含有羟基吡啶硫酮和添加剂的协同生物杀伤剂组合物 本发明通常涉及协同生物杀伤剂组合物，具体地说，涉及含有羟基吡啶硫酮或羟基吡啶硫酮盐，和对羟基苯甲酸的苄基酯或低级烷基酯或其盐，或羧酸或其盐，或它们的混合物的组合物。
生物杀伤剂对于工业，个人护理，医疗和其它产品和材料提供抗菌保护。通常，对于它将杀灭的具体的微生物而言，生物杀伤剂具有多少有限的范围，具有一些毒性，造成一些环境危害或这些缺陷的综合。因此，找到一种方法来增强生物杀伤活性，或扩大生物杀伤剂的抗菌保护有效性的范围而不增加这些化合物的毒性或对环境的危害程度是非常有用的。
本领域已知一些提供杀菌，抗细菌或抗真菌功效的羟基吡啶硫酮与其它添加剂的组合物。例如，日本Kokai59-(1984)98001公开了一种包含羟基吡啶硫酮或其盐，脂族羧酸和糖化物的切花杀菌剂。美国专利4,242,336公开了包含(a)至少一种选自脱氢乙酸，山梨酸和它们的碱金属盐的物质和(b)至少一种选自具有C8-C16烷基的烷基(氨基乙基)-甘氨酸和其盐，2-吡啶-硫醇-1-氧化物(即羟基吡啶硫酮)和其盐，和四氢-3，5-二甲基-2H-1，3，5-噻二嗪-2-硫酮地物质的抗细菌和抗真菌组合物。然而，这些文献没有公开这些公开的组合物的作用功效的基本原理，也没有暗示其它的抗菌组合物。而且，公开在′336专利中的山梨酸易遭受化学不稳定的问题，必须使用稳定剂来抑制氧化作用，例如公开在美国专利5,354,902中的二价锰离子。
在宽的使用浓度范围显示出协同功效，而不需要(并且优选在缺乏)任何抑制氧化的稳定剂的羟基吡啶硫酮和其它添加剂的新的组合物为生物杀伤剂领域所极其需要，尤其是如果该组合物还对哺乳动物显示出低的毒性。本发明提供了一些这样的组合物。
一方面，本发明涉及一种具有协同抗细菌和抗真菌功效的抗菌组合物，包括羟基吡啶硫酮酸或羟基吡啶硫酮盐或其混合物，和至少一种选自对羟基苯甲酸的苄基酯和低级烷基酯，它们的盐，羧酸，它们的盐，和其混合物的化合物，所述羧酸选自棓酸、苹果酸、酒石酸、十一碳烯酸、水杨酸、对氨基苯甲酸、苯甲酸、丙酸、乳酸、柠檬酸和它们的混合物。该抗菌组合物优选不存在抑制氧化的稳定剂添加剂。
另一方面，本发明涉及一种使包含水或有机溶剂的组合物具有抗菌活性的方法，包括向其中加入抗菌有效量的上述抗菌组合物。
另一方面，本发明涉及一种涂覆底物以在底物上提供能有效抗菌的涂层的方法，包括将底物与包含上述抗菌组合物的涂覆组合物接触。
另一方面，本发明涉及包含底物和所述底物上的涂层的涂覆底物，所述涂层通过(a)将底物与包含上述抗菌组合物的涂覆组合物接触，和(b)干燥在所述底物上的所述涂覆组合物以制备所述涂覆底物而制备。
另一方面，本发明涉及一种涂料，包括：
(a)一种包含水或一种选自乙烯基树脂、醇酸树脂、环氧树脂、丙烯酸树脂、聚氨酯树脂和聚酯树脂的树脂和它们的混合物的基本介质，和
(b)上述抗菌组合物。在使用前的储藏期间，在涂料中抗菌组合物以至少足以起到“桶内(in-can)杀菌剂”作用的量来使用。另外，当抗菌组合物在底物上干燥时，它可以足以为涂料提供抗菌功效的量使用。
另一方面，本发明涉及包含适宜载体和上述抗菌组合物的肥皂，香波或皮肤护理药物。
另一方面，本发明涉及包含水或有机碱液和上述抗菌组合物的金属加工液。本发明的另一方面涉及还另外包含一种选自腐蚀抑制剂，表面活性剂和它们的混合物的成分的上述金属加工液。
另一方面，本发明涉及包含塑料或纺织或非织造纤维的组合物，它混合包含塑料或纤维和上述抗菌组合物。
在阅读下面对本发明的详细描述后，这些和其它方面将变得显而易见。
根据本发明目前已惊奇地发现羟基吡啶硫酮酸或其盐与所选择的羧酸或其盐，与对羟基苯甲酸的苄基酯和低级烷基酯(本文也称为羟苯甲酸酯)或其盐或它们的混合物的混合作为抗细菌和抗真菌组合物提供了协同抗菌有效性。根据本发明的作用方式的进一步的了解提供了对于与羟基吡啶硫酮结合使用的抗菌增效添加剂的更好的了解。不希望被任何特定的理论束缚，根据本发明人对羟基吡啶硫酮抗菌的作用方式的理解，本发明人认为与本发明组合物相关的协同功效可归功于在存在羟基吡啶硫酮生物杀伤剂时，羧酸或羟苯甲酸酯助生物杀伤剂对于杀伤的微生物的相对毒性。羟基吡啶硫酮的作用是通过催化氢离子和钾离子通过微生物细胞膜的电中性交换来摧毁为微生物代谢提供能键的质子动力。
