使用超高压技术制备无菌液的方法及制备的乳制品.pdf

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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201310400745.2 (22)申请日 2013.09.06 A23L 3/015(2006.01) A23C 9/152(2006.01) A23C 9/15(2006.01) A23C 9/12(2006.01) (71)申请人 内蒙古蒙牛乳业 （集团） 股份有限公 司 地址 011517 内蒙古自治区呼和浩特市和林 格尔盛乐经济园区 (72)发明人 陈伟 武春雨 白林春 陈云 李洪亮 母智深 (74)专利代理机构 北京汉德知识产权代理事务 所 ( 普通合伙 ) 11328 代理人 庄一方 (54) 发明名称 使用超高压技术制备。

2、无菌液的方法及制备的 乳制品 (57) 摘要 使用超高压技术制备无菌液的方法， 包括 对含有效成分的水溶液进行超高压处理 ； 所述 超高压处理包括对含有效成分的水溶液交变加 压 ； 交变加压的交变次数为 0-5 次、 加压压力为 300-1000MPa、 总加压时长为 2-80 分钟和温度为 0-80 ； 所述有效成分包括乳糖酶、 乳铁蛋白、 免 疫球蛋白、 牛奶碱性蛋白或活性肽， 能够在超高压 处理后仍然保持无菌液中乳糖酶、 乳铁蛋白、 活性 肽、 免疫球蛋白及牛奶碱性蛋白的活性。 本发明提 供了一种乳制品， 其中含有具有活性的乳糖酶、 乳 铁蛋白、 免疫球蛋白、 活性肽或牛奶碱性蛋白。 (。

3、51)Int.Cl. (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书5页 (10)申请公布号 CN 104413528 A (43)申请公布日 2015.03.18 CN 104413528 A 1/1 页 2 1. 使用超高压技术制备无菌液的方法， 其特征在于， 包括对含有效成分的水溶液进行超高压处理 ； 所述超高压处理包括对含有效成分的水 溶液交变加压 ； 所述交变加压的次数为0-5次、 加压压力为300-1000MPa、 总加压时长为2-80分钟和温 度为 0-80 ； 所述有效成分包括乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球蛋白、 牛奶碱性蛋白或活性肽。 2. 。

4、如权利要求 1 所述的使用超高压技术制备无菌液的方法， 其中， 在所述交变加压前 先加压至 200-400Mpa 保持 1-30 分钟， 温度为 25-45。 3. 如权利要求 1 所述的使用超高压技术制备无菌液的方法， 其中， 所述交变加压的交 变次数为 0-2 次， 加压压力为 500-600MPa， 总加压时长为 10-30 分钟， 温度为 10-50。 4. 如权利要求 1 所述的使用超高压技术制备无菌液的方法， 其中， 所述含有效成分的 水溶液经由所述有效成分溶解于水制备而成， 所述有效成分与水的质量比为 1 ： 5 至 1 ： 20。 5. 如权利要求 4 所述的使用超高压技术制备。

5、无菌液的方法， 其中， 所述溶解时的水温 为 25至 45。 6. 如权利要求 4 所述的使用超高压技术制备无菌液的方法， 其中， 所述有效成分为乳 铁蛋白或免疫球蛋白， 所述有效成分与水的质量比为 1 ： 5 至 1 ： 10。 7. 如权利要求 4 所述的使用超高压技术制备无菌液的方法， 其中， 制备所述含有效成 分的水溶液还包括将所述溶解后得到的液体用离心分离机离心处理， 离心温度为 255， 离心加速度大于 3000g。 8. 乳制品， 其特征在于， 在所述乳制品制备过程中添加了如权利要求 1 所述的无菌液。 权 利 要 求 书 CN 104413528 A 2 1/5 页 3 使用超。

