《藁本提取物在防治柑桔病虫害上的应用.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《藁本提取物在防治柑桔病虫害上的应用.pdf（7页完整版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 102485001 A (43)申请公布日 2012.06.06 CN 102485001 A *CN102485001A* (21)申请号 201010575403.0 (22)申请日 2010.12.06 A01N 65/10(2009.01) A01P 7/02(2006.01) A01P 3/00(2006.01) A23B 7/154(2006.01) (71)申请人 胡军华 地址 400712 重庆市北碚区歇马镇中国农业 科学院柑桔研究所 申请人 姚廷山 李鸿筠 (72)发明人 胡军华 (54) 发明名称 藁本提取物在防治柑桔病虫害上的应用 (57) 摘要。
2、 本发明涉及了一种藁本提取物及其在防治柑 桔病虫害上的运用。该藁本提取物可由下述方 法制备获得 ： 以藁本属植物根茎为原料， 经过烘 干、 粉碎、 过筛， 加入为原料重量 3 份 30 份的 3095的乙醇， 在3070下超声波提取 三次 ； 合并提取液， 减压回收乙醇液得到湿浸膏， 其回收率 13为左右， 即为所需的藁本提取物。 经室内毒力测定实验表明， 所述的提取物具有防 治柑桔病虫害作用， 药效明显， 针对性强， 预示着 很好的药用前景。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 5 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 5。
3、 页 1/1 页 2 1. 一种藁本提取物， 该藁本提取物可由下述方法制备获得 ： 以藁本属植物根茎为原 料， 经过烘干、 粉碎、 过筛， 加入为原料重量 3 份 30 份的 30 95的乙醇， 在 30 70下超声波提取三次 ； 合并提取液， 减压回收乙醇液得到湿浸膏， 其回收率 15为左右， 即为所需的藁本提取物。 2. 根据权利要求 1 所述的藁本提取物， 其中所述的原料为藁本属植物的根茎， 所述加 入乙醇的重量为所述原料重量的 10 份。 3. 根据权利要求 1 所述的方法， 加入原料加入乙醇后， 在 60下超声波提取三次。 4. 藁本提取物在制备防治柑桔病虫害的药剂中使用。 5. 藁。
4、本提取物在防治桔全爪螨和其它病虫害的药剂中使用。 权 利 要 求 书 CN 102485001 A 2 1/5 页 3 藁本提取物在防治柑桔病虫害上的应用 所属技术领域 0001 本发明涉及一种植物源农药， 更具体地说， 本发明涉及一种藁本提取物， 同时， 本 发明还涉及所述的藁本提取物在柑桔杀虫剂和杀菌剂领域中的用途。 背景技术 0002 柑桔是世界第一大水果和第三大贸易农产品， 是我国南方的第一大水果。 0003 桔全爪螨 (Panonychus citri) 是柑桔生产中重要的有害生物， 可引起落叶、 落花 和落果， 严重影响柑桔树势和产量。目前桔全爪螨已发展成为柑桔最普遍、 最重要而且。
5、最 难防治的害虫。柑桔果实在贮藏期间因烂果造成的损失每年在 20 30， 严重时可达 50以上。引起烂果的病害主要有青霉病、 绿霉病、 黑腐病、 焦腐病、 炭疽病、 褐色蒂腐病、 酸腐病、 褐腐病等， 主要病原菌有意大利青霉 (Penicillium italicum Wehmer)、 指状青霉 (Penicillium digitatum Sacc.)、 柑桔链格孢(Alternaria citri Elliset Pierce)、 胶孢 炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides Penz.)、 白地霉(Geo trichum candidum Link) 等， 其。