根据上述作用方式，本发明人已发现选择的一些种类的化合物在与羟基吡啶硫酮结合时提供了协同抗菌有效性，即特定的羧酸或其盐，或对羟基苯甲酸的苄基酯和低级烷基酯(本文也称为“羟苯甲酸酯”)，或其盐，或这些化合物的混合物。术语“羟苯甲酸酯”还包括有机溶液，例如羟苯甲酸甲酯(MP)，羟苯甲酸丙酯(PP)，或羟苯甲酸丁酯(BP)的乙醇溶液。
如本文所采用，术语“协同抗菌有效性”指组合物显示出比当组合物各成分单独使用时产生的活性的加和更大的抗菌活性。该组合物对于微生物，主要是细菌和真菌的生长显示出协同抗菌活性。为了在使用该液体时提供抗微生物，例如细菌和真菌的生物杀伤保护，在例如含水工业官能液组合物，例如金属加工液，润滑液或免疫试验的诊断试剂中使用该组合物来提供抗菌活性。
本方法和本发明的组合物中所用的羟基吡啶硫酮优选为羟基吡啶硫酮盐，例如羟基吡啶硫酮钠、羟基吡啶硫酮锌、羟基吡啶硫酮脱乙酰壳多糖、羟基吡啶硫酮二硫化镁、羟基吡啶硫酮铜等，但如果需要，可使用羟基吡啶硫酮酸。更优选的羟基吡啶硫酮盐包括羟基吡啶硫酮钠，羟基吡啶硫酮铜和羟基吡啶硫酮锌，最优选的为羟基吡啶硫酮钠。
可用于本发明的羟基吡啶硫酮钠为熟知的商品，它通常如美国专利3,159,640的公开所描述的通过将2-氯吡啶-N-氧化物与NaSH和NaOH反应而制备。
羟基吡啶硫酮锌可如美国专利2,809,971的公开所描述的通过将1-羟基-2-吡啶硫酮(即羟基吡啶硫酮酸)或其可溶盐与锌盐(如ZnSO4)反应形成羟基吡啶硫酮锌沉淀而制备。
在使用中，本发明的抗菌组合物优选含有羧酸或其盐与羟基吡啶硫酮的重量比为约1∶1至约10,000∶1之间，较优选为约1∶1至约6,000∶1之间。如果在抗菌组合物中采用羟苯甲酸酯或其盐，那么优选羟苯甲酸酯化合物与羟基吡啶硫酮的重量比为约1∶10至约10,000∶1之间，较优选为1∶6至156∶1之间。
本发明的抗菌组合物适宜于多种用途，例如用于肥皂，香波，皮肤护理药物，金属加工液，涂料或掺入到塑料或纺织或非织造纤维之中或之上。
本发明的抗菌组合物的一个重要的使用用途是用于官能液，例如金属加工液。这些官能液通常以含有抗菌组合物和官能液的其它成分的含水浓缩液的形式使用。在含水浓缩液中，提供了足够量的抗菌组合物，这样“加工”官能液含有生物杀伤有效量的抗菌组合物。为了满足这个要求，金属加工液的浓缩液例如优选含有总量达约占金属加工液重量的2.5％(重量)的抗菌组合物，以在“加工”液中提供优选量的至少约1250ppm的抗菌组合物，该浓缩液与“加工”液体的稀释比例为约1∶10至约1∶100之间。其它的官能液，例如化妆品通常被直接制成制剂(不需要浓缩液)，可含有高达5000pm或更多的抗菌组合物。
本发明的抗菌组合物还可用于涂料中，包括内墙和外墙家用涂料，工业和商业涂料。当本发明的组合物与船舶漆结合使用于例如船壳中时获得了尤其良好的效果。此外，抗菌组合物在胶乳和醇酸类型的外用漆中提供了所需的结果。抗菌组合物还可用作在涂料使用前的储藏期间的“桶内”杀菌剂。
如本领域熟知的，涂料组合物通常包含树脂，颜料和各种任选的添加剂，例如增稠剂，湿润剂等。树脂优选选自乙烯基树脂、醇酸树脂、环氧树脂、丙烯酸树脂、聚氨酯树脂和聚酯树脂和它们的混合物。树脂优选以占涂料或涂料基质重量的约20％至约80％的量使用。
此外，本发明的涂料组合物还任选含有对粘度，湿润能力和可分散性以及对冷冻和电解质的稳定性和发泡性质具有有利影响的任选的添加剂。如果船舶漆正在制造，该漆优选含有溶胀剂以使漆在它的海水环境中逐渐“脱落”，从而导致与海水环境的水介质接触的涂料表面的新暴露的生物杀伤剂的生物杀伤功效重新恢复。溶胀剂的实例为天然产生或合成粘土，例如高岭土，蒙脱土和膨润土，粘土云母(白云母)，和绿泥石(hectonite)等。除开粘土，其它的溶胀剂包括天然或合成的聚合物，例如可购得的POLYMERGEL，已被发现可用于本发明的组合物中来提供所需的“脱落”效果。可单独或混合使用溶胀剂。任选的添加剂的总量优选不大于涂料组合物总重量的20％(重量)，较优选为约1％至约5％(重量)之间。
