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1、(10)申请公布号 CN 103649303 A (43)申请公布日 2014.03.19 CN 103649303 A (21)申请号 201280009159.9 (22)申请日 2012.01.12 PTA-12387 2012.01.11 PTA-12384 2012.01.11 PTA-12385 2012.01.11 PTA-12383 2012.01.11 PTA-12386 2012.01.11 61/432,152 2011.01.12 US C12N 1/20(2006.01) A23L 1/28(2006.01) A61K 36/06(2006.01) A61L 2/16。
2、(2006.01) B09C 1/10(2006.01) C02F 3/34(2006.01) C05F 11/08(2006.01) C09K 17/00(2006.01) C12N 1/00(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12P 1/00(2006.01) (71)申请人 伊诺库克技术股份有限公司 地址 加拿大魁北克 (72)发明人 M白瓦特 - 埃克贾德 A费特兹希蒙斯 (74)专利代理机构 中国国际贸易促进委员会专 利商标事务所 11038 代理人 林远成 (54) 发明名称 微生物组合物和方法 (57) 摘要 本发明包。
3、括生物学组合物, 方法和制品。所 公开的组合物、 对场所进行生物治理的方法、 影响 植物生长的方法、 处理表面的方法、 处理液体的方 法、 制备制品的方法、 由制备制品的方法所制备的 制品、 制备食物补充剂的方法、 以及用于食品补充 的方法包括, 分离的细菌、 至少一种分离的酵母、 以及至少一种分离的菌根真菌, 其中细菌包括至 少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中细菌基 于酶谱进行选择, 使得细菌为互补的。 本发明还包 括用于制备混合培养物的方法, 其包括测量一组 微生物的一种或多种酶活性以产生各种微生物的 酶谱, 和选择微生物, 使得各种选择的微生物的酶 谱不同于另一种微生物的酶谱。 (3。
4、0)优先权数据 (85)PCT国际申请进入国家阶段日 2013.08.16 (86)PCT国际申请的申请数据 PCT/IB2012/000833 2012.01.12 (87)PCT国际申请的公布数据 WO2012/101528 EN 2012.08.02 (83)生物保藏信息 (51)Int.Cl. 权利要求书 8 页 说明书 35 页 附图 4 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书8页 说明书35页 附图4页 (10)申请公布号 CN 103649303 A CN 103649303 A 1/8 页 2 1. 一种含微生物的组合物, 包含 : 分离的细。
5、菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种分 离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌基 于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的。 2. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌。 3. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录号 _。 4. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。 5. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _。 6. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述酵母为酿酒酵母。 7. 根据权利要求 。
6、1 所述的组合物, 其中所述酵母为称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _。 8. 根据权利要求 1 所述的组合物, 还包含分离的光合细菌。 9. 根据权利要求 8 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。 10. 根据权利要求 8 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌, IN-RP1, 登 录号 _。 11. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括分离的微生物的 混合培养物。 12. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括混合培养物, IN-M1, 登录号 _。 13. 根据权利要求 1 所述的组合物, 其中所述含微生。
7、物的组合物包括含沼泽红假单胞 菌、 枯草芽孢杆菌、 铜绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆 菌、 瑞士乳杆菌和酪蛋白乳杆菌的混合培养物。 14. 一种在某一场所进行生物治理的方法, 包括 : a) 向包含至少一种污染物的场所提供含微生物的组合物, 其中所述含微生物的组合物 包含至少一种分离的细菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种分离的菌根真菌, 其中所述 细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌基于酶谱进行选择, 使得所 述细菌为互补的 ; b) 允许所述含微生物的组合物的所述微生物生长和繁殖一段时间 ; 以及 c) 减少所述场所的至少一种。
