一种天敌昆虫滞育解除方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102771445 A (43)申请公布日 2012.11.14 CN 102771445 A *CN102771445A* (21)申请号 201210279607.9 (22)申请日 2012.08.07 A01K 67/033(2006.01) (71)申请人 中国农业科学院植物保护研究所 地址 100081 北京市海淀区中关村南大街 12 号 (72)发明人 张礼生 陈红印 刘爱萍 王伟 (74)专利代理机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 代理人 关畅 任凤华 (54) 发明名称 一种天敌昆虫滞育解除方法 (57) 摘要 本发明公开了一种七星瓢虫。

2、的滞育诱导及解 除方法。该方法包括如下步骤 ： 将七星瓢虫的成 虫置于温度 18、 光周期 L10:D14 的条件下进行 诱导， 使所述七星瓢虫进入滞育态 ；（2）将步骤 （1） 滞育后的所述七星瓢虫转入温度 24、 光周 期 L16:D8 的条件下， 恢复发育。本发明所提供的 七星瓢虫滞育诱导及解除方法， 滞育诱导率接近 100%， 滞育解除在7.52-8.62天即可完成。 本发明 对七星瓢虫的大规模扩繁， 延长其产品货架期及 在田间的防控作用时间， 掌握天敌昆虫的发育特 点与发生动态， 提高害虫防治效率， 加深对天敌昆 虫发育机制的认识， 探索昆虫对环境的适应机制 及进化途径等均具有重要意。

3、义。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 9 页 附图 2 页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 9 页 附图 2 页 1/1 页 2 1. 一种七星瓢虫滞育诱导及滞育解除方法， 包括如下步骤 ： （1） 将七星瓢虫的成虫置于温度 18、 光周期 L10:D14 的条件下进行诱导， 使所述七星 瓢虫进入滞育态 ； （2） 将步骤 （1） 滞育后的所述七星瓢虫转入温度 24、 光周期 L16:D8 的条件下， 恢复 发育。 2. 根据权利要求 1 所述的方法， 其特征在于 ： 所述成虫为羽化一天内的成虫。 3. 根据权利要求 。

4、2 所述的方法， 其特征在于 ： 所述成虫为羽化 12 小时内的成虫。 4. 根据权利要求 1-3 中任一所述的方法， 其特征在于 ： 步骤 （1） 中所述诱导的时间为 240h。 5. 一种七星瓢虫滞育解除方法， 包括如下步骤 ： 将滞育后的七星瓢虫转入温度 24、 光周期 L16:D8 的条件下， 恢复发育。 6. 根据权利要求 1-5 中任一所述的方法， 其特征在于 ： 所述恢复发育的时间为 7.52-8.6 天。 权 利 要 求 书 CN 102771445 A 2 1/9 页 3 一种天敌昆虫滞育解除方法 技术领域 0001 本发明属于生物技术领域， 涉及一种七星瓢虫的滞育解除方法，。

5、 特别涉及一种七 星瓢虫的滞育诱导及滞育解除的方法。 背景技术 0002 我国每年因农业病虫害导致的作物产量损失占总损失的 1015%， 实现农业病虫害 科学治理， 对于保障国家粮食安全战略实施、 促进农业丰产具有重要的经济、 社会效益。蚜 虫是农业生产第一大害虫， 全球每年因蚜虫造成的损失将近 50 亿美元， 当前主要是依赖于 化学杀虫剂防治蚜类危害。 0003 利用天敌昆虫防治蚜虫， 通过自然界中的生物控制作用， 能持续控制蚜虫危害， 将 蚜虫密度维持在经济危害水平之下， 结合应急性的化学紧急处理措施， 可以从根本上遏制 蚜类害虫的危害。 0004 瓢虫是捕食蚜虫的重要天敌昆虫， 对蚜虫的。

