一种从水稻杂交种中除去母本自交种苗的方法 本发明属于一种提高水稻杂交种纯度的生产方法，特别涉及在水稻杂交F1代种苗中用除草剂除去母本自交种苗的除杂技术。
水稻是自花授粉作物。用作杂交制种的母本，必须具备雄性不育的特征。但是在很多情况下，制种母本的雄性不育是不彻底的。例如受光照和温度控制的光(温)敏雄性不育系，在制种期间，如遇到异常低温，便会导致育性部分恢复，产生自交结实现象。又如化学药剂导致的雄性不育，由于药剂及施用条件的差异，有时也会发生雄性不育不完全而产生自交结实。制种母本的这种雄性不完全现象，使得在所产生的杂交种子中有可能混入母本的自交种子而造成混杂。为了剔除杂交种子中混入的母本自交种子，对母本进行性状标记是一种有效的技术。已经公知的标记方法有利用淡绿色叶片性状(中国水稻科学，1995、9(2):65-70)，利用紫色叶片性状(中国水稻科学，1995、9(1):45-48)。利用转绿型白化突变性状(浙江农业大学学报，1996,22(1):55-60)来标记母本等。带有以上标记性状的母本自交种在苗期分别表现为淡绿叶片、紫色叶片或白化叶片，而杂交苗则表现正常绿色叶片，这样就可以在F1代苗期用手工拔除自交苗，保证杂交苗纯度。这种标记除杂的缺点是要在田间手工操作，劳动量大而且很难除尽。
水稻的化学致死性状是另一类可以利用的标记性状。已经公知的对杂交水稻亲本进行化学致死标记的技术有利用抗化学除草剂显示性状标记父本(科学通报，1998 43(1)67-70)的技术。采用具有这种标记性状的父本制种，在杂交F1代苗期喷施特定除草剂，即可杀死母本自交苗，保留杂交苗，达到杂交苗保纯的目的。另一种已经应用的化学致死标记技术是利用对除草敏感致死的隐性性状标记父本，用于在混植法制种时授粉后选择性杀死父本，以便于对杂交制种地机械化收获(kloakl M et al,1991,Mechanized productionof F1 Seeds in Rice by Mixed planting JARQ(24):234-252)。以上两种公知的技术均采用标记父本的方法来达到不同的目的。
本发明的目的，是针对杂交水稻制种因雄性不育不彻底而导致的母本自交混杂，提供一种利用除草剂在F1代苗期除掉自交苗而达到提高杂交种纯度的方法。
本发明是这样实现的：
一种在水稻杂交种中用除草剂除去母本自交种苗的方法，选择对除草剂具有敏感致死隐性性状的母本与恢复系配制杂交种；在该杂交种F1代秧苗立针至4叶期，每666M2苗田均匀施用稻田除草剂草克星0.1-50克或者农得时0.1-100克或者威农0.1-50克，除去母本自交种。
在杂交种F1代秧苗立针至3叶1心期间，喷施5-15mg/L浓度的草克星或者100M2苗田均匀施用草克星0.15-0.3克后，母本自交苗2-15天内停止生长或者生长缓慢。
在杂交种F1代秧苗立针至3叶1心期间，喷施10-30mg/L浓度的农得时或者100M2苗田均匀施用农得时0.25-0.5克后，母本自交苗2-15天内停止生长或者生长缓慢。
在杂交种F1代秧苗立针至3叶1心期间，喷施2-5mg/L浓度的威农或者100M2苗田均匀施用威农0.3-0.9克后，母本自交苗2-15天内停止生长或者生长缓慢。
所述的母本为能被除草剂致死或者抑制生长的光(温)敏雄性不育系或者胞质雄性不育系或者质核互作不育系或者化杀母本。
光(温)敏雄性不育系为8077。
将8077能被除草剂致死或者抑制生长性状转育到其他不育系或者其它水稻品种，用转育成功的不育系或者水稻品种为母本配制杂交种，利用权利要求1所述的方法，即可达到去除母本自交苗的目的。
