用作HCV抑制剂的吡啶并2,3D嘧啶类及其制备方法.pdf

本发明涉及使用吡啶并[2，3-d]嘧啶类作为10HCV复制作用的抑制剂类的用途以及其用在针对治疗或对抗HCV感染的药物组合物的用途。此外，本发明也涉及吡啶并[2，3-d]嘧啶类化合物本身及其作为医药品的用途。本发明也涉及制备这类化合物、包含其的药物组合物、以及所述化合物15与其它的抗-HCV剂的联用药物的步骤。

权利要求书
1.  一种使用式(I)的化合物用于制造抑制感染了HCV的哺乳动物中的HCV复制的医药品的用途，所述化合物具下的化学式：

以及其N-氧化物、盐、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯或其代谢产物，其中
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可以选自：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、芳基C1-6烷基，其中的芳基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
L是-NR8、-NR8-C1-6亚烷基-、-NR8-CO-C1-6亚烷基-、-NR8-SO2-C1-6亚烷基-、-O-、-O-C1-6亚烷基-、-O-CO-、-O-CO-C1-6亚烷基-、-S-、-S-C1-6亚烷基-、或者

其中，虚线环与N和Z一起形成Het1环，所述Het1环为5-8员环并包括环原子N和Z，和其中所述L环是通过N原子与吡啶并[2，3-d]嘧啶环相连；
Z代表N或CH；
R2代表氢、羟基C1-6烷基、C3-7环烷基、芳基、Het1、或Het2，其中，所述C3-7环烷基、芳基、Het1和Het2是各自任选地被一个或多个选自下列的取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、和氨基苯基羰基，其中所述的C1-4烷基可以进一步被-COOR7取代；
R3代表C1-6烷基、C3-7环烷基、芳基、芳基C1-6烷基、Het1、Het2或Het2-C1-6烷基，各自任选地被选自下述一个或多个取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCOOR7、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、和-SO2NR4aR4b；
每个R4a与R4b独立地为氢、或C1-4烷基、羟基C1-4烷基、Het1-C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、氰基或硝基；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；和
每个R8独立地为氢、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷基羰基、氨基C1-10烷基、芳基、芳基羰基、芳基C1-10烷基、Het1、Het1-C1-6烷基、或氮保护基团，其中的芳基任选地被1至3个取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷基羰基、苯基、C1-4烷基苯基、苯基羰基、氨基苯基、氨基C1-4烷基苯基、氨基苯基羰基、卤素、-OR6、-NR4aR4b、-SR5、-SOR5、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SO2R5、-OCOR6、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aCOOR6、-OCONR4aR4b、-COOR6、-SO3R6、-CONR4aR4b、-SO2NR4aR4b、  氰基、多卤代C1-4烷基和硝基；
Het1作为取代基或取代基的一部分被定义成饱和或者部分不饱和的单环、双环、或三环杂环，所述杂环优选具有3-12员、更优选5-10员、更优选5-8员，其含有一个或多个杂环原子，选自N原子、氧原子或硫原子，且其任选地在一个或多个碳原子上被选自下述取代基取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、氧、任选地单或者双取代的氨基、硝基、氰基、多卤代C1-4烷基、羰基、C1-6烷氧基羰基、C3-7环烷基、任选地单或双取代的氨基羰基、甲基硫基、甲基砜基、芳基、和饱和或部分不饱和的单环、双环或三环杂环，该杂环为3-12员的含一个或多个选自氮、氧或硫的杂原子的环、且此处在任何一个氨基官能团上的任选的取代基是氢或C1-4烷基；
Het2作为取代基或取代基的一部分被定义成芳香的单环、双环、或三环杂环，所述杂环具有3-14员环，优选具有5-10员环，更优选具有5-6员环，所述杂环含有一个或多个独立选自氮原子、氧原子或硫原子的杂环原子环，所述杂环任选地在一个或多个碳原子上被取代，取代基选自：C1-6烷基、任选地单或双取代的氨基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、任选地单或者双取代的氨基、硝基、氰基、多卤代C1-4烷基、羰基、C1-6烷氧基羰基、C3-7环烷基、任选地单或双取代的氨基羰基、甲基硫基、甲基砜基、芳基，Het1和3-12员的芳香单环、双环或三环杂环；且此处在任何一个氨基官能团上的任选的取代基是氢或C1-4烷基；和
芳基作为取代基或取代基的一部分是苯基。

2.  如权利要求1中所述的用途，其中化合物具有式(II)结构：

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中，
R1、R3、R8如权利要求1中所定义，
R9代表C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、或氨基苯基羰基，其中C1-4烷基可进一步被-COOR7取代，和
n是0、1、2、3或4。

3.  如权利要求1中所述的用途，其中化合物具有式(III)结构：

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中，
R1、L、和R2如权利要求1中所定义，
R10代表C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCOOR7、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b和
m是0、1、2、3或4。

4.  如权利要求1-3中任一项所述的用途，其中化合物具有式(IV)结构；

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中，
R1、R8如权利要求1中所定义；
R9和n如权利要求2中所定义；和
R10和m如权利要求3中所定义。

5.  如权利要求1中所述的用途，其中化合物具有式(V)结构；

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中，
R1和R8如权利要求1中所定义；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、  -NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、或氨基苯基羰基，其中C1-4烷基可进一步被-COOR7取代；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

6.  如权利要求5中所述的用途，其中：
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中的苯基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a与R4b独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、-NR4aSO2R5、-SR5、-SO2R5、或-SO2NR4aR4b；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

7.  如权利要求5中所述的用途，其中：
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

8.  如权利要求5中所述的用途，其中：
R1为氢、氨基、单取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中的苯基可进一步被C1-4烷氧基取代；
每个R5为C1-4烷基；
每个R7为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COOR7、-OR7、-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

9.  如权利要求5中所述的用途，其中：
R1为氢、氨基、单取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-4烷氧基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中的苯基可进一步被C1-4烷氧基取代；
每个R5为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、卤素、-OR7、或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

10.  如权利要求1中所述的用途，其中：
R1为氢、或氨基；
每个R5为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、-OR7、或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

11.  如权利要求1-10中任一项所述的用途，其中所述的氮保护基是C1-6烷氧基羰基、芳基甲氧基羰基、三氟乙酰基、或芳基甲基。

12.  如权利要求11中所述的用途，其中所述的氮保护基是叔丁氧羰基、苄氧羰基、苄基、或三氟甲基。

13.  一种抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的、如权利要求1-12中任一项所定义的式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物。

14.  一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的、如权利要求1-12中任一项所定义的式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物。

15.  一种治疗哺乳动物中的HCV感染相关的临床病况的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的、如权利要求1-12中任一项所定义的式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物。

16.  如权利要求15中所述的方法，其中所述的临床病况不是肝纤维化。

17.  一种式(V)结构的化合物

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中，
R1为氨基、单-或二取代的氨基、其中的氨基的取代基可以选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可再进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a与R4b独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基团；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、-NR4aSO2R5、-SR5、-SO2R5、或-SO2NR4aR4b；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

18.  如权利要求15中所述的化合物，其中，
R1为氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可以选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可再进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a、R4b、R5、R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基团；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、卤素、-OR7或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

19.  如权利要求15中所述的化合物，其中：
R1为氨基；
每个R4a、R4b、R5、R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8是氢、氮保护基团；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、卤素、-OR7或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。