增稠剂的实例包括纤维素30衍生物，例如甲基、羟基乙基、羟基丙基和羧基甲基纤维素、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(乙二醇)，聚(丙烯酸)盐和丙烯酸/丙烯酰胺共聚物的盐。
适宜的湿润剂和分散剂包括多磷酸钠、低分子量的聚(丙烯酸)盐、聚(乙磺酸)盐、聚(乙烯基膦酸)盐，聚(马来酸)盐和马来酸与乙烯，具有3-18个碳原子的1-烯烃和/或苯乙烯的共聚物的盐。
为了增加对冷冻和电解质的稳定性，可向涂料组合物中加入各种1，2-二醇单体，例如乙二醇、丙二醇(1.2)和丁二醇(1.2)或它们的聚合物，或乙氧基化化合物。例如环氧乙烷与长链烷醇、胺、醇酸苯酚、聚(丙二醇)或聚(丁二醇)的反应产物，或它们的混合物等。
可通过加入溶剂，例如乙二醇、丁基乙二醇、乙酸乙基乙二醇酯、乙酸乙基二甘醇酯、乙酸丁基二甘醇酯、苯或烷基化芳香烃来降低涂料组合物的最低成膜温度(白点)。作为消泡剂，适宜的实例为聚(丙二醇)和聚硅氧烷。任选的其它生物杀伤剂可另外掺入到本发明的涂料制剂中。可用的任选的溶剂包括甲基异丁基酮(本文称为“MIBK)、二甲苯、乙苯、甲醇和它们的混合物。
本发明的涂料组合物可用作天然或合成材料的涂料，例如木材，纸，金属，织物和塑料。它尤其适宜作为外墙涂料，极其适宜用作船舶漆。
本发明的组合物可以液体或可涂布的固体形式作为消毒剂和杀菌剂单独或与惰性载体例如水、液态烃、乙醇、异丙醇等结合用于本文描述的任何一种用途中。它们可以常规方法使用来防治各种底物中的细菌和真菌，并且可以常规的方法，例如喷雾，浸渍，浸润浸渍等以抗菌量施用到细菌或真菌生物体或它们的底物上。
本发明将通过下面实施例来进一步说明。除非另有说明，“份数”和“％”分别为“重量份”和“重量百分比”。
虽然在上面已根据具体实施方案对本发明进行了描述，很显然在不背离本文描述的发明本质时，可进行许多改变，修改和变异。因此，它将包括所有这些落入所附权利要求书的实质和宽范围中的变化，修改和变异。实施例1
羟基吡啶硫酮加上羟苯甲酸酯或羧酸的MIC数据
使用Dougherty，P.F.等1977在“确定抗菌剂的体外协同作用的微量稀释转移盘技术”，抗菌剂和化学治疗，11：225-228中描述的“棋盘”MIC(“最小抑制浓度”)方法的改型来评价羟基吡啶硫酮钠与其它化合物的相互作用。这个方法使得大量的不同比例的生物杀伤剂的混合物的效果易于被测定。在微升盘中将羟基吡啶硫酮在胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中的储液用TSB稀释，并将试验化合物稀释在装有TSB的试管中。将试验化合物的每一稀释液的等分试样加入到含有羟基吡啶硫酮稀释液和作为对照的未定量的TSB的孔中，用未混合的羟基吡啶硫酮或试验化合物来确定纯羟基吡啶硫酮或试验化合物的MIC。将等体积的含有悬浮在TSB中的106细菌/ml或105真菌孢子/ml的试验培养物加入到各个孔中，将盘在28℃下温育。确定产生生长抑制的最低浓度(MIC)。确定分数抑制浓度(FIC)，即在混合物中生物杀伤剂的MIC与纯物质的MIC的比值，计算各混合物的FIC的和(“FIC指数”)。定量各种类型的相互作用并根据下面来分类：如果＜1，具有协同作用；如果＝1，具有加和作用；如果＞1，具有拮抗作用。
