一种细辛脑注射剂及其制备方法.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102973499 A (43)申请公布日 2013.03.20 CN 102973499 A *CN102973499A* (21)申请号 201210561393.4 (22)申请日 2012.12.21 A61K 9/08(2006.01) A61K 31/09(2006.01) A61K 47/34(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 11/00(2006.01) A61P 11/06(2006.01) A61P 25/08(2006.01) (71)申请人 张蕊 地址 610041 四川省成都市武侯区新光路新 加坡花园 2-11。

2、-9A (72)发明人 张蕊 (74)专利代理机构 成都天嘉专利事务所 ( 普通 合伙 ) 51211 代理人 赵丽 (54) 发明名称 一种细辛脑注射剂及其制备方法 (57) 摘要 本发明提供了一种 细辛脑注射剂， 其以 细辛脑 （ ， 化学名为 2， 4， 5 三甲氧基 1 丙烯基苯） 为活性成分， 采用 聚乙二醇 12 羟基硬脂酸酯作为增溶剂、 丙二 醇和乙醇作为助溶剂制成注射剂， 不仅有效地解 决了细辛脑不溶于水的问题， 还极大提高了细辛 脑注射剂的安全性和稳定性。本发明制备的细辛 脑注射剂， 稳定性好， 制备工艺简单。 (51)Int.Cl. 权利要求书 1 页 说明书 11 页 (。

3、19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 11 页 1/1 页 2 1. 一种细辛脑注射液， 其特征在于包含主药 - 细辛脑， 增溶剂聚乙二醇 -12- 羟基硬 脂酸酯、 助溶剂丙二醇和乙醇及注射用水， 其中包含基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， 聚乙 二醇 -12- 羟基硬脂酸酯 8 12 份， 丙二醇 50 份， 密度以 0.8 计的乙醇 12 份 ； 其制备方法 为 ： a、 准确称取处方量的 - 细辛脑、 聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯、 丙二醇， 量取乙醇， 密 封待用 ； b、 量取 50% 处方量体积的注射用水， 恒温至 60 70。

4、的条件下加入聚乙二醇 -12- 羟 基硬脂酸酯， 搅拌溶解 ； 在 60 70条件下继续加入 - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室 温 ； 依次加入丙二醇、 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至处方量体积的 95%， 搅拌混合均匀 ； 调 节 pH 至 6.0 6.1， 补加注射用水至全量， 混合均匀， 过滤， 分装， 灭菌， 即得 细辛脑注 射剂。 2. 根据权利要求 1 所述的 - 细辛脑注射剂， 其特征在于采用盐酸作为 pH 调节剂， 所 用盐酸的浓度为 0.01mol/L。 3.根据权利要求1或2所述的-细辛脑注射剂， 其特征在于制备方法包括以下步骤 ： a、 准确称取处方量的 - 细辛。

5、脑、 聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯、 丙二醇， 量取乙醇， 配 制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用 ； b、 量取 50% 处方量体积的注射用水， 恒温至 60 70的条件下加入聚乙二醇 -12- 羟 基硬脂酸酯， 搅拌溶解 ； 在 60 70条件下继续加入 - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室 温 ； 依次加入丙二醇、 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至处方量体积的 95%， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 盐酸溶液调节 pH 至 6.0 6.1， 补加注射用水至全量， 混合均匀， 过滤， 分装， 灭 菌， 即得 细辛脑注射剂。 4.根据权利要求1所述的-细辛脑注射。

6、剂， 其特征在于选取8份、 10份、 12份的聚乙 二醇 -12- 羟基硬脂酸酯作为增溶剂。 5.根据权利要求1所述的-细辛脑注射剂在制备治疗上呼吸道感染、 支气管炎、 支气 管哮喘、 急性及慢性胆囊炎、 胆石症、 癫痫大发作的药物中的应用。 6.根据权利要求1所述的-细辛脑注射剂在制备治疗肺炎和慢性阻塞性肺病急性发 作的药物中的应用。 权 利 要 求 书 CN 102973499 A 2 1/11 页 3 一种细辛脑注射剂及其制备方法 技术领域 0001 本发明涉及医药制剂领域， 尤其是涉及细辛脑的注射剂及其制备方法。 背景技术 0002 - 细辛脑化学名为 2， 4， 5- 三甲氧基 -1。

