具有副交感神经活动亢进作用的医药组合物或饮食物 【技术领域】
本发明涉及含有苯基乳酸、具有自律神经调节作用的医药组合物或饮食物。本发明还涉及苯基乳酸为D‑苯基乳酸及/或L‑苯基乳酸的上述医药组合物或饮食物。本发明进一步涉及具有副交感神经活动亢进作用、用于治疗与自律神经活动相关的疾病或状态的上述医药组合物或饮食物。
背景技术
为了维持生物体的恒常性，生物体具有自律神经系统、内分泌系统、免疫系统。其中，因为自律神经系统脱离大脑的支配，比较独立地、特别是无意识地自动工作，所以赋予了它这个名字，主要是在调节内脏的功能。自律神经系统中有交感神经系统和副交感神经系统这2个系统，通过两者的平衡受到控制。即：身体在活动时交感神经的活动占优势，全身处于紧张状态。相反，副交感神经的活动占优势时，身体的紧张得到解除，处于放松的状态(非专利文献1)。此外，交感神经活动亢进时，引起瞳孔扩大、心跳过速、血压升高、物质代谢·高血糖等，副交感神经活动亢进时，使消化吸收系统活跃，产生汗液、唾液的分泌等。
自律神经活动的平衡发生异常时，表现出不定陈诉等健康障碍(非专利文献2)。作为着眼于自律神经的健康障碍的治疗，例如已公开了下述内容，即：例如通过使用柑橘科、桉树科等的精油使副交感神经活动亢进从而产生的放松作用(专利文献1)、通过使用4‑甲氧基苯乙烯使副交感神经活动亢进从而产生的芳香疗法(专利文献2)及通过对使用了肽的副交感神经进行作用从而产生的泪液分泌作用(专利文献3)以及由使用了n‑3系多不饱和脂肪酸的交感神经抑制剂所产生的对脸红症、焦虑症等自律神经失调症的效果(专利文献4)。
另一方面，关于已知存在有2种光学异构体的苯基乳酸(phenyl lacticacid，2‑hydroxy‑3‑phenyl propionic acid)，仅仅知道其由乳杆菌属 (Lactobacillus)生产，对黑曲霉(
Aspergillus niger)等具有抗霉活性，在培养过程中添加苯基丙氨酸时培养上清中的浓度升高(非专利文献3)，使用乳酸菌产生的苯基乳酸对病原性大肠杆菌0‑157、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有抗菌效果(专利文献5)等抗菌·抗霉作用。
专利文献1日本特开2005‑272445
专利文献2日本特开2004‑131436
专利文献3日本特开平11‑209294
专利文献4日本特开2004‑067537
专利文献5日本特开2000‑300284
非专利文献1荻原俊男等、岩波讲座“现代医学基础”第4卷生物体的调节体系，1999
非专利文献2久保木富房：医学进展Vol.181 No.12，1013‑1015，1997
非专利文献3 FEMS microbiology Letters 233：289‑295，2004
【发明内容】
自律神经紊乱及起因于此的健康障碍，以不定陈述为代表而大量存在，虽然是在针对这些健康障碍的每种症状进行治疗，但未获得控制作为根本原因的自律神经活动其自身的方法。针对不同症状的疗法虽然可暂时性地改善其症状，但复发的可能性、因自律神经紊乱引发其他症状的可能性高。因此，需要控制作为根本原因的自律神经活动其自身的医药品或饮食物。
此外，还存在同时获得其效果和低副作用、高安全性的课题，因为医药品的合成过程中需要经过其他步骤的工序，并且需要加工成可容易摄取的片剂等形状，也存在高成本的课题。因此，强烈需要采用简便的工艺可从存在于自然界中的天然物质中获得的具有自律神经调节作用的物质。
本发明的课题是，提供具有自律神经活动的调节作用、特别是交感神经活动抑制作用、副交感神经活动亢进作用，在治疗与自律神经活动相关的疾病或状态时有用的医药组合物及饮食物。
关于特定的乳酸菌的菌体，已确认有抑制肾脏的交感神经活动、使胃的副交感神经活动亢进的作用(Tanida M，et al：Neuroscience Letters 389：109‑114，2005)。
本发明者为了解决上述课题进行精心研究，将使用大鼠的对自律神经的直接作用作为指标，确认特定的乳酸菌培养上清中含有苯基乳酸，并且在2个光学异构体中，含有L‑苯基乳酸作为主要成分。接着在使用大鼠的实验中，分析L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸分别对肾脏交感神经活动的作用、对血压的影响、对胃迷走神经的副交感神经活动的作用，完成了本发明。
即：本发明涉及医药组合物或饮食物，其含有临床上有效量的下式(I)：
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式(I)
的化合物(苯基乳酸)及作为医药或食品所允许的添加剂，具有自律神经调节作用。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述式(I)的化合物用下式：
