栀子有效部位在治疗老年期痴呆中的用途.pdf

本发明公开了一种栀子提取的有效部位，其含有至少50％重量的栀子苷，还公开了这种有效部位的制备方法，含有这种有效部位的药物组合物，以及这种有效部位在制备预防和/或治疗老年期痴呆药物中的应用。

权利要求书
1.  一种栀子有效部位，其特征在于，含有至少50％重量的栀子苷。

2.  制备权利要求1的栀子有效部位的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(A)栀子加10倍量55％乙醇浸泡24h后渗漉，合并渗漉液，
(B)提取液减压浓缩至无醇味，用石油醚脱脂，再用乙酸乙酯和/或正丁醇翠取
(C)减压蒸干，得到栀子苷含量过50％有效部位。

3.  制备权利要求1的栀子有效部位的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(A)栀子原药材使用溶剂提取，合并滤液，滤去药渣，浓缩
(B)缩液过滤并稀释后通过大孔树脂，用水或5％乙醇洗脱除掉杂质后，
(C)再用10-40％乙醇洗脱，蒸干，得到含有50％栀子苷的有效部位。

4.  根据权利要求3的制备方法，步骤(A)的溶剂选自水、醇类、或水与醇类的混合物。

5.  根据权利要求4的制备方法，所述的醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇。

6.  根据权利要求3的制备方法，步骤(B)的大孔树脂是D101型。

7.  根据权利要求3的制备方法，步骤(C)的乙醇是20％。

8.  一种预防和/或治疗老年期痴呆的药物组合物，其特征在于，含有治疗有效剂量的权利要求1的栀子有效部位及药用载体。

9.  根据权利要求9的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物包括片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。