7、- 丙烯基苯， 是中药石菖蒲的主要有效成 分之一， 具有镇静、 抗惊厥、 解痉、 平喘、 祛痰、 止咳、 降血脂、 利胆、 抗癌等多种药理作用 ； 同 时对于肺炎球菌、 金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的生长有不同程度的抑制作用。 在临床上， 细 辛脑已经广泛用于治疗上呼吸道感染、 支气管炎、 支气管哮喘、 急性及慢性胆囊炎、 胆石症、 癫痫大发作等病症， 尤其是对于肺炎、 支气管哮喘和慢性阻塞性肺病 ( 例如慢阻肺、 COPD) 急性发作的治疗具有显著效果。 1982年广西柳州制药厂首次在国内人工成功合成-细辛 脑， 并制成片剂和胶囊剂投放市场。 0003 细辛脑作为亲脂性极强而亲水性极差的化合物，。

8、 目前上市的细辛脑的片剂和胶 囊， 由于其水溶性极差， 口服后不易分散和溶出， 与体液接触时有效比表面积小， 例如普通 口服制剂生物利用度仅为2-5， 根本无法实现预期的治疗效果。 现有技术采用多种方式制 备细辛脑的注射剂， 但存在多种缺陷， 例如 CN1290495C 公开了采用 - 细辛脑， 加上油、 乳 化剂、 注射用水制成脂微球制剂， 工艺复杂， 成本高， 长期存储脂微球的包裹容易破裂产生 泄漏， 不利于注射 ； CN1657071A 采用水和有机溶剂溶解细辛脑， 制成冻干制剂， 冻干粉注射 前复溶效果差， 产生浑浊， 影响使用。 0004 在药用活性物质中， 大部分难溶于水的脂溶性药。

9、物， 给制剂制备过程和临床应用 带来很多不便， 也对药效的发挥带来诸多不良影响， 甚至难以制备成合理的制剂。 为了解决 此类问题， 较为常用的方法之一是以表面活性剂对药物进行增溶。 0005 为了提高其疗效， 研究人员通过加入一定表面活性剂， 增大细辛脑在水中溶解度， 制成了细辛脑注射液。 但某些表面活性剂用于注射剂可能导致存在严重的安全隐患， 例如 ： CN1313086C 公开了采用吐温 80 作为增溶剂溶解细辛脑， 本领域技术人员应深刻认识到国 内外对吐温 80 安全性研究的大量资料表明吐温 80 有一定的安全应用范围， 如对犬、 家兔、 猫和猴静脉注射吐温 80 均会导致一过性的血压降。

10、低 ( 尤其是犬的收缩压、 舒张压、 平均脉 压显著降低 )( 王庆利， 彭健吐温 80 的安全性研究进展毒理学杂志 2006， 20(4) ： 262-264 页 )， 因此难以确定该制剂对人体是否造成更为严重的影响 ； 同时， 所述产品由于含有较多 吐温 80， 导致产品冻干不完全， 外观不佳， 更严重的后果是冻干之后复溶效果差， 不利于实 际临床应用。 0006 为解决上述问题， 本发明提供了一种细辛脑注射剂， 该注射剂采用聚乙二醇 -12- 羟 基 硬 脂 酸 酯 ( 也 称 为 “聚 乙 二 醇 15 羟 硬 脂 酸 酯” ， polyoxyethylene-660-12-hydro。

11、xy stearate， 商品名 SolutolHS15) 做增溶剂， 丙二醇和乙醇做助溶剂。首先， 现有技术的文献 研究已经证实其具有远优于吐温 80 的安全性 ； 实验也证明妊娠家兔静脉注射给予含有吐温 80187.5mg/kg 可导致明显的母体毒性， 而静脉注射给予聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯 215mg/ kg 却无明显影响。而且， 实验表明 HS15 能较好地增大 - 细辛脑在水中的溶解度。 说 明 书 CN 102973499 A 3 2/11 页 4 0007 现有技术也公开了采用 HS15 作为乳化剂的细辛脑的注射制剂， 例如专利文献 C101088499A 中公开了细辛脑。

