一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法.pdf

本发明是一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，属于植物育种技术领域。包括：F0代杂交；F2代测定恢复能力；F3代耐菌核病筛选、测定恢复能力；F4、F5代耐盐鉴定筛选、测定恢复能力；F6代杂种优势能力鉴定筛选，选杂种优势强且整齐一致的株系套袋繁殖，达到快速育成的目的。本发明的有益效果是：此方法在早代就确定了所选择育种材料均具有较强的恢复基因，然后连续几代测恢保证有恢复基因，不会因为世代的选择而丢失恢复基因，大大提高了恢复系选育的准确性和成功率。此育种方法不仅仅比一般育种提前2-3个世代，缩短了育种时间2-3年，更比一般育种多了耐盐定向选择，达到快速育成杂交油菜耐盐恢复系，从而节约大量的人力、物力。

权利要求书
1.  一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征包括以下步骤：
杂交：以盐6055为母本，恢复系DY076杂交获得F1代杂交种子，在土壤含盐量为0.4-0.5％的盐碱地滩涂种植F1并套袋自交获得F2代种子；
测恢：在土壤含盐量为0.4-0.5％的盐碱地滩涂播种混收的F2种子，F2分离群体中选择株型紧凑、株高高于170cm的单株与不育系Y1A测交，收获测交种，对应的恢复系也套袋自交收获种子进行品质测定选择目标单株F3种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0%且含油量≥45.0%，即为所选育的杂交油菜耐盐恢复系。

2.  根据要求1所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征在于：在进行步骤（2）测恢后F3代，先进行耐菌核病鉴定筛选获得F4，再进行耐盐鉴定筛选获得F5，即为所选育的杂交油菜耐盐恢复系。

3.  根据要求2所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征在于：在进行步骤（2）测恢后获得的F5，再进行耐盐鉴定筛选获得F6，再进行杂种优势筛选后获得所选育的杂交油菜耐盐恢复系。

4.  根据权利要求2或3所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征在于,所述的耐菌核病鉴定筛选的办法是：选择连续5年种植甘蓝型油菜且上年菌核病发病根据农业行业标准NY/T 2038-2011油菜菌核病测报技术规范 测定为2-3级的田块分株系种植的、材料，同时种植不育系Y1A测交，收获测交种，测交种对应的F3单株也套袋自交种子中根据农业行业标准NY/T 2038-2011油菜菌核病测报技术规范选择耐菌核病0级和1级的植株，获得F4种子。

5.  根据权利要求2或3所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征在于：所述的耐盐鉴定筛选的办法是：在土壤含盐量为0.4-0.5％的盐碱地中连续两年播F4、F5代种子，将选择株型紧凑、株高高于170cm的单株分别与两个不育系Y1A和Y4-2AB测交，收获测交种，对应的单株也套袋自交收获种子收获F6种子。

6.  根据权利要求2或3所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征在于：分株系播种F6代种子和对应的测交种子，选择杂种优势强，比对照“盐油杂1号”增产效果10%以上、植株生长整齐一致的测交种，其对应的自交种进行品质测定选择目标单株种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0%且含油量≥45.0%，即为育成的耐盐恢复系。

