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1、10申请公布号CN104170731A43申请公布日20141203CN104170731A21申请号201410258289722申请日20140611A01H4/0020060171申请人陕西恒富源林业有限公司地址726000陕西省商洛市镇安县木王镇朝阳村八组72发明人马纯54发明名称一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法57摘要本发明公开了一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，属于植物快繁技术领域，包括以下步骤1选取消毒灭菌处理后的12CM茎尖或带芽茎段作为外植体；2将外植体放置于诱导培养基中培养产生丛芽，1520天繁殖出大量丛生芽；3切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁。
2、殖；4经生根培养后，直接放入育苗袋移植获得种苗。本发明解决了美国红树莓苗无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、产量低等问题,无需采集大量外植体来获得无菌苗，且不采取激素混用而达到提高增殖率和减少变异的目的，省去了组培苗营养钵移栽的环节，提高移栽成活率，与传统繁殖方式相比，产量提高约90，对缓解市场供需矛盾有积极意义。51INTCL权利要求书1页说明书4页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书4页10申请公布号CN104170731ACN104170731A1/1页21一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤1选取消毒灭菌处理后的美国红树。
3、莓的茎尖或带芽茎段作为外植体；2将美国红树莓外植体放置于诱导培养基中直接诱导培养产生丛芽；3切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖。4经生根培养后，直接放入育苗袋移植获得美国红树莓种苗。2根据权利要求1所述的一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，其特征在于所述步骤1美国红树莓外植体进行消毒灭菌处理在无菌超净台中，将经洗涤剂清洗过的12CM茎尖或带芽茎段，依次在体积浓度为8090的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗23次。3根据权利要求1所述的一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方。
4、法，其特征在于所述步骤2中所述丛生芽诱导剂培养基是MS固体培养基添加0810MG/KG6苄氨基嘌呤、2535G/KG果糖和46G/KG琼脂；培养条件为温度2325，相对湿度7590，光照时间1012小时/天，光照强度30005000LX。4根据权利要求1所述的一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，其特征在于所述步骤3中所述生根壮苗培养基的配置为1/2MS固体培养基添加0205MG/KG乙酸、5060G/KG香蕉汁、165200G/KG番茄汁、812G/KG活性炭、1025G/KG果糖和46G/KG琼脂；培养条件为温度2325，相对湿度7590，光照时间1012小时/天，光照强度30005。
5、000LX。5根据权利要求1所述的一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，其特征在于所述步骤4中的生根苗移至室外散射光下锻炼610天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒12分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得红树莓种苗。权利要求书CN104170731A1/4页3一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法技术领域0001本发明属于植物快繁技术领域，具体涉及一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法。背景技术0002树莓BLUERASPBERRY又称木莓、覆盆子，是蔷薇科悬钩子属植物，多年生小灌木类，属浆果类果树，。
6、约有450多种，主要分布在北半球的寒带、温带，少数分布在热带、亚热带和南半球。目前，世界树莓发展很快，主要有俄罗斯、美国、智利、澳大利亚、波兰、加拿大、英国等30多个国家。在国际市场上被誉为黄金水果“水果之王”。特别是美国红树莓，由于色美味香，口感独特，且对多种现代病具有良好的预防和治疗效果，欧美人称其为“贵族水果”。我国栽培历史较晚，近两年市场上较为多见。其果实为聚合浆果柔嫩多汁、色泽宜人、风味独特、营养丰富，属于不饱和脂肪酸，可促进前列腺素分泌荷尔蒙。树莓果经榨汁后可以制成果酱、果汁、果酒、果冻等，也可广泛应用于医疗保健、化妆品等方面。树莓栽培周期短、见效快、分枝多、产量高、生长快、受益长。
7、，经济效益显著。随着我国果树业的发展，树莓将成为第三代无污染的绿色保健型水果。红树莓常规的繁殖方法有分根法、分株法、扦插法和压条法等。但上述繁殖方法繁殖速度慢，对母本材料要求高，用量大，还受到季节的限制，难以进行规模化、标准化生产和优良品种的大面积推广。此外，目前运用组织培养方法繁殖生产种苗的方法成本较高、培养周期较长，在育苗过程中采取激素，对种苗的变异性和存活率。因此，需要寻找一种新的成本低、时间短、无激素培养、成活率高的无性繁殖方法来扩大美国红树莓繁殖量，进行美国红树莓苗木的产业化生产，以满足市场需求。本发明采用独特的培养配方，解决了目前美国红树莓苗无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、有。
