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1、(10)申请公布号 CN 102816818 A (43)申请公布日 2012.12.12 CN 102816818 A *CN102816818A* (21)申请号 201210286920.5 (22)申请日 2012.08.14 C12P 21/06(2006.01) C07K 1/113(2006.01) (71)申请人 吉林大学 地址 130012 吉林省长春市前进大街 2699 号 (72)发明人 刘静波 赵颂宁 孙研博 (54) 发明名称 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌 合锌的工艺方法 (57) 摘要 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌 合锌的工艺方法， 取长白山林蛙。
2、， 活剥皮后 -80 冷冻备用。取出冷冻蛙皮进行低温高压冷冻干 燥温度为 -40至 -50， 干燥时间为 20-24h， 进 行称量后将干燥蛙皮浸入 0.15mol/L NaOH(1 H2O2) 脱 色 24h-28h， 将 清 洗 蛙 皮 浸 入 30 丙 酮中脱脂， 将清洗干净的蛙皮浸入 0.05mol/ L-0.1mol/L 的 HCl 在 4条件下浸提脱钙 6-10h。 用胃蛋白酶， pH值1.5-2.5， 酶浓度5-7， 酶解 时间 3-4h， 料水比 1 130-1 150， 灭酶后在此 条件下胶原蛋白得率可以达到 20 -35。将提 取的胶原肽与硫酸锌进行鳌合反应， 测得鳌合率 。
3、达到 88 -95。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 1 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 1 页 1/1 页 2 1. 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法是经过单因素结合三 元二次回归正交多项式结合的方法优化出高效制备林蛙皮胶原肽的工艺路线， 将胶原肽液 与锌盐鳌合， 测定提取的胶原液中胶原蛋白得率可以达到 20 -35， 胶原肽鳌合锌的鳌 合率可以达到 88 -95。 2. 根据权利要求 1 所述的胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法 中的林蛙皮胶原蛋白提取方法的具体参数如下 ： 采。
4、用胃蛋白酶， 酶活为 3000U/g， pH 值 1.5-2.5， 酶浓度 5 -7， 酶解时间 3-4h， 料水比 1 130-1 150， 灭酶， 在此条件下胶原 蛋白得率可以达到 20 -35。 3. 根据权利要求 1 所述的胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法中 的蛙皮， 其特征在于 ： 长白山林蛙， 活剥皮后 -80冷冻备用。取出冷冻蛙皮进行低温高压 冷冻干燥温度为-40至-50， 干燥时间为20-24h， 进行称量后将干燥蛙皮浸入0.15mol/ LNaOH(1 H2O2) 脱色 24-28h， 蒸馏水清洗 3 遍直至没有颜色在清洗液中， 将清洗蛙皮浸 入 30丙酮中脱。
5、脂， 蒸馏水清洗 3 遍直至没有油脂在清洗液中， 将清洗干净的蛙皮浸入 0.05mol/L-0.1mol/L 的 HCl 在 4条件下浸提脱钙 6-10h， 用蒸馏水清洗 3 遍蛙皮。 权 利 要 求 书 CN 102816818 A 2 1/1 页 3 一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方 法 技术领域 ： 0001 本发明涉及一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法。 背景技术 ： 0002 当今市场， 林蛙油的开发提取已经成熟， 因而林蛙的其他副产物的研究已经成为 新的热点， 而从林蛙皮中提取胶原蛋白的研究较少， 林蛙皮胶原蛋白是一种优质蛋白， 酶解 法对蛋白质。
6、的伤害性相对于酸法、 碱法、 热水法提取来讲比较安全绿色。 发明内容 ： 0003 本发明旨在公开一种胃蛋白酶酶解提取制备林蛙皮胶原肽鳌合锌的工艺方法。 此 下艺参数是经过单因素结合三元二次回归正交多项式结合的方法优化而来。取长白山林 蛙， 活剥皮后-80冷冻备用。 取出冷冻蛙皮进行低温高压冷冻干燥温度为-40至-50， 干燥时间为 20-24h， 将称量后蛙皮浸入 0.15mol/L NaOH(1 H2O2) 脱色 24-28h， 蒸馏水清 洗3遍直至没有颜色在清洗液中， 将清洗蛙皮浸入30丙酮中脱脂， 蒸馏水清洗3遍直至没 有油脂在清洗液中， 将清洗干净的蛙皮浸入 0.05mol/L-0.。
7、1mol/L 的 HCl 在 4条件下浸提 脱钙 6-10h， 用蒸馏水清洗 3 遍蛙皮。采用胃蛋白酶， pH 值 1.5-2.5， 酶浓度 5 -7， 酶解 时间 3-4h， 料水比 1 130-1 150， 灭酶， 在此条件下胶原蛋白得率可以达到 20 -35。 将提取的胶原肽与硫酸锌进行鳌合反应， 测得鳌合率达到 88 -95。 0004 具体实施 0005 将林蛙活剥皮后 -80冷冻备用。取出冷冻蛙皮进行低温高压冷冻干燥温度 为 -40至 -50， 将干燥蛙皮浸入 0.15mol/L NaOH(1 H2O2) 脱色 24-28h， 蒸馏水清洗 3 遍直至没有颜色在清洗液中， 将清洗蛙皮。
8、浸入 30丙酮中脱脂， 蒸馏水清洗 3 遍直至 没有油脂在清洗液中， 将清洗干净的蛙皮浸入 0.05mol/L-0.1mol/L 的 HCl 在 4条件下 浸提脱钙 6-10h。用胃蛋白酶， pH 值 1.5-2.5， 酶浓度 5 -7， 酶解时间 3h-4h， 料水比 1 130-1 150， 灭酶， 在此条件下 胶原蛋白得率可以达到 20 -35。 0006 采 用 胃 蛋 白 酶， pH 值 1.5-2.5， 酶 浓 度 5 -7 ， 酶 解 时 间 3-4h， 料 水 比 1 130-1 150， 其中酶浓度为酶的质量与蛙皮质量之比， 灭酶， 在此条件下胶原蛋白 得率可以达到 20 -35。将提取的胶原肽与硫酸锌进行鳌合反应， 测得鳌合率达到 88 -95。 说 明 书 CN 102816818 A 3 。