6、自然控制效果极为显著， 其在农林业 生产中发挥着不可替代的重要作用。利用瓢虫防治蚜虫有利于减少化学农药的使用， 保护 环境， 维持生态平衡和保护生物多样性， 对农业可持续发展战略的实施具有重要意义。 瓢虫 的食性复杂， 可分为植食性、 捕食性和菌食性等， 其中捕食性瓢虫所占比例较大。 0005 七星瓢虫是非常优良的捕食性瓢虫， 七星瓢虫广泛分布于我国东北、 华北、 华中、 西北、 华东和西南等一些省区， 在北京、 辽宁、 吉林、 黑龙江、 河北、 山东、 山西、 河南、 陕西、 江苏、 浙江、 上海、 湖北、 湖南、 江西、 福建、 广东、 四川、 云南、 青海、 新疆、 西藏、 内蒙古等地均。

7、 有， 常见于农田、 森林、 园林、 果园等处。另记载于蒙古、 朝鲜、 日本、 原苏联、 印度及欧洲地 区。产卵于有蚜虫的植物寄主上。成虫和幼虫均以多种蚜虫、 木虱等为食。20 世纪 70 年代 在黄河下游已开始用助迁法防治棉花和小麦蚜虫， 90 年代开始人工繁殖， 并用于生产。该 虫一年可发生多代， 每年发生世代数因地区不同而异， 例如， 在河南安阳地区每年发生 6-8 代 ； 北方寒冷地区， 每年发生世代数则较少。七星瓢虫成虫寿命长， 平均 77 天， 以成虫和幼 虫捕食蚜虫、 叶螨、 白粉虱、 玉米螟、 棉铃虫等幼虫和卵。 七星瓢虫1只雌虫可产卵5674475 粒， 平均每天产卵 78.。

8、4 粒， 最多可达 197 粒。据统计， 七星瓢虫对烟蚜的平均日取食量为 ： 1 龄 10.7 头， 2 龄 33.7 头， 3 龄 60.5 头， 4 龄 124.5 头， 成虫 130.8 头， 七星瓢虫近 80 天的 生命期可取食上万头蚜虫。 此外， 七星瓢虫对人、 畜和天敌动物无毒无害， 无残留， 不污染环 境。正是由于七星瓢虫生殖力强， 自然寄生率高， 世代周期短， 适应性强， 易于人工繁殖， 并 能通过滞育调控技术进行长期的商品储存， 这些优良性状使其成为利用价值很高的天敌昆 虫之一。 0006 包括七星瓢虫在内的天敌昆虫的生产， 均需要发育调控技术， 即控制什么时候让 天敌停止发。

9、育 （类似于熊的冬眠） 、 什么时候让天敌昆虫发育 （类似于熊从冬眠状态复苏） ， 这对于周年扩繁天敌昆虫意义极其重要。没有滞育调控技术， 往往造成天敌昆虫在害虫发 生前就已死亡， 或害虫发生时天敌昆虫产品还没生产出来， 这恰恰是目前生物防治领域中 严重制约天敌昆虫产业化生产和大面积应用的瓶颈因素。 说 明 书 CN 102771445 A 3 2/9 页 4 0007 七星瓢虫近年来在许多国家被相继开发应用， 并取得了显著的生态效益和经济效 益， 在蚜虫的生物防治中发挥了不可替代的防控作用。 但在实际生产应用中， 常存在扩繁周 期短， 产品不能长期贮存及不能适时应用、 成虫滞育而影响扩繁效率。

10、等问题， 成为制约七星 瓢虫规模化生产应用的技术瓶颈， 而解决以上问题要基于阐明影响其滞育的环境因子 （主 要是温度和光周期） 的调控作用， 以掌握调控其滞育诱导、 持续与解除的相关技术。因此， 开 展七星瓢虫的滞育调控技术研究， 不仅能在生产实践中促进七星瓢虫的大规模扩繁， 延长 其产品货架期及在田间的防控作用时间， 也有助于掌握天敌昆虫的发育特点与发生动态， 提高害虫防治效率， 还有助于加深对天敌昆虫发育机制的认识， 探索昆虫对环境的适应机 制及进化途径。 发明内容 0008 本发明的目的是提供一种七星瓢虫的滞育诱导及滞育解除方法， 。 0009 本发明所提供的七星瓢虫滞育诱导及滞育解除方。