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(即：D‑苯基乳酸及/或L‑苯基乳酸)表示。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其用于治疗与自律神经活动相关的疾病或状态。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述与自律神经活动相关的疾病或状态选自血压降低、身心紧张、干眼、口干、免疫功能调节不全、皮肤功能不全及血糖降低。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述自律神经调节作用为交感神经活动抑制作用及/或副交感神经活动亢进作用。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述化合物为下式：
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表示的化合物，所述自律神经调节作用为胃迷走神经(副交感神经)活动亢进作用。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其含有具有式(I)的化合物的生产能力的微生物或其加工品。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其含有具有式(I)的化合物的生产能力的微生物的培养上清或其加工品。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述微生物为乳酸菌。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述乳酸菌属于链球菌属(Storeptococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、四体球菌属(Tetragenococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)、肠球菌属(Enterococcus)、蜜蜂球菌属(Melisscoccus)、乳球菌属(Lactococcus)、肉食杆菌属(Carnobacterium)、漫游球菌属(Vagococcus)、奇异菌属(Atopobium)、乳球形菌属(Lactosphaera)、酒球菌属(Oenococcus)、乏养菌属(Abiotrophia)、Paralactobacillus属、颗粒链菌属(Granulicatella)、Atopobactor属、Alkalibacterium属或Olsenella属。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述微生物为植物乳杆菌(优选植物乳杆菌SAM 2446株(FERM BP‑10438))或短乳杆菌(优选短乳杆菌ATCC14869)。
本发明还涉及所述医药组合物或饮食物的制造方法，其包括培养具有式(I)的化合物的生产能力的微生物的工序。
本发明进一步涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述自律神经调节作用为选自肾脏交感神经活动亢进作用、肾脏交感神经活动抑制作用、胃迷走神经(副交感神经)活动亢进作用中的1种以上的作用，优选为肾脏交感神经活动抑制作用及/或胃迷走神经(副交感神经)活动亢进作用。
本发明进一步涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述自律神经调节作用伴随血压降低。
本发明进一步涉及所述医药组合物或饮食物，其具有过敏症状缓和作用。
本发明进一步涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述与自律神经活动相关的疾病或状态选自癌、胃溃疡、溃疡性大肠炎、高血压、粉刺、腰痛、肩酸、膝痛及慢性类风湿性关节炎。
本发明进一步涉及所述医药组合物或饮食物，其中，所述苯基乳酸来自于乳酸菌，D‑苯基乳酸∶L‑苯基乳酸＝5∶1～0∶1，优选为1∶1～1∶20，更优选为1∶1～1∶10左右。
本发明进一步涉及医药组合物或饮食物，其含有交感神经活动亢进有效量的D‑苯基乳酸，用于治疗过敏症状。
本发明进一步涉及医药组合物或饮食物，其含有交感神经活动抑制有效量的D‑苯基乳酸及/或L‑苯基乳酸，用于治疗选自癌、胃溃疡、溃疡性大肠炎、高血压、粉刺、腰痛、肩酸、膝痛及慢性类风湿性关节炎中的疾病或状态。
本发明进一步涉及医药组合物或饮食物，其含有副交感神经活动亢进有效量的L‑苯基乳酸，用于使免疫功能亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、泪液分泌促进、皮肤功能改善及/或血糖降低。
本发明进一步涉及口服用的所述医药组合物。
本发明进一步涉及自律神经调节剂，其含有苯基乳酸作为有效成分。
本发明进一步涉及血压调节剂，其含有苯基乳酸作为有效成分。
本发明进一步涉及苯基乳酸的使用，其用于制造医药组合物或饮食物，所述医药组合物或饮食物治疗与自律神经活动相关的疾病或状态。
本发明进一步涉及与自律神经活动相关的疾病或状态的治疗方法，其包括将苯基乳酸给药。
本发明进一步涉及自律神经活动的调节方法，其包括将苯基乳酸给药。
在本说明书中，苯基乳酸是指用下式(I)：
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式(I)