一种用除草剂除去母本自交苗的应用方法，权利要求1-4所述的方法，在水稻对环境敏感雄性不育系杂交制种保纯或者水稻光温敏雄性不育系杂交制种保纯或者水稻化学杀雄杂交制种保纯或者水稻杂交种子纯度快速鉴定中应用。
本发明的优点和积极效果如下：
1、能够保证两系杂交水稻的田间纯度。研究证明，水稻杂交种子混杂每增加一个百分点，每公倾产量将减产750公斤。而两系法杂交水稻最大的风险就是不能完全排除母本自交混杂的危险性。应用本发明的技术，就能完全可靠的保证两系杂交水稻的生产纯度，避免种子生产和大田生产的损失，从而使两系杂交水稻的推广应用建立在可靠的基础之上。
2、能够拓宽水稻雄性不育的利用范围。由于有了本发明的技术，将可以使得很多过去不能应用的水稻不完全不育材料得到应用。例如起点温度较高的温敏不育系，杀雄不彻底的化学杀雄母本，只要其自交率控制在成本经济的范围内，都可以应用于杂种优势利用。
3、使稻田防除母本自交混杂的农事操作变得非常简便易行。且由于威农、草克星、农得时本身是一种廉价、安全的稻田除草剂，可以结合稻田除草一起进行。
4、能够快速准确的鉴别两系杂交稻种子纯度。过去鉴定种子纯度一般要取样，种植到抽穗以后才能区别母本自交混杂与真正的杂交种，应用本发明的技术，只需取样种植到四叶期前，约需15天即可鉴别，从而节约了大量的人力物力。
本发明的实施例为：
例1：一种在水稻杂交种中用除草剂除去母本自交种苗的方法，选择对草克星或者威农或者农得时具有敏感致死或者抑制生长的隐性性状的母本8077与恢复系配制杂交种，在杂交种F1代的立针至4.0叶龄期，每666M2苗田均匀施用稻田除草剂草克星0.1-50克或者农得时0.1-100克或者威农0.1-50克，除去母本自交苗。
上述的方法，可在水稻对环境敏感雄性不育系杂交制种保纯或者水稻光温敏雄性不育系杂交制种保纯或者水稻化学杀雄杂交制种提纯或者水稻杂交种子纯度快速鉴定中应用。
例2：选用经辐射诱变育成的水稻光(温)敏雄性不育系突变体8077作母本，恢复系测64-7为父本配制杂交F1代种子。F1代种子种植于田间，其秧苗生长立针到四叶期时，每666M2苗田均匀施用稻田除草剂草克星0.1-50克或者农得时0.1-100克或者威农0.1-50克，以后其中混杂的8077自交苗被停止生长矮缩，并且不能恢复，而真正的8077×测164-7→F1代杂交秧苗正常生长无受害症状。从而实现了当8077在制种时遇异常低温发生自交混交后，在所制得的杂交种子播种后使用化学药剂选择杀死自交苗的目的。
例3：选用经辐射诱变育成的水稻光(温)敏雄性不育系突变体8077作母本，恢复系测64-7为父本配制杂交F1代种子。F1代种子种植于田间，其秧苗生长立针到四叶期时，每666M2苗田均匀喷施稻田除草剂草克星0.1-5克或者农得时0.1-10克或者威农0.1-5克，以后其中混杂的8077自交苗被停止生长矮缩，并且不能恢复，而真正的8077×测164-7→F1代杂交秧苗正常生长，无受害症状。从而实现了当8077在制种时遇异常低温发生自交混交后，在所制得的杂交种子播种后使用化学药剂选择杀死自交苗的目的。
例4：选用经辐射诱变育成的水稻光(温)敏雄性不育系突变体8077作母本，恢复系测64-7为父本配制杂交F1代种子。F1代种子种植于田间，其秧苗生长立针到四叶期时，每666M2苗田均匀喷施稻田除草剂草克星40-50克或者农得时80-100克或者威农40-50克，以后其中混杂的8077自交苗被停止生长矮缩，并且不能恢复，而真正的8077×测164-7→F1代杂交秧苗正常生长，无受害症状。从而实现了当8077在制种时遇异常低温发生自交混交后，在所制得的杂交种子播种后使用化学药剂选择杀死自交苗的目的。