12、的乳剂， 采用大豆油和中链甘油三酸酯混合物的油相、 大豆卵 磷脂和 HS15 的乳化剂制成乳剂， 并进一步加入冻干保护剂制成干乳剂。但是冻干乳剂的 制备工艺复杂， 制成品的物理稳定性不好， 需要在 10以下甚至冰冻状态保存， 即使在室 温下放置一段时间， 乳滴都会逐渐聚合破裂， 复溶后达不到注射的要求。又例如专利文献 CN101647774B 中公开了采用 HS15 作为增溶剂的细辛脑注射剂， 按照其实施例 1、 实施例 2 和实施例 3 的制备方法制备细辛脑注射剂后发现该专利制备细辛脑注射剂的方法存在严 重缺陷， 主要表现在制备过程中主药 - 细辛脑的大量损失 （至少损失 10%） 且损失波。

13、动大 以及灭菌后澄明度不理想， 无法按照现行 中国药典 2010 年版要求制成合格药品。 0008 现有技术的研究表明， 由单一表面活性剂组成的胶束固然有明显作用， 但对一些 水难溶性药物也存在着表面活性剂用量高， 制剂黏度大， 稀释稳定性不好， 并相应带来的制 剂毒副作用、 注射疼痛、 临床用药要求高等诸多问题。 表面活性剂相互间复配形成的混合胶 束体系具有增溶性能强于单一表面活性剂溶液的特性。专利文献 CN101138550A 介绍了可 采用 HS15 和一种或多种其他表面活性剂、 磷脂等制成细辛醚的胶束药物制剂。然而， 其中 磷脂非常容易氧化， 生产中均需以氮气保护， 生产成本高 ； 产。

14、生的溶血磷脂具有很强的毒副 作用， 是注射液中必须严格控制的杂质。 0009 本发明克服了以上技术偏见， 采用安全性和助溶效果更高的表面活性剂 HS15 作 为增溶剂、 丙二醇和乙醇作为助溶剂和细辛脑制成的水性注射液， 能按照现行 中国药典 2010 年版要求制成不仅含量稳定， 成品溶液澄明度好， 安全性也更高的药品。 发明内容 0010 本发明为了解决现有技术中细辛脑制剂存在的多种安全风险和制剂缺陷， 提供一 种采用聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯 ( 以下简称 HS15) 作为增溶剂， 丙二醇和乙醇作为助溶 剂的细辛脑的注射制剂。 0011 HS15 是一种非离子型表面活性剂， 具有良好的。

15、生物耐受性且应用范围广， 并被证 明是优秀的增溶剂， 本发明采用 HS15 作为增溶剂， 具有以下一些优势 ： 低组安释放术前无需使用抗组胺剂和类皮质激素 ； 低溶血作用 ； 较高的人体使用安全性， 现有技术的文献研究已经证实其具有远优于吐温 80 的安全 性 ； 较高的生理耐受性 ； 可用蒸汽灭菌法， 无需昂贵的无菌制造工艺 ； 高增溶能力 - 使低容量高剂量的注射成为可能 ； 低粘度， 即使在高浓度时， 30浓度溶液亦可无痛给药 ； 已于近期收入德国药典 ( 即将收入到美国和欧洲药典 ) ； 本发明的目的在于提供一种以细辛脑作为活性成分的注射剂及其制备方法。 0012 本发明所述的细辛脑即。

16、理解为 - 细辛脑， 但不限于此， - 细辛脑也同样适于本 发明。 0013 本发明的注射剂， 其特征在于包含-细辛脑、 聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、 丙二 说 明 书 CN 102973499 A 4 3/11 页 5 醇、 乙醇和 pH 调节剂 0.01mol/L 盐酸溶液， 所述注射溶剂是指注射用水。 0014 作为优选的实施方案， 本发明的细辛脑注射剂， 主要是包含基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， 聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯 8 12 份， 丙二醇 50 份， 乙醇 （密度以 0.8 计） 12 份和适量的注射溶剂。 0015 更优选的实施方案是选取 8 份、 10 份、 。

17、12 份的聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯作为增 溶剂。 0016 本发明的注射剂， 所述注射溶剂是指注射用水， 其中， 全量的注射用水 - 细辛 脑的比例为 1 10 10(ml mg)。 0017 更优选的实施方案是全量的注射用水 - 细辛脑的比例为 2 8(ml mg)。 0018 本发明的制备 - 细辛脑注射液的方法， 包括如下步骤 ： a、 准确称取处方量的 - 细辛脑、 聚乙二醇 -12- 羟基硬脂酸酯、 丙二醇， 量取乙醇， 配 制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用 ； b、 量取 50% 处方量体积的注射用水， 恒温至 60 70的条件下加入聚乙二醇 -12- 羟 基。