8、污染物的至少一部分。 15. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌。 16. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录号 _。 17. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。 18. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _。 19. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述酵母为酿酒酵母。 20. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述酵母为称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _。 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 。
9、2 2/8 页 3 21. 根据权利要求 14 所述的组合物, 还包含分离的光合细菌。 22. 根据权利要求 21 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。 23. 根据权利要求 21 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌, IN-RP1, 登 录号 _。 24. 根据权利要求 14 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括分离的微生物的 混合培养物。 25. 根据权利要求 14 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括混合培养物, IN-M1, 登录号 _。 26. 根据权利要求 14 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括含沼泽红假单胞 菌、 枯草芽孢杆。
10、菌、 铜绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆 菌、 瑞士乳杆菌和酪蛋白乳杆菌的混合培养物。 27.根据权利要求14所述的方法, 还包括d)在提供所述含微生物的组合物后预定的时 间, 测量所述场所的至少一种污染物的水平或量并将其与在提供所述含微生物的组合物前 获得的所述场所的至少一种污染物的水平或量的测量值进行比较。 28.根据权利要求14所述的方法, 还包括d)在提供所述含微生物的组合物后预定的时 间, 评估所述污染场所的状况的至少一种特征并将其与在提供所述含微生物的组合物前所 述场所的状况的所述特征进行比较。 29. 根据权利要求 28 所述的方法, 其。
11、中评估所述场所的状况的至少一种特征包括测量 所述场所的至少一种特征, 其中特征包括所述场所的颜色、 气味、 清洁度、 植物生长的量、 微 生物生长的量、 动物生长的量、 生物固体的量以及将所述特征测量值与在提供所述含微生 物的组合物前获取的所述场所的状况的所述特征的测量值进行比较, 以提供所述场所的状 况变化的测量值。 30. 根据权利要求 14 所述的方法, 其中所述场所包括矿山、 市政水系统、 受污染的场 所、 被沾污的场所、 化粪池系统、 高尔夫球场、 静水、 湖泊、 池塘、 封闭的水体、 活水、 溪流、 移 动的水体、 循环的封闭水体、 垃圾填埋场渗出液、 尾矿、 工业废水或土壤、 封。
12、闭的土体、 从受 污染的场所取出的封闭物料、 水坝后方的水或土壤、 农场或动物设施中的水或土壤、 农场或 植物设施中的水或土壤、 诸如垃圾填埋场的垃圾处理厂的水或土壤、 市政水和废物处理系 统、 商业水和废物处理系统、 工业水和废物处理系统或私人水和废物处理系统。 31. 根据权利要求 14 所述的方法, 还包括 i) 在向所述场所添加所述含微生物的组合 物前, 从所述场所获得样品并将所述样品的至少一部分添加到所述含微生物的组合物中以 形成组合的含微生物的组合物, 并允许所述组合的含微生物的组合物中的微生物生长和繁 殖。 32.根据权利要求31所述的方法, 还包括向所述场所提供权利要求32所述。
13、的组合的含 微生物的组合物。 33. 一种影响植物生长的方法, 包括 : a) 向植物生长的场所、 植物或特定生长阶段的植物或其组合提供含微生物的组合物, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分离的细菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种 分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌 基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的 ; 以及 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 3 3/8 页 4 b) 允许所述含微生物的组合物的微生物生长和繁殖一段时间。 34. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌。 35. 根据权利要求 3。