20.  如权利要求17-19中任一项所述的化合物，其中：
R11是氢；和
R12是C1-4烷基、卤素、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、或三氟甲基。

21.  如权利要求17-20中任一项所述的化合物，其中：
R13和R14代表卤素。

22.  如权利要求17-21中任一项所述的化合物，其中：氮保护基团是C1-6烷氧基羰基、芳基甲氧基羰基、三氟乙酰基、或芳基甲基。

23.  如权利要求17-21中任一项所述的化合物，其中：氮保护基团是叔丁氧羰基、苄氧羰基、苄基、或三氟甲基。

24.  用作医药品的权利要求17-23中任一项所述的化合物。

25.  一种药物组合物，含有一种或多种如权利要求17-23中任一项所述的化合物和至少一种药学上可接受的赋性剂。

26.  一种由如权利要求17-23中任一项所述的化合物和一种或多种其他的抗HCV剂联合的药物。

说明书用作HCV抑制剂的吡啶并[2，3-d]嘧啶类及其制备方法
技术领域
本发明涉及使用吡啶并[2，3-d]嘧啶类作为HCV复制作用的抑制剂类的用途以及其用在针对治疗或对抗HCV感染的药物组合物的用途，此外，本发明也涉及化合物本身及其作为医药品的用途，本发明也涉及制备这类化合物、包含其的药物组合物、以及所述化合物与其它的抗-HCV剂的联用药物的步骤。
背景技术
随着在1989年被发现其为涉及大部分非-A、非-B型肝炎病毒的主因后(Choo et al.，Science 244，359-362，1989)，丙肝病毒(HCV)已变成重要的医学研究焦点(Lauer，G.M与Walker，B.D.，New Eng.J Med.345，41-52，2001)，HCV属于黄病毒科(Flaviviridae)、丙型肝炎病毒(hepacivirus)属的一种病毒，HCV与黄热病毒属(flavivirus)密切相关，所述黄热病毒属包括许多涉及人类疾病的病毒，例如登革热病毒与黄热病毒，HCV还与瘟病毒属病毒密切相关，所述瘟病毒属病毒包括牛腹泻病毒(BVDV)。HCV是一种正-义的(positive-sense)、单链的RNA病毒，基因组大小为约9,600个碱基。该基因组同时包括采取RNA二级结构的5′与3′未转录的区域，以及用于编码含约3,010-3,030个氨基酸的单个聚蛋白质的中央开放读取架构。此聚蛋白质编码十个基因产物，所述基因产物由前体聚蛋白质通过一系列精密安排的、由宿主与病毒的蛋白酶调节的同时(co-)与事后(post-)转译的内蛋白质解离而衍生得到。此病毒结构蛋白包括内核壳包核酸(core nucleocapsid)蛋白，以及两个包被(envelope)糖蛋白E1与E2。非结构的(NS)蛋白质编码一些必需的病毒的酶功能(解螺旋酶，聚合酶，蛋白酶)，以及未知功能的蛋白质。病毒基因组的复制经由RNA-附属的RNA聚合酶所调节，所述RNA聚合酶由非-结构的蛋白质5b(NS5B)编码。除了聚合酶，病毒的解螺旋酶与蛋白酶功能——此二者均被编码于双官能的NS3蛋白质——已经在黑猩猩的感染模型中被证明对HCV RNA的复制而言是必需的(Kolykhalov，A.A.，Mihalik，K.，Feinstone，S.M.，and Rice，C.M.J Virol.74，2046-2051，2000)。除了NS3丝氨酸蛋白酶，HCV也编码NS2区域的金属蛋白酶。
HCV优先在肝细胞上复制，但不直接造成细胞病变，只是顽固地导致感染。特别是，缺乏旺盛的T-淋巴细胞反应与病毒的高度突变倾向似乎只是促进高速率的慢性感染。有6种主要的HCV基因型与超过50种的亚型，被不同地分布在各地理区。在美国及欧洲，1型HCV为占绝大多数的基因型。例如在美国，1型HCV占了全部HCV感染的70％至75％。HCV的广泛的基因异种性具有重要的诊断与临床的含义，或许说明了疫苗发展的困难与对疗法的缺乏反应。  经估计，全世界约有1.7亿人口感染了丙型肝炎病毒(HCV)。初期的急性感染之后，绝大多数被感染的个体发展成慢性肝炎，其可发展成能导致肝硬化、末期肝病，与HCC(肝细胞癌)的肝纤维化(National Institutes of Health ConsensusDevelopment Conference Statement：Management of Hepatitis C.Hepatology，36，5 Suppl.S3-S20，2002)，因HCV感染导致的肝硬化，单单在美国就造成每年有约10,000的死亡案例，并也是肝脏移植的原因。HCV的传染可经由接触被污染的血液或血液产物而发生，例如在输血后或静脉内注射药物后。诊断测试被引用于血液筛选后，已使输血后HCV发生率有向下减少的趋势。然而，考虑到其缓慢进展为末期肝病，己存在的感染仍将持续呈现严重的医学与经济的负担达数十年(Kim，W.R.Hepatology，36，5 Suppl.S30-S34，2002)。
此种慢性疾病的治疗是无法达到临床需求的，因为目前的疗法仅部分有效且受限于不想要的副作用。
目前的HCV疗法是基于使用(聚乙二醇化)干扰素-alpha(IFN-α)和利巴韦林(ribavirin)联用的抗病毒药物。此种组合疗法对于感染了基因型1的患者，产生持续的病毒学的反应超过40％，对于感染了基因型2和3的患者，产生持续的病毒学的反应约为80％，除了对1型HCV的有限效果外，组合疗法具有明显的副作用且在许多病患的耐受性不佳。例如就聚乙二醇化的干扰素与利巴韦林(ribavirin)联用疗法的记录中的试验而言，因明显的副作用而中断治疗者约占病患的10至14％。组合疗法中的主要的副作用包括流感状的症状、血液学的不正常、以及神经精神病的症状。发展更有效、更方便及更被耐受的治疗方法是重要的公共健康目标。
于是，对于能导致抑制HCV复制作用的低分子量化合物，在医界仍有高度的需求。
令人惊讶地发现，吡啶并[2，3-d]嘧啶类的衍生物类在感染了HCV的哺乳类中呈现抗病毒的活性，特别是这些衍生物类抑制HCV的复制作用。这些化合物因此在哺乳动物中用于治疗或对抗HCV感染。
US20040038856描述了可作为TGFβ-R1受体激酶与TGF-β媒介讯号的抑制剂类的喹唑啉衍生物类。WO00/12497也描述了可作为TGF-β和/或p38-α激酶的抑制剂类的喹唑啉衍生物类。
此外，WO04/020584描述了能作为趋化因子(chemokine)受体活性拮抗剂的化合物类，以及制备这类化合物的方法。此专利公开物也包含了含有那些化合物的药物组合物。此专利还进一步提供方法供治疗CCR4趋化因子受体相关的疾病以及治疗或预防哮喘、风湿性关节炎、牛皮癣、实体器官移植排斥或慢性阻塞性肺疾。
WO2003059913公开roh-激酶抑制剂、其衍生物、以及其合成方法。所述的化合物为可用于抑制肿瘤生长，治疗勃起障碍，以及治疗其它的受Rho-激酶调节的病兆，例如冠心病。
JP2003321472公开可用于预防及治疗心衰竭的GRK抑制剂类。
此外，WO95/19774公开双环杂芳族化合物，所述双环杂芳族化合物能抑制表皮生长因子受体及相关受体以及，特别的，是他们的的酪氨酸激酶酶活性。所述的化合物可用于抑制肿瘤，尤其是乳腺癌，在乳腺癌中有丝分裂被EGFR家族成员强力地驱动着。此外，所述的化合物具有作为治疗剂对抗过度生长的增殖性疾病的用途，所述过度生长的增殖性疾病包括，但不限于，关节炎的滑膜翳入侵，血管再狭窄，牛皮癣与血管形成。其中公开的化合物也可用于治疗胰脏炎与肾脏疾病以及作为一种避孕剂。
US3873545公开了取代的吡啶并[2，3-d]嘧啶的衍生物类，其特别有用于作为安定药与镇静剂。
Osselaere et al.(1973，1974)公开吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物类，特别是具有抗炎性与抗痉挛性的4-氨基-2-芳基吡啶并[2，3-d]嘧啶衍生物类。
在开始曝露至丙肝病毒后，HCV RNA可在1-3星期内在血液中被侦测到。经平均50天，几乎所有的患者发展成肝细胞损伤。大部分的患者为无症状且未出现黄疸者。仅有25-35％发展成不舒服、虚弱、或厌食，且一些出现黄疸。生病期间几乎总是可侦测到HCV的抗体(抗-HCV)。50-70％的患者在症状开始出现后，可检测到抗-HCV，约有90％的患者在被感染3个月后，可检测到抗-HCV。HCV感染仅有15％的案例自限的。痊愈的特征是血液中的HCV RNA的消失且肝酶回复正常值。
约有85％受HCV-感染的个体无法在6个月内廓清病毒并发展成慢性肝炎，所述慢性肝炎——有时候为时断时续的——表现出顽固的病毒血症。  产生慢性肝炎的能力是HCV感染的最明显特征；慢性丙型肝炎是一种典型的潜伏过程，在感染后的前廿年，大多数的患者均呈现无症状或无生理征兆的慢速进展着。在大多数患者中，直到慢性丙肝发展成末期肝病时才开始出现症状。
在慢性肝炎时，发炎的细胞渗入肝门的各管道且也可能在薄壁组织中集结成小簇。后者的情况常伴随病灶肝细胞坏死。薄壁组织与肝门管道的边缘可能会发炎，肝细胞在此位置坏死(界面性肝炎)。当疾病进展时，发炎及肝细胞死亡可导致纤维化。中等的纤维化局限于肝门导管及直接相临的薄壁组织。更严重的纤维化会导致肝门导管间和肝门导管及肝静脉间的桥连，这样的纤维化可进展成肝硬化，所述肝硬化被定义为一种扩散的纤维化的状态，其中纤维间隔将肝细胞簇分隔成小根瘤。纤维化的程度决定疾病的阶段且能被可靠的评估。严重的纤维化与坏死炎性的变化预示着进展成肝硬化。一旦肝硬化形成，接着而来的并发症有继发的肝衰竭和/或肝门的高血压，例如黄疸、腹水、脉管出血(varicealhemorrhage)、与脑病变(encephalopathy)。任何这类并发症的发展，表明了由可补偿的肝硬化转变成不可补偿的肝硬化。
在至少20％的患者在受感染20年内，慢性丙型肝炎感染导致肝硬化发生。肝硬化与末期肝病可能偶尔地迅速地发展，尤其是对于伴有酗酒习惯的患者。受HCV的慢性感染，相随的是有增加的肝癌发生的风险。主流的观念认为，肝细胞癌(HCC)出现于对抗炎性的背景和对抗与慢性肝炎相联系的再生的背景中，历经约30年或更多年。HCV-相关的HCC的大部分案例出现在存在肝硬化的情形中。
肝纤维化症是一种当肝脏受到伤害时出现的过程。这类伤害可能是下述原因造成的结果：病毒活性(例如慢性乙型或丙型肝炎)或其它肝脏感染(例如寄生虫，细菌)；化学品(例如医药品，游戏性毒品，过度喝酒，曝露于污染物下)；免疫过程(例如自体免疫肝炎)；代谢性疾病类(例如脂质、肝糖、或金属蓄积疾病类)；或癌症生长(原发性或继发性肝癌)，纤维化同时是肝受到伤害的标志与经由进展性肝硬化造成肝衰竭的潜在贡献者的标志。
已发现，抑制TGFβ族的激酶类可用于治疗纤维增生性疾病，包括肝纤维化症。然而，如上面提及的，肝纤维化症可能由不同的病因(ethiological)所导致，包括丙型肝炎病毒。最重要的，肝纤维化症是在被HCV感染的患者的疾病进展中的一种特别的状况。
令人惊喜地发现，本发明的化合物能抑制HCV复制。HCV复制是指繁殖或复制HCV RNA的过程。在本发明里，HCV复制同时既指HCV病毒作为整体的复制又指HCV RNA基因组的复制。
重要的是，要在早期去治疗受HCV感染的患者以避免疾病的进展，进而避免患者发展成慢性肝炎、肝纤维化、肝硬化、肝细胞癌(HCC)，或死亡。
本发明的化合物的价值在于，其可降低病人体内的HCV病毒量(viral load)至无法检出的水平。
发明内容
本发明因此涉及将式(I)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。所述的化合物为式(I)的吡啶并[2，3-d]嘧啶类：