18、硬脂酸酯， 搅拌溶解 ； 在 60 70条件下继续加入 - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室 温 ； 依次加入丙二醇、 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至处方量体积的 95%， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 盐酸溶液调节 pH 至 6.0 6.1， 补加注射用水至全量， 混合均匀， 过滤， 分装， 灭 菌， 即得 细辛脑注射剂。 0019 上述工艺制备的细辛脑注射剂， 具有工艺简单、 成本低廉、 质量稳定、 安全性高、 临 床使用方便等优点。 0020 因此， 本发明将为上呼吸道感染、 支气管炎、 支气管哮喘、 急性及慢性胆囊炎、 胆石 症、 癫痫大发作等疾病， 特别是肺炎、 支气。

19、管哮喘和慢性阻塞性肺病急性发作患者提供一种 安全有效的细辛脑注射剂。 具体实施方式 0021 实施例 1 （基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， HS15 为 8 份， 丙二醇为 50 份， 乙醇 12 份） 称取 4g - 细辛脑、 40g HS15、 200g 丙二醇， 密封待用 ； 量取 60ml 乙醇密封待用 ； 用 浓盐酸配制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用 ； 量取 500ml 注射用水， 60水浴条件下加入 32g HS15， 搅拌溶解 ； 在 60水浴下加入 4g - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室温 ； 依次加 入 200g 丙二醇和 60ml 乙醇， 搅拌均匀。

20、 ； 加注射用水至 950ml， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 盐酸溶液调节 pH 至 6.03， 补加注射用水至全 1000ml， 混合均匀， 先经 0.45m 微孔滤膜过 滤， 再经0.22m微孔滤膜过滤， 分装于2ml安瓿中， 熔封， 经10030分钟灭菌， 得到-细 辛脑注射液。 0022 实施例 2（基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， HS15 为 10 份， 丙二醇为 50 份， 乙醇 12 份） 称取 4g - 细辛脑、 40g HS15、 200g 丙二醇， 密封待用 ； 量取 60ml 乙醇密封待用 ； 用 浓盐酸配制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用。

21、 ； 量取 500ml 注射用水， 60水浴条件下加入 40g HS15， 搅拌溶解 ； 在 60水浴下加入 4g - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室温 ； 依次加 入 200g 丙二醇和 60ml 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至 950ml， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 说 明 书 CN 102973499 A 5 4/11 页 6 盐酸溶液调节 pH 至 6.08， 补加注射用水至全 1000ml， 混合均匀， 先经 0.45m 微孔滤膜过 滤， 再经0.22m微孔滤膜过滤， 分装于2ml安瓿中， 熔封， 经10030分钟灭菌， 得到-细 辛脑注射液。 0023 实施例。

22、 3（基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， HS15 为 12 份， 丙二醇为 50 份， 乙醇 12 份） 称取 4g - 细辛脑、 40g HS15、 200g 丙二醇， 密封待用 ； 量取 60ml 乙醇密封待用 ； 用 浓盐酸配制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用 ； 量取 500ml 注射用水， 60水浴条件下加入 48g HS15， 搅拌溶解 ； 在 60水浴下加入 4g - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室温 ； 依次加 入 200g 丙二醇和 60ml 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至 950ml， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 盐酸溶液调节 pH 至 。

23、6.10， 补加注射用水至全 1000ml， 混合均匀， 先经 0.45m 微孔滤膜过 滤， 再经0.22m微孔滤膜过滤， 分装于2ml安瓿中， 熔封， 经10030分钟灭菌， 得到-细 辛脑注射液。 0024 实施例 4 比较本发明与现有技术CN101647774B实施例1(对照品1)、 CN101647774B实施例2(对 照品 2) 及 CN101647774B 实施例 3( 对照品 3) 的细辛脑注射液的 (A) 主药含量以及 (B) 澄 明度。 0025 产品 ： 对照品 1 ： 由 CN101647774B 实施例 1 制得，（规格为 2ml:10mg） ； 对照品 2 ： 由 C。