6、中由意大利青霉和指状青霉分别引起的柑桔青霉病和绿霉病导致柑桔的腐烂最为严 重， 占烂果的 90以上。 0004 目前对柑桔病虫害的防治基本与化学药剂为主， 但其连续使用造成了抗虫抗病性 不断增强， 还导致了严重的农药残留问题， 造成巨大的环境污染。因此， 从植物中寻找对柑 桔病虫害的活性物质以开发新型的植物源药剂成为目前研究领域的一个热点。而且， 植物 源药剂有着高效低毒， 低残留， 对环境影响小， 不易产生抗性等优点， 不仅可以有效地控制 植物病虫害， 而且能缓解大量化学合成农药带来的环境压力。 0005 现在国内外已有一些有关植物源杀虫剂的专利， 有些已经可以进行商品化的生 产。1985 。
7、年 WR 公司在美国注册登记了第一个商品化的印楝制剂 Margonsan-0 后， 美国、 加拿大、 德国、 澳大利亚、 印度、 泰国、 缅甸及中国已开发成功地商品制剂达 40 余种， 已在 世界许多国家登记。如美国 Thermo Trilogy 公司生产的 Azat in XL Plus 3EC( 含 3 印楝素 )， 1000 3000 倍液可用于防治蔬菜上许多难以防治的重要害虫， 如烟粉虱、 温室 白粉虱、 小菜蛾、 甜菜叶蛾、 蚜虫等。还有 Neemix4.5(Superneem)、 Trilogy， Triac90EC、 AzatinTM、 AlignTM， 德国产的 Neem Az。
8、alTM， 印度产的 Neem Gold、 Neemzal、 Econeem， 澳大利亚 产的GreenGold， 加拿大产的SaferENI等， 主要用于园林、 蔬菜、 果树、 棉花等作物病虫害的 防治。 我国已有0.2、 0.26、 0.3、 0.36苦参碱水剂， 2.5、 7.5的鱼藤酮乳油， 10 烟碱乳油， 0.65茴蒿素水剂， 0.88双素碱水剂， 0.36苦参碱 . 内酯水剂， 1.3鱼藤氰 戊乳油等产品获得农药临时登记。 杀菌剂如印株制剂90Ttifogy Triac乳油可用于防治 果树和作物的斑点落叶病、 炭疽病、 早疫病、 晚疫病、 叶斑病、 霜霉病、 白粉病、 疮痴病、 。
9、锈病、 穿孔病 ； 用印株制剂 Suuneem 作番茄种衣剂可显著减少南方根结线虫的危害 ； 使用 0.5 Neemark 制剂可有效控制蘑菇滑刃线虫。孟召礼从银杏中分离出了抑菌活性物质并进行了 仿生合成， 开发出了农用杀菌剂产品 “绿帝” 和 “银泰” 。植物源药剂之间， 植物源药剂与化 学农药或增效剂之间的二元或三元复配剂大量出现， 其加工剂型以乳油、 水剂为主， 还有可 说 明 书 CN 102485001 A 3 2/5 页 4 溶性粉剂、 悬浮剂、 粉剂。 0006 虽然植物源药剂的研究开发已取得一定的进展， 但是， 总体来看， 还存有一些问 题 ： (1) 对植物资源的调查不够详细。
10、。我国植物资源丰富， 药用植物达 8000 余种而实际应 用的较少。 (2)对植物源药剂的开发还相当的弱。 现今登记的植物源药剂产品很少、 并且品 种和类型单一。对具有活性的植物， 大多是直接利用， 间接利用的少。(3) 植物活性成分对 病虫的作用机理认为清楚， 有待进一步的研究 (4) 植物源农药见效缓慢， 成本较高， 稳定性 低， 对其推广受到一定的限制。 不过， 随着公众对绿色、 天然食品的要求越来越高， 市场对植 物源农药的需求量也逐渐增多， 植物源药剂必将有巨大的开发潜力和发展前景。 0007 藁本 (Ligusticum sinense) 又名西芎， 系伞形科藁本属植物， 其根茎为。
11、常用中药 材。藁本具有很高的药用价值， 主要成分为挥发油类， 其苯酞类成分具有镇静抗惊、 解痉止 痛、 平喘的中枢神经调节作用， 倍半萜没红药醇酮类成分具有免疫、 消炎作用， 多氧取代肉 桂基类成分具有降酶保肝活性、 阿魏酸具有抗血小板聚集、 镇静作用。 万传星等从藁本中分 离到的细辛醚成分对粘虫、 小菜蛾、 家蝇、 棉铃虫和黄粉虫有较好的杀虫活性。华燕青从藁 本根茎氯仿萃取相中分离得到细辛醚、 佛手柑内酯、 阿魏酸和异香草醛 4 个活性化合物， 佛 手柑内酯对菜青虫和粘虫有较高拒食和胃毒毒杀活性。到目前为止， 关于藁本杀螨和杀卵 活性及其杀菌活性的系统研究未见报道， 杀螨活性物质的极性分布也。
