一种地榆皂苷II乳剂及其制备方法技术领域
本发明涉及一种地榆皂苷II乳剂及其制备方法，属于医药领域。
背景技术
骨髓抑制是临床上常见的造血系统疾病,它可发生于各系统肿瘤性疾病的放射治
疗及(或)化学治疗、电离辐射引起的放射损伤、病毒性肝炎、微小病毒感染或药物(氯霉素、
苯、磺胺、抗癫痈药、镇静剂、抗甲状腺药、抗糖尿病药、抗疟疾、安眠药)等因素。骨髓抑制可
引起骨髓微环境、造血干细胞、造血细胞生长因子等的损伤,粒、红、巨核细胞系统一系、二
系或三系细胞受抑制。粒细胞缺乏会引起严重感染；红细胞明显减少会引起严重贫血；血小
板明显下降引起严重出血,甚至导致死亡。目前，临床上对于骨髓抑制尚缺乏有效的治疗手
段，亟需开发出药效较好的治疗药物。
地榆皂苷Ⅱ，化学名：3-O-α-L-阿拉伯糖基-19α-羟基乌索-12烯-28-羧酸(ziyu-
glycosideⅡ)，是从蔷薇科地榆属植物地榆或长叶地榆的根中提取得到的具有药理活性的
化合物。CN101119740A公开了地榆皂苷Ⅱ在制备升高红细胞和血红蛋白的药物中的用途。
然而，实际使用中发现，地榆皂苷Ⅱ药效欠佳，单独使用时往往难以取得较好的升高血细胞
水平、治疗骨髓抑制的效果。因此，亟需提高地榆皂苷Ⅱ的药效，促进该药物在临床上的应
用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种地榆皂苷II乳剂及其制备方法。
本发明提供了一种地榆皂苷II乳剂，它是包含下述重量配比的原辅料制备而成：
地榆皂苷II 1份、油相1-350份、乳化剂0.5-40份。
进一步的，它是包含下述重量配比的原辅料制备而成：地榆皂苷II 1份、油相300
份、乳化剂20份。
进一步的，所述的油相选自大豆油、中链甘油三酯、鱼油、橄榄油、油酸乙酯、蓖麻
油中一种或两种以上的混合物；所述的乳化剂选自蛋黄卵磷脂、大豆磷脂中的一种或两种。
进一步的，它还包含稳定剂0.5～5份、等渗调节剂1～10份。
进一步的，所述的稳定剂为油酸；所述的等渗调节剂为甘油。
进一步的，它是由下述重量配比的原辅料制备而成：地榆皂苷II 1份、大豆油300
份、大豆磷脂20份、油酸0.5份、甘油1份，加水至地榆皂苷II浓度为0.3mg/mL。
本发明提供了一种所述乳剂的制备方法，包括如下步骤：
a、称取各重量配比的地榆皂苷II、油相及乳化剂，溶解于有机溶剂，混合溶液备
用；
b、除去a步骤混合溶液中的有机溶剂，再加入稳定剂、甘油和水；
c、剪切，均质，灭菌，即得。
进一步的，所述的有机溶剂为乙醇；所述的剪切条件为：10000rpm下剪切5min；所
述的均质条件为：800bar压力下均质4次。
本发明提供了所述乳剂在制备治疗和/或预防骨髓抑制的药物的用途。
本发明提供了所述乳剂在制备升高血细胞、血红蛋白数量的药物中的用途。
本发明提供了一种地榆皂苷II乳剂。发明人在研究过程中发现，地榆皂苷II升高
血细胞水平效果欠佳的原因在于其溶解度低、胃肠吸收率小，导致该药物的生物利用度较
低，限制其药效的发挥。本发明采用特定种类、配比的辅料，可将地榆皂苷Ⅱ制备成质量较
好的乳剂。药效实验中，与模型组比较，本发明地榆皂苷Ⅱ乳剂能显著升高外周血WBC、RBC、
PLT、NEUT和HGB数量，且药效明显优于地榆皂苷Ⅱ原药，表明本发明将地榆皂苷Ⅱ制备成乳
剂后能够提高主药的生物利用度，增强其升高血细胞数量、防治骨髓抑制的作用。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离
本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说
明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容