14、3 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录号 _。 36. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。 37. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _。 38. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述酵母为酿酒酵母。 39. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述酵母为称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _。 40. 根据权利要求 33 所述的组合物, 还包含分离的光合细菌。 41. 根据权利要求 40 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。 42. 根据权利要求。
15、 40 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌, IN-RP1, 登 录号 _。 43. 根据权利要求 33 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括分离的微生物的 混合培养物。 44. 根据权利要求 33 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括混合培养物, IN-M1, 登录号 _。 45. 根据权利要求 33 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括含沼泽红假单胞 菌、 枯草芽孢杆菌、 铜绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆 菌、 瑞士乳杆菌和酪蛋白乳杆菌的混合培养物。 46. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中提供包括将所。
16、述含微生物的组合物施加到植物 的种子。 47. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中提供包括将所述含微生物的组合物施加到植物 的根部。 48. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中提供包括将所述含微生物的组合物施加到植物 的叶子和茎干。 49. 根据权利要求 33 所述的方法, 还包括 c) 增强种子发芽。 50. 根据权利要求 33 所述的方法, 还包括 c) 增强根部生产。 51.根据权利要求33所述的方法, 还包括c)与未处理的植物相比增加经处理的植物的 单株产量。 52.根据权利要求33所述的方法, 还包括c)与未处理的植物相比增加经处理的植物的 生物量。 53.根据权利要求33所。
17、述的方法, 还包括c)与未处理的植物相比增加经处理的植物的 果实生产。 54.根据权利要求33所述的方法, 还包括c)与未处理的植物相比增加经处理的植物的 生产周期。 55.根据权利要求33所述的方法, 还包括c)与未处理的植物相比增加经处理的植物的 生产生命周期。 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 4 4/8 页 5 56. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述方法用于在水培条件下生长的植物。 57. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述方法用于在温室中生长的植物。 58. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述方法用于在田野或室外生长的植物。 59. 根据权。
18、利要求 33 所述的方法, 其中所述方法用于在气培条件或组合水培与气培条 件下生长的植物。 60. 根据权利要求 33 所述的方法, 其中所述方法用于垂直耕种。 61. 一种处理表面的方法, 包括 : a) 向表面提供含微生物的组合物, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分离的细 菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆 菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的 ; 以及 b) 允许所述含微生物的组合物的微生物生长和繁殖一段时间, 其中所述微生物与内生 细菌 (无论是原来存在的还是随着时间的推移从环境中添加的) 竞。
19、争至少一种包括物理空 间、 营养物、 水、 氧或光或化学能源或它们的组合的环境因素, 或者其中所述含微生物的组 合物的所述微生物捕食并移除原来存在于所述表面上的微生物。 62. 根据权利要求 2 所述的方法, 其中所述含微生物的组合物降低原来存在的微生物 的数量。 63. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌。 64. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录号 _。 65. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。 66. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-B。