10.  权利要求1的栀子有效部位在制备预防和/或治疗老年期痴呆的药物中的应用。

说明书栀子有效部位在治疗老年期痴呆中的用途
技术领域
本发明涉及从栀子提取的有效部位，这种有效部位的制备方法，含有这种有效部位的药物组合物，以及这种有效部位和其药物组合物作为药物的用途，尤其是在制备预防和/或治疗老年期痴呆药物中的应用。
背景技术
老年期痴呆是危害老年人身心健康的常见病，多发病。目前全世界65岁以上人群中老年期痴呆患病率约为10％，85岁以上可达47％，在发达国家中，该病在死亡原因中名列第4位，仅次于心脏病，癌和中风。我国的老年期痴呆患病率略低于发达国家，但随着我国经济、文化事业的发展，寿命延长，老年人口占总人口的比例将加大。随着老年人口增加，老年期痴呆患者急剧地增多。老年期痴呆患者的症状主要表现为进行性认知功能减退，并伴有行为障碍及情绪异常波动等，直至生活不能自理，给家庭和社会造成了巨大的压力。因此开发治疗老年期痴呆药物是当务之急。在国外开发治疗老年期痴呆药物的焦点主要集中在乙酰胆碱酯酶抑制剂，如1996年首次上市的乙酰胆碱酯酶抑制剂--他可林(Tacrine)，1997年上市的多奈哌齐以及正在进行的乙酰胆碱酶抑制剂有Metrifonate，Velnacrine maleate等。由于乙酰胆碱酯酶全身分布，其副作用较大，限制了它们的治疗效果。
栀子(Gardenia jasminoides Ellis)为茜草科栀子属植物，广泛分布于中南及陕西、甘肃、新疆、浙江、安徽、江苏、福建等地。民间用于治疗热病高烧，心烦不眠，口舌生疮，目赤红肿，黄疸、流脑等。栀子的天然资源丰富，未见有毒性报告，迄今为止，我们没有看到栀子对老年期痴呆的研究报道。
发明内容
为了克服现有技术中存在的问题，本发明提供一种新的治疗老年期痴呆的药物，即一种栀子有效部位。
本发明的另一目的是提供一种栀子有效部位的制备方法。
本发明的再一目的是提供含有圆栀子有效部位的药物组合物
本发明的又一目的是提供栀子有效部位在制备治疗老年期痴呆药物中的应用。
为了解决本发明的技术问题，本发明采取如下的技术方案：
一种栀子有效部位，其特征在于，含有至少50％重量的栀子苷。
本发明还提供了这种栀子有效部位的制备方法。
栀子原药材经干燥并适当的粉碎，以利增大与溶剂的接触面积，提高效率。
原药材的提取溶剂使用水、醇类、或水与醇类的混合物。优选的醇类包括甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇等。水与醇类的混合物，例如浓度为40-99％(体积比)的醇。提取时溶剂浸过药材为宜，溶剂量为原药重量的2-14倍。提取可以在静态或动态下，优选在动态条件下。为了提高提取的效率，可以使用超声波等。提取的温度是从室温(例如20℃)到溶剂回流温度的范围内，优选在回流的温度下。提取可连续或间歇进行，间歇提取时可重复1-4次，优选2-3次。
上步结束后，合并滤液，滤去药渣，浓缩至无醇味，合并浓缩液过滤并稀释后通过大孔树脂(D101)，用水或5％乙醇洗脱除掉杂质后，用10-40％乙醇洗脱，优选是20％的乙醇洗脱，蒸干，得到含有50％栀子苷的有效部位。
栀子，加10倍量55％乙醇浸泡24h后渗漉，合并渗漉液，提取液减压浓缩至无醇味，用石油醚脱脂，再用乙酸乙酯，正丁醇翠取，优选使用正丁醇翠取，减压蒸干，得到栀子苷含量过50％有效部位。
本发明因此还涉及以栀子有效部位作为活性成份的药物组合物。该药物组合物可根据本领域公知的方法制备。可通过将栀子有效部位与一种或多种药学上可接受的固体或液体赋形剂和/或辅剂结合，制成适于人或动物使用的任何剂型。栀子有效部位在其药物组合物中的含量通常为0.1-95重量％。
栀子有效部位或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮肤、阴道、直肠等。
给药剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊剂(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、微丸、滴丸、栓剂、膜剂、贴片、气(粉)雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。
栀子有效部位可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
为了将栀子有效部位制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种赋形剂，包括稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂。稀释剂可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素、硫酸钙、磷酸氢钙、碳酸钙等；湿润剂可以是水、乙醇、异丙醇等；粘合剂可以是淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纤维素、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、丙烯酸树脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解剂可以是干淀粉、微晶纤维素、低取代羟丙基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、碳酸氢钠与枸橼酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠等；润滑剂和助流剂可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸盐、酒石酸、液体石蜡、聚乙二醇等。
还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片和多层片。
为了将给药单元制成胶囊剂，可以将有效成分栀子有效部位与稀释剂、助流剂混合，将混合物直接置于硬胶囊或软胶囊中。也可将有效成分栀子有效部位先与稀释剂、黏合剂、崩解剂制成颗粒或微丸，再置于硬胶囊或软胶囊中。用于制备栀子有效部位片剂的各稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、助流剂品种也可用于制备栀子有效部位的胶囊剂。
为将栀子有效部位制成注射剂，可以用水、乙醇、异丙醇、丙二醇或它们的混合物作溶剂并加入适量本领域常用的增溶剂、助溶剂、pH调剂剂、渗透压调节剂。增溶剂或助溶剂可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羟丙基-β-环糊精等；pH调剂剂可以是磷酸盐、醋酸盐、盐酸、氢氧化钠等；渗透压调节剂可以是氯化钠、甘露醇、葡萄糖、磷酸盐、醋酸盐等。如制备冻干粉针剂，还可加入甘露醇、葡萄糖等作为支撑剂。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂或其它添加剂。
栀子有效部位可增强环己酰亚胺、东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠的记忆能力。栀子有效部位单次小鼠灌胃给药量为5g/kg，未见死亡及异常变化，说明栀子有效部位毒副作用低。
为达到用药目的，增强治疗效果，本发明的药物或药物组合物可用任何公知的给药方法给药。
栀子有效部位药物组合物的给药剂量依照所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的个体情况，给药途径和剂型等可以有大范围的变化。一般来讲，栀子有效部位的每天的合适剂量范围为0.001-150mg/Kg体重，优选为0.1-100mg/Kg体重，更优选为1-60mg/Kg体重，最优选为2-30mg/Kg体重。上述剂量可以一个剂量单位或分成几个剂量单位给药，这取决于医生的临床经验以及包括运用其它治疗手段的给药方案。
本发明的栀子有效部位或组合物可单独服用，或与其他治疗药物或对症药物合并使用。当本发明的栀子有效部位与其它治疗药物存在协同作用时，应根据实际情况调整它的剂量。
附图说明
图1.雄性栀子有效部位急性毒性试验肉眼尸检未见异常。
图2，雌性栀子有效部位急性毒性试验肉眼尸检未见异常。
具体实施方式
有效部位的制备
实施例1
栀子1公斤70％乙醇回流提取3遍，每遍1小时，合并提取液，提取液减压浓缩至无醇味，合并浓缩液过滤并稀释10倍后，缓慢通过预先处理好的2kg大孔树脂柱，药液全部通过大孔树脂柱后用蒸馏水洗涤，再用5％乙醇洗脱，除掉杂质，再用5倍柱体积20％乙醇洗脱，收集洗脱液，减压蒸干，得到栀子苷含量过50％有效部位。
实施例2
栀子1公斤加10倍量55％乙醇浸泡24h后渗漉，合并渗漉液，提取液减压浓缩至无醇味，用石油醚脱脂，用正丁醇翠取，减压蒸干，得到栀子苷含量过50％有效部位。
药理实验
实验例1.受试品栀子对环己酰亚胺致小鼠记忆获得障碍动物记忆能力的影响
目的：观察受试品栀子有效部位对记忆获得障碍动物记忆能力的影响。
材料及方法
受试品：栀子有效部位，黄色粉末，用双蒸水溶解。
试剂：环己酰亚胺，sigma公司，批号：091K11001。
多奈派齐(安理申)，法国PFIZER PGM公司制造，卫材(中国)药业有限公司分装，批号：4221903。
动物：昆明种小鼠，雄性，体重20-24克。医科院动物所提供，合格证号：SCXK(京)2004-0001
仪器：。
步骤：小鼠随机分为六组：正常对照组、模型组、多奈派齐(0.75mg/kg)组、栀子有效部位(50mg/kg)、栀子有效部位(25mg/kg)、栀子有效部位(12.5mg/kg)组。灌胃给药，对照组给同体积生理盐水。连续给药三天，末次给药后1h，模型组和给药组i.p.环己酰亚胺(120mg/kg)药物一次，正常对照组i.p.生理盐水。注射后10min，进行避暗训练，记录小鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需的时间(s)。24h后重新测试，记录进入暗室的潜伏期和5min内的电击次数。
结果
模型组第一次触电潜伏期(162.5±105.2s)和5min内触电次数(1.8±1.5次/5min)与正常组小鼠结果(300.0±0s和0±0.0次/5min)比较有极显著性差异(P＜0.01)，说明造模成功。多奈派齐0.75mg/kg第一次触电潜伏期(275.0±82.9s)与模型组比较均有显著性差异；多奈派齐0.75mg/kg、栀子有效部位(25mg/kg)、栀子有效部位(12.5mg/kg)在5min内触电次数(0.1±0.3次，0.4±0.5次，0.7±0.7次)与模型组比较均有显著性差异。栀子有效部位(50mg/kg)第一次触电潜伏期(180.4±112.4s)和5min内触电次数(1.0±1.2次/5min)与模型组比较未见明显差异(P＞0.05)(见表1)
表1：受试品栀子对东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠记忆能力的影响