说明书一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法
技术领域
本发明属于植物育种技术领域，更为具体的说，是涉及一种杂交 油菜恢复系选育的方法。
背景技术
油菜同其他作物一样，杂种优势明显，利用杂种优势是大幅度提 高产量的有效途径之一。杂交油菜是依靠不育系和恢复系杂交产生超 双亲优势，达到高产的目的。而进行杂交油菜生产，就必须选育出杂 种优势强的亲本，恢复系就是亲本之一。目前生产上是将审定的油菜 品种直接滩涂种植鉴定，效果差，往往找不到合适在滩涂种植的耐盐 品种。现在有大量的耐盐油菜品系，但又缺少恢复基因，不能用着恢 复系，充分挖掘耐盐油菜品系的耐盐能力，用于杂交油菜的恢复系。 而现在将恢复基因导入耐盐油菜品系，选择时间长，还有可能遗失恢 复基因，导致选育失败。
发明内容
技术问题
本发明主要针对的是现有技术将恢复基因导入耐盐品系，选择时 间长，还可能遗失恢复基因，导致选育失败的问题，提供一种育成具 有耐盐性状的恢复系。
技术方案
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法，其特征包括以下步骤：
(1)杂交：以盐6055为母本，恢复系DY076杂交获得F1代杂 交种子，在土壤含盐量为0.4-0.5％的盐碱地滩涂种植F1并套袋自交 获得F2代种子；
(2)测恢：在土壤含盐量为0.4-0.5％的盐碱地滩涂播种混收的 F2种子，F2分离群体中选择株型紧凑、株高高于170cm的单株与不 育系Y1A测交，收获测交种，对应的恢复系也套袋自交收获种子进 行品质测定选择目标单株种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥 酸≤1.0％且含油量≥45.0％，即为所选育的杂交油菜耐盐恢复系。
所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法中，其特征在于：在 进行步骤(2)测恢后F3代，先进行耐菌核病鉴定筛选获得F4，再 进行耐盐鉴定筛选获得F5，即为所选育的杂交油菜耐盐恢复系。
或在进行步骤(2)测恢后获得的F3，先进行耐菌核病鉴定筛选 获得F4，再连续两年进行耐盐鉴定筛选获得F6，再进行杂种优势筛 选后获得所选育的杂交油菜耐盐恢复系。
所述的耐菌核病鉴定筛选的办法是：选择连续5年种植甘蓝型油 菜且上年菌核病发病根据农业行业标准NY/T 2038-2011油菜菌核病 测报技术规范测定为2-3级的田块分株系种植的、材料，同时种植 不育系Y1A测交，收获测交种，测交种对应的F3单株也套袋自交种 子中根据农业行业标准NY/T 2038-2011油菜菌核病测报技术规范选 择耐菌核病0级和1级的植株，获得F4种子；
所述的耐盐鉴定筛选的办法是：连续两年在土壤含盐量为 0.4-0.5％的盐碱地中播F4、F5代种子，将选择株型紧凑、株高高于 170cm的单株分别与两个不育系Y1A和Y4-2AB测交，收获测交种， 测交种对应的单株也套袋自交收获种子，最终获得F6种子即育成恢 复系。
所述的一种选育杂交油菜耐盐恢复系的方法中：分株系播种F6 代种子和对应的测交种子，选择杂种优势强，比对照“盐油杂1号” 增产效果10％以上、植株生长整齐一致的测交种，其对应的自交种进 行品质测定选择目标单株种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥 酸≤1.0％且含油量≥45.0％的单株，育成耐盐恢复系。
有益效果
本发明的有益效果是：
1、F2代测恢：早确定含有恢复基因的材料。而一般育种方法是 在F4代以后才开始测恢，按常规育种方法，要保证恢复基因的不丢 失，就必须群大，这样增加了工作量，浪费多，工作强度大；
另外高世代选择同时具有耐盐和恢复基因的概率也小，从而导致 选育失败。此方法在早代就确定了所选材料含有恢复基因，不会因为 世代的选择而丢失恢复基因，大大提高了恢复系选育准确力和目的 性，节约大量的人力、物力、财力。
2、F3代进行耐菌核病鉴定筛选:油菜菌核病又称菌核软腐病， 是由核盘菌所致的一种世界性病害，是中国油菜三大病害(油菜菌核 病、病毒病和霜霉病)之首，在长江流域油菜主栽区发生较重。油菜 菌核病一般发病率在10％～30％，严重时可高达80％，可导致减 产11％～73％，含油量降低1％～5％，严重影响油菜的产量 与品质；
3、F1、F2、F4和F5代都进行耐盐鉴定筛选：