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯或其代谢产物，其中
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可以选自：C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-4烷氧基C1-4烷基，二C1-4烷基氨基-C1-4烷基，哌啶-1-基-C1-4烷基、芳基C1-6烷基，其中的芳基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
L是-NR8、-NR8-C1-6亚烷基-、-NR8-CO-C1-6亚烷基-、-NR8-SO2-C1-6亚烷基-、-O-、-O-C1-6亚烷基-、-O-CO-、-O-CO-C1-6亚烷基-、-S-、-S-C1-6亚烷基-、或者

其中，虚线环与N和Z一起形成Het1环，所述Het1环为5-8员并包括环原子N和Z，和其中所述L环是通过N原子与吡啶并[2，3-d]嘧啶环相连；
Z代表N或CH；
R2代表氢、羟基C1-6烷基、C3-7环烷基、芳基、Het1、或Het2，其中，所述C3-7环烷基，芳基，Het1和Het2是独立的任选地被一个或多个选自下列的取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、和氨基苯基羰基，其中所述的C1-4烷基可以进一步被-COOR7取代；
R3代表C1-6烷基、C3-7环烷基、芳基、芳基C1-6烷基、Het1、Het2或Het2-C1-6烷基，各自任选地被选自下述一个或多个取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCOOR7、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、和-SO2NR4aR4b；
每个R4a与R4b独立地为氢、或C1-4烷基、羟基C1-4烷基、Het1-C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、氰基或硝基；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；和
每个R8独立地为氢、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷基羰基、氨基C1-10烷基、芳基、芳基羰基、芳基C1-10烷基、Het1、Het1-C1-6烷基、或氮保护基团，其中的芳基任选地被1至3个取代基取代，所述取代基选自：C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、C1-4烷基羰基、苯基、C1-4烷基苯基、苯基羰基、氨基苯基、氨基C1-4烷基苯基、氨基苯基羰基、卤素、-OR6、-NR4aR4b、-SR5、-SOR5、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SO2R5、-OCOR6、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aCOOR6、-OCONR4aR4b、-COOR6、-SO3R6、-CONR4aR4b、-SO2NR4aR4b、氰基、多卤代C1-4烷基和硝基；
Het1作为取代基或取代基的一部分被定义成饱和或者部分饱和的单环，双环，或三环杂环，所述杂环优选具有3-12员，更优选5-10员，更优选5-8员，其含有一个或多个杂环原子，选自N原子，氧原子或硫原子，且其任选地在一个或多个碳原子上被下列基团取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、氧、任选地单或者双取代的氨基、硝基、氰基、多卤代C1-4烷基、羰基、C1-6烷氧基羰基、C3-7环烷基、任选地单或双取代的氨基羰基、甲基硫基、甲基砜基、芳基、和饱和或部分不饱和的单环、双环或三环杂环，该杂环为3-12员的含一个或多个选自氮、氧或硫的杂原子的环，且此处在任何一个氨基官能团上的任选的取代基是氢或C1-4烷基；
Het2作为取代基或取代基的一部分被定义成芳香的单环、双环、或三环杂环，所述杂环具有3-14员环，优选具有5-10员环，更优选具有5-6员环，所述杂环含有一个或多个独立选自氮原子、氧原子或硫原子的杂环原子环，所述杂环任选地在一个或多个碳原子上被取代，取代基选自：C1-6烷基、任选地单或双取代的氨基C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、任选地单或者双取代的氨基、硝基、氰基、多卤代C1-4烷基、羰基、C1-6烷氧基羰基、C3-7环烷基、任选地单或双取代的氨基羰基、甲基硫基、甲基砜基、芳基、Het1和3-12员的芳香单环、双环或三环杂环；且此处在任何一个氨基官能团上的任选的取代基是氢或C1-4烷基；和
芳基作为取代基或取代基的一部分是苯基。
在一个实施例中，本发明涉及将式(II)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯或其代谢产物，其中
R1、R3、R8如上所定义，
R9代表C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、或氨基苯基羰基，其中C1-4烷基可进一步被-COOR7取代，
n是0，1，2，3或4。
在一个实施例中，本发明涉及将式(III)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯或其代谢产物，其中
R1、L、和R2如上所定义，
R10代表C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCOOR7、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b和
m是0，1，2，3或4。
在一个实施例中，本发明涉及将式(IV)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中
R1、R8、R9、R10、m和n如上所定义，
在一个实施例中，本发明涉及将式(V)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。

以及其N-氧化物、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯及其代谢产物，其中
R1、和R8如上所定义；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、C2-4烯基、C2-4炔基、多卤代C1-4烷基、卤素、氰基、硝基、-COR6、-COOR7、-CONR4aR4b、-OR7、-OCOR6、-OCONR4aR4b、-NR4aR4b、-NR4aCOR6、-NR4aCONR4aR4b、-NR4aSOR5、-NR4aSO2R5、-SR5、-SOR7、-SO2R5、-SO3R7、-SO2NR4aR4b、吗啉-4-基、苯基、氨基苯基、或氨基苯基羰基，其中C1-4烷基可进一步被-COOR7取代；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
在一个实施例中，本发明涉及将式(V)的化合物用于制备能在感染了HCV的哺乳动物中抑制HCV活性的医药品的用途。所述的化合物为式(V)的吡啶并[2，3-d]嘧啶类：