表示的化合物(称为2‑hydroxy‑3‑phenyl propionic acid、β‑3‑phenyllacticacid，MW 166.17)。苯基乳酸有2个异构体：
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D‑苯基乳酸及L‑苯基乳酸存在，分别为已知物质。在本说明书中简称为“苯基乳酸”时，包括全部的上述D‑苯基乳酸及L‑苯基乳酸的各自单一化合物、以及两者的混合物。已知苯基乳酸含有于牛奶、奶酪、蜂蜜等中，并已知也含有于微生物培养的培养基中。此外，D‑苯基乳酸及L‑苯基乳酸的各自标准品作为试剂已在市售。即使对于这样容易获得的安全性非常高的化合物，也仅仅报道了苯基乳酸的抗菌、抗霉作用(专利文献5、非专利文献3)，其对于自律神经的作用、用于治疗与自律神经活动相关的疾病或状态的作用无任何报道。本发明者发现含有苯基乳酸的医药组合物或饮食物(以下也简称为“组合物”)具有自律神经活动的调节作用，在治疗与自律神经活动相关的疾病或状态方面有用。
如下述实施例所示，本发明者还发现乳酸菌(
Lactobacillus plantumSAM2446株(FERM BP‑10438))的培养后培养基上清中含有苯基乳酸，并且主要含有L‑苯基乳酸(D∶L＝1∶9左右)。
关于从上述原料、培养上清等中分离苯基乳酸的方法，可以将该原料直接进行分离，或者在分离操作之前通过冷冻干燥、使用有机溶剂的液液分配萃取等进行浓缩。其后的分离操作，根据需要通过超滤处理等进行粗分离后，可通过使用反相柱、手性柱等的处理来进行。上述液液分配萃取、超滤处理、反相色谱柱处理、手性柱处理等，可使用同领域技术人员通常用的方法进行。通过分离获得的苯基乳酸，可以为D‑苯基乳酸和L‑苯基乳酸的混合物，也可以为各自的单一物质。得到混合物时，可根据需要进一步通过光学拆分操作获得单一物质。
通过上述方法可获得苯基乳酸的确认，可通过与标准品比较、MS谱、NMR谱等的测定来进行。
此外，可使用市售的标准品(BACHEM公司等)的苯基乳酸，也可通过合成得到苯基乳酸。对合成方法无特别限制。
本发明的组合物中含有的苯基乳酸，例如可采用如盐酸盐那样的药学上允许的盐的形式使用，也可采用在体内变为苯基乳酸的盐(前药)的形式使用。
本发明还提供含有具有苯基乳酸(式(I)的化合物)生产能力的微生物或其加工品、含有该微生物的培养上清或其加工品的上述医药组合物或饮食物。
在本说明书中，所谓“具有苯基乳酸生产能力”，是指在有效条件下培养时生产苯基乳酸。有效条件，如果是本领域技术人员可适当确定。微生物的苯基乳酸生产能力，将微生物(包括微生物自身、微生物的干燥物、微生物的培养液、微生物的提取物等)例如使用LC、MS、NMR等按照规定方法分析时，通过含有苯基乳酸等可确认。具有这种生产能力的微生物，也包括将培养条件(培养基的组成、培养时的温度条件、培养时的pH条件、培养密度等)进行适当调整时具有苯基乳酸生产能力的微生物。
上述微生物可以是从天然中采集的微生物，此外，以具有苯基乳酸生产能力的方式设计的突变体及/或重组体也包括在本发明的范围内。这种突变体及/或重组体包括为了下述目的而设计的突变体及/或重组体，即：使用相同组成的培养基进行培养时，与野生株相比苯基乳酸的生产能力提高。
进而，上述微生物产生的苯基乳酸，可以为D‑苯基乳酸，可以为L‑苯基乳酸，也可以为这些的混合物。例如通过参照下述实施例的记载，结合作为治疗对象的疾病或状态，从而可适当选择并使用具有所需苯基乳酸的生产能力的微生物。
这种具有苯基乳酸生产能力的微生物，例如可以为乳酸菌、酵母、枯草菌等。作为乳酸菌，例如可例举属于链球菌属(Storeptococcus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)、双歧杆菌属(Bifidobacterium)、四体球菌属(Tetragenococcus)、魏斯氏菌属(Weissella)、肠球菌属(Enterococcus)、蜜蜂球菌属(Melisscoccus)、乳球菌属(Lactococcus)、肉食杆菌属(Carnobacterium)、漫游球菌属(Vagococcus)、奇异菌属(Atopobium)、乳球形菌属(Lactosphaera)、酒球菌属(Oenococcus)、乏养菌属(Abiotrophia)、Paralactobacillus属、颗粒链菌(Granulicatella)、Atopobactor属、Alkalibacterium属或Olsenella属的微生物；作为酵母，例如可例举属于假丝酵母属(Candida)或酵母菌属(Saccharomyces)的微生物；作为枯草菌，可例举属于枯草杆菌属(B.subutilis)的微生物。
作为优选微生物，例如可例举非专利文献3中记载的
Lactobacillusplantarum、
Lactobacillus alimentarius、
Lactobacillus rhamnosus、
Lactobacillus sanfranciscensis、
Lactobacillus hilgardii、
Leuconostoccitreum、
Lactobacillus brevis某株、
Lactobacillus acidophilus某株、
Leuconostoc mesenteroides subsp.