24、N101647774B 实施例 2 制得，（规格为 2ml:10mg） ； 对照品 3 ： 由 CN101647774B 实施例 3 制得，（规格为 2ml:10mg） ； 本发明实施例 1，（规格为 2ml:8mg） ； 本发明实施例 2，（规格为 2ml:8mg） ； 本发明实施例 3，（规格为 2ml:8mg） ； (A) 主药含量 检 测 方 法 依 据 ：国 家 药 品 监 督 管 理 局 药 品 标 准 细 辛 脑 注 射 液 WS-10001-（HD-0437） -2002 检测方法 ： 取本品 5 支， 混匀， 精密量取 2ml， 置 50ml 量瓶中， 加乙醇稀释至刻度， 摇。

25、 匀， 精密量取 5ml， 置 50ml 量瓶中， 加乙醇稀释至刻度， 照分光光度法 （ 中国药典 2010 版二部附录 IV ） ， 在 313nm 的波长处测定吸收度， 按细辛脑 C12H16O3的吸收系数 （E ） 为 380.8 计算， 即得。 0026 标准规定 ： 本品为细辛脑加入适量助溶剂制成的灭菌水溶液。含细辛脑 （C12H16O3） 应为标示量的 93.0% 107.0%。 （此处标示量即为药品规格） 结果 ： 表 1 各产品主药含量的测定结果及比较 说 明 书 CN 102973499 A 6 5/11 页 7 结论 ： 按照 CN101647774B 制备方法制得的细辛脑。

26、注射液主药含量损失巨大且损失波 动大， 不适合于注射剂药品的实际生产。 0027 (B) 澄明度 检 测 方 法 依 据 ：国 家 药 品 监 督 管 理 局 药 品 标 准 细 辛 脑 注 射 液 WS-10001-（HD-0437） -2002 以及 中国药典 2010 年版附录 H 可见异物检查法 仪器和设备 ： YB 3 型澄明度检测仪 检测方法 ： 取本品 20 支， 擦净容器外壁， 轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异 物悬浮 （注意不要使药液产生气泡） ， 分别在黑色和白色背景下， 手持供试品颈部使药液轻 轻翻转， 用目检测 （照度 ： 1000 1500lx） 。 0028 。

27、标准规定 ： 不得检出烟雾状微粒柱、 金属屑、 玻璃屑、 长度或最大粒径超过 2mm 的 纤维和块状物等明显外来异物。微细可见异物如有检出仅 1 支， 再取 20 支同法复试， 均不 得检出。 0029 结果 ： 表 2 各产品澄明度测定结果及比较 对照品1、 对照品2、 对照品3澄明度不合格现象描述 ： 灭菌后绝大部分成品均有大块油 滴析出， 浮于液面或粘于安瓿内壁。放置 2 小时候后部分样品的油状物会消失， 溶液澄清透 明， 分析该油状物可能为细辛脑析出久置后又复溶， 但仍有部分样品的油状物未消失， 甚至 产生白色颗粒状物质漂浮于溶液中。 0030 结论 ： 按照 CN101647774B。

28、 制备方法制得的细辛脑注射液澄明度无法达到现行 中 国药典 2010 年版的规定要求。即使产生的油状物能全部复溶， 产品亦存在潜在的质量风 险。 0031 上述实验结果表明 CN101647774B 发明提出的细辛脑注射剂制备方法存在严重缺 陷， 不适用于实际生产。主要原因在于其制备过程中的主药含量损失波动大以及成品澄明 度不理想， 致使该工艺无法生产出符合现行药典规定的含量稳定且澄清透明的细辛脑注射 液。而本发明恰好克服了这两项技术难题， 能生产出符合现行药典规定的含量稳定且澄清 透明的细辛脑注射液。 0032 实施例 5 比较本发明实施例 2 制成的细辛脑注射液 （批号 ： 实施例 2） 。

29、与现有的市售 （成都力思特 说 明 书 CN 102973499 A 7 6/11 页 8 制药股份有限公司生产） 细辛脑注射液 ( 批号 ： 对照品 4) 的安全性。 0033 一、 产品制备 本发明实施例 2（基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， HS15 为 10 份， 丙二醇为 50 份， 乙 醇 12 份） ： 称取 4g - 细辛脑、 40g HS15、 200g 丙二醇， 密封待用 ； 量取 60ml 乙醇密封待用 ； 用 浓盐酸配制 0.01mol/L 的盐酸溶液， 密封待用 ； 量取 500ml 注射用水， 60水浴条件下加入 40g HS15， 搅拌溶解 ； 在 60水浴下。

