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1、(10)申请公布号 CN 102160572 A (43)申请公布日 2011.08.24 CN 102160572 A *CN102160572A* (21)申请号 201110112540.5 (22)申请日 2011.05.03 A23B 7/155(2006.01) A23B 7/154(2006.01) (71)申请人 浙江大学 地址 310027 浙江省杭州市西湖区浙大路 38 号 (72)发明人 余挺 郑晓冬 朱瑞瑜 努尔哈音 蓝天演 钱成济 (74)专利代理机构 杭州中成专利事务所有限公 司 33212 代理人 金祺 (54) 发明名称 基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生 。
2、物保鲜剂 (57) 摘要 本发明公开了一种基于红冬孢酵母和果实激 发子活性的柑橘生物保鲜剂， 该保鲜剂由红冬孢 酵母悬浮液、 赤霉素 / 激动素、 水杨酸、 生长素和 水组成， 每 1L 保鲜剂中含有 1101011012个红 冬孢酵母细胞、 50150mg 的赤霉素或者 50150mg 的激动素、 8100mg的水杨酸和10500mg生长素， 其余为水 ； 红冬孢酵母是保藏号为 IMI394084 的 海洋酵母RhodosporidiumpaludigenumFell&Tal lman。 本发明的生物保鲜剂， 能在不使用化学杀菌 剂的前提下有效控制柑橘果实的采后病害。 (51)Int.Cl.。
3、 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 8 页 CN 102160573 A1/1 页 2 1. 基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂， 其特征是 ： 所述保鲜剂由红 冬孢酵母悬浮液、 赤霉素/激动素、 水杨酸、 生长素和水组成， 每1L保鲜剂中含有11010 11012个红冬孢酵母细胞、 50 150mg 的赤霉素或者 50 150mg 的激动素、 8 100mg 的 水杨酸和 10 500mg 生长素， 其余为水 ； 所述红冬孢酵母是保藏号为 IMI 394084 的海洋酵母 Rhodosporidium paludigenum 。
4、Fell& Tallman。 2. 根据权利要求 1 所述的基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂， 其特 征是 ： 所述每1L保鲜剂中含有11010个红冬孢酵母细胞、 100mg的水杨酸、 100mg生长素和 赤霉素 100mg， 其余为水。 3. 根据权利要求 1 所述的基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂， 其特 征是 ： 所述每 1L 保鲜剂中含有 11010个红冬孢酵母细胞、 100mg 的水杨酸、 10mg 生长素和 激动素 100mg， 其余为水。 权 利 要 求 书 CN 102160572 A CN 102160573 A1/8 页 3 基于红冬孢酵母和果实。
5、激发子活性的柑橘生物保鲜剂 技术领域 0001 本发明涉及果实采后病害防治技术领域， 更具体的是涉及一种用于防治柑橘果实 病害的生物防腐保鲜技术。 背景技术 0002 柑橘栽培历史悠久， 是重要的水果之一。 但柑橘产区一般均地处亚热带地区， 温湿 度均较适合果实病原菌的生长， 每年由于病理性腐烂导致的采后损失巨大。 目前， 化学杀菌 剂是控制果实采后腐烂的主要和最有效方法。 但是， 随着国家经济发展和消费水平的提高， 人们对食品安全和环境保护意识的增强， 化学类杀菌剂的使用范围越来越受限制。此外由 于长期使用杀菌剂， 病原菌能进化产生了大量抗药性菌种。 因此从可持续发展的角度出发， 开发新型、。
6、 高效且安全的有机、 绿色的保鲜剂具有重大的社会意义和广阔的应用前景。 0003 近年来利用安全且有拮抗病原菌活性的酵母防治果实病害的研究受到了国内外 广泛的重视， 被认为是最有希望的替代化学杀菌剂的方法之一。但现有生防酵母对病害的 控制效力与化学杀菌剂相比仍有较大差距， 例如即使是已经商业化生产的产品 (Aspire， 基 于酵母 Candida oleophila， 美国 ) 也只有在与低剂量杀菌剂 (thiabendazole， TBZ) 联合 使用时才能达到对柑橘或葡萄等果实病害的完全控制。 0004 酵母菌株 Rhodosporidium p aludigenum Fell & Ta。