所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为各实验组小鼠骨髓造血干细胞计数比较图。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1本发明地榆皂苷Ⅱ乳剂的制备
处方一(A)：地榆皂苷II 0.6g、大豆油180g、蛋黄卵磷脂12g、甘油0.6g、水加至
2000ml
处方二(B)：地榆皂苷II 0.6g、中链甘油三酯120g、蛋黄卵磷脂8g、甘油0.6g、水加
至2000ml
处方三(C)：地榆皂苷II 0.6g、鱼油60g、蛋黄卵磷脂4g、甘油0.6g、水加至2000ml
处方四(D)：地榆皂苷II 0.6g、橄榄油6g、蛋黄卵磷脂1g、甘油0.6g、水加至2000ml
处方五(E)：地榆皂苷II 6g、油酸乙酯300g、蛋黄卵磷脂30g、甘油5g、水加至
20000ml
处方六(F)：地榆皂苷II 9g、蓖麻油300g、蛋黄卵磷脂30g、甘油9g、水加至30000ml
处方七(G)：地榆皂苷II 9g、大豆油300g、大豆磷脂30g、甘油10g、水加至30000ml
制备方法：将地榆皂苷II、油脂及磷脂混合，以乙醇溶解，减压旋转蒸发除去乙醇，
按照地榆皂苷II︰油酸︰甘油重量配比为1:0.5:1，高速搅拌下加入油酸、甘油，加水至乳剂
中地榆皂苷II的浓度为0.3mg/mL，10000rpm下高速剪切5min，800bar压力下高压均质4次，
高压灭菌，即得。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1采用不同辅料制备地榆皂苷II乳剂的质量评价
本实验设置9个实验组。分别取地榆皂苷II 0.6g、如表1所示的油相、乳化剂、稳定
剂与等渗调节剂，然后将地榆皂苷II、油相与乳化剂按照重量配比为1:300:20混合，以乙醇
溶解，减压旋转蒸发除去乙醇，按照重量配比地榆皂苷II︰稳定剂︰等渗调节剂为1:0.5:1高
速搅拌下加入稳定剂、等渗调节剂，加水至乳剂中地榆皂苷II的浓度为0.3mg/mL，10000rpm
下高速剪切5min，800bar压力下高压均质4次，高压灭菌。观察外观有无分层、絮凝、粘壁，测
定粒径大小，测定Ke(以分光光度法测定乳剂离心前后的吸收度Ao和A进而计算稳定常数Ke
＝(Ao-A)/Ao×100％。Ke值越小，说明分散相油滴在离心力作用下上浮或下沉的越少，该乳
剂越稳定)，结果见表1。
表1地榆皂苷Ⅱ乳剂的质量评价结果
注：“+”表示有；“-”表示无；与其他组比较：*P<0.05
实验结果：根据本发明制剂处方中所用辅料种类，均能制备得到质量较好的地榆
皂苷II乳剂，乳剂外观无分层、絮凝、粘壁等现象；其中，实验组6与其他实验组相比乳剂的
粒径、Ke值有显著性减小(P<0.05)，表明制备地榆皂苷II乳剂最适宜使用的辅料种类为：豆
油为油相，大豆磷脂为乳化剂，油酸为稳定剂，甘油为渗透压调节剂。
实验例2辅料用量对地榆皂苷II乳剂质量的影响
本实验设置7个实验组。分别按表2所示的重量配比称取地榆皂苷II、豆油、大豆磷
脂(固定地榆皂苷II重量0.6g)，以乙醇溶解，减压旋转蒸发除去乙醇，按照重量配比地榆皂
苷II︰油酸︰甘油为1:0.5:1高速搅拌下加入油酸、甘油，加水至乳剂中地榆皂苷II的浓度为
0.3mg/mL，10000rpm下高速剪切5min，800bar压力下高压均质4次，高压灭菌。观察外观有无
分层、絮凝、粘壁，测定粒径大小，测定Ke，结果见表2。
表2地榆皂苷Ⅱ乳剂的质量评价结果
注：“+”表示有；“-”表示无；与其他组比较：*P<0.05
实验结果：地榆皂苷II：豆油：大豆磷脂重量配比在1:1～350:0.5～40的范围内，
均能制备得到质量较好的乳剂；其中，实验组6与其他实验组相比乳剂的粒径、Ke值有显著
性减小(P<0.05)，表明地榆皂苷Ⅱ乳剂中辅料的最佳用量配比为：地榆皂苷II：豆油：大豆
磷脂＝1:300:20。
实验例3本发明地榆皂苷Ⅱ乳剂的药效实验
1、实验材料、试剂、仪器