含有变化比例的羟基吡啶硫酮和有机酸或羟苯甲酸甲酯的混合物协同地抑制细菌绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和真菌黑曲霉(Aspergillus niger)，其MIC数据分别列于表1和2中。 表1 羟基吡啶硫酮钠(NPT)混合物的协同抗细菌作用 混合物的MIC(ppm)a 试验化合物试验化合物(TC)NPT，ppm比率(TC/NPT)FIC指数b 无 0 128 - - 水杨酸 6250 0 - - ＂ 3125 8 391/1 0.56 ＂ 1563 32 49/1 0.50 ＂ 781 32 24/1 0.38 ＂ 391 64 6/1 0.56 对氨基苯甲酸 6250 0 - - ＂ 3125 16 195/1 0.63 ＂ 1563 32 49/1 0.50 ＂ 781 64 12/1 0.63 苯甲酸 6250 0 - - ＂ 3125 4 781/1 0.53 ＂ 1563 16 98/1 0.38 ＂ 781 32 24/1 0.38 ＂ 391 32 12/1 0.31 丙酸 3125 0 - - ＂ 1563 2 781/1 0.52 ＂ 781 64 12/1 0.75 乳酸 22,225 0 - - ＂ 11,113 16 695/1 0.63 ＂ 5560 32 174/1 0.50 ＂ 2780 64 43/1 0.62 柠檬酸 ＞25,000 0 - - ＂ 12,500 8 ＞1563/1 ＜0.56 ＂ 6250 16 ＞391/1 ＜0.38 ＂ 3125 16 ＞195/1 ＜0.25 ＂ 1563 32 ＞49/1 ＜0.31 ＂ 781 64 ＞12/1 ＜0.53 ＂ 391 64 ＞6/1 ＜0.52对羟基苯甲酸甲酯 2500 0 - - ＂ 625 16 39/1 0.38 ＂ 313 32 10/1 0.38 ＂ 156 32 5/1 0.31 ＂ 78 32 2/1 0.28 ＂ 39 64 1/2 0.52 ＂ 20 64 1/3 0.51 ＂ 10 64 1/6 0.50 无 0 64 - - 山梨酸 4096 0 - - ＂ 2048 16 128/1 0.75 ＂ 1024 32 32/1 0.75 ＂ 512 32 16/1 0.63 ＂ 256 32 8/1 0.56a 对绿脓杆菌NCIMB菌株6749测定最小抑制浓度(MIC)。将NPT和细菌
细胞的接种物加入pH调为5.8的胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中。将试验
化合物溶于TSB，并将所得溶液调至pH5.8，过滤灭菌。在TSB中稀释
混合物(pH5.8)并在28℃下温育4-6天。b 分数抑制浓度指数：如果＝1，具有加和作用；如果＜1，具有协同作用；
如果＞1，具有拮抗作用。 表2 羟基吡啶硫酮钠(NPT)混合物的协同抗真菌作用 混合物的MIC(ppm)a 试验化合物试验化合物(TC)NPT，ppm比率(TC/NPT)FIC指数b 无 0 32 - - 水杨酸 6250 0 - - ＂ 3125 1 3125/1 0.53 ＂ 1563 16 98/1 0.75 山梨酸 1250 0 - - ＂ 625 8 78/1 0.75 ＂ 313 8 39/1 0.50 苯甲酸 1500 0 - - ＂ 750 4 188/1 0.75 丙酸 3125 0 - - ＂ 1563 0.25 6252/1 0.51 ＂ 781 4 195/1 0.38 无 0 64 - -对羟基苯甲酸甲酯 1250 0 - - ＂ 625 4 156/1 0.56 ＂ 313 16 20/1 0.50 ＂ 156 16 10/1 0.38 ＂ 78 16 5/1 0.31 ＂ 39 16 2/1 0.28 ＂ 20 32 1/2 0.52 ＂ 10 32 1/3 0.50a 对真菌黑曲霉的环境分离物测定最小抑制浓度(MIC)。将NPT和真菌
孢子的接种物加入pH调至4.5的胰蛋白酶大豆肉汤(TSB)中。将试验
化合物溶于TSB中，并将所得溶液调至pH4.5，过滤灭菌。混合物在TSB
中稀释(pH4.5)并在28℃下温育12-13天。b 分数抑制浓度指数：如果＝1，具有加和作用；如果＜1，具有协同作用；
如果＞1，具有拮抗作用。实施例2
含有羟基吡啶硫酮和羟苯甲酸酯的金属加工液
