSD为1.5%，表明供试品溶液在24h内稳定性良好。
    2.3.7重复性实验：精密称取同批本发明中药组合物胶囊样品5份，按“2.3.2”方法平行制备，在上述色谱条件下进行分析，计算RSD为0.9%，表明重复性良好。
    2.3.8回收率实验：精密称取已知槲皮素含量的本发明中药组合物胶囊样品5份，各样品分别精密加入已知槲皮素含量的对照品溶液1mL，按供试品溶液制备方法平行制备。按“2.3.1”色谱条件，分别进样10μL。结果槲皮素的平均回收率为99.81%。结果见表15。
表15 回收率实验结果（n=5）

    2.3.9供试品含量测定：取本发明中药组合物胶囊样品5份，50℃烘干至恒重，精密称定。按“2.3.2”项下方法制成供试品，按“2.3.1”项下色谱条件分别进行分析测定，分别进样10μL，按外标法计算样品中槲皮素的含量。含量测定结果表明，5批样品中槲皮素平均含量分别为1.1，1.2，1.3，1.2，1.0，平均含量为1.16mg·g-1。结果见表16。
表16 样品中槲皮素含量测定（n=5）

    本发明中药组合物胶囊每粒装0.3g，依实验数据，每粒胶囊中槲皮素平均含量0.350mg；考虑到中药材质量、工艺稳定性等因素，暂定质量标准为每粒本发明中药组合物胶囊中槲皮素平均含量不得低于0.200mg。
    3结论
    该研究以干膏收率为指标，以加水量、浸泡时间、煎煮时间为影响因素，采用正交试验法系统优化了本发明中药组合物胶囊剂的提取工艺；通过对比试验，考察了该胶囊剂辅料类型和配比、辅料用量成型工艺条件；建立了本发明中药组合物胶囊剂的含量检查项，为有效检测该制剂的有效性与安全性提供了实验依据。
实验五：本发明中药组合物胶囊的HPLC指纹图谱研究
    为了表征本发明中药组合物的主要有效成分，采用高效液相色谱（HPLC）法对其进行分析，参照中药注射剂指纹图谱的有关技术要求进行试验；同时对该制剂中4个指标成分即槲皮素、卫矛醇、金丝桃苷、当归酸进行定量分析。
    1仪器与试药
    岛津高效液相色谱仪，附LC-20AD双泵，SPD-M20A二极管阵列检测器，SIL-20ACHT自动进样器，CTO-20A柱温箱，LC/Labsoluion色谱工作站，日本岛津公司；电子分析天平，1/10万g，型号ME235S，德国塞多利斯公司；SK250-LHC超声波发生器，上海科导超声仪器有限公司。乙腈、甲醇，色谱级，美国Honey-well公司；水为自制超纯水，由Millipore纯水仪，美国millipore公司；其余为分析纯。槲皮素、卫矛醇、金丝桃苷、当归酸对照品均购自中国药品生物制品检定所；本发明中药组合物胶囊，按照本发明说明书实施例1的方法制备，批号：20140224、20140225、20140226、20140301、20140302、20140306、20140309、20140311、20140316、20140318。
    2指纹图谱测定方法与结果
2.1色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱（250×4.6mm，5μm，瑞士Kromasil公司）；流动相：乙腈（A）-0.6%磷酸水溶液溶液（B），梯度洗脱，0～30min，A10%→25%；30～60min，A25%→60%：60～65min，A60%→67%；65～75min，A67%；75～95min，A67%→100%。记录时间为95min。体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；进样10μL。
    2.2参比物与供试品溶液的制备
    2.2.1参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得。
    2.2.2供试品的制备：取10粒本发明中药组合物胶囊内容物，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，滤过（0.45μm滤膜），滤液作为供试品溶液。
    2.3方法学考察
    2.3.1精密度试验：取供试品溶液（批号20140224），连续进样6次，分别对共有峰的相对保留时间和相对峰面积进行考察。结果表明，各共有峰的相对保留时间RSD小于1.0%；相对峰面积RSD小于2.0%，表明仪器精密度良好。
    2.3.2稳定性试验：取供试品溶液（批号20140224），分别于0、2、4、8、12、24h进样分析，考察共有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果表明，各共有峰相对保留时间RSD小于1.0%，相对峰面积RSD小于2.0%，表明供试品在24h内稳定性良好。
    2.3.3重复性试验：取供试品（批号20140224）6份，分别按供试品溶液的制备与检测方法进行检测，分别对共有峰的相对保留时间和相对峰面积进行考察。结果表明，各共有峰相对保留时间RSD小于1.0%，相对峰面积RSD小于2.0%，表明重复性良好。