7、llman 是一株从我国近东 海海水中分离得到的新型果实病害生防酵母。该酵母对柑橘酸腐、 樱桃番茄和冬枣等果 实采后病害的控制已有报道 ( 王一非等， 2008， 2009， 2010abc， 2011 ； 刘霞等， 2010)。中国 发明授权专利 一株水果蔬菜的生物保鲜剂及其制备方法 ， 专利号 200610155209.0， 公开 了一种基于红冬孢酵母和尼泊金乙酯钠或尼泊金丁酯钠制备水果蔬菜的生物杀菌剂的方 法。中国发明授权专利 用于果蔬采后病害生物防治的海洋酵母及其制备方法和用途 ， 专利号 ZL200610155062.5， 公开了一种用海洋酵母菌株 Rhodosporidium p 。
8、aludigenum Fell & Tallman 抑制链格孢、 灰葡萄孢、 扩展青霉、 指状青霉、 多毛孢等多种果蔬采后主 要真菌病害的生物防治方法。中国发明授权专利 一种海洋酵母的用途和相应微生物燃 料电池及制备方法 。授权公告号 CN101552340B， 公开了一种利用红冬孢酵母制备微生 物燃料电池的方法。中国发明申请专利 一种防治果蔬病害的生物保鲜剂及其制备方 法 ， 申请号 200910095643.8， 公开了一种基于红冬孢酵母和羧甲基纤维素钠等物质防治 果蔬病害的生物保鲜方法。中国发明申请专利 海洋酵母 Rhodosporidum paludigenum Fell & Tall。
9、man 的专用甘蔗糖蜜培养基 ， 申请号 2010101485270， 公开了一种海洋酵 母 Rhodosporidumpaludigenum Fell & Tallman 液体培养的方法。中国发明申请专利 海洋酵母 Rhodosporidumpaludigenum Fell & Tallman 的真空冷冻干燥制 ， 申请号 2010101400817， 公开了一种红冬孢酵母活性干粉制备的方法。中国发明申请专利 一种诱 导提高海洋红冬孢酵母对果实病害防治效力的方法 ， 申请号 201010551754.8， 公开了一种 利用几丁质物质诱导提高红冬孢酵母生防效力的方法。 0005 诱导抗性是当前。
10、国内外关注的新型采后病害控制方法之一。研究表明， 植物包括 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A2/8 页 4 采后果蔬， 经过预先接种或采用一些物理的、 化学的因子处理后， 可诱导产生抗病性， 从而 减少病害发生。能引起植物产生抗病性的因素根据其来源分为生物型和非生物型激发子。 其中水杨酸是研究最为广泛的激发子之一， 而细胞分裂素、 生长素、 赤霉素等植物激素对果 实抗性影响的研究尚少。 0006 参考文献 ： 0007 1、 Wang Yifei， Bao Yihong， Shen Danhong， Feng Wu， Yu Ting， Zhang Jia 。
11、and Zheng XiaoDong.2008.Biocontrol of Alternaria alternata on cherry tomato fruit by use of marine yeastRhodosporidium paludigenum Fell & Tallman.International Journal of Food Microbiology123 ： 234-239.( 王 一 非 等， 2008， 海 洋 Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman 对樱桃番茄链格孢生物防治的研究， 国际食品微生物， 123 ： 234。
12、-239)。 0008 2、 Wang Yifei， Yu Ting， Li Y.， Cai D.， Liu X.， Lu H.and Zheng X.D2009. Postharvestbiocontrol of Alternaria alternata in Chinese winter jujube by Rhodosporidium paludigenum.Journal of Applied Microbiology 107 ： 1492-1498.( 王 一非等， 2009， 海洋 Rhodosporidiumpaludigenum Fell & Tallman 对冬枣链格孢生物防。
13、治 的研究， 应用微生物杂志， 107 ： 1492-1498.)。 0009 3、Liu Xia.，Fang Weiwen.，Liu L，Yu Ting.，Lou Bingan.and Zheng Xiaodong2010.Biological control of postharvest sour rot of citrus by two antagonistic yeasts.Letters in AppliedMicrobiology 51 ： 30-35.( 刘霞等， 2010， 2 种 拮抗菌对柑橘酸腐病的生物控制， 应用微生物学报， 51 ： 30 35.)。 0010 4、Wa。