例5：选用经辐射诱变育成的水稻光(温)敏雄性不育系突变体8077作母本，恢复系测64-7为父本配制杂交F1代种子。F1代种子种植于田间，其秧苗生长立针到四叶期时，每666M2苗田均匀喷施稻田除草剂草克星5-20克或者农得时10-40克或者威农5-20克，以后其中混杂的8077自交苗被停止生长矮缩，并且不能恢复，而真正的8077×测164-7→F1代杂交秧苗正常生长，无受害症状。从而实现了当8077在制种时遇异常低温发生自交混交后，在所制得的杂交种子播种后使用化学药剂选择杀死自交苗的目的。
例6：选用经辐射诱变育成的水稻光(温)敏雄性不育系突变体8077作母本，恢复系测64-7为父本配制杂交F1代种子。F1代种子种植于田间，其秧苗生长立针到四叶期时，每666M2苗田均匀喷施稻田除草剂草克星20-40克或者农得时40-80克或者威农20-40克，以后其中混杂的8077自交苗被停止生长矮缩，并且不能恢复，而真正的8077×测164-7→F1代杂交秧苗正常生长，无受害症状。从而实现了当8077在制种时遇异常低温发生自交混交后，在所制得的杂交种子播种后使用化学药剂选择杀死自交苗的目的。
例7：选用8077为母本制种，在苗期1叶1心每666M2苗田喷施或者撒施毒土施用草克星10％可湿性粉剂15克，保水3cml-15天，则母本自交苗停止生长，而杂交苗生长正常。20天后杂交苗已有5叶，而母本自交苗仍然只有1叶1心，矮缩发黄，在拔秧移栽时被子自然淘汰，从而达到除杂保纯的目的。
例8：选用8077为母本制种，在苗期1叶1心每666M2苗田喷施或者撒施毒土施用农得时10％可湿性粉剂20克，保水3cml-15天，则母本自交苗停止生长，而杂交苗生长正常。20天后杂交苗已有5叶，而母本自交苗仍然只有1叶1心，矮缩发黄，在拔秧移栽时被子自然淘汰，从而达到除杂保纯的目的。
例9：选用8077为母本制种，在苗期1叶1心每666M2苗田喷施或者撒施毒土施用威农30％可湿性粉剂15克，保水3cml-15天，则母本自交苗停止生长，而杂交苗生长正常。20天后杂交苗已有5叶，而母本自交苗仍然只有1叶1心，矮缩发黄，在拔秧移栽时被子自然淘汰，从而达到除杂保纯的目的。
例10：选用光温敏雄性不育系培矮64S为轮回亲本，和8077多次回交，育成具有除草剂致死或者抑制生长的隐性性状的标记培矮64S，以标记培矮64S为母本，配制杂交种，采用例1的方法可以清除混杂的母本自交苗，达到除杂保纯的目的。
例11：龙特甫A是一个具有优良配合力的质核互作雄性不育系，但是其育性有时受温度等环境条件影响，而发生少量自交结实，造成制种时母本自交结实混杂，采用8077和龙特甫A杂交，以龙特甫A为轮回亲本，每世代选择具有8077的致死或者抑制生长性状的个体并用RAPD、RFLP等DNA分子标记方法，排除连锁累赘，加速回交转育，育成具有除草剂致死或者抑制生长的标记龙特甫A。以标记龙特甫A为母本，配制三系杂交水稻组合，在杂种一代采用例1方法清除混杂的母本自交苗，达到除杂保纯的目的。
例12：亚优Ⅱ号是以3037经化学杀雄为母本，以02428为父本配制的强优势化学杀雄杂交组合。采用8077和3037杂交，以3037为轮回亲本，辅以分子标记辅助选择，每世代选择具有8077的致死或者抑制生长性状的个体并用RAPD、RFLP等DNA分子标记方法，排除连锁累赘，加速回交转育，育成具有除草剂致死或者抑制生长的标记3037。以标记3037为化学杀雄母本，配制杂交水稻组合，当化学杀雄效果未达到100％的效果时，在杂种一代采用例1方法清除混杂标记3037母本自交苗，达到除杂保纯的目的。