11、法， 具体可包括如下步骤 ： 0010 （1） 滞育诱导 ： 将七星瓢虫的成虫置于温度 18、 光周期 L10:D14 的条件下进行诱 导， 使所述七星瓢虫进入滞育态 ； 0011 所述成虫对于雌虫来说具体均可为产卵前期成虫 （自羽化至产卵之间的时期， 属 于成虫期中的一段） ； 所述产卵前期成虫以羽化一天内的成虫滞育效果较佳， 以羽化 12 小时 内的成虫滞育效果最佳。所述成虫对于雄虫来说具体均可为羽化一天内的成虫， 其中以羽 化 12 小时内的成虫滞育效果最佳。由于瓢虫滞育研究中， 国内外均采用雌虫发育生态学指 标 （产卵前期） 来反映群体滞育进程， 而不检测雄虫， 主要原因是雌雄虫个体滞。

12、育发生是一 致的。因而， 本发明中以雌虫的滞育反应群体的滞育。 0012 在本发明的一个实施例， 步骤 （1） 中所述诱导的时间具体可为 240h。 0013 （2） 滞育解除 ： 将步骤 （1） 滞育后的所述七星瓢虫转入温度 24、 光周期 L16:D8 的条件下， 恢复发育。 0014 实际应用中， 在上述方法中的 “滞育诱导” 和 “滞育解除” 之间常常配合如下 “滞育 维持” 的方法使用 : 将进入滞育态的七星瓢虫转入 18、 光周期 L10:D14（或黑暗） 的条件 下贮存 ； 所述贮存的时间均可在 114 天以内 （或 183 天以内） ， 如 114-183 天。在本发明的一 个。

13、实施例中， 所述贮存的时间具体为 114 天 （光周期 L10:D14 时） 或 183 天 （黑暗时） ； 所述条 件中的空气相对湿度具体为 70%-80%。 0015 本发明的再一个目的是提供一种七星瓢虫滞育解除方法。 0016 该方法具体可包括如下步骤 ： 将滞育的七星瓢虫转入温度 24、 光周期 L16:D8 的 条件下， 恢复发育。 0017 在上述方法中， 所述滞育的七星瓢虫具体可通过上述步骤 （1） 中所述的方法获得。 0018 在上述方法中， 所述恢复发育的时间可为 7.52-8.62 天。 0019 在上述方法中， 步骤 （2） 中， 所述条件中的光照强度可为 5000Lx。。

14、 0020 在本发明的一个实施例， 上述方法步骤 （2） 中， 所述条件中的空气相对湿度均可为 70%10%。 0021 在本发明中， 光周期 Lx ： Dy 表示每天光照时长 x 小时， 黑暗时长 y 小时， x+y=24。 0022 本发明所提供的七星瓢虫滞育诱导及滞育解除方法， 滞育诱导率接近 100%， 滞育 说 明 书 CN 102771445 A 4 3/9 页 5 解除在 7.52-8.62 天即可完成。本发明不仅有助于生产实践中促进七星瓢虫的大规模扩 繁， 延长其产品货架期及在田间的防控作用时间， 也有助于掌握天敌昆虫的发育特点与发 生动态， 提高害虫防治效率， 还有助于加深对。

15、天敌昆虫发育机制的认识， 探索昆虫对环境的 适应机制及进化途径。 附图说明 0023 图 1 为光周期 16L ： 8D 下雌虫产卵前期的分布情况。 0024 图 2 为滞育雌虫卵巢和卵巢小管。其中， A 为卵巢 ； B 为卵巢小管。 0025 图3为温度24， 不同光周期条件下七星瓢虫的产卵前期时长统计结果。 其中， 不 同的小写字母表示差异显著 （P0.05） 。 0026 图 4 为温度 18条件下不同光周期对滞育持续时间的影响。其中， 不同的小写字 母表示差异显著 （P0.05） 。 0027 图 5 为光周期 L12:D12 条件下不同温度对滞育持续时间的影响。其中， 不同的小 写字。

16、母表示差异显著 （P0.05） 。 具体实施方式 0028 下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明， 均为常规方法。 0029 下述实施例中所用的材料、 试剂等， 如无特殊说明， 均可从商业途径得到。 0030 下述实施例中所用到的七星瓢虫 （程英 , 李忠英， 李凤良 . 七星瓢虫的研究进 展 . 贵州农业科学 2006,34(5):117-119.） ， 公众可从中国农业科学院植物保护研究所获 得） 采自中国农业科学院麦田， 经室内饲养形成稳定世代后为供试虫源。饲养方法为 ： 卵、 蛹和成虫饲养条件为温度241、 空气相对湿度70%10%、 光周期L16:D8 ； 幼虫于养虫 笼内饲喂，。

