一种清热抗炎颗粒的制备方法技术领域
本发明涉及清热抗炎药物的制备方法，尤其涉及了一种三叶青清热抗炎颗粒的制
备方法。
背景技术
发热是由于发热激活物作用于机体，进而导致内生致热原的产生并入脑作用于体
温调节反馈示意图体温调节中枢，导致发热中枢介质的释放继而引起调定点的改变，最终
引起发热。常见的发热激活物有细菌、病毒、真菌、螺旋体、抗原抗体复合物及类固醇等。一
定程度的体温升高，能使人体免疫功能明显增强，有利于清除病原体和促进疾病的痊愈。但
发热超过了一定程度或长期发热，可影响机体的代谢过程，引起多系统特别是中枢神经系
统的功能紊乱。发热多数伴随炎症的产生，炎症是机体对于刺激的一种防御反应，表现为
红、肿、热、痛和功能障碍。在炎症过程中，一方面损伤因子直接或间接造成组织和细胞的破
坏，另一方面通过炎症充血和渗出反应，以稀释、杀伤和包围损伤因子。
三叶青(Tetrastigmatis hems-leyani)为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤。其块
根称为蛇附子，为民间常用的中草药，主要含黄酮类如槲皮素、山奈酚及三萜类化合物如蒲
公英萜醇等化学成份，具有抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗炎、调节免疫作用，并基本无毒。严余明
等研究了传统的水煎、饮片打粉与冻干粉三种不同工艺加工的三叶青的抗炎作用，结果表
明三叶青冻干粉的抗炎作用明显优于水煎剂与饮片粉。原因在于水煎剂和饮片粉在加工工
艺中采用较高温度，从而使有效成份活性失活等。
发明内容
本发明针对现有技术中的缺点，提供了一种可以保留有效成份活性的清热抗炎颗
粒的制备方法，其以三叶草为主要原料，制得的颗粒可以作为清热抗炎的药物。
为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决：
一种清热抗炎颗粒的制备方法，其包括以下步骤，
步骤一：水煎
将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥后粉碎得三叶青粗粉，取
三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的8～20倍，煎煮两次，每次1
～2h，过滤，合并滤液，滤渣备用；
步骤二：醇提
将步骤一所得的滤渣加入60～80％乙醇水浴提取两次，60～80％乙醇的添加量为
滤渣重量6～10倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；
步骤三：浓缩
将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10的浓缩
浸膏，将浸膏进行保温；
步骤四：减压干燥、制粒
将保温后的浸膏在温度为70～90℃、压力为-0.2～-0.05Mpa下进行减压干燥，干
燥后将其粉碎，加入糊精、润湿剂，混合均匀，再以挤压方式通过筛网，制成均匀的颗粒；将
颗粒置于干燥机中进行干燥，温度控制在70℃～100℃之间，干燥时间为8～15min，再用整
粒机整粒。采用减压干燥法进行干燥，能较好保留主要有效成分，缩短干燥时间，所得干燥
物呈蜂窝状，疏松易粉碎。
作为优选，三叶青为野生三叶青。
作为优选，步骤三中保温的温度为40～60℃，保温时间为1～3h。
作为优选，保温的温度为50℃。
作为优选，减压干燥时间为2～4h。
作为优选，减压干燥时的温度为80℃，压力为-0.1Mpa。
作为优选，润湿剂为乙醇。
本发明由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果：三叶草主要含黄酮类如
槲皮素、山奈酚及三萜类化合物如蒲公英萜醇等化学成份，具有抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗
炎、调节免疫作用，而且基本无毒。本发明采用水煎、醇提、浓缩、减压干燥及制粒等制备步
骤，能避免现有技术中因较高温度而使有效成份活性失活的缺点，而且采用减压干燥法进
行干燥，能较好保留主要有效成分，缩短干燥时间，所得干燥物呈蜂窝状，疏松易粉碎；采用
本方法制得的颗粒，不仅清热抗炎效果佳，同时还能提高免疫力。
具体实施方式
下面实施例是对本发明进一步详细描述，但不是限制本发明的范围。
实施例1
清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，
步骤一：水煎
将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，
取300g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的8倍，煎煮两次，第
一次煎煮1h，第二次煎煮1.5h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；
步骤二：醇提
将步骤一所得的滤渣加入60％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量
8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；
步骤三：浓缩
将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热
测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为2h；
步骤四：减压干燥、制粒
将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1Mpa下进行减压干燥，干燥时间为2h，
干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的16.7％，以95％
乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机
中进行干燥，干燥温度为70℃，干燥时间为13min，再用快速整粒机整粒。
实施例2
清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，
步骤一：水煎
将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥1h后粉碎得三叶青粗粉，
取400g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的13倍，煎煮两次，第
一次煎煮2h，第二次煎煮2h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；
步骤二：醇提
将步骤一所得的滤渣加入70％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量
8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；
步骤三：浓缩
将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热
测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为1h；
步骤四：减压干燥、制粒
将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1Mpa下进行减压干燥，干燥时间为4h，
干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的15％，以95％乙
醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机中
进行干燥，干燥温度为90℃，干燥时间为10min，再用快速整粒机整粒。
实施例3
清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，
步骤一：水煎
将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，