14、ng Yifei，Yu Ting，Xia Jindan，Yu Dasheng，Wang Jun，Zheng Xiaodong.2010a.Biocontrol of Postharvest Gray Mold of Cherry Tomatoes with the Marine YeastRhodosporidium paludigenum， Biological Control 53 ： 178 182.( 王一 非等， 2010a， 海洋 Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman 对樱桃番茄采后灰霉病 的生物防治， 生物控制， 53 178 182。
15、.)。 0011 5、 Wang Yifei， Wang Peng， Xia Jindan， Yu Ting， Lou Binggan， Wang Jun， Zheng XiaoDong.2010b.Effect of water activity on stress tolerance and biocontrol activity in antagonisticyeast Rhodosporidium paludigenum.International Journal ofFood Microbiology 143 ： 103-108.( 王一非等， 2010b， 水分活度对海洋 Rhod。
16、osporidium paludigenum Fell & Tallman 逆境和生防效力的影响， 国际食品微生物， 143 ： 103-108.)。 0012 6、 Wang Yifei Fei， Ren X.， Song X， Yu Ting.， Lu Huangpin.， Wang Peng.， Wang J.andZheng Xiao.Dong2010c.Control of postharvest decay on cherry tomatoes by marine yeastRhodosporidium paludigenum and calcium chloride.Journa。
17、l of Applied Microbiology 109 ： 651-656.(王一非等， 2010c.， 海洋Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman和氯化钙对樱桃番茄采后病害的防治研究， 应用微生物杂志， 107 ： 1492-1498.)。 0013 7、 Wang， Yifei Fei Tang， Jindan Xia， Ting Yu， Jun Wang， Remila Azhati， Xiao DongZheng.2011A combination of marine yeast and food additive enhances pr。
18、eventive effects onpostharvest decay of jujubes(Zizyphus jujuba).Food Chemistry， 125 ： 835-840.( 王一非等， 2011.， 海洋 Rhodosporidium paludigenum Fell & 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A3/8 页 5 Tallman 和食品添加剂对冬枣采后病害的防治研究， 食品化学， 107 ： 1492-1498.)。 发明内容 0014 本发明要解决的技术问题是提供一种在不使用化学杀菌剂前提下能有效控制柑 橘果实采后病害的生物保鲜。
19、剂。 0015 为了解决上述技术问题， 本发明提供一种基于红冬孢酵母和果实激发子活性的 柑橘生物保鲜剂， 该保鲜剂由红冬孢酵母悬浮液、 赤霉素 (GA4+7)/ 激动素 (6-BA)、 水杨酸 (SA)、 生长素 (IBA) 和水组成， 每 1L 保鲜剂中含有 11010 11012个红冬孢酵母细胞、 50 150mg 的赤霉素或者 50 150mg 的激动素、 8 100mg 的水杨酸和 10 500mg 生长 素， 其余为水 ； 0016 红冬孢酵母是保藏号为 IMI 394084 的海洋酵母 Rhodosporidium paludigenum Fell &Tallman。 0017 作。
20、为本发明的基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂的改进 ： 每 1L 保鲜剂中含有 11010个红冬孢酵母细胞、 100mg 的水杨酸、 100mg 生长素和赤霉素 (GA4+7)100mg， 其余为水。 0018 作为本发明的基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂的另一种改 进 ： 每 1L 保鲜剂中含有 11010个红冬孢酵母细胞、 100mg 的水杨酸、 10mg 生长素和激动素 (6-BA)100mg， 其余为水。 0019 本发明所选用的海洋酵母 (Rhodosporidium paludigenum Fell & Tallman) 被保藏于英国国际真菌研究所国际农业。