6、高压技术制备无菌液的方法及制备的乳制品 技术领域 0001 本发明涉及无菌液的制备方法， 具体来说， 涉及一种采用超高压处理技术的无菌 液的制备方法及使用该无菌液的乳制品， 属于食品生产领域。 背景技术 0002 为了避免食品热处理杀菌造成营养物质的损失， 近来超高压技术得到应用和发 展。超高压杀菌处理是利用帕斯卡定律， 在常温或较低温度下以液压作为压力传递介质对 食品加压， 达到杀菌、 物料改性、 产生新的组织结构和改变食品品质等目的。超高压处理可 防止微生物对食品的污染， 延长保藏时间， 保持食品的原始风味和天然营养。 但是现有的超 高压处理会对食品中特别是乳制品中添加的一些敏感性物质产生。

7、影响， 如乳糖酶、 乳铁蛋 白、 活性肽、 免疫球蛋白及牛奶碱性蛋白， 导致这些敏感性物质在超高压处理后丧失活性。 发明内容 0003 本发明的目的是提供使用超高压技术制备无菌液的方法， 能够在超高压处理后仍 然保持无菌液中有效成分的活性。 0004 本发明的还一个目的是提供了一种乳制品， 其中含有具有活性的有效成分， 有效 成分包括乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球蛋白、 活性肽或牛奶碱性蛋白。 0005 本发明提供了一种使用超高压技术制备无菌液的方法 , 包括对含有效成分的水 溶液进行超高压处理 ； 所述超高压处理包括对有效成分的水溶液交变加压， 交变次数为 0-5 次， 加压压力为 300-1。

8、000MPa， 总加压时长为 2-80 分钟， 温度为 0-80 ； 所述有效成分 包括乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球蛋白、 牛奶碱性蛋白或活性肽。 0006 使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 在所述交变加压前 先加压至200-400Mpa保持1-30分钟， 温度为25-45， 这样可以激活芽孢， 使得杀菌效果较 好， 并且更好地保持无菌液中乳糖酶、 乳铁蛋白、 活性肽、 免疫球蛋白及牛奶碱性蛋白等有 效成分的活性。 0007 本发明提供使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 交变 加压的交变次数为 0-2 次， 加压压力为 500-600MPa， 总加压时。

9、长为 10-30 分钟， 温度为 10-50。 0008 在使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 含有效成分的水 溶液经由有效成分溶解于水制备而成， 有效成分与水的质量比为 1 ： 5 至 1 ： 20。 0009 在无使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 溶解时的水温 为 25至 45。 0010 在使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 有效成分为乳铁 蛋白或免疫球蛋白， 有效成分与水的质量比为 1 ： 5 至 1 ： 10。 0011 在使用超高压技术制备无菌液的方法的一种示意性实施方式中， 制备含有效成分 的水溶液还包括将溶解后得到的。

10、液体用离心分离机离心处理， 离心温度为 255， 离心加 说 明 书 CN 104413528 A 3 2/5 页 4 速度大于 3000g。 0012 本发明提供的乳制品， 在乳制品制备过程中添加了上述无菌液。 0013 本发明提供的无菌液的制备方法， 对含有有效成分乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球蛋 白、 活性肽或牛奶碱性蛋白的水溶液进行超高压处理， 实现杀菌的同时保持了有效成分的 活性。用此无菌液制备的乳制品保质期较长， 且更充分地保留了乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球 蛋白、 活性肽和牛奶碱性蛋白的活性。 具体实施方式 0014 如无特殊说明， 本说明书中的科技术语的含义与本领域技术人员一般理。

11、解的含义 相同， 但如有冲突， 则以本说明书中的定义为准。 0015 在说明书和权利要求书中使用的涉及组分量、 工艺条件等的所有数值在所有情形 中均应理解被 “约” 修饰。涉及相同组分或性质的所有范围均包括端点， 该端点可独立地组 合。由于这些范围是连续的， 因此它们包括在最小值与最大值之间的每一个数值。还应理 解的是， 本申请引用的任何数值范围预期包括该范围内的所有子范围。 0016 本发明的无菌液的制备方法中， 交变加压指的是间歇、 多次、 重复加压的方式， 也 可称作脉冲加压。 本发明中交变次数0次， 是指对含有效成分的水溶液加压一次 ； 交变次数 1 次指加压两次， 依次类推。 001。