8、效产量低等问题。本发明之方法高效、快速，周期短、繁殖率高、成本低廉，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，且不采取激素混用而达到提高增殖率和减少变异的目的，省去了组培苗营养钵移栽的环节，提高移栽成活率，与传统繁殖方式相比，产量提高约90，完全实现了美国红树莓优良品种种苗的规模化和标准化生产，对缓解美国红树莓的市场供需矛盾有积极意义。发明内容0003本发明解决的问题在于提供一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，本方法是一种周期短、繁殖率高、无激素培养、成本低廉的无病毒携带的育苗方法。0004本发明是通过以下技术方案来实现0005快速繁殖美国红树莓的方法，包括以下步骤00061选取消毒灭菌处理。
9、后的美国红树莓的茎尖或带芽茎段作为外植体所截取的外植体为12CM茎尖或带芽茎段；00072将美国红树莓外植体放置于诱导培养基中直接诱导培养产生丛芽将外植体转接至丛生芽诱导及增殖培养基，1520天繁殖出大量丛生芽；说明书CN104170731A2/4页400083切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将丛生芽转接至生根壮苗培养基，约20天后，可获得高79CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗；00094经生根培养后，直接放入育苗袋移植获得美国红树莓种苗0010所述步骤1中消毒灭菌方法是在无菌超净台中，将经洗涤剂清洗过的12CM茎尖或带芽茎段，依次在体积浓度为8090的酒精中消毒处理30秒、。
10、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗23次。0011所述步骤2中丛生芽诱导剂增殖培养基的配置为MS固体培养基添加0810MG/KG6苄氨基嘌呤、2535G/KG蔗糖和46G/KG琼脂；培养条件为温度2325，相对湿度7590，光照时间1012小时/天，光照强度30005000LX。0012所述步骤3中所述生根壮苗培养基为1/2MS固体培养基添加0205MG/KG乙酸、5060G/KG香蕉汁、165200G/KG番茄汁、812G/KG活性炭、1025G/KG果糖和46G/KG琼脂；培养条件为温度2325，相对湿度759。
11、0，光照时间1012小时/天，光照强度30005000LX。0013所述步骤4中的生根苗移至室外散射光下锻炼610天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒12分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得红树莓种苗。0014与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果0015本发明采用独特的培养配方，解决了目前美国红树莓苗无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、有效产量低等问题。本发明之方法高效、快速，周期短、繁殖率高、成本低廉，无需通过采集大量外植体来获得无菌苗，且不采取激素混用而达到提高增殖率和减少变异的目的，省去了组培苗营养。
12、钵移栽的环节，提高移栽成活率，与传统繁殖方式相比，产量提高约90，完全实现了美国红树莓优良品种种苗的规模化和标准化生产，对缓解美国红树莓的市场供需矛盾有积极意义。具体实施方式0016下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。0017实施例10018一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，包括以下步骤00191将经洗涤剂清洗过的2CM茎尖，依次在体积浓度为80的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗2次。00202处理后的茎尖转接至丛生芽诱导剂增殖培养基中培。
13、植在MS固体培养基添加08MG/KG6苄氨基嘌呤、25/KG果糖和4G/KG琼脂；培养条件为温度23，相对湿度75，光照时间10小时/天，光照强度3000LX。00213切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将幼苗转接至1/2MS固体培养基添加02MG/KG乙酸、50/KG香蕉汁、165/KG番茄汁、8G/KG活性炭、10/KG果糖和4G/KG琼脂的生根壮苗培养基中培养，培养条件为温度23，相对湿度75，光照时间10小说明书CN104170731A3/4页5时/天，光照强度3000LX，约30天后，可获得高6CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗。00224生根苗移至室外散射光下锻炼6天。
14、后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒2分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得美国红树莓种苗0023实施例20024一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，包括以下步骤00251将经洗涤剂清洗过的1CM带芽茎段，依次在体积浓度为90的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗2次。00262处理后的茎尖转接至丛生芽诱导剂增殖培养基中培植在MS固体培养基添加09MG/KG6苄氨基嘌呤、28/KG果糖和5G/KG琼脂；培养条件为。