mesenteroides、专利文献5中记载的
Enterococcus faecalis等。特别优选的微生物为乳酸菌的植物乳杆菌(
Lactobacillus plantarum)(更加特定为植物乳杆菌SAM 2446株(FERMBP‑10438))及短乳杆菌(
Lactobacillus brevis)(更加特定为短乳杆菌ATCC14869)。
本发明还提供包括将上述具有苯基乳酸生产能力的微生物在培养基中进行培养的工序的上述医药品组合物或饮食物的制造方法。该微生物的培养，可将微生物接种到适当的培养基上，根据微生物的种类，使用同领域技术人员公知的方法来进行。
对于例如微生物为乳酸菌时的培养以下做简略说明。培养基可使用例如琼脂培养基及/或液体培养基。在培养基中适当添加期望浓度的同领域技术人员公知的碳源、氮源，进而根据需要添加无机离子、维生素类等微量营养源。更加简便的是，例如可使用MRS培养基等市售的培养基，可在其中进一步加入添加物后而使用。培养时，可加入采用同领域技术人员公知的手段可使苯基乳酸生成量适当增加的操作，例如如非专利文献3所述，在Lactobacillus属培养过程中，通过增加苯基丙氨酸可使培养基中的苯基乳酸量增加。在制备培养基后，可使用适当的酸或碱将pH调整为6.0～7.0的范围，使用高压釜等进行灭菌。
然后，将乳酸菌接种到培养基上，在培养温度10℃～45℃下，通常通过1～2天的振荡培养、静置培养、培养槽中的工业培养、琼脂培养基等的固体培养基上的培养等，可使微生物在培养基中增殖。培养条件因使用的微生物的不同而不同，例如用
Lactobacillus plantarum时，在37℃左右，可在pH6.5左右的MRS培养基中静置培养1天。将这样培养的微生物根据需要进行离心分离，进而根据需要进行过滤，可获得培养上清。
对于苯基乳酸，由下述实施例可知，分别单独将D‑苯基乳酸及L‑苯基乳酸经过十二指肠给药时，对大鼠的肾脏交感神经活动、血压、胃迷走神经(副交感神经)活动产生作用。
更加详细地说，对于肾脏交感神经活动，给药量为10μg/匹时，发现D‑苯基乳酸有肾脏交感神经活动亢进作用，几乎未发现L‑苯基乳酸对肾脏交感神经活动的影响。给药量为100μg/匹时，发现D‑苯基乳酸、L‑苯基乳酸均有肾脏交感神经活动抑制作用。
对于血压，特别是给药量为100μg时，发现L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸均有血压降低作用。
进而对于胃迷走神经(副交感神经)活动，给药量为100μg/匹时，发现L‑苯基乳酸有胃迷走神经(副交感神经)活动亢进作用。
作为评价自律神经活动的方法，可例举心电图计、血压计、皮肤电反射、瞳孔径测定等生物物理学的测定方法、血中儿茶酚胺浓度测定等生物化学的测定方法等。特别是使用心电图计分析心跳变化是常用的方法，但如下述实施例所述，本发明者通过可直接评价给药物质对自律神经活动的影响的使用大鼠的方法来评价上述苯基乳酸对自律神经活动的作用。本方法的特征在于，可分别分析给药物质对于支配各脏器、组织等的自律神经的神经活动的作用。进而， 该方法还具有下述优点，即只要实验动物是活着的，可依次测定不同给药物质的自律神经调节作用。
下表表示了认为与自律神经的活动相关的器官、激素、生物体活动、和认为自律神经对它们产生的影响以及预测的效果的一例。
表1
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由上表可知，自律神经活动密切影响着血糖调节、血压调节、激素分泌调节、糖代谢调节、胃液分泌调节、血流量调节、体温调节等生物体的各种调节机构。自律神经活动的平衡发生异常时，出现例如不定陈诉等身体不舒服状况。不定陈诉的症状涉及多方面，例如有全身疲劳感、睡眠障碍、心悸、口渴(口干)、阳萎、口内干燥感、眼睛疲劳等(非专利文献2)。此外，作为交感神经过度优势的疾病，可例举癌·胃溃疡·溃疡性大肠炎·高血压·粉刺·腰痛·肩酸·膝痛·慢性类风湿性关节炎等；作为副交感神经过度优势的疾病，可例举作为淋巴球增殖从而与抗原发生过敏性反应所形成的结果的过敏症状等。通过使副交感神经活动亢进，可预测到使淋巴球数增加所产生的免疫功能亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、促进泪液分泌、血糖降低等作用、由皮肤功能改善产生 的美容效果、美肌效果。
