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1、(10)申请公布号 CN 102747116 A (43)申请公布日 2012.10.24 CN 102747116 A *CN102747116A* (21)申请号 201210190930.9 (22)申请日 2012.06.12 C12P 17/06(2006.01) (71)申请人 山东东兴生物科技股份有限公司 地址 250100 山东省济南市高新区舜凤路 322 号 (72)发明人 崔泰兴 李世武 唐东起 吴琦 王向东 (54) 发明名称 酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺 (57) 摘要 本发明提供一种酶解法提取大豆异黄酮苷元 的生产工艺, 属于大豆类加工提取技术领域, 其工 艺步。
2、骤是 : 脱脂豆粕浸泡, 料水比 5 10 1, 在 浸泡液中加入乙醇至乙醇占总浸泡液质量浓度的 10, 浸泡液加超高温 - 葡萄糖苷酶水解, 水解 温度为 90 120, 边水解边缓慢搅拌, 水解 时间 1 2h 后, 固液分离, 固形沉淀物加 60 80乙醇抽提, 抽提液经膜过滤, 得透过液, 透过 液经脱蛋白、 减压浓缩、 干燥后得异黄酮苷元。该 工艺利用超高温 - 葡萄糖苷酶的耐高温、 热稳 定性等酶学特征, 将其应用于大豆异黄酮苷元的 提取、 制备工艺, 不仅提高生产效率, 降低生产成 本, 而且所得产品是吸收率高、 生物活性强的无糖 型异黄酮。 (51)Int.Cl. 权利要求书 。
3、1 页 说明书 2 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 2 页 附图 2 页 1/1 页 2 1. 酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其特征在于工艺步骤是 : 脱脂豆粕浸泡, 料水比 5 10 1, 在浸泡液中加入乙醇至乙醇占总浸泡液质量浓度的 10, 浸泡液加超 高温 - 葡萄糖苷酶水解, 水解温度为 90 120, 边水解边缓慢搅拌, 水解时间 1 2h 后, 固液分离, 固形沉淀物加 60 80乙醇抽提, 抽提液经膜过滤, 得透过液, 透过液经 脱蛋白、 减压浓缩、 干燥后得异黄酮苷元。 2. 根据权利要求 1 所。
4、述的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其特征在于所述的 膜过滤采用无机陶瓷膜过滤。 3. 根据权利要求 1 所述的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其特征在于浸泡液 水解 PH 范围在 4.5 8.0。 4. 根据权利要求 1 所述的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其特征在于所述的 超高温 - 葡萄糖苷酶添加量为 0.5U/mL 浸泡液。 5. 根据权利要求 1 所述的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其特征在于所述的 超高温 - 葡萄糖苷酶采用酵母菌 - 葡萄糖苷酶。 权 利 要 求 书 CN 102747116 A 2 1/2 页 3 酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺 。
5、技术领域 0001 本发明涉及大豆类加工提取技术领域, 技术领域, 具体地说是一种酶解法提取大 豆异黄酮苷元的生产工艺。 背景技术 0002 一般的, 大豆异黄酮苷元多采用如下方法制得, 但是都存在一定的缺陷和不足 : 碱 水解 : 苷元结构不稳定, 易水解 ; 酸水解 : 水解效率高 ; 但强酸条件下不利于工业生产, 易腐 蚀设备, 造成环境污染, 且苷元稳定性值得怀疑 ; 酶水解 : 反应速度快, 条件温和, 且苷元稳 定性高 ; 但苷元在水中溶解度低, 普遍酶水解不高。 0003 目前发现的大豆异黄酮共有 12 种, 但大多数不稳定。现阶段, 对大豆异黄酮的应 用、 生物功能研究主要集中。
6、于大豆苷和染料木苷上。天然大豆籽粒中, 97-98的大豆异黄 酮是以 -D- 结合型的糖苷形式存在。人体对结合型的糖苷吸收能力低, 无糖异黄酮苷吸 收能力强, 所有, 异黄酮糖苷的水解至关重要。酶水解 : 反应速度快, 条件温和, 且苷元稳定 性高 ; 但苷元在水中溶解度低, 普遍酶水解不高。 发明内容 0004 本发明的技术任务是解决现有技术的不足, 提供一种酶解法提取大豆异黄酮苷元 的生产工艺。 0005 本发明的技术方案是按以下方式实现的, 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工 艺, 其工艺步骤是 : 脱脂豆粕浸泡, 料水比 5 10 1, 在浸泡液中加入乙醇至乙醇占总浸 泡液质量浓度的 。