30、加入 4g - 细辛脑， 搅拌使溶解， 放冷至室温 ； 依次加 入 200g 丙二醇和 60ml 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水至 950ml， 搅拌混合均匀 ； 用 0.01mol/L 盐酸溶液调节 pH 至 6.08， 补加注射用水至全 1000ml， 混合均匀， 先经 0.45m 微孔滤膜过 滤， 再经0.22m微孔滤膜过滤， 分装于2ml安瓿中， 熔封， 经10030分钟灭菌， 得到-细 辛脑注射液。 0034 对照品 4（基于重量份计的 - 细辛脑 1 份， 吐温 80 为 10 份， 丙二醇为 50 份， 乙 醇 12 份） ： 称取 4g - 细辛脑、 40g 吐温 80、 2。

31、00g 丙二醇、 磷酸氢二钠 2.5g、 磷酸二氢钠 8.25g， 密封待用 ； 量取 60ml 乙醇， 密封待用 ； 量取 400ml 注射用水， 分别加入磷酸氢二钠 2.5g、 磷酸二氢钠 8.25g， 搅拌溶解， 待用 ； 40g 吐温 80 在水浴下加热至 60， 加入 4g - 细辛 脑， 搅拌使溶解， 放冷至室温 ； 依次加入 200g 丙二醇和 60ml 乙醇， 搅拌均匀 ； 加注射用水 至 400ml， 搅拌混合均匀 ； 将之前配制好的磷酸盐溶液加入， 混合均匀， 补加注射用水至全 1000ml， 混合均匀， 先经 0.45m 微孔滤膜过滤， 再经 0.22m 微孔滤膜过滤， 。

32、分装于 2ml 安 瓿中， 熔封， 经 100 30 分钟灭菌， 得到 - 细辛脑注射液。 0035 二、 安全性试验 安全性判定依据 ： 根据不同处方产品对豚鼠产生主动过敏性的差异和程度来比较其安 全性。 0036 动物试验单位 ： 成都岐黄药物非临床研究有限公司 1、 实验材料 ： 药品 品 名 ： 细辛脑注射液 批 号 ： 实施例 2、 对照品 4 规 格 ： 2ml ： 8mg 生产单位 ： 成都力思特制药股份有限公司 用法用量 ： 静脉注射。1. 静脉推注 ： 一次 16 24mg， 稀释于 20% 葡萄糖注射液 40ml 中， 缓慢静脉推注， 一日 2 3 次。小儿剂量酌减。2. 。

33、静脉滴注 ： 成人一次 16 24mg， 儿童 一次 0.5mg/kg， 用 5% 或 10% 葡萄糖注射液稀释成 0.01% 0.02% 的溶液， 静脉滴注， 一日 2 次。 0037 贮 藏 ： 避光保存。 0038 剂量计算 ： 根据说明书 ： 临床日用最大剂量 ： 24mg3 次 /60kg=1.2mg/kg ； 临床受试品最大浓度 ： 24mg/40ml=0.6mg/ml。 0039 对照品 说 明 书 CN 102973499 A 8 7/11 页 9 10% 葡萄糖注射液， 规格 ： 250ml ： 25g， 批号 ： C110618B1， 四川科伦药业股份有限公司生 产。 00。

34、40 卵蛋白粉 ： 规格 ： 100g， 批号 ： F20100819， 国药集团化学试剂有限公司生产。 0041 动物 豚鼠 48 只， 体重 251.7 335.2g， 24 雌 24 雄， 符合一级动物标准， 由四川省实验动物 专委会养殖场提供， 动物生产许可证号 ： SCXK（川） 2008-14 号。采用豚鼠全价颗粒饲料， 由 四川省实验动物专委会养殖场提供。自由饮用城市生活饮水。饲养环境为普通系统， 温度 16 26， 相对湿度 40 70%， 自然通风、 换气， 自然光照。 0042 仪器 电子天平， BS600L 型， 量程 600g， 精密度 0.1g， 上海友声衡器有限公司。