在本说明书中，自律神经调节作用包括交感神经活动亢进作用、交感神经活动亢进的抑制作用、交感神经活动抑制作用、副交感神经活动亢进作用、副交感神经活动亢进的抑制作用、副交感神经活动抑制作用。
因为本发明的组合物含有上述苯基乳酸，因此可在治疗上述与自律神经活动相关的疾病或状态时使用。例如可在治疗下述症状时使用，即：因自律神经紊乱而容易引发的症状，有时统称为不定陈诉的气喘、心悸、肩酸、头痛、头晕、焦虑症、食欲不振、倦怠感、失眠等(也称为自律神经失调症。)、认为是起因于自律神经活动紊乱的体温调节障碍所引发的更年期障碍的上火·面赤·怕冷·出急汗等。特别是认为在治疗下述疾病或状态时有用，即：通过抑制交感神经活动可治疗的疾病或状态，例如交感神经活动占优势时的疾病：见人紧张症、脸红症、多汗症、心悸、心律不齐、腹泻、站起时眩晕、消化不良、疲劳感、癌·胃溃疡·溃疡性大肠炎·高血压·粉刺·腰痛·肩酸·膝痛·慢性类风湿性关节炎等；副交感神经活动占优势时的疾病：作为淋巴球增殖从而与抗原发生过敏性反应所形成的结果的过敏症状等。并且认为本发明的组合物在治疗高血压时有用。进而认为本发明的组合物通过使副交感神经活动亢进，可具有使淋巴球数增加所产生的免疫功能的亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、促进泪液分泌、血糖降低等作用，所以认为在治疗血压降低、身心紧张、干眼、口干、免疫功能调节不全、皮肤功能不全、血糖降低等时有用。
在本说明书中，所谓的对疾病或状态进行治疗，包括防止该疾病或状态的恶化、改善该疾病或状态、以及预防该疾病或状态。含有上述苯基乳酸的本发明的组合物，根据下述实施例的结果判断，如果将苯基乳酸给药为5μg/kg以上时可获得充分的效果。苯基乳酸的给药量无上限，如考虑毒性、经济性，通常优选不大于50mg/kg左右。本发明的组合物，为了充分发挥其效果，期望含有苯基乳酸每次服用时为5μg/kg～50mg/kg(优选为10μg/kg～20mg/kg、更优选为20μg/kg～10mg/kg)，更加具体地说，以成人为对象时，每次服用时为300μg～3000mg(优选为600μg～1200mg、更优选为1200μg～600mg)。此外，对于本发明的组合物，每单位产品重量(g)可含有苯基乳酸0.5μg～5mg(优选为1μg～2mg、更优选为2μg～1mg)。此外，从其他观点来看，每单位产品重 量(g)可含有苯基乳酸4μg以上(优选为25μg以上、更优选为75μg以上)，此时的上限值，每单位产品重量(g)均可为例如1mg、2mg、或5mg。
此外，在决定给药量时，通过参照例如下述实施例的记载，结合作为治疗对象的疾病或状态，从而可适当设定D‑苯基乳酸及/或L‑苯基乳酸的给药量。在本说明书中，临床上有效量是指用于调节自律神经的临床上有效的量，交感神经活动亢进有效量是指用于使交感神经活动亢进的有效的量，交感神经活动抑制有效量是指用于抑制交感神经活动的有效的量，副交感神经活动亢进有效量是指用于使副交感神经活动亢进的有效的量，这些有效量，例如可将采用下述实施例中记载的方法测定的、物质对自律神经活动产生的作用以及产生该作用时的给药量作为判断标准来进行设定。
本发明的组合物，可直接含有含苯基乳酸的原料、具有苯基乳酸生产能力的微生物、该微生物的培养上清、含有该微生物的培养物自身等，或者含有将上述物质进行提取·分离操作等处理，进行分离、精制后的产物，无特别限制。此外，也可用通常的杀菌、减压浓缩、冷冻干燥等方法将上述物质制成浓缩物、干燥粉体等加工品而使用。如果是不容易制成干燥粉体的浓缩物时，可将常用的糊精、高分子淀粉水解物或高分子肽等作为赋形剂使用从而制成干燥粉体。从作业性、保存性的观点来看，优选形成粉体。
本发明的组合物，根据目的可形成饮食物(包括食品、饮料、调味料、酒精饮料、功能食品等)及医药组合物的各种形态。例如使用苯基乳酸、具有苯基乳酸生产能力的微生物、该微生物的培养上清、加工品等，可提供饮食物、医药品。
作为本发明提供的饮食物，可例举软粘糖、含片、口香糖、酸奶、冰激淋、布丁、果冻、水羊羹、酒精饮料、咖啡饮料、果汁、果实饮料、碳酸饮料、清凉水饮料、牛奶、乳清饮料、乳酸菌饮料等各种饮食物。