1.1、受试药物：根据实施例1制备的地榆皂苷II脂肪乳溶液组(A、B、C、D、E、F、G)、
地榆皂苷II 10％DMSO-生理盐水组。
1.2、工具药物：环磷酰胺。
1.3、实验动物KM-小鼠：18.5～22.5g。
1.4、实验仪器：全自动血球分析仪；BS-600L电子天平：规格：600g/0.1g，上海友声
衡器有限公司。
2、统计方法
用SPSS 17.0软件进行统计分析。数据以均数±标准差()表示，组间采用单因
素方差分析，方差齐者组间进行LSD检验，方差不齐者进行Tamhane’s T2检验。
3、实验方法
3.1、实验动物分组及模型制备
所有动物适应性喂养1周后按体重随机分为：空白组；模型组；不同处方地榆皂苷
II乳剂组(A、B、C、D、E、F、G)，配制成2.5mg·kg-1混悬液，临用前配制；地榆皂苷II组：地榆
皂苷II粉末，用10％DMSO-生理盐水溶解，配制成2.5mg·kg-1混悬液，临用前配制。实验第1
天，除空白组外，其余各组小鼠按50mg·kg-1剂量腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液，连续3
天，空白组小鼠尾静脉注射等体积生理盐水。
3.2、给药
各实验组自实验第1天开始按剂量、iv给予相应药物，空白组和模型组小鼠尾静脉
注射等体积生理盐水，连续7天。
3.3、标本采集
实验第8天，各实验组小鼠眼眶取血，用装有EDTA抗凝剂的0.5mlEP管收集待测。
3.4、检测指标及方法
(1)外周血象检测：采用全自动血球计数仪对各实验组小鼠外周血白细胞(WBC)、
中性粒细胞(NEUT)红细胞(RBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(HGB)进行计数。
(2)骨髓造血干细胞计数(以骨髓细胞CD34+抗原表达量计)用含牛血清白蛋白浓
度为0.2％的PBS缓冲液冲出小鼠右侧股骨骨髓细胞，取出106个细胞离心，弃上清，加入30μ
L正常小鼠血清以封闭非特异结合位点，再加入10μL FITC标记的大鼠抗小鼠CD34+抗体，对
照管加入10μL相应对照抗体，4℃避光反应30min。加入2mL红细胞裂解液，作用5min，洗细胞
2次，加入终浓度为3μg/mL的PI染液，采用流式细胞仪检测骨髓细胞CD34+抗原表达。
4、实验结果
4.1、外周血主要血细胞计数比较
表3各实验组小鼠外周血血细胞数量
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；注：与地榆皂苷II组比较，△P<0.05，△△P<
0.01。
由表3可知，与模型组比较，本发明地榆皂苷II乳剂组小鼠外周血WBC、RBC、PLT数
量均有显著升高(P<0.05)，地榆皂苷II组无显著性差异；与地榆皂苷II组比较，本发明地榆
皂苷II乳剂组小鼠外周血WBC、RBC、PLT数量均有显著升高(P<0.05)。
表4各实验组小鼠外周血NEUT和HGB数量
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与地榆皂苷II组比较，△P<0.05，△△P<0.01。
由表4可知，与模型组比较，本发明地榆皂苷II乳剂组小鼠外周血NEUT和HGB数量
均有显著升高(P<0.05)，地榆皂苷II组无显著性差异；与地榆皂苷II组比较，本发明地榆皂
苷II乳剂组小鼠外周血NEUT和HGB数量均有显著升高(P<0.05)。
4.2、骨髓造血干细胞计数比较
从图1可知，与模型组比较，本发明地榆皂苷II乳剂组小鼠造血干细胞数量均有显
著升高(P<0.05)，地榆皂苷II组无显著性差异；与地榆皂苷II组比较，本发明地榆皂苷II乳
剂组小鼠造血干细胞数量均有显著升高(P<0.05)。
以上实验结果表明，根据本发明制剂处方将地榆皂苷Ⅱ制备成乳剂后，可显著提
高药物升高血细胞水平的作用，能有效防治骨髓抑制。