7、10, 浸泡液加超高温 - 葡萄糖苷酶水解, 水解温度为 90 120, 边 水解边缓慢搅拌, 水解时间 1 2h 后, 固液分离, 固形沉淀物加 60 80乙醇抽提, 抽提 液经膜过滤, 得透过液, 透过液经脱蛋白、 减压浓缩、 干燥后得异黄酮苷元。 0006 所述的膜过滤采用无机陶瓷膜过滤。 0007 浸泡液水解 PH 范围在 4.5 8.0。 0008 所述的超高温 - 葡萄糖苷酶添加量为 0.5U/mL 浸泡液。 0009 所述的超高温 - 葡萄糖苷酶采用酵母菌 - 葡萄糖苷酶。 0010 脱脂豆粕来自油厂的下脚料大豆豆粕。 0011 膜过滤采用的无机陶瓷膜, 截留大分子醇溶蛋白。 0。
8、012 本发明与现有技术相比所产生的有益效果是 : 0013 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺利用超高温 - 葡萄糖苷酶的耐高温、 热稳定性等酶学特征, 将其应用于大豆异黄酮苷元的提取、 制备工艺, 不仅提高生产效率, 降低生产成本, 而且所得产品是吸收率高、 生物活性强的无糖型异黄酮。 无糖异黄酮苷生物 功能 : 抗氧化, 清除自由基, 预防心血管疾病 ; 激素活性, 对乳腺癌, 前列腺癌, 更年期综合 症有预防作用 ; 阻止血管增生, 抑制多种癌细胞生长。 0014 超高温 - 葡萄糖苷酶 : pyrococcus furiosus CelB 基因表达的耐高温 - 葡萄 说 明 书 C。
9、N 102747116 A 3 2/2 页 4 糖苷酶, 可以工作在 65-120下, 而且酶活性稳定, 此时苷元水溶解度大, 可增加无糖异黄 酮苷的产量, 缩短生产周期。且在 10乙醇环境下, 该酶活性略有提高。 0015 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺所用酶为超高温 - 葡萄糖苷酶, 在 120时, 仍具有较高的酶活 ; 而传统技术上所用酶的最高反应温度为 90, 温度越高, 从 大豆豆粕中溶出的水溶性大豆异黄酮越多, 越有利于转化产出大豆异黄酮苷元。 0016 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺所用酶为食品添加剂用酶, 是酵母的代 谢产物, 具有安全性, 分解产生的大豆异黄酮苷元。
10、可以用于食品、 药品和保健品等 ; 而传统 技术上所用酶来源于细菌, 不能保证用于食品添加剂, 可能含有一定的毒性, 限制了大豆异 黄酮苷元的应用。 0017 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺所用酶反应液为水溶液, 不需要添加任 何成分或缓冲液等其他添加物。 0018 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺酶反应时间少, 酶反应时间仅为 1 2 小时 ; 而传统技术上酶反应时间为35小时, 因此该工艺节省时间, 有利扩大规模生产, 带 来良好的经济效益。 0019 该酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺在提取大豆异黄酮苷元的效率上, 要高 于传统技术。 附图说明 0020 附图 1 是本发明的。
11、检测结果的大豆苷元的水解量结构示意图 ; 0021 附图 2 是本发明的检测结果的染料木素的水解量结构示意图。 具体实施方式 0022 下面对本发明的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺作以下详细说明。 0023 本发明的酶解法提取大豆异黄酮苷元的生产工艺, 其工艺步骤是 : 脱脂豆粕来自 油厂的下脚料大豆豆粕, 脱脂豆粕浸泡, 料水比 5 10 1, 在浸泡液中加入乙醇至乙醇占 总浸泡液质量浓度的10, 浸泡液加超高温-葡萄糖苷酶水解, 超高温-葡萄糖苷酶采 用酵母菌 - 葡萄糖苷酶。超高温 - 葡萄糖苷酶添加量为 0.5U/mL 浸泡液, 水解温度为 90 120, 浸泡液水解 PH 范围在 4.5 8.0, 边水解边缓慢搅拌, 水解时间 1 2h 后, 固液分离, 固形沉淀物加 60 80乙醇抽提, 抽提液经无机陶瓷膜过滤, 截留大分子醇 溶蛋白, 得透过液, 透过液经脱蛋白、 减压浓缩、 干燥后得异黄酮苷元。 说 明 书 CN 102747116 A 4 1/2 页 5 图 1 说 明 书 附 图 CN 102747116 A 5 2/2 页 6 图 2 说 明 书 附 图 CN 102747116 A 6 。