12、没有报道。本发明通 过对藁本杀螨活性成分进行初步的分离提取和活性评价， 明确藁本含有杀螨 ( 虫 ) 和杀菌 活性物质， 对桔全爪螨及其卵具有触杀作用， 对柑桔病菌有较好的抑制作用。 发明内容 0008 本发明目的是针对现有的植物源杀虫剂和杀菌剂的不足， 提供一种藁本提取物。 它以天然的中草药植物为原料， 成本低廉， 杀螨(虫)杀卵和抑菌的效果显著， 毒副作用低， 预示着很好的使用前景。 0009 本发明的目的通过以下技术方案予以实现。 0010 除非另有说明， 本发明中所采用的百分数均为重量百分数。 0011 本发明提供一种藁本提取物， 该藁本提取物可由下述方法制备获得 ： 以藁本属植 物根。
13、茎为原料， 经过烘干、 粉碎、 过筛， 加入为原料重量 3 30 份的 30 95的乙醇， 在 30 70下超声波提取三次 ； 合并提取液， 减压回收乙醇液得到湿浸膏， 其回收率 13 为左右， 即为所需的藁本提取物。 0012 本发明藁本提取物的使用方法与一般的水溶性农药的使用方法相同， 只需要加入 一定比例的水搅拌使其充分溶解后， 均匀喷洒在作物叶面或者浸渍果实即可。 0013 有益效果 ： 0014 1. 藁本提取物对柑桔全爪螨雌成螨和卵的触杀作用， 实验的情况详述如下 ： 0015 实验材料 ： 验证药物 ： 本发明的提取物， 供试螨 ： 桔全爪螨采自中国农业科学 院柑桔研究所 ( 重。
14、庆北碚 ) 的柑桔园。 0016 实验方法 1 ： 取直径为 9cm 的培养皿依次铺上 0.7cm 厚的海绵、 滤纸， 直径逐渐减 小， 加水至滤纸， 制成水隔离台。摘取新鲜柑桔叶片， 洗净， 剪成平整片段， 叶面向下置于隔 离台上， 用零号毛笔挑取健康活泼的雌成螨， 每片叶 30 头， 待螨体稳定后， 剔除死亡和受伤 个体， 将带螨叶片在稀释成系列浓度的药液中浸渍 5s 后取出， 吸去多余药液。处理时先用 说 明 书 CN 102485001 A 4 3/5 页 5 清水作对照， 每一浓度重复 3 次， 水隔离台置于温度 (25 1)， RH 85， 光照 LD 16:8 的生化培养箱中， 。
15、24h 后用双目镜检查死亡及存活个体。用毛笔轻触螨体， 以螨足不动者为 死亡。对所得数据利用 Abbott 公式 ： 校正死亡率处理死亡率 - 对照死亡率 /(1- 对照死 亡率 )100 进行校正。用 IRM( 害虫抗药性检测管理 ) 软件计算毒力回归方程、 致死中浓 度 (LC50)、 LC50值的置信限等。 0017 实验方法2 ： 参考IRAC(Insectic ide Resistance Comm ittee2000)方法， 任其产 卵 12h， 移去成螨， 将带卵叶片在稀释成系列浓度的药液中浸渍 5s 后取出， 吸去多余药液。 处理时先用清水作对照， 每一浓度重复3次， 水隔离台。
16、置于温度(251)， RH 85左右的 生化培养箱中， 每 24h 观察卵孵化情况， 观察 7d， 当对照卵全部孵化时， 处理卵仍没有孵化 的作为判断死亡的标准， 计算死亡率， 并用Abbott公式校正， 用IRM(害虫抗药性检测管理) 软件计算毒力回归方程、 致死中浓度 (LC50)、 LC50 值的置信限等。 0018 实验结果 ： 0019 以藁本乙醇提取物对桔全爪螨成螨的触杀活性最强， LC50 0.0001mg mL-1， 对桔 全爪螨成螨产卵抑制作用也最好， 抑制率达到 47.15所需浓度是 0.165mgmL-1； 丙酮提取 物对桔全爪螨卵的触杀活性最强， LC500.204mg。