35、生产。 0043 电子天平， FA1004 型， 量程 100g， 精密度 0.0001g， 上海良平仪器仪表有限公司生 产。 0044 材料 一次性使用无菌注射器， 规格 ： 1ml， 批号 ： 20120122， 失效期 ： 201412， 江西洪达医疗器 械集团有限公司生产。 0045 一次性使用无菌注射器， 规格 ： 2.5ml， 批号 ： 20101212， 失效期 ： 201311， 江西洪达 医疗器械集团有限公司生产。 0046 一次性使用无菌注射器， 规格 ： 5ml， 批号 ： 20101009， 失效期 ： 201309， 成都市新津 事丰医疗器械有限公司生产。 0047 。

36、、 实验系统及选择理由 试验时在成都岐黄药物非临床研究有限公司动物房豚鼠观察室观察和试验， 动物使用 许可证号 ： SYXK（川） 2010 096。 0048 选择理由 ： 根据 化学药物刺激性、 过敏性和溶血性研究技术指导原则 过敏试验 选择使用豚鼠， 为一级试验动物， 故在开放系统中饲养及观察。 0049 、 试验分组 取豚鼠 36 只， 按体重分层分组， 分为 6 组， 6 只 / 组， 雌雄各半 ： 阴性对照组 （10% 葡萄糖注射液） ； 阳性对照组 （卵蛋白粉） ； 高剂量组 1（细辛脑注射液实施例 2） ； 低剂量组 1（细辛脑注射液实施例 2） ； 高剂量组 2（细辛脑注射液。

37、对照品 4） ； 低剂量组 2（细辛脑注射液对照品 4） ； 4、 试验方法 给药剂量及周期设计 ： 在过敏试验中， 为充分暴露药液的免疫原性， 应选用浓度最大、 剂量最大的临床给药方式作为参考。因此考虑以临床日用最大剂量 1.2mg/kg 为剂量参考， 以临床受试品最大浓度 0.6mg/ml 为浓度参考。 0050 给药周期及给药途径 ： 隔日腹腔注射1次致敏， 共3次， 末次致敏后第14天脚背静 脉注射激发。 0051 致敏前阴性对照品准备 ： 取 10% 葡萄糖注射液备用。 说 明 书 CN 102973499 A 9 8/11 页 10 0052 致敏前阳性对照品准备 ： 称取适量卵蛋。

38、白粉， 溶解于 10% 葡萄糖注射液配成浓度 为 2mg/ml 的溶液备用。 0053 致敏前受试品准备 ： 高剂量组1 ： 取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀 释成浓度 2.4mg/ml 的溶液备用 ； 低剂量组 1 ： 取细辛脑注射液实施例 2 加 10% 葡萄糖注射 液稀释成浓度 0.6mg/ml 的溶液备用 ； 高剂量组 2 ： 取细辛脑注射液对照品 4 加 10% 葡萄糖 注射液稀释成浓度 2.4mg/ml 的溶液备用 ； 低剂量组 2 ： 取细辛脑注射液对照品 4 加 10% 葡 萄糖注射液稀释成浓度 0.6mg/ml 的溶液备用。 0054 致敏方法 ： 各组按组别腹腔。

39、注射各溶液进行致敏， 隔日 1 次， 共 3 次。给药方案见 表 3 表 3 细辛脑注射液全身主动过敏试验致敏剂量表 注 ： 高剂量组1和低剂量组1采用细辛脑注射液实施例2配制 ； 高剂量组2和低剂量组 2 采用细辛脑注射液对照品 4 配制。 0055 激发前阴性对照品准备 ： 取 10% 葡萄糖注射液备用。 0056 激发前阳性对照品准备 ： 称取适量卵蛋白粉， 溶解于 10% 葡萄糖注射液配成浓度 为 2mg/ml 的溶液备用。 0057 激发前受试品准备 ： 高剂量组1 ： 取细辛脑注射液实施例2加10%葡萄糖注射液稀 释成浓度 2.4mg/ml 的溶液备用 ； 低剂量组 1 ： 取细辛。