以及其盐类、立体异构体、外消旋混合物，其中
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可以选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中的苯基可再进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a与R4b独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基团；每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、-NR4aSO2R5、-SR5、-SO2R5、或-SO2NR4aR4b；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
本发明的另一方面涉及一种在感染了HCV的哺乳动物体内抑制HCV复制的方法，所述方法包括施用抑制HCV有效量的由上述的或进一步如后所述的式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)化合物。本发明的另一方面涉及一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包括施用上述的或将更明确说明如后的具抑制HCV效果量的式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物。
本发明的另一具体实施例涉及使用式(V)的化合物用于制备抑制感染了HCV的哺乳动物体内的HCV复制的药物的用途。所述的化合物为具式(V)的蝶啶类以及其盐类、立体异构体、与外消旋混合物，其中
R1为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R5独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R6独立地为氢、或C1-4烷基；
每个R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
各个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
于是，本发明的另一具体实施例涉及一种抑制感染了HCV的哺乳动物中的HCV复制的方法，以及一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的式(V)的化合物，其中R1、R8、R11、R12、R13、R14等的定义如前一段说明中的定义。
本发明的另一具体实施例涉及使用式(V)的化合物用于制造一种可抑制感染了HCV的哺乳动物中的HCV复制的药物的用途。所述化合物是式(V)结构的蝶啶化合物以及其盐类、立体异构体、与外消旋混合物，其中
R1为氢、氨基、单取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中苯基可进一步被C1-4烷氧基取代；
每个R5为C1-4烷基；
每个R7为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COOR7、-OR7、-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
于是，本发明的另一具体实施例涉及一种抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的方法，以及一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的式(V)的化合物，其中R1、R8、R11、R12、R13、R14等的定义如前一段说明中的定义。
本发明的另一具体实施例涉及使用式(V)的化合物用于制造一种可抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的药物的用途。所述化合物是式(V)结构的蝶啶化合物以及其盐类、立体异构体、与外消旋混合物，其中
R1为氢、氨基、单取代的氨基，其中氨基的取代基可选自：C1-4烷氧基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中苯基可进一步被C1-4烷氧基取代；
每个R5为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、可进一步被-COOR7取代的C1-4烷基、卤素、-OR7、或-SR5；
R12代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
于是，本发明的另一具体实施例涉及一种抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的方法，以及一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的式(V)的化合物，其中R1、R8、R11、R12、R13、R14等的定义如前一段说明中的定义。
本发明的另一具体实施例涉及使用式(V)的化合物用于制造一种可抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的药物的用途。所述化合物是式(V)结构的蝶啶化合物其盐类、立体异构物、与外消旋混合物，其中
R1为氢、或氨基；
每个R5为C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
各个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、-OR7、或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
于是，本发明的另一具体实施例涉及一种抑制感染了HCV的哺乳动物的HCV复制的方法，以及一种治疗感染了HCV的哺乳动物的方法，所述方法包含施用抑制HCV有效量的式(V)的化合物，其中R1、R8、R11、R12、R13、R14等的定义如前一段说明中的定义。
一种用于治疗涉及哺乳动物感染HCV的临床病况的方法，所述的方法包含施用抑制HCV有效量的式(V)的化合物，其中R1、R8、R11、R12、R13、R14等的定义如后。
如前段所述的方法，其中的临床的病况不是肝纤维化。
式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物显现对抗HCV病毒的活性，并因此可用作一种药物，以及用于制造一种供预防、治疗或对抗HCV感染相关的感染或疾病的医药品的用途。
式(I)、(II)、(III)、(IV)或(V)的化合物显现对抗HCV病毒的活性，并因此可用作一种药物，以及用于制造一种供预防、治疗或对抗HCV感染而不是肝纤维化相关的临床病况的医药品的用途。
″C1-2烷基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有1至2个碳原子的直链的或支链的饱和烃基，例如甲基、乙基等等。
″C1-4烷基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有1至4个碳原子的直链的或支链的饱和烃基，例如被定义为C1-2烷基的基团与丙基、丁基、2-甲基-丙基等等。
″C1-6烷基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有1至6个碳原子的直链的或支链的饱和烃基，例如被定义为C1-4烷基的基团与戊基、己基、2-甲基丁基、3-甲基戊基等等。
″C1-10烷基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有1至10个碳原子的直链的或支链的饱和烃基，例如被定义为C1-6烷基的基团与庚基、辛基、壬基、癸基等等。
″C2-4烯基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个双键，且具有2至4个碳原子的直链或支链烃基，例如乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基等等。优选为具有一个双键的C2-4烯基。
″C2-6烯基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个双键、且具有2至6个碳原子的直链或支链烃基，例如被定义于C2-4烯基的基团与戊-1-烯基、戊-2-烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、1-甲基-戊-2-烯基等等。优选为具有一个双键的C2-6烯基。