21、与生物中心基因资源保藏中心 (International Mycological Institute， CABI Genetic Resource Collection)， 保藏地址 ： 英国 TW209TY 萨里郡艾格镇贝克汉姆路国际农业与生物中心英国中心， 保藏日期 ： 2006.4.19， 保藏编号 ： IMI 394084。该菌株已经在申请号为 200610155209.0 的专利中被公开。 0020 在本发明中， 水杨酸为邻羟基苯甲酸， 生长素为吲哚丁酸， 激动素为 6- 苄氨基嘌 呤。 0021 本发明的生物保鲜剂， 是将果实用红冬孢酵母 (Rhodosporidium palud。
22、igenum Fell &Tallman， 英国国际真菌研究所国际农业与生物中心基因资源保藏中心保藏编号 IMI394084 悬浮液和果实抗性激发子复合进行处理而得 ； 其可以进行常温或低温贮藏。 0022 本发明的生物保鲜剂只有在确保酵母活性的基础上才能发挥最佳的防腐效应， 因 此所用的红冬孢酵母悬浮液是指经过菌种活化、 并配制成的具有抑菌效果且浓度适宜的酵 母菌悬液， 其有效浓度为 1107细胞 / 毫升 1109细胞 / 毫升。 0023 红冬孢酵母和果实抗性激发子的复合处理是指将果实抗性激发子成分直接添加 到酵母菌菌悬液中而制成的生物保鲜剂。 0024 本发明所设定的果实抗性激发子的有。
23、效浓度是指其使用量确保不抑制拮抗酵母 的生长和繁殖， 并能发挥果实抗性激发子特定生理功能的浓度。 0025 本发明的生物保鲜剂有效整合了生防酵母、 果实抗性激发子的活性， 从而能显著 抑制柑橘果实病害的发生和发展 ； 由于能根据具体情况大幅度降低拮抗酵母的使用量， 从 而显著降低成本。 0026 本发明的生物保鲜剂具有安全高效、 环境友好、 病害防治效果突出等优点。 使用本 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A4/8 页 6 发明的生物保鲜剂， 能转变长期以来依赖化学杀菌剂为主的果实真菌病害控制方法， 对确 保食品安全、 环境保护和农业增效、 农民增收和经济社。
24、会可持续的发展等具有重要意义。 0027 实际使用时， 可任选以下任意一种处理方式对果实进行处理 ： 0028 处理方式一 ： 选择无机械损伤、 未感染、 大小和成熟度等外观品质基本一致的果 实， 用自来水冲洗、 并在室温 (25左右 ) 下放干。将果实在本发明的生物保鲜剂中浸泡 3 分钟后， 取出放干， 然后放入保鲜薄膜袋中在室温(25左右)下保持2024小时， 接着将 果实从薄膜袋中取出， 装箱贮藏。 0029 处理方式二 ： 采前采用喷壶喷洒的处理方法， 将本发明的生物保鲜剂溶液喷在果 实表面 ( 湿润即可 )， 待干后取下果实放入保鲜薄膜袋中在室温 (25左右 ) 下保持 20 24 。
25、小时， 再将果实从薄膜袋中取出， 装箱贮藏。 具体实施方式 0030 以下实验中的果实为正常商业成熟度的柑橘 (Citrus unshiu Marc.) 果实， 试验 品种为早桔。选择无机械损伤、 未感染、 大小和成熟度等外观品质基本一致的果实， 用质量 浓度 0.1的次氯酸钠溶液浸泡消毒 1-2 分钟后， 用自来水冲洗， 在室温下 (20-25 ) 放 干后备用。拮抗酵母为红冬孢酵母 ( 保藏号为 IMI 394084 的海洋酵母 Rhodosporidium paludigenum Fell& Tallman) ； 病原菌为指状青霉 (Penecillium digitatum)。水杨酸 。
26、(SA)， 分析纯 AR， 上海化学试剂采购供应五联化工厂 ； 激动素 (6-BA)， 生化试剂 BR， 国药 集团化学试剂有限公司 ； 生长素 (IBA)， 化学纯 CP， 国药集团化学试剂有限公司 ； 赤霉素 (GA4+7)， 生化试剂 BR， 中国医药 ( 集团 ) 上海化学试剂公司。 0031 红冬孢酵母悬浮液的制备方法如下 ： 0032 以下所用的 NYDA 培养基为 ： 牛肉浸膏 8g， 酵母粉 5g， 葡萄糖 10g， 琼脂 20 克， 水定 容至 1000ml， 高压 (1kg/cm2)121灭菌 30 分钟。所用的 NYDB 种子培养基为 ： 牛肉浸膏 8g、 酵母粉 5g、。
27、 葡萄糖 10g， 水定容至 1000ml， 高压 (1kg/cm2)121灭菌 30 分钟。 0033 红冬孢酵母 IMI 394084 在低温 (4 ) 下保存在 NYDA 培养基中。培养程序依次 为 ： 0034 、 活化 ： 红冬孢酵母 IMI 394084 先在 NYDA 培养基中 28培养 48 小时， 然后重 复传代培养 2 次 ( 每次均为在 NYDA 培养基中 28培养 48 小时 ) ； 0035 将上述重复传代培养2次所得的活化好的酵母用接种环接到NYDB种子培养基中， 28下培养 24 小时 ； 然后在相同条件下重复培养 1 次 ( 即将 NYDB 种子培养基中培养而得。