40、脑注射液实施例 2 加 10% 葡萄糖注射 液稀释成浓度 0.6mg/ml 的溶液备用 ； 高剂量组 2 ： 取细辛脑注射液对照品 4 加 10% 葡萄糖 注射液稀释成浓度 2.4mg/ml 的溶液备用 ； 低剂量组 2 ： 取细辛脑注射液对照品 4 加 10% 葡 萄糖注射液稀释成浓度 0.6mg/ml 的溶液备用。 0058 激发方法 ： 末次致敏后第14天各组按组别脚背静脉注射各溶液进行激发。 给药方 案见表 4。 0059 表 4 细辛脑注射液全身主动过敏试验激发剂量表 说 明 书 CN 102973499 A 10 9/11 页 11 注 ： 高剂量组1和低剂量组1采用细辛脑注射液实。

41、施例2配制 ； 高剂量组2和低剂量组 2 采用细辛脑注射液对照品 4 配制。 0060 初次、 最后一次致敏和激发当日测定每组每只动物的体重。 0061 每次致敏后及激发静脉注射后立刻至30分钟， 按下表5详细观察每只动物的反应 症状及死亡时间。最长观察 3 小时。按表 6 评价标准进行评价。 0062 表 5 过敏反应症状 表 6 全身致敏性评价标准 说 明 书 CN 102973499 A 11 10/11 页 12 5、 试验结果及分析 致敏期间豚鼠一般情况观察正常， 无异常情况出现。 0063 激发后过敏情况统计见表 7， 试验结果分析见表 8 表 7 细辛脑注射液豚鼠全身主动过敏试验。

42、激发症状记录 注 ： 高剂量组1和低剂量组1采用细辛脑注射液实施例2配制 ； 高剂量组2和低剂量组 2 采用细辛脑注射液对照品 4 配制。 0064 表 8 细辛脑注射液豚鼠全身主动过敏试验结果分析 说 明 书 CN 102973499 A 12 11/11 页 13 注 ： 高剂量组1和低剂量组1采用细辛脑注射液实施例2配制 ； 高剂量组2和低剂量组 2 采用细辛脑注射液对照品 4 配制。 0065 各组与阴性对照组比较 *P10.001 *P10.01 *P10.05 各受试组与阳性对照组比较 P20.001 P20.01 P20.05 高剂量组 2 与高剂量组 1 比较 P30.001 。

43、P30.01 P30.05 低剂量组 2 与低剂量组 1 比较 P40.001 P40.01 P40.05 表 7、 8 结果显示 ： 细辛脑注射液全身主动过敏性试验中， 、 阴性对照组、 阳性对照 组及两批批细辛脑注射液试验期间各组豚鼠体重均有所增加， 各组间体重无差异性。、 阴性对照组豚鼠激发后过敏反应阴性， 阳性对照组豚鼠激发后过敏反应极强阳性， 阳性对 照组与阴性对照组有显著差异 （P10.001） ， 表明试验数据准确度高 ； 、 实施例 2 批细辛 脑注射液低剂量组 （低剂量组 1） 激发后过敏反应阴性， 对照品 4 批细辛脑注射液低剂量 组 （低剂量组 2） 激发后过敏反应弱阳性。

44、 ； 、 实施例 2 批细辛脑注射液高剂量组 （高剂量 组 1） 激发后过敏反应阳性， 对照品 4 批细辛脑注射液高剂量组 （高剂量组 2） 激发后过敏 反应强阳性 ； 、 低剂量组 1 与阴性对照组过敏反应均为阴性， 无差异， 与阳性对照组有显 著差异 （P20.001） ； 低剂量组 2 与阴性对照组有差异 （P10.05） ， 与阳性对照组有显著差 异 （P20.001） ； 、 高剂量组 1 与阴性对照组有差异 （P10.01） ， 与阳性对照组有显著差 异 （P20.001） ； 高剂量组 2 与阴性对照组有显著差异 （P10.001） ， 与阳性对照组有差异 （P20.01） ； 、 高剂量组 2 与高剂量组 1 有差异 （P10.05） ； 低剂量组 2 与低剂量组 1 有差 异 （P10.05） 6、 结论 根据细辛脑注射液全身过敏性试验研究表明， 采用聚乙二醇 12 羟基硬脂酸酯作 为增溶剂的本发明实施例 2 批细辛脑注射液安全性高于市售的采用吐温 80 作为增溶剂细 辛脑注射液， 由此可见根据本发明提供的细辛脑注射剂处方和制备方法制得的细辛脑注射 剂不仅产品质量稳定临床使用也将更为安全可靠。 说 明 书 CN 102973499 A 13 。