20、S1, 登录号 _。 67. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述酵母为酿酒酵母。 68. 根据权利要求 61 所述的方法, 其中所述酵母为称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _。 69. 根据权利要求 61 所述的组合物, 还包含分离的光合细菌。 70. 根据权利要求 69 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。 71. 根据权利要求 69 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌, IN-RP1, 登 录号 _。 72. 根据权利要求 61 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括分离的微生物的 混合培养物。 73. 根据权利要求 61 所述的组合物, 。
21、其中所述含微生物的组合物包括混合培养物, IN-M1, 登录号 _。 74. 根据权利要求 61 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括含沼泽红假单胞 菌、 枯草芽孢杆菌、 铜绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆 菌、 瑞士乳杆菌和酪蛋白乳杆菌的混合培养物。 75. 一种处理流体的方法, 包括 : a) 向流体提供含微生物的组合物, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分离的细 菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 5 5/8 页 6 菌和至少一种芽孢杆菌。
22、, 其中所述细菌基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的 ; 以及 b) 允许所述含微生物的组合物的微生物生长和繁殖一段时间, 其中所述微生物与内生 细菌 (无论是原来存在的还是随着时间的推移从环境中添加的) 竞争至少一种包括物理空 间、 营养物、 水、 氧或光或化学能源或它们的组合的环境因素, 或者其中所述含微生物的组 合物的所述微生物捕食并移除原来存在于所述流体中的微生物。 76. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述含微生物的组合物降低所述液体中大肠菌 群的数量。 77. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌。 78. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中。
23、所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录号 _。 79. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌。 80. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _。 81. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述酵母为酿酒酵母。 82. 根据权利要求 75 所述的方法, 其中所述酵母为称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _。 83. 根据权利要求 75 所述的组合物, 还包含分离的光合细菌。 84. 根据权利要求 83 所述的组合物, 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。 85. 根据权利要求 83 所述的组合物,。
24、 其中所述光合细菌为沼泽红假单胞菌, IN-RP1, 登 录号 _。 86. 根据权利要求 75 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括分离的微生物的 混合培养物。 87. 根据权利要求 75 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括混合培养物, IN-M1, 登录号 _。 88. 根据权利要求 75 所述的组合物, 其中所述含微生物的组合物包括含沼泽红假单胞 菌、 枯草芽孢杆菌、 铜绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆 菌、 瑞士乳杆菌和酪蛋白乳杆菌的混合培养物。 89. 一种制备包含含微生物的组合物的制品的方法, 包括 : a) 向制品的表面。
25、添加含微生物的组合物, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分 离的细菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一 种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的。 90. 根据权利要求 1 所述的方法, 其中对所述含微生物的组合物和表面进行干燥以将 所述含微生物的组合物附着到所述表面。 91. 根据权利要求 89 所述的方法, 还包括处理所述表面以有助于附着所述含微生物的 组合物。 92. 根据权利要求 89 所述的方法, 还包括对所述含微生物的组合物添加一种或多种组 分以有助于其附着到所述表面。 93. 根据权利要求 89。