17、 条件为温度 20 -26、 空气相对湿度为 50%-75%、 光周期为 L16:D8。食料为大 豆蚜 （Aphis gylcnies Matsumura） 。 0031 下述实施例中， 光周期Lx ： Dy表示每天光照时长x小时， 黑暗时长y小时， x+y=24。 0032 下述实施例中， 滞育判断标准如下 ： 18条件下， 雌虫羽化 40 天 （正常发育个体产 卵前期 2 倍左右） 后依然未产卵的个体， 可视为滞育个体。瓢虫滞育研究中， 国内外均采用 雌虫发育生态学指标 （产卵前期） 来反映群体滞育进程， 而不检测雄虫， 主要原因是雌雄虫 个体滞育发生是一致的。 0033 已有资料显示， 。

18、雌虫的产卵前期、 生殖系统的发育状况、 脂肪体的大小是判断瓢 虫滞育的常用标准， 其中采用产卵前期这一标准， 有益于研究成虫的滞育发育时间、 滞育 结束后的生殖力、 再次滞育等生物学特征， 是一种较优的判断手段 （王伟 , 张礼生 , 陈红 印 , 等 . 瓢虫滞育的研究进展 J. 植物保护 ,2011,37(5)） 。当前国内外通用的方法是 将正常产卵个体产卵前期 2 倍左右的时间内未产卵的雌虫判定为滞育个体， 并对相应处理 条件下的部分雌虫进行解剖， 观察其生殖系统的发育状况。具体的解剖和判断方法参考 阎浚杰等 （阎浚杰 , 尚玉昌 , 蔡晓明 . 蚜虫天敌七星瓢虫 Coccinella 。

19、Septempunctata L. 的研究 . 七星瓢虫卵巢发育的分级标准及其研究卵巢发育的生态学意义 J. 昆虫 天 敌 ,1980(2):5-8.） 、 Sakurai H 等 （Sakurai H,Goto K,Takeda S.Emergence of the Ladybird Beetle Coccinella septempunctata bruckii Mulsant in the FieldJ.Res. 说 明 书 CN 102771445 A 5 4/9 页 6 Bull.Fac.Agr.Gifu Univ.,1983(48):37-45.） 。 0034 滞育诱导的光周期反。

20、应 ： 实验于于人工气候箱 （宁波江南产） 内进行， 设定 4 个光 周期 ： L:D=10:14、 L:D=12:12、 L:D=14:10、 L:D=16:8， 温度为 18 1， 空气相对湿度均为 70%10%。12 小时内羽化的成虫雌雄配对后饲养于放有折叠小纸片的透明塑料杯 （上底面 直径 7cm， 下底面直径 5cm， 高 10cm） 中。每个处理重复 3 次， 共处理成虫 90 对左右。每天 观察并跟换饲料和纸片， 记录成虫产卵前期和产卵个体数。结果取 3 次重复的平均值。 0035 数据统计与分析 ： 处理间不同参数经方差分析统计差异显著后， 用 Duncans 多重 比较进行显。

21、著性测定。滞育率数据在统计分析前进行反正弦平方根转化， 统计软件为 SAS （V8.0） 。 0036 结果与分析 （成虫的产卵前期及分布） ： 光周期对成虫产卵前期及产卵行为的发生 具有明显的调控作用 （表 1） 。光照时长为 16h 时， 绝大多数雌虫正常产卵 ； 产卵前期主要集 中于羽化后的 15d-21d(48.78%)， 90% 以上的个体产卵前期不超过 25 天 （图 1） 。而短光照 下， 特别是光照时长为 10h 和 12h 时， 大部分雌虫均不产卵。虽然光照时长 14h 下雌虫产卵 前期略长于光照时长为16h时的个体， 但二者差异不显著 （P=0.44） 。 由此可见， 雌虫。