此外，这些饮食物，可根据需要配合各种添加剂根据通常方法来制备。具体来说，在制备这些饮食物时，例如可适当配合葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、山梨糖醇、甜菊糖、甜茶素、玉米浆、乳糖、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸、乳酸、L‑抗坏血酸、dl‑α‑生育酚、异抗坏血酸钠、甘油、丙二醇、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、脱水山梨糖醇脂肪酸酯、丙二 醇脂肪酸酯、阿拉伯胶、卡拉胶、酪蛋白、明胶、果胶、琼脂、维生素B类、烟酸胺、泛酸钙、氨基酸类、钙盐类、色素、香料、保存剂等通常可作为食品原料使用的物质，根据通常方法进行制造。
在制备本发明所提供的医药品时，可根据需要配合各种添加剂，制成各种剂型的医药品。例如可提供片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂、浸膏剂等口服医药品，或者软膏、眼软膏、洗剂、乳膏、贴付剂、栓剂、点眼药、点鼻药、注射剂等非口服医药品。
这些医药品，可使用各种添加剂按照通常方法制造。使用的添加剂无特别限制，可使用通常使用的添加剂。作为其例子，可例举淀粉、乳糖、白糖、甘露醇、羧甲基纤维素、玉米淀粉、无机盐等固体载体；蒸馏水、生理盐水、葡萄糖水溶液、乙醇等醇、丙二醇、聚乙二醇等液体载体；各种动植物油、白凡士林、石蜡、蜡类等油性载体等。
本发明的组合物含有苯基乳酸作为有效成分，根据需要可进一步含有医药组合物、饮食物中以往一直使用的其它有效成分。
例如为具有自律神经调节作用的物质(交感神经作用物质、副交感神经作用物质等)，交感神经活动亢进作用物质，与过敏症状的治疗相关的物质，交感神经活动抑制物质，与选自癌、胃溃疡、溃疡性大肠炎、高血压、粉刺、腰痛、肩酸、膝痛及慢性类风湿性关节炎中的疾病或状态的治疗相关的物质，具有血压降低作用的物质，副交感神经活动亢进作用物质(包括具有芳香疗法效果·放松效果的物质)，具有免疫功能亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、促进泪液分泌、皮肤功能改善及/或血糖降低作用的物质等，可含有同领域技术人员公知物质的一种或组合含有多种。
进而，本发明的组合物含有具有苯基乳酸生产能力的微生物或其加工品、含有其培养上清或加工品时，特别是可含有来自该微生物的上述物质(具有自律神经调节作用的物质、交感神经活动亢进作用物质、交感神经活动抑制物质、具有血压降低作用的物质、副交感神经活动亢进相关物质)。
特别是本发明的组合物含有交感神经活动亢进有效量的D‑苯基乳酸时，上述其他有效成分优选为交感神经活动亢进作用物质、与过敏症状的治疗相关的物质。特别是本发明的组合物含有交感神经活动亢进有效量的D‑苯基乳酸及/ 或L‑苯基乳酸时，上述其他有效成分优选为交感神经活动亢进作用物质、与选自癌、胃溃疡、溃疡性大肠炎、高血压、粉刺、腰痛、肩酸、膝痛及慢性类风湿性关节炎中的疾病或状态的治疗相关的物质。特别是本发明的组合物含有副交感神经活动亢进有效量的L‑苯基乳酸时，上述其他有效成分优选为副交感神经活动亢进作用物质、具有免疫功能亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、促进泪液分泌、皮肤功能改善及/或血糖降低作用的物质。
此外，对于本发明的医药组合物或饮食物，可将其具体的用途(例如用于调节自律神经、用于调节交感神经、用于调节副交感神经、用于缓和过敏症状、用于治療/预防高血压、用于免疫功能亢进、用于放松身心、用于血糖降低对策、用于唾液分泌促进、用于促进泪液分泌、用于美容效果·美肌效果、用于健康维持等)及/又其具体的使用方法(例如摄取量、摄取次数、摄取方法)标示出来。
如上详述，根据本发明可提供调节作为与自律神经活动相关的疾病或状态的根本原因的自律神经活动自身的医药组合物、饮食物。特别是可提供在不伴随血压升高的情况下，具备高安全性、且可简便地制造的上述医药组合物、饮食物。
【附图说明】
图1为确认实施例1中的乳酸菌培养上清中的2‑苯基乳酸的手性的图。
图2表示在实施例2中将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸给药10μg时对大鼠肾脏交感神经活动的影响的图。
图3表示在实施例2中将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸给药100μg时对大鼠肾脏交感神经活动的影响。