2.3.4指纹图谱建立与相似度分析：取10批样品，分别按供试品溶液的制备与检测方法进行检测，进样10μL，记录指纹图谱，峰10为卫矛醇，建立指纹图谱。10批样品共有色谱峰的相对保留时间的RSD均小于1.0%，相对峰面积的RSD均小于5.0%，符合指纹图谱研究技术的要求。运用中国药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”对10批本发明中药组合物胶囊的指纹图谱进行相似度分析，首先将色谱工作站数据导入中药指纹图谱相似度计算软件，选定33个共有峰进行谱峰匹配，通过中位数矢量计算得出样品指纹图谱的共有模式，并以此共有模式为标准，进行整体相似度评价，结果相似度为0.955～0.995，表明这10批本发明中药组合物胶囊的化学成分一致性较好。见附图1、附图2。
附图说明：
图1：本发明中药组合物胶囊 HPLC 指纹图谱
图2：10批本发明中药组合物胶囊的 HPLC 指纹图谱
具体实施方式：
实施例1：
处方：大叶藜250.0g、马蹄根250.0g、东北卫矛250.0g、花荵250.0g。
制法：取干燥的大叶藜250.0g，马蹄根250.0g，东北卫矛250.0g，花荵250.0g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，装入硬胶囊，制成硬胶囊1000粒。
含量测定：采用高效液相色谱法测定：
    （1）色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为15:85的甲醇:水，流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000；
    （2）供试品溶液：取装量差异符合规定的10粒本发明中药组合物胶囊的内容物，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液；
（3）对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
    （5）测定结果：每粒本发明中药组合物胶囊中槲皮素为0.355mg。
指纹图谱测定：高效液相色谱指纹图谱的检测：
（1）色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱；流动相：乙腈-0.6%磷酸水溶液，梯度洗脱：0min～30min，乙腈从10%线性上升至25%，0.6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%，30min～60min，乙腈从25%线性上升至60%，0.6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%，60min～65min，乙腈从60%线性上升至67%，0.6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%，65min～75min，乙腈保持67%，0.6%磷酸水溶液保持33%，75min～95min，乙腈从67%线性上升至100%，0.6%磷酸水溶液从33%线性下降至0；体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；
（2）参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得；
（3）供试品溶液的制备：取10粒本发明中药组合物胶囊的内容物，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
（5）检测结果：符合指纹图谱标准。
功能主治：抑郁症、失眠症、健忘症。
用法用量：口服，1次3粒，每日2次。
实施例2：
处方：大叶藜166.7g、马蹄根333.3g、东北卫矛166.7g、花荵333.3g。
制法：取干燥的大叶藜166.7g、马蹄根333.3g、东北卫矛166.7g、花荵333.3g，加水煎煮2次，第一次加水11000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮1h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，装入硬胶囊，制成硬胶囊1000粒。
含量测定：采用高效液相色谱法测定：
    （1）色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为15:85的甲醇:水，流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000；
    （2）供试品溶液：取装量差异符合规定的10粒本发明中药组合物胶囊的内容物，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液；
（3）对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
    （5）测定结果：每粒本发明中药组合物胶囊中槲皮素为0.264mg。
指纹图谱测定：高效液相色谱指纹图谱的检测：