17、 mL-1。 进一步将藁本乙醇提取物萃取分离 获得组分 G1 和 G2， 并测定它们的杀螨活性， 发现组分 G1、 G2 均具有杀螨杀卵活性， 组分 G2 还具有较好的杀卵活性 (LC50 0.0094mg mL-1) 和产卵抑制作用 (72.13 )。 0020 采用藁本提取物对桔全爪螨雌成螨及其卵进行毒力测定， 结果见表1。 藁本乙醇提 取物对桔全爪螨雌成螨的触杀毒力较高， LC50为 0.0014mgmL-1； 藁本的乙醇提取物对桔全 爪螨卵的触杀毒力也较强， LC50为 0.204mgmL-1。 0021 表 1 藁本提取物对桔全爪螨雌成螨和卵的毒力 0022 0023 2. 藁本提取。
18、物对桔全爪螨雌成螨生殖力测定 0024 实验方法 ： 采用叶片涂布法， 从田间柑桔树上采取未曾施过药的叶片， 洗净晾干。 叶背朝上放置在垫一层湿海绵的培养皿中， 区域两侧用湿棉花覆盖， 使叶片紧贴棉花。 叶片 上涂布药液后接入大小一致的30头雌成螨， 统计24h的产卵量， 计算活螨平均产卵量， 产卵 抑制指数和产卵抑制率。 0025 产卵抑制指数 ( 对照产卵数 - 处理产卵数 )/( 对照产卵数 + 处理产卵数 ) 0026 产卵抑制率 ( ) ( 对照产卵数 - 处理产卵数 )/ 对照产卵数 100。 0027 实验结果 ： 0028 结果如表 2 所示。藁本提取物对对桔全爪螨成螨产卵的抑。
19、制效果也是比较显著 的。 0029 表 2 藁本平行提取物对桔全爪螨产卵的抑制作用 0030 说 明 书 CN 102485001 A 5 4/5 页 6 0031 3. 藁本提取物对柑桔病原菌的抑制作用 0032 实验材料 ： 菌种 ： 柑桔炭疽菌 (Colletotrichum gloeosporioides)、 柑桔绿霉菌 (Penicillium digitatum) 由中国农科院柑桔研究所综合防治课题提供。 0033 实验方法病原菌毒力测定 ( 生长速率法 ) 0034 在9mL PDA培养基中加入1mL 50mg/mL独活提取物， 混匀， 制成质量浓度为5mg/mL 的含药培养基平。
20、板， 将各病原菌菌饼 ( 直径为 6mm) 分别接于平板中央， 每皿接 1 个菌饼， 每 处理3次重复， 同时设清水对照。 28培养72h， 采用十字交叉法测定菌落直径， 按照下列公 式计算抑制效率。 0035 菌落直径 (mm) 平均菌丝直径 (mm)-0.6(mm) 0036 0037 IC 是空白对照上的菌落直径 (mm)， I1 是处理中的菌落直径 (mm)。 0038 实验结果 ： 试验结果表明， 藁本乙醇提取物对柑桔炭疽、 绿霉病病原菌都具有不同 程度的抑制活性， 其中当其浓度在 3.5mg/mL 时， 对绿霉病原菌抑制率达到 93.8 (3d) 和 85.4 (5d)， 对炭疽病。
21、原菌抑制率达到 98.2 (3d) 和 91.71 (5d)。 0039 表 3 藁本乙醇提取物对病原菌的毒力 0040 0041 0042 上述结果表明， 本发明的提取物对桔全爪螨及其卵有较明显的触杀作用， 具有抗 病原真菌的功能， 药理作用强， 预示着很好的药用前景。原料来源丰富、 价廉、 制备工艺简 单， 为中国植物资源开拓了新的应用领域。 具体实施方式 说 明 书 CN 102485001 A 6 5/5 页 7 0043 通过下面给出的具体的实例， 可以进一步清楚地了解本发明， 但它不是对本发明 的限定。 0044 实施例 1 0045 将藁本根茎烘干， 粉碎， 过筛， 称取 1000g， 加入 10 升 70乙醇， 60超声提取 40min， 减压抽滤， 重复 3 次。合并三次滤液， 高压真空过滤后， 60旋转蒸发缩成膏。其回 收率至少 11， 即为所需的提取物。 0046 实施例 2 0047 将藁本根茎烘干， 粉碎， 过筛， 称取 1000g， 加入 10 升 95乙醇， 70超声提取 40min， 减压抽滤， 重复 3 次。合并三次滤液， 高压真空过滤后， 60旋转蒸发缩成膏。其回 收率至少 13， 即为所需的提取物。 说 明 书 CN 102485001 A 7 。