图4表示在实施例3中将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸给药100μg时对大鼠血压产生的影响。
图5表示在实施例4中将L‑苯基乳酸给药100μg时对大鼠胃迷走神经(副交感神经)活动的影响。
【具体实施方式】
实施例 以下根据实施例对本发明进行详细说明，但本发明并不限于这些实施例。
在实施例1中，对乳酸菌
Lactobacillus plantarum SAM 2446株(FERMBP‑10438)的培养上清中含有的苯基乳酸进行手性分析。此外，在实施例2～4中使用BACHEM公司的试剂L‑苯基乳酸(L‑β‑3‑phenyl lactic acid(Q1375))、及D‑苯基乳酸(D‑β‑3‑phenyl lactic acid(Q1670))，分析含有苯基乳酸的组合物对大鼠自律神经活动的效果。
实施例1：Lactobacillus plantarum SAM 2446株(FERM BP‑10438)培养上清中的苯基乳酸(2‑hydroxy‑3‑phenyl propionic acid)的手性的确认 将
Lactobacillus plantarum SAM 2446株培养上清的冷冻干燥品作为初始材料，使用Develosil C30‑UG‑5柱，回收相当于苯基乳酸的峰。接着，将该峰溶解于含有0.1％TFA及5％2‑丙醇的己烷中，加载到Chiralpak AD(大赛璐(Daicel)化学工业株式会社)上，作为流动相，等强度地使用含有0.1％TFA及5％2‑丙醇的己烷，进行分析。
其结果判定，
Lactobacillus plantarum SAM 2446株培养上清中的苯基乳酸中含有L‑苯基乳酸作为主要成分(D∶L＝约1∶9)(图1)。此外，收率约为90％左右。
实施例2：L‑苯基乳酸或D‑苯基乳酸对大鼠肾脏交感神经活动的影响 在本实验中，使用体重为300～350g的Wistar系雄性大鼠，使用在1天开灯12小时(7:00‑19:00)的24℃的恒温动物室内预饲养1周时间以上的动物。对于各种神经实验，各使用1只大鼠。使其自由摄取食饵(MF、Oriental酵母公司制)及水。实验当天在绝食5小时后，用乌拉坦(urethane)(1g/kg，ip)麻醉下进行开腹，采用T.Yamano et al.，Neurosci.Lett.313：78‑82(2001)、A.Niijima et al.，Autonom.Neurosci.：Basic&Clinical 97：99‑102(2002)及M.Tanida et al.，Am.J.Physiol：Regulatory，Integrative andComerative Physiology 288：R447‑R455(2005)中记载的方法，测定将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸(10μg或100μg)在十二指肠内给药时对肾脏交感神经 活动的效果。即：将辐射向肾脏的交感神经在脏器前面切断，将其中枢侧钩在银制电极上，测定其电活动变化。为了防止干燥，预先将电极在液体石蜡和凡士林的混合物中充分浸渍。此外，从手术开始至测定结束，在气管中插入导管确保气道，用保温装置保持体温为(大鼠直肠温)35.0±0.5℃。在十二指肠内给药按以下操作进行，即：用生理盐水将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸分别制成10μg/2ml或100μg/2ml，使用在十二指肠中插入的聚乙烯导管(tube)，以1ml/min的给药速度每1只分别给药2ml。将得到的神经电活动用电容式差动放大器放大，用示波器进行监视，记录在磁盘中。对于全部的神经活动，为了将其原始数据和背景噪音分离，使用限幅器和鉴别器转变为标准脉冲后进行分析。放电频率利用照度计以5秒复位时间在描笔式记录器上表示。数据利用每5分钟的平均5秒的发电频率(pulse/5sec)的平均值来分析，将给药前的值作为100％以百分率表示。将给药生理盐水的实验作为对照。
其结果，对照组中未发现对评价的全部自律神经活动产生的影响，也未发现对血压产生的影响。另一方面，在给药组中用10μg的给药量时，D‑苯基乳酸使肾脏交感神经活动亢进，但几乎未发现L‑苯基乳酸对肾脏交感神经活动的影响(图2)。100μg的给药量时，D‑苯基乳酸、L‑苯基乳酸均抑制肾脏交感神经活动，特别是L‑苯基乳酸的抑制效果高(图3)。