15、温度25，相对湿度85，光照时间11小时/天，光照强度4000LX。00273切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将幼苗转接至1/2MS固体培养基添加03MG/KG乙酸、50/KG香蕉汁、185/KG番茄汁、8/KG活性炭、15/KG蔗糖和5G/KG琼脂的生根壮苗培养基中培养，培养条件为温度25，相对湿度90，光照时间11小时/天，光照强度4000LX，约30天后，可获得高6CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗。00284生根苗移至室外散射光下锻炼8天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒1分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比。
16、为5的珍珠岩，即得红树莓种苗0029实施例30030一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，包括以下步骤00311将经洗涤剂清洗过的1CM带芽茎段，依次在体积浓度为90的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗2次。00322处理后的茎尖转接至丛生芽诱导剂增殖培养基中培植在MS固体培养基添加1MG/KG6苄氨基嘌呤、30/KG果糖和6G/KG琼脂；培养条件为温度23，相对湿度85，光照时间11小时/天，光照强度3000LX。00333切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将幼苗转接至1/2。
17、MS固体培养基添加03MG/KG乙酸、60/KG香蕉汁、180/KG番茄汁、8/KG活性炭、12/KG果糖和4G/KG琼脂的生根壮苗培养基中培养，培养条件为温度23，相对湿度85，光照时间12小时/天，光照强度3000LX，约30天后，可获得高6CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗。00344生根苗移至室外散射光下锻炼6天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒1分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得红树莓种苗0035实施例40036一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，包括以下步骤00371将经洗涤剂清洗过的2C。
18、M带芽茎段，依次在体积浓度为80的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗2次。说明书CN104170731A4/4页600382处理后的茎尖转接至丛生芽诱导剂增殖培养基中培植在MS固体培养基添加08MG/KG6苄氨基嘌呤、30/KG果糖和6G/KG琼脂；培养条件为温度23，相对湿度90，光照时间12小时/天，光照强度5000LX。00393切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将幼苗转接至1/2MS固体培养基添加02MG/KG乙酸、60/KG香蕉汁、200/KG番茄汁、8/KG活性炭、15/。
19、KG果糖和4G/KG琼脂的生根壮苗培养基中培养，培养条件为温度25，相对湿度90，光照时间12小时/天，光照强度5000LX，约30天后，可获得高8CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗。00404生根苗移至室外散射光下锻炼8天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒1分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得红树莓种苗。0041实施例50042一种美国红树莓苗的无激素培养及快速繁殖方法，包括以下步骤00431将经洗涤剂清洗过的2CM茎尖，依次在体积浓度为90的酒精中消毒处理30秒、在质量浓度为1的聚维酮碘溶液中灭菌处理5分钟。
20、、在体积浓度为15的次氯酸钠溶液中消毒处理10分钟，之后用去离子水清洗2次。00442处理后的茎尖转接至丛生芽诱导剂增殖培养基中培植在MS固体培养基添加08MG/KG6苄氨基嘌呤、25/KG果糖和6G/KG琼脂；培养条件为温度25，相对湿度75，光照时间12小时/天，光照强度5000LX。00453切割丛生芽放置于生根壮苗培养基中使其大量繁殖将幼苗转接至1/2MS固体培养基添加05MG/KG乙酸、60/KG香蕉汁、200/KG番茄汁、8/KG活性炭、10/KG果糖和6G/KG琼脂的生根壮苗培养基中培养，培养条件为温度25，相对湿度85，光照时间10小时/天，光照强度5000LX，约30天后，可获得高8CM、根系发达、根茎粗壮的美国红树莓苗。00464生根苗移至室外散射光下锻炼6天后，取出生根苗，用清水将苗上培养基洗净，放入质量浓度为1的百菌清溶液中消毒1分钟，移栽至装有腐殖土红土11，其中该混合基质中含有质量比为5的珍珠岩，即得红树莓种苗。说明书CN104170731A。