一种生物农药的制备方法技术领域
本发明涉及农药技术领域，具体是一种生物农药的制备方法。
背景技术
在公知的技术领域，生物农药因为对环境友好的特质，近年来发展比较迅速，而且
也受到各国政府的高度重视，通过简化登记流程、降低登记门槛等措施为生物农药的开发
提供便利。因此，生物农药已成为新农药开发的一个非常活跃的领域。生物农药目前的市场
约为15～20亿美元，约占全球农药市场的5%，虽然占比较低，但在整个农药市场增长缓慢的
背景下生物农药一直保持着一个非常快的增长势头，从2006年占农药市场的不到1%增长到
目前约5%。目前最大的生物农药市场在美国，占全球市场份额的40%以上。欧洲排第二，占总
数的25%，亚洲占20%左右排第三，拉丁美洲约占10%。全球生物农药市场是生物农药中规模
最大的，约为9亿美元，植物源农药位居次席，约5亿美元，并以每年10%～15%的速度增长。生
物农药是一个比较大的范畴，里边包含很多种品种，销售状况也因地区而已，因此不能仅仅
因为整个市场表现良好就得出个别品种也具有良好发展前景的结论。而且，相比植物源农
药，随着现代基因工程和发酵工程技术的不断进步，使得微生物源农药往往更具成本优势。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生物农药的制备方法，以解决上述背景技术中提出的
问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过100-200目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在30-40℃，发酵5-7天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为10000-12000r/min，离心时间为10-20min，离心后
取上清液，加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截
留分子量为100或120或150kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为20-30MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置
为40-45℃，分离温度设置为48-50℃，萃取时间为3-3.5h；萃取结束后，收集萃取液，进行减
压浓缩，即得组分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（1）中过150目筛。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（2）中控制温度在35℃，发酵6天。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（3）中离心转速为11000r/min，离心时间为
15min。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（3）中超滤膜选用截留分子量为120kDa。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（4）中设置压强为25MPa。
作为本发明进一步的方案：具体步骤（4）中萃取剂温度设置为43℃，分离温度设置
为49℃，萃取时间为3.3h。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
（1）对人畜安全：本发明只针对病虫害有作用，一般对人、畜及各种有益生物(包括动物
天敌、昆虫天敌、蜜蜂、传粉昆虫及鱼、虾等水生生物)比较安全，对非靶标生物的影响也比
较小；（2）对生态环境影响小：本发明的有效活性成分完全存在和来源于天然草本植物和自
然生态系统，它的最大特点是极易被日光、植物或各种土壤微生物分解，是一种来于自然，
归于自然正常的物质循环方式；因此，可以认为它们对自然生态环境安全、无污染；（3）可利
用野生植物进行生产加工：本发明中原材料的来源十分广泛、生产成本比较低廉，因此，生
产生物农药一般不会产生与利用不可再生资源(如石油、煤、天然气等)生产化工合成产品
争夺原材料的矛盾，有利于人类自然资源保护和永久利用；（4）生产设备通用性较好：本发
明中所用设备为通用设备，一般主要包括：粉碎机、发酵罐、离心装置、浓缩装置、过滤系统
和干燥装置等，该类设备一般可以满足进行大规模工业化生产的要求；（5）产品改良的技术
潜力大：可以利用常规技术、基因工程技术和微生物发酵工程技术改良的生产性能；优化活
性成份提取工艺流程；提高生产效率；缩短生产周期；减少原材料消耗；降低生产使用成本；
改进产品性能及提高防治效果的稳定性、速效性和持效性等；技术改进的途径多，发展潜力
巨大。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本专利的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过100目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在30℃，发酵5天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为10000r/min，离心时间为10min，离心后取上清液，
加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截留分子量
为100kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为20MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置为40
℃，分离温度设置为48℃，萃取时间为3h；萃取结束后，收集萃取液，进行减压浓缩，即得组
分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
实施例2
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过120目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在33℃，发酵5天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为10500r/min，离心时间为13min，离心后取上清液，
加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截留分子量
为100kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为23MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置为42
℃，分离温度设置为48℃，萃取时间为3.1h；萃取结束后，收集萃取液，进行减压浓缩，即得
组分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
实施例3
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过150目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在35℃，发酵6天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为11000r/min，离心时间为15min，离心后取上清液，
加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截留分子量
为120kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为25MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置为43
℃，分离温度设置为49℃，萃取时间为3.3h；萃取结束后，收集萃取液，进行减压浓缩，即得
组分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
实施例4
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过180目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在37℃，发酵7天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为11500r/min，离心时间为17min，离心后取上清液，
加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截留分子量
为150kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为28MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置为44
℃，分离温度设置为50℃，萃取时间为3.4h；萃取结束后，收集萃取液，进行减压浓缩，即得
组分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
实施例5
一种生物农药的制备方法，包括以下步骤：
（1）预处理：分别称取芥末、辣椒、大蒜、花椒、醋、咖喱、生姜、夏枯草、荷叶、茴香、肉桂、
橘皮、鱼腥草、栀子，去除杂质，使用超微粉碎机进行处理，过200目筛，晾干，备用；
（2）发酵：将芥末、辣椒、夏枯草、荷叶、鱼腥草放入发酵罐中，加醋、果胶酶、淀粉酶及纤
维素酶后密封，控制温度在40℃，发酵7天，拆封并过滤，制得发酵液；
（3）纯化：将发酵液离心，离心转速为12000r/min，离心时间为20min，离心后取上清液，
加入上清液3倍体积的70%乙醇，混匀后静置10min，接着进行超滤，超滤膜选用截留分子量
为150kDa，反复进行三次，收集滤液，进行减压蒸发，即得组分A；
（4）超临界二氧化碳萃取：将大蒜、花椒、咖喱、生姜、茴香、肉桂、橘皮、栀子加入到超临
界二氧化碳萃取机中，设置压强为30MPa，采用95%乙醇为萃取洗脱剂，萃取剂温度设置为45
℃，分离温度设置为50℃，萃取时间为3.5h；萃取结束后，收集萃取液，进行减压浓缩，即得
组分B；
（5）混合成品：将组分A与组分B搅拌混匀后，质检合格后即得。
上面对本专利的较佳实施方式作了详细说明，但是本专利并不限于上述实施方
式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本专利宗旨的前提下
做出各种变化。