″C2-10烯基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个双键，且具有2至10个碳原子的直链或支链烃基，例如被定义于C2-6烯基的基与庚-1-烯基、庚-2-烯基、2-甲基-庚-1-烯基、辛-3-烯基、壬-4-烯基、1-甲基-壬-2-烯基等等。优选为具有一个双键的C2-10烯基。
″C2-4炔基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个三键，且具有2至4个碳原子的直链或支链烃基，例如乙炔基、丙-1-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基等等。优选为具有一个三键的C2-4炔基。
″C2-6炔基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个三键，且具有2至6个碳原子的直链或支链烃基，例如被定义于C2-4炔基的基与戊-1-炔基、戊-2-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、1-甲基-戊-2-炔基、戊-2-烯-4-炔基等等。优选为具有一个三键的C2-6炔基。
″℃2-10炔基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有饱和的碳-碳链与至少一个三键，且具有2至10个碳原子的直链或支链烃基，例如被定义于C2-6炔基的基与庚-1-炔基、庚-2-炔基、2-甲基-庚-1-炔基、辛-3-炔基、壬-4-炔基、1-甲基-壬-2-炔基等等。优选为具有一个三键的C2-10炔基。
″C1-6亚烷基″一词作为一种取代基或取代基的一部分，定义为具有1至6个的碳原子的二价的直链或支链烃基，例如亚甲基、1，2-亚乙基、或1，1-亚乙基、1，3-亚丙基、1，3-亚丁基、1，4-亚丁基、1，3-亚戊基、1，5-亚戊基、1，4-亚己基、1，6-亚己基等等。
″C3-7环烷基″一词一般的指环丙基、环丁基、环戊基、环己基与环庚基。
″芳基″一词作为取代基或取代基的一部分，是指包括苯基或萘基，在一个优选的实施例中，“芳基”一词作为基团或者基团的一部分是苯基。
″卤素″一词一般的是指氟、氯、溴或碘。
上面或后面的指称的″多卤代C1-4烷基″作为一种取代基或者取代基的一部分、定义为被一个或多个卤素取代的C1-4烷基，例如1，1，1-三氟乙基、1，1-二氟乙基，后面将提及的多卤代甲基等等。优选的多卤代C1-4烷基的副族(subgroup)为多卤代甲基，其中后者作为一种取代基或者取代基的一部分，被定义为被一个或多个卤原子取代的甲基，特别是带有一或多个氟原子的甲基，例如二氟甲基或三氟甲基。所定义的多卤代甲基或多卤代C1-4烷基的范围内，当有多于一个的卤素原子被连接至烷基时卤素卤素上时，这些卤素可以是相同的或者不同的。
″氮保护基″指氨基保护基，例如C1-10烷氧基-羰基、芳基C1-10烷氧基-羰基、像是苯甲酰基、茴香醚基-、异丁酰基-、乙酰基-、或叔丁基苯甲酰基(Breipohl et al.(1997)Tetrahedron 53，14671-14686)。氮保护基最好是对酸不稳定的氮保护基，例如二甲氧基三苯甲基。在一个实施例中，氮保护基选自C1-6烷氧基羰基、芳基甲氧基羰基、三氟乙酰基、芳基甲基。在另一个实施例中，氮保护基是叔丁氧羰基、苄氧羰基、苄基、或三氟甲基。
还应该注意到，在定义中所用的任何分子片断(moiety)上的基(radical)的位置，除非另有指示，可位于该片断的任何位置，只要其是化学稳定的。例如吡啶基可包括2-吡啶基、3-吡啶基与4-吡啶基；戊基可包括1-戊基、2-戊基与3-戊基。
当任何变量(例如卤素或C1-4烷基)在任何组成中出现多于一次时，各定义各自独立的。
本发明的化合物的N-氧化物形式指包含本发明任一种化合物中的一或多个氮原子被氧化成所谓的N-氧化物。
供治疗的使用时，本发明的化合物的盐类为那些其中的抗衡离子是药学上或生理上可接受形式的盐。然而，具有药学上不可接受抗衡离子的盐类也有其用途，例如供用于制备或纯化药学上可接受的式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)化合物。所有的盐类，不管其是否为药学上可接受的盐，均被涵盖于本发明范围内。
本发明的化合物能够形成的药学上可接受的或生理上可耐受的加成盐形式，可方便地使用适当的酸类予以制备，例如使用无机酸类、例如氢卤酸类、例如氢氯酸或氢溴酸、硫酸、半硫酸、硝酸、磷酸等酸类；或使用有机酸类、例如、乙酸、天冬氨酸、十二烷基-硫酸、庚酸、己酸、苯甲酸、烟酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对-氨基-水杨酸、亚甲基双羟萘酸等酸类。
相反，所述的酸加成盐类形式可经适当的碱处理被转变成游离碱的形式。
含有酸性质子的式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，也可通过适当的有机碱与无机碱的处理而被转变成其无毒性的金属或胺加成碱盐形式。适当的碱盐形式包含，例如铵盐类、碱金属与碱土金属盐类、例如锂、钠、钾、镁、钙等的盐类，与有机碱类形成的盐类，例如与苄星青霉素(benzathine)、N-甲基-D-葡糖胺、海巴青霉素(hydrabamine)形成的盐类，以及与氨基酸类，例如精氨酸、赖氨酸等形成的盐类。  或者，当式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物中存在羧基时，此化合物也可与药学上可接受的阳离子形成盐形式被提供。
相反，所述的碱加成盐类形式可经适当的酸处理被转变成游离酸形式。
″盐类″一词也包含本发明的化合物能形成的水合物和溶剂加成物形式。这类形式的实施例为，例如水合物、醇化物等等。
当式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的任一取代基含有手性中心时，确实有这类化合物，则此式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物包含其所有的立体异构体形式，包括分离的立体异构体和由这些立体异构体形成的混合物。
本发明的化合物的立体化学异构体形式，如以上所指称的，定义为本发明的化合物可能拥有的，由相同的原子以相同的顺序键合但具有不同的三维结构且不能相互替换的所有可能的分子。除非另有指明，化合物的化学名称包含所有所述化合物可拥有的可能的立体化学异构形式的混合物。所述混合物可含有所述化合物的基本分子结构的所有的非对映异构体和/或对映异构体。本发明的化合物的所有立体化学异构形式，不管是呈纯态或为彼此混合物形式，均被包含于本发明范围中。
在此提及的化合物与中间体的纯的立体异构体形式指实质不含其它的对映异构体或非对映异构体的具相同基本分子结构的所述化合物或中间的异构体。特别是，″立体异构纯″指具有立体异构体过量率为至少80％(即，最少90％的其中一种异构体与最多10％的其他可能的异构体)至高达立体异构体过量率为100％(即，100％的其中一种异构体物且不含其他异构体)的化合物或中间物，更优选化合物或中间物具有立体异构体过量率为90％至高达100％，进一步优选为具有立体异构体过量率为94％至高达100％且最优选为具有立体异构体过量率为97％至高达100％。″对映异构体纯″与″非对映异构体纯″应当以相同的方式被理解，但分别以混合物中的对映异构体过量、非对映异构体过量来考虑。
本发明的化合物与中间物的纯立体异构体形式可应用本领域中已知的方法取得。例如对映异构体可由其与光学活性的酸类或碱类形成的非对映异构体后选择性结晶后彼此分开。光学活性物的实施例为：酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸和樟脑磺酸。或者，对映异构体可通过色谱技术、使用手性固定相进行分离。所述的纯立体化学异构体形式也可衍生自相应的适当的起始化合物的纯立体化学异构体，经进行立体专一性反应而得到。优选地，如果需要某个特定的立体异构体，此化合物将以立体专一性制备方法予以合成。这些方法将有利地应用对映异构纯的起始材料进行。
式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的非对映异构外消旋混合物可得自传统的分离方法。有利地被应用的适当的物理分离方法为，例如选择性结晶法与色谱法，例如柱色谱法。
本发明的化合物也可能以其互变异构体形式存在。这类形式虽未明确被示出于上述的化学式中，但也被包含在本发明的范围的内。例如在Het2的定义中，例如一种被取代羟基或巯基在5-位取代的1，2，4-氧杂二唑，可与其与各自相应的互变异构体形成平衡，如下图所示：