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
与空白组比较，#P＜0.05，##P＜0.01
结论：栀子有效部位(25mg/kg)、栀子有效部位(12.5mg/kg)可增强环己酰亚胺所致学习记忆障碍小鼠的记忆能力。
实验例2.受试品栀子对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍动物记忆能力的影响
目的：观察受试品栀子有效部位对记忆获得障碍动物记忆能力的影响。
材料及方法
受试品：栀子有效部位，黄色粉末，用双蒸水溶解。
试剂：东莨菪碱，Merck公司，批号K29367747。
多奈派齐(安理申)，法国PFIZER PGM公司制造，卫材(中国)
药业有限公司分装，批号：4221903。
动物：昆明种小鼠，雄性，体重20-24克。医科院动物所提供，合格证号：SCXK(京)2004-0001
仪器：Passive Avoidance Control，大正制药株式会社。
步骤：小鼠随机分为五组：正常对照组、模型组、多奈派齐(0.75mg/kg)组、栀子有效部位(25mg/kg)、栀子有效部位(12.5mg/kg)组。灌胃给药，对照组给同体积生理盐水。连续给药三天，末次给药后1h，模型组和给药组i.p.东莨菪碱(5mg/kg)药物一次，正常对照组i.p.生理盐水。注射后10min，进行避暗训练，记录小鼠从放入明室至进入暗室遇到电击所需的时间(s)。24h后重新测试，记录进入暗室的潜伏期和5min内的电击次数。
结果
模型组第一次触电潜伏期(32.5±24.2s)和5min内触电次数(3.1±1.4次/5min)与正常组小鼠结果(180.2±111.0s和1.0±0.8次/5min)比较有极显著性差异(P＜0.01)，说明造模成功。多奈派齐0.75mg/kg、栀子有效部位(25mg/kg)第一次触电潜伏期(143.8±137.7s，145.5±102.8s)与模型组比较均有显著性差异；多奈派齐0.75mg/kg、栀子有效部位(25mg/kg)在5min内触电次数(1.5±1.6次，1.7±1.3次)与模型组比较均有显著性差异。栀子有效部位(12.5mg/kg)第一次触电潜伏期(79.3±114.5s)和5min内触电次数(2.4±1.9次/5min)与模型组比较未见明显差异(P＞0.05)(见表2)
表2：受试品栀子对东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠记忆能力的影响