26、 所述的方法, 还包括向所述含微生物的组合物和所述表面两者添 加一种或多种组分以有助于所述含微生物的组合物附着到所述表面。 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 6 6/8 页 7 94. 根据权利要求 89 所述的方法, 其中所述表面为玻璃珠、 惰性材料、 织造材料、 非织 造材料、 诸如植物材料的天然材料、 椰垫、 二氧化硅珠、 聚合物材料、 植物容器、 容器、 过滤器 结构、 多孔惰性粒子或沸石。 95. 一种通过权利要求 89 所述的方法制备的制品。 96. 根据权利要求 89 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录 号 _, 所述芽孢杆菌为枯草芽。
27、孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _, 所述酵母为 称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _, 所述组合物还包含光合细菌, 沼泽红假单 胞菌, IN-RP1, 登录号 _, 或者所述组合物包括含有混合培养物, IN-M1, 登录号 _ 的分离微生物的混合培养物, 或者包括含有沼泽红假单胞菌、 枯草芽孢杆菌、 铜 绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆菌、 瑞士乳杆菌和酪 蛋白乳杆菌的混合培养物。 97. 一种制备食品补充剂的方法, 包括 : 使含微生物的组合物生长到特定的细胞浓度, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分离的细菌、 至少一种分离的酵母以及。
28、至少一种 分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌 基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的, 以及从所述微生物或培养基中分离因子。 98. 根据权利要求 97 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录 号 _, 所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _, 所述酵母为 称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _, 所述组合物还包含光合细菌, 沼泽红假单 胞菌, IN-RP1, 登录号 _, 或者所述组合物包括含有混合培养物, IN-M1, 登录号 _ 的分离微生物的混合培养物, 或者包括含有沼泽红假单胞菌、 枯。
29、草芽孢杆菌、 铜 绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆菌、 瑞士乳杆菌和酪 蛋白乳杆菌的混合培养物。 99. 一种制备食品补充剂的方法, 包括 : 使含微生物的组合物生长到特定的细胞浓度, 其中所述含微生物的组合物包含至少一种分离的细菌、 至少一种分离的酵母以及至少一种 分离的菌根真菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌 基于酶谱进行选择, 使得所述细菌为互补的, 以及干燥并包装用作食品补充剂的所述组合 物。 100. 根据权利要求 99 所述的方法, 其中所述乳杆菌为瑞士乳杆菌, IN-LH1, 登录 号 _, 所述芽孢杆。
30、菌为枯草芽孢杆菌, IN-BS1, 登录号 _, 所述酵母为 称为 IN-SC1 的酿酒酵母, 登录号 _, 所述组合物还包含光合细菌, 沼泽红假单 胞菌, IN-RP1, 登录号 _, 或者所述组合物包括含有混合培养物, IN-M1, 登录号 _ 的分离微生物的混合培养物, 或者包括含有沼泽红假单胞菌、 枯草芽孢杆菌、 铜 绿假单胞菌、 酿酒酵母、 米曲霉、 产朊假丝酵母、 乳酸链球菌、 植物乳杆菌、 瑞士乳杆菌和酪 蛋白乳杆菌的混合培养物。 101. 一种用于食品补充的方法, 包括向动物、 植物或人类食物添加含微生物的组合物, 所述含微生物的组合物包含分离的细菌、 至少一种分离的酵母以及至。
31、少一种分离的菌根真 菌, 其中所述细菌包括至少一种乳杆菌和至少一种芽孢杆菌, 其中所述细菌基于酶谱进行 选择, 使得所述细菌为互补的。 102. 一种制备混合培养物的方法, 包括 : 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 7 7/8 页 8 a) 测量多种类型或物种的微生物的一种或多种酶活性以形成各微生物的酶谱, 其中酶 谱包括一种或多种酶和所述一种或多种酶针对特定底物的活性水平 ; b) 选择 a) 中的两种或更多种微生物, 其中各选定微生物的酶谱不同于另一微生物的 酶谱, 使得所述谱的至少一种酶和 / 或所述酶的至少一种酶活性只见于所述混合培养物中 的一种微生物 ; c) 使所。
32、述选定的微生物在培养基中生长形成孵育混合物。 103. 根据权利要求 102 所述的方法, 还包括 i) 测量所述孵育混合物的特征。 104. 根据权利要求 103 所述的方法, 其中测量所述孵育混合物的特征包括测量一种或 多种选定微生物被一种或多种其他选定微生物的捕食、 测量由一种或多种微生物释放或产 生的因子或蛋白、 pH 变化、 或由一种或多种选定微生物分泌的胞外酶及其对一种或多种其 他选定微生物的影响、 测量所述混合物中一种或多种选定微生物的每毫升细胞数、 测定一 种或多种选定微生物的生长速率, 或特征和测量值的组合。 105. 根据权利要求 103 所述的方法, 还包括 ii) 使用。