本文中通篇所称的″前药″，指药学上可接受的衍生物类，例如酯类、酰胺类与磷酸酯类，其使得衍生物在生物体内经生物转换形成的产物是所定义过的具活性的式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的药物。描述前药的、Goodman与Gilman的参考资料(The Pharmacological Basis ofTherapeutics，8th ed，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，″Biotransformation ofDrugs″，p13-15)被并入于此作为参考。本发明的化合物的前药以以下方式制备，即将存在于本发明的化合物中的官能基加以修饰，使得修饰物可经一般操作或在体内被解离成专利化合物。例如含巯基的取代基可被偶连至载体，所述载体使得化合物变成生物非活性，直到被对象的内原酶，或，例如酶靶向的特定的受体或位置所移除。
前药的特征为极佳的水溶解性、增加的生体利用度和在体内极易地被代谢成活性抑制剂类。
本发明的目的也包含出现于本发明的化合物上的所有原子的同位素。同位素包含那些具有相同原子序数但质量数不同的原子。经由一般性而非限制的实施例，氢的同位素包括氚与氘，碳的同位素包括C-13与C-14。
在此之后的，术语″式(I)的化合物″，″式(II)的化合物″，″式(III)的化合物″，″式(IV)的化合物″，″式(V)的化合物″、或″本发明的化合物″或类似的术语，指包含通式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物、其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋异构体混合物、前药、酯类与代谢产物类、以及其季铵化的氮相似物。有趣的本发明的化合物的副族或其它任何副族是其N-氧化物类、盐类与所有的立体异构体。
本发明的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中4-吡啶基形成N-氧化物，例如第21号化合物的N-氧化物。

第21号化合物的N-氧化物
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物以酸-加成盐形式出现、其中的盐优选的选自氢氯酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、氯乙酸盐、甲磺酸盐、草酸盐、乙酸盐与柠檬酸盐。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二-C1-4烷基氨基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-4烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二-C1-4烷基氨基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-2烷基、C1-2烷氧基C1-2烷基、二-C1-2烷基氨基C1-2烷基、哌啶-1-基-C1-2烷基、苯基C1-2烷基，其中的苯基可进一步被C1-2烷氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：甲基、甲基氧乙基、二甲基氨基乙基、哌啶-1-基-乙基、苯基甲基，其中的苯基可进一步被甲氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢，氨基或单取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：甲氧基乙基、二甲基氨基乙基、哌啶-1-基-乙基、和苯基甲基，其中的苯基可进一步被甲氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1独立地为氢或氨基。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R1是氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二-C1-4烷基氨基C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基、其中的苯基可进一步被C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R8为氢、C1-10烷基、氨基C1-10烷基、苯基C1-10烷基、Het1C1-6烷基、或氮保护基，其中苯基为可选择地被1至3个选自下述的取代基取代：C1-4烷基、C1-4烷基羰基、卤素、-OR6、-NR4aR4b、-SR5、和多卤代-C1-4烷基。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R8为氢、C1-6烷基、氨基C1-6烷基、苯基C1-6烷基、Het1C1-6烷基、或C1-6烷氧基-羰基。
本发明的另外的具体实施例为那些式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物，式(I)、(II)、(III)、(IV)、或(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R8为氢、C1-6烷基、氨基C1-4烷基、苯基C1-4烷基、吡咯烷-1-基-C1-4烷基、或C1-6烷氧基羰基。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中每个R11和R12独立的代表氢、C1-4烷基、C1-4烷基、多卤代-C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、或-SR5，其中的C1-4烷基可以进一步的被-COOR7取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中每个R11和R12独立的代表氢、甲基、三氟甲基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、或-SR5，其中的甲基可以进一步的被-COOR7取代。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R13代表氢或氟。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，其中R14代表氯、溴或氟。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物，盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中
R1独立地为氢、氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中苯基可进一步被C1-4烷基或C1-4烷氧基取代；
R4a、R4b、R5、R6、R7如上述式(V)的化合物中的定义；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、-NR4aSO2R5、-SR5、-SO2R5、或-SO2NR4aR4b；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
条件为，下述的两个化合物被排除在外：
-2-(5-氯-2-氟苯基)-N-4-吡啶基-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-胺；
-2-(5-氯-2-氟苯基)-N-(3-甲基-4-吡啶基)-吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-胺
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中：
R1  为氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a和R4b是独立的氢或C1-4烷基；
每个R5是独立的氢或C1-4烷基；
每个R6是独立的氢或C1-4烷基；
每个R7是独立的氢或C1-4烷基；
R8是氢或氮保护基团；
每个R11与R12独立地代表氢、可被-COOR7进一步取代的C1-4烷基、多卤代C1-4烷基、卤素、-COR6、-COOR7、-OR7、-NR4aR4b、-NR4aSO2R5、-SR5、-SO2R5、或-SO2NR4aR4b；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任-副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中：
R1为氨基、单-或二取代的氨基，其中的氨基的取代基可选自：C1-6烷基、C1-4烷氧基C1-4烷基、二C1-4烷基氨基-C1-4烷基、哌啶-1-基-C1-4烷基、苯基C1-6烷基，其中的苯基可进一步被C1-4烷基、或C1-4烷氧基取代；
每个R4a、R4b、R5、R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、卤素、-OR7、或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中：
R1为氨基
每个R4a、R4b、R5、R7独立地为氢、或C1-4烷基；
R8为氢、或氮保护基；
每个R11与R12独立地代表氢、C1-4烷基、卤素、-OR7、或-SR5；
R13代表氢、或卤素；且
R14代表卤素。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、或式(V)的化合物的任一副族、或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中：
R11是氢；和
R12是C1-4烷基、卤素、C1-4烷硫基、或三氟甲基。
本发明的另外的具体实施例为那些式(V)的化合物、或式(V)的化合物的任一副族，或使用所述化合物用于制备能抑制HCV活性的医药品的用途，以及其N-氧化物类、盐类、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯类以及其代谢产物，其中：
R13和R14代表卤素。
卤素特别有趣的化合物为那些被列于下面表1中的式(I)的化合物，特别是第1、第2、第3、第6、第7、第8、第9、第10、第11、第22、与第26号的化合物，以及其N-氧化物、盐类与立体异构体。
有许多的合成方式可被应用于本发明以合成得到本发明的化合物。通常，它们可使用本领域中已知的方法所合成。任何本领域已知的合成方法都是可以采用的。然而，下述的合成法用于制备本发明的化合物是很方便的。
具体实施方式
式(V)的化合物根据改进自Wamhoff，H.；Kroth，E.Synthesis，1994，405-410的方法被合成，如路线1中所述。
路线1