在江苏沿海滩涂面积一千万亩左右，占全国滩涂面积的1/4以上。 盐城市境内沿海滩涂面积700多万亩，占江苏省滩涂总面积的3/4， 而且每年仍以3万亩的成陆速度向东延伸，近期可围垦形成270万亩 左右的土地后备资源，是江苏油菜生产极其重要的增长点。我省沿海 滩涂多为砂性夜潮土，比较适合油菜生长，在沿海垦区，土壤经初步 改良后即可栽种油菜，且一般不需要浇水，农民也习惯于栽种油菜。 但该区人少地多，土壤的盐分含量较高，早春气温回升较慢，选择耐 盐的油菜品种在沿海滩涂种植是沿海滩涂发展油菜的极其重要的工 作；本发明既进行抗菌核病种植鉴定也进行耐盐种植鉴定，充分利用 抗性基因，不至于因为世代自交导致抗性基因的丢失，实现了恢复系 耐盐、耐病性育种与强优势选育共同进行，这是常规育种无法做到的。
4、F6代测定杂种优势：在F6代就进行了杂种优势的测定，比 一般育种提前了2-3个世代，缩短了育种时间2-3年，达到快速育成 杂交油菜恢复系。
5、本发明选择沿海滩涂江苏沿海地区农业科学研究所育成的盐 6055为母本，恢复系DY076为父本进行杂交进行耐盐恢复系选育， 同时选择耐盐和恢复基因。
盐6055(已通过江苏省农作物品种审定，审定名称：盐油2号, 审定编号：苏审油200902)属半冬性甘蓝型常规油菜品种,品种来源： 以(93-1105/镇油2号)F1为母本，以华杂4号为父本通过杂交选育， 江苏沿海地区农业科学研究所于2005年育成。
2006-2008年度参加江苏省常规油菜区域试验，2006-2007年度平 均亩产191.3公斤，较对照史力佳增产14.1％，达极显著；2007-2008 年度平均亩产211.7公斤，较对照红油3号增产7.8％，达显著。 2008-2009年度参加省常规油菜生产试验，平均亩产163.4公斤，较 对照红油3号增产7.3％。
苗期叶色深葱绿，裂叶片数较多，叶缘剧齿，花期无柄叶叶耳较 大，幼苗期生长势强，越冬半直立，花瓣着生形态复瓦。省区试平均 结果：全生育期246天，较对照红油3号迟1天；株高161厘米，分 枝点高38厘米，主轴长度63厘米，一次分枝9.1个，二次分枝7.0 个，单株有效角果425个，每角21.5粒，千粒重3.9克。经江苏省农 科院经作所品质测定，两年平均结果：芥酸含量0.6％，硫甙含量 22.6μmol/g饼粉，含油率42.2％。两年区试田间抗性调查平均：菌核 病发病率8.8％、病指4.4，冻害率41.4％、冻指19.3，抗倒性中等。
恢复系DY076(单忠德、孙明法、孙红芹等.优质高产杂交油菜 盐油杂1号的选育江苏农业科学200931(3)：99-100)系江苏沿海 地区农业科学研究所以宁杂3号为母本,荣选×淮油16号为父本于 1997年春杂交,后经连续自交、测恢选育而成。宁杂3号为江苏省农 业科学院育成的细胞质雄性不育三系杂交组合,荣选为江苏太湖地区 农业科学研究所选育的低芥酸油菜品种,淮油16号为江苏徐淮地区淮 阴农业科学研究所选育。曾与细胞质雄性不育系盐1A杂交育成优质 高产杂交油菜“盐油杂1号”(苏审油200802),表现产量突出,综合 性状好。杂交油菜盐油杂1号株高154cm,分枝点高27cm,一次分枝 9.1个,二次分枝10.6个,单株有效角果441个,每角22.1粒,千粒重4.11 g；芥酸含量0.3％,硫苷含量22.5Lmol/g饼粉,含油率41.2％；菌核病发病 率16.5％、病指11.8,冻害率60.6％,冻指31.1,抗倒性中上；恢复度96％。
具体实施方式
(一)选育得恢复系R417
2003年以盐6055(已通过江苏省农作物品种审定，审定名称： 盐油2号,审定编号：苏审油200902)为母本，恢复系DY076为父 本杂交收获得F1种子。
2004年在盐城金海农场盐碱滩涂土壤含盐量为0.4-0.5％的地块 种植F1代种子，收获F2种子，2005年继续在金海农场滩涂土壤含 盐量约为0.4-0.5％的田块种植F2分离群体从分离的植株中选择株型 紧凑、株高高于170cm的单株与不育系Y1A(单忠德、孙明法、孙红 芹等.优质高产杂交油菜盐油杂1号的选育江苏农业科学200931 (3)：99-100)测交，收获测交种，对应的恢复系也套袋自交收获种子 进行品质测定选择目标单株种子(饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、 芥酸≤1.0％且含油量≥45.0％)准备下年播种。