33、所述孵育混合物的测得特征确定 是否要将一种或多种微生物从所述孵育混合物中移除或是否要将一种或多种微生物加入 所述孵育混合物。 106. 根据权利要求 105 所述的方法, 其中当要将一种或多种微生物从所述孵育混合物 中移除时, 所述方法还包括 iii) 杀灭 c) 的所述孵育混合物 ; 以及 iv) 重复 a) 至 c) 的步骤 以制备包含权利要求 105 中所鉴定的微生物的新孵育混合物。 107. 根据权利要求 105 所述的方法, 其中当要将一种或多种微生物加入所述孵育混合 物时, 所述方法还包括将一种或多种分离的微生物加入所述孵育混合物, 以及使所述混合 物生长到预定的细胞浓度以产生混合。
34、培养物, 以及任选地包装所述混合培养物的全部或一 部分。 108. 根据权利要求 106 所述的方法, 其中将杀灭和重复步骤 a) 至 c) 的步骤重复一次 或多次。 109.根据权利要求102所述的方法, 还包括d)使所述孵育混合物的所述细胞生长到特 定浓度以形成各个混合培养物。 110. 根据权利要求 102 所述的方法, 还包括 e) 制备一个或多个混合培养物以及 f) 将 各个混合培养物组合形成混合培养物。 111. 根据权利要求 110 所述的方法, 还包括 g) 使所述混合培养物生长到特定浓度 ; 以 及 h) 包装所述混合培养物的全部或一部分。 112. 根据权利要求 110 所。
35、述的方法, 其中 f) 还包括 i) 使所述混合培养物生长形成孵 育混合培养物以及测量所述孵育混合培养物的特征。 113. 根据权利要求 112 所述的方法, 其中测量所述孵育混合培养物的特征包括测量一 种或多种选定微生物被一种或多种其他选定微生物的捕食、 测量因子、 pH 变化或由一种或 多种选定微生物分泌的胞外酶及其对一种或多种其他选定微生物的影响、 测量所述混合物 中一种或多种选定微生物的每毫升细胞数、 测定一种或多种选定微生物的生长速率, 或测 量值的组合。 114. 根据权利要求 112 所述的方法, 还包括 ii) 使用所述孵育混合培养物的测得特征 确定是否要将一种或多种微生物从所。
36、述孵育混合培养物中移除或是否要将一种或多种微 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 8 8/8 页 9 生物加入所述孵育混合培养物, 或是否不对微生物作出变化。 115. 根据权利要求 114 所述的方法, 其中当要将一种或多种微生物从所述孵育混合培 养物中移除时, 所述方法还包括 iii) 杀灭权利要求 9 的所述孵育混合培养物 ; 以及 iv) 重 复至少权利要求 110、 112、 113 和 114 的步骤, 以制备包含权利要求 114 中所确定的至少一 种微生物的新孵育混合物。 116. 根据权利要求 115 所述的方法, 其中将杀灭以及重复至少权利要求 110、 112。
37、、 113 和 114 的步骤的步骤重复一次或多次。 117. 根据权利要求 114 所述的方法, 其中当要将一种或多种微生物加入所述孵育混合 培养物时, 所述方法还包括将一种或多种分离的微生物加入所述孵育混合培养物, 以及使 所述孵育混合培养物生长到预定的细胞浓度以产生混合培养物, 以及任选地包装所述混合 培养物的全部或一部分。 权 利 要 求 书 CN 103649303 A 9 1/35 页 10 微生物组合物和方法 0001 相关申请案 0002 本申请要求于 2011 年 1 月 12 日提交的美国临时专利申请第 61/432152 号的优先 权的利益, 其以其整体通过引用并入本文。。
38、 技术领域 0003 本发明关于包含微生物的组合物和方法, 所述组合物和方法例如用于生物治理。 更具体地, 本发明包括含微生物 (比如细菌混合物) 的组合物和方法, 以用于多种目的。例 如, 有效地治理土壤和水源和减少化学和有机废物以及降低来自粪肥、 化粪池、 污水、 油沾 污和其他污染物的环境风险。 另外, 本发明的组合物和方法可用于持续地管理土壤和水, 以 及修复受污染或沾污所影响的生态系统。 0004 发明背景 0005 诸如危险的、 沾污的或毒性的物质或废物的污染物是美国和世界范围国家的健康 和安全问题。 政府机构、 商业公司、 军方和消费者正在寻求可用于去除这些危险的和沾污的 物质的。
39、更经济有效的技术。并且, 环境法规正在作出修改以对土壤和水污染进行可持续的 管理。 0006 污染物由行星上的人类活动持续地产生。并且, 自然界原因可释放或造成环境中 的污染物。油和放射性元素被突然释放到环境中, 且自然灾害, 诸如洪水, 在其水流中造成 沾污区域。除了目前产生的废弃物质外, 存在来自过去人类和自然界活动的大量污染。 0007 净化环境的成本是惊人的。这些成本是发达国家的经济的浪费, 且对于较贫穷的 国家几乎是不可逾越的问题。 用于去除来自环境的危险的或污染的废物的许多现代技术需 要跨越长距离运输并涉及精密的机械或经验丰富的人员, 其均增加了成本、 环境污染, 且不 支持地方社。
40、区。 0008 废物处理的目前方法通常不足以治理污染的空气、 土壤或水。 对 于一些废物可使 用化学处理, 但可能存在由于处理产生的危险的副产物、 浸出液或污泥。通过诸如稳定化、 固化或封装的方法可分离或改变废物。 但是, 在这些方法中仅封闭了废物, 并未将其销毁或 转换。此外, 产生了封闭的废物的贮存的问题。 0009 需要的是可进行生物治理的组合物和方法, 所述生物治理比如在污染的或沾污的 场所进行, 或为了治理具有大量不需要的生物物质或其他污染或沾污的化合物的诸如土壤 或水的物质, 或为了增强局部自然环境的健康和可持续性, 所述组合物和方法可应用于多 种环境。甚至更理想地, 可能是生物治。