基本地，在适当的溶剂(例如氯仿或吡啶)存在下，令2-氨基-3-吡啶羧酸甲酯(1a)与酰基氯反应，制得2-酰基氨基吡啶-2-羧酸酯(1b)。例如使用氨水，此2-酰基氨基吡啶-3-羧酸酯(1b)被转变成2-酰基氨基吡啶-3-酰胺(1d)。选择地，2-酰基氨基吡啶-3-酰胺(1d)也可由2-氨基-3-吡啶酰胺(1c)经酰化作用取得。
此2-酰基氨基吡啶-3-酰胺类(1d)，再通过添加一种碱而合环以形成式(1e)的吡啶并[2，3-d]嘧啶-4-醇衍生物。此醇再通过卤化剂(例如氯化亚砜)，在适当的溶剂(例如氯仿、二氯乙烷或四氢呋喃(THF))内，催化剂量的二甲基甲酰胺(DMF)存在下，被取代成卤素。接着，在化合物(1f)上，以胺或式HLR2的醇，与适当的碱(例如TEA或DIPEA)一起，在有机溶剂(例如DCM、THF或DMF)内，进行亲核性取代反应，制得式(1g)的化合物。
或者，此2-酰基氨基吡啶-3-酰胺可以以一锅法被转变成式(V)的吡啶并[2，3-d]嘧啶类，将式(1e)的化合物与胺或式HLR2的醇一起与适当的碱(例如TEA或DIPEA)，在苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷基-_六氟磷酸酯(PyBOP)存在下进行。式HLR2中，H为氢、且L与R2具有如上述的式(V)的化合物的取代基的定义中所提及的含义。
路线2
或者，式(V)的化合物可由相应的吡啶并嘧啶酮衍生物作为起始物，将其转变成亚氨基氯化物并接着以适当的胺(例如4-氨基吡啶)置换氯原子而制备，如下面路线2所示。

(i)氯化亚砜，DMF；(ii)4-氨基烟酸甲基酯，TEA；(iii)NaOH；(iv)PyBOP，TEA，HNR4aR4b。
如下所示的路线3与4，提供另种路径至吡啶基核及其进一步的取代反应。
路线3

路线4

路线5：连接4-氨基吡啶至双环嘧啶的一般方法

路线1显示如何将4-羟基嘧啶转变成4-卤代嘧啶，所述4-卤代嘧啶再偶连至4-氨基吡啶上。此偶连反应使用钯催化剂进行，且在一些情况下可使用4-氯嘧啶衍生物进行，但某些情况下使用4-碘衍生物进行。
此必不可少的3-羧酰氨基可能在当吡啶被加至嘧啶时出现在4-氨基吡啶上，或吡啶基可能含有一种酯于3-位置，如表5中所示。在此情况中，此酯可在吡啶基被引入后，经碱水解而形成羧酸。此羧酸很容易地通过本领域中被熟知的形成酰胺键的方法，被偶连至各式各样的氨基，如表2中所示。由于各式各样的胺类很容易得到且与酰胺键形成的一般性，此方法可制得大量的本发明的化合物。
包含于本发明的化合物示于下面表1中：