在用细菌和真菌混合物侵染的水包油乳液金属加工液中测定作为杀菌剂的羟基吡啶硫酮钠-羟苯甲酸甲酯混合物的功效。将由矿物油(83.5％)，磺化烃(10.7％)，油酸(1.0％)，三乙醇胺(0.8％)，动物脂甲酯(methyl tallowate)(3.0％)和丙二醇醚(1.0％)组成的浓缩MWF的5％含水乳液用125ppm羟基吡啶硫酮钠和1000ppm的羟苯甲酸甲酯配料，分散到锥瓶中。107细菌细胞和105真菌孢子/ml乳液的侵染水平通过加入最初从污染的MWF中分离的七种细菌和两种真菌(假单胞菌(Pseudomonasrubescens NCIMB12202)，施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)，荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorecens)NCIMB12201，绿脓杆菌NCIMB6749，食油假单胞菌(Pseudomonas oleovorans)NCIMB6576，粪产碱杆菌，弗氏柠檬酸细菌NCIMB12203，镰孢属数种和头孢属数种)的悬浮液引发。将液体在旋转摇床上连续搅拌，对胰蛋白酶大豆琼脂上存活的细菌和每升添加100mg硫酸庆大霉素的胰蛋白酶大豆琼脂上存活的真菌进行定期取样。两周后，相对于未处理的对照组，在羟基吡啶硫酮-羟苯甲酸甲酯液体中观察到显著的对细菌和真菌的协同抑制，正如示于下表3的数据所显示。抑制还在当液体第二次被侵染时显示出(见表3)。 表3羟基吡啶硫酮钠/羟苯甲酸甲酯混合物在水包油乳液中的功效* 平均存活数/ml 处理 时间(天) 细菌 真菌 空白 7 20,700,000 150,000 NPT(125ppm) 7 12,400,000 134,000 MP(1,000ppm) 7 5,930,000 44,000 NPT(125)+MP(1000) 7 ＞1,000,000 27,000 空白 12 25,900,000 94,000 NPT(125ppm) 12 8,190,000 44,000 MP(1,000ppm) 12 442,000 53,000 NPT(125)+MP(1000) 12 ＜260 100 14 再次侵染 空白 19 39,500,000 152,000 NPT(125ppm) 19 25,200,000 106,000 MP(1,000ppm) 19 4,160,000 74,000 NPT(125)+MP(1000) 19 25,700 19,200 空白 27 29,500,000 270,000 NPT(125ppm) 27 16,500,000 50,000 MP(1,000ppm) 27 375,000 50,000 NPT(125)+MP(1000) 27 ＜26,000 ＜1000* 用羟基吡啶硫酮钠(NPT)和羟苯甲酸甲酯(MP)处理金属加工液浓缩液的5％水乳液。实施例3
含有羟基吡啶硫酮钠和羟苯甲酸酯的乳胶漆
在人工用绿脓杆菌污染的乳胶漆中测定羟基吡啶硫酮钠加上羟苯甲酸酯混合物的功效。将代表性的乙烯基丙烯酸无光建筑用乳胶漆制剂(由水(30％)，乙二醇(2.20％)，阴离子分散剂(0.58％)，消泡剂(0.33％)，羟基乙基纤维素(0.25％)，三聚磷酸钠(0.08％)，硅酸盐填料(20.60％)，二氧化钛(18.50％)，丙二醇(2.80％)，硅镁土(0.49％)，脂肪醇乙氧基化物(0.21％)，胶乳(30.20％)和醇酯聚结剂(0.74％)组成)用无菌水稀释至10％以模仿大量漂洗水冷凝情况，并用带绿脓杆菌ATCC10145的肉汤培养液接种。通过在胰胨葡萄糖提取物琼脂(TGEA，Difco)的斜面上将涂料溶液在29℃下棓养5天来监测生长。将10克未污染的10％的涂料称至玻璃管形瓶中，用羟基吡啶硫酮钠水溶液(本文称为“SP)或羟苯甲酸甲酯(MP)乙醇溶液，羟苯甲酸丙酯(PP)乙醇溶液或羟苯甲酸丁酯(BP)乙醇溶液校正。包括含有等量乙醇(50ml)的空白。每个管形瓶接种1％体积的被污染的稀释涂料(2.0×106CFU/ml)。如前面通过将样品再次在TGEA斜面上培养来定期评价存活的污染物。32天后，涂料样品再次用1％体积的稀释的被污染涂料侵染。