2006年F3代耐菌核病鉴定：F3代株系在江苏沿海地区农科所试 验场选择连续5年种植甘蓝型油菜且上年菌核病发病根据农业行业 标准NY/T 2038-2011油菜菌核病测报技术规范测定为2-3级的田块 分株系种植的、材料，同时种植不育系Y1A测交，收获测交种，测 交种对应的F3单株也套袋自交种子中根据农业行业标准NY/T 2038-2011油菜菌核病测报技术规范选择耐菌核病0级和1级的植株， 获得F4种子；
收获F4自交种用FOSS 5000仪器进行品质测定，根据品质结果 选择目标单株种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0％且 含油量≥45.0％，准备下年播种。
2007年F4、F5代耐盐鉴定：
2007年通过选择的F4代种子按株系在江苏大丰金海农场滩涂土 壤含盐量约为0.4-0.5％的田块中种植，在种植前，必须进行田块整理， 保持田面平整，种植后，做好三沟配套，保证排水。选择株型紧凑、 株高高于170cm的株系的单株与两个不育系Y1A和Y4-2AB(孙红 芹、孙明法、万林生等.甘蓝型油菜核不育系Y4-2AB的选育及利用金 陵科技学院学报2013(2)：58-61)测交，收获测交种,并收获对应的 自交种，收获自交种G5用FOSS 5000仪器进行品质测定，根据品质 结果选择目标单株种子(饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0％ 且含油量≥45.0％)准备下年播种。
2008年通过选择的F5代种子继续按株系在江苏大丰金海农场滩 涂土壤含盐量约为0.4-0.5％的田块中种植，在种植前，必须进行田块 整理，保持田面平整，种植后，做好三沟配套，保证排水。选择株型 紧凑、株高高于170cm的株系的单株与两个不育系Y1A和Y4-2AB 测交，收获测交种,并收获对应的自交种，收获自交种用FOSS 5000 仪器进行品质测定，根据品质结果选择目标单株种子(饼粕硫苷含量 ≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0％且含油量≥45.0％),即为育成的新的 高含油耐盐恢复系。
2009年F6代杂种优势选择：
分株系播F6代种子和相应测交种子，选择杂种优势强,选择杂 种优势强,比对照“盐油杂1号”增产效果10％以上、植株生长整齐 一致的测交种，将其对应的自交种进行品质测定，根据品质结果选择 目标单株种子：饼粕硫苷含量≤30.0微摩尔/克、芥酸≤1.0％且含油 量≥45.0％，收获育成新的高含油耐盐恢复系，命名为恢复系R417。
(二)新的恢复系R417的应用
2010年新的恢复系R417再与多个不育系Y1A、052A(刘葛山， 赵祥祥，严卫古等.高产双低杂交油菜淮杂油1号的选育中国油料 作物学报2003：25(1)：66-68)、Y4-2AB及H2A(陶侠林等.高产·双 低·抗病杂交油菜滁核杂1号的选育安徽农业科学2006，34(14)： 3287-3288)进行测配，2011年、2012年分别参加参加江苏沿海地区 农业科学研究所在江苏大丰金海农场滩涂土壤含盐量约为0.4-0.5％ 的田块中种植田间单行鉴定、品比，其中盐杂417(恢复系R417与 不育系Y4-2AB的组合)2011年测鉴产量比秦优7号增产10.3％，2012 年品比产量比秦优7号增产11.2％；恢复度96％。2013年继续参加江 苏沿海地区农业科学研究所油料作物研究室油菜品比并在东台弶港 滩涂进行试种，获得了227.4公斤每亩的产量。2014年推荐参加省级 区试试验，争取合格成为新品种在沿海滩涂上推广。
耐盐油菜新组合盐杂417栽培技术要点：
(1)适期播种，培育壮苗：育苗移栽播种期，苏北地区9月15 日左右，苏中地区9月20日左右，苏南地区9月25左右为宜。播种 量0.4-0.5kg/667m2，秧龄30-35天。3叶期施用多效唑50g/667m2。
(2)适期早栽：苏北及苏中地区适宜移栽期10月20日左右， 苏南地区10月下旬至11月上旬移栽。
(3)合理密植：中等肥力田块移栽密度1万/667m2株左右，肥 力较高田块0.8万/667m2株左右。大小苗分开移栽。
(4)肥水管理：遵循重施基肥、增施磷钾肥、必施硼肥的原则， 氮肥施用：基肥、苗肥、苔肥的比例为5:3:2，磷钾硼肥一次底施。 施肥量：每667m2纯N15kg-20kg，N、P、K三要素配合，亩施硼肥 1kg。
(5)田内开好三沟，做到明水能排，暗水能降。
(6)加强病、虫、草害防治：重点是移栽前在苗床上防治蚜虫、 菜青虫一至二次。冬前和开春注意防治好蚜虫等害虫，初花期防治菌 核病，雨水多年份盛花期再防治一次。