表1





本发明中有用的化合物及其相关的化合物的施用方式与制剂形式，将视病况的性质、病况严重程度、特定的受治疗的对象、以及从业医生的判断而定；制剂形式也将视施用模式而定。由于本发明的化合物为小分子，它们可通过与适当的医药的赋形剂混合成片剂、胶囊剂、糖浆剂等剂型后很方便的口服施用。适当的供口服施用的制剂也可包含次要组份，例如缓冲剂、矫味剂等等。典型地，在制剂中的活性组分的量将占总制剂量的5％-95％的范围，但视载体而允许更广的变化。合适的载体包括蔗糖、果胶、硬脂酸镁、乳糖、花生油、橄榄油、水等等。
本发明中有用的化合物也可经由栓剂或其它跨膜载体施用。典型地，这类配制剂将包括促进化合物穿透粘膜的赋形剂，例如药学上可接受的清洁剂。
化合物也可被局部施用，或置于可穿透皮肤的制剂内。这些制剂包括洗剂、乳膏、油膏等等、所述制剂可依已知的方法予以配制。
化合物也可经由注射施用、包括静脉内、肌肉内、皮下或腹膜内的注射方式。供这类目的使用的典型的制剂为在等渗载剂[例如Hank′s溶液或林氏液(Ringer′s solution)]内的液态制剂。
选择性的制剂也包括鼻喷雾剂、脂质体制剂、缓释制剂等等，如本领域中已知的制剂。
可使用任何适当的制剂，本领域已知制剂的总目录见于Remington′s  Pharmaceutical Sciences，latest edition. Mack PublishingCompany，Easton，PA。参考此手册已是本领域中的例行做法。
本发明化合物的剂量要视许多的因素而定，所述因素在不同患者中均不同。然而，一般的相信，每日的口服剂量相对于总体重可使用0.001-100毫克/千克的量，优选0.01-50毫克/千克，且更优选约0.01毫克/千克-10毫克/千克。给药策略也要视受治疗的病况与从业医生的判断而定。
应注意到，本发明的化合物可作为单独的活性组分，或是作为所述式的许多具体实施例的混合物被施用。此外，本发明的化合物可被作为单独的治疗剂使用或与其它治疗剂联合使用。
由于其有利的抗病毒的性质，如将在实施例中所显现出的，本发明的化合物为可用于治疗被HCV感染的个体并且供这些个体预防HCV感染。  通常，本发明的化合物可用于治疗被黄病毒(flaviviruses)感染的恒温动物。可利用本发明的化合物预防或治疗的病况，尤其是和HCV及其它的病源性黄病毒相关的病况，例如黄热病、登革热(1-4型)、St.Louis脑炎、日本脑炎、Murray河谷脑炎、西尼罗(West Nile)病毒与Kunjin病毒。和HCV相关的病况，包括进展性肝纤维化、炎症和能导致肝硬化、末期肝病与HCC的坏死；以及对于其它的病源性黄热病毒而言，这些病况包括黄热病、登革热、出血热与脑炎。
本发明的化合物或其任何副族化合物因此可被用于对抗上述病况的医药品，所述的用作医药品或者用作治疗方法包括，对受HCV感染的患者系统施用能有效对抗HCV和其他病源性黄病毒的量的化合物。因此，本发明的化合物可被用于制备一种能治疗HCV以及其它病源性黄病毒相关病况的药物的用途。
在一个具体实施例中，本发明涉及被定义于此的式(V)的化合物或其任何副族化合物的用途，所述用途是用于制备能在哺乳动物中治疗或对抗HCV感染相关的感染或疾病的医药品的用途。本发明还涉及一种治疗黄病毒感染或和黄病毒感染相关的疾病的方法，所述方法包括对有需要的哺乳动物施用有效量的此处所定义的式(V)的化合物或其副族化合物。
另一具体实施例中，本发明涉及被定义于此的式(V)的化合物或其任何副族化合物的用途，所述用途是用于制备能抑制被黄热病毒，特别是HCV感染的哺乳动物中的HCV活性的医药品的用途。
另一具体实施例中，本发明涉及被定义于此的式(V)的化合物或其任何副族化合物的用途，所述用途是用于制备能抑制被黄热病毒感染的哺乳动物中的HCV活性的医药品的用途，其中所述的HCV是被抑制其复制作用。
此外，先前已知的抗-HCV化合物，例如干扰素-α(IFN-α)、聚乙二醇化的(pegylated)干扰素-α和/或利巴韦林(ribavirin)、和本发明的化合物的联用药物，可以在组合疗法中被做为医药品使用。″组合疗法″一词指一种产品，所述产品中必须含有(a)本发明的化合物、与(b)选择地另种抗-HCV化合物，所述产品在治疗HCV感染，特别是治疗1型HCV感染的过程中作为联合制剂供同时的、分开的或顺序的使用。于是，为对抗或治疗HCV感染，本发明的化合物可以和其他治疗剂联合后共同施用，所述其他治疗剂是，例如干扰素-α(IFN-α)、乙二醇化的干扰素-α和/或利巴韦林(ribavirin)、以及基于靶向对抗HCV抗原决定基的抗体的治疗剂、小分子的干扰的RNA(Si RNA)、核酸酶类、DNA酶、反义RNA、小分子拮抗剂、例如NS3蛋白酶、NS3解螺旋酶与NS5B聚合酶的拮抗剂。
因此，本发明涉及被如上定义的式(V)的化合物或其任何副族化合物在制备医药品中的用途，所述医药品能抑制被感染了HCV病毒的哺乳动物中的HCV活性，所述医药品是用于组合疗法中的医药品，所述的组合疗法优选包括式(V)的化合物与(乙二醇化的)IFN-α和/或利巴韦林(ribavirin)。
本领域技术人员可以认识到，式(V)的化合物可在细胞HCV复制子(replicon)系统中被测试，所述细胞HCV复制系统是基于Lohmann et al.(1999)Science 285：110-113中的方法，其进一步的修饰被描述于Kriegeret al.(2001)Journal of Virology 75：4614-4624(被并入于此做为参考)，该方法被进一步示例性的示于实施例部分。此种模型虽不是完整的HCV感染模型，但被广泛接受为是目前可取得的，最健全且最有效的自发HCVRNA复制模型。在此种细胞的模型中呈现出抗-HCV活性的化合物被认为是候选药物，此候选药物在哺乳动物HCV感染的治疗中进一步研究。应该意识到的是，在HCV复制子模型中，区别出化合物是特异性的干扰HCV的功能还是呈现细胞毒性或细胞抑制性作用是相当重要的，且其结果分别是导致HCV RNA浓度降低或连结的通讯酶浓度的降低。评价方法是本领域已知用于评估细胞的毒性的方法，其根据，例如使用萤光氧化还原染料(例如resazurin)测定粒线体的酶活性。进一步的，细胞的反-筛选(counter-screens)用于评估连结的通讯基因活性的非选择性抑制作用，例如萤火虫的荧光素酶。适当的细胞类型可通过稳定的转染而引入荧光素酶通讯基因，所述荧光素酶通讯基因的表达依赖于结构性的活性基因促进子，且这类细胞可用于反筛选以消除非选择性的抑制剂。
在前或后面所有参考到的专利、专利申请与文章，被并入于此作为参考。
实施例
下面的实施例是用来说明本发明，而不是用来限制本发明。
实施例1：
合成  吡啶并[2，3-d]嘧啶类
公开于本发明的分子可根据公开于WO03/097615中的步骤，特别是反应路线4来合成。
实施例2
式(V)的化合物在HCV复制子评价中的活性
稳定的复制子细胞通讯评价：
本发明的化合物在细胞评价中被检测其抑制HCV RNA复制的活性。此评价证明本发明的化合物在细胞培养物中呈现对抗HCV复制子功能的活性。此细胞评价是根据双顺反子(bicistronic)表达结构，该结构被描述于Lohmann et al.(1999)Science vol.285 pp.110-113和被描述于Krieger et al.(2001)Journal of Virology 75：4614-4624的文章中，后者是在进一步修饰的一个多靶向的筛选策略中。基本上，其方法如下：
此评价利用稳定地被转染的细胞系Huh-7 luc/neo(后面称的为Huh-Luc)。此细胞系包藏着一种用于编码的双顺反子表达结构的RNA，该RNA包含由得自脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖入口位置(IRES)转译的1b型HCV的野生型NS3-NS5B区域，其由通讯部分(FfL-荧光素酶)所领先，和任选地标记物部位(neoR，新霉素磷酸转移酶)。此结构被来自1b型HCV的5′与3′NTRs(非-转译的区域)所限制住。复制子细胞在G418(neoR)存在下的连续培养要依赖HCV RNA的复制作用。表达HCV RNA的稳定转染的复制子细胞，所述HCV RNA独立自主地被复制至高量水平且编码尤其是荧光素酶，被使用于筛选抗病毒的化合物。
细胞评价的实验方法：
将复制子细胞铺于384孔中，其中包含各种浓度的试验的化合物与对照的化合物。接着孵育三天，HCV的复制作用通过评价荧光素酶的活性测定(使用标准的荧光素酶评价底物与试剂以及Perkin ElmerViewLuxTm ultraHTS微板成像仪)。在没有任何抑制剂存在的对照组培养物中，复制子细胞具有高度荧光素酶表达。化合物对荧光素酶活性的抑制的活性在Huh-Luc细胞上被监测，以使得各试验化合物得到剂量-反应曲线。再计算其EC50值，此值代表所需的能够降低50％的被检测的荧光素酶活性的化合物的量，或更明确地说，用于抑制基因地连结的HCV复制子RNA发生复制的能力。
受试的化合物被发现具有的活性如下：
表3
    化合物    号码    HCV复制子活性    (μM)    1    0.13    2    0.23    3    0.41    4    ＞10    5    25    6    0.56    7    0.57    8    0.57    9    0.67    10    0.76    11    0.77    12    1.1
    化合物    号码    HCV复制子活性    (μM)    13    1.3    14    1.6    15    1.8    16    2.1    17    2.2    18    5.1    19    3.4    20    3.9    21    3.2    22    0.49    23    ＞10    24    ＞10    25    ＞10    26    0.48    27    ＞10    28    ＞10    29    ＞10    30    ＞10    31    ＞10    32    12    33    15    34    19    35    12    36    ＞10    37    ＞10