实施例3：L‑苯基乳酸或D‑苯基乳酸对大鼠血压的影响 使用与实施例2同样的方法，采用上述实施例2所列文献中记载的方法，分析将L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸(10μg或100μg)在十二指肠内给药时对血压的影响。即：在左大腿动脉中插入套管，使用传感器测定血压。对于各化合物的各给药量，分别使用1只大鼠。在十二指肠内给药时，采用与实施例2同样的方法进行。其结果判断，L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸均具有血压降低作用、特别是100μg的给药量具有血压降低作用(图4)。
实施例4：L‑苯基乳酸对大鼠胃迷走神经(副交感神经)活动的影响 使用与实施例2同样的方法，将L‑苯基乳酸(100μg)在大鼠十二指肠内给药，分析对胃迷走神经(副交感神经)活动的影响。其结果确认胃迷走神经(副 交感神经)活动亢进(图5)。
制造例1：
含有苯基乳酸的医药品 片剂：
根据以下所示的方法，制造含有苯基乳酸的医药品(片剂)。
将市售的苯基乳酸5g、乳糖293.7g及硬脂酸镁1.3g混合在一起，通过用单冲压片机进行压片，制造直径10mm、重量300mg的片剂。
颗粒剂：
加入市售的苯基乳酸5g、乳糖293.7g及硬脂酸镁1.3g，进行压缩、粉碎、制粒、过筛，得到20～50目的颗粒剂。
制造例2：含有苯基乳酸的饮食物 利用通常方法制造以下组成的含有苯基乳酸的各种食品。
冰激淋：
(组成) (重量份)
鲜奶油(45％脂肪) 33.8
脱脂奶粉 11.0
细砂糖 14.8
加糖卵黄 0.3
香草精 0.1
水 39.995
苯基乳酸 0.005
总量 100.00
果汁：
(组成) (重量份)
冷冻浓缩温州柑橘果汁 5.0
果糖葡萄糖液糖 11.0
柠檬酸 0.2
L‑抗坏血酸 0.02
苯基乳酸 0.005
香料 0.2
色素 0.1
水 83.475
总量 100.00
乳酸菌饮料：
(组成) (重量份)
乳固体成分21％发酵乳 14.76
果糖葡萄糖液糖 13.31
果胶 0.5
柠檬酸 0.08
香料 0.15
水 71.195
苯基乳酸 0.005
总量 100.00
酸奶：
(组成) (重量份)
鲜奶(3.4％脂肪) 80.0
鲜奶油(50％脂肪) 8.0
脱脂奶粉 1.5
水 7.495
发酵剂 3.0
苯基乳酸 0.005
总量 100.00
咖啡饮料：
(组成) (重量份)
细砂糖 8.0
脱脂奶粉 5.0
焦糖 0.2
咖啡提取物 2.0
香料 0.1
脂肪酸酯 0.05
食盐 0.05
水 84.595
苯基乳酸 0.005
总量 100.00
酒精饮料：
(组成) (重量份)
50容量％乙醇 32.0
砂糖 8.4
果汁 2.4
苯基乳酸 0.005
精制水 57.195
总量 100.0
由上述结果可知，在乳酸菌
Lactobacillus plantarum SAM 2446株培养上清中，2‑苯基乳酸以光学异构体L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸而含有，主要是L‑苯基乳酸。
接着分析了这些化合物对肾脏交感神经活动的影响，结果发现给药量为10μg/匹时，D‑苯基乳酸有肾脏交感神经活动亢进作用，但几乎未发现L‑苯基乳酸对肾脏交感神经活动的影响，认为D‑苯基乳酸为低浓度的有效用量时，对于副交感神经活动占优势时的疾病的作为淋巴球增殖从而与抗原发生过敏性 反应所形成的结果的过敏症状有效。此外，给药量为100μg/匹时，发现D‑苯基乳酸、L‑苯基乳酸均有肾脏交感神经活动抑制作用，因此认为L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸为高浓度的有效用量时，对于交感神经占优势的疾病的癌·胃溃疡·溃疡性大肠炎·高血压·粉刺·腰痛·肩酸·膝痛·慢性类风湿性关节炎等有效。
因为L‑苯基乳酸及D‑苯基乳酸具有血压降低作用，所以认为对于高血压的改善有效。
进而发现L‑苯基乳酸特别是给药量为100μg/匹时，具有胃迷走神经(副交感神经)活动亢进作用，表明具有副交感神经活动的亢进作用。因此认为对于使淋巴球数增加所产生的免疫功能亢进、血压降低、身心放松、唾液分泌、促进泪液分泌、皮肤功能改善、血糖降低等有效。