28、 的酵母再次用接种环接到 NYDB 种子培养基中， 28下培养 24 小时 ) ； 0036 、 液体培养 ： 用步骤活化所得的酵母按照5(重量比)的接种量接到NYDB种 子培养基中， 在 200rpm、 28条件下培养 24 小时 ； 0037 、 离心分离 ： 将步骤液体培养后的所得物在 3000rpm 条件下， 离心 10 分钟， 并 用灭菌蒸馏水洗 2 次， 以去除培养介质 ； 0038 、 悬浮和确定浓度 ： 用无菌蒸馏水重新悬浮酵母细胞， 用血球记数板的方法确定 酵母的浓度， 并用无菌蒸馏水调整到试验所需要的浓度。 0039 实施例 1、 一种基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生。
29、物保鲜剂 0040 在 2 升的红冬孢酵母 IMI 394084 悬浮液 ( 有效浓度为 5107细胞 / 毫升 ) 中缓 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A5/8 页 7 慢加入浓度为 1000mg/L 的 SA 溶液 1000 毫升、 浓度为 1000mg/L 的 IBA 溶液 1000 毫升和浓 度为1000mg/L的赤霉素溶液1000毫升， 搅拌混匀5分钟， 加水稀释到10升备用。 该最终所 得的每L生物保鲜剂中含有11010个红冬孢酵母IMI 394084细胞、 SA100mg/L、 IBA100mg/ L 和赤霉素 100mg/L， 其余为水。 。
30、0041 实施例 2、 一种基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂 0042 在 2 升的红冬孢酵母 IMI 394084 悬浮液 ( 有效浓度为 5107细胞 / 毫升 ) 中缓 慢加入浓度为 1000mg/L 的 SA 溶液 1000 毫升、 浓度为 1000mg/L 的 IBA 溶液 100 毫升和浓 度为1000mg/L的激动素溶液1000毫升， 搅拌混匀5分钟， 加水稀释到10升备用。 该最终所 得的每 L 生物保鲜剂中含有 11010个红冬孢酵母 IMI 394084 细胞、 SA100mg/L、 IBA10mg/ L 和激动素 100mg/L， 其余为水。 0043 为了。
31、证明本发明的基于红冬孢酵母和果实激发子活性的柑橘生物保鲜剂的实际 使用效果， 发明人进行了如下的实验 ： 0044 柑橘果实生物保鲜剂的效果实验 ： 0045 用消过毒的打孔器在每个果实表面形成统一大小和的深度的伤口。 将红冬孢酵母 IMI394084 细胞悬浮在含有各种不同成分及含量的病害控制物中， 从而获得不同的组合试 剂 ； 各取 50l 不同的组合试剂分别添加到不同的果实伤口处。病原菌接种在以上处理 2 小时后在每个伤口加入等量 (30l) 的病原菌孢子悬浮液 (Penecillium digitatum 浓度 为 104spores/ml)。处理完毕后在常温 (20 25 ) 下贮藏。
32、， 并用 PE 塑料膜密封作保湿处 理。每个处理每重复 12 个果实， 每处理重复 3 次。 0046 具体处理安排如下 ： 0047 处理 1 ： 处理液所含成分浓度为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 1107cells/ml ； 0048 处理 2 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 水杨酸 (SA)10mg/L、 生长素 (IBA)10mg/L、 赤霉素 (GA4+7)10mg/L。 0049 处理 3( 即实施例 1) ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬 浮液浓度为。
33、107cells/ml， 水杨酸(SA)100mg/L、 生长素(IBA)100mg/L、 赤霉素(GA4+7)100mg/ L。 0050 处理 4 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 水杨酸 (SA)100mg/L、 激动素 (6-BA)10mg/L、 赤霉素 (GA4+7)10mg/L。 0051 处理 5 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 激动素 (6-BA)10mg/L、 生长素 (IBA)10mg/L、 赤霉素 (GA4+7)100mg/L。。