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
与空白组比较，#P＜0.05，##P＜0.01
结论：栀子有效部位(25mg/kg)可明显增强东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠的记忆能力。
实验例3栀子有效部位急性毒性试验
试验目的
观察栀子有效部位单次灌胃给药对小鼠的急性毒性反应和死亡情况。
1试验材料
1.1受试药物
栀子有效部位，淡黄色粉末，易溶于水；临用前用生理盐水配制成所需浓度的溶液备用。
1.2受试动物
昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄各半，由北京大学实验动物科学部提供，合格证号SCXK(京)2002-0001。
动物在恒温(24℃)、恒湿(45％)、各12小时明暗周期的饲养室，同性别5只小鼠同笼饲养，用全价颗粒饲料喂养，自由饮水，动物饲养许可证号SYXK(京)2005-0039。
2试验方法和结果
2.1试验方法
取昆明种小鼠20只，体重18～22g，雌雄各半。禁食(不禁水)12小时后，一次性灌胃给药5g/kg(0.2ml/10g)。连续观察一周，记录受试小鼠行为、活动、体重、摄食量、粪便及死亡等情况，处死进行肉眼尸检。
2.2观察指标及试验结果
上述栀子有效部位给药后无小鼠死亡；给药后未见小鼠有异常表现，小鼠均活动正常、毛色光滑、摄食量正常、粪便正常、体重增加、肉眼尸检未见异常(见图1.图2)。给药后每日记录小鼠体重，结果见表3。
表3.栀子有效部位给药后小鼠体重变化(g)

3试验结论
栀子有效部位单次小鼠灌胃给药量为5g/kg，未见死亡及异常变化。栀子有效部位小鼠最大耐受量为5g/kg。