表4中提供的结果表明在一周后，500ppm羟基吡啶硫酮和1000ppm的羟苯甲酸酯的混合物比单独任何一种杀菌剂具有更好的抗菌有效性。此外，表4的数据表明羟苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯与羟苯甲酸丁酯相比为相对更为有效的增效剂。再次侵染后，在这次试验中，1000ppm的羟苯甲酸甲酯与500至1000ppm的羟基吡啶硫酮钠的组合物为最具有有效协同作用的组合物。
在结果示于表5的第二次实验中，将未稀释的被类似地污染的涂料用羟苯甲酸甲酯和羟基吡啶硫酮钠以各种比例校正，并且类似于第一个实施例对生长进行定期评价。在第21天和第69天，将样品用2％(体积)污染的涂料(8.7×106CFU/ml)再次侵染。500ppm羟基吡啶硫酮钠加上500或1000ppm的羟苯甲酸甲酯的混合物被证明在这些试验中是有效的，但是，在这个试验中，500ppm羟基吡啶硫酮钠加上1000ppm的羟苯甲酸甲酯提供了最大的抗菌有效性。结果示于表5中。
在表4和5中，“-”表示没有试验生物体的的存活微生物生长，而“+”表示非常少量的存活，“++和+++”表示极小量微生物存活，“++++和+++++”表示大量的微生物存活。 表4 桶内涂料杀菌剂功效 天 生长(TGEA再次培养) 杀菌剂(ppm，w/w) 空白 SP500 SP1000 MP1000 PP1000 BP1000 SP 500+MP SP 500+PP SP 500+BP SP 1000+MP SP 1000+PP SP 1000+BP 1 +++++ ++++ +++ +++++ +++++ +++++ ++++ ++++ ++++ +++ ++++ ++++ 8 +++++ +++ ++ +++++ +++++ +++++ + ++ +++ + ++ ++ 15 +++++ ++++ + +++++ +++++ +++++ - - ++ - - + 25 +++++ +++++ - +++++ +++++ +++++ - - + - - - 32 再次侵染 39 +++++ +++++ +++ +++++ +++++ +++++ ++ ++++ +++++ + +++ +++ 表5羟基吡啶硫酮+羟苯甲酸甲酯混合物的功效 天 生长(TGEA再次培养) 杀菌剂(ppm，w/w) 空白 SP250ppm SP500ppm MP500ppm MP 1000ppm SP 250ppm+ MP500ppm SP 500ppm+ MP500ppm SP250 ppm+MP 1000ppm SP500 ppm+MP 1000ppm 7 +++++ + + +++++ +++++ ++++ ++ +++ + 14 +++++ - - +++++ +++++ - - - - 21 +++++ - - +++++ +++++ - - - - 再次侵染 28 +++++ +++++ - +++++ +++++ ++ + + - 35 +++++ +++++ - +++++ +++++ - - - - 42 +++++ +++++ - +++++ +++++ + - - - 49 +++++ +++++ - +++++ +++++ +++ - - - 56 +++++ +++++ - +++++ +++++ - - - - 63 +++++ +++++ - +++++ +++++ +/- - - - 69 +++++ +++++ - +++++ +++++ +/- - - - 再次侵染 72 +++++ +++++ ++++ +++++ +++++ +++++ + +++ - 79 +++++ +++++ +++++ +++++ +++++ +++++ ++++ +++++ -