取325g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的20倍，煎煮两次，第
一次煎煮1.5h，第二次煎煮1h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；
步骤二：醇提
将步骤一所得的滤渣加入80％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量
8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；
步骤三：浓缩
将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热
测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为3h；
步骤四：减压干燥、制粒
将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1Mpa下进行减压干燥，干燥时间为
2.8h，干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的17％，以
95％乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干
燥机中进行干燥，干燥温度为100℃，干燥时间为8min，再用快速整粒机整粒。
实施例4
清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，
步骤一：水煎
将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，
取360g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的16倍，煎煮两次，第
一次煎煮1h，第二次煎煮1.2h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；
步骤二：醇提
将步骤一所得的滤渣加入74％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量
8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；
步骤三：浓缩
将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热
测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为2.3h；
步骤四：减压干燥、制粒
将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1Mpa下进行减压干燥，干燥时间为4h，
干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的17.4％，以95％
乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机
中进行干燥，干燥温度为80℃之间，干燥时间为15min，再用快速整粒机整粒。
以下通过具体药效学试验证明本发明的有益成果。
1、清热药效评价
健康新西兰家兔，雌雄兼用，体重1.8～2.4kg，试验前1～2天进行体温预选，选用
体温在38.0～39.0℃之间，3小时内体温变化<0.3℃的40只用于实验。按基础体温搭配分成
6组，每组8只，分别灌胃给予蒸馏水(对照组)、阿司匹林(24mg/kg，阳性对照组)、细菌内毒
素(24mg/kg，模型组)、三叶青颗粒低剂量(12.5mg/kg，三叶青低剂量组)、三叶青颗粒中剂
量(25mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量(50mg/kg，三叶青高剂量组)，给药后立
即耳缘静脉注射50u/kg的细菌内毒素生理盐水溶液，用WRY电脑热原测温仪观察注射内毒
素后6h内的温度变化，每隔30min记录1次体温；以各时段的升温值以及最大升温值作指标
比较各组对内毒素所致发热家兔体温的影响。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青
高剂量组所用颗粒为实施例1或实施例2或实施例3或实施例4所得颗粒。
表1解热作用实验结果
与对照组比较**p<0.01；与模型组比较##p<0.01。
2、抗炎药效评价
2.1对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
雄性ICR小鼠50只，体重25～30g，按体重搭配平均分为5组，每组10只；分别灌胃给
予蒸馏水(对照组)、阿司匹林(0.27mg/kg，阿司匹林组)、三叶青颗粒低剂量(1.5mg/kg，三
叶青低剂量组)、三叶青颗粒中剂量(3.0mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量
(6.0mg/kg，三叶青高剂量组)；每日2次，连续5d；末次给药后30min，小鼠右耳涂以二甲苯
0.05ml/只致炎，左耳作对照；15min后脱颈臼处死，沿耳廓基线剪下双耳，用6mm角膜环钻在
左右耳相同位置冲下耳片，在电子分析天平上称重(精确到0.1mg)，右耳重量减去左耳重量
之差值(单位:mg)即为肿胀度，计算各组平均肿胀度并求出肿胀抑制率(％)，肿胀抑制率
(％)＝[(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)/空白对照组肿胀度]×100％，见表2。表2显示
三叶青颗粒明显减少二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，肿胀抑制率30.29％～61％,剂量关系明
确。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青高剂量组所用颗粒为实施例1或实施例2或
实施例3或实施例4所得颗粒。
表2三叶青颗粒对小鼠耳肿胀的影响
与对照组比较**p<0.01,*p<0.05。
2.2对小鼠碳粒廓清指数和吞噬指数的影响
雄性ICR小鼠50只，体重25～30g，按体重搭配平均分为5组，每组10只；分别灌胃给
予蒸馏水(正常组)、氢化可的松(50mg/kg，模型组)、三叶青颗粒低剂量(1.5mg/kg，三叶青
低剂量组)、三叶青颗粒中剂量(3.0mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量(6.0mg/
kg，三叶青高剂量组)；每日2次，连续5d。除了正常组外，其余各组在灌胃给药的同时，皮下
注射氢化可的松50mg/kg，1次/d，连续6d造成免疫低下阳性对照。于末次给药后0.5h，各组
小鼠尾静脉注射20％印度墨汁5uL/g，于1min和5min分别眼眶取血，测廓清指数K，将小鼠处
死，取肝脏和肾脏，计算吞噬指数ɑ。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青高剂量组所
用颗粒为实施例1或实施例2或实施例3或实施例4所得颗粒。
表3三叶青颗粒对小鼠碳粒廊清指数和吞噬指数的影响
组别
K
ɑ
正常组
0.064±0.007
8.16±0.83
模型组
0.021±0.0034##
4.31±0.454##
三叶青低剂量组
0.034±0.004*
5.70±0.63*
三叶青中剂量组
0.047±0.007**
6.64±0.41**
三叶青高剂量组
0.596±0.002**
7.95±0.82**
与对照组比较**p<0.01；与模型组比较##p<0.01。
表3结果表明，三叶青颗粒各剂量组与模型组比较，碳粒廓清指数和吞噬指数明显
升高，有显著差异，且随着剂量的增加，效果越明显，说明三叶青颗粒不仅具有明显的抗炎
作用，而且还能提高小鼠的免疫力。
总之，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所作的均等
变化与修饰，皆应属本发明专利的涵盖范围。