22、产卵前 期可作为判断成虫滞育的标准， 18条件下， 雌虫羽化40天 （正常发育个体产卵前期2倍左 右） 后依然未产卵的个体， 可视为滞育个体。部分未产卵雌虫卵巢解剖的结果进一步证明了 此标准的可靠性。各光周期条件下， 雌虫羽化 40 天后依然未产卵的个体， 卵巢无卵黄沉积 现象 （图 2 中 A） 卵巢小管呈透明状 （图 2 中 B） 。 0037 表 1 不同光周期下七星瓢虫成虫产卵前期 0038 0039 注 ： 表中产卵前期为平均值 标准误 ； 差异比较为 Duncan 氏多重比较。 0040 实施例 1、 七星瓢虫的滞育诱导试验 0041 一、 滞育调控操控时机筛选试验 0042 以卵。

23、、 幼虫、 蛹和成虫这四个虫态 （即发育阶段） 不同阶段的七星瓢虫 （雌虫） 为试 验材料， 在 18条件下， 参照表 2 所示方式 （虫态时期 - 光周期） 进行滞育诱导， 初羽化成虫 的诱导时间均为240h。 诱导结束后观察各处理组七星瓢虫的滞育情况并统计滞育率。 实验 重复 3 次， 结果取平均值。 。 0043 结果如表 2 所示， 七星瓢虫的初羽化成虫 （羽化 12 小时内的成虫， 属于产卵前期） 是其滞育的关键敏感虫期， 只有初羽化成虫处在短光照 （S， 光周期为 L10 ： D14） 条件下， 多 数才能进入滞育 （组 6 和组 7） ； 四龄幼虫和蛹期的短光照经历对初羽化成虫的。

24、滞育发生亦 有一定的促进作用。在 18下， 将七星瓢虫的不同发育阶段按不同组合分别给予长光照 （16hr/d） 和短光照 （10hr/d） 处理后， 在成虫之前的不同发育阶段， 即卵期、 幼虫期和蛹期， 无论进行怎样的短光照处理， 只要在产卵前期不进行短光照 （10hr/d） ， 绝大多数羽化成虫 说 明 书 CN 102771445 A 6 5/9 页 7 均能产卵， 不发生滞育 （组 1 至组 5） ； 而初羽化成虫阶段置于短光照条件下时， 绝大多数雌 虫则不能产卵， 进入滞育 （组 6 和组 7） ， 四龄幼虫期、 预蛹期和蛹期七星瓢虫也同时经历短 光照诱导时， 成虫的滞育相对较高 （组。

25、 6， 95.01%） 。 0044 表 2 七星瓢虫不同发育阶段感受长光照 （L， 光周期为 L16 ： D8） 和短光照 （S， 光周 期为 L10 ： D14） 的滞育率 （18） 0045 0046 0047 注 ： 刚从卵里孵化出来的幼虫是1龄， 1龄幼虫蜕皮后就变成2龄幼虫， 2龄幼虫蜕 皮后就变成3龄幼虫， 3龄幼虫蜕皮后就变成4龄幼虫。 预蛹是指老熟幼虫停止取食至脱皮 成蛹之前的这个发育阶段。所述初羽化成虫均为羽化 12h 内的成虫。卵、 幼虫和蛹这三个 虫态均为全程诱导。 0048 以上结果表明， 通过调控光周期和温度因子， 可实现七星瓢虫的滞育诱导。 七星瓢 虫成虫 （初羽。

26、化成虫） 在温光组合条件为温度 18、 光周期 L10:D14 时滞育率接近 100%。 0049 二、 滞育诱导试验 0050 1、 实验方法 0051 设两因素各四水平的重复性试验， 于人工气候箱 （宁波江南 RZX500C 型） 内进行滞 育诱导， 4 个光周期水平分别是 L10:D14、 L12:D12、 L14:D10、 L16:D8， 3 个温度水平分别是 30、 24和 18； 空气相对湿度 70%10%。将初羽化 （12 小时内） 的成虫雌雄配对后饲于 置有折叠纸片的塑料杯 （直径 7cm， 高 10cm） 中， 杯口罩以纱布以防试虫逃逸。每处理重复 3 次， 每次每处理成虫 。