41、理系统, 其不仅可能去除或稳定污染的废物, 而且还 可能能够将一些废物转化为可用的产品。还需要的是用于增强生物过程 (比如增强植物生 长) 的方法和组合物。 发明概要 0010 本发明包括含诸如细菌的微生物的组合物和方法, 例如, 以用于环境的处理, 用于 增强的植物生长、 污染物的减少、 生物治理、 不需要的植物或微生物物种的减少和诸如食物 说 明 书 CN 103649303 A 10 2/35 页 11 补充剂、 营养品、 药妆品、 化妆品和药剂的天然产品的产生。本发明的组合物和方法可包括 提供给环境的含微生物的组合物和 / 或附着、 粘附或紧密结合于表面的含微生物的组合 物, 其中所述。
42、表面可以是活的生物体, 比如根茎、 根丝和 / 或根, 或其他植物或动物表面, 或 惰性表面比如玻璃珠、 壳、 植物体、 塑料、 金属、 木材、 陶瓷和织造或非织造材料。 本发明包括 可用于控制和减少静水中的污染和沾污的组合物和方法, 所述静水比如封闭的水体, 包括 但不限于湖泊和池塘。本发明包括可用于控制和减少活水中的污染和沾污的组合物和方 法, 所述活水比如流动的水体。 0011 本发明包括可用于受烃污染的场所的生物治理的组合物和方法, 所述烃包括但不 限于, 油和有机溶剂, 其中场所可包括固体, 土壤、 液体、 水体或固体和液体的混合物。 0012 本发明包括可用于改善和净化烃污染的野生。
43、生物的组合物和方法。 本发明包括可 用于土壤的生物治理的组合物和方法。 0013 本发明包括可用于商业、 城市和居民化粪池系统的处理或管理, 和生物污泥的减 少。 0014 本发明包括可用于城市和工业废水的处理、 用于城市和工业废水的处理设备的失 败的减少, 和城市或工业废水的管理的组合物和方法。本发明包括可用于在工业、 矿业、 商 业、 私人或个体工程中使用的水的再循环的组合物和方法。 0015 本发明包括可用于水坝封闭的水的处理的组合物和方法。 0016 本发明包括可用于控制由场所生成的气味, 和加速堆肥设施中的微生物进程以及 用于处理来自填埋的浸出液的组合物和方法。 0017 本发明包括。
44、可用于受烃、 溶剂、 病原微生物有机体、 动物粪便或其他有机废物污染 的土壤的去污染的组合物和方法。本发明包括可用于土壤和水的去污染的组合物和方法, 尤其是由自然灾害产生的或由居住在无适当的废物控制设施的不卫生的条件下的人产生 的污染的土壤或水。 0018 本发明包括可用于动物在其中繁殖、 饲养、 生活或被屠宰的设施处生成的动物粪 便的处理的组合物和方法, 所述设施比如农场, 和工业农业联合厂, 例如, 牛奶生产中的乳 牛场、 鸡或蛋生产设施、 猪生产设施、 宠物寄养和看护设施, 以及其他商业或个体农场或动 物收容场所。 0019 本发明包括可用于构建和维持健康土壤环境的组合物和方法。 本发明。
45、包括用于调 节土壤并维持可任选地在最低限度的化学制剂输入下支持植物的生长的平衡的且可持续 的土壤生态。 本发明增强了植物生长, 支持植物成熟和增高的产量, 快速的种子发芽和增高 的生物量。 0020 本发明包括可用于封闭的环境中的霉菌的治理的组合物和方法, 所述封闭的环境 比如房间或建筑物, 或在外部的位置中, 比如在建筑物的表面上, 且例如这样的组合物和方 法可用于已受洪水的影响的区域或用于高湿度的区域中。 0021 本发明包括用于提高土壤的质量的组合物和方法。 本发明包括协助植物生长和增 强种子发芽、 根部生产、 植物的增高的产量、 增高的结果、 在一个季节或贯穿植物的生产贮 藏寿命中植物。
46、延长的生产和增 高的植物的萌发势和生物量的组合物和方法。 0022 本发明包括可用于在植物中控制昆虫和昆虫传播疾病的组合物和方法。 本发明包 括可用于蜜蜂养殖的组合物和方法。 说 明 书 CN 103649303 A 11 3/35 页 12 0023 本发明包括可用于水培或气培农业或结合水培和气培方法的受控的植物生长系 统的技术中的组合物和方法。本发明包括可用于水产养殖或鱼类养殖的组合物和方法。本 发明包括可用于垂直耕种的过程的组合物和方法。 0024 本发明包括可用于工业副产物的治理的组合物和方法, 所述副产物比如来自建筑 工业的副产物, 例如, 已经处理的木材, 来自包括防御来源或医院来。
47、源的任何来源的核废物 的副产物, 和可利用本发明的组合物来处理的其他工业废物。本发明包括可用于养殖或饲 养动物的组合物和方法。 0025 本发明包括可用于采矿业的组合物和方法。本发明包括可用于医疗保健业的组 合物和方法, 例如通过提供从植物或微生物组合物或其组合中提取或纯化的天然来源的产 品, 包括食物补充剂、 营养品、 药品、 药妆品和化妆品。 本发明包括可用作人类或动物消耗或 使用的产品中的添加剂的组合物。 0026 本发明包括可用于家用装置诸如家庭用品的组合物和方法。 本发明包括可用于多 种纳米技术诸如本文所描述的含微生物组合物或微生物的纳米颗粒递送的组合物和方法。 0027 附图简述 。
48、0028 图 1 显示了代表某些细菌的酶活性检验的图表。 0029 图 2 是显示利用本发明的组合物处理之后大肠杆菌类的减少的图。 0030 图 3A 和 B 是显示在利用本发明的组合物处理之后场所中氮转移 (A) 和硝酸盐增 高 (B) 的图。 0031 图 4 是显示在利用本发明的组合物处理之后场所中的汞水平的图。 0032 图 5 是显示在利用本发明的组合物处理之后场所中的甲苯水平的 图。 具体实施方式 0033 本发明包括含微生物有机体的组合物和方法, 其可用于包括但不限于生物治理和 健康生态系统的形成维持的方法中。组合物可包括微生物的混合物, 包括细菌、 真菌、 藻类 和 / 或其他内源微生物或外源微生物, 其全部形成微生态系统, 具有其成员的作用。目前认 为, 虽然不受任何特定理论所束缚地, 本发明的组合物和方法增强植物、 土壤真菌和土壤细 菌的营养根之间天然存在的相互共生。 本发明的组合物和方法可包括分离的微生物的混合 物, 且可用作外源微生物和 / 或微生物的内源群落的运载体和 / 或递送系统。 0034 本发明的组合物和方法可作用于旁分泌和 / 或相互再生形式以修复沾污的或污 染的环境的微。