12、7 只要不影响本发明的目的， 本发明的乳制品的生产可以采用任何本技术领域的常 规工艺， 但优选采用实施例中所描述的工艺进行。 0018 实施例 1 ： 乳铁蛋白无菌液的制备。 0019 1） 粉状原料的溶解 ： 在化料罐内调入纯净水 （纯净水的质量是待溶解的乳铁蛋白 质量的 9 倍） ； 开启混料机， 使纯净水在混料机与化料罐之间循环， 同时将水温升至 25； 在 开启搅拌的条件下将乳铁蛋白缓慢地投入混料机内 ； 投料结束后， 持续搅拌 30 至 40 分钟 ； 静置 30 分钟后， 泡沫基本消除， 得到乳铁蛋白溶解液。 0020 2） 离心净化 ： 将乳铁蛋白溶解液通过离心分离机进行离心净化。

13、处理， 离心温度为 255， 离心加速度为 3000g， 取离心后上清得到乳铁蛋白水溶液。 0021 3） 超高压处理 ： 将乳铁蛋白水溶液打冷至 10 5后， 灌装入铝箔复合材料袋 中 ； 将装有乳铁蛋白水溶液的铝箔复合材料袋置于超高压设备中， 在 600MPa 的压力下保持 20 分钟， 温度为 25， 保压期间不改变压力， 得到乳铁蛋白无菌液。 0022 经检测， 制得的乳铁蛋白无菌液达到商业无菌水平且乳铁蛋白活力未发生显著变 化。 0023 实施例 2 ： 乳糖酶无菌液的制备。 0024 1） 取乳糖酶溶解液， 活力浓度如后附的表 4 所示。 0025 2） 离心净化 ： 将乳糖酶溶解。

14、液通过离心分离机进行离心净化处理， 离心温度为 255， 离心加速度为 3000g， 取离心后上清得到乳糖酶水溶液。 0026 3） 超高压处理 ： 将乳糖酶水溶液打冷至 10 5后， 灌装入铝箔复合材料袋中 ； 将装有乳糖酶水溶液的铝箔复合材料袋置于超高压设备中， 加压至 200Mpa 保持 30 分钟， 温度为 45 ； 交变加压， 第一次加压至 600MPa， 温度为 45， 第二次加压至 600MPa， 温度为 45， 每相邻两次加压之间需将压力释放至常压， 一共 30 分钟。得到乳糖酶无菌液。 说 明 书 CN 104413528 A 4 3/5 页 5 0027 经检测， 制得的乳。

15、糖酶无菌液达到商业无菌水平且乳糖酶活力未发生显著变化。 0028 实施例 3 ： 免疫球蛋白无菌液的制备。 0029 1） 粉状原料的溶解 ： 在化料罐内调入纯净水 （免疫球蛋白与纯净水的质量比为 1 ： 20） ； 开启混料机， 使纯净水在混料机与化料罐之间循环， 同时将水温升至 30； 在开启搅拌 的条件下将免疫球蛋白缓慢地投入混料机内 ； 投料结束后， 持续搅拌30至40分钟 ； 静置30 分钟后， 泡沫基本消除， 得到免疫球蛋白溶解液。 0030 2） 离心净化 ： 将免疫球蛋白溶解液通过离心分离机进行离心净化处理， 离心温度 为 255， 离心加速度为 3000g， 取离心后上清得到。

16、免疫球蛋白水溶液。 0031 3） 超高压处理 ： 将免疫球蛋白水溶液打冷至 10 5后， 灌装入铝箔复合材料 袋中 ； 将装有免疫球蛋白水溶液的铝箔复合材料袋置于超高压设备中， 在 300MPa 的压力下 保持 2 分钟， 温度为 1， 保压期间不改变压力， 得到免疫球蛋白无菌液。 0032 经检测， 制得的免疫球蛋白无菌液达到商业无菌水平， 且免疫球蛋白活力未发生 显著变化。 0033 实施例 4 活性肽无菌液的制备。 0034 1） 粉状原料的溶解 ： 在化料罐内调入纯净水 （活性肽与纯净水的质量比为 1 ： 5 ； 开 启混料机， 使纯净水在混料机与化料罐之间循环， 同时将水温升至 4。