27、90 对。逐日观察并更换饲料及纸片， 记录雌虫产卵前期时长， 直至试验 结束。滞育诱导时间为 240h。诱导结束后观察各处理组七星瓢虫的滞育情况并统计滞育 率， 结果取 3 次重复的平均值。 0052 2、 实验结果 说 明 书 CN 102771445 A 7 6/9 页 8 0053 （1） 光周期对滞育诱导的影响 0054 不同光周期条件下七星瓢虫成虫的滞育率如表 3 所示。由表可知， 成虫滞育率随 着光照时长的延长而逐渐降低。 0055 温度为 18时， 成虫的滞育率在长光照 L16:D8 时仅为 12.5%， 而光照时长为 14h 时， 滞育率增至 67.4%， 为长光照条件下的 5。

28、.39 倍 ； 光照时间进一步缩短为 12h 或 10h 时， 成虫滞育率进一步扩大至 94.7% 或 95.0%（表 4） ， 约为长光照条件下 7.6 倍。 0056 温度为 24时， 光周期对成虫滞育的诱导作用有所下降， 滞育率最高不超过 50%， 但不同光周期之间成虫的滞育率依然是长光照 L16:D8 下较低， 滞育率仅为 5.6%， 成虫几乎 不滞育 ； 而光照时长缩短时， 成虫滞育率增加， 在光周期为 L12:D12 时达最高， 为 33.5%。 0057 温度为 30时， 无论是长光照 L16:D8 还是短光照 L10:D14， 成虫滞育率均为 0， 表 明此温度下， 光周期对成。

29、虫的滞育诱导无明显影响。 0058 24时， 虽然光周期对成虫的滞育诱导作用不如 18时明显， 但光周期对雌虫的 产卵发生具有显著的调控作用， 长光照下雌虫生殖系统的发育速度较慢 （图3） 。 雌虫的产卵 前期显著高于短光照 （P0.05） ， 雌虫的产卵前期在光周期为 L16:D8 和 L14:D10 时较长， 分 别为 13.09 天和 13.98 天， 而光周期为 L12:D12 和 L10:D14 则缩短为 10.71 天和 10.68 天。 0059 表 3 温度和光周期对七星瓢虫滞育诱导的影响 0060 0061 注 ： 表中数据是平均值 标准误， 数据后不同的小写字母表示差异显著。

30、 （P0.05） 。 0062 表 4 表 3 中温度 18、 光周期为 L12 ： D12 或 L10 ： D14 条件下七星瓢虫滞育率的三 次重复结果 0063 光周期 重复 1 重复 2 重复 3 平均值 标准差 L12 ： D12 94.21.6 95.10.3 94.81.1 94.72.8 L10 ： D14 95.10.2 94.60.6 95.30.4 95.01.1 0064 （2） 温度对滞育诱导的影响 0065 如表 3 所示， 温度对成虫滞育诱导具有显著影响， 成虫的滞育率随着温度的升高 说 明 书 CN 102771445 A 8 7/9 页 9 而显著下降 （P0.。

31、05） ， 高温下成虫甚至不发生滞育 ； 较低温度对成虫滞育有明显的促进作 用。 0066 光周期为 L16:D8 时， 成虫的滞育率在低温 18下较高， 为 12.5% ； 温度升高至 24时， 滞育率明显下降， 仅为 5.6% ； 当温度进一步升高至 30时， 成虫不发生滞育， 滞育 率降至 0。 0067 光周期为 L14:D10、 L12:D12 和 L10:D14 时， 同样也是温度低时， 成虫的滞育率较 高， 而温度升高时， 成虫滞育率降低。特别是光周期为 L10:D14 时， 18时成虫几乎全部滞 育， 而温度升高至 24时， 滞育率仅为 17.7%， 30时则完全不滞育。表明相。

32、较于光周期， 温 度对滞育的发生起决定性作用。 0068 此外， 温度对成虫滞育诱导的临界光周期 （引起昆虫种群中 50% 的个体进入滞育 的光周期） 也起到明显的调节作用。18时成虫滞育诱导的临界光照时长在 14hr/d-16hr/ d 之间 ； 24和 30时， 四个光周期下成虫滞育率最高未超过 50%， 不存在明显的临界光周 期。 0069 （3） 温度与光周期的交互作用 0070 不同光周期和温度 （18和 24） 条件下滞育率的双因素方差分析结果表明， 不 仅光周期 （F=88.87， df 3， P0.0001） 和温度 （F=346.36， df 1， P0.0001） 均对七星。