34、 0052 处理 6 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 激动素 (6-BA)10mg/L、 生长素 (IBA)100mg/L、 水杨酸 (SA)10mg/L。 0053 处理 7 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 激动素 (6-BA)100mg/L、 赤霉素 (GA4+7)100mg/L、 水杨酸 (SA)10mg/L。 0054 处理 8( 即实施例 2) ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬 浮液浓度为 107cel。
35、ls/ml， 激动素 (6-BA)100mg/L、 生长素 (IBA)10mg/L、 水杨酸 (SA)100mg/ L。 0055 处理 9 ： 处理液所含成分浓度分别为红冬孢酵母 IMI 394084 细胞悬浮液浓度为 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A6/8 页 8 107cells/ml， 激动素 (6-BA)100mg/L、 生长素 (IBA)100mg/L、 赤霉素 (GA4+7)10mg/L。 0056 处理 10 ： 对照， 处理液所含成分浓度为 108ells/ml 红冬孢酵母单独使用对照。 0057 处理 11 ： 对照， 处理液所含成分浓。
36、度为 109ells/ml 红冬孢酵母单独使用对照。 0058 处理 12 ： 对照， 处理为水， 即空白对照。 0059 处理 13 ： 处理液所含成分浓度为水杨酸 (SA)100mg/L 单独使用。 0060 处理 14 ： 处理液所含成分浓度为激动素 (6-BA)100mg/L 单独使用。 0061 处理 15 ： 处理液所含成分浓度为生长素 (IBA)100mg/L 单独使用。 0062 处理 16 ： 处理液所含成分浓度为赤霉素 (GA4+7)100mg/L 单独使用。 0063 处理 17 ： 处理液所含成分浓度分别为水杨酸 (SA)100mg/L、 (6-BA)100mg/L、 。
37、生长 素 (IBA)100mg/L、 赤霉素 (GA4+7)100mg/L 混合使用。 0064 实验结果如表 1 所示 ： 0065 表 1. 实验结果 0066 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A7/8 页 9 0067 0068 从表 1 可以看出， 不同的激发子处理组合能不同程度的增强红冬孢酵母对柑橘果 实病害的发病率和病害严重程度的防治效力 ； 而对于不使用酵母， 仅依靠单一激发子或激 发子组合对果实病害的发生和发展均没有任何抑制作用。其中处理 3( 红冬孢酵母细胞悬 浮液浓度为 107cells/ml， SA100mg/L、 IBA100mg/L。
38、、 GA4+7100mg/L) 和处理 8( 红冬孢酵母细 胞悬浮液浓度为 107cells/ml， 6-BA100mg/L、 IBA10mg/L、 SA100mg/L) 的效果最好 ： 在接种 病原菌后第 4 天时， 与空白对照相比， 以上 2 种处理能分别降低病害发病率 46.9 和 48.6 个百分点， 且发病率指标均控制在 5以内， 平均病斑直径指标与空白对照相比则分别降低 说 明 书 CN 102160572 A CN 102160573 A8/8 页 10 95.0和 97.0； 在接种病原菌后第 5 天时， 与空白对照相比， 以上 2 种处理能分别降低病 害发病率67.5个百分点。
39、， 发病率均为7.5， 而空白对照此时的发病率指标已达到75.0， 而平均病斑直径指标与空白对照相比则分别降低 88.4和 91.6 ； 特别是这两个处理对 病害的控制效果均大幅度超过了红冬孢酵母IMI 394084细胞悬浮液单独使用时108cells/ ml， 甚至109cells/ml的控制效力 ： 处理3和处理8在第4天的发病率仅分别为108cells/ml 红冬孢酵母处理的 20.2和 12.0， 为 109cells/ml 红冬孢酵母处理的 50.6和 30.1； 即使到第 5 天， 处理 3 和处理 8 发病率也仅分别为 108cells/ml 红冬孢酵母处理的 18.0， 为 109cells/ml 红冬孢酵母处理的 21.2。因此本实验中的处理 3 和处理 8 是较佳的处理 组合。 0069 最后， 还需要注意的是， 以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然， 本发 明不限于以上实施例， 还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容 直接导出或联想到的所有变形， 均应认为是本发明的保护范围。 说 明 书 CN 102160572 A 。