17、5； 在开启搅拌的条件 下将活性肽缓慢地投入混料机内 ； 投料结束后， 持续搅拌 30 40 分钟 ； 静置 30 分钟后， 泡 沫基本消除， 得到活性肽溶解液。 0035 2） 离心净化 ： 将活性肽溶解液通过离心分离机进行离心净化处理， 离心温度为 255， 离心加速度为 6000g， 取离心后上清得到活性肽水溶液。 0036 3） 超高压处理 ： 将活性肽水溶液打冷至 10 5后， 灌装入铝箔复合材料袋中 ； 将装有活性肽水溶液的铝箔复合材料袋置于超高压设备中， 先加压至300Mpa保持10分钟， 温度为 35 ； 再加压至 300MPa 保持 2 分钟， 温度为 65， 两次加压之间需。

18、将压力释放至常 压， 得到活性肽无菌液。 0037 经检测， 制得的活性肽无菌液达到商业无菌水平。 0038 实施例 5 牛奶碱性蛋白无菌液的制备。 0039 1） 粉状原料的溶解 ： 在化料罐内调入纯净水 （纯净水的质量是待溶解的牛奶碱性 蛋白质量的 10 倍） ； 开启混料机， 使纯净水在混料机与化料罐之间循环， 同时将水温升至 25； 在开启搅拌的条件下将牛奶碱性蛋白缓慢地投入混料机内 ； 投料结束后， 持续搅拌 30 至 40 分钟 ； 静置 30 分钟后， 泡沫基本消除， 得到牛奶碱性蛋白溶解液。 0040 2） 离心净化 ： 将牛奶碱性蛋白溶解液通过离心分离机进行离心净化处理， 离。

19、心温 度为 255， 离心加速度为 10000g， 取离心后上清得到牛奶碱性蛋白水溶液。 0041 3） 超高压处理 ： 将牛奶碱性蛋白水溶液冷至 10 5后， 灌装入铝箔复合材料 袋中 ； 将装有牛奶碱性蛋白水溶液的铝箔复合材料袋置于超高压设备中， 加压至 400MPa 保 持 5 分钟， 温度为 25。交变加压， 第一次至 1000Mpa 保持 15 分钟， 温度为 25； 第二次加 压至 1000Mpa 保持 10 分钟， 温度为 25； 第三次加压至 1000Mpa 保持 10 分钟， 温度为 25； 第四次加压至 1000Mpa 保持 20 分钟， 温度为 25； 第五次加压至 10。

20、00Mpa 保持 20 分钟， 温 度为 25 ； 第六次加压至 1000Mpa， 保持 5 分钟， 温度 25 ； 每相邻两次加压之间需将压力 释放至常压， 得到牛奶碱性蛋白无菌液。 说 明 书 CN 104413528 A 5 4/5 页 6 0042 经检测， 制得的牛奶碱性蛋白无菌液达到商业无菌水平， 且牛奶碱性蛋白的含量 和活力未发生显著变化。 0043 产品微生物含量检测 取样测定实施例 1 至 5 中获得的无菌液产品中的微生物含量， 各自取 5 次样， 使用 GB4789.2 检测菌落总数、 GB/T4789.3 检测大肠菌群、 GB/T4789.15 检测酵母、 霉菌、 NY/。

21、 T1331 检测需氧芽孢和嗜热需氧芽孢 ； 检测结果如下表 1 所示 ： 表 1 菌落总数大肠菌群酵母、 霉菌需氧芽孢嗜热需氧芽孢 实施例 1 1 1 1 2 2 实施例 2 1 1 1 2 2 实施例 3 1 1 1 2 2 实施例 4 1 1 1 2 2 实施例 5 1 1 1 2 2 0044 产品功能含量及活性的检测。 0045 1、 通过高效液相色谱方法检测实施例 1 中乳铁蛋白水溶液和乳铁蛋白无菌液中 乳铁蛋白的含量， 分别取 6 个样品， 检测结果如下表 2 所示 ： 表 2 样品序号123456平均 乳铁蛋白无菌液中乳铁蛋白的含量 （g/100g）9.2 9.5 9.6 8.。