（1）色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱；流动相：乙腈-0.6%磷酸水溶液，梯度洗脱：0min～30min，乙腈从10%线性上升至25%，0.6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%，30min～60min，乙腈从25%线性上升至60%，0.6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%，60min～65min，乙腈从60%线性上升至67%，0.6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%，65min～75min，乙腈保持67%，0.6%磷酸水溶液保持33%，75min～95min，乙腈从67%线性上升至100%，0.6%磷酸水溶液从33%线性下降至0；体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；
（2）参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得；
（3）供试品溶液的制备：取10粒本发明中药组合物胶囊的内容物，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
（5）检测结果：符合指纹图谱标准。
功能主治：抑郁症、失眠症、健忘症。
用法用量：口服，1次3粒，每日2次。
实施例3：
处方：大叶藜333.3g、马蹄根166.7g、东北卫矛333.3g、花荵166.7g
制法：取干燥的大叶藜333.3g、马蹄根166.7g、东北卫矛333.3g、花荵166.7g，加水煎煮3次，第一次加水10000mL，浸泡1h，煎煮1h，第二次加水5000mL，煎煮1h，第二次加水4000mL，煎煮0.5h，合并煎液，滤过，滤液浓缩，干燥，粉碎成细粉，加入比例为1:1的糊精和可溶性淀粉作为辅料，干膏粉与辅料比例为4:1，混匀，制粒，压制成1000片，包衣，即得。
含量测定：采用高效液相色谱法测定：
    （1）色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为比例为15:85的甲醇:水，流速1.2mL?min-1，检测波长256nm，柱温25℃，理论板数按槲皮素峰计不低于4000；
    （2）供试品溶液：取装量差异符合规定的10片本发明中药组合物片剂，研细，50℃烘干至恒重，取1g，精密称量；置具塞20mL容量瓶中，加入80%乙醇至刻度，室温下超声处理2次，0.5h/次；摇匀，滤过，取续滤液，用80%乙醇调至20mL，作为供试品溶液；
（3）对照品溶液制备：精密称取槲皮素对照品4.30mg，置100mL量瓶中，加80%乙醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液贮备液；精密吸取上述溶液1.0mL置10mL量瓶中，用80%乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、对照品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
    （5）测定结果：每片本发明中药组合物片剂中槲皮素为0.422mg。
指纹图谱测定：高效液相色谱指纹图谱的检测：
（1）色谱条件：色谱柱：Kromasil C18色谱柱；流动相：乙腈-0.6%磷酸水溶液，梯度洗脱：0min～30min，乙腈从10%线性上升至25%，0.6%磷酸水溶液从90%线性下降至75%，30min～60min，乙腈从25%线性上升至60%，0.6%磷酸水溶液从75%线性下降至40%，60min～65min，乙腈从60%线性上升至67%，0.6%磷酸水溶液从40%线性下降至33%，65min～75min，乙腈保持67%，0.6%磷酸水溶液保持33%，75min～95min，乙腈从67%线性上升至100%，0.6%磷酸水溶液从33%线性下降至0；体积流量：0.8ml/min；柱温：30℃；检测波长：322nm；
（2）参比物溶液的配制：精密称取卫矛醇对照品适量，加流动相制成质量浓度为100μg/ml的溶液，摇匀，即得；
（3）供试品溶液的制备：取10片本发明中药组合物片剂，混匀，称取1.0g，精密称定，置于50ml量瓶中，加80%甲醇适量，超声30min，放凉，加80%甲醇至刻度，经0.45μm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液；
（4）测定：分别精密量取上述供试品溶液、参比物溶液溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，进行检测；
（5）检测结果：符合指纹图谱标准。
功能主治：抑郁症、失眠症、健忘症。
用法用量：口服，1次3片，每日2次。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。