33、瓢 虫滞育率有显著影响， 而且光周期和温度的交互作用显著 （F 28.98， df 3， P0.0001） 。 成虫在温光组合条件为 18、 L12:D12 和 L10:D14 时滞育率较高， 滞育率接近 100%， 而温光 组合条件为 30、 L10:D14 时滞育率为 0。表明虽然短光照对成虫的滞育诱导具有明显的 促进作用， 但温度对成虫滞育的发生起主导作用， 光周期伴随温度起作用。 0071 综合实施例 1 试验结果， 对于初羽化的七星瓢虫成虫， 施以温度 18、 光周期 L10:D14 的环境因子刺激， 即可诱导接近 100% 的个体进入滞育态。 0072 实施例 2、 七星瓢虫的滞育。

34、维持试验 0073 1、 试验方法 0074 （1） 光周期的影响 ： 根据实施例 1 中滞育诱导试验结果， 在温度 18、 空气相对湿 度 70%-80% 的条件下， 初羽化成虫 （12 小时内） 经光周期 L10:D14、 L12:D12、 L14:D 10 诱导 240h 进入滞育后， 滞育成虫仍于原条件下饲养。每天观察并记录成虫滞育解除并开始产卵 的时间， 各处理观察雌虫 30 头左右。实验重复 3 次， 结果取平均值。同时设置了将滞育成 虫置于黑暗条件下饲养的处理组。 0075 （2） 温度的调控作用 ： 由实施例 1 中滞育诱导结果可知， 24、 30时， 成虫的滞育 发生率较低，。

35、 光周期为 L12:D12 时最高， 为 33.5%。其他温光组合条件下， 成虫基本不滞育。 故本试验仅统计温光组合条件为 24、 L12:D12 下雌虫的滞育持续时间。具体方法如下 ： 24， 初羽化成虫 （12 小时内） 经光周期 L12:D12 诱导 30 天进入滞育后， 滞育成虫仍于原条 件下饲养。每天观察并记录成虫滞育解除并开始产卵的时间， 各处理观察雌虫 30 头左右。 0076 2、 试验结果 0077 （1） 光周期对成虫滞育持续时间的影响 0078 从光周期对七星瓢虫成虫滞育持续时间的影响可以看出， 在所有短光照条件下， 滞育成虫经过一段时间的滞育发育后都能解除滞育开始产卵 。

36、； 但 18、 不同光周期条件下 雌虫的滞育持续时间差异显著 （图 4 和表 5） ， 雌虫的滞育持续时间与光照时长呈负相关， 随 说 明 书 CN 102771445 A 9 8/9 页 10 光周期的缩短而延长。光周期为 L14:D10 时， 滞育持续时间为 78.27 天 ； L12:D12 时， 滞育 持续时间为 89.18 天 ； L10:D14 时， 滞育持续时间延长至 114.11 天。 0079 进一步开展的全黑试验结果显示， 滞育持续时间延长至 183.32 天。结果表明七 星瓢虫滞育的解除不需要低温的刺激 ； 不同光周期对成虫滞育持续时间的调控表现出明显 的数量反应， 即接。

37、近临界光周期 （14hr/d-16hr/d） 的光照条件下成虫滞育发育的速度明显 快于短光照 ； 此外， 成虫在滞育发育结束即滞育解除后， 即使在原滞育诱导条件下仍可以产 卵， 表明在滞育发育后期， 成虫暂时失去对促进诱导滞育的短光照的敏感性。 0080 表 5 不同温度、 不同光周期条件下雌虫的滞育持续时间三次重复结果 0081 0082 （2） 温度对滞育持续时间的调控作用 0083 不同温度下， 成虫的滞育持续时间也有显著差异， 低温有利于成虫的滞育发育， 滞 育发育速度较慢， 滞育持续时间延长 （图 5 和表 5） 。温度为 24时， 光周期 L12:D12 诱导的 滞育持续时间为 7。