22、9 9.3 9.4 9.32 乳铁蛋白水溶液中乳铁蛋白的含量 （g/100g）9.3 9.6 9.7 9.1 9.4 9.6 9.45 0046 2、 对实施例 1 中乳铁蛋白水溶液和乳铁蛋白无菌液的抗菌活性进行检测， 分别取 6 个样品， 抗菌活性通过对 E.coli 的最小抑菌浓度进行测定， 检测结果如下表 3 所示 ： 表 3 样品序号123456平均 乳铁蛋白无菌液 （mg/mL）2.02.0 1.75 2.25 2.0 2.25 2.04 乳铁蛋白水溶液 （mg/mL）1.75 2.0 2.01.75 2.0 2.25 1.96 0047 3、 对实施例 2 中乳糖酶水溶液和乳糖酶无。

23、菌液中乳糖酶的活力进行检测， 分别取 6 个样品， 检测结果如下表 4 所示 ： 表 4 样品序号123456平均 乳糖酶无菌液 （NLU）1900 1970 1960 1950 1890 1791 1910 乳糖酶水溶液 （NLU）2010 2100 2008 2120 2100 2012 2058 0048 4、 对实施例 3 中免疫球蛋白水溶液和免疫球蛋白无菌液中免疫球蛋白的含量进 行检测， 分别取 6 个样品， 检测结果如下表 5 所示 ： 表 5 样品序号123456平均 免疫球蛋白无菌液 （mg/mL）40 42 40 38 43 37 40 免疫球蛋白水溶液 （mg/mL）40 。

24、45 42 45 42 45 43.2 0049 5、 对实施例 4 中活性肽水溶液和活性肽无菌液中活性肽的含量进行检测， 取 6 个 样品， 检测结果如下表 6 所示 ： 表 6 样品序号123456平均 活性肽无菌液 （g/10g）1.48 1.38 1.32 1.35 1.33 1.48 1.39 活性肽水溶液 （g/10g）1.36 1.49 1.43 1.34 1.41 1.50 1.42 说 明 书 CN 104413528 A 6 5/5 页 7 0050 6、 对实施例 5 中牛奶碱性蛋白水溶液和牛奶碱性蛋白无菌液中牛奶碱性蛋白的 含量进行检测， 取 6 个样品， 检测结果如下。

25、表 7 所示 ： 表 7 样品序号123456平均 牛奶碱性蛋白无菌液 （g/100g）8.2 8.5 8.6 7.9 8.3 8.4 8.32 牛奶碱性蛋白水溶液 （g/100g）8.3 8.6 8.7 8.1 8.4 8.6 8.45 0051 由上述结果可以得知， 利用本发明制备方法生产的无菌液均达到了商业无菌的水 平， 同时超高压处理前后液体中有效成分的含量没有发生明显的变化， 可以安全且有效地 应用到乳制品中。 0052 将实施例 1-5 制得的无菌液加入无菌奶中， 可低成本地获得具有长保质期的乳制 品， 且其中的乳糖酶、 乳铁蛋白、 免疫球蛋白、 活性肽或牛奶碱性蛋白未失去活性。 。

26、0053 在本文中，“示意性” 表示 “充当实例、 例子或说明” ， 不应将在本文中被描述为 “示 意性” 的任何实施方式解释为一种更优选的或更具优点的技术方案。 0054 在本文中，“相等” 、“相同” 等并非严格的数学和 / 或几何学意义上的限制， 还包含 本领域技术人员可以理解的且生产或使用等允许的误差。除非另有说明， 本文中的数值范 围不仅包括其两个端点内的整个范围， 也包括含于其中的若干子范围。 0055 应当理解， 虽然本说明书是按照各个实施例描述的， 但并非每个实施例仅包含一 个独立的技术方案， 说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见， 本领域技术人员应当将说 明书作为一个整体， 各实施例中的技术方案也可以经适当组合， 形成本领域技术人员可以 理解的其他实施方式。 0056 上文所列出的一系列的详细说明仅仅是针对本发明的可行性实施例的具体说明， 它们并非用以限制本发明的保护范围， 凡未脱离本发明技艺精神所作的等效实施方案或变 更， 如特征的组合、 分割或重复， 均应包含在本发明的保护范围之内。 说 明 书 CN 104413528 A 7 。