38、9.30 天， 而当温度下降至 18时， 则延长至 89.18 天， 表明高温时光周期 诱导的滞育强度较低温时低。 0084 综合实施例 2 的试验结果， 将进入滞育态的七星瓢虫保存于 18、 L10:D14、 湿度 70%-80% 的条件下， 贮存期可达 114 天 ； 若保存于全黑暗、 18、 湿度 70%-80% 的条件下， 贮 存期可达 183 天。 0085 实施例 3、 七星瓢虫的滞育解除试验 0086 1、 试验方法 0087 设两因素各两水平的重复性试验， 于人工气候箱 （宁波江南 RXL-500C） 内进行， 2 个光周期水平分别是 L10:D14、 L16:D8， 2 个温。

39、度水平分别是 18和 24 ； 空气相对湿度 70%10% ； 光照强度 5000Lx。将温光组合条件 18、 L10:D14 下诱导滞育的成虫 （41 日龄） 分别置于上述4个处理条件下饲养。 每天观察并记录成虫滞育解除 （将在理论产卵前期(20 天 ) 内恢复产卵者视为解除个体） ， 并开始产卵的时间， 各处理观察雌虫 30 头左右。实验重 复 3 次， 结果取平均值。 0088 2、 试验结果 0089 环境条件改变后， 温度与光周期对七星瓢虫滞育解除都具有显著的影响， 滞育成 虫依然保持对温度和光周期的敏感性。长光照对成虫滞育解除具有促进作用， 相同温度下 环境条件为长光照时， 滞育解。

40、除历期显著小于短光照 ； 短光照则维持成虫滞育， 成虫需要经 过较长时间的滞育发育后才能解除滞育。适宜升高温度可加速成虫的滞育解除， 环境温度 说 明 书 CN 102771445 A 10 9/9 页 11 升高时， 成虫滞育解除速度加快， 滞育解除历期缩短。无论光周期为长光照还是短光照， 成 虫在环境温度升高时， 都能很快解除滞育， 表明温度对成虫滞育解除起决定作用， 光周期伴 随温度起作用 ； 对于滞育成虫而言， 短光照和低温起维持成虫滞育发育的作用 （表 6） 。 0090 温度为 18时， 不同光周期条件下， 成虫的产卵前期差异显著。长光照促进滞育 解除， 短光照则促进滞育发育的进行。

41、。长光照 （光周期 16L:8D） 条件下滞育解除仅需 18.87 天， 而短光照 （光周期 10L:14D） 下则延长近 4 倍， 为 74.39 天 ； 当温度为 24， 长光照条件 下成虫产卵前期亦显著小于短光照 （8.07vs 12.44） ， 但此时短光照下滞育解除历期较长光 照时仅延长 1.54 倍 （表 6 和表 7） 。 0091 温度不同、 光周期相同时， 成虫产卵前期也存在显著差异， 低温对滞育发育具有显 著的促进作用， 而高温则促进滞育解除。光周期为 16L:8D 时， 雌虫在 18下的滞育解除 历期为 24下的 2.34 倍 （18.87vs 8.07） ； 而光周期为。

42、 10L:14D 时， 雌虫在 18和 24下 的滞育解除历期差异进一步扩大， 18下滞育雌虫产卵前期约为 24下的 6 倍 （74.39vs 12.44） （表 6 和表 7） 。 0092 不仅光周期 （F=273.94， P0.0001） 和温度 （F=770.68， P0.0001） 均对七星瓢虫滞 育率有显著影响， 而且光周期和温度的交互作用显著 （F=120.47， P0.0001） 。 0093 表 6 光周期和温度对七星瓢虫滞育解除的调控作用 0094 0095 注 ： 成虫为温光组合条件 18、 L10:D14 下诱导 40 天的滞育成虫。数据后不同的 小写字母表示差异显著 （P0.05） 。 0096 表 7 表 6 中不同光周期和不同温度对七星瓢虫滞育解除调控作用的三次重复结 果 （产卵前期 ( 天 )） 0097 0098 综合实施例 3 试验结果， 对处于滞育状态的七星瓢虫施以温度 24、 光周期 L16:D8、 光照强度 5000Lx 处理， 8.07 天后即可完全解除滞育， 雌虫开始产卵。 说 明 书 CN 102771445 A 11 1/2 页 12 图 1 图 2 说 明 书 附 图 CN 102771445 A 12 2/2 页 13 图 3 图 4 图 5 说 明 书 附 图 CN 102771445 A 13 。